Robert K.
Murroy, MD, PhD
PERAN BIOMEDIS
Kini semakin banyak manusia yang terpajan oleh berbagai
bahan kimia asing (xenobiotik)-obat, zar aditif makanan,
polutan, dstnya. Situasi ini dilingkaskan dengan baik dalam
kutipan berikut dari Rachel Carson: "As crude a wedpln
as t/te caue manls club, the chemical barrage has been hurled
against the fabric of Ltfr" Pemahaman mengenai pemrosesan
xenobiotik di tingkat sel penting untuk mempelajari cara
kita menghadapi 'serangan' bahan kimia ini.
Pengetahuan tentang metabolisme xenobiotik merupa-
kan hal mendasar untuk memahami secara rasional farma-
kologi dan ilmu terapi, fannasi, toksikologi, penatalaksanaan
kanker, serta ketagihan obat. Semua bidang ini melibatkan
pemberian, atau pajanan oleh, xenobiotik.
MANUSIA MENGHADAPI RIBUAN
XENOBIOTIK YANG HARUS
DIMETABOLISME SEBEIUM
DIEKSKRESIKAN
Suatu xenobiotik (Yunani xenos, "orang asing") adalah
senyawa yang asing bagi tubuh. Kelas-kelas utama xenobiotik
yang relevan dari segi medis adalah obat, karsinogen kimia,
dan berbagai senyawa yang melalui satu dan lain cara, sampai
di lingkungan kita, misalnya polychlorinated bipbenyls (PCB)
dan insektisida tertentu. Lebih dari 200.000 bahan kimia
buatan terdapat di lingkungan. Sebagian besar bahan kimia
ini mengalami metabolisme (perubahan kimiawi) di dalam
tubuh manusia dengan hati sebagai organ yang terurama
berperan; kadang-kadang suatu xenobiotik diekskresikan
tanpa mengalami perubahan. Seticlaknya terdapat 30
enzim yang mengatalisis berbagai reaksi yang terlibat dalam
metabolisme xenobiotik; namun, bab ini hanya membahas
sebagian di antaranya.
Untuk menyederhanakan, metabolisme xenobiotik
dibagi menjadi dua fase. Pada fase l, reaksi utama adalah
653
hidrolsilasi yang dikatalisis oleh anggota suatu kelas
enzim yang disebut mono-oftsigenase arau sitokrom
P450. Flidroksilasi dapat menghentikan kerja suatr.r obat,
meskipun tidak selalu demikian. Selain hidroksilasi, enzim-
enzim ini mengatalisis berbagai reaksi, termasuk reaksi yang
melibatkan deaminasi, dehaiogenasi, desulfurasi, epoksidasi,
peroksigenasi, dan reduksi. Reaksi-reaksi yang melibatkan
hidrolisis (mis. yang dikatalisis oleh esterase) dan reaksi lain
yang tidak dikatalisis oleh P450 juga terjadi di fase 1.
Pada fase 2, senyawa yang telah terhidroksilasi atau
diproses dengan cara lain pada fase 1 diubah oleh enzim
spesifik menjadi berbagai metabolit polar oleh konjugasi
dengan asam glukuronat, sulfat, asetat, glutation, atau asam
amino tertentu, atau oleh metilasi.
Ti-rjuan keseluruhan kedua fase metabolisme xenobiotik
ini adalah meningkatkan kelarutan xenobiotik dalam air
(polaritas) sehingga ekskresinya dari tubuh juga meningkat.
Xenobiotik yang sangat hidrofobik akan menetap di jaringan
adiposa hampir selamanya jika tidak diubah menjadi bentuk
yang lebih polar. Pada kasus tertentu, reaksi metabolik fase
1 mengubah xenobiotik dari senyawa yang secara biologis
inaktif menjadi aktif. Dalam hal ini, xenobiotik asal disebut
sebagai "prodrug'atau "prokarsinogen". Pada kasus lain,
reaksi fase 1 tambahan (mis. reaksi hidroksilasi lebih lanf ut)
mengubah senyawa aktif menjadi bentuk yang kurang
aktif atau inaktif sebelum konjugasi. Pada kasus yang lain
lagi, reaksi konjugasi ini sendiri yang mengubah produk
aktif pada reaksi fase 1 menjadi bentuk yang kurang atau
tidak aktil" yang kemudian diekskresikan dalam urine atau
empedu. Konjugasi sangat jarang meningkatkan aktivitas
biologis suaru xenobiorik.
Kata "detoftsifikasi" kadang-kadang digunakan
untuk menggambarkan reaksi-reaksi yang terlibat dalam
metabolisme xenobiotik. Namun, kata ini tidak selalu sesuai
karena, seperti disebutkan sebelumnya, pada sebagian kasus
reaksi-reaksi tersebut malah meningkatkan aktivitas biologis
arau roksisires xenobiotik.
