Latarnya

Di era globalisasi ini kita dihadapkan dengan berbagai persaingan global, baik itu dalam hal
ekonomi maupun pendidikan, di sektor ekonomi berbagai negara berusaha meningkatkan
perekonomiannya dengan mengelola sumber daya alam yang ada, dengan menciptakan dan
mengembangkan sektor-sektor industry kecil, menengah dan atas. Dengan memanfaatkan
sumber daya alam dan sumber daya manusia yang ada kita dapat menghindari keterpurukan
ekonomi negara.

Adanya persaingan global dalam sektor ekonomi, kami termotivasi untuk ikut serta dalam
menyelamatkan perekonomian negara, salah satu cara yang kami tempuh adalah dengan
memproduksi senyawa organik dalam hal ini adalah senyawa alkohol, yang nantinya dapat
digunakan di sektor industry sebagai pelarut, obat-obatan dan dapat juga digunakan sebagai salah
satu bahan baku pembuatan gasohol yang kita kenal dengan salah satu bahan bakar pengganti
BBM. Alkohol merupakan senyawa organik yang bersifat polar dan memiliki gugus fungsi
Hidroksil (OH).

Fermentasi adalah proses produksi energi dalam sel dalam keadaan anaerobik (tanpa oksigen).
Secara umum, fermentasi adalah salah satu bentuk respirasi anaerobik, akan tetapi, terdapat
definisi yang lebih jelas yang mendefinisikan fermentasi sebagai respirasi dalam lingkungan
anaerobik dengan tanpa akseptor elektron eksternal.Fermentasi dikenal sebagai bentuk
pengawetan makanan secara modern. Umumnya bahan makanan yang akan diawtkan akan
mengalami proses pengubahan kabohidrat menjadi alkohol. Proses tersebut dipengaruhi oleh
enzim yang dibuat oleh sel-sel ragi.

Senyawa alkohol (Etanol) dapat dibuat secara bioteknologi dengan bahan baku awal adalah
sumber karbohidrat.Sumber karbohidrat yang digunakan dapat berupa sayur-sayuran, dan buah-
buahan, dalam makalah ini kami menggunakan sumber karbohidrat berupa sari buah nanas,
didalam nanas terkandung unsur karbohidrat yang kemudian akan kita fermentasi dengan
bantuan bakteri yang terdapat dalam ragi sehingga dapat menghasilkan senyawa baru yang kita
kenal dengan alkohol (etanol).
Awalan:

Yeast adalah salah satu mikroorganisme yang termasuk dalam golongan fungi uniseluler.
Reproduksi vegetatif pada yeast terutama dengan cara pertunasan. Sebagai sel tunggal, yeast
tumbuh dan berkembang biak lebih cepat dibandingkan dengan mold yang tumbuh dengan
membentuk filamen. Berdasarkan sifat metabolismenya yeast dapat dibedakan atas dua
kelompok yaitu: bersifat fermentatif dan oksidatif. Jenis fermentatif dapat melakukan
fermentasi alkohol, yaitu memecah gula (glukosa) menjadi alkohol dan gas contohnya pada
produk roti dan bioetanol(Ivanesthi, 2016).

Alkohol dapat diproduksi secara fermentasi oleh berbagai mikroba menggunakan bahan baku
yang mengandung karbohidrat. Alkohol ini disebut bioalkohol atau bioethanol karena sebagian
besar produknya adalah etanol. Efisiensi produksi bioetanol diperoleh melalui ketepatan
pemilihan jenis mikroorganisme, bahan baku, dan kontrol proses fermentasi. Selama ini
fermentasi alkohol menggunakan molase atau tetes yang merupakan sisa dari proses
pengkristalan gula pasir yang masih mengandung gula dan asam-asam organik sebagai bahan
baku. Dibandingkan bahan baku lain, molase mempunyai keunggulan yaitu selain harganya
murah juga mengandung 50% gula sederhana yang dapat difermentasi langsung oleh khamir
menjadi etanol tanpa pretreatment(Atmodjo, 2017).

