Machine Translated by Google

Artikel ini diunduh oleh: [FU Berlin]

Pada: 03 Juli 2015, Pukul: 20:19
Penerbit: Taylor & Francis
Informa Ltd Terdaftar di Inggris dan Wales Nomor Terdaftar: 1072954 Kantor terdaftar: 5 Howick Place,
London, SW1P 1WG

Jurnal Kromatografi Cair &

Teknologi Terkait
Detail publikasi, termasuk instruksi untuk penulis dan informasi
berlangganan: http://
www.tandfonline.com/loi/ljlc20

METODE SPEKTROMETRI MASSA

KROMATOGRAFI CAIR UNTUK
PENENTUAN SIMULTAN
CAPECITABINE, 5ÿ-DEOXY-5-
FLUOROCYTIDINE, 5ÿ-DEOXY-5-
FLUOROURIDINE, 5-FLUOROURACIL, AND
5-FLUORODIHYDROURACIL PADA
PLASMA
MANUSIA R. Švobaitÿ
, I. Solassol , F. abc
Pinguet , d T. Mazard , L.
C C

Ivanauska B
, M.Ychou D
& FMM Bresolle ac

A
Laboratorium Farmakokinetik Fakultas Farmasi Universitas
Montpellier I , Montpellier, Perancis
B
Departemen Kimia Analitik dan Toksikologi , Kauna
Universitas Kedokteran , Kaunas, Lituania
C
Departemen Onkofarmakologi, Layanan Farmasi, Val d'Aurelle
Pusat Antikanker , Montpellier, Perancis
D
Departemen Onkologi Medis , Pusat Antikanker Val d'Aurelle Montpellier, ,
Prancis Diterbitkan
online: 01 Des 2010.

I. Solassol
Mengutip artikel ini: R. Švobaitÿ F. ,Pinguet ,
, T. Mazard Ychou & FMM , L. Ivanauskas , M.
Bressolle (2010) METODE SPEKTROMETRI KROMATOGRAFI MASSA CAIR UNTUK PENENTUAN
SIMULTAN CAPECITABINE, 5ÿ-DEOXY-5-FLUOROCYTIDINE, 5ÿ-DEOXY- 5-FLUOROURIDINE, 5-
FLUOROURACIL, DAN 5-FLUORODIHYDROURACIL DALAM PLASMA MANUSIA, Jurnal
Kromatografi Cair & Teknologi Terkait, 33:19, 1705-1719, DOI: 10.1080/10826076.2010.503842

Untuk menautkan ke artikel ini: http://dx.doi.org/10.1080/10826076.2010.503842

HARAP SCROLL KE BAWAH UNTUK ARTIKEL

Taylor & Francis melakukan segala upaya untuk memastikan keakuratan semua informasi ("Konten") yang
terkandung dalam publikasi di platform kami. Namun, Taylor & Francis,
 Machine Translated by Google
agen kami, dan pemberi lisensi kami tidak membuat pernyataan atau jaminan apa pun mengenai
keakuratan, kelengkapan, atau kesesuaian untuk tujuan Konten apa pun. Setiap pendapat dan
pandangan yang diungkapkan dalam publikasi ini adalah pendapat dan pandangan penulis,
dan bukan merupakan pandangan atau didukung oleh Taylor & Francis. Keakuratan Konten tidak
boleh diandalkan dan harus diverifikasi secara independen dengan sumber informasi utama.
Taylor dan Francis tidak akan bertanggung jawab atas kerugian, tindakan, klaim, proses
hukum, tuntutan, biaya, pengeluaran, kerusakan, dan kewajiban lain apa pun atau apa pun
penyebabnya yang timbul secara langsung atau tidak langsung sehubungan dengan, sehubungan
dengan atau timbul dari penggunaan Konten.

Artikel ini dapat digunakan untuk tujuan penelitian, pengajaran, dan studi pribadi. Setiap
reproduksi substansial atau sistematis, redistribusi, penjualan kembali, pinjaman, sublisensi,
pasokan sistematis, atau distribusi dalam bentuk apa pun kepada siapa pun secara tegas dilarang.
Syarat & Ketentuan akses dan penggunaan dapat dilihat di http://www.tandfonline.com/page/
terms and-conditions

Diunduh
Berlin]
20:19
2015
pada
oleh
Juli
[FU
03
 Machine Translated by Google

Jurnal Kromatografi Cair & Teknologi Terkait, 33:1705–1719, 2010 Jurnal Kromatografi Cair & Teknologi Terkait, 33:1705–1719, 2010 Hak Cipta

# Taylor & Francis Group, LLC Hak Cipta # Taylor & Francis Group, LLC ISSN:

1082- 6076 cetak/1520-572X online ISSN: 1082-6076 cetak/1520-572X online

DOI: 10.1080/10826076.2010.503842 DOI: 10.1080/10826076.2010.503842

METODE SPEKTROMETRI KROMATOGRAFI MASSA CAIR

UNTUK PENETAPAN SIMULTAN CAPECITABINE,
50 -DEOXY-5-FLUOROCYTIDINE, 50 -DEOXY-5-FLUOROURIDINE,
5-FLUOROURACIL, DAN 5-FLUORODIHYDROURACIL PADA MANUSIA
PLASMA

R. Sÿ vobaiteÿ,1,2,3 I. Solassol,3 F. Pinguet,3 T. Mazard,4 L. Ivanauskas,2 M. Ychou,4

dan FMM Bressolle1,3
1
Laboratorium Farmakokinetik, Fakultas Farmasi, Universitas Montpellier I, Montpellier,
Perancis
2
Departemen Kimia Analitik dan Toksikologi, Universitas Kedokteran Kaunas,
Kaunas, Lituania
3
Departemen Onkofarmakologi, Layanan Farmasi, Pusat Antikanker Val d'Aurelle,
Montpellier, Perancis
4
Departemen Onkologi Medis, Pusat Antikanker Val d'Aurelle, Montpellier, Prancis
Diunduh
Berlin]
20:19
2015
pada
oleh
Juli
[FU
03

& Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengembangkan metode kromatografi cair-spektrometri
massa (LC-MS) selektif dan sensitif untuk kuantisasi simultan capecita bine, 50 -deoxy-5-
fluorocytidine (50 -DFCR ) , 50 -deoxy- 5-fluorouridine (50 -DFUR), 5-fluorouracil (5-FU), dan 5-
fluorodihydrouracil (5-FUH2) dalam plasma manusia. Kromatografi dilakukan pada kolom Atlantis
dC18 dengan fase gerak yang terdiri dari 1% asam format dalam asetonitril dan 1% asam format
dalam elusi gradien air. 5-fluorocytosine (5-FC) digunakan sebagai standar internal. Data LC-
MS diperoleh dalam mode SIM pada m=z 130 untuk 5-FC, m=z 131 untuk 5-FU, m=z 133 untuk
5-FUH2, m=z 246 untuk 50 -DFCR, m = z 247 untuk 50 -DFUR, dan m=z 360 untuk capecitabine.
Obat = rasio luas puncak standar internal dihubungkan melalui hubungan kuadrat dengan
konsentrasi (100-10000 lg = L untuk 5-FU; 50-10000 lg = L untuk 5-FUH2; dan 25-10000 lg = L
untuk 50 -DFCR, 50 -DFUR, dan capecitabine). Analisis matriks kosong dari donor yang berbeda
menunjukkan tidak adanya komponen endogen yang mengganggu pada waktu retensi analit.
Tidak ada bukti efek matriks yang diamati. Metodenya tepat (presisi, 0,2–8,3%) dan akurat
(pemulihan, 99–104%). Efisiensi ekstraksi rata-rata >89% untuk setiap analit diperoleh.
Kuantisasi batas bawahnya adalah 25 lg=L untuk capecitabine, 50 -DFCR, dan 50 -DFUR; 50
lg=L untuk 5-FUH2; dan 100 lg=L untuk 5-FU. Metode ini berhasil digunakan untuk menyelidiki
konsentrasi plasma capecitabine dan metabolitnya dalam studi farmakokinetik yang dilakukan
pada pasien dengan tumor padat metastatik yang menerima pemberian capecitabine oral (1600
hingga 3420 mg menurut pasien) dua kali sehari.

Alamat korespondensi kepada Dr. FMM Bressolle, Ph.D., Laboratoire de Pharmacocine´tique Clinique, Faculte´ de Pharmacie,
BP 14491, 15 Avenue Ch. Flahault, 34093 Montpellier Cedex 5, Prancis. Email: Fbressolle@aol.com
 Machine Translated by Google

1706 R. Sÿvobaiteÿ dkk.

Kata kunci 50 -deoxy-5-fluorocytidine, 50 -deoxy-5-fluorouridine, 5-fluorodihydrouracil,

5-fluorouracil, capecitabine, kuantisasi LC-ESI-MS

PERKENALAN

Capecitabine (Xeloda1) adalah fluoropyrimidine tumor-selektif yang diberikan

secara oral yang digunakan dalam pengobatan kanker payudara metastatik dan
kanker kolorektal. Capecitabine adalah prodrug, yang secara enzimatik diubah
menjadi 5-fluorouracil (5-FU) pada tumor, dimana ia menghambat sintesis DNA dan
memperlambat pertumbuhan jaringan tumor.[2] Capecitabine dimetabolisme
terutama di hati oleh karboksilesterase menjadi 50 -deoxy-5-fluorocytidine (50
-DFCR). Yang terakhir kemudian diubah menjadi 50 -deoxy-5-fluorouridine (50
-DFUR) oleh cytidine deaminase. Akhirnya, 50 -DFUR diubah menjadi 5-FU oleh
thymidine phosphor ilase, yang terdapat dalam konsentrasi tinggi pada jaringan
tumor.[3] 5-FU dibersihkan secara enzimatik dari plasma untuk menghasilkan 5-
fluorodihydrouracil (5-FUH2), yang merupakan langkah pembatas laju yang
dikatalisis oleh dihydropyrimidine dehydrogenase (DPD).[4]
Meskipun capecitabine secara umum dapat ditoleransi dengan baik, beberapa
pasien dapat mengalami diare parah akibat pelepasan 50 -DFUR di dalam usus
kecil.[5] Selain itu, sindrom tangan-kaki telah terbukti menjadi toksisitas terbatas
Diunduh
Berlin]
20:19
2015
pada
oleh
Juli
[FU
03
dosis kronis dari capecitabine, yang menyebabkan morbiditas yang signifikan pada
pasien yang menerima obat ini. [6,7] Dengan demikian, metode bioanalitik yang
sensitif dan akurat untuk menganalisis capecitabine dan metabolitnya diperlukan.
untuk pemantauan pengobatan kemoterapi pada pasien kanker.
Beberapa metode kromatografi cair (LC) dengan ultra-violet (UV), [8]
spektrometri massa, [9,10] atau spektrometri massa tandem [11-13] telah
dikembangkan selama beberapa tahun terakhir untuk analisis capecitabine dan
metabolit dalam plasma manusia. Di sebagian besar dari mereka, baik capecitabine
dan 5-FU dikuantifikasi. Metode lain telah dikembangkan untuk menghitung
capecitabine dan metabolitnya dalam matriks hewan.[10,14] Zufÿ´a et al.[8]
melaporkan metode LC dengan deteksi UV memungkinkan kuantisasi simultan
capecitabine, 50 -DFUR, 5-FU, dan 5-FUH2. Namun, metode ini memerlukan
langkah ekstraksi dan pemurnian yang membosankan, serta waktu analisis yang
lama. Demikian juga, Licea-Perez et al.[12] vali mengencani metode LC-MS=MS
untuk penentuan capecitabine, 5-FU, dan a-fluoro-b-alanine dalam plasma manusia.
Langkah ekstraksi cair-cair yang berbeda diikuti dengan derivatisasi 5-FU dan
capecitabine dilakukan. Xu et al.[9] menjelaskan metode prosedur pembersihan
sampel online untuk mengukur capecitabine, 50 -DFCR, dan 50 -DFUR secara
bersamaan dalam plasma manusia. Namun, dengan menggunakan metode ini,
tidak mungkin mengukur 5-FU. Siethoff et al.[11] menerbitkan uji LC-MS=MS untuk
hanya mengukur capecitabine dan 5-FU. Prosedur pretreatment sampel yang terlibat
 Machine Translated by Google

Metode LCMS untuk Penentuan Capecitabine dalam Plasma Manusia 1707

teknik peralihan kolom. Baru-baru ini, Vainchtein et al.[13] mengembangkan

metode LC-MS=MS untuk penentuan capecitabine secara simultan dan empat
metabolit berikut, 50 -DFCR, 50 -DFUR, 5-FU, dan 5-FUH2 dalam plasma
manusia. Para penulis ini menggunakan dua standar internal: fludarabine dan 5-
chloro uracil; prosedur pretreatment sampel terdiri dari presipitasi protein satu
langkah sederhana menggunakan asam trifluoroa cetic 10% dalam air. Namun,
tidak mungkin untuk mereplikasi metode mereka dalam LC-MS karena adanya
puncak yang mengganggu pada waktu retensi analit.

