PEMERIKSAAN DAN

EVALUASI SEMEN
TEMPAT
PEMERIKSAAN • Laboratorium Inseminasi Buatan dan
DAN EVAUASI • Laboratorium Fisiologi Reproduksi
SEMEN
 • Semen tidak boleh
– Terkena sinar matahari angsung,
SAAT - Kontak dengan logam,
- tercampur bahan kimia, urine, air dll,
PEMERIKSAAN - dikocok kuat dan sering
SEMEN • Harus cermat dan secepat mungkin tanpa
mengurangi ketelitian
• Alat harus bersih dan steril, bersuhu 37oC
 MAKROSKOPIS

MIKROSKOPIS
JENIS
PEMERIKSAAN
BIOLOGI

BIOKIMIA
PEMERIKSAAN MAKROSKOPIS

VOLUME

KONSISTENSI

WARNA

BAU

pH
PEMERIKSAAN MAKROSKOPIS

VOLUME

- MELIHAT SKALA DI TABUNG KOLEKSI

- Sapi rata2 4ml dan kado 1ml
PEMERIKSAAN MAKROSKOPIS

KONSISTENSI
- MIRINGKAN TAB KOLEKSI KMD TEGAKKAN, LIHAT
DI DINDING TAB, BILA LAMBAT TURUN MAKA
KENTAL
- Normal umumnya sedang sampai kental
PEMERIKSAAN MAKROSKOPIS

WARNA

Melihat warna semen dari putih

susu sampai kuning (Sapi), putih
sampai krem (Domba) sperma domba
PEMERIKSAAN MAKROSKOPIS

BAU

Sapi  seperti air susu,

Domba  prengus
PEMERIKSAAN MAKROSKOPIS

pH

- pH meter
- Kertas pH
- pH normal 6,4 – 6,8 (Sapi dan Kado)
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS

GERAKAN MASSA

GERAKAN INDIVIDU

KONSENTRASI

JUMLAH SPERMATOZOA HIDUP DAN MATI

JUMLAH SPERMATOZOA ABNORMALITAS (MORFOLOGIS)

PEMERIKSAAN • Gerakan dari beberapa sel spermatozoa
bersama-sama sehingga membentuk suatu
MIKROSKOPIS gelombang
GERAKAN • Mencerminkan daya gerak dan konsentrasi
sel spermatozoa
MASSA • 37o C agar diperoleh gerakan sel sperma yang
optimal
PEMERIKSAAN CARANYA
MIKROSKOPIS • 1) Letakkan satu tetes semen di atas gelas
obyek,
GERAKAN • 2) Lakukan pengamatan gerakan massa di
MASSA bawah mikroskop dengan pembesaran 100
kali.

