A. Prelab
1. Bagaimana cara pengambilan sampel sayuran seperti bayam, sawi yang akan dianalisis
total E.coli? Jelaskan tahapannya!
Disiapkan wadah erlenmeyer yang telah diaseptis terlebih dahulu, pisau yang
digunakan juga diaseptis dengan disemprotkan alkohol dan dibakar dengan bunsen,
sayuran seperti bayam, sawi dipotong secara aseptis dengan ukuran 5x5 cm, cotton
woll swab dicelupkan dalam larutan pengencer pepton, permukaan sayuran di swab
oles dengan menggunakan cotton wall swab sebanyak tiga kali atau bisa dengan
setelah langkah nomor 2, lalu sayuran seperti bayam dan sawi ditimbang sebanyak 5
gram, kemudian dipotong. Selanjutnya potongan sayuran tersebut dimasukkan
kedalam 45 ml pepton(Lay, 2005).
3. Jelaskan perbedaan tahapan pengambilan sampel cair dan padat untuk pengujian
mikrobiologi? Jelaskan tahapannya !
Dari
langkahperngambilansampelcairdansampelpadatdapatdibedakanbahwapadasampelcairseb
elumdiambilharus diaduk(dihomogenkan). Sedangkanpadapengambilansampelpadat,
sebelumdiambilpraktikanharusmengamatibeberapabagianpadasampeldaritempat yang
berbedakira – kira 100 gram danditulistanggalpengambilan, namasampel, danlokasi
(Subandi, 2010).
a. Sampel cair(Subandi, 2010).
-. Sampel diaduk (dihomogenkan)
- Diambil sebanyak 100-500 ml sampel
-. Ditempatkan pada botol steril
-. Dibawa ke laboratorium
b. Sampel padat(Subandi, 2010).
-. Diambil dengan menggunakan pisau atau sendok tergantung bahan sampel
-. Diambil bagian permukaan dan dalamnya
-. Diamati beberapa bagian dari tempat yang berbeda, kira-kira 100 gram
-. Dimasukkan ke dalam tempat yang telah tersedia secara aseptik
-. Ditutup rapat
-. Ditulis tanggal pengambilan, nama sampel dan lokasi
-. Dibawa ke laboratorium
B. Diagram Alir Paraf Asisten
a. Pengambilan Sampel Padat
Sampel
Nama:
Diambil menggunakan pisau, sendok atau alat lain tergantung
bahan sampel
Ditutup rapat
Dibawa ke laboratorium
Hasil
C. Pembahasan
1. Sebutkan beberapa jenis teknik sampling! Jelaskan pula masing-masing peranannya!
Jenis teknik sampling (Russel, 2013) :
Pengambilan sampel padat : Digunakan untuk mengambil sampel mikroba dari bahan
makanan berbentuk padat dari permukaanya maupun bagian dalamnya seperti daging,
ikan dan makanan yang serupa. Sampel diambil sebanyak 100 gram.
Pengambilan sampel cair : Digunakan untuk mengambil sampel mikroba dari bahan
cair seperti susu, yoghurt, es krim, sirup dan sebagainya. Sampel yang digunakan
berkisar antara 100 hingga 500 ml
Pengambilan sampel permukaan : Digunakan untuk mengambil sampel mikroba yang
tumbuh hanya pada permukaan bahan makan saja. Teknik yang digunakan antara lain
surface slice, swab, cotton-wool swab, adhesive tape.
Pengambilan sampel anaerob : Digunakan untuk mengambil sampel mikroba dari
bahan makanan yang tidak diperkenankan terpapar oksigen (O2)
3. Mengapapengambilansampeluntukujimikrobiologidilakukandenganaseptis?
Tujuan dari aseptis adalah untuk menghindari terjadinya kontaminasi dari bakteri
kontaminan yang dapat mempengaruhi hasil percobaan sehingga yang tumbuh bukan
bakteri yang diharapkan melainkan bakteri kontaminan. Hasil hitungan juga akan
terganggu sehingga data menjadi tidak akurat, tidak dapat mewakili sampel dari
populasi mikroba (Seidel, 2006).
4. Apa perbedaan teknik sampling metodeswab dan metode adhesive surface? Jelaskan!
Metode swab:
Metodeinidigunakanuntukmengambilsampeldilakukanmenggunakan batangoles steril
bernama cotton swab.Caranya denganmembasahi cotton swab dengan pepton steril
kemudian mengoleskan padapermukaan ataupun bagian dalam
sampellaludimasukkanpadacairansteril (Graman, 2005).
Metode Adhesive surface: Metode ini digunakan untuk mengambil sampel pada
bahan pangan untuk diuji atau dianalisis jumlah mikrobanya dengan merekatkan
perekat atau semacamnya pada permukaan yang akan dijadikan sampel atau bisa
dikatakan media agar cawan ditempelkan ke benda(Graman, 2005).