Tujuan dari pekerjaan kami adalah untuk mengembangkan metode LC-MS

yang selektif dan sensitif untuk kuantisasi simultan capecitabine, 50 -DFCR, 50
-DFUR, 5-FU, dan 5-FUH2 dalam plasma manusia. Penanganan sampel dan
kondisi kromatografi dioptimalkan untuk memberikan hasil kuantitatif yang cepat
sambil mempertahankan spesifisitas, sensitivitas, akurasi, dan presisi yang
diperlukan untuk studi farmakokinetik dan pemantauan obat terapeutik.
Prosedur pretreatment sampel melibatkan ekstraksi cair-cair; 5-fluorocytosine
(5-FC) digunakan sebagai standar internal. Metode ini sepenuhnya divalidasi
menurut pedoman FDA tentang validasi bioanalitik; [15] metode ini digunakan
untuk mengukur obat ini dalam sampel plasma dari pasien yang menerima
capecitabine.

Diunduh
Berlin]
20:19
2015
pada
oleh
Juli
[FU
03

EKSPERIMENTAL

Bahan dan Reagen

Standar referensi Capecitabine dan 50 -DFCR dengan murah hati

disediakan oleh Hoffmann-La Roche (Basel, Suisse). 5-FUH2 diperoleh dari
Toronto Research Chemicals (North York, Kanada). 50 -DFUR, 5-FC (IS) dan
asam format dibeli dari Sigma-Aldrich (Lyon, Prancis).
5-FU dan asetonitril dengan kemurnian tinggi berasal dari Merck (Darmstadt,
Jerman); asam trifluoasetat, etil asetat dan metanol diperoleh dari Prolabo
(Fontenay sous Bois, Prancis). Semua reagen adalah kelas HPLC atau
kemurnian setara.
Air berkualitas sangat tinggi diperoleh dari sistem pemurni air Milli-Q
tem (Millipore, Bedford, MA, AS).
Untuk validasi metode, sampel plasma manusia Kaukasia bebas obat (6
batch berbeda dari 6 kumpulan donor berbeda) diperoleh dari Etablissement
Franc¸ais du Sang (Montpellier, Prancis).
Kolam plasma ini diperoleh dari darah yang dikumpulkan pada lithium hepar
inate untuk mencegah koagulasi. Matriks kosong dialirkan dan disimpan pada
suhu 20C sampai digunakan. Batch yang sama digunakan selama penelitian
untuk persiapan kalibrator dan kontrol kualitas (QC) sampel. Batch lainnya
 Machine Translated by Google

1708 R. Sÿvobaiteÿ dkk.

digunakan untuk mempelajari selektivitas = spesifisitas metode dan untuk menilai

efek matriks.
Larutan stok 5-FU, 50 -DFCR, 50 -DFUR, capecitabine, dan 5-FC disiapkan
secara individual dalam air murni, larutan stok 5-FUH2 disiapkan dalam metanol.
Semua larutan stok pada konsentrasi target 1 g=L disimpan pada -20C. Mereka
stabil dalam kondisi penggunaan sehari-hari selama minimal 1 bulan (data tidak
ditampilkan). Larutan stok selanjutnya diencerkan setiap hari dengan air murni
(metanol untuk 5-FUH2) untuk mendapatkan larutan kerja (dari 1 hingga 150
mg=L). Mereka digunakan untuk menyiapkan kurva kalibrasi dan sampel kontrol
kualitas (QC). Dua larutan stok yang berbeda digunakan untuk menyiapkan
kalibrator dan sampel QC.
Larutan referensi yang mengandung 5-FU, 5-FUH2, 50 -DFCR, 50 -DFUR,
cape citabine (250, 750, 7500 mg=L), dan 5-FC (7500 mg=L) disiapkan setiap
hari dalam air murni untuk memeriksa kinerja sistem LC-MS.

Instrumentasi dan Kromatografi

Eksperimen LC-MS dilakukan pada spektrometer massa quadrupole Hewlett

Packard Agilent 1100 (Agilent Technologies, Les Ulis, Prancis) dengan sumber
ionisasi elektrospray (ESI) yang dioperasikan dalam mode ionisasi positif.
Diunduh
Berlin]
20:19
2015
pada
oleh
Juli
[FU
03 Optimalisasi berbagai parameter eksperimental termasuk sifat fasa diam,
komposisi eluen, sifat pengubah organik, tegangan kapiler, tekanan nebulizer,
dan tegangan sampling cone telah dilakukan (data tidak ditampilkan).

Sistem LC dari Agilent Technologies, yang terdiri dari unit pemompaan

kuaterner seri 1100, degasser, dan autosampler digunakan. Data diperoleh dan
diproses dengan perangkat lunak HPChem (versi 08.04) dari Agilent Technologies.
Kolom analitik adalah kolom Atlantis dC18 (5 mm, 4,6 100 mm, Waters, Milford,
MA, USA). Suhu kolom dipertahankan pada 20C dan kompartemen sampel
dipertahankan pada 4C. Fase gerak A terdiri dari 1% (v=v) asam format dalam
air dan fase gerak B adalah 1% (v=v) asam format dalam asetonitril. Fase gerak
dideaerasi secara ultrasonik sebelum digunakan dan dengan aliran helium
selama penggunaan. Tabel 1 menunjukkan variasi proporsi pelarut A dan B.

Total run time adalah 15 menit dan laju alir dipertahankan konstan pada 0,6
mL=menit selama run. Volume injeksi 10 mL dalam loop 100 mL digunakan.

Spektrometer massa disetel dengan prosedur yang disediakan oleh Agi lent
Technologies untuk memberikan respons maksimum untuk m=z 118, 230, 508,
dan 997. Instrumen dioptimalkan dengan memasukkan larutan 10 mg=L dari
semua analit dalam fase gerak (95% air-5% asetonitril mengandung 1% asam
format) pada 600 mL=menit melalui pompa Agilent yang terhubung langsung
 Machine Translated by Google

Metode LCMS untuk Penentuan Capecitabine dalam Plasma Manusia 1709

TABEL 1 Profil Gradien Elusi

Waktu (menit) Pelarut A (%) Pelarut B (%)

0,0 95 5
2.0 95 5
8.0 0 100
9.0 0 100
9.1 95 5
15.0 95 5

ke spektrometer massa. Tegangan ditetapkan pada þ3.0 kV untuk kapiler dan þ0.5 kV
untuk lensa skimmer. Parameter spektrometer utama adalah sebagai berikut: suhu
sumber, 100C; suhu quadrupole, 99C; gas nebulisasi (nitrogen), 0,25 MPa; gas
pengering (nitrogen), 720 L=h. Selama semua percobaan, spektrum massa diperoleh
dengan memindai dari m=z 100 hingga m=z 500. Mode pemantauan ion tunggal (SIM)
digunakan untuk kuantitas sampel dengan memantau secara berurutan molekul
terprotonasi (MþH)þ, dari masing-masing analit : m=z 130 untuk 5-FC, m=z 131 untuk 5-
FU, m=z 133 untuk 5-FUH2, m=z 246 untuk 50 -DFCR , m=z 247 untuk 50 -DFUR, dan
m=z 360 untuk capecitabine (Gambar 1). Akuisisi data dilakukan dengan waktu tunda
95 ms.
Tegangan sampling cone masing-masing adalah 180, 80, 140, 35, 80, dan 60 V.

