Int. J.Biol. Sains.2015, Jil.

11

ivy melompat
Penerbit Internasional Jurnal Internasional Ilmu Biologi2015;
11(2): 220-229. dua: 10.7150/ijbs.10178
Makalah Penelitian
220

Perubahan Sel T Helper Follicular pada Pasien

Purpura Trombositopenik Idiopatik
Jue Xie1*🖂,Dawei Cui2*,Yan liu1*,Jie Jin3,Hong Yan Tong3,Lei Wang1,Guoxiang Ruan1,Yun Lu1,Huiming
Yuan1
1. Departemen Transfusi Darah, Rumah Sakit Afiliasi Pertama, Fakultas Kedokteran, Universitas Zhejiang, Hangzhou, China, 310003 2.
Departemen Laboratorium Klinik, Rumah Sakit Afiliasi Pertama, Fakultas Kedokteran, Universitas Zhejiang, Hangzhou, China, 310003
3. Departemen Hematologi, Rumah Sakit Afiliasi Pertama, Fakultas Kedokteran, Universitas Zhejiang, Hangzhou, Tiongkok, 310003
*
Kontributor yang setara

🖂Penulis koresponden: Jue Xie, Departemen Transfusi Darah, Rumah Sakit Afiliasi Pertama, Fakultas Medis, Universitas Zhejiang,
Hangzhou, Tiongkok, Tel:+0571-87236391, Faks: +0571-87236391, Email:zyyyxj2011@163.com

© Penerbit Internasional Ivyspring. Ini adalah artikel akses terbuka yang didistribusikan di bawah ketentuan Lisensi Creative Commons
(http://creativecommons.org/ licenses/by-nc-nd/3.0/). Reproduksi diperbolehkan untuk penggunaan pribadi, nonkomersial, asalkan artikel tersebut utuh,
tidak dimodifikasi, dan dikutip dengan benar.

Diterima: 23.07.2014; Diterima: 2014.11.30; Diterbitkan: 2015.01.05

Abstrak
Latar belakang:Purpura Trombositopenik Idiopatik (ITP) adalah penyakit autoimun primer
dengan penurunan jumlah trombosit yang disebabkan oleh kerusakan trombosit yang dimediasi
terutama oleh antibodi trombosit. Sel T follicular helper (TFH) telah menunjukkan peran penting
dalam penyakit autoimun. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengeksplorasi kemungkinan
peran sel TFH pada pasien ITP.
Metode:Dua puluh tiga pasien ITP dan 12 kontrol sehat (HC) terdaftar dalam penelitian ini.
Frekuensi sel TFH yang bersirkulasi pada pasien dan HC dianalisis dengan aliran sitometri. Kadar
serum interleukin (IL)-21 dan IL-6 diukur menggunakan ELISA, dan antibodi trombosit diuji
menggunakan teknik fase padat. Selain itu, mRNA IL-21, IL-6, Bcl-6 dan c-Maf
tekanan dalam sel mononuklear darah perifer (PBMC) terdeteksi menggunakan PCR waktu
nyata.Hasil:Persentase peredaran CXCR5+CD4+sel TFH dengan ICOStinggiatau PD-1tinggiekspresi
secara signifikan lebih tinggi pada pasien ITP daripada di HC. Apalagi frekuensi CXCR5 yang
beredar+CD4+Sel TFH dengan inducible costimulator (ICOS)tinggiatau terprogram kematian-1
(PD-1)tinggiekspresi secara khusus lebih tinggi pada ITP dengan pasien trombosit-antibodi-positif
(ITP (+)) dibandingkan pada ITP dengan pasien trombosit-antibodi-negatif (ITP (-)) dan HC,
seperti halnya kadar serum IL-21 dan IL-6 (penting). Selain itu, korelasi positif ditemukan antara
CXCR5+CD4+sel TFH dengan ICOStinggiatau PD-1tinggiekspresi dan kadar serum IL-21 pasien ITP
(+). Selain itu, tingkat ekspresi mRNA IL-21, IL-6, Bcl-6 dan c-Maf meningkat secara signifikan
pada pasien ITP, terutama pada pasien ITP (+).
Kesimpulan:Studi ini menunjukkan sel TFH dan molekul efektor mungkin memainkan peran
penting dalam patogenesis ITP, yang merupakan target terapi yang mungkin pada pasien ITP.
Kata kunci: antibodi trombosit; Sel pembantu folikel T; purpura trombositopenik idiopatik; penyakit autoimun

