Machine Translated by Google

Jurnal Riset Pangan Internasional 24(5): 2153-2160 (Oktober 2017)

Beranda jurnal: http:// www.ifrj.upm.edu.my

Penurunan glukosa darah kombinasi Andrographis paniculata (Burm.f)

Ekstrak etanol Ness dan Morinda citrifolia L. pada tikus
diabetes mellitus tipe 2 yang diinduksi streptozotocin neonatal

1,4Anwar, K., 2Wigati, D., 1

Sudarsono, 3,*Nugroho, AE

1
Jurusan Biologi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada,
Yogyakarta, 55281, Indonesia
2
STIFAR Yayasan Farmasi, Semarang 50139, Indonesia
3
Departemen Farmakologi dan Farmasi Klinik Fakultas Farmasi Universitas Gadjah
Mada, Yogyakarta 55281, Indonesia
4
Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Lambung
Mangkurat, Banjarmasin 70123, Indonesia

Sejarah artikel Abstrak

Diterima: 9 Juli 2016
Diterima dalam bentuk revisi:
25 Agustus 2016
Diterima: 27 Agustus 2016
Kata kunci
Andrographis paniculata
mengkudu citrifolia
Hipoglikemia neonatal
Streptozotocin
DM tipe 2
Andrographis paniculata (Burm. f.) Ness dan Morinda citrifolia L. merupakan dua tanaman obat
yang secara tradisional digunakan masyarakat Indonesia untuk pengobatan diabetes. Tujuan
dari penelitian ini adalah untuk mengevaluasi efek hipoglikemik kombinasi A. paniculata
ethanolic extract (APEE) dan M. citrifolia ethanolic extract (MCEE) pada tikus diabetes mellitus
tipe 2 yang diinduksi streptozotocin neonatal sehubungan dengan efek regenerasi pankreasnya.
Serbuk herba A. paniculata kering dan buah M. citrifolia dimaserasi menggunakan etanol 70%.
Analisis fitokimia andrografolida pada APEE dan skopoletin pada MCEE dilakukan dengan KLT-
densitometri menggunakan fase stasioner silika gel 60 F254 dan fase gerak methanol n-heksana-
kloroform (6:41:3 v/v/v). Kondisi hiperglikemik pada tikus diinduksi dengan injeksi Streptozotocin
(STZ) dosis tunggal 90 mg/kg BB secara intraperitoneal pada tikus baru lahir 2 hari.
Tikus yang diinduksi STZ neonatal berumur 12 minggu diberikan secara oral dengan beberapa
kombinasi dosis APEE: MCEE (375:125; 250:250; 125:375 mg/kg BB) selama 14 hari berturut-
turut. Efek hipoglikemik dievaluasi dengan mengukur kadar glukosa darah pre-prandial dan
post-prandial dan parameter lain seperti morfologi pulau pankreas, kepadatan sel ÿ pankreas,
dan ekspresi insulin pankreas. Pada penelitian tersebut, konsentrasi andrographolide pada
APEE adalah 13,72% sedangkan scopoletin pada MCEE adalah 0,32%. Pengobatan tunggal
APEE dan MCEE tidak menunjukkan efek hipoglikemik yang signifikan daripada kombinasinya.
Namun, kombinasi APEE dan MCEE menunjukkan peningkatan yang lebih baik dalam morfologi
pulau pankreas dan peningkatan ekspresi insulin pankreas daripada pengobatan tunggal APEE
atau MCEE. Kombinasi APEE: MCEE dosis 250:250 mg/kg BB menunjukkan efek hipoglikemik
dan regenerasi pankreas yang lebih baik dibandingkan kombinasi lainnya. Kombinasi ekstrak
etanolik A. paniculata dan M. citrifolia berpotensi untuk dikembangkan sebagai antidiabetes.
© Semua Hak Dilindungi Undang-Undang

pengantar menggunakan tanaman obat telah dipilih sebagai solusi

alternatif. Penggunaan kombinasi tanaman obat untuk
Indonesia merupakan negara keempat di dunia dengan pengobatan menguntungkan karena kandungan kimia
jumlah penderita diabetes terbanyak. Pada tahun 2000 tanaman akan memberikan efek terapeutik multi-obat multi-
diperkirakan terdapat 8,4 juta penderita diabetes melitus (DM) target. Herba Andrographis paniculata dan buah M. citrifolia
dan akan meningkat menjadi 21,3 juta pada tahun 2030 (Wild secara tradisional digunakan oleh masyarakat Indonesia
et al., 2004). Patogenesis DM yang kompleks memerlukan untuk pengobatan diabetes.
pendekatan terapi multimodal yang memerlukan kombinasi Aktivitas hipoglikemik A. paniculata telah ditunjukkan
beberapa obat (Tiwari dan Rao, 2002). dalam beberapa studi in vivo menggunakan model hewan
Dengan meningkatnya keparahan diabetes, dibutuhkan diabetes. Andrographolide adalah lakton diterpene utama
kombinasi dua atau lebih agen hipoglikemik oral (OHO) yang dari A. paniculata yang bertanggung jawab atas aktivitas
akan meningkatkan risiko efek samping obat dan meningkatkan hipoglikemiknya. Andrographolide berhasil menurunkan kadar
biaya pengobatan (Ramachandran et al., 2010). Pengobatan glukosa darah dengan meningkatkan penggunaan glukosa
komplementer untuk diabetes dan menstimulasi subtipe transporter glukosa

*Penulis yang sesuai.

