Leaky Gut: Pengaruh Serat Makanan dan Lemak pada Mikrobioma dan

Penghalang usus

Abstrak
Saluran usus adalah batas yang mencegah masuknya molekul berbahaya ke dalam
jaringan mukosa, diikuti oleh sirkulasi sistemik. Permeabilitas usus adalah indeks untuk usus
integritas penghalang. Permeabilitas usus telah terbukti meningkat pada berbagai penyakit —
tidak hanya penyakit radang usus, tetapi juga penyakit sistemik, termasuk diabetes, ginjal kronis
disfungsi, kanker, dan penyakit kardiovaskular. Peningkatan kronis permeabilitas usus adalah
disebut 'usus bocor' yang diamati pada pasien dan model hewan dari penyakit ini. negara ini
sering berkorelasi dengan keadaan penyakit. Selain itu, penelitian terbaru mengungkapkan
bahwa mikrobiota usus mempengaruhi kondisi kesehatan usus dan sistemik melalui
metabolitnya, terutama asam lemak rantai pendek dan lipopolisakarida, yang dapat memicu usus
bocor. Etiologi usus bocor masih belum diketahui; Namun, penelitian terbaru telah menemukan
faktor eksogen yang dapat memodulasi permeabilitas usus. Nutrisi terkait erat dengan kesehatan
usus dan permeabilitas yang secara aktif diselidiki sebagai topik hangat penelitian ilmiah. Di
sini, kami akan meninjau efek nutrisi pada permeabilitas usus dan mikrobioma untuk
pemahaman yang lebih baik tentang usus bocor dan kemungkinan mekanisme peningkatan
permeabilitas usus.

Kata kunci: usus bocor; permeabilitas usus; asam lemak rantai pendek; persimpangan ketat;
mikrobioma
1. Perkenalan

Usus bocor mengacu pada disfungsi penghalang usus dan sering menyebabkan
generasi sindrom usus bocor (LGS) di bawah keadaan kronis. Seperti namanya, manifestasi
patologis usus bocor adalah peningkatan permeabilitas usus, yang disebabkan oleh berbagai
faktor penyebab. Istilah 'permeabilitas usus' sederhana; Namun, definisi permeabilitas usus
ambigu, karena berpotensi memiliki dua arti — permeabilitas epitel dan permeabilitas
pembuluh kapiler di vili. Sulit untuk mengevaluasi yang terakhir secara in vivo. Jadi, istilah
'usus bocor' digunakan untuk menunjukkan translokasi abnormal molekul berukuran besar
dari lumen ke vili atau absorpsi yang berlebihan molekul tersebut dari lumen ke dalam
sirkulasi sistemik, yang, pada gilirannya, menginduksi berbagai gangguan organ. Secara
historis, konsep usus bocor mulai muncul sebagai epitel permeabilitas. LGS klasik telah
diamati bersamaan dengan peradangan usus, termasuk penyakit radang usus (IBD) atau
penyakit celiac, dan yang diinduksi NSAID ulserasi yang dipelajari dari tahun 1970 hingga
1990 secara ekstensif. Oleh karena itu, usus bocor adalah dikenali sebagai manifestasi khas
dari peradangan usus selama periode ini dan berhenti untuk difokuskan. Usus bocor kembali
menjadi sorotan ilmiah karena perhatian yang diperoleh oleh mikrobioma usus. Metode
pengurutan genom telah secara dramatis berevolusi dalam dua dekade terakhir, yang
sekarang memungkinkan analisis seluruh usus genom bakteri, atau identifikasi bakteri dalam
sampel tinja dengan mengurutkan yang dilestarikan gen penanda seperti gen 16srRNA
bakteri.

Sekarang kita tahu seluruh genetik kandungan mikrobiota usus manusia, yang
jumlahnya terhitung 100 kali lipat atau lebih tinggi dibandingkan dengan konten genom
manusia. Temuan ini telah menyebabkan munculnya dari konsep enterotipe usus. Dua filum
utama, Bacteroidetes dan Firmicutes, mendominasi di antara mikrobiota manusia, dan
banyak penelitian telah menunjukkan variabilitas antar dan intrapersonal pada tingkat genus
dan di atasnya. filum Firmicutes mengandung berbagai jenis bakteri antara lain bakteri
fakultatif, anaerobik, kokus, dan basil. Bakteri gram positif adalah yang utama dalam filum
ini dan memiliki guanin yang relatif rendah dan kandungan sitosin. Berbeda dengan
Firmicutes, bakteri gram negatif lebih dominan dalam filum Bacteroidetes dan usus manusia
memiliki Bacteroides, Alistipes, Parabacteroides, dan Genus Prevotella terutama. Bakteri
berinteraksi dengan inang secara langsung atau tidak langsung melalui molekul aktif
fisiologis yang disekresikan dari bakteri termasuk asam lemak rantai pendek (SCFA), p-
cresol, p-cresyl-glucuronide (pCG), indoksil sulfat (IS), asam indole-3 asetat (IAA), dan H2S
dan trimetilamina N-oksida (TMAO) yang dapat mengakibatkan efek berbahaya pada
penghalang usus dan berbagai organ yang jauh dari usus termasuk hati, ginjal, dan otak
.Faktanya, dysbiosis, pergantian yang tidak sehat dari mikrobiota usus, berkorelasi dengan
beberapa jenis penyakit, termasuk IBD, kanker, gangguan neuropsikiatri, penyakit ginjal
kronis (CKD), dan kardiometabolik penyakit termasuk obesitas, diabetes tipe 2 (T2D), dan
penyakit kardiovaskular, bersama dengan peningkatan permeabilitas usus. Disbiosis
mengakibatkan peningkatan populasi bakteri patogen yang cenderung menghasilkan tingkat
lipopolisakarida (LPS) yang lebih tinggi dan menginduksi kerusakan sel epitel yang
merupakan salah satu kemungkinan mekanisme peningkatan permeabilitas usus diamati
dengan dysbiosis. Selanjutnya, gangguan pada koneksi antar sel membiarkan molekul
berbahaya, termasuk LPS, menyerang jaringan usus, dan akibatnya mengakses aliran darah,
yang memprovokasi atau memperburuk tidak hanya IBD. tetapi juga penyakit sistemik . Oleh
karena itu, konsep LGS bergeser dari sekadar inflamasi fenotipe menjadi faktor eksaserbasi
penyakit sistemik, meskipun etiologinya masih tidak jelas. Selain itu, translokasi dua arah
molekul, metabolit, dan toksin berasal dari sirkulasi sistemik ke lumen usus juga dapat
dikenali sebagai LGS meskipun buktinya buruk.

