Pengembangan dan

Validasi Metode Analisis

Oleh:
Dr.nat.techn. apt. Hendri Wasito, M.Sc.
Jurusan Farmasi FIKES
Universitas Jenderal Soedirman
By: hendri.wasito@unsoed.ac.id 1
Outline
• Pemilihan metode analisis
• Pengembangan metode analisis
• Validasi metode analisis

By: hendri.wasito@unsoed.ac.id 2
 Prinsip Praktek Analisis yang Baik
1. Analisis pengukuran harus dilakukan untuk memenuhi persyaratan yang
disepakati.
2. Analisis pengukuran harus dilakukan dengan menggunakan metode dan
peralatan yang telah diuji untuk memastikan kecocokan dengan tujuannya
3. Personal yang melakukan analisis pengukuran harus memenuhi syarat dan
kompetensi untuk melakukan tugas.
4. Harus ada penilaian independen yang teratur terhadap kinerja teknis
laboratorium.
5. Analisis pengukuran yang dilakukan di satu lokasi harus konsisten dengan yang
dilakukan di tempat lain.
6. Organisasi yang melakukan analisis pengukuran harus memiliki kendali mutu
yang jelas dan prosedur penjaminan mutu.
By: hendri.wasito@unsoed.ac.id 3
Metode Analisis

By: hendri.wasito@unsoed.ac.id 4
 Pemilihan Metode Analisis
accuracy

cost precision

availability of
sensitivity
equipment
choosing
a method

scale of
operation, selectivity
analysis time

ruggedness robustness

By: hendri.wasito@unsoed.ac.id 5
Pengembangan Metode Analisis

By: hendri.wasito@unsoed.ac.id 6
 Quality by Design (QbD)
• QbD merupakan pendekatan sistematis untuk pengembangan yang dimulai dengan
tujuan yang telah ditentukan sebelumnya dan menekankan pemahaman produk
dan proses.dan pengendalian proses.
• QbD dapat diterapkan pada pengembangan metode analitis.

By: hendri.wasito@unsoed.ac.id 7
 Experimental Design (DoE) dalam
Pengembangan Metode Analisis
• DoE menggunakan pendekatan statistik dalam
perencanaan dan rekomendasi percobaan untuk
meningkatkan kemungkinan bahwa hasil studi akan
mengarah pada kesimpulan yang valid.
• Ada berbagai pilihan dalam memilih desain
eksperimental (OFAT, Factorial Design, CCD, RSM).
• Prosedur:
– Menyatakan tujuan eksperimen dengan jelas dan
untuk mengidentifikasi kendala potensial.
– Mengidentifikasi faktor yang berpengaruh dan
tingkatannya.
– Mengidentifikasi variabel respons mana yang
signifikan
– Mengoptimasi variabel
By: hendri.wasito@unsoed.ac.id 8
 Validasi dan Verifikasi Metode Analisis
• Validasi: Suatu proses untuk mendefinisikan
persyaratan analitis, dan memastikan bahwa suatu
metode analisis memiliki kemampuan yang
konsisten dengan apa yang dibutuhkan sesuai
dengan tujuan aplikasinya.
• Verifikasi: Beberapa pekerjaan eksperimental yang
harus dilakukan untuk menunjukkan bahwa metode
tersebut bekerja di laboratorium pengguna akhir.
• Uji validasi ulang diperlukan untuk:
– Perubahan dalam sintesis zat obat
– Perubahan komposisi produk jadi
– Perubahan dalam prosedur analitis
By: hendri.wasito@unsoed.ac.id 9
 Tipe Prosedur analisis yang di Validasi
• Tujuan dari prosedur analitis harus dipahami
dengan jelas karena akan menentukan
karakteristik validasi yang perlu dievaluasi.
• Tipe prosedur analitis:
– Uji identifikasi
– Uji kuantitatif untuk kandungan
pengotor
– Batasi pengujian untuk mengontrol
pengotor
– Uji kuantitatif dari bahan aktif dalam
sampel

By: hendri.wasito@unsoed.ac.id 10
 Akurasi
• Akurasi menyatakan kedekatan kesepakatan
antara nilai yang diterima baik sebagai nilai
konvensional yang benar atau nilai referensi
yang diterima dan nilai yang ditemukan.
• Akurasi harus dievaluasi menggunakan
minimal 9 penentuan dengan minimal 3
tingkat konsentrasi yang mencakup rentang
yang ditentukan.
• Akurasi harus dilaporkan sebagai persen
perolehan kembali dengan penetapan jumlah
analit tambahan yang diketahui dalam sampel
atau sebagai perbedaan antara rata-rata dan
nilai sebenarnya yang diterima bersama-sama
dengan interval kepercayaan.

