DAFTAR PUSTAKA

Azizah, D.N., dan Faramayuda, F. 2014. Penetapan Kadar Flavonoid Metode

AlCl3 pada Ekstrak Metanol Kulit Buah Kakao (Theobroma Cacao L.).
Kartika Jurnal Ilmiah Farmasi Vol 2(2).

Ikhlas, N. 2013. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Herba Kemangi (Ocimum

Americanum Linn) dengan Metode DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazin).
Skripsi UIN Syarif Hidayatulloh. Jakarta – Indonesia.

Inggrid, M., dan Santoso, H. 2014. Esktraksi Antioksidan dan Senyawa Aktif dari
Buah Kiwi (Actinida Deliciosa). Lembaga Penelitian dan Pengabdian
Kepada Masyarakat. Universitas Katolik Parahyangan.

Kurnia, P.M. 2015. Ekstraksi Senyawa Fenolik Pada Kulit Ari Kacang Tanah
(Arachis Hypogaea L.) Menggunakan Irradiasi Microwave Dan Uji
Aktivitas Antioksidan. Tesis Universitas Negeri Semarang. Semarang –
Jawa Tengah Indonesia.

Latifah. 2015. Identifikasi Golongan Senyawa Flavonoid dan Uji Aktivitas

Antioksidan pada Ekstrak Rimpang Kencur Kaempferia galanga L. dengan
Metode DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil). Skripsi Universitas Islam
Negeri Maulana Malik Ibrahim. Malang – Jawa Timur Indonesia.

Malik, A. 2019. Bioaktivitas Fraksi Etil Asetat dan Aktivitas Antidiabetes

Senyawa Fenolik dari Daun Sirih (Piper betle L). Disertasi Universitas
Sumatera Utara. Medan – Sumatera Utara Indonesia.

Novi, P. 2017. Identifikasi Senyawa Flavonoid pad Tumbuhan Daun Sirih (Piper
betle L.). Program Studi Pendidikan IPA PPs Universitas Syiah Kuala,
Banda Aceh – Aceh Indonesia.

Pertiwi, L.L. 2016. Aktivitas Antioksidan Tanaman Obat Tradisional Bali dan
Isolasi Senyawa Terpenoid dari Ekstrak Metanol Daun Pare (Momordica
charantia). Tesis Institut Teknologi Sepuluh Nopember. Surabaya – Jawa
Timur Indonesia.

Rollando. 2012. Uji Aktivitas Antioksidan Menggunakan Radikal 1,1-difenil-2-

pikrilhidrazil (DPPH) dan Penetapan Kandungan Fenolik Total Fraksi Air
Ekstrak Metanol Daun Sirih (Piper betle L.). Skripsi Universitas Sanata
Dharma. Yogyakarta – Jawa Tengah Indonesia.

Yanlinastuti., dan Fatimah, S. 2016. Pengaruh Konsentrasi Pelarut Untuk

Menentukan Kadar Zirkonium dalam Paduan U-Zr dengan Menggunakan
Metode Spektrofotometri UV-Vis. Banten: Jurnal ISSN Vol 1(17).
 LAMPIRAN

1. Lampiran Perhitungan
a. Perhitungan Kadar Air dan Rendemen Hasil Ekstraksi
 Uji Kadar Air
Kadar air = (𝐴−𝐵)/𝐴 x 100 %
Keterangan:
A = Berat sampel sebelum dikeringkan (kg)
B = Berat sampel setelah dikeringkan (kg)

Kadar air = (0,5 kg − 0,4 kg) x 100%

0,5 kg
= 0,1 x 100%
= 10 %

 % Rendemen Hasil Ekstraksi

Rendemen = B x 100%
A
Keterangan:
A = Berat sampel sebelum ekstraksi
B = Berat sampel setelah ekstraksi

Rendemen n-Heksan = 10 g x 100%

400 g
= 2,5%
Rendemen Etil Asetat = 30 g x 100%
400 g
= 7,5%
Rendemen Metanol = 80 g x 100%
400 g
= 20%
b. Kurva Standar Kuersetin
Konsentrasi Absorbansi
0 0,138
40 1,054
50 1,224
60 1,465
70 1,786
80 1,999

Standar Kuersetin
2.5
y = 0.0232x + 0.1164
Absorbansi (nm)

