Journal Mikrobiologi Industri Teknik Kimia Page 1

PENGARUH RAGI TERHADAP PERTUMBUHAN YEAST PADA STARTER

DAN KONSENTRASI SARI BUAH BELIMBING TERHADAP KONVERSI
ALKOHOL DALAM PEMBUATAN ALKOHOL METODE FERMENTASI
DENGAN BANTUAN SC

Adelia Dian Oktaviani, Dwi Anggraini Multasih, Irvan Maulana dan Muhhammad Rezky
Fadilah *)

Jurusan Teknik Kimia, Fakultas Teknik, Universitas Diponegoro,

Jl. Prof. Soedarto, SH, Kampus Undip Tembalang, Semarang, Indonesia 50275

Abstrak

Alkohol adalah kelompok yang mengandung satu atau lebih gugus fungsi hidroksid (-OH) pada suatu
senyawa alkana. Alkohol dapat dibuat dari bahan yang mengandung gula sederhana, pati, maupun bahan
berserat melalui proses fermentasi. Salah satu bahan yang mengandung gula yang dapat dimanfaatkan
sebagai alkohol adalah buah belimbing. Kandungan gula pada buah belimbing adalah 3,98 gram dari 100
gram belimbing. Metode yang digunakan adalah fermentasi dengan bantuan Saccharomyces cerevisiae.
Adanya penurunan densitas tiap penambahan waktu. Fenomena penurunan densitas tiap penambahan
waktu tersebut terjadi karena semakin lama fermentasi aktivitas mikroba mengalami pertumbuhan dengan
berkembang biak semakin banyak, sehingga dengan semakin meningkatnya jumlah mikroba maka semakin
banyak pula karbohidrat yang terurai menjadi alkohol. Penambahan urea menyebabkan bertambahnya
jumlah koloni. Hal ini terjadi karena adanya kandungan nutrisi yang melimpah. Pada penurunan densitas
terjadi kenaikan yeast diakibatkan oleh perubahan sebagian glukosa menjadi etanol dan faktor lamanya
waktu membuat yeast yang digunakan mengalami peningkatan jumlah sel sehingga jumlah dan kemampuan
sel untuk mengkonversi senyawa gula menjadi etanol akan semakin meningkat. Semakin besar jumlah %V
starter yang ditambahkan maka jumlah alkohol yang di dapatkan juga akan semakin besar. Jumalah alkohol
paling besar pada variabel 8 dengan faktor konversi 90,98 %.

Kata kunci: Alkohol, Belimbing, Bioproses

Abstract
Alcohol is a group containing one or more hydroxide functional groups (-OH) in an alkane compound.
Alcohol are made of the containing simple sugar, starch, and fibrous material through fermentation. One
of the sugary fruit that can be used as an alcohool is starfruit. Sugar content of this fruit is 3.98 gram of
100 gram starfruit. The method used is fermentation with the help of Saccharomyces cerevisiae and the
analysis used is fehling titration. There is a decrease in the density of each additional time. The
phenomenon of density decrease in each additional time occurs because the longer the fermentation of
microbial activity grows by multiplying more and more, so with the increasing number of microbes then
more and more carbohydrates are decomposed into alcohol. The addition of urea shows an increase in
the number of colonies. This happens because of the abundant nutritional content. There was an increase
in the density of yeast to drop as a consequence of the change of glucose to make ethanol and the length
of time taken yeast used has increased the number of the compound and the ability of a cell to convert
sugar into ethanol will increase. Increase in the number of starter % v added an amount of alcohol and
there would also.