Perkenalan
9
Purpura trombositopenik idiopatik (ITP), perifer (<100 × 10 /L) yang disebabkan oleh destruksi
ditandai dengan berkurangnya jumlah trombosit platelet dengan peningkatan risiko perdarahan
mukokutan, merupakan penyakit autoimun primer
[1]. Fitur khas dari turun di bawah 20 × 109/L, meskipun gejala klinis
pasien dengan ITP termasuk petechiae kulit dan tidak jelas pada sebagian besar pasien ITP. Diagnosis
perdarahan pada selaput lendir atau organ dalam ITP tergantung pada
yang mudah dimanifestasikan jika jumlah trombosit
Int. J.Biol. Sains.2015, Jil. 11
karakteristik klinis dan pemeriksaan laboratorium
yang dilakukan, serta kemampuan untuk
mengecualikan agen lain yang terkait dengan
trombositopenia [2, 3].
Autoantibodi trombosit terhadap glikoprotein
membran spesifik memediasi penghancuran
trombosit dan merupakan agen utama dalam
mekanisme patogenetik ITP yang mencakup pelat
yang diperantarai sel yang diperantarai antibodi
biarkan kehancuran dan penindasan megakaryo
poiesis [4-6]. Dengan ITP, autoantibodi imunoglobulin
(Ig) G yang berasal dari sel B auto-reaktif dapat
mengenali dan berikatan dengan satu atau lebih
glikoprotein (GP) pada permukaan trombosit,
termasuk GP IIb/IIIa, GP Ib/IX, dan GP Ia/ IIa;
sekitar 75% terletak di membran platelet glikoprotein
GP IIb/IIIa atau kompleks GP Ib/IX [5]. Kompleks ini
dapat dengan mudah ditelan dan dihancurkan oleh
reticulo
sistem endotel dengan mengikat reseptor Fcγ yang
diekspresikan pada monosit dan makrofag,
menyebabkan penurunan jumlah trombosit perifer
[7]. Namun, sedikit yang diketahui tentang
bagaimana sel B menghasilkan auto-antibodi spesifik
yang diaktifkan pada pasien dengan ITP dan tipe sel
T mana yang dapat menginduksi sel B untuk
menghasilkan antibodi pada pasien ITP.
Sel T follicular helper (TFH) mungkin
memainkan peran penting dalam mengatur respon
imun humoral yang terjadi pada penyakit autoimun,
penyakit menular, dan tumor [8]. Sebagai subset baru,
sel TFH mengatur proses kekebalan sel B spesifik
antigen dan ditandai oleh ekspresi molekul seperti
kemokin (motif C-X-C) reseptor 5 (CXCR5), induci ble
costimulator (ICOS), program kematian-1 (PD-1),
reseptor interleukin (IL)-21 (IL-21R), reseptor IL-6
(IL-6R), Bcl-6 dan c-Maf [9-12].
Sel TFH mengatur respons sel B yang dapat
menghasilkan antibodi spesifik yang sesuai [13].
Ekskresi IL-21 tingkat tinggi merupakan ciri khas sel
TFH. Defisiensi IL-21 atau IL-21R memengaruhi
evolusi imunitas yang dimediasi sel-B dengan sakelar
isotipe yang terganggu [14, 15]. PD-1 dan ICOS, yang
berada dalam keluarga CD28, adalah dua molekul
pembeda yang memiliki fungsi terkait erat dalam sel
TFH [13, 16-20]. Bcl-6 dan c-Maf dianggap dua
faktor transkripsi penting sel TFH yang memandu
diferensiasi dan mengontrol tanda tangan transkripsi
sel TFH [12, 21]. Selain itu, beberapa penelitian telah
http://www.ijbs.com
mendefinisikan ICOStinggiCXCR5+CD4+dan/atau
PD-1tinggiCXCR5+CD4+Sel T sebagai penanda sirkulasi
sel TFH yang berkorelasi erat dengan ekspresi
sion antibodi pada lupus eritematosus sistemik (SLE)
dan sindrom Sjögren [22].
Berdasarkan temuan ini, kami berhipotesis
bahwa sel TFH yang bersirkulasi dapat memainkan
peran penting dalam mengatur produksi antibodi
trombosit pada pasien dengan ITP. Selain itu, apakah
sel TFH yang bersirkulasi berperan dalam patogenesis
ITP re
221
listrik tidak diketahui. Dengan demikian, kami
mengeksplorasi peran sirkulasi sel TFH pada pasien
dengan ITP. Kami menemukan bahwa persentase
CXCR5 yang beredar+CD4+sel TFH dengan
ICOS tinggi
atau PD-1tinggiekspresi secara signifikan lebih
tinggi pada pasien ITP dibandingkan kontrol sehat
(HC). Selain itu, frekuensi sirkulasi CXCR5 yang lebih
tinggi+CD4+sel TFH dengan ICOStinggiatau
tinggi
PD-1 mantan
bersama dengan tingkat serum IL-21 dan IL-6 yang
lebih tinggi (signifikan) terlihat pada pasien ITP (+)
dibandingkan pada pasien ITP (-) dan HC. Selain itu,
korelasi positif ditemukan antara CXCR5+CD4+sel
TFH dengan ICOStinggiatau PD-1tinggiekspresi dan
kadar sitokin IL-21 serum pada pasien ITP (+).
Meskipun kadar serum IL-21 dan IL-6 lebih tinggi
daripada HC, korelasi yang signifikan tidak
ditemukan antara kadar serum IL-6 dan parameter ini
(data tidak ditampilkan). Selanjutnya, tingkat ekspresi
mRNA IL-21, IL-6, Bcl-6 dan c-Maf secara signifikan
lebih tinggi pada pasien ITP (+) dibandingkan pada
pasien ITP (-) dan HC. Hasil kami menunjukkan
bahwa frekuensi sirkit yang lebih tinggi
Lating sel TFH pada pasien ITP mungkin memainkan
peran penting dalam patogenesis ITP.
Metode
Demografi pasien
Menggunakan kriteria International Working
Group of ITP yang ditetapkan pada tahun 2009 [23],
kami menganalisis 23 pasien yang didiagnosis dengan
ITP kronis di Departemen Hematologi di rumah sakit
kami. Karakteristik klinis dan laboratorium dari 23
pasien ITP dan 12 subjek HC disajikan pada Tabel 1.
Semua pasien ITP telah didiagnosis selama sekitar 24
bulan. Tidak ada pasien ITP yang menjalani splenec
 tomy. Selama sekitar 2 bulan selama penelitian ini,
semua pasien ITP tidak memiliki penyakit lain yang
relevan selama 3 bulan terakhir dan tidak diresepkan
kortikosteroid apapun pada saat dianalisis. Tidak ada
HC (tidak ada anggota keluarganya) yang memiliki
riwayat penyakit hematologi atau autoimun, pernah
mendapat terapi darah, atau memiliki riwayat
transfusi darah. Sebaliknya, semua pasien ITP
memiliki purpura lokal pada kulit dan selaput lendir,
memiliki riwayat transfusi trombosit (minimal), dan
memiliki riwayat pengobatan obat (deksametason,
prednisolon, atau prednison). Pasien dengan penyakit
hematologi lainnya dikeluarkan. Semua sampel
diperoleh sesuai dengan peraturan dan persetujuan
Rumah Sakit Afiliasi Pertama Universitas Zhejiang.
Isolasi sel
Sampel darah lengkap perifer diperoleh dari pasien
HC dan ITP, dan sel mononuklear darah perifer
(PBMC) diisolasi menggunakan sentrifugasi density
gradient dengan Ficoll-Hypaque so lution (CL5020,
CEDARLANE, Belanda).