654 / BAGIAN Vl:TOPIK KHUSUS
BERBAGN ISOFORM SITOKROM
P45O MENGHIDROKSITASI
BERAGAM XENOBIOTIK PADA FASE I
METABOTISME
Hidrolisilasi adalah re aksi utama pada fase I . Enzim -enzim
yang berperan disebut monooksigenase atau sitokrom
P45O. Pada manusia, diperkirakan terdapat sekitar 60 gen
sitokrom P450. Reaksi yang dikatalisis oleh mono-oksigenase
(sitokrom P450) adalah sebagai berikut:
RH + O, + NADPH + H* ---r R- OH + H2O + NADP
RH di atas mewakili beragam xenobiotik, termasuk obat,
karsinogen, pestisida, produk petroleum, dan polutan
(misalnya campuran PCB). Selain itu, senyawa endogen,
misalnya steroid tertentu, eikosanoid, asam lemak, dan
retinoid, jtg" merupakan substrat. Substrat biasanya
bersifat lipofilik dan diubah menjadi lebih hidrofilik oleh
hidroksilasi.
Sitokrom P450 dianggap merupakan biokatalis yang
paling serba-guna. Mekanisme reaksinya sebenarnya rumit
dan telah secara singkat dijelaskan sebelumnya (Gambar l2-
6). Telah dibuktikan melalui pemakaian 18O, bahwa satu
atom oksigen masuk ke R-OH dan satu atom memasuki
air. Nasib ganda oksigen ini menyebabkan mono-oksigenase
dulu disebut sebagai "oksidase berfungsi campuran" (mixed-
function oxidase). Reaksi yang dikatalisis oleh sitokrom
P450 |uga dapat dituliskan sebagai berikut:
.
Sitokrom P450 tereduksi Sitokrom P450 teroksidasi
RH+orYR-oH+H2o
Sitokrom P450 diberi nama demikian karena enzim ini
ditemukan saat diketahui bahwa Preparat mikrosom yang
telah direduksi secara kimiawi dan kemudian dipajankan
dengan karbondioksida memperlihatkan puncak tersendiri
di 450 nm. Salah satu alasan mengapa enzim ini penting
adalah kenyataan bahwa sekitar 507o dari obat yang sering
dikonsumsi manusia dimetabolisme oleh berbagai isoform
sitokrom P450; enztm-enzim ini juga bekerja pada berbagai
karsinogen dan polutan.'Enzim-enzim sitokrom P450 yang
utama dalam metabolisme obat adalah anggota famili CYP1,
CYP2, dan CYP3 (lihat bawah).
tsoform Sitokrom P45O Membenruk
Superfomili Enzim yqng Mengondung Heme
Berikut ini merupakan beberapa butir penting mengenai
sitokrom P450.
(1) Karena besarnya jumlah isoform (sekitar 150) yang
telah ditemukan, tata-nama sistematik untuk isoform
P450 dan gen-gennya menjadi penting. Thta-nama ini telah
tersedia dan digunakan secara luas serta didasarkan pada
homologi struktural. Singkatan dasar CYP menandakan
suatu sitokrom P450. Singkatan ini diikuti oleh angka
Arab yang menunjukkan famili; berbagai sitokrom P450
dimasukkan dalam famili yang sama jika memperlihatkan
40o/o atart lebih kesamaan sekuens asam amino. Angka Arab
ini diikuti oieh sebuah huruf besar yang menunjukkan
subfamili jika terdapat dua anggota atau lebih; berbagai
sitokrom P450 dimasukkan dalam subfamili yang sama jika
sitokrom tersebut memperlihatkan kesamaan sekuens lebih
dari 55o/o. Masing-masing P450 kemudian secara acak
diberi angka Arab. Oleh karena itu, CYPlA1 menandakan
suatu sitokrom P450 yangmerupakan anggota famili 1 dan
subfamili A serta merupakan anggota pertama dari subfamili
tersebut. Tata-nama untuk gen yang menyandi sitokrom
P450 identik dengan tata nama yang digunakan di atas
kecuali bahwa huruf miring digunakan. Oleh karena itu' gen
yang menyandi C\?1A1 dinamai C\?141.
C\?3A adalah sitokrom P450 terPenting dalam
metabolisme obat karena jumlahnya yang banyak di hati dan
usus. Enzim ini dapat bekerja pada berbagai obat dari hampir
semua kelas. Aktivitasnya juga agak sulit diperkirakan karena
dapat bervariasi hingga 400 kali lipat akibat inhibisi dan
induksi sehingga menimbulkan kesulitan dalam penentuan
dosis obat.
(2) Seperti hemoglobin, sitokrom P450 adalah
hemoprotein.
(3) Enzirn ini tersebar luas di segala spesies' termasuk
bakteri.
(4) Enzim ini terdapat paling banyak di sel hati dan
enterosit meskipun mungkin terdapat di semua .iaringan.
Di hati dan sebagian besar jaringan lain, sitokrom P450
terutama terdapat di membran retikulum endoplasma
halus, yang membentuk sebagian dari fraksi mikrosom
jika jaringan mengalami fraksionasi subselular. Di mikrosom
hati, sitokrom P450 dapat membentuk hingga 20o/o dari
protein total. P450 ditemukan di sebagian besar jaringan,
meskipun dalam jumlah kecil bila dibandingkan dengan di
hati. Di kelenjar adrenal, enzim golongan ini ditemukan
di mitokondria, selain di retikulum endoplasma; berbagai
hidroksilase yang terdapat di organ ini berperan penting
dalam biosintesis kolesterol dan steroid. Sistem sitokrom P450
mitokondria berbeda dari sistem mikrosom karena sistem ini
menggunakan flavoprotein terkait-NADPH, adrenodoksin
reduktase, dan suatu protein sulfur-besi nonheme, yaitu
adrenodoksin. Selain itu, isoform-isoform P450 spesifik
yang berperan dalam biosintesis kolesteroi umumnya jauh
lebih terbatas daiam hal spesifisitas substratnya.