Komponen makanan bersentuhan dengan lumen usus untuk waktu yang lama dan
kemungkinan untuk mengatur mikrobiota usus dan permeabilitas usus. Namun, banyak
penelitian yang sekarang berfokus pada mikrobiota usus mengenali perubahan permeabilitas
usus sebagai gejala tambahan. Dalam ulasan ini, kami memberikan ikhtisar tentang studi
terbaru yang menyelidiki efek komponen makanan pada permeabilitas usus dan mikrobioma
dan berhipotesis kemungkinan korelasi di antara mereka (Gambar 1). Terutama, efek dari
serat makanan dan permeabilitas usus yang tinggi memiliki telah menarik perhatian global
sebagai target penelitian dan diselidiki paling aktif. Oleh karena itu, kami akan fokus pada
nutrisi ini.

2. Penghalang Usus
Komponen luminal termasuk air yang tidak diaduk, glikokaliks, dan lendir serta
molekul antibakteri termasuk defensin, lisosom, dan IgA menyediakan lini pertama
pertahanan sebelum bakteri berbahaya bersentuhan dengan epitel. Tambahan, iklim mikro
dan sekresi dari lambung, pankreas, dan asam pankreas merusak bakteri dan antigen dalam
lumen [22]. Lapisan lendir dan epitel adalah struktur yang paling penting dan utama dari usus
penghalang. Lapisan lendir ada di permukaan luar usus besar. Lapisan ini adalah terdiri dari
dua sub-lapisan. Lapisan luarnya tebal dan longgar, tempat bakteri dan bakteri berasal
molekul berlimpah. Banyak spesies bakteri komensal tumbuh dan terbentuk koloni di lapisan
luar, sehingga dalam kondisi sehat, bakteri patogen tidak dapat menumbuhkan atau
menginvasi wilayah bakteri komensal ini. Lapisan dalam keras, melekat, dan menampung
sejumlah kecil bakteri. Lapisan ini bertindak sebagai batas antara bakteri dan epitel.
Dalam kasus usus kecil, lapisan lendirnya tunggal dan cairan dan mengandung zat
antimikroba yang melimpah. Studi menggunakan eksperimental hewan telah menunjukkan
bahwa gangguan produksi lendir dapat menyebabkan kerusakan usus dan peradangan. Epitel
terletak tepat di bawah lapisan dalam dan terdiri dari epitel normal sel dan beberapa jenis sel
yang memiliki fungsi tertentu, termasuk sel Paneth, goblet sel, dll. Sel Paneth mengeluarkan
peptida antibakteri seperti lisozim dan defensin dan mencegah kolonisasi bakteri berbahaya,
sementara enterosit menghasilkan klorida dalam respon terhadap rangsangan berbahaya. Sel
goblet berkontribusi untuk mempertahankan lapisan mukosa dengan mensekresi musin. Sel-
sel epitel dihubungkan oleh kompleks junctional apikal yang terdiri dari persimpangan ketat
(TJ) dan persimpangan kepatuhan. TJ selanjutnya terdiri dari claudin, occludin, dan
junctional adhesion protein molecule-A (JAM-A) serta intraseluler protein plak seperti
zonula occludens (ZOs) dan cingulin [28] (Gambar 2). Dua puluh tujuh gen claudin manusia
telah diidentifikasi, meskipun ekspresi protein dari beberapa di antaranya adalah tidak
dikonfirmasi. Sebagai catatan, claudin-13 diekspresikan pada hewan pengerat tetapi tidak ada
pada manusia. Claudin dan occludin berfungsi secara kooperatif. Namun demikian, sel induk
embrionik yang kekurangan occludin berdiferensiasi menjadi epitel terpolarisasi dengan TJ
fungsional. Selain itu, oklusi knockout mengarah ke fungsi penghalang normal epitel usus.
Dengan demikian, oklusi memainkan peran pendukung dalam permeabilitas usus.