http://www.ijbs.com
Int. J.Biol. Sains.2015, Jil. 11
222

TABEL 1.Karakteristik klinis dari 23 pasien yang direkrut dengan ITP

Grup M/F Usia (tahun) RBC(×1012/L) WBC(×109/L) PLT (×109/ L) Waktu Riwayat pengobatan ITP obat
transfusi PLT
HC 6/6 44±3,2 5,2±0,6 6,9±1,8 176±30,6 0 0 ITP (+) 6/7 46±11,6 3,5±1,2 2,6±1,6 40±9,8 6±1,1 8±2,3 ITP (-) 5/5 43±14,8 3,3±1,4 3,1±1,3 44±12,2
2±1,4 6±1,4
Catatan: data sesuai dengan rata-rata aritmatika±SD. L/P: laki-laki/perempuan; PLT: trombosit; WBC: sel darah putih; RBC: sel darah merah; HC: kontrol sehat; ITP (+):
ITP dengan trombosit-antibodi-positif; ITP (-): ITP dengan platelet-antibodi-negatif.
saline (PBS) dan diimunisasi dengan APC mouse
anti-human CD4, FITC anti-human ICOS, dan
PerCP-Cy™5.5-mouse anti-human CD279 (PD-1) (BD
Analisis uji imunosorben terkait enzimKami Biosciences, San Diego, CA, USA), serta PE
memisahkan serum dari darah semua pasien dan anti-human CD185 (CXCR5) (BioLegend). Kontrol
kemudian menggunakan sampel tersebut untuk antibodi yang cocok dengan tipe Iso digunakan di
menguji keberadaan sitokin IL-21 dan IL-6 dengan uji semua prosedur; ini termasuk FITC mouse IgG1, κ iso
imunosorben terkait-enzim (ELISA; Bio Legend type control Alexa, dan mouse IgG1 kappa isotype
ELISA kit dengan pelat berlapis sebelumnya; control APC. Semua prosedur pewarnaan dilakukan
BioLegend, San Diego, CA, AS). Setiap langkah sesuai dengan protokol pabrikan, dan sel-sel yang
dilakukan sesuai dengan protokol pabrikan. diwarnai dianalisis menggunakan FACS Calibur flow
Deteksi antibodi trombosit cytometer dan perangkat lunak CELLQUEST (Becton
Dickinson, Sparks, MD, USA). Yang tersisa
Untuk pasien ITP dan HC, antibodi trombosit
sel disimpan dalam reagen TRIzol (Invitrogen,
diuji sesuai dengan protokol Platelet Crossmatch
Carlsbad, CA, USA) untuk reaksi berantai polimerase
(MASPAT kit; K1360; Sanquin, Am sterdam, Belanda).
(PCR) waktu nyata.
Lapisan donor tunggal
trombosit diimobilisasi dengan sentrifugasi ke Ekstraksi RNA dan PCR waktu nyata
permukaan sumur pelat mikro yang dilapisi dengan Untuk mendeteksi level ekspresi mRNA IL-6,
antibodi monoklonal tikus spesifik-let. Se rum pasien IL-21, dan Bcl-6, total RNA dari PBMC diekstraksi
dan larutan kekuatan ion rendah (LISS) dikubasi di menggunakan reagen TRIzol (Invitrogen).
sumur yang sesuai, memungkinkan serum dan tibodi Selanjutnya, cDNA disintesis menggunakan kit
untuk berikatan dengan lapisan mono platelet yang reagen transkripsi terbalik (Toyobo, Osaka, Jepang)
tidak bergerak. Setelah inkubasi, komponen serum sesuai dengan protokol pabrikan. PCR waktu nyata
yang tidak terikat dihilangkan dengan pencucian. adalah per
Trombosit terikat tibodi terdeteksi dengan dibentuk rangkap tiga menggunakan Takara SYBR
penambahan tikus Supermix (Takara, Dalian, China) dan sistem analisis
IgG anti-manusia monoklonal dan eritrosit yang peka ABI 7500 (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA).
terhadap IgG manusia. Reaksi positif ditandai dengan Kondisi amplifikasi adalah sebagai berikut: 5 menit
melekatnya sel darah merah indikator MASPAT di pada 95°C untuk denaturasi, dan kemudian 40 siklus
seluruh permukaan sumur, sedangkan negatif pada 95°C selama 10 detik dan 60°C selama 40 detik.
reaksi positif menghasilkan pelet diskrit sel darah Nilai fluoresensi adalah
merah indikator MASPAT di tengah sumur. dikumpulkan pada 60°C. Urutan primer adalah
Analisis sitometri aliran sebagai berikut [24, 25]:
IL-21: indra, 5′-CACAGACTAACATGCCCTT
PBMC manusia dicuci dengan phos phate-buffered
CAT-3′, antisense, 5′-GAATCTTCACTTCCGTGTG
 TTCT-3′;
IL-6: indra, 5′-AGACAGCCACTCACCTCTTC
AG-3′, antisense, 5′-TTCTGCCAGTGCCTCTTTG
CTG-3′;
Bcl-6: indra, 5′-CATGCAGAGATGTGCCTCCA
CA-3′, antisense, 5′-TCAGAGAAGCGGCAGTCA
CACT-3′;
c-Maf: akal, 5′-AGCGGCTTCCGAGAAAAC 3′,
antisense, 5′-ACTTGCGAGTGGGCTCAG-3′. Setiap
gen distandarisasi menggunakan ekspresi
gliseraldehida 3-fosfat dehidrogenase (GAPDH)
dengan primer sebagai berikut:
Masuk akal,
5′-GTCTCCTCTGACTTCAACAGCG-3′; antisense,
Int. J.Biol. Sains.2015, Jil. 11
koefisien tion. Data dianalisis menggunakan pada pasien ITP.
perangkat lunak GraphPad Prism 5 (GraphPad
Software, Inc, San Diego, CA, USA).
Hasil
Data klinis pasien dengan ITP
ITP adalah penyakit yang dimediasi kekebalan
yang didapat yang ditandai dengan penurunan
jumlah trombosit perifer, dan tergantung pada derajat
trombositopenia, peningkatan risiko perdarahan [26].
Dalam penelitian ini, 23 pasien ITP direkrut dan
ditentukan berdasarkan gejala klinis dan jumlah
trombosit. Kami menemukan bahwa sel darah putih
perifer (WBC), sel darah merah (RBC), dan jumlah
trombosit pasien ITP secara signifikan lebih rendah
daripada HC, dan setiap pasien ITP memiliki purpura masing-masing (Gambar 1 J-L). Namun, persentase
lokal pada kulit dan selaput lendir. Selain itu, 13 dari yang beredar
23 pasien ITP adalah ITP (+), dan pasien tersebut
memiliki transfusi trombosit yang secara signifikan
lebih banyak daripada sepuluh pasien ITP
(-)(p<0,0001), meskipun tidak ada perbedaan jumlah
trombosit yang signifikan antara pasien ITP (+) dan
ITP (-) (p=0,5543). Selain itu, pasien ITP (+) memiliki
lebih banyak pengalaman pengobatan dengan
obat-obatan (seperti deksametason dan prednison)
daripada pasien ITP (-) (p=0,0118) (Tabel 1).
Peningkatan frekuensi sirkulasi
CXCR5+CD4+sel TFH pada pasien ITPStudi
terbaru menunjukkan bahwa CXCR5+CD4+Sel TFH