2
R² = 0.9963
1.5
1

0.5
0
0 20 40 60 80 100
Konsentrasi (ppm)

c. Perhitungan Uji Total Flavonoid Fraksi Metanol

Diketahui persamaan regresi linier kuersetin:

y=ax+b
y = 0,0232 x + 0,1164
R2 = 0,9963

Kandungan Kandungan Kadar

No Absorbansi Flavonoid Awal Flavonoid Total flavonoid
(mg/L) (mgQE/g Ekstrak) (%)
1 0,823 30,45 6,09
2 0,861 32,09 6,41 0,644
3 0,908 34,12 6,82
Rata-rata 32,22 6,44
  Perhitungan Flavonoid Awal (mg/L)
y=ax+b
y = 0,0232 x + 0,1164
Dimana: y = Absorbansi dan x = Konsentrasi (C)
Maka,
C = Absorbansi – b
a
C1 = 0,823 - 0,1164 = 30,45 mg/L
0,0232
C2 = 0,861 - 0,1164 = 32,09 mg/L
0,0232
C3 = 0,908 - 0,1164 = 34,12 mg/L
0,0232

C rata-rata = 32,22 mg/L

 Perhitungan Flavonoid Total (mgQE/g)

Kadar total (%) = C x V
m
Keterangan: C = Konsentrasi kuersetin (mg/L)
M = Berat ekstrak (g) = 50mg = 0,05g
V = Volume Ekstrak (L) = 10ml = 0,01 L
C0 = Kadar total flavonoid (%)
Maka,
1. C = 30,45mg/L x 0,01L
0,05 g
= 0,3045mg
0,05 g
= 6,09 mg QE/g
= 0,00609 g/g x 100%
= 0,609%
 2. C = 32,09 mg/L x 0,01L
0,05 g
= 0,3209mg
0,05 g
= 6,41 mg QE/g
= 0,00641 g/g x 100%
= 0,641%

3. C = 34,12 mg/L x 0,01L

0,05 g
= 0,3412mg
0,05 g
= 6,82 mg QE/g
= 0,00682 g/g x 100%
= 0,682%
Rata-rata konstrasi flavonoid total = 6,44 mgQE/g atau 0,644%

d. Perhitungan Uji Total Flavonoid Fraksi Metanol

Diketahui persamaan regresi linier kuersetin:
y=ax+b
y = 0,0232 x + 0,1164
R2 = 0,9963

Kandungan Kandungan Kadar

No Absorbansi Flavonoid Awal Flavonoid Total flavonoid
(mg/L) (mgQE/g Ekstrak) (%)
1 0,608 21,18 4,23
2 0,681 24,33 4,86 0,531
3 0,864 32,22 6,84
Rata-rata 25,91 5,31
  Perhitungan Flavonoid Awal (mg/L)
y=ax+b
y = 0,0232 x + 0,1164
Dimana: y = Absorbansi dan x = Konsentrasi (C)
Maka,
C = Absorbansi – b
a
C1 = 0,608 - 0,1164 = 21,18 mg/L
0,0232
C2 = 0,681 - 0,1164 = 24,33 mg/L
0,0232
C3 = 0,864 - 0,1164 = 32,22 mg/L
0,0232
C rata-rata = 25,91 mg/L

 Perhitungan Flavonoid Total (mgQE/g)

Kadar total (%) = C x V
m
Keterangan: C = Konsentrasi kuersetin (mg/L)
M = Berat ekstrak (g) = 50mg = 0,05g
V = Volume Ekstrak (L) = 10ml = 0,01 L
C0 = Kadar total flavonoid (%)

Maka,

1. C = 21,18 mg/L x 0,01L

0,05 g
= 0,2118mg
0,05 g
= 4,236 mg QE/g
= 0,00423 g/g x 100%
= 0,423%
 2. C = 24,33 mg/L x 0,01L
0,05 g
= 0,2433mg
0,05 g
= 4,866 mg QE/g
= 0,00486 g/g x 100%
= 0,486%

3. C = 34,22 mg/L x 0,01L

0,05 g
= 0,3412mg
0,05 g
= 6,844 mg QE/g
= 0,00684 g/g 100%
= 0,684%

Rata-rata Flavonoid Total = (4,236+4,866+6,844)/3 = 5,315 mgQE/g atau 0,531%

e. Perhitungan Uji Total Flavonoid Fraksi n-Heksan

Diketahui persamaan regresi linier kuersetin:
y=ax+b
y = 0,0232 x + 0,1164
R2 = 0,9963

Kandungan Kandungan Kadar

No Absorbansi Flavonoid Awal Flavonoid Total flavonoid
(mg/L) (mgQE/g Ekstrak) (%)
1 0,388 11,70 2,34
2 0,363 10,62 2,12 0,208
3 0,326 9,03 1,80
Rata-rata 10,45 2,08
  Perhitungan Flavonoid Awal (mg/L)
y=ax+b
y = 0,0232 x + 0,1164
Dimana: y = Absorbansi dan x = Konsentrasi (C)
Maka,
C = Absorbansi – b
a
C1 = 0,388 - 0,1164 = 11,70 mg/L
0,0232
C2 = 0,363 - 0,1164 = 10,62 mg/L
0,0232
C3 = 0,326 - 0,1164 = 9,03 mg/L
0,0232
C rata-rata = 10,45 mg/L