Keywords: Alcohol, Starfruits, Bioprocess, Fermentation, Sugar

 Journal Mikrobiologi Industri Teknik Kimia
1. Pendahuluan
Alkohol adalah kelompok yang mengandung satu
atau lebih gugus fungsi hidroksid (-OH) pada suatu
senyawa alkana. Alkohol dapat dikenali dengan rumus
umumnya R-OH. Alkohol merupakan salah satu zat
yang penting dalam kimia organik karena dapat diubah
dari dan ke banyak tipe senyawa lainnya. Reaksi dengan
alkohol akan menghasilkan 2 macam senyawa. Reaksi
bisa menghasilkan senyawa yang mengandung ikatan R-
O atau dapat juga menghasilkan senyawa mengandung
ikatan O-H.
Alkohol dapat dibuat dari bahan yang
mengandung gula sederhana, pati, maupun bahan
berserat melalui proses fermentasi. Mikroorganisme
yang umumnya digunakan dalam proses produksi
bioetanol adalah Saccharomyces cerevisiae.
Saccharomyces cerevisiae memiliki beberapa kelebihan
dibandingkan dengan mikroorganisme lain yang dapat
memproduksi alkohol. Kelebihan tersebut antara lain
lebih mudah beradaptasi dengan lingkungan, lebih tahan
terhadap kadar alkohol tinggi, dan lebih mudah didapat
(Anizah dkk., 2012).
Saccharomyces cerevisiae adalah salah satu
spesies khamir yang memiliki daya konversi gula
menjadi etanol yang sangat tinggi. Mikroba ini biasanya
dikenal dengan baker’s yeast dan metabolismenya dapat
dipelajari dengan baik. Produk metabolit utama adalah
etanol, CO2, dan air, sedangkan produk lain dihasilkan
dalam jumlah sedikit. Khamir ini bersifat fakultatif
anaerobik. Saccharomyces cerevisiae memerlukan suhu
300C dan pH 4,0–4,5 agar dapat bertumbuh dengan baik
(Khodijah dkk., 2015).
Salah satu bahan yang mengandung gula yang
dapat dimanfaatkan sebagai alkohol adalah buah
belimbing. Kandungan gula pada buah belimbing adalah
3,98 gram dari 100 gram belimbing. Buah belimbing ini
banyak ditanam di Indonesia, India, dan Malaysia.
Tanaman ini memiliki daun majemuk yang panjangnya
dapat mencapai 50 cm, bunga berwarna merah muda
yang umumnya muncul di ujung dahan, abang banyak,
serta batangnya dapat tumbuh mencapai 5 m (Parandica,
2011).
Bioetanol
Bioetanol adalah cairan biokimia hasil dari
proses fermentasi gula dari sumber karbohidrat yang
menggunakan bantuan mikroorganisme. Etanol
dikategorikan dalam dua kelompok yaitu etanol
berhidrat (etanol 95-96 %) dan etanol unhidrat (etanol >
99,6 %). Etanol kelompok kedua adalah etanol yang
digunakan sebagai bahan bakar dan disebut fuel grade
------------------------------------------------------------------
*)
Penulis Korespondensi.
E-mail: rezkyfadilah32@gmail.com
Page 2
ethanol (FGE). Produksi bioetanol dari tanaman yang
mengandung glukosa yang selanjutnya dilakukan proses
fermentasi atau peragian dengan menambahkan yeast
atau ragi sehingga diperoleh bioetanol sebagai sumber
energi (Nasrun dkk., 2015).
Secara umum mekanisme pembuatan bioetanol di
bagi menjadi tiga tahap yaitu hidrolisis,fermentasi dan
distilasi : pada tahap hidrolisis terjadi proses konversi
pati menjadi glukosa. Prinsip dari hidrolisis pati pada
dasarnya adalah pemutusan rantai polimer pati menjadi
unit-unit dekstrosa (C6H12O6). Pemutusan rantai
polimer tersebut dapat dilakukan dengan berbagai
metode, misalnya secara enzimatis, kimiawi ataupun
kombinasi keduanya lalu bergeser ke tahap fermentasi
pada proses ini terjadi perubahan gula menjadi alkohol
dan CO2 oleh mikroba, terutama oleh khamir
Saccharomyces cerevisiae. Karbohidrat akan dipecah
dahulu menjadi gula sederhana yaitu dengan hidrolisis
pati menjadi unit-unit glukosa. Perubahan gula
pereduksi menjadi etanol dilakukan oleh enzim
invertrase, yaitu enzim kompleks yang terkandung
dalam ragi. Setelah beberapa hari fermentasi dilanjutkan
ketahap pemurnian atau destilasi pada proses ini terjadi
pemisahan anatara alkohol dan air karena perbedaan titik
didih, dan dihasilkanlah alkohol dengan kadar tertentu.
Saccharomyces cerevisae
Dalam pembuatan bioetanol pada umumnya
menggunakan mikrooraganisme berupa khamir yaitu
Saccharomyces cerevisae. Saccharomyces cerevisae
adalah salah satu spesies khamir yang memiliki daya
konversi gula menjadi etanol yang sangat tinggi.
Mikroba ini biasanya dikenal dengan baker’s yeast dan
metabolismenya dapat dipelajari dengan baik. Produk
metabolit utama adalah etanol, CO2, dan air, sedangkan
produk lain dihasilkan dalam jumlah sedikit. Khamir ini
bersifat fakultatif anaerobik. Saccharomyces cerevisiae
memerlukan suhu 300C dan pH 4,0–4,5 agar dapat
bertumbuh dengan baik (Khodijah dkk., 2015).
Belimbing
Dalam pembuatan bioetanol, bahan yang di