1.Jus diekstrak dari buah-buahan dan gula awal dipertahankan antara 13 hingga 26 ° Brix.
Fermentasi dilakukan menggunakan Saccharomyces cerevisiae di suhu kamar. Sari buah dapat
dengan mudah difermentasi oleh ragi seperti Saccharomyces cerevisiae, memproduksi
minuman beralkohol. Saccharomyces cerevisiae telah digunakan di proses fermentasi selama
ribuan tahun, menurut sejarah pertama cerita tentang produksi bir dan anggur. Karena
kepentingan komersial ini mikroorganisme, strain dengan karakteristik fermentasi yang baik
telah dipilih dan dikomersialkan dalam bentuk dehidrasi dan / atau liofilis untuk dipekerjakan di
Indonesia pabrik, kilang anggur dan industri lainnya. Sejumlah faktor lingkungan mempengaruhi
produksi metabolit dan kelangsungan hidup ragi selama fermentasi industri. Faktor utama
adalah suhu, pH, konsentrasi gula dan keasaman buah jus (substrat). Dalam kasus ragi, suhu
dan toleransi etanol memiliki pengaruh penting pada kinerja mereka(Souza, 2017).
Fermentasi pada ekstrak buah diawali dengan pengumpulan bahan sampel. Buah-buahan dicuci
menyeluruh dengan air steril dan dibilas dengan deionisasi air mengandung formaldehida 0,1%.
Selanjutnya mengisolasi yeast atau ragi dari wine. Wine yang diperolah difermentasi selama 24
jam. Lalu dibiarkan membentuk endapan, lalu endapan tersebut diinokulasi ke agar agar ekstrak
Malt dalam duplikat. Piring diinkubasi pada suhu kamar selama 24 jam. Mengembangkan isolat
dimurnikan dengan subkultur berulang teknik dan slide budaya murni disiapkan untuk
pengamatan dan identifikasi mikroskopis menggunakan lactophenol kapas biru dan kultur
murni diidentifikasi oleh karakteristik morfologisi(Okeke, 2015).

Selanjutnya adalah pengembangan inokulum, buah yang dipilih dalam pembuatan kali ini
adalah nanas dan semangka kemudian dicuci bersih dengan 0,1% natrium metabisulfit dalam
air. Buahnya potong, dibuang secara manual, dicampur dan disaring untuk mendapatkan jus.
Sekitar 200 ml jus (100 ml jus nanas dan 100 ml jus melon Air) dimasukkan ke dalam. Bersihkan
labu berbentuk kerucut steril 500 ml dan disterilkan dengan autoclaving. Setelah dingin, 3
loopful dari kultur ragi diisolasi dari arak digunakan untuk menginokulasi jus dan diinkubasi
dalam pengocok rotari selama 48 jam. Semua prosedur dilakukan dalam kondisi aseptiki(Okeke,
2015).

Kemudian fermentasi, Nanas dan semangka dicuci bersih dengan 0,1% natrium metabisulfit
dalam air. Buahnya potong, dibuang secara manual, dicampur dan disaring untuk mendapatkan
must liot dari jus diekstraksi yang diperoleh dan digunakan untuk pH, suhu, keasaman yang
dapat dititrasi dan mengurangi analisis gula. Harus ditransfer ke dalam gelas 500 ml steril
fermentor, sampai terisi. Dilakukan bersamaan dengan penambahan 0,4 g Natrium
metabisulfit, 100 g pasir gula (untuk fortifikasi), 29,4g Amonium 0,84% sulfat 4,2 g kalium
dihidrogen 0,12% untuk ragi suplementasi. Jus itu diinokulasi dengan ragi diperoleh dengan
pengembangan inokulum dan pengaturan diizinkan untuk berfermentasi selama 28 hari,
dengan analisis harian parameter tersebut sebagai: pH, suhu, gula reduksi dan keasaman yang
dapat dititrasi(Okeke, 2015).