(5) Di retikulum endoplasma hati manusia, terdaPat
paling tidak enam isoform sitokrom P450, masing-masing
dengan spesifisitas substrat yang luas dan agak tumpang-
tindih serta bekerja baik pada senyawa endogen mauPun

xenobiotik. Gen-gen untuk berbagai isoform P450 (baik
dari manusia maupun hewan, misalnya tikus) telah berhasil
diisolasi dan dipelajari secara rinci dalam tahun-tahun
rerakhir.
(6) NADPH, bukan NADH, berperan dalam mekanisme
reaksi sitokromP450. Enzim yang menggunakan NADPH
untuk menghasilkan sitokrom P450 teredui<si yalg
di sisi kiri dari persamaan di atas, dinamai
diperlihatkan
NADPH-sitokrom P450 reduktase. Elektron dipindahkan
dari NADPH ke NADPH-sitokrom P450 reduktase dan
kemudian ke sitokrom P450.Hal ini menyebabkan aktivasi
reduktif olisigen molekular dan satu atom oksigen
kemudian disisipkan ke dalam substrat. Sitokrom 6r,
hemoprotein lain yang ditemukan di membran retikulum
endoplasma halus (Bab l2), dapar terlibat sebagai donor
elektron pada beberapa kasus.
(7) Lipid, juga merupakan komponen penting sisrem
sitokrom P450. Lipid yang disukai adalah fosfatidilkolin,
yaitu lipid utama di membran retikulum endoplasma.
(8) Sebagian besar isoform sitokrom P450 dapat
diindulisi. Contohnya, pemberian fenobarbital atau banyak
obat lain menyebabkan hipertrofi retikulum endoplasma
halus dan peningkatan tiga sampai empat kali lipat jumlah
sitokrom P450 dalam 4-5 hari. Mekanisme induksi tersebut
telah diteliti secara ekstensif dan umumnya melibatkan
peningkatan transkripsi mRNA untuk sitokrom P450.
Namun, beberapa kasus induksi melibatkan stabilisasi
mRNA, stabilisaii enzim, atau mekanisme lain (mis. suatu
efek terhadap translasi).
Induksi sitokrom P450 menimbulkan dampak klinis
penting karena induksi ini adalah suatu mekanisme
biokimiawi interaksi obat. Interaksi obat terjadi jika
efek satu obat berubah oleh pemberian obat lain sebelum,
bersamaan dengan, atau setelah pemberian obat pertama.
Sebagai ilustrasi, perhatikan situasi saat seorang pasien
mendapat antikoagulan warfarin untuk mencegah
pembekuan darah. Obat ini dimetabolisme oleh C\ry2C9.
Secara bersamaan, pasien ini juga diberi fenobarbital
(penginduksi C\ry2C9) untuk mengobati epilepsi jenis
tertentu, tetapi dosis warfarin tidak diubah. Setelah sekitar
5 hari, kadar C\ry2C9 di hati pasien akan meningkat tiga
sampai empat kali lipat. Hal ini berarti bahwa warfarin akan
dimetabolisme lebih cepat daripada sebelumnya dan dosis
semula akan menjadi kurang adekuat. Oleh karena itu,
dosis warfarin harus ditingkatkan agar tetap efektif. Untuk
memperjelas contoh ini lebih jauh, dapat muncul masalah di
kemudian hari jika pemberian fenobarbital dihentikan, tetapi
warfarin yang sudah ditingkatkan tidak diubah. Pasien akan
berisiko mengalami perdarahan karena warfarin dosis tinggi
akan menjadi lebih aktif daripada sebelumnya karena kadar
C\ryzc9 akan turun dengan penghentian fenobarbital.
BAB 52: METABOLISME XENOBIOTIK / 655
Contoh yang lain adalah induksi enzimyangmelibatkan
CYP2E1, yang diindulai oleh konsumsi etanol. Hal
ini perlu mendapat perhatian karena sitokrom P450 ini
memetabolisme pelarut tertentu yang banyak digunakan
dan juga memetabolisme komponen yang ditemukan dalam
asap rokok, yang banyak di antaranya terbukti merupakan
karsinogen. Oleh karena itu, jika aktivitas CYP2E1
ditingkatkan dengan induksi, risiko karsinogenisitas akibat
pajanan senyawa-senyawa di atas akan meningkat.
(9) Isoform-isoform tertentu sitokrom P450 (mis.