Molekul dapat melewati epitel secara pasif melalui rute transeluler [26,33] atau rute
paraseluler (Gambar 3). Lipid larut, senyawa hidrofilik kecil, ion, dan molekul air melewati
rute transeluler. Rute paraseluler memungkinkan lewatnya molekul yang lebih besar,
meskipun ukurannya terbatas hingga 600 Da in vivo dan 10 kDa secara in vitro [35,36]
melalui kompleks sambungan apikal. Rute terakhir lebih jauh dibagi menjadi dua jenis jalur
dan diatur oleh IL-13 dan faktor nekrosis tumor (TNF). IL-13 secara khusus meningkatkan
fluks melintasi molekul kecil, termasuk ion dan air, melalui jalur pori. IL-13 menyebabkan
hilangnya penghalang dengan menginduksi claudin-2 ekspresi serta dengan meningkatkan
apoptosis dan menghambat penyembuhan luka baik secara in vitro dan in vivo, sedangkan
dosis IL-13 yang lebih rendah menginduksi upregulasi claudin-2 dan claudin-2- aktivasi jalur
pori yang bergantung pada respons terhadap paparan IL-13 tanpa peningkatan kebocoran
atau fluks jalur tak terbatas. TNF membuka jalur kebocoran melalui rantai ringan miosin
kinase (MLCK) dan memungkinkan molekul yang lebih besar melewati ruang intraseluler .
Karenanya, jalur kebocoran kemungkinan terkait dengan peradangan, yang akan
memungkinkan lewatnya makromolekul, produk bakteri, dan antigen makanan.
TNF juga pernah ditunjukkan untuk mengatur TJ dan peran TNF yang relevan secara
klinis dalam patogenesis IBD jelas ditunjukkan oleh kemanjuran antibodi anti-TNF pada
IBD, yang mengurangi keparahan penyakit dan mengembalikan fungsi penghalang usus.
Pemulihan fungsi penghalang epitel dengan terapi anti-TNF mungkin mencerminkan
penyembuhan mukosa dalam pengaturan sistem kekebalan yang berkurang; namun, studi
pra-klinis telah menunjukkan bahwa pensinyalan TNF juga memodulasi TJ. Banyak
penelitian telah menunjukkan penurunan kadar protein yang terdiri dari TJ usus pada model
hewan Sel-sel epitel saling mengikat dengan tight junction, adherens junction, dan
desmosom. Tight junction terdiri dari claudin, occluding, dan junctional adhesion protein
molekul-A (JAM) diakui sebagai konstruksi kunci yang mengatur penyerapan molekul
melalui rute paraseluler. Molekul-molekul ini, terkait dengan zonula occluden-1 (ZO-1),
yang berkontribusi pada pembentukan persimpangan ketat sebagai protein perancah.
Kompleks miosin-aktin yang terkait dengan myosin light-chain kinase (MLCK) juga
berinteraksi dengan ZO-1 dalam keadaan stabil. Persimpangan Adherens terdiri dari a-
catenin, b-catenin, dan E-cadherin. Desmosom terdiri dari tiga macam molekul yang
berikatan dengan keratin. Molekul diserap dari lumen usus ke dalam jaringan melalui tiga
jalur. lemak molekul terlarut, molekul hidrofilik kecil, ion, dan air melewati badan sel. Ion
dan air juga diserap secara intraseluler yang disebut jalur pori. lebih besar molekul (>600 Da)
dapat diserap ketika persimpangan ketat menjadi longgar atau runtuh oleh peradangan atau
rangsangan berbahaya lainnya. Mode aksi untuk membuka jalur pori oleh interleukin-13 (IL-
13) dan jalur kebocoran oleh faktor nekrosis tumor (TNF-a) relatif terkenal. Sinyal dari
reseptor IL-13, mengaktifkan kasein kinase 2 dan fosforilasi oklusi berturut-turut yang
memungkinkan interaksi claudin-2 dan oklusi menghubungkan dengan zonula occluden-1
(ZO-1) seperti yang ditunjukkan pada Gambar 3. Dalam kasus TNF-a, rantai ringan miosin
kinase (MLCK) diaktifkan dan endositosis oklusi dipromosikan yang menghasilkan
runtuhnya persimpangan ketat.

3. Bagaimana Mengevaluasi Fungsi Penghalang Usus

Pemberian reagen evaluasi secara oral adalah metode standar dan paling sering
dilakukan sering dalam studi in vivo. Terutama, pemberian dua gula yang tidak
dimetabolisme, laktulosa dan manitol, digunakan sebagai metode standar emas untuk
studi yang ditargetkan pada manusia. Penyerapan laktulosa meningkat ketika penghalang
epitel paraseluler dikompromikan sedangkan manitol berukuran lebih kecil terus diserap
terlepas fungsi penghalang, yang mencerminkan kemampuan basal penyerapan usus.
Karenanya, nilai rasio laktulosa / manitol urin digunakan sebagai indeks gangguan usus
penghalang. Namun, gula ini dapat mendeteksi status fungsi penghalang dalam usus kecil
hanya karena ini terdegradasi oleh bakteri. Sucralose dan 51
Crethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) dapat mengevaluasi permeabilitas usus secara
keseluruhan karena molekul-molekul ini tidak dimetabolisme oleh bakteri dan digunakan
secara luas dari studi in vitro untuk studi klinis.