Ragi memainkan peran penting dalam produksi semua produk beralkohol dan pemilihan jenis
ragi yang cocok sangat penting tidak hanya untuk itu memaksimalkan hasil alkohol, tetapi juga
untuk menjaga kualitas sensorik minuman. Spesies ragi yang mendominasi dalam produksi
minuman beralkohol di seluruh dunia adalah Saccharomyces cerevisiae, dan strain khusus dari
spesies ini yang digunakan dalam fermentasi diberikan pengaruh mendalam pada karakteristik
rasa dan aroma minuman yang berbeda. Untuk skala besar fermentasi minuman, seperti
pembuatan bir, pembuatan anggur dan produksi suling, kultur murni strain S. cerevisiae yang
dipilih biasanya digunakan. Strain ini bersumber di rumah atau dipasok dari perusahaan
penghasil ragi(Walker, 2016).

2. Tes asimilasi karbon telah digunakan selama beberapa dekade. Dalam teknik ini media agar
sintetis itu telah diinokulasi dengan suspensi berat sel yang dipadatkan dalam cawan petri.
Setelah permukaan kering, sejumlah kecil berbagai gula umum ditempatkan agar-agar.
Pertumbuhan berkembang di daerah di mana senyawa yang dapat berasimilasi berada
ditempatkan. Ragi yang menunjukkan pertumbuhan buruk diuji kembali pada media yang sama
dengan beberapa ekstrak ragi yang telah ditambahkan. Hasilnya biasanya dibaca setelah 1 atau
2 hari inkubasi(Wickerham dan Burton, 1948).

Medium Wickerham adalah sebuah media yang digunakan untuk mengisolasi dan membiakkan
ragi, kapang, dan mikroorganisme lainnya. Komposisi agar ekstrak malt adalah sebagai berikut:
3 g ekstrak ragi bubuk, 3 g ekstrak malt, 5 g pepton, 10 g glukosa, dan 20 g agar dalam 1 liter air
suling. pH terletak antara 5.0 dan 6.0, tergantung pada jumlah bahan yang digunakan. Semua
inkubasi pada 25 C, untuk beberapa spesies tumbuh tidak menentu pada suhu yang lebih tinggi.
Setelah 48 jam, transfer dilakukan ke 10 ml media sintetis lengkap. tetap sebagai karbohidrat
hanya 0,1 persen glukosa. Satu ml cairan media ditempatkan pada miring, pertumbuhan
diemulsi melalui pipet, dan 0,2 ml hingga 0,4 ml suspensi, tergantung pada kelimpahan
pertumbuhan pada miring, dipindahkan ke tabung media sintetis(Wickerham dan Burton,
1948).

3.Perhitungan kadar etanol dalam penelitian ini menggunakan alat piknometer dan rotary
evaporator. Rotary evaporator berfungsi untuk mendapatkan larutan etanol dari medium
fermentasi sedangkan piknometer berfungsi untuk mengukur kadar etanol setelah dilakukan
evaporasi(Ivanesthi, 2016). Pertama tama sampel sebanyak 100ml dimasukkan ke dalam labu
destilasi Kjeldah kemudian ditambahkan dengan aquades sebanyak100 ml. Selanjutnya
didestilasi pada suhu 800 C. Destilat ditampung di dalam erlenmeyer hingga volume 50 ml.
Destilat tersebut kemudian dimasukkan ke dalam piknometer yang telah ditimbang
sebelumnya. Destilat dimasukkan hingga memenuhi piknometer. Kelebihan destilat pada
puncak pipa kapiler dibersihkan. Piknometer yang berisi destilat ditimbang dan beratnya
dicatat. Prosedur yang sama dilakukan pada aquades sebagai pembanding. Berat jenis alkohol
dihitung dari (berat piknometer + destilat) dikurangi berat piknometer kosong kemudian dibagi
(berat piknometer + aquades) dikurangi berat piknometer kosong. Hasil penghitungan berat
jenis alkohol kemudian dikonversikan dengan menggunakan tabel konversi BJ alkohol(Azizah,
2012).

Lama fermentasi yang paling optimal untuk proses pembuatan bioetanol adalah 3 hari. Jika
fermentasi dilakukan lebih dari 3 hari, justru kadar alkoholnya dapat berkurang. Berkurangnya
kadar alkohol disebabkan karena alkohol telah dikonversi menjadi senyawa lain, misalnya
ester(Azizah, 2012).