NAMA : SRI RAHAYU

NIM : 2211E2023
KELAS : A NON REG
MATKUL : VIROLOGI
RESUME TENTANG TEKNIK DIAGNOSTIK : PENDEKATAN SEROLOGIS DAN
MOLEKULER VIRUS CORONA COVID-19

A. Pengertian
Diagnostik virus tertentu dapat digunakan untuk menentukan etiologi infeksi
virus akut atau reaktivasi infeksi laten. Ada dua pendekatan yang dapat digunakan:
demonstrasi respons antibodi spesifik atau keberadaan virus itu sendiri. Metode
serologis digunakan untuk mengukur anti respon tubuh sedangkan kehadiran virus
bisa bersifat setan dimulai dengan budidaya atau demonstrasi antigen spesifik atau
urutan gen. Untuk yang terakhir, met diagnostik molekuler peluang telah menjadi
semakin banyak diterapkan.Struktur virus dapat diselidiki langsung dari berbagai
spesimen klinis baik melalui isolasi virus, uji deteksi asam nukleat, atau uji deteksi
antigen. Untuk mencapai diagnosis terbaik bagi setiap pasien, penting untuk memilih
metode yang paling sesuai dengan menggunakan sampel yang dikumpulkan pada
waktu yang tepat.

B. Prinsip Tes Serologi yang Paling Umum

1. Uji Antibodi Netral
Antibodi yang menurunkan kapasitas infeksi virus disebut antibodi
penetralisir. Mereka pro disebabkan selama infeksi akut dan sering menetap
sepanjang hidup. Mereka juga berguna sebagai indikasi kekebalan. Antibodi IgM
dan IgG berpartisipasi dalam netralisasi.Dalam pengujian ini, sejumlah virus
menular yang diketahui dicampur dengan sampel serum dan diinkubasi dalam
waktu singkat, setelah itu sisa infektivitasnya diukur menggunakan kultur sel atau
hewan uji. Tingkat penularan ini kemudian dibandingkan dengan tingkat
penularan virus aslinya dan dari hasil ini dihitung kapasitas penetralannya. Saat
ini, tes antibodi penetral sering dilakukan dengan tes pengurangan plak dengan
akurasi yang lebih baik tetapi dengan persyaratan teknis yang lebih rumit.

2. Uji Penghambatan Hemaglutinasi

 Tes yang dikenal sebagai tes penghambatan hemaglutinasi ini penting aplikasi
diagnostik dan kesehatan masyarakat yang penting pada infeksi tertentu, terutama
pada influenza di mana antibodi yang diukur dengan tes ini menunjukkan
spesifisitas tambahan dibandingkan dengan tes lain dan oleh karena itu
memberikan informasi yang lebih rinci tentang kekebalan dan infeksi masa lalu.
Dalam pengujian tersebut, sediaan virus dengan kapasitas hemaglutinasi yang
telah ditentukan dicampur dengan sampel serum dan setelah inkubasi yang tepat,
kapasitas sisa hemaglutinasi diukur. Antibodi IgM dan IgG mampu menghambat
hemaglutinasi.

3. Tes Fiksasi Komplemen

Tes fiksasi komplemen (CFT) adalah tes laboratorium klasik tes diagnostik
sejarah, yang masih digunakan untuk penentuan antibodi virus dalam sampel
serum atau cairan serebrospinal pasien selama infeksi akut. Tes ini terutama
mengukur antibodi IgG. Dalam pengujian sebenarnya, komplemen dalam serum
pasien pertama-tama dihancurkan dengan pemanasan; serum kemudian dicampur
dengan antigen virus yang sesuai dan setelah inkubasi; ketika kompleks antigen-
antibodi terbentuk, eksog banyak pelengkap (biasanya dari serum kelinci
percobaan segar) ditambahkan. Komplemen ini kemudian berikatan dengan
kompleks dan setelah 'diperbaiki', komplemen ini tidak lagi mampu menyebabkan
lisis sel darah merah indikator tambahan. Biasanya, sel darah merah domba yang
dilapisi dengan antibodi sel darah merah antidomba digunakan sebagai indikator
untuk mengukur keberadaan sisa komplemen. Efeknya diukur dengan protokol
pengujian yang sesuai.

4. Tes Imuno
Dalam immunoassay, antibodi berikatan dengan immobi tertentu Antigen
yang teridentifikasi dapat langsung diamati dengan menggunakan antigen yang
terikat dan indikator yang tepat seperti anti yang diberi label antibodi
imunoglobulin. Antigennya bisa jadi immo dibilisasi menjadi pelat mikrotiter
plastik, slide kaca, kertas saring atau bahan serupa lainnya. Immunoassay yang
berbeda sekarang saat ini banyak digunakan untuk mengukur antibodi IgM dan
IgG spesifik virus. Dalam format dasar immunoassay fase padat, sel yang
terinfeksi virus, lisat sel, antigen virus rekombinan atau peptida sintetik yang
dimurnikan atau semi murni diimobilisasi ke fase padat, biasanya sumur
mikrotiter plastik atau slide kaca. Serum pasien diinkubasi dengan antigen dan
antibodi yang terikat, setelah tahap pencucian, divisualisasikan menggunakan
antibodi anti-imunoglobulin berlabel ('konjugat'). Jika label yang digunakan
adalah enzim maka pengujiannya disebut enzim immunoassay (EIA) atau enzim-
linked immunosorbent assay (ELISA) dan uji anti terikat tubuh dideteksi oleh
 reaksi warna yang bergantung pada enzim. Jika label fluoresen digunakan, metode
ini disebut uji imunofluoresensi (IFT).

5. Tes Deteksi Asam Nukleat

Demonstrasi langsung asam nukleat virus dalam sampel klinis merupakan
teknik yang semakin banyak digunakan untuk diagnosis virus. Menggunakan
reaksi berantai polimerase (PCR) dengan spesifik primer, rangkaian virus dapat
dengan cepat berkembang biak dan diidentifikasi disertifikasi. Teknik-teknik ini
sebagian besar menggantikan isolasi virus klasik. Tindakan ini cepat dilakukan
dan dalam banyak kasus lebih sensitif dibandingkan metode isolasi virus atau
deteksi antigen sehingga memungkinkan diagnosis dini. Mereka terbukti
berpartisipasi sangat berharga untuk diagnosis virus yang tidak dapat dibiakkan
seperti virus papiloma, parvovirus, dan hep. virus atitis.
Tes-tes ini tidak dapat membedakan membedakan antara virus yang mampu
bertahan dan virus yang tidak mampu bereplikasi, sehingga memerlukan kehati-
hatian dalam menafsirkan hasil pada kasus tertentu. Juga, kepekaan terhadap
kontaminasi silang tion di laboratorium telah menyebabkan beberapa masalah
dalam pengaturan laboratorium klinis.Spesifisitas tes ini didasarkan pada sejauh
mana rangkaian pencocokan pasangan antara asam nukleat virus dan primer.
Sensitivitas yang sangat tinggi merupakan ciri khas metode PCR; 1–10 salinan
asam nukleat virus dapat dideteksi dalam beberapa jam. Asam nukleat virus
diekstraksi dari bahan sampel dan diperkuat dalam tiga langkah berturut-turut.
Ganda DNA terdampar pertama-tama didenaturasi dengan panas dan dipisahkan
menjadi untaian tunggal.