C\?1A1) sangat berperan dalam metabolisme hidrokarbon
aromatik polisiklik (polyq,clic aromatic hydrocarbons, PAII)
dan molekul terkait; karena itu, dahulu enzim ini dinamai
hidrokarbon aromatik hidrolisilase (AHH). Enzim ini
penting dalam metabolisme PAH dan dalam karsinogenesis
yang ditimbulkan oleh zavzat ini. Contohnya, di paru-
paru enzim ini mungkin berperan mengubah PAH inaktif
(prokarsinogen) yang terhirup sewaktu merokok, menjadi
karsinogen aktif oleh reaksi hidroksilasi. Kadar enzim ini
di sebagian sel dan jaringan perokok lebih tinggi daripada
bukan perokok. Beberapa laporan menunjukkan bahwa
aktivitas enzim ini mungkin meningkat (terinduksi) di dalam
plasenta wanita yang merokok sehingga berpotensi mengubah
jumlah metabolit PAH (yang sebagian di antaranya mungkin
berbahaya) yang akan diterima oleh janin. ,
(10) Sitokrom P450 tertentu terdapat dalam bentuk
polimorfik (isoform genetik) yang sebagian di antaranya
memperlihatkan aktivitas katalitik rendah. Pengamatan
akan hal ini penting untuk menjelaskan variasi respons
terhadap obat yang diamati pada banyak pasien. Salah satu
P450 yang memperlihatkan polimorfisme adalah CYP2D6
yang berperan dalam metabolisme debrisokuin (suatu obat
antihipertensi; lihat Thbel 52-2) dan spartein (suatu obat
antiaritmia dan oksitosik). Polimorfisme tertentu CYP2D6
menyebabkan metabolismeyang burukpada berbagai obat ini
serta beberapa obat lain sehingga akan terjadi akumulasi obat
dalam tubuh yang akan menimbulkan berbagai konsekuensi
yang tidak diinginkan. Contoh lain yang menarik adalah
polimorfisme yang terdapat pada C1?2A6, yaitu enzim yang
berperan dalam metabolisme nikotin menjadi konitin. Glah
diketahui tiga alel CYP2A6: sar:u wild type dan dua alel nol
atau inaktif, Menurut pengamatan, pada kelompok orang
dengan alel nol yang metabolisme nikotinnya terganggu,
kemungkinan menjadi pecandu rokok yang dependen-
tembakau tampaknya lebih kecil (Tabel 52-2). Kelompok
orang ini lebih jarang merokok, kemungkinan disebabkan
karena konsentrasi nikotin darah dan otak yang tetap dnggi
dalam waktu yang lebih lama dibandingkan pada mereka
dengan aIeI wild type. Inhrbisi CYP2A6 diperkirakan
dapat menjadi cara baru untuk mencegah atau mengobati
kecanduan rokok.
656 / BAGIAN Vl:TOPIK KHUSUS
Thbel 52.1 meringkaskan beberapa gambaran penting
sitokrom P450.
REAKSI KONJUGASI MENYIAPKAN
XENOBIOTIK UNTUK DIEKSKRESIKAN
PADA FASE 2 METABOLISMENYA
Pada reaksi fase 1, xenobiotik umumnya diubah menjadi
turunan terhidroksilasi yang lebih polar. Pada reaksi fase 2,
turunan ini dikonjugasikan dengan molekul lain, misalnya
asam glukuronat, sulfat, atau glutation. Pengkonjugasian
ini menyebabkan xenobiotik menjadi lebih larut air dan
akhirnya diekskresikan melalui urine atau empedu.
Tabel 52-1. Beberapa sifat sitokrom P450 pada
manusia
. Berperon dolom fose I metobolisme berbogoi
xenobiotik, mungkin termosuk 50% obot yong
diberikon kepodo monusio
r Berperon dolom metobolisme bonyok senyowo
endogen (mis. steroid)
. Semuanyo odoloh hemoprotein
r Sering memperlihotkon spesifisilos subskot yong luos
sehinggo dopot bekerio podo bonyok senyowo;
okibotnyo, berbogoi P450 berbedo dopot mengotolisis
pembentukon produk yong somo
. Kotolis yong songot serbo-guno, don mungkin
mengotclisis sekitor 60 jenis reoksi
r Nomun, podo dosornyo sistem ini mengotolisis reoksi-
reoksi yong melibotkqn, int#uk i,sctu otom oksigen ke
dolom substrot don sotu otom oksigen ke dolom air
. Produk hidroksilosinyo lebih lorut oir doripodo substrot
yong biosonyo lipofilik sehinggo ekskresi meniodi lebih
mudoh
e Hoti mengondung poling bonyok, letopi iugo
diiemukon di hompir semuo ioringon, termcsuk usus
holus, otok, don poru
r Terdopot di retikulum endoplosmo holus otou di
mitokondrio (hormon steroidogenik)
r sedikit di jaringan lain. Di jaringan manusia terdapat
Podo beberopo kosus, produknyo bersifot mutogenik
otou korsinogenik
r Bonyok yong memiliki mosso molekul sekitor 55 kDo
. Bonyok yong dopof diinduksi, merupokon soloh sotu
penyebob teriodinyo interoksi obot
. Bonyok yong dihombot oleh berbogoi obot otou
.
"'..produk metobol'ilinyo, don iugo rnerupokon sstqh sqfu"'
penyebob interoksi obot
. Sebogiqn memperlihclkon polimorfisne,genetik yong
dopoi menimbulkon rnetobolisrne sbst alipikol ,, ,, '
. Aktivitosnyo dopot beruboh di ioringon yong sokit {mis.
sirosis) sehinggo memengoruhi metobolisme obot
rr
,D,l,rnsss mendalong, penentuan profil genofipe P450
,
:.,ri.,posien {mis' untult rnendeteksi polimorfisme) mung}<in ',
. . , opqt digunokon untuk, mer,ryesuoikon teropi'obol , dengan GSH kepada tikus), jaringan tersebut terbukti
,;, laeegrc,ifld.ividusl,
Penieloson Limo Tipe Reoksi Fose 2
A. GLUKURONIDASI
Glukuronidasi bilirubin dibahas di Bab 3i; reaksi-reaksi
tempat xenobiotik mengalami glukuronidasi pada dasarnya
serupa. Asam UDP-glukuronat adalah donor glukuronil,
dan berbagai glukuronosiltransferase yang terdapat baik di
retikulum endoplasma maupun sitosol adalah katalisnya.