gunakan bisa berasal dari tumbuh-tumbuhan atau dari
buah-buahan salah satunya adalah belimbing. Buah
belimbing manis merupakan buah banyak digemari
masyarakat karena rasanya yang manis dan
menyegarkan karena kandungan airnya yang tinggi,
serta mengandung gizi yang tinggi pula. Menurut Dinas
Pertanian kota Depok, setiap 100 gram buah belimbing
manis segar mengandung gizi yang terdiri dari kalori
36,00 kal; protein 0,40 gram; lemak 1,40 gram;
karbohidrat 8,80 gram; kalsium 4,00 mg; fosfor 12,00
mg; zat besi 1,10 mg; vitamin A 170,00 mg; vitamin B1
35,00 mg; vitamin C 0,90 mg; air 90,00 mg; dan bagian
yang dapat dimakan (bdd) 86,00%. Selain sebagai buah
Journal Mikrobiologi Industri Teknik Kimia
segar, belimbing manis juga dapat berkhasiat sebagai
obat.
Mengkonsumsi buah belimbing manis yang sudah
matang dapat menurunkan tekanan darah tinggi dan
kadar kolesterol, mencegah kanker, serta memperlancar
pencernaan. Secara ilmiah, kandungan racun (toksisitas)
akut tanaman belimbing manis terbukti tidak beracun
dan aman digunakan. Daun dan buah belimbing dapat
digunakan untuk mengobati sakit gondong, cacar air,
demam dan wasir (Prastowo dkk., 2015).
METODE PENELITIAN
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini
adalah sari buah belimbing, glukosa, urea, KH2PO4,
MgSO4, NaOH, H2SO4. Indikator MB, Aquadest, Ragi
roti (Fermipan), Fehling A dan Fehling B, sedangkan
alat yang di gunakan adalah .Beaker glass, Gelas ukur,
Burt, statif, klem, Hemasitometer, Termometer , Kompor
listrik, Pipet tetes, Labu takar, Erlenmeyer, Corong dan
Pengaduk.
Prosedur Penelitian
Tahapan penelitian ini sebagai berikut: (1) Analisis
Bahan Baku, pada tahap ini dilakukan analisis kadar
gula dan kadar air dari sari belimbing. (2) pembuatan
starter, pada tahap ini Sari buah belimbing sebanyak
200 mL ditambahkan 3 gr/l KH2PO4, 3 gr/l MgSO4,
dan urea sebanyak 3 gr/l sebagai nutrient (untuk 3
variabel) lalu Larutan tersebut disterilkan dengan cara
dididihkan selanjutttnya Adonan didinginkan sampai
dengan suhu kamar lalu pH diatur hingga 4,5,
Ragi/fermipan sebanyak (1; 1,8; dan 2,6 gram/liter)
ditambahkan ke dalam larutan tersebut ,Jumlah yeast
dan densitas dalam larutan dihitung setiap hari (dua
hari)sampai dengan konstan. (3) fermentasi, di tahap
ini Persiapan sari buah,Sari buah belimbing yang telah
bebas dari ampas disiapkan sesuai variabel.lalu Sari
buah belimbing disterilkan dengan cara dididihkan.
Adonan didinginkan sampai suhu kamar, lalu diatur pH
4,5 selanjutnya Penentuan kadar glukosa subtrat. Pada
tahp ini Kadar glukosa substrat sebelum fermentasi
diatur sebesar 7%, 11%, 16 % Contohnya Bila dalam
substrat kita menginginkan kadar glukosanya 14% Bila
%SB > 14 %, perlu diencerkan :
14 % =
Bila % SB < 14 %, perlu ditmbah sukrosa :
14 % =
Berat sukrosa = X mol . 342 gr/mol = Y gram ,Y gram
dilarutkan ke dalam substrat tersebut.
Fermentasi media sari buah belimbing dilakukan dengan
Substrat yang telah diatur kadar glukosanya diambil lalu
Substrat ditambahkan starter sesuai variabelselanjutnya
Page 3
densitas dan volume konstan diukur sebelum fermentasi
dan fermentasi anaerob selama 5 hari.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengaruh Penambahan Urea Terhadap Densitas
Pada Starter
Gambar 1 Grafik hubungan jumlah urea terhadap
densitas pada starter.
Dapat dilihat dari gambar 1 bahwa tersebut
untuk masing-masing starter A,B dan C, nilai densitas
setiap harinya mengalami penurunan.
Fenomena penurunan densitas tiap penambahan
waktu tersebut terjadi karena semakin lama fermentasi
aktivitas mikroba mengalami pertumbuhan dengan
berkembang biak semakin banyak, sehingga dengan
semakin meningkatnya jumlah mikroba maka semakin
banyak pula karbohidrat yang terurai menjadi alkohol.
Dengan meningkatnya jumlah alkohol ini maka berat
atau densitas daripada campuran alkohol-air akan
semakin rendah (Khodijah .2015)
Hal tersebut sesuai dengan percobaan yang
telah dilakukan bahwa semakin lama fermentasi
mikroba akan mengalami pertumbuhan dan
perkembangbiakan. Oleh karena itu, jumlah mikroba
semakin banyak pula karbohidrat yang terurai menjadi
alkohol. Dengan meningkatnya meningkatnya jumlah
alkohol ini maka berat atau densitas daripada campuran
alkohol-air akan semakin rendah.
Pengaruh Penambahan Urea Terrhadap Jumlah
Koloni Pada Starter
Gambar 2 hubungan penambahan urea terhadap jumlah
koloni pada satarter.
Pada gambar 2 dapat dilihat bahwa jumlah
koloni selalu bertambah seiring bertambahnya waktu
Journal Mikrobiologi Industri Teknik Kimia Page 4