Email: agungendronugroho@gmail.com, nugroho_ae@ugm.ac.id
Machine Translated by Google
2154 Anwar dkk./ IFRJ 24(5): 2153-2160
4 (GLUT4) transkripsi (Zhang dan Tan, 2000; Yu et al., 2003;
Nugroho et al., 2012). Jumlah sel ÿ dan kadar insulin pankreas
pada tikus diabetes juga dilaporkan meningkat dengan adanya
andrographolide (Nugroho, Rais, Setiawan et al., 2014).
Andrographolide juga memiliki aktivitas pencegahan DM tipe 1
dengan regulasi homeostatis Th1/Th2/Th17 yang akan
mencegah kematian sel ÿ pankreas dan menghambat infiltrasi
sel T ke pulau pankreas (Zhang et al., 2013).
Ekstrak etanol M. citrifolia menunjukkan aktivitas
penurunan kadar glukosa darah pada tikus diabetes yang
diinduksi aloksan (Adnyana et al., 2004). Perlakuan ekstrak
etanol buah M. citrifolia pada tikus diabetes yang diinduksi
streptozotocin menurunkan kadar glukosa darah, hemoglobin
glikosilasi, urea darah, dan kreatinin serum (Jin, 2007; Rao
dan Subramanian, 2009).
Jus buah mengkudu juga dapat mempercepat penyembuhan
luka pada tikus diabetes yang diinduksi streptozotocin (Nayak
et al., 2007).
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengevaluasi efek
hipoglikemik kombinasi A. paniculata ethanolic extract (APEE)
dan M. citrifolia ethanolic extract (MCEE) pada tikus neonatal
yang diinduksi streptozotocin tipe 2 terkait dengan efek
regenerasi pankreasnya. Kombinasi kedua ekstrak dapat
menunjukkan efek hipoglikemik yang lebih baik daripada
pemberian ekstrak tunggal tersebut.
Efek hipoglikemik dievaluasi dengan mengukur kadar glukosa
darah pre-prandial dan post-prandial dan parameter lain seperti
morfologi pulau pankreas, jumlah sel ÿ pankreas, dan ekspresi
insulin pankreas.
Bahan dan metode
Bahan kimia
Streptozotocin, andrographolide, dan scopoletin dibeli
dari Sigma Chemical Co. (St.Louis, MO, USA). Kadar glukosa
diukur menggunakan GOD PAP kit dengan glucose oxidase 4-
aminoantipyrine (DiaSys, Diagnostic Systems GmbH, Holzheim,
Jerman). Natrium karboksimetil selulosa, glukosa, n-heksana,
kloroform, metanol, hematoksilin dan eosin diperoleh dari E.
Merck, Darmstadt, Jerman. Antibodi untuk penentuan ekspresi
insulin adalah antibodi anti-insulin primer (Santa Cruz
Biotechnologies, California, USA) dan antibodi Streptavidin-
Horse Radish Peroxidase sekunder (Invitrogen Carlsbad, CA,
USA).
Hewan
Tikus Wistar jantan umur 2 hari 3 bulan (6-250 g) yang
digunakan dalam penelitian ini dipelihara di
temperatur konstan 25+2°C, kelembaban relatif 45-55%, dan
siklus terang-gelap terkontrol 12.12 jam (lampu menyala pukul
06.00 WIB). Tikus diberi pakan standar laboratorium (Comfeed,
Indonesia) dan air ad libitum. Eksperimen ini telah memperoleh
izin etik dari Ethical Clearance Committee for Pre
Klinik Eksperimen, Laboratorium Riset dan Uji Terpadu
Universitas Gadjah Mada Indonesia (Nomor Sertifikat: 241/
KEC-LPPTIV/2015).
Sediaan Ekstrak Etanol Jamu
Andrographis paniculata diperoleh dari BP2TOOT
Tawangmangu, dan buah M. citrifolia dikumpulkan dari Mlati,
Sleman, Yogyakarta pada bulan Desember 2014. Tanaman
tersebut diautentikasi di Departemen Biologi Farmasi, Fakultas
Farmasi, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Spesimen voucher sampel disimpan di herbarium departemen.
Serbuk kering herba A. paniculata (1,02 kg) dan buah M.
citrifolia (1,1 kg) diekstraksi dengan metode maserasi
menggunakan etanol 70% selama 24 jam. Setelah 2 kali
maserasi ulang, semua filtrat dicampur, dan diuapkan hingga
diperoleh ekstrak kental.
Penentuan Senyawa Penanda A. paniculata dan M. citrifolia
Penanda ekstrak etanolik Andrographis paniculata (APEE)
dan ekstrak etanolik Morinda citrifolia (MCEE) ditentukan
menggunakan metode kromatografi lapis tipis (KLT), dengan
fase diam silika gel 60 F254 dan fase gerak heksana-kloroform-
metanol (6:41:3 v/v/v).
Penentuan androgapholide pada APEE dilakukan dengan
densitometer pada panjang gelombang 232 nm.
Sedangkan skopoletin pada MCEE ditentukan dengan
densitometer pada panjang gelombang 369 nm.
Induksi diabetes Tikus
neonatus jantan (umur 2 hari) diberikan streptozotocin
secara intraperitoneal dengan dosis 90 mg/kg BB dalam bufer
sitrat (pH 4,3). Hewan disapih pada umur 4 minggu. DM
dikonfirmasi pada minggu ke- 12 dengan pengukuran kadar
glukosa darah preprandial dan postprandial dengan metode
glucose oxidase peroxidase (GOD/POD).
Rancangan percobaan
Tikus diabetes dibagi menjadi delapan kelompok sebagai
berikut, i) Kontrol positif, diberi glibenklamid 4,5 mg/kg BB; ii)
Kontrol negatif, menerima larutan pembawa, 0,5 mL Na-CMC
0,5%; aku aku aku)