memainkan peran penting dalam mengatur respons
antibodi, dan mengedarkan CXCR5+CD4+sel TFH
dengan ICOStinggiekspresi, PD-1tinggiekspresi, atau
keduanya berkorelasi erat dengan ekspresi antibodi
pada banyak penyakit [20, 24, 27]. Beberapa penelitian
menyiratkan bahwa penghancuran trombosit yang
dimediasi oleh antibodi trombosit memainkan peran
penting dalam mekanisme patogenetik ITP [28].
5′-ACCACCCTGTTGCTGTAGCCAA-3′. Kami
menganalisis data menggunakan perangkat lunak
ABI 7500, v2.0.5 (Applied Biosystems).
Analisis statistik
Semua percobaan dilakukan dalam rangkap tiga
kecuali untuk flow cytometry. Analisis varians satu
arah digunakan untuk menentukan apakah ada
variasi keseluruhan dengan signifikansi statistik di
antara kelompok yang berbeda. Siswa tidak
berpasangan atau berpasanganTtes dipilih dengan
tepat. Korelasi antar variabel ditentukan dengan
menggunakan korelasi Spearman
http://www.ijbs.com
Namun, sedikit yang diketahui tentang peran sel TFH
Untuk mengeksplorasi peran potensial sel TFH
yang bersirkulasi pada pasien dengan ITP, frekuensi
CXCR5 yang bersirkulasi+CD4+Sel TFH dan
persentase ICOStinggi CXCR5+CD4+dan
tinggi + +
PD-1 CXCR5 CD4 Sel TFH dianalisis
menggunakan flow cytometry (Gambar 1). Kami
menyelidiki menggunakan CD4+Sel T dari PBMC
manusia dan menganalisis CXCR5+Sel T untuk
membatasi sel TFH dalam darah tepi dari pasien ITP
(+) atau pasien ITP (-), dan HC (Gambar 1A-I).
Persentase peredaran CXCR5+CD4+Sel TFH, ICOStinggi
CXCR5+CD4+sel TFH, dan PD-1tinggiCXCR5+CD4+ Sel
TFH secara signifikan lebih tinggi pada pasien ITP (+)
dibandingkan dengan pasien ITP (-) dan HC,
CXCR5+CD4+Sel TFH, ICOStinggiCXCR5+CD4+TFH
223
sel, dan PD-1tinggiCXCR5+CD4+Sel TFH tidak berbeda
bermakna antara pasien HC dan ITP (-) (Gambar 1
J-L). Selain itu, untuk menganalisis lebih lanjut
apakah sel TFH yang meningkat juga memiliki
ekspresi molekul ICOS atau PD-1 yang tinggi,
penelitian kami mengungkapkan bahwa korelasi
positif yang kuat diamati antara CXCR5+CD4+Sel
TFH, ICOStinggiCXCR5+CD4+sel TFH, dan
PD-1tinggiCXCR5+ CD4+Sel TFH pada pasien ITP (+)
(Gambar 2 C, F, I), tetapi tidak ditemukan perbedaan
besar pada pasien HC atau ITP (-) (Gambar 2 A, D, E,
G, H). Hanya ada korelasi positif dan sederhana
antara CXCR5+CD4+sel TFH dan
ICOStinggiCXCR5+CD4+Sel TFH pada pasien ITP (-)
(Gambar 2B).
Kadar sitokin serum berkorelasi dengan
sirkulasi sel TFH pada pasien ITP
 Studi terbaru menunjukkan bahwa sitokin IL-6
dan IL-21 memainkan peran penting dalam
diferensiasi dan fungsi sel TFH dan sebagai respons
terhadap tibodi [29, 30].
Tingkat serum IL-6 dan IL-21 secara signifikan
lebih tinggi pada pasien ITP daripada HC, terlepas
dari status antibodi trombosit mereka, meskipun
tingkat sitokin ini paling tinggi pada pasien ITP (+)
(Gambar 3A, B). Beberapa penelitian telah
menunjukkan bahwa tingkat IL-21 dan IL-6 secara
signifikan terkait dengan frekuensi sel TFH yang
bersirkulasi [29]. Dalam penelitian ini, kadar IL-21
serum berkorelasi kuat dan positif dengan persentase
usia CXCR5+CD4+Sel TFH, PD-1tinggiCXCR5+CD4+
TFH dan ICOStinggiCXCR5+CD4+Sel TFH
masing-masing pada pasien ITP (+) (Gambar 3 E, H,
K). Namun, tidak ada korelasi antara kadar IL-21 dan
parameter ini dalam HC (Gambar 3 C, F, I). Selain itu,
korelasi yang moderat dan positif ditemukan antara
Int. J.Biol. Sains.2015, Jil. 11
ITP (-), tetapi tidak ditemukan perbedaan antara
kelompok ITP (-) dan HC (Gambar 4.A). Ekspresi
mRNA IL-6, Bcl-6 dan c-Maf semuanya lebih tinggi
pada pasien ITP (+) dan ITP (-) dibandingkan pada
HC, dengan
frekuensi ICOStinggiCXCR5+CD4+TFH pada pasien ITP
(-) (Gambar 3 J), meskipun tidak ada korelasi yang
signifikan antara kadar serum IL-21 dan
CXCR5+CD4+Sel TFH atau PD-1tinggiCXCR5+CD4+TFH
(Gambar 3 D, G). Sayangnya, kami tidak menemukan
hubungan antara kadar serum IL-6 dan parameter ini
pada pasien HC dan ITP (+) atau ITP (-),
masing-masing (data tidak ditunjukkan).
Peningkatan ekspresi mRNA IL-21, IL-6,
Bcl-6 dan c-Maf pada pasien ITP
Sitokin IL-21 dan IL-6, serta faktor transkripsi Bcl-6
dan c-Maf, memainkan peran penting dalam generasi,
diferensiasi dan fungsi sel TFH [12, 29, 31]. Kami
menilai ekspresi mRNA dari mRNA Bcl-6, c-Maf,
IL-21, dan IL-6 pada pasien HC (n=12) dan ITP (-) (n =
10) dan ITP (+) ( n = 13). Ekspresi mRNA IL-21 lebih
tinggi pada pasien antibodi-positif dibandingkan
pada HC dan
http://www.ijbs.com
224
perbedaan yang signifikan antara kelompok ITP (+)
dan ITP (-), masing-masing (Gambar 4.B,C,D).
Gambar 1.Peningkatan persentase sirkulasi CXCR+CD4+Sel TFH dalam darah tepi pasien ITP. Sel mononuklear darah tepi (PBMC) dari 23 pasien dengan
ITP dan 12 kontrol kesehatan (HC) diisolasi dan diwarnai dengan antibodi berlabel, dianalisis dengan flow cytometry seperti yang dijelaskan pada bagian
Bahan dan Metode. Sel-sel awalnya terjaga keamanannya pada limfosit (kiri atas) dan kemudian pada CD4+Sel T (kanan atas). (A, D, G): CXCR5+CD4+sel
TFH dalam total CD4+Sel T HC, ITP (+) dan ITP (-); (B, E, H): PD-1tinggiCXCR5+CD4+sel TFH dari HC, ITP (+) dan ITP (-); (C, F, I):
ICOStinggiCXCR5+CD4+sel TFH dari HC, ITP (+) dan ITP (-); (J–L): Analisis persentase CXCR5+sel pada CD4+Sel T, ICOStinggidan PD-1tinggisel pada
CXCR5+CD4+Sel TFH dari pasien HC, ITP (+) dan ITP (-). Setiap titik data mewakili subjek individual. Garis horizontal menunjukkan artinya. *,p<0,05;
**,p<0,01; ***,p<0,001; ns, tidak ada perbedaan yang signifikan.

