Tutorial Excel 3

3a. Cara Mengolah Data Hasil Penentuan Kadar Total Flavonoid (KTF) dengan Microsoft Office Exc

Ihsani Channel - Science and Computer Tutorial

 ngan Microsoft Office Excel

al
* Alat yang digunakan adalah 96 wells Microplate Reader (Epoch Biotech)

* Penentuan Kadar Total Flavonoid (KTF) dilakukan menggunakan Baku Standar Quercetin

OH 1. Quercetin bereaksi dengan AlCl3 membentuk kompleks yang serapannya dapat diukur pada
HO O panjang gelombang 430 nm (tergantung baku standar dan metode yang digunakan, literatur
OH
2. Serapan kompleks Quercetin-AlCl3 yang terukur sebanding dengan konsentrasi Quercetin d
OH setara dengan konsentrasi flavonoid yang akan ditetapkan dalam sampel
OH O 3. Kadar total flavonoid dalam sampel ditetapkan sebagai mgQE/g sampel
rapannya dapat diukur pada
de yang digunakan, literatur lain: 425 atau 510 nm)
gan konsentrasi Quercetin dan
Results
Quercetin Ekstrak X
1 2 3 4 5 6 7 8
A 0.874 0.904 0.865 0.424 0.411 0.436
B 0.687 0.790 0.676 0.152 0.148 0.146
C 0.586 0.497 0.523
D 0.412 0.359 0.367
E 0.200 0.219 0.199
F 0.088 0.089 0.091
G
H

A123 = Quercetin
A456 = Ekstrak X
9 10 11 12
430
430
430
430

430

430
430
430
Pastikan Data ini tercatat pada Log Book Peneliltian

Berat Quercetin = 0.010 g

Dilarutkan dalam = 10 ml
Pelarut yang digunakan = Etanol
Kons. Larutan Induk Quercetin = 1000 µg/mL
Kons. Larutan Quercetin yang diuji = 100 80

Berat Ekstrak = 0.010 g

Dilarutkan dalam = 10 ml
Pelarut yang digunakan = Etanol
Kons. Larutan Induk Ekstrak = 1000 µg/mL
Kons. Larutan Ekstrak yang diuji = 1000 µg/mL
100 µg/mL

Data Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Baku Standar Quercetin dan Larutan Uji Ekstrak X

Quercetin Ekstrak X
1 2 3 4 5 6
A 0.874 0.904 0.865 0.424 0.411 0.436
B 0.687 0.790 0.676 0.152 0.148 0.146
C 0.586 0.497 0.523
D 0.412 0.359 0.367
E 0.200 0.219 0.199
F 0.088 0.089 0.091
G
H

4 5 6
Pembuatan Kurva Standar Kompleks Quercetin-AlCl 3

Konsentrasi A. Pengukuran A
Rata-Rata
(µg/mL) 1 2 3 Quercetin
100 0.874 0.904 0.865 0.881 0.792
80 0.687 0.790 0.676 0.718 0.628
60 0.586 0.497 0.523 0.535 0.446
40 0.412 0.359 0.367 0.379 0.290
20 0.200 0.219 0.199 0.206 0.117
Blanko 0.088 0.089 0.091 0.089

1 A. Kompleks Quercetin = (A. Pengukuran) - (A blanko)

2 Kurva Standar hubungan antara konsentrasi Kompleks Quercetin-AlCl3 (x) dengan Absorbansinya (
0.90
0.80
Absorbansi

f(x) = 0.008441666666667 x − 0.051966666666667

0.70 R² = 0.999592163428262
0.60
0.50
0.40
0.30
0.20
0.10
0.00
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110
Konsentrasi (µg/mL)

Penentuan Kadar Total Flavonoid (KTF) Ekstrak X

Konsentrasi A. Pengukuran A.
Rata-Rata
(µg/mL) 1 2 3 Larutan Uji
1000 0.424 0.411 0.436 0.424
0.334
Blanko 0.088 0.089 0.091 0.089

1 Menghitung Konsentrasi Flavonoid dalam Larutan Ekstrak yang setara dengan Konsentrasi Querceti
(dihitung berdasarkan Persamaan Regresi dari Kurva Standar Kompleks Quercetin-AlCl 3)
y a b y=ax+b
0.334 0.0084 -0.052 ax=y-b
x=(y-b)/a
x= 45.952 µg/mL