8. Jelaskan kelebihan dan kekurangan teknik sampling metode cuci dan metode bilas!
Kelebihan metode cuci (Garg, 2010):
a. Dapat langsung digunakan untuk pengujian permukaan sampel
b. Semua bakteri yang ada pada sampel dapat terambil
c. Sangat mudah dilakukan dan tidak merusak struktur sampel yang akan dianalisis
Kekurangan metode cuci(Garg, 2010):
a. Tidak semua sampel cocok dengan metode cuci
b. Hanya digunakan untuk sampel padat dan berpori
c. Dibutuhkan ketelitian dan kehati-hatian yang ekstra pada saat pengenceran dan
perhitungan
Kelebihan metode bilas(Garg, 2010):
a. Proses berlangsung cepet, sehingga efisien waktu
b. SOP mudah karena hanya dicuci
c. Sangat mudah dilakukan dan tidak merusak struktur sampel yang akan dianalisis
Kekurangan metode bilas(Garg, 2010):
a. Kurang efektif dan hanya digunakan pada sampel padat
b. Larutan yang digunakan terbatas, maksimal hanya 2 kg
c. Tidak cocok untuk peralatan kompleks yang ada komponen listrik seperti mesin tablet,
FBD, granulator
9. Apakah metode pengemasan dan kondisi penyimpanan mempengaruhi tipe
mikroorganisme bahan pangan yang akan dianalisis? Jelaskan alasan anda!
Metode pengemasan dan kondisi penyimpanan juga dapat mempengaruhi tipe dari
mikroorganisme bahan pangan yang akan dianalisis. Bila metode pengemasan dan
kondisi penyimpanan pada suhu ruang dan terbuka maka mikroorganisme yang
tumbuh pada bahan pangan diindikasikan sebagai bakteri mesofilik, aerob. Sedangkan
jika penyimpanan pada ruang tertutup pada suhu dingin maka dapat diindikasi bateri
yang tumbuh adalah bakteri psikotrop. Jikapenyimpanansampel di tempat yang
tidakterdapatoksigen, makamikroorganisme yang
dapatbertahanatautumbuhhanyalahmikroorganisme yang bersifatanaerobsaja(Seidel,
2006).
D. Kesimpulan
Teknik sampling dilakukan untuk memudahkan peneliti dalam melakukan analisis
jumlah mikroba sampel. Sampling dilakukan dengan cara mengambil sebagian jumlah
yang ada. Teknik-teknik dalam pengambilan sampel makanan antara lain pengambilan
sampel padat untuk mengambil sampel mikroba dari bahan makanan yang berbentuk
padatan seperti daging dan ikan, pengambilan sampel cair untuk mengambil sampel
mikroba dari bahan makanan yang berbentuk cairan atau larutan seperti susu, yoghurt, es
krim dan sirup, pengambilan sampel permukaan untuk mengambil sampel bakteri aerob
yang dapat hidup hanya dipermukaan saja, pengambilan sampel anaerob untuk mengambil
sampel bakteri anaerob yang tidak tahan dengan oksigen. Setelah dilakukan pengambilan
sampel kemudian dilakukan dengan transportasi, penyimpanan sampel dan dilanjutkan
dengan penanganan sampel di laboratorium.
Saran
Praktikan seharusnya juga melakukan teknik sampling karena pada praktikum
sebelumnya praktikan langsung melakukan percobaan hitungan cawan sehingga teknik
sampling dilalui begitu saja. Teknik sampling sangatlah penting karena dapat
mempengaruhi keakuratan data hasil hitungan cawan.
DAFTAR PUSTAKA
Adams , M. R., M. O. Moss. 2008. Food Microbiology. Cambridge: Royal Society of
Chemistry
Lay, B. W., 2005.AnalisisMikroba di Laboratorium. Jakarta:Rajawali Press
Subandi, M. 2010. Mikrobiologi: perkembangan, kajian, dan pengamatan dalam persfektif
Islam. Jakarta: PT Remaja Rosdakarya
Herawati, Niniek. 2007. Analisis Risiko LingkunganAliran Air Lumpur Lapindo Ke Badan
Air. Semarang: Universitas Diponegoro
Garg, N. 2010. Laboratory Manual of Food Microbiology. New Delhi: LK International
Publishing House Pvt. Ltd.
Graman, P. S., Menegus, M. A. 2005. Microbiology Laboratory Tests. Philadelphia:
Lippincott Williams and Wilkins
Russell, Hugo Ayliffes. 2013.Principles and Practice of Disinfection,Preservation and
Sterilization.Hoboken: Wiley Blackwell
Seidel, V. 2006.Natural Products Isolation. Totowa: Humana Press