Nutrisi yang dibutuhkan mikroorganisme untuk dihasilkan akan membuat densitas turun karena etanol
pertumbuhannya meliputi karbon, nitrogen, unsur non memiliki densitas yang lebih kecil dari sari buah
logam seperti sulfur dan fosfor, unsur logam seperti Ca, belimbing yang praktikan dapat sebesar 1,0688. Selain
Zn, Na, K, Cu, Mn, Mg, dan Fe, vitamin, air, dan energi. itu faktor lamanya waktu membuat yeast yang
Dengan kandungan nutrisi yang melimpah, proses digunakan mengalami peningkatan jumlah sel sehingga
metabolisme bakteri akan berlangsung optimal sehingga jumlah dan kemampuan sel untuk mengkonversi
proses pembelahan sel berjalan baik yang dapat senyawa gula menjadi etanol akan semakin meningkat,
menyebabkan ukuran koloni semakin besar (Anisah akibatnya etanol yang dihasilkan pun semakin besar
dkk., 2015). Selain itu pada gambar 4.3 menunjukan (Isna Syauqiah, 2015).
jumlah koloni pada masing-masing stater semakin Pengaruh Perbedaan % V Starter Terhadap
meningkat seiring dengan pertambahan hari, hal ini Konversi Alkohol Saat Fermentasi.
karena kecepatan pertumbuhan sel pada jam ke-0 sampai
ke-24 lebih rendah dari jam-jam berikutnya. Hal ini
disebabkan karena mikroba masih dalam fase adaptasi
(fase lag) dimana sel masih beradaptasi dengan kondisi
lingkungannya. Pada fase ini mikroba merombak
substrat menjadi nutrisi untuk pertumbuhannya. Pada
jam berikutnya yaitu memasuki jam ke-24 sampi jam
ke-48 terlihat adanya percepatan pertambahan sel
mikroba. Hal ini menandakan bahwa telah memasuki
fase pertumbuhan eksponensial (fase log) (Krido dkk.,
2011).
Hubungan antara densitas dan jumlah koloni pada
starter Gambar 4 Grafik hubungan %V starter dengan konversi
alkohol pada fermentasi dengan starter A.
Tangg Starter A Starter B Starter C
Jum Jum Jum
al
lah lah lah
yea Yea Yea
st st st
04/09/ 1,1 23 1,1 33 1,0 44
2017 04 02 99 Gambar 5 Grafik hubungan %V starter dengan konversi
05/09/ 1,0 72 1,0 130 1,0 201 alkohol pada fermentasi dengan starter B