Ukuran gula ini dan 51Cr-(EDTA lebih kecil sehingga molekul berukuran lebih
besar yang tidak dimetabolisme oleh enzim manusia dan bakteri juga digunakan pada
hewan studi, in vitro dan ex vivo, untuk mengevaluasi penyerapan molekul dari jalur
kebocoran. Ovalbumin (OVA) sering digunakan untuk mengukur ambilan antigen setelah
pemberian oral. Polietilen glikol dan fluorescein isothiocyanate (FITC)-dekstran mudah
untuk diperkirakan ukuran molekul yang bocor dari lumen karena berbagai ukuran
molekul mereka tersedia. Berat molekul reagen ini yang paling sering digunakan adalah
sekitar 4000. Ada beberapa metode lain untuk mengevaluasi permeabilitas. Menghitung
listrik resistensi membran sel, yang mencerminkan permeabilitas ion paraseluler, secara
khusus berlaku untuk studi in vitro dan ex vivo. Selain itu, berbagai biomarker yang
berhubungan kerusakan epitel termasuk citrulline, protein pengikat asam lemak (FABP)
dan LPS telah digunakan sebagai indeks tidak langsung dari penurunan penghalang usus
seperti yang ditunjukkan di tempat lain secara rinci .
 4. Serat Makanan
4.1. Serat Makanan dan Penghalang Usus
4.1.1. Fermentasi Serat Makanan dan SCFA Serat makanan sebagian besar
dimetabolisme oleh bakteri usus.
Tambahan, lebih dari 100 triliun bakteri dapat terlibat dalam mengonsumsi
karbohidrat yang diturunkan dari serat makanan yang akan membantu pencernaan serat
makanan yang efektif. Oleh karena itu, diet serat yang resisten terhadap pencernaan oleh
inang disebut sebagai karbohidrat yang dapat diakses mikrobiota (MAC). Serat makanan
dibagi menjadi serat larut dan tidak larut. Serat tidak larut termasuk selulosa, beberapa
hemiselulosa, dan lignin. Serat larut meliputi gandum dekstrin, pektin, gum, -glukan,
psyllium, dan fruktan, serta beberapa hemiselulosa. Serat ini berasal dari biji-bijian,
buah-buahan, sayuran, dan kacang-kacangan. Umumnya tidak larut serat difermentasi
dengan buruk oleh mikroba usus, tetapi mereka kemungkinan mempromosikan transit
usus tingkat dan dengan demikian mengurangi jumlah waktu yang tersedia untuk
fermentasi bakteri kolon dari yang tidak tercerna bahan makanan. Serat larut dapat
diproses lebih lanjut oleh bakteri menjadi SCFA sebagai: metabolit meskipun beberapa
dari mereka tidak dapat difermentasi termasuk psyllium dan gum. Berbagai jenis bakteri
menghasilkan berbagai jenis SCFA. Yang paling melimpah SCFA di usus besar manusia
adalah asetat, propionat, dan butirat, dengan rasio molar dari 60:20:20, kira-kira [58].
Kolonosit menyerap SCFA melalui transporter atau difusi. SCFA diangkut ke berbagai
organ melalui keluarga pembawa zat terlarut 16 anggota 1 (SLC16a1) dan SLC5a8,
pengangkut untuk SCFA. Sebagian besar asetat melewati sirkulasi splanknik untuk
diubah menjadi asetil-KoA untuk lipogenesis atau oksidasi pada otot perifer. Asetat yang
tersisa diubah menjadi butirat dan digunakan oleh kolonosit [60,61]. Propionat terutama
berkontribusi pada glukoneogenesis di hati. Beberapa spesies bakteri mengambil laktat
dan suksinat dan mengubahnya menjadi propionat. Ini fungsi fisiologis diatur oleh SCFA
melalui reseptor berpasangan G-protein termasuk: GPR40, GPR41, GPR43, dan
GPR120, yang didistribusikan di berbagai jenis sel. GPR41 dan GPR43 sangat
diekspresikan di usus. Telah dilaporkan bahwa, di manusia, tingkat SCFA tinja
meningkat setelah mengonsumsi makanan kaya MAC.
4.1.2. Kontribusi SCFA pada Penghalang Usus
Butyrate adalah faktor bermanfaat yang terdokumentasi dengan baik untuk
menjaga kesehatan kolonosit dengan memberikan energi ke sel epitel usus, yang
kemungkinan berkontribusi pada integritas epitel. Butyrate menekan disfungsi
penghalang yang diinduksi sitokin dengan memodifikasi tingkat claudin-2 in vitro.
Penelitian pada hewan juga menunjukkan perlindungan serupa efek pada tidak hanya
penghalang usus tetapi juga penghalang epitel saluran napas. Calprotectin tinja, penanda
peradangan usus, berkurang dengan pemberian butirat untuk pasien UC. Selain efek ini,
butirat tampaknya mempertahankan integritas usus dengan menginduksi ekspresi musin
kolon seperti yang ditunjukkan dalam studi in vitro. Selain itu, penelitian pada hewan
menunjukkan bahwa asetat secara langsung mengaktifkan oligomerisasi pengikatan
nukleotida domain 3 (NLRP3) inflammasome dalam sel epitel usus yang menghasilkan
pelepasan IL-18, yang, pada gilirannya, meningkatkan integritas penghalang usus melalui
aktivasi reseptor IL-18 pada sel epitel tikus. Namun, penghancuran genetik IL-18 secara
keseluruhan tubuh atau pemblokiran reseptor IL-18 meningkatkan sensitivitas terhadap
bahan kimia yang menginduksi kolitis pada tikus, menunjukkan bahwa asetat
berkontribusi untuk mempertahankan epitel penghalang melalui pensinyalan NLRP3,
diikuti oleh produksi IL-18. Propionat juga berkurang permeabilitas usus hiper yang
diinduksi oleh dekstran sulfat natrium (DSS) melalui perbaikan downregulation ekspresi
ZO-1, occludin, dan E-cadherin di jaringan kolon di tikus. Baru-baru ini, asetat,
propionat, dan butirat telah terbukti sinergis mempromosikan permeabilitas intraseluler
dengan memodifikasi ekspresi atau distribusi TJ, termasuk ZO-1 in vitro. Bersama
dengan temuan ini, SFCA diakui sebagai faktor kunci untuk mempertahankan
penghalang usus (Gambar 4).