2 Mengkonversi nilai x (µg/mL) menjadi X (mg/mL)

X= 0.045952 mg/mL
3 Menghitung nilai KTF (mgQE/g ekstrak) * FP merupakan nilai yang menunjukkan berapa k
KTF = V(mL) * X (mg/mL) * FP dapat diencerkan untuk mendapatkan konsentras
g ekstrak
FP = Konsentrasi Larutan Induk
KTF = 45.95 mgQE/g ekstrak Konsentrasi Larutan encer

Contoh 1: Suatu larutan dengan konsentrasi 1000

menjadi 100 µg/mL. Maka nilai FP nya = 1000 µ

* FP juga dapat didefinisikan sebagai perbanding

larutan encer dengan volume larutan pekat yang d
larutan encer tersebut.

FP = Volume Larutan Encer

Volume Larutan Pekat

Contoh: Suatu larutan dengan volume 250 mL die

memipet 20 mL larutan tersebut ke dalam labu tak
ditambahkan dengan pelarut hingga tanda batas. M
100 mL / 20 mL = 5
 Youtube: Ihsani Channel

60 40 20 µg/mL

= 10000 µg / 10 mL = 1,000 µg/mL

Boleh dilakukan dengan variasi konsentrasi,

misalnya: 1000, 800, 600, 400, 200, dan 100 µg/mL
Konsentrasi yang dipilih untuk penentuan kadar
adalah konsentrasi yang nilai absorbansinya
masuk dalam range nilai absorbansi baku standar

dan Larutan Uji Ekstrak X

7 8 9 10 11 12

1000 µg/ml
100 µg/ml
AlCl 3 (x) dengan Absorbansinya (y)

etara dengan Konsentrasi Quercetin

pleks Quercetin-AlCl 3)
n nilai yang menunjukkan berapa kali suatu larutan induk
an untuk mendapatkan konsentrasi larutan encer tertentu

Konsentrasi Larutan Induk (µg/mL)

Konsentrasi Larutan encer (µg/mL)

u larutan dengan konsentrasi 1000 µg/mL jika diencerkan

/mL. Maka nilai FP nya = 1000 µg/mL / 100 µg/mL = 10

didefinisikan sebagai perbandingan antara volume

ngan volume larutan pekat yang diambil untuk membuat

Volume Larutan Encer (mL)

Volume Larutan Pekat (mL)

arutan dengan volume 250 mL diencerkan dengan cara

larutan tersebut ke dalam labu takar 100 mL, kemudian
ngan pelarut hingga tanda batas. Maka nilai FP nya =
Data Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Baku Standar Quercetin dan Larutan Uji Ekstrak X

Quercetin Ekstrak X
1 2 3 4 5 6
A 0.874 0.904 0.865 0.424 0.411 0.436
B 0.687 0.790 0.676 0.152 0.148 0.146
C 0.586 0.497 0.523
D 0.412 0.359 0.367
E 0.200 0.219 0.199
F 0.088 0.089 0.091
G
H

4 5 6

Pembuatan Kurva Standar Kompleks Quercetin-AlCl 3

Konsentrasi A. Pengukuran A
Rata-Rata
(µg/mL) 1 2 3 Quercetin

1 A. Kompleks Quercetin = (A. Pengukuran) - (A blanko)

2 Kurva Standar hubungan antara konsentrasi Kompleks Quercetin-AlCl3 (x) dengan Absorbansinya (y)
Penentuan Kadar Total Flavonoid (KTF) Ekstrak X

Konsentrasi A. Pengukuran A.
Rata-Rata
(µg/mL) 1 2 3 Sampel

Blanko

1 Menghitung Konsentrasi Flavonoid dalam Larutan Ekstrak yang setara dengan Konsentrasi Quercetin
(dihitung berdasarkan Persamaan Regresi dari Kurva Standar Kompleks Quercetin-AlCl 3)
y a b

x= µg/mL

2 Mengkonversi nilai x (µg/mL) menjadi X (mg/mL)

X= mg/mL

3 Menghitung nilai KTF (mgQE/g ekstrak)

KTF = V(mL) * X (mg/mL) * FP
g ekstrak

KTF = mgQE/g ekstrak

dan Larutan Uji Ekstrak X

7 8 9 10 11 12

1000 µg/ml
100 µg/ml

AlCl3 (x) dengan Absorbansinya (y)

tara dengan Konsentrasi Quercetin
pleks Quercetin-AlCl 3)
Pastikan Data ini tercatat pada Log Book Peneliltian