2017 74 56 51
06/09/ 1,0 241 1,0 283 1,0 285
2017 54 52 46

Gambar 3 tabel hubungan antara jumlah koloni dan

densitas pada starter
Dari percobaan yang kami dapat, densitas turun
setiap bertambahnya jumlah koloni pada starter pada t0,
t1 dan t2.
Terjadinya penurunan densitas dan kenaikan
yeast dikarenakan Fenomena penurunan densitas untuk
kedua starter diakibatkan oleh perubahan sebagian
glukosa menjadi etanol. Etanol memiliki densitas
berkisar 0.7883 kg/l, sedangkan densitas starter 1 dan
starter 2 diatas 1.0, sehingga seiring dengan waktu
densitas starter akan menurun (MSDS Commercial
Alcohols, 2009). Semakin banyak etanol yang
Gambar 6 Grafik hubungan %V starter dengan konversi
alkohol pada fermentasi dengan starter C
Dari gambar di atas dapat diketahui bahwa %v
starter mempengaruhi jumlah alkohol yang didapatkan,
semakin besar jumlah %V starter yang ditambahkan
maka jumlah alkohol yang di dapatkan juga akan
semakin besar. Dengan jumlah starter yang banyak itu
merupakan pemicu bagi organisme pengurai akan
bekerja secara optimal dalam menghasilkan etanol.
Journal Mikrobiologi Industri Teknik Kimia Page 5