http://www.ijbs.com
Int. J.Biol. Sains.2015, Jil. 11
225
Gambar 2.Korelasi sel TFH yang bersirkulasi dengan ICOStinggidan PD-1tinggiekspresi pada pasien ITP. (A, D, G): Hubungan antara persentase
CXCR5+CD4+TFH, ICOStinggiCXCR5+CD4+TFH, dan PD-1tinggiCXCR5+CD4+sel TFH di HC; (B, E, H): Hubungan antara persentase CXCR5+CD4+TFH,
ICOStinggiCXCR5+CD4+TFH, dan PD-1tinggiCXCR5+CD4+sel TFH di ITP (-); (C, F, I): Hubungan antara persentase CXCR5+CD4+TFH,
ICOStinggiCXCR5+CD4+TFH, dan PD-1tinggiCXCR5+CD4+sel TFH pada pasien ITP (+).
Studi terbaru menyiratkan bahwa im humoral
respon mune memainkan peran penting dalam
Diskusi pathogenesis ITP yang melibatkan interaksi kompleks
antara sel penyaji antigen (APC), sel T helper (Th), sel
ITP kronis adalah gangguan yang dimediasi
T regulator (Treg) dan sel B [34, 35]. Selain itu,
kekebalan yang ditandai dengan penurunan jumlah
semakin banyak bukti yang menunjukkan bahwa sel
trombosit sementara atau terus-menerus yang
T CD8+ cy totoxic berkontribusi terhadap
disebabkan oleh penghancuran trombosit, dan
penghancuran platelet [36]. Diketahui bahwa sel TFH
penghancuran trombosit yang dimediasi antibodi
memainkan peran penting dalam penyakit autoimun
trombosit adalah faktor penyebab utama mekanisme
dan infeksi virus [13, 37-39]. Namun, peran sel TFH
patogenetik ITP [1, 32 , 33]. Dalam penelitian ini,
masih belum jelas dalam perkembangan dan
gambaran klinis dan bukti laboratorium seperti
perkembangan ITP. Ekspresi CXCR5 diperlukan
derajat trombositopenia atau petechiae pada kulit,
untuk migrasi sel TFH ke area folikel sel B di pusat
jumlah trombosit dan ekspresi antibodi trombosit
germinal (GC) seperti limpa, dan untuk pembentukan
sesuai dengan laporan sebelumnya [26, 32, 33]. Kami
GC yang terganggu tanpa adanya CXCR5 [9-11, 40].
menemukan bahwa pasien ITP (+) memiliki transfusi
Menariknya, peningkatan regulasi CXCR5 bermanfaat
trombosit yang jauh lebih banyak daripada pasien ITP
untuk meningkatkan kemungkinan kontak spesifik
(-), yang menyiratkan bahwa transfusi trombosit
antigen antara sel TFH dan sel B dalam pengeringan
eksogen mungkin berguna untuk menghasilkan
jaringan limfoid [13]. Hasil kami menunjukkan
antibodi trombosit yang mempercepat penghancuran
persentase yang dievaluasi dari sirkulasi
trombosit yang menurunkan jumlah trombosit. Oleh
CXCR5+CD4+Sel TFH dicirikan dengan ICOStinggidan
karena itu, perkembangan pasien ITP, terutama pasien
ITP (+), akan dilemahkan dengan berkurangnya PD-1tinggidalam darah tepi dari pasien ITP dan HC
frekuensi transfusi trombosit. Selain itu, frekuensi sesuai dengan definisi sel TFH sirkulasi sebelumnya
terapi obat yang lebih tinggi mungkin penting untuk [22], dan dengan laporan lain sebelumnya yang
mengurangi keparahan penyakit pasien ITP (+) menunjukkan peningkatan frekuensi sel TFH dengan
dibandingkan dengan pasien ITP (-). ICOStinggiDan
 http://www.ijbs.com
Int. J.Biol. Sains.2015, Jil. 11
226