Diabetes diobati dengan APEE tunggal (500 mg/kg BB); iv)
Penderita diabetes diobati dengan MCEE tunggal (500 mg/kg
Machine Translated by Google
Anwar dkk./ IFRJ 24(5): 2153-2160
BB); v) Penderita diabetes yang diobati dengan kombinasi
APEE 375 dan MCEE 125 mg/kg BB; vi) Penderita diabetes
yang diobati dengan kombinasi APEE 250 dan MCEE 250 mg/
kg BB; dan vii) Penderita diabetes yang diobati dengan
kombinasi APEE 125 dan MCEE 375 mg/kg BB. Semua
perlakuan diberikan secara oral, sekali sehari, selama 14 hari berturut-turut.
Pada 0; 7; dan 14 hari pengobatan, baik pre-prandial (setelah
puasa 12 jam) dan post-prandial (2 jam setelah 1,75 g/kg BB
per pembebanan glukosa oral) kadar glukosa darah ditentukan.
Kadar glukosa darah dianalisis dengan metode kolorimetri
menggunakan reagen GOD-PAP. Sampel darah dari pleksus
retro orbitalis diinkubasi pada suhu kamar selama 30 menit.
Serum dikumpulkan dengan sentrifugasi pada 5000 rpm
selama 10 menit pada suhu 25°C.
Pengamatan Histologis Pankreas Pada akhir
perlakuan, tikus dikorbankan, pankreas diangkat dan
difiksasi dengan PBS formalin 4% selama 24 jam. Jaringan
pankreas dalam slide bagian diwarnai untuk pewarnaan
hematoxylin eosin (HE) dan dianalisis dengan imunohistokimia
(IHC) menggunakan antibodi anti-insulin primer dan antibodi
Streptavidin-Horse Radish Peroxidase sekunder. Bagian
pankreas yang lain difiksasi dengan larutan Bouin kemudian
dibuat irisannya
Pewarnaan Victoria Blue (VB). Semua slide yang diwarnai
diamati dengan mikroskop cahaya (Olympus BX51, Jepang)
dengan lensa objektif 40x, dan pembesaran okuler 10x.
Analisis statistik
Semua data eksperimen disajikan sebagai mean+standard
error of mean (SEM). Analisis statistik menggunakan one way
analysis of variance (ANOVA) dilanjutkan dengan uji post hoc
least significant difference (LSD).
Perbedaan nyata ditunjukkan oleh P-values kurang dari 0,05.
Hasil dan Diskusi
Analisis fitokimia ekstrak etanolik A. paniculata dan M. citrifolia
Andrographis paniculata (APEE) menunjukkan kandungan
andrografolida positif berdasarkan analisis fitokimia
menggunakan metode KLT densitometri. Spot yang sama
dengan andrographolide standar memberikan spektrum yang
sama dengan scanner TLC (Gambar 1A). Selanjutnya, analisis
kuantitatif mengkonfirmasi kandungan andrografolida sebesar
13,7% menggunakan pemindai TLC pada panjang gelombang
232 nm.
Analisis fitokimia ekstrak etanolik M. citrifolia (MCEE) dilakukan
dengan menggunakan scopoletin sebagai standar. Konten
positif scopoletin adalah
2155
Gambar 1. Spektrum andrografolida APEE (hijau)
dibandingkan dengan standar (ungu) (A), dan spektra
skopoletin MCEE (hijau) dibandingkan dengan standar
(ungu) (B). Metode KLT dilakukan dengan menggunakan
fase diam silika gel 60 F254 dan fase gerak n-
heksana:kloroform:metanol (6:41:3 v/v/v)
ditunjukkan oleh spektrum identik dari titik MCEE dan standar
scopoletin yang sama oleh pemindai TLC (Gambar 1B).
Analisis kuantitatif dengan TLC scanner pada panjang
gelombang 369 nm menunjukkan bahwa kandungan skopoletin
dalam ekstrak sebesar 0,3%.
Pengaruh Induksi Streptozotocin Kadar
glukosa darah preprandial dan postprandial diukur pada
12 minggu setelah induksi streptozotocin. Hasil independent
sample T-Test menunjukkan bahwa kadar glukosa darah
preprandial tikus n-STZ (163,7+8,01 mg/dL) dan tikus normal
(104,1+10,61 mg/dL) memiliki perbedaan yang bermakna (P <
0,05). Kadar glukosa darah post-prandial tikus n-STZ
(182,9+8,13 mg/dL) juga berbeda nyata dibandingkan dengan
tikus normal (126,2+6,57 mg/dL). Tikus mengalami kondisi
hiperglikemik jika kadar glukosa darahnya lebih dari 1,5 kali
kadar glukosa darah kelompok normal. Hasil penelitian
menunjukkan kadar glukosa darah tikus n-STZ lebih dari 1,5
kali lipat dari tikus normal, sehingga dapat disimpulkan jika
sudah terjadi kondisi hipoglikemik.
Sebagai diabetogenik, streptozotocin digunakan untuk
induksi hewan model diabetes baik IDDM maupun NIDDM
(Rees and Alcolado, 2005; Lenzen, 2008). Streptozotocin
memiliki aktivitas diabetogenik dengan cara menekan produksi
insulin (sindrom insulinopenia). Diabetes akibat induksi
streptozotocin disebabkan oleh nekrosis spesifik sel ÿ pankreas
(Lenzen, 2008). Sel ÿ penghasil insulin pada tikus n-STZ
memiliki karakteristik yang mirip dengan penderita diabetes
tipe 2, mengakibatkan kondisi sedikit penurunan kadar insulin
plasma, peningkatan kadar glukosa darah, dan penurunan
insulin pankreas (Arulmozhi et al., 2004 ).
Pada hari ke 4 setelah induksi streptozotocin di
Machine Translated by Google
2156 Anwar dkk./ IFRJ 24(5): 2153-2160