+++ ++
 • Video gerakan massa +++ ; ++ dan + pada
PEMERIKSAAN sapi
MIKROSKOPIS • Video gerakan massa +++ ; ++ dan + pada
sapi pada domba
GERAKAN
MASSA
 • Gerakan per individu spermatoazoa
PEMERIKSAAN • Penting untuk mencapai sel telur (ovum)
MIKROSKOPIS yang ada di tuba-falopii
• 37o C agar diperoleh gerakan sel sperma yang
GERAKAN optimal
INDIVIDU • Harus dilakukan segera setelah semen
ditampung
 CARANYA
PEMERIKSAAN • 1). Letakkan satu tetes semen di atas gelas
obyek, tambahkan satu tetes atau 1 : 10 atau
MIKROSKOPIS 1 : 100 larutan NaCl fisiologis campur sampai
GERAKAN homogen.
• 2). Tutuplah gelas obyek dengan gelas
INDIVIDU penutup dan
• 3). Dilakukan pemeriksaan di bawah
mikroskop dengan pembesaran 400 kali.
 VIDEO
• 60/3  Motil progresif 60% dengan kecepatan
cepat
• 55/3  Motil progresif 55% dengan kecepatan
PEMERIKSAAN cepat
MIKROSKOPIS • 30/3  Motil progresif 30% dengan kecepatan
cepat
GERAKAN • 45% 3+.mpeg
INDIVIDU • 60% prog 3 ind.mpeg
• 80 % progresif 3+ ind.mpeg
• 90 % individu 3+.mpeg
 METODE
PEMERIKSAAN • RUSIA
MIKROSKOPIS • HAEMACYTOMETER PAPAN THOMA/NEUBAUER
IMPROVED
KONSENTRASI • SPEKTROFOTOMETER
• ALAT BLOM
 EVALUASI
PEMERIKSAAN • DENSUM (D)  JARAK KURANG DARI SATU
UKURAN KEPALA SPERMATOZOA (>1000jt/ml)
MIKROSKOPIS • SEMI DENSUM (SD)  JARAK LEBIH DARI SATU
UKURAN KEPALA SPERMATOZOA (500jt-
KONSENTRASI 1000jt/ml)
RUSIA • RARUM (R)  JARAK HSMPIRSAMA DENGAN
SATU UKURAN SPERMATOZOA (< 500jt/ml)
• AZOOSPERMIA (A)  TIDAK TERDAPAT ATAU
SEDIKIT SPERMATOZOA
PEMERIKSAAN
MIKROSKOPIS
METODE
KONSENTRASI • PAPAN THOMA
HAEMACYTO • PAPAN NEUBAUER IMPROVED
METER
 CARANYA
• 1). Mula-mula dihisap semen memakai pipet
PEMERIKSAAN eritrosit hingga angka 0.5.
• 2). Kemudian tambahkan pengencer (NaCl 3% 
MIKROSKOPIS methylen blue/eosin) sampai angka 101.
Sehingga diperoleh besarnya pengencer : 100/0.5
KONSENTRASI = 200 kali, karena cairan di dalam pipet sampai
angka 1.0 tidak ikut bercampur.
HAEMACYTO • 3). Tekuk ujung karet penghisap dan kocok pipet
dengan gerakan membentuk angka delapan
beberapa kali sampai larutan didalamnya
METER homogen.
• 4). Untuk selanjutnya sebelum dilakukan
THOMA pemeriksaan, maka buanglah 2-4 tetes larutan
untuk menghilangkan cairan dalam pipet yang
tidak ikut bercampur tadi.
• 5). Teteskan larutan di atas pada papan hitung
Thoma melalui salah satu sisi gelas penutup.
PEMERIKSAAN
MIKROSKOPIS CARA PERHITUNGAN
Lima (5) kotak besar yang terdiri dari 4
KONSENTRASI kotak yang berdiagonal dan 1 kotak di
sudut yang lain.
HAEMACYTO Jadi yang dihitung ada 5 x 16 kotak kecil
= 80 kotak kecil.
METER Dalam papan hitung thoma seluruhnya
mengandung 400 kotak kecil.
THOMA Bila jumlah sel spermatozoa di dalam 80
kotak kecil = y, jadi di dalam 400 kotak
kecil (0.1 mm3) semen mengandung
400/80 x 200 x Y.
Berarti di dalam 1 mm3 semen
mengandung = 400/80 x 200 x 10 x Y =
10000 Y. Sehingga, bila Y= 100 sel maka
di dalam 1 mm3 semen ada 10000 x 100
= 1000 000 sel spermatozoa/mm3.
 CARANYA
• 1). Nyalakan spektrofotometer selama 10
PEMERIKSAAN menit
MIKROSKOPIS • 2). Setting panjang gelombangnya (546 nm)
3). Masukkan NaCl fisiologis ke dalam kuvet
KONSENTRASI sebanyak 4 ml lalu tera di spektrofotometer
SPEKTROFOTO 4). Ambil kuvet tersebut tambahkan semen
sebanyak 40 mikroliter aduk sampai
METER homogen dengan pelan.
• 5). Masukkan lagi ke dalam spektrofotometr
kemudian ditera dan lihat hasilnya di kertas
printing.
 CARANYA
PEMERIKSAAN • Ambil obyek glass yang bersih dan bila bekas
perlu panaskan atau hapus dengan alkohol
MIKROSKOPIS untuk membebaskan lapisan lemaknya.
JUMLAH • Pada obyek glass diberikan satu tetes kecil
semen dan satu tetes besar larutan Eosin
SPERMATOZOA nigrosin di sampingnya.
HIDUP DAN • Campurkanlah zat warna itu dengan semen
sampai homogen.
MATI • Buat preparat ulas tipis dan keringkan di atas
nyala api (proses ini harus selesai maksimal
15 detik).
• Lihat di bawah mikroskop dengan
pembesaran 400X.
 EVALUASI
• SPERMATOZOA HIDUP KEPALA TDK TERWARNAI
PEMERIKSAAN • SPERMATOZOA MATI KEPALA TERWARNAI
MIKROSKOPIS
JUMLAH
SPERMATOZOA
HIDUP DAN
MATI

BERAPA PERSEN YANG HIDUP?