4.1.3. Kontribusi Serat Makanan terhadap Integritas Penghalang Usus
Dampak MAC pada permeabilitas usus telah diselidiki melalui dua: jenis
pendekatan menggunakan diet serat atau diet tinggi serat. Tikus yang diberi makan MAC
yang kekurangan diet menunjukkan kolitis parah dan peningkatan permeabilitas usus
yang disebabkan oleh DSS bersama dengan kadar serum IL-18 yang lebih sedikit pada
tikus . Sebuah penelitian hewan baru-baru ini menargetkan setan tikus menyatakan bahwa
penghapusan MAC mempengaruhi sekresi glukagon-like peptide-1 (GLP-1) dan GLP-2,
yang secara sinergis memperbaiki cedera usus dan meningkatkan penyembuhan usus
[77,78]: mereka diturunkan regulasi di ileum dan usus besar, bersama dengan
peningkatan usus permeabilitas [79]. Hasil ini menunjukkan bahwa MAC berkontribusi
pada penghalang usus melalui mengatur sistem kekebalan usus dan regulasi sekresi
hormon peptida dari kolonosit (Gambar 4). Selain itu, suplementasi frukto-oligosakarida
yang diproduksi oleh degradasi inulin, serat makanan yang larut dalam air, menginduksi
Produksi IgA dalam sekum tikus dan menekan penurunan yang disebabkan oleh diet
defisiensi MAC permeabilitas usus [80]. Selain itu, tingkat keparahan kolitis yang
diinduksi DSS berkurang setelah pemberian diet yang mengandung MAC, bersama
dengan peningkatan yang nyata dalam feses butirat [81]. Hasil ini juga menunjukkan
bahwa MAC memiliki efek menguntungkan pada usus penghalang. Namun demikian,
apakah suplementasi MAC benar-benar direkomendasikan untuk dipertahankan?
kesehatan usus termasuk fungsi penghalang belum dikonfirmasi karena beberapa klinis
penelitian menunjukkan efek menguntungkan dari frukto-oligosakarida dan polidekstrosa
pada usus fungsi penghalang pada subyek sehat atau pasien pankreatitis, tapi administrasi
oat-glukan, arabinoxylan (hemiselulosa larut) tidak menunjukkan efek yang signifikan
pada hiperpermeabilitas usus yang diinduksi indometasin akut [84,85]. Diperkaya
oligofruktosa inulin juga tidak meningkatkan fungsi penghalang usus yang efektif pada
pasien celiac penyakit.

4.2. Perubahan Mikrobiota dan Integritas Penghalang Usus yang Diinduksi MAC
 Beberapa penelitian menunjukkan perubahan mikrobiota setelah pemberian MAC.
NS komposisi mikrobiota tinja tikus yang diberi makan HFD dimodifikasi dengan
pemberian inulin dalam a cara yang tergantung dosis. Dalam penelitian ini, populasi
Roseburia, Clostridium I, IV, dan XIV sp. menurun, sedangkan kadar Bifidobacterium
spp. dan Bacteroidetes meningkat [86], seiring dengan penurunan asupan kalori. Studi
lain menargetkan manusia dengan sembelit ringan juga menunjukkan bahwa inulin
menginduksi peningkatan populasi Anaerostipes, Bilophila, dan genus Bifidobacterium
[87]. Terutama Bilophila spp. telah dilaporkan menjadi terkait dengan feses yang lebih
lunak dan perubahan yang menguntungkan dalam kualitas hidup spesifik konstipasi
langkah-langkah [87]. Selain itu, T2D dikaitkan dengan berkurangnya kelimpahan
pendegradasi serat bakteri pada manusia [88,89]. Di sisi lain, pemberian makanan rendah
serat yang berkepanjangan memperburuk penyakit saluran napas alergi pada tikus, yang
dapat dikoreksi dengan pemberian SCFA propionat [90], menyiratkan pergantian
mikrobiota. Hasil ini menunjukkan bahwa MAC menunjukkan efek yang menguntungkan
pada mikrobiota dan kesehatan usus yang akan mempengaruhi keadaan berbagai penyakit
sistemik, meskipun mekanisme yang tepat masih belum diketahui. Di samping itu, diet
kekurangan MAC menyebabkan peningkatan tingkat Bacteroides thetaiotaomicron (B.
thetaiotaomicron), yang memasukkan glikans lendir usus pada tikus [48]. Sebagai
catatan, mikrobiota transplantasi ke tikus bebas kuman menunjukkan bahwa populasi
bakteri pendegradasi musin termasuk B. thetaiotaomicron dan Akkermansia muciniphila
(A. muciniphila) meningkat di usus di bawah defisiensi MAC diet [91,92]. Menariknya,
penelitian pada hewan menunjukkan bahwa A. muciniphila adalah bakteri probiotik yang
menjanjikan meskipun memiliki fitur pendegradasi musin [93]. A. muciniphila
menyumbang 1-4% dari mikrobiota usus manusia mulai dari kehidupan awal [94].