Gambar 2. Aktivitas hipoglikemik (%) kelompok perlakuan setelah
14 hari berturut-turut. Data disajikan sebagai rata-rata ± SEM (n =
*
5). p<0,05 dibandingkan dengan nilai kelompok glibenklamid
Gambar 3. Pengamatan histologis pulau pankreas dengan
pewarnaan HE. (A) tikus normal; (B) glibenklamid; (C)
Na-CMC (kontrol negatif); (D) APEE; (E) MCEE; (F)
APEE:MCEE=375:125; (G) APEE:MCEE=250:250; (H)
APEE:MCEE=125:375. Menampilkan beberapa bentuk

tikus neonatal, hanya 20% massa sel ÿ yang tersisa
pada tikus n-STZ (Garofano et al., 2000). Regenerasi
sel sudah dimulai pada hari ke -10 , dimana jumlah
sel ÿ pankreas meningkat menjadi 39,6%.
Regenerasi ini melalui neogenesis dan peningkatan
mekanisme proliferasi sel. Meskipun sel ÿ pankreas
meningkat menjadi 48,8% pada minggu ke 6,
hiperglikemia tetap ada. Keadaan ini berlangsung
sampai umur 13 minggu. Hal ini menandakan
regenerasi sel ÿ pankreas tidak berjalan sempurna
dan membuat hiperglikemia saat mencit berumur 3
bulan (Bonner-Weir, 1981).
Efek pengobatan pada kadar glukosa darah
Aktivitas hipoglikemik menunjukkan penurunan
kadar glukosa darah pada tikus n-STZ yang diberi
perlakuan senyawa uji dibandingkan kontrol negatif
pada hari ke- 14 perlakuan. Pemberian APEE dan
MCEE selama 14 hari berturut-turut baik dalam bentuk
pengobatan tunggal atau kombinasinya menunjukkan
penurunan kadar glukosa darah preprandial dan
postprandial pada tikus diabetes tipe 2 yang diinduksi
streptozotocin neonatal. Aktivitas hipoglikemik
preprandial dan postprandial dari kombinasi APEE
dan MCEE lebih rendah daripada ekstrak tunggalnya
(Gambar 2). Hasil analisis statistik menunjukkan tidak
ada perbedaan bermakna antar kelompok (P > 0,05)
baik aktivitas hipoglikemik preprandial maupun
postprandial. Dengan demikian, seluruh kelompok uji
mengalami penurunan kadar glukosa darah preprandial
dan postprandial yang sebanding.
Pengaruh terhadap pulau
pankreas tikus Pengamatan morfologi pulau
Langerhans diamati dengan pewarnaan HE. Beberapa
perubahan degeneratif morfologi pulau Langerhans adalah
perubahan sel (Pembesaran 10x40 kali)
diamati dibandingkan dengan tikus kontrol normal.
Sel pulau pankreas berkurang jumlah dan ukurannya.
Setelah pengobatan, peningkatan pulau tikus diabetes
terjadi pada semua kelompok perlakuan dibandingkan
dengan kontrol negatif. Kombinasi APEE 250 mg/kg
BB dan MCEE 250 mg/kg BB menunjukkan
peningkatan regenerasi pulau tikus diabetes yang
terbaik (Gambar 3).
Efek pada sel ÿ pankreas tikus
Pewarnaan Victoria Blue membuat sitoplasma sel
ÿ pankreas berwarna biru dengan inti sel darah merah
sehingga dapat dihitung jumlah sel ÿ pankreas.
Induksi streptozotocin mengakibatkan destruksi sel ÿ
pankreas sehingga jumlah kelompok normal sangat
jauh berbeda dengan kelompok yang mendapat
induksi streptozotocin. Kelompok kontrol negatif
memiliki sedikit pulau Langerhans pankreas, serta
jumlah sel ÿ di pulau Langerhans pankreas. Pemberian
glibenklamid dan perlakuan ekstrak akan meningkatkan
kemampuan regenerasi sel ÿ dan menurunkan
nekrosis sel, sehingga jumlah sel ÿ yang diamati
meningkat (Gambar 4).
Kombinasi 250 mg/kg BB APEE dan 250 mg/kg BB
MCEE memiliki jumlah sel ÿ pankreas tertinggi,
berbeda bermakna pada semua kelompok perlakuan
(P < 0,05).
Efek pada ekspresi insulin pankreas tikus
Pewarnaan imunohistokimia dilakukan untuk
mengetahui ekspresi insulin pankreas secara kualitatif.
Sel ÿ pankreas imunoreaktif insulin akan memberikan
warna coklat dengan pewarnaan. Kelompok normal
memiliki
insulin pankreas paling kuat
Machine Translated by Google
Anwar dkk./ IFRJ 24(5): 2153-2160
Gambar 4. Jumlah sel ÿ pankreas/5 lapang pandang.
Data disajikan sebagai mean+SEM (n = 3). p<0,05*
berbeda nyata dibandingkan kontrol negatif Na-CMC.
ekspresi karena produksi insulin sel ÿ pankreas tidak
terganggu (Gambar 5). Ekspresi insulin pada kontrol negatif
Na-CMC 0,5% paling rendah dan berbeda bermakna pada
semua kelompok (P < 0,05).
Glibenklamid dan perlakuan ekstrak memberikan ekspresi
insulin yang lebih baik dibandingkan kelompok kontrol negatif.
Kombinasi APEE 250 mg/kg BB dan MCEE 250 mg/kg BB
menunjukkan ekspresi insulin pankreas terbaik.
Beberapa penelitian telah melaporkan aktivitas A.
paniculata dalam menurunkan kadar glukosa darah pada
berbagai model tikus diabetes yaitu tikus yang diinduksi
aloksan, diinduksi streptozotocin, dan tikus yang diberi
makan lemak tinggi fruktosa (Zhang dan Tan, 2000; Hossain
et al., 2007 ; Ravikumar et al., 2010; Nugroho et al., 2012).
Andrographis paniculata juga dilaporkan memiliki aktivitas