By: hendri.wasito@unsoed.ac.id 11
 Presisi
• Presisi menyatakan kedekatan kesepakatan
antara serangkaian pengukuran yang diperoleh
dari beberapa pengambilan sampel dari sampel
homogen yang sama di bawah kondisi yang
ditentukan.
• Tingkatan: repeatability, intermediate precision
and reproducibility.
• Dinyatakan sebagai varians, standar deviasi (SD)
atau koefisien variasi (CV) dari serangkaian
pengukuran.

By: hendri.wasito@unsoed.ac.id 12
 Linieritas dan Rentang
• Linearitas merupakan kemampuannya
untuk memperoleh hasil uji yang
berbanding lurus dengan konsentrasi
(jumlah) analit dalam sampel.
• Rentang pengukuran adalah interval
antara konsentrasi atas dan bawah
(jumlah) analit dalam sampel yang
telah ditunjukkan bahwa prosedur
analitis memiliki tingkat presisi, akurasi
dan linearitas yang sesuai.
• Analisis regresi digunakan untuk
mengevaluasi hubungan linierantara
hasil uji.

By: hendri.wasito@unsoed.ac.id 13
 Batas Deteksi dan Kuantifikasi
• Batas deteksi: jumlah analit terendah dalam sampel
yang dapat dideteksi tetapi tidak harus dikuantifikasi
sebagai nilai yang tepat.
• Batas deteksi biasanya dinyatakan sebagai konsentrasi
analit sesuai dengan sampel blanko ditambah tiga
sampel deviasi standar, berdasarkan 10 analisis
independen sampel blanko.
• Batas kuantifikasi: jumlah analit terendah dalam sampel
yang dapat ditentukan secara kuantitatif dengan presisi
dan akurasi yang sesuai.
• Batas kuantisasi diatur oleh berbagai konvensi
untukmenjadi lima, enam atau sepuluh standar deviasi
dari rata-rata kosong.

By: hendri.wasito@unsoed.ac.id 14
 Spesifisitas/ Selektivitas
• Spesifisitas adalah kemampuan untuk
menilai secara tegas analit dengan adanya
komponen yang mungkin ada (kotoran,
degradasi, matriks, dll).
• Gangguan acak harus ditentukan
menggunakan sampel blanko yang
representative.
• Interferensi dapat menyebabkan bias dengan
menambah atau mengurangi sinyal yang
dikaitkan dengan besaran ukur.
• Hasil dari studi spesifisitas biasanya juga
ditafsirkan dengan inspeksi secara visual.
By: hendri.wasito@unsoed.ac.id 15
 Ketahanan Analisis
• Ketahanan abalisis merupakan ukuran kapasitas metode analisis untuk tetap tidak
terpengaruh oleh variasi kecil, tetapi disengaja dalam parameter metode dan
memberikan indikasi keandalannya selama penggunaan secara normal.

By: hendri.wasito@unsoed.ac.id 16
 Ketidakpastian Pengukuran
• Ketidakpastian adalah interval yang terkait dengan hasil pengukuran yang
menyatakan kisaran nilai-nilai yang secara wajar dapat diatribusikan kepada
kuantitas yang diukur.
• Sebuah ketidakpastian perkiraan harus memperhitungkan semua yang diakui efek
yang berpengaruh pada hasil.

By: hendri.wasito@unsoed.ac.id 17
Terima kasih…

Referensi:
• Belouafa, S., Habti, F., Benhar, S., Belafkih, B., Tayane, S., Hamdouch, S., ... & Abourriche, A. (2017).
Statistical tools and approaches to validate analytical methods: methodology and practical examples.
International Journal of Metrology and Quality Engineering, 8, 9.
• EURACHEM Working Group. (1998). The fitness for purpose of analytical methods: A laboratory
guide to method validation and related topics. http://www. eurachem. org/guides/pdf/valid. pdf.
• International Conference on Harmonization. (2005, November). Validation of analytical procedures:
text and methodology Q2 (R1). In International Conference on Harmonization. Geneva: IFPMA.
• Nickerson, B. (Ed.). (2011). Sample Preparation of Pharmaceutical Dosage Forms: challenges and
strategies for sample preparation and extraction. Springer Science & Business Media.

By: hendri.wasito@unsoed.ac.id 18