Diunduh
Berlin]
20:19
2015
pada
oleh
Juli
[FU
03

Persiapan Standar dan Sampel QC

Standar kalibrasi yang mengandung capecitabine dan metabolit disiapkan baru

dengan menambahkan volume larutan kerja yang sesuai ke dalam 0,5 mL plasma pada
konsentrasi 100, 500, 1000, 5000, dan 10000 mg=L untuk 5-FU; 50, 100, 500, 1000,
5000, dan 10000 mg=L untuk 5-FUH2; dan 25, 50, 100, 500, 1000, 5000, dan 10000
mg=L untuk 50 -DFCR, 50 -DFUR dan capecitabine. Standar kalibrasi dicampur dengan
pusaran selama kurang lebih 30 detik sebelum diproses.

Sampel QC disiapkan secara independen seperti yang disebutkan di atas untuk

menghasilkan konsentrasi 250, 750, dan 7500 mg = L untuk semua analit. Untuk 50
-DFCR, 50 -DFUR, dan capecitabine, sampel QC tambahan disiapkan pada 75 mg=L.
Persentase pelarut non-matriks yang digunakan untuk stan kalibrasi spike
sampel dards dan QC kurang dari 5% (v = v).

Prosedur Pretreatment Sampel

25 mL alikuot larutan kerja IS (150 mg=L) ditambahkan ke 0,5 mL alikuot sampel

dan dicampur vorteks selama 10 detik. Protein plasma kemudian diendapkan dengan
0,5 mL 1% (v=v) TFA dalam air; setelah pencampuran vortex untuk a
 Machine Translated by Google

1710 R. Sÿvobaiteÿ dkk.

Diunduh
Berlin]
20:19
2015
pada
oleh
Juli
[FU
03

GAMBAR 1 Spektra massa (mode pemindaian), 50 -DFCR, 50 -deoxy-5-fluorocytidine; 50 -DFUR, 50

-deoksi-5-fluoridin; 5-FU, 5-fluorourasil, 5-FUH2, 5-fluorodihidrourasil.

beberapa detik, campuran disentrifugasi pada 16000 g selama 10 menit (þ4C).

Supernatan dipindahkan ke tabung gelas dan 5 mL etil asetat= metanol (95:5, v=v)
ditambahkan sebagai pelarut ekstraksi. Sampel dicampur lagi dengan vor tex selama
5 detik, dikocok selama 5 menit dan kemudian disentrifugasi pada 16000 g selama
10 menit pada suhu þ4C untuk memisahkan lapisan berair dan organik. Fase organik
dipindahkan ke tabung kaca kosong dan diuapkan hingga kering pada suhu 45C di
bawah aliran nitrogen selama 30 menit. Ekstrak kering dilarutkan kembali dalam 100
mL air yang mengandung asam format 1% (v=v) dan dipindahkan ke vial injeksi.

Analisis data

Kuantisasi menggunakan analit terhadap rasio luas standar internal. Untuk

menghubungkan rasio luas puncak dan konsentrasi teoritis masing-masing analit, berbeda
 Machine Translated by Google

Metode LCMS untuk Penentuan Capecitabine dalam Plasma Manusia 1711

model diuji: 1) analisis regresi linier kuadrat-terkecil tertimbang atau tertimbang

(Y ¼ aX þ b) dan 2) hubungan kuadrat (Y ¼ aX2 þ bX þ c) dengan Y ¼ rasio
luas puncak dan konsentrasi nominal X ¼. Kurva regresi tidak dipaksa melalui
nol. Para meter persamaan yang dihasilkan digunakan untuk menghitung
kembali konsentrasi untuk kalibrator yang dievaluasi secara statistik.

Efek Matriks

Untuk penentuan efek matriks (yaitu, penekanan atau peningkatan ionisasi

analit dengan adanya komponen matriks), [16] enam kumpulan sampel plasma
manusia bebas obat kontrol yang berbeda diproses sesuai prosedur yang
dijelaskan sebelumnya. Ekstrak kering dilarutkan kembali dalam 100 mL asam
format 1% dalam air yang dibubuhi larutan capecitabine dan metabolitnya untuk
menghasilkan konsentrasi yang sama seperti pada sampel QC yang diproses.
Sampel yang belum diproses disiapkan dalam air yang mengandung asam
format 1% pada konsentrasi nominal yang sama. Efek matriks didefinisikan
sebagai rasio respons puncak analit dengan adanya ion matriks terhadap
respons puncak analit tanpa adanya ion matriks. Setiap penentuan direplikasi 3
kali lipat. Nilai faktor matriks antara 0,85–1,15 dianggap dapat diterima.
Diunduh
Berlin]
20:19
2015
pada
oleh
Juli
[FU
03

Validasi

Spesifisitas
Untuk penentuan spesifisitas metode analitik, kromatogram dari sampel
plasma bebas obat manusia (enam kumpulan berbeda) diperiksa untuk bukti
interferensi yang terlihat oleh senyawa endogen dengan senyawa yang
diinginkan.
Sampel plasma dari pasien yang menerima obat lain (irinotecan,
ondansetron, metoclopramide, racecadotril, paracetamol, obat antiinflamasi
nonsteroid, dan kortikosteroid) dianalisis untuk interferensi.

Presisi dan Akurasi

Ketepatan dan akurasi metode intra-pengujian dan antar-pengujian divalidasi
dengan menganalisis sampel QC terhadap kurva kalibrasi. Determinasi
dilakukan dengan enam ulangan per QC pada hari yang sama serta setiap hari
selama 7 hari terpisah. Ketepatan metode pada masing-masing
konsentrasi dihitung sebagai standar deviasi relatif dari rata-rata
(RSD).
 Machine Translated by Google

1712 R. Sÿvobaiteÿ dkk.

Keakuratan prosedur ditentukan sebagai kesalahan rata-rata relatif (RME)

dengan menggunakan persamaan berikut: RME ¼ [rata-rata konsentrasi
yang ditemukan = konsentrasi berduri teoritis] 100.