Molekul-molekul, seperti 2-asetilaminofluoren (suatu karsi-
nogen), anilin, asam benzoat, meprobamat (obat penenang),
fenol, dan banyak steroid diekskresikan sebagai glukuronida'
Giukuronida dapat melekat pada gugus oksigen, nitrogen,
atau sulfur substrat. Glukuronidasi mungkin merupakan
reaksi konjugasi yang paling sering terjadi.
B. SuLFAsr
Sebagian alkohol, arilamin, dan fenol mengalami sulfasi.
Donor sulfat dalam reaksi sulfasi berbagai molekul
tersebut dan sulfasi biologis lain (mis. sulfasi steroid,
glikosaminoglikan, glikolipid, dan glikoprotein) adalah
adenos in 3' - fosfat- 5' -fosfos ulfat ( PAP S ) (B ab 2 4) ; se nyawa
ini dinamai "sulfat aktif".
C. KoNJUGASI DENGAN GLUTA,TION
Glutation (y-glutamil-sisteinilglisin) adalah suatu tripeptida
yang terdiri dari asam glutamat, sistein, dan glisin (Gambar
3-3). Glutation sering disingkat GSH (karena gugus sulfhidril
sisteinnya, yaitu bagian molekul yang aktif). Sejumlah
xenobiotik elektrofilik yang berpotensi toksik (misalnya
karsinogen tertentu) dikonjugasikan dengan GSH nukleofilik
dalam reaksi yang dapat diringkas sebagai berikut:
R+CSH---+R-S-C
R adalah xenobiotik elektrofilik. Enzim yang mengatalisis
reaksi ini disebut glutation S-transferase yang terdapat
dalam jumlah besar di sitosol hati dan dalam iumlah lebih
beragam glutation S-transferase yang memperlihatkan
spesifitas substrat yang berbeda dan dapat dipisahkan dengan
menggunakan teknik elektroforesis dan teknik lainnya. Jika
xenobiotik yang berpotensi toksik tidak dikonjugasikan
dengan GSH, xenobiotik tersebut akan bebas berikatan
secara kovalen dengan DNA, RNA, atau protein sel sehingga
dapat menyebabkan kerusakan sel serius. Oleh karena itu,
GSH merupakan mekanisme pertahanan Penting terhadap
senyawa toksik, misalnya obat dan karsinogen tertentu. Jika
kadar GSH di suatu jaringan, seperti hati menurun (seperti
dapat terjadi pada pemberian senyawa tertentu yang berealai
lebih rentan terhadap cedera akibat berbagai bahan kimia,
yang dalam keadaan normal dikonjugasikan dengan GSH.

Konjugat glutation mengalami metabolisme lebih lanjut
sebelum diekskresikan. Gugus glutamil dan glisinil yang
berasll dari glutation dikeluarkan oleh enzim spesifik, dan
sebuah gugus asedl (diberikan oleh asetil-KoA) ditambahkan
ke gugus amino pada residu sisteinil yang tersisa. Senyawa
yang terbentuk adalah asam merkapturat, suatu konjugat
L-asetilsistein, yang kemudian diekskresikan dalam urine.
Glutation memiliki fungsi penting lain pada sel manusia
selain peranannya dalam metabolisme xenobiotik.
1. Ikut serta dalam dekomposisi hidrogen peroksida,
yang berpotensi toksik dalam reaksi yang dikatalisis oleh
glutation peroksidase (Bab 21).
2. Merupakan reduktan intrasel penting yang membantu
mempertahankan gugus SH esensial enzim dalam
keadaan tereduksi. Peran ini dibahas di Bab 21, dan
keterlibatannya dalam anemia hemolitik akibat defisiensi
glukosa 6-fosfat dehidrogenase dibahas di Bab 2l dan
5r.
3. Pada pengangkutan asam amino tertentu yang
menembus membran di ginjal, diduga terdapat suatu
siklus metabolikyang melibatkan GSH sebagai pembawa.
Reaksi pertama dalam siklus tersebut diperlihatkan di
bawah.
Asam amino + CSH -- Asam amino y-glutamil
+ Sisteinilglisin
Reaksi ini membantu memindahkan asam amino
tertentu menembus membran plasma. Asam amino tersebut
kemudian dihidrolisis dari kompleksnya dengan GSH dan
GSH tersebut disintesis dari sisteinilglisin. Enzim yang
mengatalisis reaksi di atas adalah y-glutamil-transferase
(GGT). Enzim ini terdapat di dalam membran plasma
sel tubulus ginjal dan sel duktulus empedu, dan di dalam
retikulum endoplasma hepatosit. Enzim ini memiliki nilai
diagnostik karena pada berbagai penyakit hepatobiliaris
terjadi pembebasan enzim ini ke dalam darah yang berasal
dari sel hati.
D. REAKSI LAIN
Dua reaksi lain yang terpenting adalah asetilasi dan
metilasi.
