Pengertian mikroskop
Suatu alat yg tdr dr bbrp lensa & tersusun dlm sebuah
tabung (mikroskop majemuk)
Fungsinya utk melihat obyek (objectum=sesuatu yg
diketengahkan) & gerakan halus yg tak teramati olh mata
biasa memperbesar obyek
2
3
CARA KERJA
Cara kerja:
Menggunakan cahaya yg ditembuskan ke obyek
yg diamati
Hasilnya:
Bayangan obyek diperbesar
Daya pisah dipertinggi
Btk proyeksi bayangan
Terbalik (mikroskop sederhana)
Tegak (mikroskop majemuk)
4
5
Daya pisah = daya resolusi
Daya pisah: jarak minimum antara 2 titik yg dpt
dibedakan scr jelas sbg 2 titik oleh mata
Mata manusia yang sehat mempunyai daya resolusi 0,2
mm
Dgn mikroskop cahaya perbesaran 1000x
memungkinkan mata mns membedakan dua buah obyek
yang berjarak satu sama lain sekitar 0,0002 mm (daya
resolusi 0,0002 mm)
Berbagai nilai daya pisah:
Mata = 0,1-0,2 mm
Mikroskop cahaya = 0,2 μm
Mikroskop elektron = 0,1 – 6 nm
6
λ
Rumus daya pisah:
D = k --------------
D : daya pisah n sin αo
k : konstanta (0,61)
λ : panjang gelombang λ cahaya putih: 550 nm = 0,550 μm
n : indeks bias media pengamatan
αo : ½ sudut jatuhnya cahaya pd lensa obyektif dr specimen
Cara memperbesar daya pisah/resolusi:
Konstanta kecil dgn pengaturan jarak
(misal uv)
n diperbesar/dinaikkan dgn pemilihan media mounting preparat
obyektif
Mengubah diafragma
7
n sin αo = Numerical Apertura (NA)
n (indeks bias) berbagai media:
Udara : 1,000
Air : 1,333
Air laut : 1,343
Etanol 100% : 1,367
Formalin: 1,372
Gliserin 100% : 1,475
Kanada balsam : 1,547
Minyak emersi : 1,560
Daya pisah & NA berbagai lensa obyektif:
Lensa obyektif 10 NA: 0,25, D: 1,3 μm
Lensa obyektif 40 NA: 0,70, D: 0,5 μm
Lensa obyektif 100 NA: 1,25, D: 0,3 μm
8
PERBESARAN OBYEK/PREPARAT
9
Misal pd lensa obyektif ada tulisan
40 / 0,55
160 / 0-2,5
Artinya:
40 : perbesaran lensa obyektif
0,55 : NA (Numerical Apertura)
160 : panjang tabung lensa okuler sampai
lensa obyektif (mm)
0-2,5 : ketebalan gelas penutup (mm)
10
JENIS-JENIS MIKROSKOP
11
Mikroskop monokuler & binokuler
Mrp mikroskop cahaya utk mengamati irisan tipis
2 dimensi (panjang & lebar)
Mikroskop stereo
Mrp mikroskop cahaya dgn arah sinar dr atas utk
mengamati 3 dimensi pd sediaan/preparat semi
mikroskopis
Inverted microscope
Mrp mikroskop cahaya dgn arah sinar dr atas,
lensa obyektif di bawah obyek, utk mengamati 3
dimensi pd preparat mikroskopis & preparat yg dpt
dibolak-balik
12
13
14
Mikroskop inverted Mikroskop fase kontras
15
Mikroskop fase kontras
Mrp mikroskop cahaya dgn variasi
pengaturan cahaya shg pd preparat
dpt memberi variasi gelap & terang
sangat kontras colorless
Mikroskop fluoresens
Mrp mikroskop cahaya, dgn sumber
cahaya yg intensitasnya tinggi
(lampu xenon/mercuri), obyek diberi
pewarnaan khusus (pewarna
fluoresens) shg dpt memantulkan
warna khas yg diserap olh bag
tertentu sel
16
Mikroskop flouresens
17
18
Mikroskop elektron
Sumber energinya elektron
Gerakan elektron yang dipercepat dalam suatu
kolom elektromagnet,
Dalam suasana hampa udara (vakum), elektron
akan berkarakter seperti cahaya, dengan λ
100.000x lebih kecil dari cahaya.