antioksidan, renoprotektif, dan hepatoprotektif (Trivedi dan
Rawal, 2000; Zhang dan Tan, 2000; Dandu dan Inamdar,
2009; Singh et al., 2009). Andrographolide yang merupakan
lakton diterpene utama dari A. paniculata terutama
berkontribusi pada aktivitas hipoglikemiknya. Penurunan
kadar glukosa darah oleh andrographolide melalui
mekanisme peningkatan pemanfaatan glukosa, merangsang
transkripsi glukosa transporter subtipe 4 (GLUT4),
memperbaiki kondisi pulau Langerhans, meningkatkan
jumlah sel ÿ di pulau Langerhans, dan meningkatkan kadar
insulin pankreas (Zhang dan Tan, 2000; Yu et al., 2003;
Nugroho, Andrie, Susilowati et al., 2011; Nugroho et al.,
2012; Nugroho, Rais, Setiawan et al., 2014).
Andrographolide juga mencegah kematian sel ÿ pankreas
dan menghambat infiltrasi sel T ke pulau pankreas melalui
regulasi homeostatis Th1/Th2/Th17 (Zhang et al., 2013).
Pada penelitian tersebut, ekstrak etanol A. paniculata
mengandung andrographolide sebesar 13,7%.
Kabarnya, ekstrak etanol buah M. citrifolia
2157
Gambar 5. Pengamatan histologis pulau pankreas
dengan pewarnaan imunohistokimia. (A) tikus normal;
(B) glibenklamid; (C) Na-CMC (kontrol negatif); (D)
APEE; (E) MCEE; (F) APEE:MCEE=375:125; (G)
APEE:MCEE=250:250; (H) APEE:MCEE=125:375.
Menunjukkan sel ÿ pankreas imunoreaktif insulin.
(Pembesaran 10x40 kali)
dapat menurunkan kadar glukosa darah pada tikus diabetes
yang diinduksi streptozotocin dan memperbaiki fungsi ginjal
nefropati diabetik melalui penurunan kadar glukosa darah,
jumlah neutrofil dan glukosa darah fibronektin pada tikus DM
(Hadijah et al., 2004). Jus M. citrifolia yang difermentasi
menurunkan kadar hemoglobin glikosilasi (HbA1c),
meningkatkan sensitivitas insulin, mengaktifkan reseptor
aktif proliferator peroksisom (PPAR-ÿ) dan memicu
pengambilan glukosa dengan merangsang AMP-activated
protein kinase (AMPK) dalam kultur sel C2C12 (Verma et
al., 2013). Kandungan scopoletin pada MCEE yang
merupakan senyawa identitas M. citrifolia sebesar 0,3%.
Scopoletin memiliki sifat antioksidan dengan menangkap
anion superoksida dalam sistem reaksi xanthine/xanthine
oxidase dan memiliki aktivitas hipotensi, antidepresan,
hipolipidemik, dan hipoglikemik (Lee et al., 2012).
Senyawa metabolik lain dalam A. paniculata dan M.
citrifolia seperti flavonoid dan senyawa fenolik mungkin
memiliki kontribusi dalam efek hipoglikemik. Flavonoid dan
fenolik memiliki kemampuan untuk menangkap dan
menetralkan radikal bebas (efek antioksidan). Efek
antioksidan pada kedua ekstrak tersebut bila digabungkan
dapat lebih kuat dibandingkan dengan ekstrak tunggalnya.
Antioksidan dapat mengurangi pembentukan radikal bebas
pada kondisi diabetes, stres oksidatif, ekspresi TNF-ÿ,
peroksidasi lipid, dan mencegah kerusakan sel ÿ pankreas
sehingga insulin tetap dapat diproduksi dengan baik
(Fenercioglu et al., 2010). Flavonoid juga menghambat
enzim penghidrolisis karbohidrat, ÿ-glukosidase dan ÿ-
amilase sehingga flavonoid
Machine Translated by Google
2158 Anwar dkk./ IFRJ 24(5): 2153-2160
efektif menurunkan kadar glukosa darah postprandial
karena produksi dan penyerapan glukosa yang
diturunkan (Gautam et al., 2013; Hong et al., 2013).
Tanaman obat lain sering dikombinasikan dengan
A. paniculata untuk menyelidiki potensi anti-diabetes
pada berbagai model hewan diabetes. A. paniculata
dikombinasikan dengan Centella asiatica L. pada tikus
yang diberi makan lemak fruktosa tinggi (Nugroho,
Lindawati, Herlyanti et al., 2013), daun Azadirachta
indica A. Juss pada tikus diabetes yang diinduksi
alloxan (Nugroho, Sari, Sunarwidhi et al ., 2014; Ucche Referensi
et al., 2015), rimpang Curcuma xanthorrhiza dan
propolis pada tikus yang diberi lemak fruktosa tinggi
(Nugroho, Kusumaramdani, Widyaningar et al., 2014),
dan Gynura procumbens (Lour.) Merr pada induksi
aloksan tikus hiperglikemik (Sari et al., 2015). Pada
penelitian ini, APEE dan MCEE baik tunggal maupun
kombinasinya berpengaruh terhadap penurunan kadar
glukosa darah dan perbaikan pulau pankreas karena induksi streptozotocin.
Setiap ekstrak herba memiliki senyawa aktif yang
dilaporkan dapat menurunkan kadar glukosa darah.
Kandungan senyawa fenolik, flavonoid, skopoletin, dan
andrografolida diharapkan dapat berperan sinergis
dalam perbaikan kerja pankreas dan penurunan kadar
glukosa darah. Penyelidikan lebih lanjut diperlukan
untuk mengidentifikasi senyawa aktif lainnya pada A.
paniculata dan M. citrifolia.
Temuan ini mendukung upaya eksplorasi tanaman
obat untuk penemuan dan pengembangan obat