1. Asetilasi-Asetilasi diwakili oleh
X + Asetil-KoA---+ Asetil-X + KoA
X mewakili suatu xenobiotik. Seperti reaksi asetilasi lain,
asetil-KoA (asetat aktif) adalah donor asetil. Reaksi ini
dikatalisis oleh asetiltransferase yang terdapat di dalam
sitosol berbagai jaringan, terutama hati. Obat isoniazid
yang digunakan untuk mengobati tuberkulosis, mengalami
asetilasi. Individu dapat diklasifikasikan sebagai asetilator
cepat atau lambat karena terdapat bentuk polimorfik
asetiltransferase. Hal ini memengaruhi laju pembersihan
BAB 52:METABOLISME XENOBIOTIK / 657
obat, seperti isoniazid dari darah. Asetilator lambat lebih
rentan mengalami efek tolaik tertentu isoniazid karena
obat ini akan menetap lebih lama pada kelompok orang
tersebut.
2. Metilasi-Beberapa xenobiotik mengalami metilasi oleh
metilransferase dengan menggunakan S-adenosilmetionin
(Gambar 29-17) sebagai donor metil,
AKTIVITAS ENZIM YANG
MEMETABOLISME XE NOBIOTI K
DIPENGARUHI OIEH USIA, JENIS
KEIAMIN, & FAKTOR IAIN
Terdapat berbagai faktor yang memengaruhi aktivitas enzim-
enzim yang memetabolisme xenobiotik. Aktivitas enzim-
enzim ini dapat menunjukkan perbedaan bermakna di
antara spesies. OIeh karena itu, contohnnya, kemungkinan
toksisitas atau karsinogenisitas xenobiotik pada satu
spesies tidak sama dengan spesies lain. Terdapat perbedaan
signifikan dalam aktivitas enzim di antara individu, dan
banyak di antaranya disebabkan oleh faktor genetik.
Aktivitas sebagian enzim ini bervariasi sesuai usia dan jenis
kelamin.
Asupan berbagai xenobiotik, misalnya fenobarbital,
PCB, atau hidrokarbon tertentu dapat menyebabkan
induksi enzim. Oleh karena itu, dalam mengevaluasi respons
biokimiawi terhadap xenobiotik, penting diketahui apakah
yang bersangkutan telah terpajan bahan-bahan pengindulai
ini. Metabolit xenobiotik tertenru dapat menghambat atau
mer.rngszrng aktivitas enzim-enzim yang memetabolisme
xenobiotik. Hal ini juga dapat memengaruhi dosis obat
tertentu yang diberikan kepada pasien. Berbagai penyakit
(mis. sirosis hati) dapat memengaruhi aktivitas enzim yang
memetabolisme obat sehingga kadang-kadang dosis berbagai
obat untuk pasien dengan penyakit ini perlu disesuaikan.
RESPONS TERHADAP XENOBIOTIK
P EFEK FARMAKOLOGIK,
'VIENCAKUIMUNOTOGIK, &
TOKSIK,
KARSINOGENIK
Xenobiotik dimetabolisme di dalam tubuh oleh reaksi-
reaksi yang diterangkan di atas. Jika xenobiotik tersebut
I dapat mengubahnya
berada dalam bentuk obat, reaksi fase
ke dalam bentuk aktif atau mungkin mengurangi atau
menghilangkan efek obat tersebut, jika xenobiotik itu
sudah aktif secara farmakologis tanpa perlu dimetabolisme
sebelumnya. Berbagai efek yang ditimbulkan oleh obat
merupakan bidang studi farmakologi; di sini penting
disadari bahwa obat bekerja terutama melalui mekanisme
biokimiawi. Tabel 52-2 meringkaskan empat reaksi penting
658 / BAGIAN Vl:TOPIK KHUSUS
Tabel 52-2. Beberapa reaksi obat penting akibat
bentuk mutan atau polimorfik enzim atau proteinr
rDefisiensi C6PD dibahas di Bab 21 dan 51 dan hiPertermia maligna di Bab
48. Paling tidak satu gen, selain gen yang menyandi reseptor rianodin, terlibat
dalam kasus tertentu hipertensi maligna. Terdapat banyak contoh lain reaksi
obat yang didasarkan pada polimoriisme atau mutasi
yang mencerminkan perbedaan genetik dalam struktur
enzim dan protein di antara individu-bagian bidang studi
yang dikenal sebagai farmakogenetika (lihat bawah).
Polimorfisme yang memengaruhi metaboiisme obat
dapat terjadi pada enzim apapun yang berperan dalam
metabolisme obat (termasuk kelompok sitokrom P450),
pada transPorter dan pada reseptor.
Xenobiotik tertentu bersifat sangat toksik bahkan
pada kadar rendah (mis. sianida). Beberapa xenobiotik
lain, termasuk obat, tidak menimbulkan efek toksik jika
diberikan dalam jumlah cukup. 'Walaupun spektrum efek
toksik xenobiotik sangat iuas, secara garis besar dapat
dikeiompokkan ke dalam tiga kelompok besar (Gambar
52-r).
Pertama adalah jejas sel (sitotoksisitas), yang dapat cukup
parah sehingga mematikan sel. Terdapat banyak mekanisme
yang digunakan oleh xenobiotik untuk mencederai sel. Salah
satu yang dibahas di sini adalah pengikatan secara kovalen
spesies reaktif xenobiotik, yang dihasilkan oleh metaboiisme
pada makromolekul sel. Makromolekul sel sasaran tersebut
DNA, RNA, dan protein. Jika makromolekul tempat
xenobiotik reaktif terikat ini esensiai bagi kelangsungan
hidup jangka-pendek, misalnya protein atau enzim yang
berperan penting dalam suatu fungsi sel, seperti fosforilasi
oksidatif atau regulasi permeabilitas membran plasma, efek
yang kuat terhadap fungsi sel dapat cepat terlihat.