Medan listrik dan medan magnet dapat berperan
sebagai lensa dan cermin thd elektron spt pd
lensa optik dalam mikroskop cahaya
19
Ada 2 jenis:
TEM (Transmission Electron Microscope):
elektron ditembuskan ke dalam obyek pengamatan
obyek yang diamati hrs setipis mungkin sehingga dapat
ditembus oleh elektron, atau elektron dipercepat secepat
mungkin sehingga mampu menembus obyek sampai pada
batas tertentu
resolusi hingga 0,1 nm (= 1 angstrom) atau dgn
pembesaran sampai 1.000.000x
SEM (Scanning Electron Microscope)
sinar elektron (electron beam) difokuskan di permukaan
obyek dan mengambil gambarnya dengan mendeteksi
elektron yang muncul dari permukaan obyek
Obyek tidak perlu diiris ultra tipis
resolusi hingga 1 nm atau pembesaran 400.000 x
20
TEM
21
SEM
22
Berdasarkan sumber energi utk membentuk bayangan:
Mikroskop cahaya/optik
Mikroskop elektron
Berdasarkan jumlah lensa okulernya:
Mikroskop monokuler: hy 1 lensa okuler
Mikroskop binokuler: mpy 2 lensa okuler
Berdasarkan kualitas & kesempurnaan komponennya:
Student microscope
Clinical microscope
Research microscope utk pengamatan biasa sampai dgn
menggunakan mikrochip yg komponennya dpt diganti utk
berbagai keperluan sistem pengamatan. Disertai jg dgn
adanya layar monitor
23
Berdasarkan konstruksi & kegunaannya
Mikroskop biologi (biological/medical microscope)
utk mengamati benda tipis & transparan,
penyinaran dr bwh
Mikroskop stereo utk mengamati benda scr 3
dimensi, mpy 2 lensa okuler & 2 lensa obyektif yg
diluruskan. Benda yg diamati dpt tipis, tebal atau
transparan
Mikroskop metalurgi/material khusus utk
pengamatan permukaan logam/kristal atau benda
transparan lain
Mikroskop berkamera → mikroskop yg dilengkapi
dgn kamera utk keperluan dokumentasi
24
25
BAGIAN-BAGIAN MIKROSKOP
26
27
Bagian optik
Lensa okuler
Mrp lensa kompleks
Fungsi: menerima bayangan semu yg
terbentuk
Perbesaran umumnya: 4, 6, 10 x
Lensa obyektif
Mrp lensa kompleks
Fungsi: menerima cahaya yg telah
menembus obyek shg terbentuk
bayangan dr obyek tsb
Perbesaran umumnya: 10, 40, 100 x
dilekatkan pd revolver
Obyektif kuat berukuran lbh pjg dr
obyektif lemah
28
Comparing Powers of Magnification
31
Kondensor
Mrp lensa kompleks
Fungsi: mengumpulkan cahaya yg msk
(dipantulkan olh cermin) & difokuskan ke obyek
Bag ini dilengkapi dgn diafragma
Dpt dinaikturunkan dgn sekrup pengendali
kondensor
Diafragma
Tdp di sebelah bawah kondensor
Fungsi: mengatur byk sedikitnya cahaya yg msk
ke obyek
Cermin
Mpy 2 permukaan: cekung & datar
Fungsi: mengarahkan (menerima &
memantulkan) cahaya ke obyek
32
Bagian mekanik
Tubus
Menghubungkan lensa okuler & obyektif
Ada 2 tipe: yg dpt dinaikturunkan (dgn mikrometer
& makrometer) & yg tdk dpt dinaikturunkan
Revolver
Mrp penukar obyektif yg dpt diputar
Fungsi: utk mengganti lensa obyektif dgn cara
memutar revolver sedemikian rupa shg sampai