Berat Quercetin = 0.010 g

Dilarutkan dalam = 10 ml
Pelarut yang digunakan = Etanol
Kons. Larutan Induk Quercetin = 1000 µg/mL
Kons. Larutan Quercetin yang diuji = 100 80

Berat Ekstrak = 0.010 g

Dilarutkan dalam = 10 ml
Pelarut yang digunakan = Etanol
Kons. Larutan Induk Ekstrak = 1000 µg/mL
Kons. Larutan Ekstrak yang diuji = 1000 µg/mL

Data Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Baku Standar Quercetin dan Larutan Uji Ekstrak X

Quercetin Ekstrak X
1 2 3 4 5 6
A 0.874 0.904 0.865 0.424 0.411 0.436
B 0.687 0.790 0.676
C 0.586 0.497 0.523
D 0.412 0.359 0.367
E 0.200 0.219 0.199
F 0.088 0.089 0.091
G
H

Pembuatan Kurva Standar Kompleks Quercetin-AlCl 3

Konsentrasi A. Pengukuran A
Rata-Rata
(µg/mL) 1 2 3 Quercetin
100 0.874 0.904 0.865 0.881 0.792
80 0.687 0.790 0.676 0.718 0.628
60 0.586 0.497 0.523 0.535 0.446
40 0.412 0.359 0.367 0.379 0.290
20 0.200 0.219 0.199 0.206 0.117
Blanko 0.088 0.089 0.091 0.089

1 A. Kompleks Quercetin = (A. Pengukuran) - (A Blanko)

2 Kurva Standar hubungan antara konsentrasi Kompleks Quercetin-AlCl3 (x) dengan Absorbansinya (y)
0.90
Absorbansi

0.80
f(x) = 0.008441666666667 x − 0.051966666666667
0.70 R² = 0.999592163428262
0.60
0.50
 0.90

Absorbansi
0.80
f(x) = 0.008441666666667 x − 0.051966666666667
0.70 R² = 0.999592163428262
0.60
0.50
0.40
0.30
0.20
0.10
0.00
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110
Konsentrasi (µg/mL)

Penentuan Kadar Total Flavonoid (KTF) Ekstrak X

A. A. A. x X
Pengulangan
Pengukuran Blanko Sampel (µg/mL) (mg/mL)
1 0.424 0.089 0.335 46.071 0.04607
2 0.411 0.088 0.323 44.643 0.04464
3 0.436 0.091 0.345 47.262 0.04726

1 Menghitung Konsentrasi Flavonoid dalam Larutan Ekstrak yang setara dengan Konsentrasi Quercetin
x= ? µg/mL

2 Mengkonversi nilai x (µg/mL) menjadi X (mg/mL)

X= ? mg/mL

3 Menghitung nilai KTF (mgQE/g ekstrak)

KTF = V(mL) * X (mg/mL) * FP
g ekstrak

4. Menghitung Rata-Rata Nilai KTF

5. Menghitung Standar Deviasi

 Youtube: Ihsani Channel

60 40 20 µg/mL

= 10000 µg / 10 mL = 1,000 µg/mL

an Larutan Uji Ekstrak X

7 8 9 10 11 12

AlCl3 (x) dengan Absorbansinya (y)

 a= 0.0084
b= -0.052
y= A. Sampel = ?

y=ax+b
ax=y-b
x=(y-b)/a

KTF Rata-Rata KTF KTF ± SD

SD
(mgQE/g) (mgQE/g) (mgQE/g)
46.07
44.64 45.99 1.31 45,99 ± 1,31
47.26

tara dengan Konsentrasi Quercetin

Data Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Baku Standar Quercectin dan Larutan Uji Ekstrak

Quercetin Ekstrak X
1 2 3 4 5 6
A 0.874 0.904 0.865 0.424 0.411 0.436
B 0.687 0.790 0.676
C 0.586 0.497 0.523
D 0.412 0.359 0.367
E 0.200 0.219 0.199
F 0.088 0.089 0.091
G
H

Pembuatan Kurva Standar Kompleks Quercetin-AlCl 3

Konsentrasi A. Pengukuran A
Rata-Rata
(µg/mL) 1 2 3 Quercetin
100 0.874 0.904 0.865 0.881 0.792
80 0.687 0.790 0.676 0.718 0.628
60 0.586 0.497 0.523 0.535 0.446
40 0.412 0.359 0.367 0.379 0.290
20 0.200 0.219 0.199 0.206 0.117
Blanko 0.088 0.089 0.091 0.089