Kedua, spesies reaktif suatu xenobiotik dapat berikatan
dengan protein dan mengubah antigenisitasnya. Xenobiotik
ini dikatakan berfungsi sebagai hapten, yi. molekul kecil
yang tidak merangsang pembentukan antibodi dengan
sendirinya, tetapi akan berikatan dengan antibodi jika
telah terbentuk. Antibodi yang terbentuk kemudian dapat
merusak sel melalui beberapa mekanisme imunologis yang
sangat mengganggu proses biokimiawi normal sel.
Ketiga, reaksi spesies aktif karsinogen kimiawi
dengan DNA diperkirakan sangat penting dalam proses
karsinogenesis kimiawi. Beberapa bahan kimia (mis.
benzo[cr]piren) perlu diaktifkan oleh monooksigenase di
retikulum endoplasma agar menjadi karsinogenik (sehingga
disebut karsinogen takJangsung). Karena itu, aktivitas
monooksigenase dan enzim-enzim lain yang memetabolisme
xenobiotik dapat membantu menentukan apakah senyawa
tersebut menjadi karsinogenik atau "terdetoksifikasi". Bahan
kimia lain (mis. berbagai bahan pengalkil) dapat bereaksi
langsung (karsinogen langsung) dengan DNA tanPa
mengalami aktivasi kimiawi di dalam sel.
Enzim epoksida hidrolase menarik perhatian karena
enzim ini dapat menimbulkan efek protektif terhadap
karsinogen tertentu. Produk kerja monooksigenase tertentu
pada beberapa substrat prokarsinogen adalah epolaida yang
dapat bersifat sangat reaktif dan mutagenik atau karsinogenik
atau keduanya. Epoksida hidrolase-seperti sitokrom P450
yang juga terdapat di membran retikulum endoplasma-
bekerja pada senyawa ini dan mengubahnya menjadi
dihidrodiol yang jauh kurang reaktif. Reaksi yang dikatalisis
oleh epoksida hidrolase dapat disajikan sebagai berikut:
ll +H2o +
II
-"a,r" -
o tl -
-c-c
HO OH
Epoksida Dihidrodiol
FARMAKOGE NO'VII KA AKAN
MENDORONG PERKEMBANGAN OBAT
BARU YANG LEBIH AMAN
Seperti disebutkan di atas, farmakogenetika adalah ilmu
yang mempelajari peranan variasi genetik dalam respons
terhadap obat. Berkat kemajuan dalam penentuan sekuens
genom manusia, telah berkembang sebuah bidang studi
baru-farmakogenomika omics)-baru-6aru
ini. Bidang ini selain mencakup farmakogenetika juga
mencakup beragam aktivitas yang lebih luas. Informasi dari
genomika, proteomika, bioinformatika, dan disiplin lain,
seperti biokimia dan toksikologi akan dipadukan untuk
memungkinkan pembuatan obat baru yang lebih aman.
Dengan diketahuinya sekuens semua gen manusia dan
protein yang tersandi di dalamnya saat ini, sejumlah besar
 BAB 52: METABOLISME XENOBIOTIK / 6s9

Sitokrom P450

.Jeias sel

Gambar 52-1. Skema sederhana ini memperlihatkan bagaimana metabolisme suatu xenobiotik dapat menyebabkan jejas sel,
kerusakan imunologis, atau kanker. Dalam hal ini, pengubahan xenobiotik menjadi suatu metabolit reaktif dikatalisis oleh
sitokrom P450, dan pengubahan metabolit reaktif (mis. suatu epoksida) menjadi metabolit nontoksik dikatalisis oleh CSH-
transferase atau epoksida hidrolase.

sasaran baru tempat kerja obat akan terungkap. Informasi
ini juga akan mengungkapkan polimorfisme (istilah ini
dibahas secara singkat di Bab 49) enzim dan protein yang
berkaitan dengan metabolisme, kerja, dan totr<sisitas obat.
Microarrays yang mampu mendeteksi polimorfisme tersebut
akan dikembangkan sehingga pemeriksaan penyaring untuk
mendeteksi polimorfisme yang berpotensi merugikan individu
dapat dilakukan sebelum dimulainya suatu pengobatan.
Untuk menganalisis genotipe P450 tertentu, sudah tersedia
gene chips (mis.
untuk CYP2D6yangproduk gennya berperan
dalam metabolisme banyak obat antidepresan, antipsikotik,
monooksigenase yang juga dikenal sebagai sitokrom
P450. Pada fase 2, spesies yang telah terhidroksilasi
dikonjugasikan dengan berbagai senyawa hidrofilik,
misalnya asam giukuronat, sulfat, atau glutation.
Penggabungan kedua fase ini menyebabkan perubahan
senyawa lipofilik menjadi senyawa larut-air yang dapat
dieliminasi dari tubuh.
