Judul Analisis kandungan Rhodamin B pada lipstik dengan metode KLT

Tujuan :
- Peserta didik dapat melakukan preparasi sampel sampel dan standar
- Peserta didik dapat melakukan preparasi chamber dan pemilihan eluen
- Peserta didik dapat melaksanakan analisis sampel menggunakan KLT
- Peserta didik dapat menghitung nilai Rf hasil analisis
- Peserta didik dapat melakukan identifikasi kandungan rhodamin B pada
sampel

Prosedur Kerja :
a. Preparasi Chamber
1. Buat eluen isopropanol dan ammonia dengan perbandingan 9,25: 0,48 sebanyak
250 ml
2. Masukkan eluen ke dalam chamber yang telah dipersiapkan
3. Tutup chamber, biarkan selama ± 1 jam pada suhu kamar
4. Lakukan tes kejenuhan chamber dengan cara memasukkan selembar kertas aring
pada chamber, apabila uap eluen sudah bisa merambat pada kertas, maka chamber
siap digunakan.
b. Pembuatan pelat KLT
1. Timbang sebanyak 7 gram silica gel for chromatografi
2. Tambahkan sebanyak 20% dari massa adsorben kalsium sulfat sebagai pengikat
3. Tambahkan air suling dengan perbandingan 1:2, homogenkan sampai didapat
suspense yang seragam tanpa gelembung udara ataupun gumpalan.
4. Tuangkan suspense segera pada plat kaca (ukuran 20 x 20 cm) yang telah dibebas
lemakkan dengan pelarut methanol
5. Plat kaca yang sudah dilapisi dibiarkan kering kemudian diaktivasi dalam oven
pada suhu 100°C selama ± 1 jam, kemudian dinginkan pada desikator
c. Preparasi Sampel
1. Timbang ± 10 gr sampel lipstick
2. Rendam dalam 20 mL ammonia 2% (yang dilarutkan dalam etanol 70%)
semalaman
3. Saring larutan dengan kertas saring dan ambil filtratnya
4. Larutan dipanaskan diatas hotplate hingga kering
5. Buat larutan air dan asam ( 10 mL aquades dan 5 mL asam asetat 10%)
 6. Larutkan residu dari penguapan dengan 10 mL air yang mengandung asam
7. Masukkan benang wol bebas lemak kedalam larutan asam dan didihkan selama 10
menit
8. Bilas benang wol dengan aquades
9. Tambahkan 10 mL ammonia 10% (yang dilarutkan dalam etanol 70%), didihkan
hingga benang melepas pewarna dan pewarna masuk ke dalam larutan basa
10. Pipet 2 mL larutan dan masukkan kedalam labu ukur 10 mL dan tambahkan HCl
0,1%
11. Totolkan sampel pada plat KLT yang telah dipreparasi
d. Analisa sampel pada KLT
1. Totolkan cuplikan sampel dan larutan pembanding rhodamin B standar pada
plat KLT yang sudah aktif dengan menggunakan pipa kapiler
2. Masukkan plat KLT yang telah ditotol kedalam chamber
3. Setelah sampai tanda batas, plat KLT diangkat
4. Amati bercak dengan lampu UV pada UV 254 dan UV 365.
5. Semprot plat KLT dengan H2SO4 10% lalu keringkan diatas hotplate
6. Amati noda pada plat
7. Hitung nilai Rf dan bandingkan dengan standar