Penurunan populasi A. muciniphila telah dilaporkan pada pasien dengan IBD [95,96].
Sebaliknya, populasi usus A. muciniphila meningkat sesuai dengan induksi DSS kolitis
pada tikus [97,98]. Namun, studi intervensi menunjukkan efek perlindungan dari A.
muciniphila pada integritas usus atau keadaan inflamasi pada model kolitis hewan.
Administrasi A. muciniphila hidup memperbaiki kolitis yang diinduksi DSS bersama
dengan supresi peningkatan permeabilitas usus pada tikus [99]. Studi hewan lain
menunjukkan berat limpa, indeks peradangan usus besar, dan skor histologis usus besar
serta ekspresi sitokin pro-inflamasi termasuk TNF- dan IFN- di usus besar adalah
menurun dengan pemberian A. muciniphila [100]. Selanjutnya, membran luar protein
yang berasal dari A. muciniphila juga menunjukkan efek perlindungan yang serupa pada
kolitis tikus modelnya [101]. Protein ini telah terbukti meningkatkan permeabilitas
intraseluler, mengaktifkan jalur pensinyalan melalui Toll-like receptor 2 (TLR2) dan
TLR4, dan memodulasi sitokin produksi dari sel mononuklear darah perifer in vitro
[102]. Modus aksi dari A. muciniphila dalam menyajikan efek ini masih belum jelas.
Penyelidikan lebih lanjut mungkin mengungkapkan mekanisme ini di masa depan

5. HFD dan Asam Empedu

 5.1. HFD dan Penghalang Usus
5.1.1. Pengaruh Asam Lemak dan HFD pada Penghalang Usus
Asam lemak yang berasal dari lemak makanan secara luas dikategorikan menjadi
jenuh atau tidak jenuh asam lemak. Secara paralel, ada klasifikasi lain berdasarkan
panjang asam lemak: SFCA, asam lemak rantai tengah (MCFA), dan asam lemak rantai
panjang (LCFA). Mereka punya kemampuan untuk mempengaruhi permeabilitas
paraseluler seperti yang ditunjukkan dalam studi in vitro sebelumnya [103.104]. Asam
eikosapentaenoat (EPA), asam dokosaheksaenoat (DHA), dan -linolenat asam, yang
termasuk LCFA tak jenuh meningkatkan permeabilitas TJ di bawah fisiologis normal
keadaan tanpa rangsangan yang mengganggu penghalang usus dalam sel Caco-2
[103.104]. Namun, LCFA ini menurunkan permeabilitas TJ dalam sel T84, garis sel yang
mirip dengan Caco-2 sel. Selain itu, EPA dan DHA mengurangi peningkatan
permeabilitas paraseluler yang dimediasi IL-4 dalam sel T84 [105]. Baik asam kaprat dan
asam laurat, yang dikenal sebagai MCFA jenuh, meningkatkan peningkatan permeabilitas
paraseluler melalui aktivasi MLCK dalam sel Caco-2 [106]. Selain itu, asam kaprat
menginduksi perubahan konformasi protein TJ termasuk occludin dan ZO-1 [107],
sedangkan asam laurat tidak [106]. Hasil ini menunjukkan bahwa lemak makanan.
Studi etiologi menunjukkan hubungan LCFA dengan perkembangan IBD, yang
menyiratkan bahwa LCFA mengubah fungsi penghalang usus pada manusia. Sebuah
studi kohort prospektif besar menunjukkan hubungan antara konsumsi DHA yang lebih
tinggi dan penurunan kejadian kolitis ulserativa (UC) [108]. Asosiasi n-6 dan n-3 lemak
tak jenuh ganda asam (PUFA) dengan status IBD juga telah dilaporkan. Umumnya, n-6
PUFA disarankan untuk memicu atau meningkatkan jalur pensinyalan inflamasi,
sedangkan n-3 PUFA menunjukkan antiinflamasi efek [109-111]. Asupan n-3 PUFA
yang lebih tinggi dikaitkan dengan peningkatan Rasio n-3/n-6 pada membran eritrosit
pasien IBD yang dalam keadaan remisi dibandingkan dengan mereka yang telah kambuh
[112]. Serum n-3 asam lemak dan tingkat EPA telah dilaporkan berkorelasi positif
dengan tingkat sitokin pro-inflamasi dan penyakit aktivitas, sedangkan serum n-6 asam
lemak berkorelasi terbalik dengan indeks ini [113]. HFD dapat menginduksi peningkatan
permeabilitas usus pada tikus atau tikus dengan penurunan mRNA atau ekspresi protein
TJ termasuk claudin-1, claudin-2, claudin-3, dan ZO- 1 [114–117]. Lebih khusus lagi,
pada tikus knockout IL-10 dengan IBD, kolitis mirip IBD terjadi secara spontan dipicu
dengan peningkatan permeabilitas usus [118]. Lemak jenuh yang tinggi diet diamati
untuk meningkatkan respon imun Th1 dan meningkatkan kejadian kolitis [119]. Efek ini
mungkin timbul karena peningkatan populasi Bilophila wadsworthi, patobion pereduksi
sulfit, melalui konjugasi taurin asam empedu hati. Tikus diberi makan diet kombinasi
tinggi lemak dan tinggi gula menunjukkan peningkatan penanda inflamasi tinja dengan
peningkatan kadar proteobakteri dalam tinja [120]. Sesuai dengan perubahan tersebut,
tikus-tikus ini lebih rentan terhadap kolitis yang diinduksi DSS. HFD juga mempengaruhi
sekresi IgA. Tingkat sekretori IgA yang melapisi mikrobiota usus meningkat baik pada
diet normal maupun tikus yang diberi makan HFD. Namun, peningkatan ini berkurang
pada tikus yang diberi makan HFD [121]. Oleh karena itu, HFD Diet menginduksi
peningkatan permeabilitas usus melalui downregulation TJ dan mengubah respon imun
yang dimediasi oleh sel T dan sel plasma penghasil IgA in vivo.