. Sitokrom P450 mengatalisis reaksi yang memasukkan
satu atom oksigen yang berasal dari oksigen molekular
llmu kimia

ffil
kombinasi
penyekat reseptor B, dan beberapa obat kemoterapi). Studi
Gambar 52-2 meringkaskan beberapa pendekatan yang komputasi
digunakan untuk mengembangkan obat baru. Pendorong Pengetahuan tentang
utama dalam pengembangan obat baru adalah keinginan patogenesis
untuk meningkatkan kualitas pengobatan dan menciptakan penyakit spesifik
obat yang lebih aman serta bersifat individual, dengan
mempertimbangkan polimorfisme dan faktor lain. Seleksi sasarsn obat
Diperkirakan bahwa di Amerika Serikat saja terjadi sekitar {gen, RNA, protein, glikokonjugat, dsb.}
I
100.000 kematian akibat reaksi simpang obat setiap tahun. *
Diharapkan bahwa informasi baru yang berasal dari studi di
Pembuatan model obat dan interaksi obat deilgsn
berbagai bidang yang ditunjukkan di Gambar 52-2 dan dl
rnolek$l sasaran dan pcmrosesan selaniutnya
bidang lain akan menjelma menjadi terapi yang efektif dan yang dldasarkan pada penelitian
akhirnya juga menjadi era bart personalized therape utics. I
v

RINGKASAN Berbagqi uji (in vitro, in vivo)

I

Xenobiotik merupakan senyawa kimia yang asing bagi v

tubuh, misalnya obat, zat aditif makanan, dan polutan Kemungkinan ujt klinis
lingkungan; lebih dari 200.000 telah teridentifikasi
Xenobiotik dimetabolisme dalam dua fase. Reaksi utama Gambar 52-2. Skema sederhana beberapa pendekatan yang
fase 1 adalah hidroksilasi yang dikataliis oieh berbagai digunakan dalam pengembangan obat baru.
660 / BAGIAN Vl:TOPIK KHUSUS
ke dalam substrat, yang menghasilkan produk
terhidrolailasi, NADPH dan NADPH-sitokrom P450
reduktase berperan dalam mekanisme realai kompleks.
Semua sitokrom P450 adalah hemoprotein dan umum-
nya memiliki spesifisitas substrat yang luas, bekerja pada
banyak substrat endogen dan eksogen. Sitokrom adalah
biokatalis paling serba'guna yang diketahui.
Sekitar 60 gen sitokrom P450 ditemukan di jaringan
manusia,
Banyak sitokrom P450 umumnya terletak di retikulum
eridoplasma sel dan terutama banyak terdapat di hati
Sitokrom P450 dapat diindulai. Hd ini berdampak
penting dalam berbagai fenomena, sePerti interaksi obat
Sitokrom P450 terdapat juga di
mitokondria dan
terlibat dalam biosintesis kolesterol dan steroid. Enzim
ini menggunakan protein sulfur yang mengandung besi
nonheme, adrenodoksin yang tidak diperlukan oleh
isoform mikrosom.
Sitokrom P450 berperan besar dalam reaksi sel terhadap
senyawa kimia dan dalam karsinogenesis kimiawi karena
akdvitas katalitiknya.
Realai fase 2 dikatalisis oleh enzim seperti glukuronil-
transfetase, sulfotransferase, dan glutation S-transferase,
yang masing-masing menggunakan asam UDP-gluku-
ronat, PAPS (sulfat aktif), dan glutation sebagai donor'
Glutation tidak saja berperan penting dalam reaksi fase 2,
tetapi juga sebagai bahan peredulai intrasel dan terlibat
dalam transpor asam amino tertentu ke dalam sel.
Xenobiotik dapat menimbulkan berbagai efek biologis,
termasuk respons farmakologis, toksisitas, reaksi
imunologis, dan kanker.
. Berkat kemajuan dalam penentuan sekuens genom
manusia, telah tercipta suatu bidang baru, yaitu
farmakogenomika yang memberi harapan dalam
pembuatan obat baru yang dirancang secara rasional dan
lebih aman.
REFERENSI
Austin CP. The impact of the completed human genome sequence
on the development of novel therapeutics for human disease,
Annu Rev Med, 2004;55:1.
Borst B Elferink RO, Mammalian ABC transPorters in health and
disease. Annu Rev Biochem 2002;71:537 '
Evans rWE, Mcleod HL, Pharmacogenomics -
drug disposition,
drug targets, and side effects. N Engl J Med 2003;348:538.
Human CJ'tochrome P450 (CYP) Allele Nomenclature Committee.
http ://www. imm. ki,se/CYPalleles/
Kalow S7, Grant DM. Pharmacogenetics. Dalam: The Metabolic
and Molecuhr Basu oflnherind Dhease, ed ke'8. Scriver CR, et
al (ed), McGraw-Hill, 2001.
Katzung BG (ed). Basic and Clinical Pharmacologt, ed ke-9.
McGraw-Hill, 2004.
Lee \VM. Drug-induced hepatotoxiciry' N Engl J Med
2003;349:474
Szuromi B et al. Revisiting drug discovery' Science 2004;303:1795
(lni adalah pengenalan untuk serangkaian artikel tentang
pengembangan obat di edisi khusus Science ini.)
Veinshilboum R. Inheritance and drug response. N Engl J Med
2003;348:529.
\Wilkinson GR. Drug metabolism and variabiliry among patients in
drug response. N Engl J Med2005;350:2211.