Efisiensi Ekstraksi
Pemulihan absolut capecitabine, 50 -DFCR, 50 -DFUR, 5-FU, dan 5-FUH2
dari plasma dievaluasi berdasarkan perbandingan area puncak sampel QC
yang diekstraksi dengan yang diperoleh dengan injeksi langsung dengan
jumlah yang sama senyawa (n ¼ 3 per konsentrasi) dilarutkan dalam air yang
mengandung 1% asam format. Efisiensi ekstraksi internal
standar juga dihitung.

Penentuan Batas Bawah Kuantisasi (LLOQ)

Estimasi LLOQ pada sampel QC didefinisikan sebagai konsentrasi obat
terendah yang dapat ditentukan dengan presisi 20% dan akurasi 80-120%.

Aplikasi untuk Studi Farmakokinetik Klinis

Prosedur analitik keseluruhan ini telah digunakan untuk menentukan

Diunduh
Berlin]
20:19
2015
pada
oleh
Juli
[FU
03
konsentrasi capecitabine dan metabolitnya dalam sampel plasma dari pasien
berusia 18-75 tahun dengan tumor padat metastatik. Protokol penelitian
ditinjau dan disetujui oleh dewan peninjau kelembagaan. Capecitabine
diberikan secara oral dengan dosis 1600 hingga 3420 mg, dua kali sehari
dikombinasikan dengan irinotecan, 180 mg=m2 , dan untuk 10 pasien yang
dikombinasikan dengan oxaliplatin, 85 mg=m2 . Analisis farmakokinetik
dilakukan dengan menggunakan perangkat lunak Pk-fit . [17,18] Parameter
farmakokinetik ditentukan dari data konsentrasi-waktu plasma menggunakan
pendekatan kompartemen dan mencakup area total di bawah kurva konsentrasi-
waktu plasma (AUC), eliminasi waktu paruh (t1=2), jeda waktu (tlag), jarak
bersih total (CL=F), dan volume distribusi (V=F). CL dan V tidak dikoreksi untuk bioavailabilitas

HASIL

Pengembangan Metode

Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengembangkan metode kasar,

spesifik, dan sensitif yang memungkinkan penentuan capecitabine, 50 -DFCR,
50 -DFUR, 5-FU, dan 5-FUH2 secara simultan dalam plasma manusia.
Masalah utama yang dihadapi selama pengembangan metode adalah
perbedaan polaritas yang signifikan antara analit yang menyebabkan kesulitan
ekstraksi sampel. Kondisi kromatografi dioptimalkan untuk mendapatkan ketajaman
 Machine Translated by Google

Metode LCMS untuk Penentuan Capecitabine dalam Plasma Manusia 1713

bentuk puncak dengan respon yang memadai. Ini termasuk jenis kolom
(C8, C18, fenil, Shield RP18 atau Atlantis dC18), komposisi fase gerak,
pH larutan buffer, dan laju aliran. Kehadiran asam organik (asam format,
asetat atau trifluoroasetat) atau penyangga (format atau asetat) dalam
fase gerak dievaluasi. Pemisahan analit terbaik dan waktu analisis relatif
singkat diperoleh pada Atlantis DC18 menggunakan fase gerak yang
terdiri dari eluen A, 1% asam format dalam air dan eluen B, 1% asam
format dalam asetonitril. Pretreatment sampel juga dioptimalkan, ekstraksi
fase cair-cair dan padat diuji. Hasil terbaik diperoleh dengan menggunakan
ekstraksi cair-cair dengan etil asetat yang mengandung metanol 5%
setelah presipitasi protein dengan TFA 1% dalam air.

Waktu Retensi dan Kekhususan

Kromatogram representatif pada Gambar 2 menunjukkan plasma
manusia bebas obat, plasma manusia bebas obat dibubuhi lima analit di LLOQ

Diunduh
Berlin]
20:19
2015
pada
oleh
Juli
[FU
03

GAMBAR 2 Kromatogram khas plasma kosong (A); plasma dibubuhi lima analit di LLOQ (B); dan
plasma diambil 1 jam setelah pemberian capecitabine (2500 mg) (C): 5-FU 150 mg=L, 50 -DFCR 293
mg=L, 50 -DFUR mg=L, dan capecitabine 8904 mg=L, Puncak 1: internal standar; Puncak 2: 5-
fluorouracil (5-FU); Puncak 3: 5-fluorodihydrouracil (5-FUH2); Puncak 4: 50 -deoxy-5-fluorocytidine
(50 -DFCR); Puncak 5: 50 -deoxy-5-fluorouridine (50 -DFUR); Puncak 6: capecitabine.
 Machine Translated by Google

1714 R. Sÿvobaiteÿ dkk.

dan plasma manusia diperoleh 1 jam setelah pemberian oral capecitabine

(2500 mg). Waktu retensi capecitabine, 50 -DFCR, 50 -DFUR, 5-FU, 5-FUH2,
dan standar internal masing-masing adalah 9,0, 6,5, 7,5, 3,5, 3,3, dan 2,3 menit
(CV, 0,6–2,2%, n ¼ 20). Kurva kalibrasi terdiri dari 5-7 titik kalibrasi.

Enam kumpulan plasma manusia yang berbeda, yang diperoleh secara

komersial, disaring secara kromatografi untuk zat-zat yang mengganggu. Tidak
ada gangguan pada waktu retensi analit yang diamati (Gambar 2A). Obat yang
diuji tidak mengganggu salah satu analit dalam pengujian yang dijelaskan.

Hubungan Respons Obat/Detektor

Untuk semua analit, kurva kalibrasi kuadrat memberikan kecocokan terbaik

berdasarkan hasil analisis statistik[19] dan presisi serta pemulihan sampel QC.
Nilai CV pada lereng b adalah <14% (Tabel 2). Rata-rata konsentrasi yang
dihitung kembali dirangkum dalam Tabel 3. Untuk setiap analit, kesesuaian
antara konsentrasi yang dihitung kembali dan konsentrasi nominal diverifikasi
secara statistik (uji-t Student). Rata-rata kesalahan prediktor relatif dihitung
dari perbedaan antara konsentrasi kembali dihitung dan nominal tidak berbeda
secara statistik dari nol.