PD-1tinggipada darah tepi dan limpa pasien ITP pasien [40].

yang berkorelasi dengan perluasan GC di ITP

Gambar 3.Korelasi kadar sitokin dan sel TFH yang bersirkulasi pada pasien HC, dan ITP (-) dan ITP (+). (A): Tingkat serum IL-21 pada pasien HC, ITP
(+) dan ITP (-); (B) Tingkat serum IL-6 pada pasien HC, ITP (-) dan ITP (+); (C, D, E): Hubungan kadar serum IL-21 dan persentase CXCR5+CD4+Sel TFH
masing-masing pada pasien HC, ITP (-) dan ITP (+); (F, G, H): Hubungan kadar serum IL-21 dan persentase PD-1tinggiCXCR5+CD4+Sel TFH masing-masing
pada pasien HC, ITP (-) dan ITP (+); (I, J, K): Hubungan kadar serum IL-21 dan persentase ICOStinggiCXCR5+CD4+sel TFH di HC,
pasien ITP (-) dan ITP (+). Selain itu, tidak ada korelasi yang signifikan antara kadar IL-6 dan CXCR5+CD4+Sel TFH masing-masing pada pasien HC, ITP (-)
dan ITP (+), data tidak ditampilkan. Data yang ditampilkan adalah rata-rata ± SD. Garis horizontal menunjukkan median. *,p<0,05; **,p<0,01; ***,p<0,001.
 http://www.ijbs.com
Int. J.Biol. Sains.2015, Jil. 11
227