(Nugroho, Riyanto, Sukari et al., 2011a; Harwoko et
al., 2014). Eksplorasi obat (senyawa aktif terisolir,
tanaman obat, dan obat sintetik) meliputi aktivitas
farmakologi dan toksikologi, formulasi herbal, studi
fitokimia, isolasi senyawa aktif dll. (Nugroho, Riyanto, Fenercioglu, AK, Saler, T., Genc, E., Sabuncu, H. and
Sukari et al., 2011b; Nugroho, Hermawan, Putri et al.,
2013; Febriansah et al., 2015; Sunarwidhi et al., 2014).
Untuk meningkatkan aktivitas farmakologi, beberapa
tumbuhan obat tradisional sering dikombinasikan
dengan obat lain. Dalam studi tersebut, ekstrak etanolik Garofano, A., Czernichow, P. dan Bréant, B. 2000. Gangguan
A. paniculata menunjukkan peningkatan efek anti-
diabetes bila dikombinasikan dengan ekstrak etanolik
M. citrifolia .
Kesimpulan
Kombinasi ekstrak etanol A. paniculata dan M.
citrifolia menunjukkan efek hipoglikemik yang sebanding
dibandingkan dengan perlakuan tunggal ekstrak A.
paniculata dan M. citrifolia . Kombinasi ini menunjukkan
peningkatan yang lebih baik pada pulau pankreas,
meningkatkan jumlah sel ÿ pankreas, dan meningkatkan
ekspresi insulin pankreas dibandingkan dengan ekstrak
tunggalnya pada neonatal yang diinduksi streptozotocin.
tikus diabetes melitus tipe 2.
Pengakuan
Kami mengucapkan terima kasih kepada
Kementerian Riset, Teknologi, dan Pendidikan Tinggi
Republik Indonesia, Indonesia melalui Dana Riset
“Penelitian Unggulan Perguruan Tinggi” atas dukungan
dana untuk penelitian ini.
Adnyana, IK, Yulinah, E., Soemardji, AA, Kumolosasi, E.,
Iwo, MI, Sigit, JI and Suwendar. 2004.
Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Etanol Buah Mengkudu
(Morinda citrifolia L.). Acta Pharmaceutica Indonesia
29(2): 43–49.
Arulmozhi, D., Veeranjayenulu, A. dan Bodhankar, S.
2004. Model tikus yang diinduksi streptozotocin neonatal
dari diabetes mellitus tipe 2: Sekilas. Jurnal Farmakologi
India 36(4): 217–221.
Bonner-Weir, S., Trent, DF, Honey, RN dan Weir, GC 1981.
Tanggapan pulau tikus neonatal terhadap streptozotocin:
Regenerasi Sel-B yang terbatas dan hiperglikemia.
Diabetes 30(1): 64–69.
Dandu, AM dan Inamdar, NM 2009. Evaluasi efek
menguntungkan dari sifat antioksidan ekstrak air daun
Andrographis paniculata pada diabetes yang diinduksi
STZ. Jurnal Ilmu Farmasi Pakistan 22(1): 49–52.
Febriansah, R., Putri, DDP, Sarmoko, Nurulita, NA, Meiyanto,
E. and Nugroho, AE 2014. Hesperidin sebagai agen
pencegahan resistensi sel kanker payudara MCF-7
yang resisten terhadap doxorubicin. Jurnal Biomedis
Tropis Asia Pasifik 4(3):228-233.
Altuntas, Y. 2010. Pengaruh Antioksidan yang
Mengandung Polifenol Terhadap Stres Oksidatif dan
Peroksidasi Lipid pada Diabetes Mellitus Tipe 2 Tanpa
Komplikasi. Jurnal Investigasi Endokrinologis 33(2):
118–124.
regenerasi sel beta pada tikus kurang gizi perinatal:
Sebuah studi dengan STZ. Federasi Masyarakat
Amerika untuk Jurnal Biologi Eksperimental 14(15): 2611–2617.
Gautam, K., Kumar, P. dan Jai, C. 2013. Studi perbandingan
aktivitas penghambatan alfa amilase flavonoid Vitex
negundo Linn. dan Andrographis paniculata Nees.
Jurnal Internasional Farmasi Hijau 7(1): 25–28.
Hadijah, H., Ayub, MY, Zaridah, H. dan Normah, A.
2004. Aktivitas hipoglikemik ekstrak mengkudu pada
tikus normal dan tikus diabetes yang diinduksi
streptozotocin. Jurnal Pertanian Tropis dan Ilmu Pangan
32(1): 39–44.
Harwoko, Pramono, S. dan Nugroho, AE 2014.
Fraksi kaya triterpenoid dari daun Centella asiatica dan
aktivitas antihipertensi in vivo . Jurnal Penelitian Pangan
Internasional 21(1): 149–154.
Machine Translated by Google
Anwar dkk./ IFRJ 24(5): 2153-2160
Hong, HC, Li, SL, Zhang, XQ, Ye, WC and Zhang, QW
2013. Flavonoid dengan aktivitas penghambatan ÿ-
glukosidase dan kandungannya pada daun Morus
atropurpurea. Pengobatan Cina 8(19):1-7 Hossain, MA,
Roy, BK, Ahmed, K., Chowdhury, A.
WS dan Rashid, MA 2007. Aktivitas antidiabetes
Andrographis paniculata. Jurnal Ilmu Farmasi Universitas
Dhaka 6(1): 15–20.
Jin, BJ 2007. Evaluasi sifat hipoglikemik ekstrak buah
mengkudu citrifolia pada tikus diabetes yang diinduksi
streptozotocin. Jurnal Tanaman Obat Tropis 8(1): 15–
19.
Lee, SY, Park, SL, Hwang, JT, Yi, SH, Nam, YD dan Lim,
SI 2012. Efek antidiabetes Morinda citrifolia (noni) yang
difermentasi oleh cheonggukjang pada tikus diabetes
KK-A. Pengobatan Pelengkap dan Alternatif Berbasis
Bukti 2012: e163280.
Lenzen, S. 2008. Mekanisme diabetes yang diinduksi
alloxan dan streptozotocin. Diabetes 51(2): 216–226.
Nayak, BS Isitor, GN, Maxwell, A., Bhogadi, V. dan Ramdath,
DD 2007. Aktivitas penyembuhan luka jus buah