 Perhitungan Flavonoid Total (mgQE/g)

Kadar total (%) = C x V
m
Keterangan: C = Konsentrasi kuersetin (mg/L)
M = Berat ekstrak (g) = 50mg = 0,05g
V = Volume Ekstrak (L) = 10ml = 0,01 L
C0 = Kadar total flavonoid (%)

Maka,

1. C = 11,70 mg/L x 0,01L

0,05 g
= 0,739 mg
0,05 g
= 2,34 mg QE/g
= 0,00234 g/g x 100%
= 0,234%
 2. C = 10,62 mg/L x 0,01L
0,05 g
= 0,1062mg
0,05 g
= 2,12 mg QE/g
= 0,00212 g/g x 100%
= 0,212%

3. C = 9,03 mg/L x 0,01L

0,05 g
= 0,0903mg
0,05 g
= 1,80 mg QE/g
= 0,00180 g/g x 100%
= 0,180%

Rata-rata Flavonoid Total = (2,34+2,12+1,80)/3 = 2,086 mgQE/g atau 0,208%

f. Perhitungan %Inhibisi dan IC50 Ekstrak Metanol Daun Sirih Kuning

% Inhibisi Radikal DPPH = Absorbansi Blanko - Absorbansi Sampel X 100%

Absorbansi Blanko

Ulangan ke Konsentrasi (ppm) % Inhibisi Absorbansi IC50 (ppm)

0 - 0,575

20 41,39 0,337

40 51,4 0,279 38,865

1
60 58,95 0,236

80 66,95 0,190

100 74,43 0,147

 0 - 0,618

20 45,63 0,336

40 55,50 0,275
2
60 63,75 0,224 27,846

80 68,12 0,197

100 76,05 0,148

Rata-rata 33,355

Pengulangan 1
1. % Inhibisi = 0,575 – 0,337 x 100% = 41,39 %
0,575

2. % Inhibisi = 0,575 – 0,279 x 100% = 51,40 %

0,575

3. % Inhibisi = 0,575 – 0,236 x 100% = 58,95 %

0,575

4. % Inhibisi = 0,575 – 0,190 x 100% = 66,95 %

0,575

5. % Inhibisi = 0,575 – 0,147 x 100% = 74,43 %

0,575

Pengulangan 2
1. % Inhibisi = 0,618 – 0,336 x 100% = 45,63 %
0,618

2. % Inhibisi = 0,618 – 0,275 x 100% = 55,50 %

0,618
3. % Inhibisi = 0,618 – 0,224 x 100% = 63,75 %
0,618

4. % Inhibisi = 0,618 – 0,197 x 100% = 68,12 %

0,618

5. % Inhibisi = 0,618 – 0,148 x 100% = 76,05 %

0,618

 Perhitungan IC50 Ekstrak daun sirih kuning

Diketahui persamaan regresi linier:
1. y = ax + b
y = 0.4082x + 34.135
Nilai y diganti dengan 50 (penghambatan DPPH 50%)
50 = 0.4082x + 34.135
Nilai x merupakan nilai IC50
X = 50 – 34,135
0,4082
= 38,865 ppm

2. y = ax + b
y = 0.3673x + 39.772
Nilai y diganti dengan 50 (penghambatan DPPH 50%)
50 = 0.3673x + 39.772
Nilai x merupakan nilai IC50
X = 50 – 39,772
0.3673
= 27,846 ppm

Rata-rata nilai IC50 = (38,865+27,846)/2 = 33,355 ppm

 g. Perhitungan %Inhibisi dan IC50 Ekstrak Etil Asetat Daun Sirih Kuning

% Inhibisi Radikal DPPH = Absorbansi Blanko - Absorbansi Sampel X 100%

Absorbansi Blanko

Ulangan ke Konsentrasi (ppm) % Inhibisi Absorbansi IC50 (ppm)