1 A. Kompleks Quercetin = (A. Pengukuran) - (A Blanko)

2 Kurva Standar hubungan antara konsentrasi Kompleks Quercetin-AlCl3 (x) dengan Absorbansinya (y)
0.90
Absorbansi

0.80
f(x) = 0.008441666666667 x − 0.051966666666667
0.70 R² = 0.999592163428262
0.60
0.50
0.40
0.30
0.20
0.10
0.00
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110
Konsentrasi (µg/mL)
Penentuan Kadar Total Flavonoid (KTF) Ekstrak X

A. A. A. x X
Pengulangan
Pengukuran Blanko Sampel (µg/mL) (mg/mL)
1 0.424 0.089
2 0.411 0.088
3 0.436 0.091

1 Menghitung Konsentrasi Flavonoid dalam Larutan Ekstrak yang setara dengan Konsentrasi Quercetin
x= ? µg/mL

2 Mengkonversi nilai x (µg/mL) menjadi X (mg/mL)

X= ? mg/mL

3 Menghitung nilai KTF (mgQE/g ekstrak)

KTF = V(mL) * X (mg/mL) * FP
g ekstrak

4. Menghitung Rata-Rata Nilai KTF

5. Menghitung Standar Deviasi

 dan Larutan Uji Ekstrak

7 8 9 10 11 12

AlCl3 (x) dengan Absorbansinya (y)

a= 0.0084
b= -0.052
y= A. Sampel = ?

y=ax+b
ax=y-b
x=(y-b)/a
 KTF Rata-Rata KTF KTF ± SD
SD
(mgQE/g) (mgQE/g) (mgQE/g)

tara dengan Konsentrasi Quercetin

 Tutorial Excel 3
3b. Cara Mengolah Data Hasil Penentuan Kadar Total Fenolik (KTFe) dengan Microsoft Office Exce

Ihsani Channel - Science and Computer Tutorial

ngan Microsoft Office Excel

al
* Alat yang digunakan adalah 96 wells Microplate Reader (Epoch Biotech)

* Penentuan Kadar Total Fenolik (KTFe) dilakukan menggunakan Baku Standar Asam Galat
O
1. Asam galat bereaksi dengan reagen Folin-Ciocalteu (Mo(VI)) sehingga menyebabkan kompo
HO
OH tereduksi (Mo(V)) dan serapannya dapat diukur pada panjang gelombang 730 nm (tergantu
HO dan metode yang digunakan, literatur lain: 750 nm, 765 nm)
OH 2. Serapan campuran bentuk tereduksi reagen Folin yang terukur sebanding dengan konsentra
setara dengan konsentrasi fenolik yang akan ditetapkan dalam sampel
3. Kadar total fenolik dalam sampel ditetapkan sebagai mgGAE/g sampel
hingga menyebabkan komposisi reagen tersebut
elombang 730 nm (tergantung baku standar

sebanding dengan konsentrasi asam galat dan

Results
Asam Galat Ekstrak X
1 2 3 4 5 6 7 8
A 1.121 1.189 0.987 0.352 0.351 0.35
B 0.836 0.838 0.771
C 0.574 0.684 0.568
D 0.402 0.438 0.375
E 0.302 0.301 0.3
F 0.04 0.039 0.036
G
H

A123 = Asam Galat

A456 = Ekstrak X
9 10 11 12
730
730
730
730

730

730
730
730
Pastikan Data ini tercatat pada Log Book Peneliltian

Berat Asam Galat = 0.010 g

Dilarutkan dalam = 10 ml
Pelarut yang digunakan = Metanol
Kons. Larutan Induk Asam Galat = 1000 µg/mL
Kons. Larutan Asam Galat yang diuji = 100 80

Berat Ekstrak = 0.010 g

Dilarutkan dalam = 10 ml
Pelarut yang digunakan = Metanol
Kons. Larutan Induk Ekstrak = 1000 µg/mL
Kons. Larutan Ekstrak yang diuji = 1000 µg/mL

Data Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Baku Standar Asam Galat dan Larutan Uji Ekstrak

Asam Galat Ekstrak X

1 2 3 4 5 6
A 1.121 1.189 0.987 0.352 0.351 0.350
B 0.836 0.838 0.771
C 0.574 0.684 0.568
D 0.402 0.438 0.375
E 0.302 0.301 0.300
F 0.040 0.039 0.036
G
H