mengkudu pada tikus yang diinduksi diabetes.
Jurnal Perawatan Luka 16(2): 83–86.
Nugroho, AE, Riyanto, S., Sukari, MA dan Maeyama, K.
2011a. Efek aegeline, alkaloid utama daun Aegle
marmelos Correa, pada pelepasan histamin dari sel
mast. Jurnal Ilmu Farmasi Pakistan 24(3): 359-367.
Nugroho, AE, Riyanto, S., Sukari, MA dan Maeyama, K.
2011b. Efek anti-alergi marmin, kumarin yang diisolasi
dari Aegle marmelos Correa: Studi in vitro .
Jurnal Internasional Phytomedicine 3(1): 84–97.
Nugroho, AE, Andrie, M., Susilowati, R., Nurrochmad, A.,
Lukitaningsih, E. and Pramono, S. 2011. Ethanolic
extracts of A. paniculata (Burm. F.) nees and its active
compound, andrographolide, menurunkan ekspresi
transporter glukosa (GLUT 4) pada tikus yang diberi
makan lemak tinggi fuctose. Jurnal Internasional
Phytomedicine 3(4): 486–497.
Nugroho, AE, Andrie, M., Warditiani, NK, Siswanto, E.,
Pramono, S. and Lukitaningsih, E. 2012. Efek
antidiabetik dan antihiperlipidemik Andrographis
paniculata (Burm. f.) Nees dan andrographolide pada
fruktosa tinggi tikus yang diberi makan gemuk. Jurnal
Farmakologi India 44(3): 377–381.
Nugroho, AE, Lindawati, NY, Herlyanti, K., Widyastuti, L.
and Pramono, S. 2013. Efek antidiabetes dari kombinasi
ekstrak Andrographis paniculata (Burm f.) Nees yang
diperkaya andrographolide dan ekstrak yang diperkaya
asiaticoside Centella asiatica L. pada tikus yang diberi
makan lemak fruktosa tinggi. Jurnal Biologi Eksperimental
India 51(12): 1101–1108.
Nugroho, AE, Hermawan, A., Putri, DDP, Novika, A. and
Meiyanto, E. 2013. Efek kombinasi fraksi tak larut
heksana Ficus septica Burm. Kemoterapi F. dan
doxorubicin pada sel kanker payudara T47D. Jurnal
Biomedis Tropis Asia Pasifik 3(4):297-302.
Nugroho, AE, Rais, IR, Setiawan, I., Pratiwi, PY,
2159
Hadibarata, T., Tegar, M. dan Pramono, S. 2014.
Efek pankreas andrographolide diisolasi dari
Andrographis paniculata (Burm. f.) Nees. Jurnal Ilmu
Biologi Pakistan 17(1): 22–31.
Nugroho, AE, Sari, KRP dan Sunarwidhi, AL
2014. Penurunan glukosa darah dengan kombinasi
Andrographis paniculata (Burm. f.) Ness herbal dan
daun Azadirachta indica A. Juss pada tikus diabetes
yang diinduksi aloksan. Jurnal Ilmu Farmasi Terapan
4(9): 30–35.
Nugroho, AE, Kusumaramdani, G., Widyaningar, A.,
Anggoro, DP and Pramono, S. 2014. Efek antidiabetes
kombinasi fraksi tak larut n-heksana ekstrak etanol
Andrographis paniculata dengan obat tradisional
lainnya. Jurnal Penelitian Pangan Internasional 21(2):
785–789.
Ramachandran, A., Das, A., Joshi, S., Yajnik, C., Shah, S.
dan Kumar, K. 2010. Status diabetes saat ini di India
dan kebutuhan agen terapi baru. Jurnal Asosiasi Dokter
India 58(7): 7–9.
Rao, USM dan Subramanian, S. 2009. Evaluasi biokimia
efek antihiperglikemik dan antioksidan dari ekstrak
buah Morinda citrifolia dipelajari pada tikus diabetes
yang diinduksi streptozotocin. Penelitian Kimia Obat
18(6): 433–446.
Ravikumar, R., Krishnamoorthy, P. dan Kalidoss, A. 2010.
Khasiat antidiabetes dan antioksidan Andrographis
paniculata pada tikus albino alloxanized. Jurnal
Internasional Farmasi dan Teknologi 2(4): 1016– 1027.
Rees, DA dan Alcolado, JC 2005. Hewan model diabetes
melitus. Pengobatan Diabetes 22(4): 359–370.
Sari, KRP, Sudarsono and Nugroho, AE 2015. Pengaruh
ekstrak etanol kombinasi herbal Andrographis paniculata
(Burm.f) Ness dan Gynura procumbens (Lour.) Merr
pada tikus hiperglikemik yang diinduksi aloksan. Jurnal
Penelitian Pangan Internasional 22(4): 1332–1337.
Singh, P., Srivastava, MM dan Khemani, LD 2009.
Efek reprotektif Andrographis paniculata (burm. F.)
Nees pada tikus. Jurnal Ilmu Kedokteran Upsala 114(3):
136–139.
Sunarwidhi, AL, Sudarsono, S. dan Nugroho, AE 2014.
Efek hipoglikemik kombinasi Azadirachta indica A.
Juss. dan Gynura procumbens (Lour.) Merr. ekstrak
etanol yang distandarisasi oleh rutin dan quercetin pada
tikus hiperglikemik yang diinduksi aloksan. Buletin
Farmasi Lanjutan 4(suppl 2): 613-618.
Tiwari, AK dan Rao, JM 2002. Diabetes melitus dan berbagai
pendekatan terapi fitokimia: Status sekarang dan
prospek masa depan. Sains Saat Ini 83(1): 30–38.
Trivedi, N. dan Rawal, UM 2000. Evaluasi hepatoprotektif
dan toksikologi Andrographis paniculata pada kerusakan
hati berat. Jurnal Farmakologi India 32(5): 288–293.
Ucche, S., Marceila, C., Sudarsono dan Nugroho, AE
2015. Kajian Histologi Efek Kombinasi Sambiloto
(Andrographis paniculata Burm. F. Ness) dan Mimba
(Azadirachta indica A. Juss) pada Diabetes
Machine Translated by Google
2160 Anwar dkk./ IFRJ 24(5): 2153-2160