0 - 1,343

20 40,357 0,810

40 55,547 0,597 37,731

1
60 67,609 0,435

80 77,885 0,297

100 90,171 0,132

0 - 1,278

20 37,480 0,799

40 52,425 0,608
2
60 65,023 0,447 33,250

80 77,543 0,287

100 90,062 0,127

Rata-rata 35,490

Pengulangan 1
1. % Inhibisi = 1,343 – 0,810 x 100% = 40,357 %
1,343

2. % Inhibisi = 1,343 – 0,597 x 100% = 55,547 %

1,343

3. % Inhibisi = 1,343 – 0,435 x 100% = 67,609 %

1,343
4. % Inhibisi = 1,343 – 0,297 x 100% = 77,885 %
1,343

5. % Inhibisi = 1,343 – 0,132 x 100% = 90,171 %

1,343

Pengulangan 2
1. % Inhibisi = 1,278 – 0,799 x 100% = 37,480 %
1,278

2. % Inhibisi = 1,278 – 0,608 x 100% = 52,425 %

1,278

3. % Inhibisi = 1,278 – 0,447x 100% = 65,023 %

1,278

4. % Inhibisi = 1,278 – 0,287 x 100% = 77,543 %

1,278

5. % Inhibisi = 1,278 – 0,127 x 100% = 90,062 %

1,278
 Perhitungan IC50 Ekstrak daun sirih kuning
Diketahui persamaan regresi linier:
1. y = ax + b
y = 0.6514x + 25.422
Nilai y diganti dengan 50 (penghambatan DPPH 50%)
50 = 0.6514x + 25.422
Nilai x merupakan nilai IC50
X = 50 – 25,422
0,6514
= 37,731 ppm
 2. y = ax + b
y = 0.6098x + 29.724
Nilai y diganti dengan 50 (penghambatan DPPH 50%)
50 = 0.6098x + 29.724
Nilai x merupakan nilai IC50
X = 50 – 29,724
0.6098
= 33,250 ppm

Rata-rata nilai IC50 = (37,731+33,250)/2 = 35,490 ppm

h. Perhitungan %Inhibisi dan IC50 Ekstrak n-Heksan Daun Sirih Kuning

% Inhibisi Radikal DPPH = Absorbansi Blanko - Absorbansi Sampel X 100%
Absorbansi Blanko

Ulangan ke Konsentrasi (ppm) % Inhibisi Absorbansi IC50 (ppm)

0 - 1,136

20 9,947 1,023

40 14,172 0,975 1103,911

1
60 14,525 0,969

80 15,141 0,964

100 18,750 0,923

0 1,126

20 9,414 1,020

40 12,304 0,970
2
60 14,298 0,965 1108,119

80 14,742 0,960

100 17,673 0,927

Rata-rata 1105,015
Pengulangan 1
1. % Inhibisi = 1,136 – 0,1023 x 100% = 9,947 %
1,136

2. % Inhibisi = 1,136 – 0,975 x 100% = 14,172 %

1,136

3. % Inhibisi = 1,136 – 0,969 x 100% = 14,525 %

1,136

4. % Inhibisi = 1,136 – 0,964 x 100% = 15,141 %

1,136

5. % Inhibisi = 1,136 – 0,923 x 100% = 18,750 %

1,136

Pengulangan 2
1. % Inhibisi = 1,126 – 1,020 x 100% = 9,414 %
1,126

2. % Inhibisi = 1,126 – 0,970 x 100% = 12,304 %

1,126

3. % Inhibisi = 1,126 – 0,965 x 100% = 14,298 %

1,126

4. % Inhibisi = 1,126 – 0,960 x 100% = 14,742 %

1,126

5. % Inhibisi = 1,126 – 0,927 x 100% = 17,673 %

1,126
 Perhitungan IC50 Ekstrak daun sirih kuning
Diketahui persamaan regresi linier:
1. y = ax + b
y = 0.0372x + 8.9345
Nilai y diganti dengan 50 (penghambatan DPPH 50%)
50 = 0.0372x + 8.9345
Nilai x merupakan nilai IC50
X = 50 – 8,9345
0,0372
= 1103,911 ppm

2. y = ax + b
y = 0.0379x + 7.9994
Nilai y diganti dengan 50 (penghambatan DPPH 50%)
50 = 0.0379x + 7.9994
Nilai x merupakan nilai IC50
X = 50 – 7,9994
0.0379
= 1108,119 ppm

Rata-rata nilai IC50 = (1103,911+1108,119)/2 = 1106,015 ppm

2. Dokumentasi Penelitian

Daun sirih kuning sebelum Daun sirih kuning setelah

dikeringkan dikeringkan

Proses penyaringan setelah Proses pemekatan ekstrak

maserasi menggunakan Rotary
evaporator
Ekstrak daun sirih kuning
setelah di evaporasi

Sampel uji flavonoid daun

sirih kuning

Sampel uji antioksidan

daun sirih kuning

Proses pengecekan kadar

flavonoid dan antioksidan
menggunakan
Spektrofotometer