Diunduh
Berlin]
20:19
2015
pada
oleh
Juli
[FU
03

Efek Matriks, Presisi, Akurasi, Efisiensi Ekstraksi, dan

LLOQ

Tidak ada bukti efek matriks yang diamati pada waktu retensi analit (Tabel
4); faktor matriks berkisar antara 85 hingga 115%. Itu

TABEL 2 Nilai Rata-Rata Parameter Regresi Kuadrata

Reproduksibilitas r2 (Rata-rata SD) a (Rata-rata SD) b (Rata-rata SD) c (Rata-rata SD)

Intra-pengujian (n ¼ 6)
5-FU 0,992 0,004 0,104 0,078 0,175 0,024 0,002 0,001
5-FUH2 0,997 0,003 0,074 0,080 0,345 0,024 0,012 0,019
50 -DFCR 0,999 0,001 0,549 0,161 1,76 0,224 0,001 0,002
50 -DFUR 0,999 0,001 0,067 0,049 0,612 0,048 0,015 0,028
Capecitabine 0,998 0,003 0,260 0,040 11,0 0,831 0,226 0,404
Antar-pengujian (n ¼ 7)
5-FU 0,992 0,011 0,143 0,064 0,233 0,016 0,002 0,002
5-FUH2 0,997 0,002 0,095 0,034 0,386 0,031 0,002 0,001
50 -DFCR 0,996 0,002 0,357 0,220 1,65 0,114 0,001 0,003
50 -DFUR 0,998 0,001 0,060 0,069 0,652 0,053 0,042 0,053
Capecitabine 0,998 0,003 0,220 0,084 11,4 1,27 0,131 0,309

A
Regresi tak tertimbang kuadrat, rumus: y ¼ ax2 þ bx þ c.
2 r: koefisien determinasi; n : jumlah ulangan; SD, standar deviasi.
50 -DFCR, 50 -deoxy-5-fluorocytidine; 50 -DFUR, 50 -deoksi-5-fluorouridin; 5-FU, 5-fluorourasil, 5-FUH2,
5-fluorodihydrouracil.
 1715
50-
DFUR 50-
Capecitabine DFCR 5-
FUH2 5-
FU Antar-
pengujian 50-
Capecitabine FUH2
DFCR 5-
DFUR 50- 5-
FU Intra-
pengujian TABEL
3
Relative
Standard
Deviation
(RSD)
dan
Recoveries
Dihitung
dari
Mean
Back-
Calculated
Concentrations
(Kurva
Kalibrasi)
n
ulangan;
jumlah
50-
DFCR,
50-
deoksi-5-
fluorocytidine;
DFUR,
50-
deoksi-5-
fluorouridin;
5-
FU,
5-
fluorourasil,
FUH2,
5-
fluorodihidrourasil.
: (n
¼
6)
(n
¼
7)
RSD
9.4 9.9 3.1 5.1
3.8
6.3 (%)
– – – –
25
mg=L
Pemulihan
92,9
102,0
103,0 95,7
100,0
102,0
(%)
– – – –
RSD
11.1 (%)
8.4 8.8 8.9 – 6,5
5,5
8,0
6,7 –
50
mg=L
Pemulihan
104.0 102,0
105,0 99,9
105,0
101,0
101,0
(%) Diunduh
oleh
[FU
Berlin]
pada
20:19
03
Juli
2015
97.8
– –
RSD
9.0
9.7 8.0 5.9 6.0 3,8
7,0
6,7
2,3
7,8 (%)
100
mg=L
Pemulihan
103.0 99,8
102,0 97,9
101,0
103,0
103,0
104,0
98.4 98.4 (%)
RSD
7,2
7,4
11,2
11,5 (%)
3.9 4,0
8,1
8,0
6,2
2,2
500
mg=L
Pemulihan
100.0 103.0 103.0 103.0 93,0
102,0
102,0
104,0
104,0
99.3 (%)
RSD
8.3 5.8 3,2
7,0
7,3 3,6
5,3
6,5
4,8
1,5 (%)
1000
mg=L
Pemulihan
102.0 97,6
100,0 104.0
98.4 94,9
99,0
104,0
101,0
102,0 (%)
RSD
5.00 1,50 6.00
5.70 6.00 5,40
2,50
3,00
0,67
0,95
(%)
5000
mg=L
Pemulihan
102,0
101,0 103.0
96.8 95.5 96,0
98,3
98,8
99,6
99,4 (%)
RSD
10.0
5.50 2,50
2,30
0,48 7,70
1,80
1,80
1,10
0,83 (%)
10000
mg=L
Pemulihan
100.0 100.0 101,0
101,0
102,0
99,9 98.8 99.8 97,2
99,1 (%)
Machine Translated by Google
 Machine Translated by Google

1716 R. Sÿvobaiteÿ dkk.

TABEL 4 Efek Matriks

250 mg=L 750 mg=L 7500 mg=L

n¼6 Maksud SD Jangkauan Maksud SD Jangkauan Maksud SD Jangkauan

5-FU 0,99 0,03 0,97–1,05 0,90 0,03 0,87–0,94 0,91 0,07 0,87–1,03
5-FUH2 0,93 0,05 0,87–1,01 1,02 0,10 0,88–1,15 0,89 0,04 0,88–0,94
50 -DFCR 1,12 0,03 1,08–1,15 1,10 0,05 1,05–1,15 1,05 0,05 0,98–1,11
50 -DFUR 1,02 0,04 0,97–1,07 1,11 0,04 1,04–1,15 0,94 0,04 0,87–0,98
Capecitabine 1,02 0,07 0,91–1,07 1,00 0,09 0,89–1,14 0,93 0,08 0,85–1,03

n: jumlah matriks berbeda yang dipelajari; SD, standar deviasi; 50 -DFCR, 50 -deoxy-5-fluorocytidine;
50 -DFUR, 50 -deoksi-5-fluorouridin; 5-FU, 5-fluorourasil, 5-FUH2, 5-fluorodihidrourasil.
Setiap nilai adalah rata-rata dari 3 ulangan di setiap kumpulan matriks.

hasil presisi dan akurasi intra-assay dan inter-assay disajikan pada Tabel 5; presisi berkisar
antara 0,2 hingga 8,3% dan akurasi 99-104%.
Nilai berada dalam batas yang dapat diterima. [15,16,19]
Pemulihan ekstraksi rata-rata adalah 98,4% (RSD, 4,8%) untuk capecitabine, 94,9%
(RSD, 5,5%) untuk 50 -DFCR, 94,2% (RSD, 6,7%) untuk 50 -DFUR, 89,7% (RSD, 7,9%) untuk
5-FU, 91,8% (RSD, 8,1%) untuk 5-FUH2, dan 93,5% (RSD, 5,4%) untuk standar internal.
Mereka tidak berbeda secara statistik pada rentang konsentrasi yang dipelajari.

LLOQ adalah 25 mg=L untuk capecitabine, 50 -DFCR, dan 50 -DFUR; 50 mg=L untuk 5-
Diunduh
Berlin]
20:19
2015
pada
oleh
Juli
[FU
03

FUH2; dan 100 mg=L untuk 5-FU.