Gambar 4.Ekspresi mRNA IL-21, IL-6, Bcl-6 dan c-Maf pada PBMC dari pasien HC, ITP (-) dan ITP (+). ( A ): Tingkat ekspresi relatif mRNA IL-21 dalam
PBMC dari pasien HC, ITP (-) dan ITP (+); ( B ) Tingkat ekspresi relatif mRNA IL-6 dalam PBMC dari pasien HC, ITP (-) dan ITP (+); ( C ) Tingkat
ekspresi relatif mRNA Bcl-6 dalam PBMC dari pasien HC, ITP (-) dan ITP (+); ( D ) Tingkat ekspresi relatif mRNA c-Maf dalam PBMC dari pasien HC, ITP
(-) dan ITP (+). Setiap titik data mewakili subjek individu, dan data dari setiap sampel adalah nilai rata-rata dari tiga percobaan independen dengan hasil
yang serupa. Garis horizontal menunjukkan artinya. *,p<0,05; **,p<0,01; ***,p<0,001; ns, tidak ada perbedaan yang signifikan.
dan secara khusus mempromosikan pro-antibodi.
pengurangan [13, 21]. Molekul PD-1 dianggap
Molekul ICOS dan PD-1, milik anggota keluarga mendukung regulasi negatif sel T yang teraktivasi
CD28, dianggap diperlukan untuk fungsi sel TFH secara kronis, menghambat proliferasi berlebihan sel
[16-20]. Manusia dan tikus yang kekurangan ICOS TFH di GC [8, 19, 20, 27]. Namun, pensinyalan PD-1
berhubungan dengan penurunan parah sel dapat meningkatkan jumlah sel TFH, menurunkan
CXCR5+CD4+TFH dari GC dan darah tepi [17]. Tikus fungsi TFH dengan mengurangi 'sitokin terkait
yang kekurangan ICOS/ICOS-L sangat mengurangi seperti IL-21, memengaruhi pembentukan GC dan
produksi antibodi dan pergantian isotipe, dan kuantitas serta kualitas sel plasma berumur panjang
pembentukan GC yang sangat terganggu [16-18]. tanpa adanya PD. -1 [20]. Selain itu, studi terbaru
Sebaliknya, ekspresi ICOS yang berlebihan pada tikus berimplikasi pada peningkatan frekuensi sirkulasi
menyebabkan sel CXCR5+CD4+TFH yang diproduksi
ICOStinggiCXCR5+CD4+dan/atau
berlebihan, dan menginduksi reaksi GC yang
PD-1tinggiCXCR5+CD4+Sel TFH pada banyak penyakit
berlebihan dengan terobosan penyakit autoim mune,
autoimun seperti SLE, autoim mune thyroid disease
(AITD), rheumatoid arthritis
(RA), dan sindrom Sjögren terkait erat dengan
produksi auto-antibodi, sel TFH sebagai sitokin
terkait seperti IL-21, yang memperburuk
perkembangan penyakit tersebut [22, 24, 27, 29]. Kami
juga menemukan bahwa frekuensi sirkulasi
CXCR5+CD4+sel TFH dengan ICOStinggidan PD-1tinggi
tertinggi pada pasien ITP (+), meskipun tidak ada
perbedaan parameter ini antara pasien ITP (-) dan
HC. Selain itu, korelasi yang sangat positif diamati di
antara persentase sirkulasi CXCR5+CD4+Sel TFH,
ICOStinggiCXCR5+CD4+sel TFH, dan
PD-1 tinggi + +
CXCR5 CD4 sel TFH pada pasien ITP (+).
Int. J.Biol. Sains.2015, Jil. 11
mengurangi keparahan penyakit pada beberapa
penyakit autoimun [41, 42]. Frekuensi terapi obat
yang lebih tinggi pada pasien ITP (+) mungkin
bertanggung jawab untuk menghambat peningkatan
proporsi sel TFH pada pasien ITP (+) dibandingkan
dengan pasien ITP (-).
IL-21 adalah sitokin penting untuk pembentukan
pusat germinal, proliferasi dan fungsi sel TFH, sel B
yang mensekresi Ig, dan respons antibodi [37]. Selain
itu, IL-6 menginduksi sekresi IL-21 dan pembentukan
sel TFH, dan tikus yang kekurangan IL-6 dan IL-21
tidak dapat menghasilkan respon imun yang
bergantung pada sel TFH [29]. Selain itu, sel TFH
teraktivasi dengan ekspresi ICOS dan/atau PD-1
dapat menghasilkan sitokin IL-21 yang melimpah
dengan sendirinya, dan kadar IL-21 dan IL-6 secara
signifikan terkait dengan frekuensi sirkulasi sel TFH
dengan ICOS dan / atau ekspresi PD-1 pada beberapa
penyakit autoimun [31, 37, 43]. Dalam studi saat ini,
kami menemukan perbedaan yang signifikan tentang
kadar serum IL-21 dan IL-6 antara pasien HC, ITP (-)
dan ITP (+), yang menunjukkan bahwa IL-21 dan IL-6
mungkin memainkan peran penting dalam ITP.
pasien. Analisis korelasi selanjutnya antara kadar
sitokin serum dan frekuensi sel TFH selanjutnya
menunjukkan bahwa peningkatan kadar IL-21
mungkin memainkan peran utama dalam
pembentukan dan diferensiasi sel TFH dengan
ICOS.tinggimolekul dibandingkan dengan molekul
PD-1, dan produksi trombosit dan tibodi pada pasien
ITP, dan IL-6 dapat memainkan peran pembantu
dalam patogenesis pasien ITP, yang sesuai dengan
laporan sebelumnya [38]. Selain itu, perbedaan ini
mungkin terkait dengan jumlah pasien ITP yang kami
evaluasi, serta antibodi tidak teratur lainnya, tetapi
bukan antibodi trombosit. Faktor transkripsi Bcl-6 dan
c-Maf yang diekspresikan secara selektif dalam sel
TFH penting untuk pembentukan dan diferensiasi sel
TFH, dan ekspresi Bcl-6 diatur oleh IL-6 dan IL-21,
Hasil ini menyiratkan bahwa ekspresi ICOS dan PD-1
yang lebih tinggi pada sel TFH pada pasien ITP,
terutama pasien ITP (+), mungkin membantu untuk
meningkatkan kuantitas dan kualitas sel TFH yang
mempromosikan induksi auto-antibodi trombosit
pada gangguan tersebut. Pasien ITP dibandingkan
dengan HC, yang sesuai dengan pra
laporan sebelumnya [22, 24, 40]. Selain itu, transfusi
trombosit eksogen merupakan penjelasan potensial
atau parsial dari peningkatan sel TFH dengan
ekspresi ICOS dan PD-1 yang lebih tinggi pada pasien
ITP (+). Selain itu, obat-obatan (seperti deksametason,
atau prednison) dapat secara efektif mengurangi
frekuensi sel TFH dan
http://www.ijbs.com
c-Maf juga menginduksi ekspresi CXCR5 dan sekresi
IL-21 [12, 15, 29]. Selain itu, Bcl-6 dan c-Maf bekerja
sama untuk menginduksi ekspresi CXCR5, PD-1, dan
ICOS, dan menginstruksikan diferensiasi sel TFH [12].
Analisis PCR menyiratkan bahwa peningkatan
ekspresi mRNA IL-21, IL-6, dan Bcl-6 dan c-Maf pada
pasien dengan ITP adalah kemungkinan penjelasan
untuk peningkatan jumlah CXCR5 yang
bersirkulasi.+CD4+sel TFH dengan ICOStinggidan
PD-1tinggipada pasien ITP ini, terutama pada pasien
ITP (+), yang konsisten dengan penelitian sebelumnya
[12, 24, 40].
Namun, dalam penelitian ini, kami tidak
mengamati adanya korelasi positif atau negatif antara
kadar sitokin dan persentase sel TFH, atau persentase
sel TFH dan ekspresi molekul terkaitnya dalam HC,
yang menunjukkan keseimbangan lingkungan
internal.
tergantung pada keseimbangan berbagai sel dan
sitokin seperti sel T, sel B dan IL-2 1 in vivo
berkontribusi terhadap
228
kesehatan tubuh. Setelah proporsi sel dan sitokin
yang harmonis dihancurkan secara parah oleh faktor
internal atau eksternal seperti patogen dan
autoantigen, penyakit akan muncul seperti ITP.
Kesimpulan
Hasil kami menunjukkan bahwa frekuensi
sirkulasi CXCR5+CD4+sel TFH dengan ICOStinggidan
PD-1tinggi, ekspresi molekul terkait sel TFH seperti
IL-21 dan Bcl-6 meningkat secara signifikan pada
pasien ITP, terutama pada pasien ITP (+)
dibandingkan dengan HC, yang menyiratkan bahwa
trombosit endogen dan/atau lebih banyak transfusi
trombosit eksogen
dikaitkan dengan generasi dan diferensiasi sel TFH
yang mempromosikan produksi antibodi trombosit.
Frekuensi tinggi pengobatan obat (seperti dexame
 thasone, atau prednison) dapat berkontribusi untuk
secara efektif mengurangi frekuensi sel TFH dan
mengurangi keparahan penyakit pada pasien ITP.
Oleh karena itu, sel TFH mungkin memainkan peran
penting dalam patogenesis ITP, sel TFH dan molekul
penting terkait akan menjadi target terapi baru untuk
pasien ITP di masa mendatang. Sejumlah besar pasien
ITP, dan peran sel TFH dalam mengatur respons sel B
dan produksi antibodi dalam patogenesis ITP akan
diselidiki dalam penelitian selanjutnya.
Singkatan
ITP: Purpura trombositopenik idiopatik; ITP (+): Kontribusi penulis
ITP dengan trombosit-antibodi-positif; ITP (-):
ITP dengan platelet-antibodi-negatif; dokter
umum,
glikoprotein; TFH, T pembantu folikel; IL, interleukin;
IG, imunoglobulin; LISS, larutan berkekuatan ionik
rendah; PBS, garam buffer fosfat; CXCR5, reseptor
kemo kine 5; ICOS, kostimulator yang dapat
diinduksi; PD-1, kematian terprogram-1; IL-21R,
reseptor IL-21; IL-6R, reseptor IL-6; leukosit, sel darah
putih; sel darah merah, sel darah merah; PCR, reaksi
berantai polimerase.
Terima kasih
Studi ini didukung oleh Yayasan Ilmu
Pengetahuan Alam Provinsi Zhejiang, Cina
(LY13H080001), Proyek Teknologi Ilmiah Komisi
Kesehatan dan Keluarga Berencana Provinsi Zhejiang
(2012KYA083), dan Proyek Penelitian Ilmiah
Pendidikan Provinsi Zhejiang, Cina (Y201224054) .
Jue Xie, Dawei Cui, Jie Jin, dan Hongyan Tong
berpartisipasi dalam desain penelitian. Yan Liu,
Guoxiang Ruan, Lei Wang, Yun Lu, dan Huiming
Yuan membentuk karya eksperimental. Jue Xie,
Dawei Cui, Jie Jin, dan Yan Liu melakukan analisis
statistik dan membantu menyusun naskah.Guoxiang
Ruan,