4 5 6

Pembuatan Kurva Standar Larutan Asam Galat

Konsentrasi A. Pengukuran A
Rata-Rata
(µg/mL) 1 2 3 Asam Galat
 100
80
60
40
20
Blanko

1 A. Asam Galat = A. Pengukuran - A. Blanko

2 Kurva Standar hubungan antara Konsentrasi (x) dengan Absorbansi (y) larutan standar asam galat

Penentuan Kadar Total Fenolik (KTFe) Ekstrak X

Konsentrasi A. Pengukuran A.
Rata-Rata
(µg/mL) 1 2 3 Sampel

Blanko

1 Menghitung Konsentrasi Fenolik dalam Larutan Ekstrak yang setara dengan Konsentrasi Asam Gala
(dihitung berdasarkan Persamaan Regresi dari Kurva Standar Asam Galat)
y a b y=ax+b
ax=y-b
x=(y-b)/a
x= µg/mL

2 Mengkonversi nilai x (µg/mL) menjadi X (mg/mL)

X= mg/mL

3 Menghitung nilai KTFe (mgGAE/g ekstrak)

KTFe = V(mL) * X (mg/mL) * FP
g ekstrak
KTFe = mgGAE/g ekstrak
 Youtube: Ihsani Channel

60 40 20 µg/mL

= 10000 µg / 10 mL = 1,000 µg/mL

Boleh dilakukan dengan variasi konsentrasi.

dan Larutan Uji Ekstrak

7 8 9 10 11 12

1000 µg/ml
y) larutan standar asam galat

dengan Konsentrasi Asam Galat

Pastikan Data ini tercatat pada Log Book Peneliltian

Berat Asam Galat = 0.010 g

Dilarutkan dalam = 10 ml
Pelarut yang digunakan = Metanol
Kons. Larutan Induk Asam Galat = 1000 µg/mL
Kons. Larutan Asam Galat yang diuji = 100 80

Berat Ekstrak = 0.010 g

Dilarutkan dalam = 10 ml
Pelarut yang digunakan = Metanol
Kons. Larutan Induk Ekstrak = 1000 µg/mL
Kons. Larutan Ekstrak yang diuji = 1000 µg/mL

Data Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Baku Standar Asam Galat dan Larutan Uji Ekstrak X

Asam Galat Ekstrak X

1 2 3 4 5 6
A 1.121 1.189 0.987 0.352 0.351 0.350
B 0.836 0.838 0.771
C 0.574 0.684 0.568
D 0.402 0.438 0.375
E 0.302 0.301 0.300
F 0.040 0.039 0.036
G
H

Pembuatan Kurva Standar Larutan Asam Galat

Konsentrasi A. Pengukuran A
Rata-Rata
(µg/mL) 1 2 3 As. Galat
100
80
60
40
20
Blanko

1 A. Asam Galat = A. Pengukuran - A. blanko

2 Kurva Standar hubungan antara Konsentrasi larutan standar asam galat (x) dengan Absorbansinya (y)
Penentuan Kadar Total Fenolik (KTFe) Ekstrak X

A. A. A. x X
Pengulangan
Pengukuran Blanko Sampel (µg/mL) (mg/mL)
1
2
3

1 Menghitung Konsentrasi Fenolik dalam Larutan Ekstrak yang setara dengan Konsentrasi Asam Galat
x= ? µg/mL

2 Mengkonversi nilai x (µg/mL) menjadi X (mg/mL)

X= ? mg/mL

3 Menghitung nilai KTFe (mgGAE/g ekstrak)

KTFe = V(mL) * X (mg/mL) * FP
g ekstrak

4. Menghitung Rata-Rata Nilai KTFe

5. Menghitung Standar Deviasi

 Youtube: Ihsani Channel

60 40 20 µg/mL

= 10000 µg / 10 mL = 1,000 µg/mL

Boleh dilakukan dengan variasi konsentrasi.

dan Larutan Uji Ekstrak X

7 8 9 10 11 12

alat (x) dengan Absorbansinya (y)

 a=
b=
y= A. Sampel = ?

y=ax+b
ax=y-b
x=(y-b)/a

KTFe Rata-Rata KTFe KTFe ± SD

SD
(mgGAE/g) (mgGAE/g) (mgGAE/g)

a dengan Konsentrasi Asam Galat

Like

Subscribe

Share

Comment

Sampai Jumpa Pada Tutorial Menarik Berikutnya