5.1.2. Penyerapan LPS yang Diinduksi HFD dan Penghalang Usus
Peningkatan penyerapan LPS dari usus bocor telah disarankan oleh beberapa
penelitian tentang: Tikus yang diberi makan HFD menunjukkan peningkatan
permeabilitas dengan peningkatan kadar LPS serum [114,122]. Di sisi lain, tikus yang
disuntik dengan LPS menunjukkan penurunan kolesterol HDL plasma dan peningkatan
trigliserida plasma [123]. Sebuah studi kohort manusia juga menunjukkan bahwa kadar
LPS serum yang tinggi pada pasien diabetes tipe 1 dikaitkan dengan trigliserida serum
yang tinggi dan peningkatan tekanan darah diastolik [124]. Hasil ini menunjukkan bahwa
usus bocor mempengaruhi dislipidemia melalui penyerapan LPS (Gambar 5). Faktanya,
model mouse telah menunjukkan pentingnya TLR4, reseptor untuk LPS, dan
pensinyalannya dalam insulin yang diinduksi diet resistensi dan aterosklerosis [125].
Tikus knockout TLR4 tahan terhadap induksi HFD intoleransi glukosa [126.127] serta
aterosklerosis yang diinduksi HFD [128]. Demikian pula, penelitian pada manusia telah
menunjukkan bahwa asupan lemak tinggi dan karbohidrat tinggi memodulasi TLR2 dan
ekspresi TLR4 dalam sel mononuklear dengan peningkatan kadar LPS dalam serum
[129.130]. Selain itu, LPS merangsang diferensiasi sel T helper (Th) 17 melalui TLR4
sebagai respons terhadap LPS [131] yang mungkin berkontribusi pada reaksi inflamasi
yang diinduksi LPS, karena IL-17A menurunkan ekspresi peroksisom proliferator-
activated receptor-, yang merupakan antiinflamasi dan menghambat oksidasi asam lemak
[132]. Sebuah studi lanjutan telah menunjukkan bahwa infiltrasi leukosit ke hati dan
ekspresi mRNA dari sitokin inflamasi TLR4 dan TLR9 meningkat pada tikus yang diberi
makan HFD, di mana penghalang usus terganggu oleh pemberian bersama DSS dengan
HFD, yang menurunkan regulasi ekspresi ZO-1 dan Claudin-1 di usus besar,
menunjukkan bahwa usus bocor dan serangan berikutnya ke hati oleh LPS terlibat dalam
patogenesis disfungsi hati
5.2. Perubahan Mikrobioma oleh HFD dan Permeabilitas Usus
Beberapa penelitian telah menunjukkan perubahan mikrobioma oleh HFD baik
pada hewan [134-136] dan manusia [137.138]. Sebuah studi baru-baru ini menunjukkan
kemungkinan bahwa HFD-induced perubahan mikrobioma secara tidak langsung
memodulasi ekspresi TJ. Paparan cahaya konstan dengan HFD menginduksi kelainan
glukosa, resistensi insulin, peradangan, dan hati steatohepatitis pada tikus, yang dikaitkan
dengan kelimpahan Butyricicoccus, Clostridium, dan Turicibacter, juga dikenal sebagai
produsen butirat. Perubahan ini berkorelasi dengan penurunan kadar butirat dalam kontes
usus besar, penurunan ekspresi usus besar ocludin-1 dan ZO-1, dan peningkatan serum
LPS dan ekspresi mRNA dari protein pengikat LPS hati [139]. Seperti dijelaskan
sebelumnya, A. muciniphila menunjukkan efek perlindungan pada permeabilitas usus.
Efek bakteri ini pada disfungsi penghalang usus diinduksi oleh HFD dan terkait gangguan
sistemik, termasuk obesitas dan T2D. Kelimpahan A. muciniphila adalah berkorelasi
negatif dengan glukosa darah puasa, rasio pinggang-pinggul, dan lemak subkutan
diameter sel pada subjek obesitas dan peningkatan kelimpahan A. muciniphila secara
positif berkorelasi dengan peningkatan penanda sensitivitas insulin dan parameter klinis
lainnya setelah pembatasan kalori [140]. Dibandingkan dengan subyek sehat, pasien T2D
memiliki lebih sedikit feses A. muciniphila extracellular vehicle (AmEVs) [141], yang
menekan berat badan akibat HFD keuntungan, peningkatan kolesterol plasma,
trigliserida, dan glukosa, bersama dengan downregulation mRNA TLR4 dan TJ usus
pada tikus [142]. Selain itu, protein membran berasal dari A. muciniphila mengurangi
intoleransi terhadap glukosa dan kadar LPS plasma dengan upregulasi molekul yang
terkait dengan pensinyalan insulin dan claudin-3 [143]. Ini hasil menyiratkan bahwa A.