 EVALUASI
• SPERMATOZOA HIDUP KEPALA TDK TERWARNAI
PEMERIKSAAN • SPERMATOZOA MATI KEPALA TERWARNAI
MIKROSKOPIS
JUMLAH
SPERMATOZOA
HIDUP DAN
MATI
 EVALUASI
• SPERMATOZOA HIDUP KEPALA TDK TERWARNAI
PEMERIKSAAN • SPERMATOZOA MATI KEPALA TERWARNAI
MIKROSKOPIS
JUMLAH
SPERMATOZOA
HIDUP DAN
MATI
 EVALUASI
• SPERMATOZOA HIDUP KEPALA TDK TERWARNAI
PEMERIKSAAN • SPERMATOZOA MATI KEPALA TERWARNAI
MIKROSKOPIS
JUMLAH
SPERMATOZOA
HIDUP DAN
MATI
 • PRIMER
• SEKUNDER
PEMERIKSAAN
MIKROSKOPIS
JUMLAH
SPERMATOZOA
ABNORMALITAS
 • PRIMER
• SEKUNDER
PEMERIKSAAN
MIKROSKOPIS
JUMLAH
SPERMATOZOA
ABNORMALITAS
 UJI RESISTENSI
(KETAHANAN)
PEMERIKSAAN
BIOLOGI

UJI KATALASE
PEMERIKSAAN
LARUTAN HIPOTONIS
BIOLOGI
UJI RESISTENSI
(KETAHANAN)
BERTAHAN TERHADAP LARUTAN HIPOTONIS
 CARANYA

PEMERIKSAAN Siapkan tabung Erlenmeyer (100-200 ml), dengan pipet.

Diambil 0.02 ml semen dimasukkan ke dalam labu
BIOLOGI Erlenmeyer kemudian tambahkan 10 ml NaCl 1%, lalu
larutan diaduk pelan-pelan dan diperiksa gerak sel
UJI RESISTENSI spermatozoa di bawah mikroskop dengan pembesaran 100
kali.
(KETAHANAN) Pada setiap penambahan 10 ml NaCL 1% diusahakan
kontinyu dan akan dihentikan setelah nampak banyak sel
spermatozoa yang gerakannya hanya berputar-putar.
Proses ini harus dilakukan pada temperatur 20 – 25o C dan
seluruh percobaan harus sudah selesai dalam 5 menit.
 MENENTUKAN KEBERSIHAN SEMEN
PEMERIKSAAN SEL-SEL DARAH DAN BAKTERI DI
BIOLOGI DALAM SEMEN MENGHASILKAN
ENZIM KATALASE YANG DAPAT
UJI MEMISAHKAN OKSIGEN DARI SUATU
LARUTAN PEROKSIDA AIR (H2O2)
KATALASE ANGKA KATALASE ADALAH BANYAKNYA
UDARA YANG TERBENTUK DI ATAS
CAIRAN DI DALAM TABUNG KATALASE
 UJI
DEHIDROGENISASI
PEMERIKSAAN
BIOKIMIA
UJI KADAR ASAM
ASKORBIN
 Prinsip Uji ini berdasarkan lamanya waktu
PEMERIKSAAN dari semen untuk merubah warna biru
larutan methylen blue.
BIOKIMIA Dari kecepatan merubah warna biru
UJI methylen blue dapat ditentukan tingkat
kesuburan semen.

DEHIDRO
GENISASI SEMAKIN CEPAT MERUBAH WARNA BIRU
SEMAKIN SUBUR SEMEN TERSEBUT
 Setiap 100 ml semen
PEMERIKSAAN
BIOKIMIA Subur mengandung 3 –
UJI KADAR 8 mg asam ascorbin
ASAM Kurang subur <3 mg
ASKORBIN asam ascorbin,
atau >8 mg
 Jenis hewan : Domba
LAPORAN Umur :
Nama hewan :

1. PEMERIKSAAN MAKROSKOPIS Parameter Hasil Normal Kelainan Keterangan

Volume
Konsistensi
Warna
Bau
pH

Keterangan:
- Kolom Hasil dibuat simulasi
- Kolom Normal bisa dicari dari bacaan baik Indonesia maupun Asing
LAPORAN Parameter Hasil Normal Kelainan Keterangan
Gerakan massa
Gerakan individu
2. PEMERIKSAAN MiKROSKOPIS
Konsentrasi (Rusia)

Konsentrasi (Thoma)

Konsentrasi
(spektrofotometer)
% Hidup
% Mati
% Abnormalitas
Keterangan:
- Kolom Hasil dibuat simulasi
- Kolom Normal bisa dicari dari bacaan baik Indonesia maupun Asing
 3. PEMERIKSAAN
BIOLOGI

LAPORAN UJI RESISTENSI

• - PRINSIP
• - PROSEDUR
• - EVALUASI
LAPORAN

DIKUMPULKAN DI RUANG DOSEN INSEMINASI BUATAN A314 LANTAI 3

PALING LAMBAT DIKUMPULKAN BESOK JAM 13.00

JANGAN LUPA BUKU LAPORAN DIBERI NAMA, NIM DAN KELAS

TERIMA
KASIH