TABEL 5 Presisi Intra-Pengujian dan Inter-Pengujian dan Akurasi Metode

75 mg=L 250 mg=L 750 mg=L 7500 mg=L

Presisi (%) Akurasi (%) Presisi (%) Akurasi (%) Presisi (%) Akurasi (%) Presisi (%) Akurasi (%)

Intra-pengujian
(n ¼ 6)
5-FU – – 0,6 104 0,7 103.0 0,8 99.3
5-FUH2 – – 1.4 102 2,7 100.0 0,8 101.0
50 -DFCR 1.0 104.0 0,6 103 2,4 101.0 0,4 101.0
50 -DFUR 3.7 100.0 0,8 103 3,1 99,5 0,8 102,0
Capecitabine 4.2 99.8 1.1 103 2.4 100.0 0,6 102,0
Antar-pengujian
(n ¼ 7)
5-FU – – 2.8 104 8.0 101.0 0,6 100.0
5-FUH2 – – 2.9 104 2.7 102.0 0,2 101.0
50 -DFCR 7.5 101.0 4.9 101 2.0 102.0 0,8 99.8
50 -DFUR 7.0 102,0 5.6 102 2.3 103,0 0,6 101,0
Capecitabine 6.0 102,0 8.3 102 5.3 101,0 0,5 101,0

n : jumlah ulangan; 50 -DFCR, 50 -deoxy-5-fluorocytidine; 50 -DFUR, 50 -deoksi-5-fluorouridin; 5-FU,

5-fluorourasil, 5-FUH2, 5-fluorodihidrourasil.
 Machine Translated by Google

Metode LCMS untuk Penentuan Capecitabine dalam Plasma Manusia 1717

TABEL 6 Mean (SD) Parameter Farmakokinetik Capecitabine dan Metabolit Utamanya

Capecitabine 50 -DFCR 50 -DFUR 5-FUH2

443 888 – – –
V=F, L
268 424 – – –
CL=F, L=h
t1=2, h 1,03 0,66 0,89 0,76 1,12 1,37 0,99 0,38
AUC, mgxj=L 13.0 8.85 4,83 3,84 39,6 28,4 2,43 0,81

SD, standar deviasi; 50 -DFCR, 50 -deoxy-5-fluorocytidine; 50 -DFUR, 50 -deoksi-5-fluorouridin,

5-FUH2, 5-fluorodihydrouracil.
V, volume distribusi; CL=F pembersihan total tidak dikoreksi untuk bioavailabilitas (F); t1=2, terminal elim
waktu paruh inasi; AUC, area di bawah kurva dinormalisasi menjadi dosis yang diberikan 2500 mg.

Studi klinis

Untuk capecitabine dan metabolit utamanya, rata-rata parameter

farmakokinetik diberikan pada Tabel 6. Profil rata-rata konsentrasi versus
waktu disajikan pada Gambar 3. Proses penyerapan berlangsung cepat (4
jam1 ) dengan jeda waktu (0,4 jam). Untuk beberapa pasien dengan defisiensi
DPD, konsentrasi 5-FUH2 dengan cepat berada di bawah LLOQ metode ini.
Konsentrasi 5-FU hanya dapat diukur pada beberapa pasien 1 dan 2 jam
setelah pemberian capecitabine; mereka mendekati LLOQ (yaitu, 100 mg=L).
Pada waktu pengambilan sampel lainnya, konsentrasi 5-FU berada di bawah LLOQ.
Diunduh
Berlin]
20:19
2015
pada
oleh
Juli
[FU
03

DISKUSI DAN KESIMPULAN

Metode LC dengan deteksi MS untuk penentuan simultan

capecitabine, 50 -DFCR, 50 -DFUR, 5-FU, dan 5-FUH2 dalam plasma manusia adalah

GAMBAR 3 Rata-rata (standar deviasi) profil konsentrasi vs waktu capecitabine, 50 -DFCR, 50 -DFUR dan 5-FUH2 pada
pasien dengan tumor padat metastatik.
 Machine Translated by Google

1718 R. Sÿvobaiteÿ dkk.

dikembangkan. Pengujiannya akurat dan tepat. Pemulihan yang baik dicapai

dalam langkah ekstraksi campuran pelarut tunggal. Metode ini digunakan untuk
menganalisis sampel plasma yang diambil selama studi farmakokinetik yang
dilakukan pada pasien dengan tumor padat metastatik yang menerima
capecitabine. Dibandingkan dengan metode yang diterbitkan oleh Vainchtein et al.
[13] oleh LC-MS=MS, dalam penelitian ini, LLOQ 25 mg=L untuk capecitabine, 50
-DFCR, dan 50 -DFUR sekitar dua kali lebih tinggi. Namun, sensitivitas ini cukup
untuk mengikuti konsentrasi ketiga senyawa ini pada pasien 12 jam setelah
asupan capecitabine. Untuk 5-FU, tidak mungkin menurunkan LLOQ di bawah
100 mg=L. Karena 5-FU dielusi pada menit pertama, kandungan air yang tinggi
dari fase gerak akan merusak desolvasi dan, karenanya, proses ionisasi.

Pembersihan capecitabine yang tidak dikoreksi untuk bioavailabilitas, 268

L=h, lebih rendah tetapi dalam urutan perkiraan yang dilaporkan sebelumnya dari
analisis non kompartemen, 347 L=h=1,8 m2 311 , [20]hingga 378 L=h=1,8 m2[21], dan
315 L =h=1.8 m2[22] tetapi serupa dengan yang dilaporkan oleh Urien et al., 231
[23]
L=h=m2 . Capecitabine t1=2, 1 jam, juga berada dalam kisaran perkiraan
sebelumnya.[21] Penghapusan metabolit jelas terbatas pada tingkat, yaitu, waktu
paruh ketiga metabolit yang terlihat dekat dengan waktu paruh capecitabine.