Int. J.Biol. Sains.2015, Jil. 11
Hongyan Tong, dan Yun Lu memberikan dukungan
administratif dan mendanai eksperimen. Semua
penulis membaca dan menyetujui naskah akhir.
Minat Bersaing
Para penulis telah menyatakan bahwa tidak ada
kepentingan yang bersaing.
Referensi
1. Trombositopenia imun terkait Kuwana M. Helicobacter pylori: gambaran klinis
dan mekanisme patogenik. Dunia J Gastroenterol. 2014; 20: 714-23.
2. Antigen Metcalfe P. Platelet dan deteksi antibodi. Vox Sang. 2004; 87 Suppl1: 82-6.
3. Sun L, Yu Z, Bu Y, Su J, Wang C, Cao L, dkk [Studi klinis terhadap 51 pasien
dengan purpura trombositopenik trombotik]. Zhonghua Xue Ye Xue Za Zhi.
2014; 35: 147- 51.
4. [Tidak ada penulis terdaftar]. Deteksi antibodi platelet-reaktif pada pasien yang
refrakter terhadap transfusi platelet, dan pemilihan donor yang kompatibel.
Vox Sang. 2003; 84: 73-88.
5. Cines DB, Blanchette VS. Purpura trombositopenik imun. N Engl J Med. 2002;
346: 995-1008.
6. Tripathi AK, Mishra S, Kumar A, Yadav D, Shukla A, Yadav Y. Morfologi cyte
Megakaryo dan dampaknya dalam memprediksi respon steroid pada
trombositopenia imun. Trombosit. 2014; 25: 526-31.
7. Stasi R. Patofisiologi dan pilihan terapi pada trombositopenia imun primer.
Transfusi Darah. 2011; 9: 262-73.
8. Xiang D, Wang D, He Y, Xie J, Zhong Z, Li Z, dkk. Caffeic acid phenethyl ester
menginduksi penghentian pertumbuhan dan apoptosis sel kanker usus besar
melalui pensinyalan faktor be ta-catenin / T-cell. Obat Antikanker. 2006; 17: 753-62.
9. Yang X, Yang J, Chu Y, Xue Y, Xuan D, Zheng S, dkk. Sel pembantu folikel T dan
dinamika sel B pengatur pada lupus eritematosus sistemik. PloS satu. 2014; 9:
e88441.
10. Arnold CN, Campbell DJ, Lipp M, Jagal EC. Respons pusat germinal terganggu
dengan tidak adanya CXCR5 yang diekspresikan sel T. Eur J Immunol. 2007;
37: 100-9.
11. Haynes NM, Allen CD, Lesley R, Ansel KM, Killeen N, Cyster JG. Peran CXCR5
dan CCR7 dalam posisi sel Th folikel dan penampilan gen kematian sel
terprogram-1 subpopulasi terkait pusat germinal tinggi. J Imunol. 2007; 179:
5099-108.
12. Kroenke MA, Eto D, Locci M, Cho M, Davidson T, Haddad EK, dkk. Bcl6 dan
Maf bekerja sama untuk menginstruksikan diferensiasi sel CD4 T helper folikel
manusia. J Imunol. 2012; 188: 3734-44.
13. Fazilleau N, Mark L, McHeyzer-Williams LJ, McHeyzer-Williams MG. Sel T
pembantu folikel: garis keturunan dan lokasi. Kekebalan. 2009; 30: 324-35. 14. Ozaki
K, Spolski R, Feng CG, Qi CF, Cheng J, Sher A, dkk. Peran penting IL-21 dalam
http://www.ijbs.com
mengatur produksi imunoglobulin. Sains. 2002; 298: 1630-4. 15.Spolski R, Leonard
WJ. Sel pembantu folikel IL-21 dan T. Int imunol. 2010; 22: 7-12.
16. Hutloff A, Dittrich AM, Beier KC, Eljaschewitsch B, Kraft R, Anagnostopoulos I,
dkk. ICOS adalah co-stimulator sel-T yang dapat diinduksi secara struktural
dan fungsional terkait dengan CD28. Alam. 1999; 397: 263-6.
17. Bossaller L, Burger J, Draeger R, Grimbacher B, Knoth R, Plebani A, dkk.
Defisiensi ICOS dikaitkan dengan penurunan parah sel Th pusat germinal
CXCR5+CD4. J Imunol. 2006; 177: 4927-32.
[ PubMed ] 18. Tafuri A, Shahinian A, Bladt F, Yoshinaga SK, Jordana M, Wakeham
A, dkk. ICOS sangat penting untuk respons sel T-helper yang efektif. Alam. 2001;
409: 105–9 [ Artikel gratis PMC ] [ PubMed ] 19. Ishida Y, Agata Y, Shibahara K,
Honjo T. Ekspresi PD-1 yang diinduksi, anggota baru dari superfamili gen
imunoglobulin, setelah kematian sel terprogram. EMBO J. 1992; Wahyu 11: 3887–9
20. Baik-Jacobson KL, Szumilas CG, Chen L, Sharpe AH, Tomayko MM, Shlomchik
MJ. PD-1 mengatur kelangsungan hidup sel B pusat germinal dan pembentukan
dan afinitas sel plasma berumur panjang. Nat imunol. 2010; 11: 535-42.
21. Yu D, Rao S, Tsai LM, Lee SK, He Y, Sutcliffe EL, dkk. Penekan transkripsional
Bcl-6 mengarahkan komitmen garis keturunan sel pembantu folikel T.
Kekebalan. 2009; 31: 457-68.
22. Simpson N, Gatenby PA, Wilson A, Malik S, Fulcher DA, Tangye SG, dkk.
Perluasan sel T yang bersirkulasi menyerupai sel T helper folikel adalah
fenotipe tetap yang mengidentifikasi subset dari lupus eritematosus sistemik
yang parah. Rheum Arthritis. 2010; 62: 234-44.
23. Rodeghiero F, Stasi R, Gernsheimer T, Michel M, Provan D, Arnold DM, dkk.
Standarisasi terminologi, definisi dan kriteria hasil pada purpura
trombositopenik imun orang dewasa dan anak-anak: laporan dari kelompok
kerja internasional. Darah. 2009; 113: 2386-93.
24. Zhu C, Ma J, Liu Y, Tong J, Tian J, Chen J, dkk. Peningkatan frekuensi sel T
helper folikel pada pasien dengan penyakit tiroid autoimun. J Clin Endo
crinol Metab. 2012; 97: 943-50.
25. Li T, Xiao J, Wu Z, Qiu G. Ekspresi c-maf yang berlebihan oleh kondrosit pada
oste oarthritis. J Int Med Res. 2009; 37: 129-35.
229
[ PubMed ] 26. Stasi R, Newland AC. ITP: perspektif sejarah. Br J Hematol. 2011;
153: 437–50.
27. Xu H, Wang X, Lackner AA, Veazey RS. PD-1 (TINGGI) Subset Sel Pembantu T
CD4 Folikuler yang Berada di Pusat Germinal Kelenjar Getah Bening
Berkorelasi dengan Pematangan Sel B dan Produksi IgG pada Kera Rhesus.
Imunol depan. 2014; 5: 85.
28. Cooper N, Stasi R, Cunningham-Rundles S, Cesarman E, McFarland JG, Bussel
JB. Antibodi terkait trombosit, imunitas seluler, dan genotipe FCGR3a
memengaruhi respons terhadap rituximab pada trombositopenia imun. Br J
Hae matol. 2012; 158: 539-47.
[ PubMed ] 29. Eto D, Lao C, DiToro D, Barnett B, Escobar TC, Kageyama R, dkk.
IL-21 dan IL-6 sangat penting untuk berbagai aspek kekebalan sel B dan secara
berlebihan menginduksi diferensiasi sel T CD4 (Tfh) penolong folikel yang
optimal. PloS satu. 2011; 6: e17739.
30. Park HJ, Kim DH, Lim SH, Kim WJ, Youn J, Choi YS, dkk. Wawasan tentang
peran sel T pembantu folikel dalam autoimunitas. Jaringan kekebalan 2014; 14: 21-9.
 31. Nakayamada S, Poholek AC, Lu KT, Takahashi H, Kato M, Iwata S, dkk. Jenis
I IFN menginduksi pengikatan STAT1 ke Bcl6: peran yang berbeda dari faktor
transkripsi keluarga STAT dalam program genetik sel pembantu folikel T. J
Imunol. 2014; 192: 2156-66.
32. Andersson PO, Wadenvik H. Purpura trombositopenik idiopatik kronis (ITP):
mekanisme molekuler dan implikasi untuk terapi. Pakar Rev Mol Med. 2004;
6: 1-17.
33. Najaoui A, Bakchoul T, Stoy J, Bein G, Rummel MJ, Santoso S, dkk. Aktivasi
komplemen yang dimediasi tibodi autoan pada trombosit adalah temuan
umum pada pasien dengan purpura trombositopenik imun (ITP). Eur J
Hematol. 2012; 88: 167-74.
34. Penipisan sel Godeau B. B pada trombositopenia imun. Semin Hematol. 2013; 50
Suppl 1: S75-82.
35. Nishimoto T, Satoh T, Takeuchi T, Ikeda Y, Kuwana M. Peran penting sel T
regulator CD4(+)CD25(+) dalam mencegah trombositopenia yang dimediasi
tubuh autoanti murine. Exp Hematol. 2012; 40: 279-89.
36. Nishimoto T, Kuwana M. CD4+CD25+Foxp3+ sel T pengatur dalam jalur
fisiologi trombositopenia imun. Semin Hematol. 2013; 50 Suppl 1: S43-9.
37. Terrier B, Costedoat-Chalumeau N, Garrido M, Geri G, Rosenzwajg M, Musset
L, dkk. Interleukin 21 berkorelasi dengan perubahan subset sel T dan sel B
pada lupus eritematosus sistemik. J Rheumatol. 2012; 39: 1819-28.
38. Wang J, Shan Y, Jiang Z, Feng J, Li C, Ma L, dkk. Frekuensi tinggi sel B
teraktivasi dan sel pembantu folikel T berkorelasi dengan aktivitas penyakit
pada pasien dengan artritis reumatoid onset baru. Klinik Exp Imunol. 2013;
174: 212-20.
39. Wu J, Cui D, Yang X, Lou J, Lin J, Ye X, dkk. Peningkatan frekuensi sirkulasi sel
T helper folikel pada anak dengan penyakit tangan, kaki, dan mulut yang
disebabkan oleh infeksi enterovirus 71. J Immunol Res. 2014; 2014: 651872.
40. Audia S, Rossato M, Santegoets K, Spijkers S, Wichers C, Bekker C, dkk.
Ekspansi TFH limpa berpartisipasi dalam diferensiasi sel-B dan produksi
antiplate let-antibodi selama trombositopenia imun. Darah. 2014; 124: 2858-66.
41. Zhang L, Wang Y, Shi X, Zou H, Jiang Y. Frekuensi sel pembantu folikel
CD4(+)CXCR5(+) T yang lebih tinggi pada pasien dengan nefropati IgA yang
baru didiagnosis. Surat imunologi. 2014; 158: 101-8.
42. Feng X, Wang D, Chen J, Lu L, Hua B, Li X, dkk. Penghambatan proporsi sel Tfh
sirkulasi yang menyimpang oleh kortikosteroid pada pasien dengan lupus
eritematosus sistemik. PloS satu. 2012; 7: e51982.
43. Xie A, Buras ED, Xia J, Chen W. Peran Interleukin-21 yang Muncul dalam
Transplantasi. Imunol Sel J Clin. 2012; Supl 9: 1-7.
http://www.ijbs.com