terasa berdetik
33
Sekrup pengarah kasar (makrometer)
Fungsi: utk menggerakkna tubus scr kasar shg
obyek yg terfokuskan dpt terlihat
Sekrup pengarah halus (mikrometer)
Fungsi: menggerakkan tubus scr halus & teliti,
digunakan jk obyek telah fokus
Meja sediaan
Ada 2 penjepit utk memegang gelas benda
Bag tengah berlubang utk lewat cahaya
Ada sekrup penggerak gelas benda ke depan &
belakang serta ka kanan & kiri
34
Pemegang
Mrp tempat utk memegang mikroskop ketika
mikroskop diangkat
Sendi inklinasi
Mrp sendi pd pemegang shg pemegang dpt
dimiringkan ke belakang
Sendi ini menghubungkan alat pemegang & bag
kaki
Kaki
Fungsi: agar mikroskop dpt berdiri kokoh
35
LANGKAH2 MENGGUNAKAN
MIKROSKOP
1. Menyiapkan mikroskop
Mengangkat sebaikna dgn 2 tangan, 1 tangan di
pemegang, 1nya di kaki
Saat digunakan, lengan menghadap tempat
duduk & meja obyek berlawanan arah dgn posisi
kita
Utk perawatan, almari penyimpan diberi silika gel
& lampu agar tdk berjamur
Bag optik dibersihkan dgn kain/kertas khusus yg
seratnya halus
36
Bas
Always carry a microscope with one hand holding the arm and
one hand under the base.
2. Tubus dinaikkan dgn makrometer shg obyektif tdk
membentur meja bila revolver diputar
3. Revolver diputar pd obyektif terlemah lebih
dahulu, tepat di bawah okuler. Ciri telah tepat,
akan terasa berdetik
4. Diafragma dibuka sebesar-besarnya dgn cara
menggeser bag yg manonjol
5. Cermin diatur shg cahaya terpantul lewat lubang
pd meja obyek & terlihat merata terangnya pd
lingkaran okuler
Hindari cahaya matahari langsung
Pilih lensa cekung jk cahaya kurang kuat
Jk byk penghalang, jgn menggunakan lensa datar
Jk terlalu silau kecilkan apertura diafragma
38
6. Sediaan diletakkan pd meja dgn dijepit &
diposisikan tepat di bwh lensa obyektif
7. Dgn memperhatikan obyek di samping mikroskop,
makrometer diputar shg tubus turun. Jgn sampai
lensa menyentuh sediaan (pd bbrp mikroskop
biasanya sdh ada alat otomatis utk menghindari
hal tsb)
8. Dgn melihat obyek pd lensa okuler, mikrometer
diputar utk mencari fokus yg plg baik
9. Mengganti dengan perbesaran lebih kuat
Revolver diputar sesuai dgn perbesaran yg dikehendaki
Usahakan pertama kali mencari dgn perbesaran paling
lemah jangan langsung perbesaran kuat
39
10. Stl itu putar mikrometer utk mencari fokus
perbesaran kuatnya. Walaupun dgn perbesaran
lemah fokusnya sdh tepat, bila diganti dgn
perbesaran kuat fokusnya berubah, shg hrs diatur
lagi sampai fokus
11. Utk perbesaran 1000x menggunakan minyak
emersi
12. Biasakan mengamati dgn 2 mata, utk menghindari
keletihan mata
13. Stl pemakaian, mikroskop disimpan dlm posisi
istirahat:
Posisi cermin tegak lurus
Meja benda diturunkan sampai maksimal
Tubus dinaikkan sampai maksimal
Revolver yg berhadapan dgn meja benda pd perbesaran
terlemah
Sekrup penggeser sediaan hrs rata dgn meja benda
jangan sampai menonjol
40