REFERENSI
Diunduh
Berlin]
20:19
2015
pada
oleh
Juli
[FU
03

1. Lamont, EB; Schilsky, RL Oral Fluoropyrimidines dalam Kemoterapi Kanker. Klinik. Kanker Res. 1999, 5, 2289–
2296.
2. Malet-Martino, M.; Martino, R. Studi Klinis dari Tiga Prodrug Oral 5-Fluorouracil (Capeci
tabine, UFT, S-1): Sebuah Tinjauan. Onkologi 2002, 7, 288–323.
3. Johnston, PG; Kaye, S. Capecitabine: Agen Baru untuk Pengobatan Tumor Padat. Antikanker
Narkoba 2001, 12, 639–646.
4. Grem, JL 5-Fluorouracil: Empat Puluh Plus dan Masih Berdetak. Tinjauan Perkembangan Praklinis dan Klinisnya.
Menginvestasikan. Obat Baru 2000, 18, 299–313.
5. Wagstaff, AJ; Ibbotson, T.; Goa, KL Capecitabine: Tinjauan Farmakologi dan Khasiat Terapinya dalam
Penatalaksanaan Kanker Payudara Lanjutan. Narkoba 2003, 63, 217–236.
6. Lassere, Y.; Hoff, P. Penatalaksanaan Sindrom Tangan-Kaki pada Pasien yang Diobati dengan Capecitabine
(Xeloda1). eur. J.Oncol. Nur. 2004, 8, S31–S40.
7. Webster-Gandy, JD; Bagaimana, C.; Harrold, K. Palmar-plantar Erythrodysesthesia (PPE): Tinjauan literatur
dengan Komentar tentang Pengalaman di Pusat Kanker. eur. J.Oncol. Nur. 2007, 11, 238–246.
8. Zufÿ´a, L.; Aldaz, A.; Gira´ldez, J. Penentuan Sederhana Capecitabine dan Metabolitnya dengan Kromatografi Cair
dengan Deteksi Ultraviolet dalam Injeksi Tunggal. J. Kromatografi. B 2004, 809, 51–58.
9. Xu, Y.; Grem, JL Metode Kromatografi Cair-Spektrometri Massa untuk Analisis Agen Anti-Kanker Capecitabine
dan Metabolit Nukleosidanya dalam Plasma Manusia. J. Kromatografi.
B 2003, 783, 273–285.
10.Guichard, SM; Mayer, saya.; I. Jodrell, D. Penentuan Simultan Capecitabine dan Metabolitnya oleh HPLC dan
Spektrometri Massa untuk Studi Praklinis dan Klinis. J. Kromatografi. B 2005, 826, 232–237.

11. Siethoff, C.; Orth, M.; Ortling, A.; Brendel, E.; Wagner-Redeker, W. Penentuan Simultan Capecitabine dan Metabolit
5-fluorourasilnya dengan Pergantian Kolom dan Kromatografi Cair = Spektrometri Massa Tandem. J. Massa
Spektrom. 2004, 39, 884–889.
 Machine Translated by Google

Metode LCMS untuk Penentuan Capecitabine dalam Plasma Manusia 1719

12. Licea-Perez, H.; Wang, S.; Bowen, C. Pengembangan Metode LC-MS=MS Sensitif dan Selektif untuk Penentuan
Alpha-fluoro-beta-alanine, 5-fluorouracil dan Capecitabine dalam Plasma Manusia. J. Kromatografi. B.2009, 877,
1040–1046.
13. Vainchtein, LD; Mawar, H.; Schellens, JH; Beijnen, JH A Baru, Metode HPLC-MS=MS Tervalidasi untuk Penentuan
Secara Simultan Agen Anti-Kanker Capecitabine dan Metabolitnya: 50 -deoxy-5-fluorocytidine, 50 -deoxy-5-
fluorouridine, 5-fluorouracil dan 5 -fluorodihydroura cil, dalam Human Plasma. Bioma. Kromatografi 2009, 24, 374–
378.
14. Dhananjeyan, MR; Liu, J.; Bykowski, C.; Trendel, JA; Sarver, JG; Ando, H.; Erhardt, PW Penentuan Cepat dan
Simultan Capecitabine dan Metabolitnya dalam Plasma Tikus, Serum Tikus, dan Empedu Kelinci dengan Kromatografi
Cair Kinerja Tinggi. J. Kromatografi. Tahun 2007, 1138, 101–108.

15. Badan Pengawas Obat dan Makanan AS. Bimbingan untuk industri. Validasi Metode Bioanalitik,
http://www.fda.gov/cder/guidance/index.html (diakses Mei 2004).
16. Viswanathan, CT; Bansal, S.; Stan, B.; DeStefano, AJ; Mawar, MJ; Sailstad, J.; Syah, VP; Skelly, JP; Swann, PG;
Weiner, R. Validasi dan Implementasi Metode Bioanalitik Kuantitatif: Praktik Terbaik untuk Uji Kromatografi dan
Pengikatan Ligan. Farmasi. Res. 2007, 24, 1962–1973.
17. Farenc, C.; Fabreguette, JR; Bressolle, F. Pk-fit: A Farmakokinetik = Farmakodinamik dan Statisti
kal Perangkat Lunak Analisis Data. Komputer. Bioma. Res. 2000, 33, 315–329.
18. Penelitian dan Pengembangan Farmakokinetik Penduduk (RDPP). Program Komputer Pk-Fit, Ver.
2.1., RDPP: Montpellier, Prancis, 1999.
19. Bressolle, F.; Bromet-Petit, M.; Audran, M. Validasi Metode Kromatografi Cair dan Kromatografi Gas. Aplikasi untuk
Farmakokinetik. J. Kromatografi. B.1996, 686, 3–10.
20. Poole, C.; Gardiner, J.; Dua Belas, C.; Johnston, P.; Harper, P.; Cassidy, J.; Monkhouse, J.; Banken, L.; Weidekamm,
E.; Reigner, B. Pengaruh Kerusakan Ginjal pada Farmakokinetik dan Tolerabilitas Capecitabine (Xeloda) pada
Pasien Kanker. Kemoterapi Kanker. Pharmacol. 2002, 49, 225–234.
21. Reigner, B.; Blesch, K.; Weidekamm, E. Farmakokinetik Klinis Capecitabine. Klinik. Pharmaco
kinet. 2001, 40, 85–104.
22. Reigner, B.; Watanabe, T.; Schuller, J.; Lucraft, H.; Sasaki, Y.; Bridgewater, J.; Saeki, T.; McAleer, J.; Kuranami, M.;
Diunduh
Berlin]
20:19
2015
pada
oleh
Juli
[FU
03

Poole, C.; Kimura, M.; Monkhouse, J.; Yorulmaz, C.; Weidekamm, E.; Grange, S.
Farmakokinetik Capecitabine (Xeloda) pada Pasien Jepang dan Kaukasia dengan Kanker Payudara.
Kemoterapi Kanker. Pharmacol. 2003, 52, 193–201.
23. Urien, S.; Rezai, K.; Lokiec, F. Pemodelan Farmakokinetik Produksi 5-FU dari Capecitabine - Studi Populasi pada 40
Pasien Dewasa dengan Kanker Metastatik. J. Farmakokinet. Farmakodin. 2005, 32, 817–833.