tikus dan toksisitas akutnya. Jurnal Internasional Farmasi

dan Penelitian Klinis 7(4): 231–238.
Verma, A., Dewangan, P., Disha, K. dan Kela, SP
2013. Aktivitas hipoglikemik dan hipolipidemik skopoletin
(turunan kumarin) pada tikus diabetes yang diinduksi
streptozotocin. International Journal of Pharmaceutical
Sciences Review and Research 22(1): 79–83.

Wild, S., Roglic, G., Green, A., Sicree, R. dan King, H.

2004. Perkiraan prevalensi global diabetes untuk tahun
2000 dan proyeksi untuk tahun 2030. Perawatan
Diabetes 27(5): 1047–1053.
Yu, BC, Hung, CR, Chen, WC dan Cheng, JT
2003. Efek antihiperglikemik andrographolide pada tikus
diabetes yang diinduksi streptozotocin. Planta Medica
69(12): 1075–1079.
Zhang, C., Gui, L., Xu, Y., Wu, T. dan Liu, D. 2013.
Efek pencegahan andrographolide pada perkembangan
diabetes pada tikus NOD diabetes autoimun dengan
menginduksi toleransi imun. Imunofarmakologi
Internasional 16(4): 451–456.
Zhang, XF dan Tan, BK 2000. Sifat antihiperglikemik dan
antioksidan Andrographis paniculata pada tikus normal
dan diabetes. Farmakologi dan Fisiologi Klinis dan
Eksperimental 27(5-6): 358–363.