Menurut Budianto (2002), hasil fermentasi alkohol
sangat dipengaruhi oleh teknologi produksi yang
dipakai, jenis mikroorganisme yang digunakan sebagai
pengurai dan konsentrasi starter yang ditambahkan ke
bahan yang akan difermentasikan.
Terjadinya peningkatan persentase kadar etanol
yang didapat selama proses fermentasi ini mencapai
puncak pada hari ke-4 pada setaip penambahan starter
(7%,11%,16%) disebabkan karena S. cereviceae
mengalami exponensial fase yaitu fase dimana yeast
mengalami pertumbuhan yang sangat cepat dan jenis
mikroorganisme pengurai yang digunakan yaitu S.
cereviceae, karena S. cereviceae mampu menggunakan
sejumlah gula, diantaranya sukrosa, glukosa, fruktosa,
galaktosa, mannosa, maltosa dan maltotriosa (Lewis dan
Young, 1990), sehingga proses perombakan gula
menjadi etanol semakin cepat dan pada fase ini pula
yeast bekerja maksimal dalam memproduksi etanol.
SIMPULAN
Fenomena penurunan densitas tiap penambahan
waktu tersebut terjadi karena semakin lama fermentasi
aktivitas mikroba mengalami pertumbuhan dengan
berkembang biak semakin banyak, sehingga dengan
semakin meningkatnya jumlah mikroba maka semakin
banyak pula karbohidrat yang terurai menjadi alkohol.
Adanya kandungan nutrisi yang melimpah, membuat
proses metabolisme bakteri akan berlangsung optimal
sehingga proses pembelahan sel berjalan baik yang
dapat menyebabkan ukuran koloni semakin besar.
Sehingga Dengan jumlah starter yang banyak itu
merupakan pemicu bagi organisme pengurai akan
bekerja secara optimal dalam menghasilkan etanol.
Adsorbsi dengan Adsorbent Zeolit. Semarang :
Universitas Diponegoro.
Puji Prastowo dan Putri, S.S. 2014. Pengaruh Waktu
Pembungkusan terhadap Jumlah Larva Lalat
Buah (Bactrocera spp.) pada Buah Belimbing
(Averrhoa carambola). Prosidin Seminar
Nasional Biologi.
Ropiah, Dede. 2010. Pemanfaatan Hidrolisat Tandan
Kosong Kelapa Sawit (TKKS) untuk Produksi
Etanol dengan Pichia stipitis. Jakarta :
Universitas Islam Negeri Syarif Hidyatullah.
Siswati, Nana Dyah dkk. 2014. Bioetanol dari Limbah
Kulit Kopi dengan Proses Fermentasi.
Suabaya : Universitas Pembangunan Nasional.
Siti Khodijah dan Ahmad Abtokhi. 2015. Analisis
Pengaruh Variasi Persentase Ragi
(Saccharomyces cerevisiae) dan Waktu pada
Proses Fermentasi dalam Pemanfaatan
Duckweed (Lemna minor) sebagai Bioetanol.
Jurnal Neutrino Vol. 7, No. 2
Azizah, dkk. 2012. Pengaruh Lama Fermentasi terhadap
Kadar Alkohol pH, dan Produksi Gas pada
proses fermentasi bioetanol dari whey dengan
substansi kulit nanas.

DAFTAR PUSTAKA
Abdullah, Adesya dkk., 2014. Pemisahan Campuran
Etanol-Oktanol-Air dengan Metode Distilasi
dalam Structured Packing. Surabaya : Institut
Teknologi Sepuluh Nopember.
Anisah dan Triastuti Rahayu. 2015. Media Alternatif
untuk Pertumbuhan Bakteri Mengunakan
Sumber Karbohidrat yang Berbeda. Seminar
Nasional XII Pendidikan Biologi FKIP UNS.
Krido, dkk. 2011. Laju Pertumbuhan Saccharomyces
cerevisiae pada Proses Fermentasi
Pembentukan Bioetanol dari Biji Sorgum
(Sorghum bicolor L.). Surakarta : Universitas
Sebelas Maret.
Nasrun, dkk. 2015. Pengaruh Jumlah Ragi dan Waktu
Fermentasi terhadap Kadar Bioetanol yang
Dihasilkan dari Fermentasi Kulit Pepaya.
Lhokseumawe : Universitas Malikussaleh.
Novitasari, dkk., 2014. Pemurnian Bioetanol
menggunakan Proses Adsorbsi dan Distilasi