muciniphila menunjukkan efek menguntungkan pada gangguan yang diinduksi HFD dan
integritas penghalang usus mungkin terlibat dalam mekanisme ini (Gambar 5). 5.3. Asam
Empedu dan Permeabilitas Usus Asam empedu (BA) yang dikeluarkan dari duodenum
membantu pencernaan lipid serta kolesterol dan vitamin yang larut dalam lemak. HFD
menginduksi pelepasan BA yang ditingkatkan, menghasilkan peningkatan konsentrasi
kolon BA primer, dibandingkan dengan diet rendah atau normal lemak [144]. Namun,
5% sampai 10% BA tidak direabsorbsi tetapi diubah menjadi asam empedu sekunder oleh
bakteri di usus besar. Asam empedu sekunder berbahaya dan disarankan untuk
mempromosikan karsinogenesis usus besar [145]. Selain perannya dalam penyerapan
lemak makanan dan homeostasis kolesterol, asam empedu bertindak sebagai molekul
pemberi sinyal melalui dua sinyal utama jalur. Salah satunya adalah reseptor asam
empedu berpasangan protein G (GPBAR1, juga dikenal sebagai TGR5) dan yang lain
terdiri dari anggota superfamili reseptor hormon nuklir termasuk reseptor farnesoid X
(FXR) [146]. Penelitian pada hewan menunjukkan bahwa GPBAR1 dan FXR
berkontribusi pada integritas penghalang usus. GPBAR1 melumpuhkan tikus
menunjukkan abnormal arsitektur molekul TJ epitel dengan peningkatan ekspresi dan
subseluler abnormal distribusi zonulin-1 dengan peningkatan permeabilitas usus. Selain
itu, tikus ini adalah lebih sensitif terhadap rangsangan DSS dan menunjukkan kolitis
parah [147]. Aktivasi GPBAR1 dengan agonis sintetis membalikkan peradangan usus
pada model kolitis yang diinduksi secara kimia. Mekanisme yang mungkin termasuk
pengurangan perdagangan monosit dari darah ke mukosa usus dan modulasi keadaan
aktivasi makrofag yang dihasilkan dalam penurunan ekspresi gen inflamasi, termasuk
TNF-a, IFN-g, IL-1b, IL-6, dan CCL2 [148]. Permeabilitas usus meningkat pada tikus
knockout FXR [149] dan FXRagonist menunjukkan efek perlindungan pada kolitis yang
diinduksi secara kimia dengan pengurangan epitel permeabilitas dan beberapa respon
inflamasi [150]. Sebuah studi baru-baru ini menunjukkan bahwa tikus yang kekurangan
FXR spesifik usus menunjukkan peningkatan permeabilitas usus, mungkin karena
penurunan integritas mukosa, terkait dengan penurunan sekresi protein musin 2 dan
tingkat yang lebih rendah dari protein E-cadherin [151]. Secara bersama-sama, hasil ini
menunjukkan bahwa BAs mempertahankan penghalang usus melalui reseptor
penginderaan BA setidaknya sebagian.
 6. Penutup
Kami meninjau efek serat makanan dan lemak pada permeabilitas usus dan
mikrobioma, dan korelasi di antara mereka. Serat makanan dikenal sebagai pelindung
nutrisi untuk penghalang usus dan berkontribusi untuk menjaga mikrobiota dalam
keadaan sehat negara. Efek menguntungkan ini dimediasi oleh SCFA, dan epitel IL-18
tampaknya terlibat dalam mekanisme molekuler regulasi penghalang. Sebaliknya, lemak
cenderung mempromosikan peningkatan permeabilitas epitel. Studi in vitro menunjukkan
bahwa asam lemak secara langsung merusak penghalang epitel. Selain itu, peningkatan
kadar LPS plasma yang diinduksi lemak dapat mengganggu penghalang usus. Temuan ini
menunjukkan bahwa diet kebarat-baratan mengandung lemak tinggi dan serat yang buruk
cenderung menyebabkan atau memperburuk berbagai penyakit sistemik karena usus yang
buruk kesehatan termasuk gangguan fungsi penghalang usus. Selain itu, baik serat
makanan maupun lemak tinggi dapat mempengaruhi populasi relatif A. muciniphila yang
memberikan efek perlindungan pada integritas penghalang usus dan keadaan penyakit,
menunjukkan kemungkinan hubungan penyebab antara serat makanan dan lemak,
mikrobioma, LGS, dan penyakit sistemik. Namun demikian, hubungan ini memiliki mata
rantai yang hilang karena molekul yang bertanggung jawab untuk LGS dan disfungsi
berturut-turut dari berbagai organ tidak diidentifikasi. Untuk memperjelas poin ini, kita
harus mengidentifikasi wilayah LGS yang tepat dari reagen evaluasi LGS konvensional
tidak dapat melakukannya [45]. Hal inilah yang menjadi hambatan untuk mengevaluasi
apakah subjek termasuk dalam LGS atau tidak hewan dan studi klinis. Itu sebabnya usus
bocor bukanlah sesuatu yang bisa disimpulkan semudah itu selama ini, terutama pada
manusia. Peningkatan metode atau pengembangan evaluasi LGS organ ex vivo seperti
organoid akan menghubungkan mata rantai yang hilang dan menyediakan informasi lebih
lanjut tentang hubungan antara nutrisi dan LGS.