MODUL PRAKTIKUM BIOTEKNOLOGI MAKRO/MIKROALGA

Materi : Uji Antioksidan

Alat dan Bahan:

Alat:

 Labu ukur 100 ml

 Labu ukur 250 ml
 Corong
 Tabung reaksi 250 ml
 Makropipet 1-10 ml
 Rak tabung reaksi
 Nampan
 Lemari asam
 Spektrofotometer
 Mikropipet
 Vortex
 Tabung reaksi 10 ml

Bahan:

 DPPH 0,0059 gr
 Metanol 250 ml
 Asam Askorbat
 Alumunium Foil

Prosedur kerja

A. Uji Antioksidan Spirulina sp.

Pengujian antioksidan dilakukan dengan mengacu pada penelitian milik Ardhani (2018)
dan dimodifikasi. Variasi konsentrasi untuk masing-masing larutan uji adalah 1000 ppm, 800
ppm, 500 ppm. Pengujian dilakukan dengan menimbang sampel sebanyak 0,1 gr dilarutkan
ke dalam 100 mL akuades untuk pembuatan larutan induk 1000 ppm. Dari larutan induk 1000
ppm dipipet sebanyak 16 mL untuk konsentrasi 800 ppm dimasukan dalam tabung reaksi 20
mL dan ditambahkan 4 mL akuades. Dari konsentrasi 1000 ppm dilakukan pengenceran
bertingkat pada masing-masing konsentrasi dan ditambahkan akuades. Larutan DPPH dibuat
dengan melarutkan 0,0059 g bubuk DPPH ke dalam 250 mL metanol p.a. Blanko sampel
dibuat dengan cara 3 mL larutan DPPH dimasukan kedalam tabung reaksi. Tiap serial
konsentrasi dimasukan ke dalam tabung reaksi masing-masing sebanyak 500μL dan
ditambahkan larutan DPPH masing-masing 5000μL, kemudian divortex hingga homogen.
Selanjutnya, tabung reaksi diinkubasi pada suhu ruang berkondisi gelap selama 30 menit dan
dibaca absorbansinya dengan spektrofotometri pada panjang gelombang 517 nm.

Kontrol positif yang digunakan dalam penelitian ini adalah asam askorbat dengan seri
konsentrasi 10 ppm, 8 ppm, 6 ppm, 4 ppm, 2 ppm, 1 ppm. Persen aktivitas penghambatan (%
inhibisi) dihitung dengan rumus :

Nilai 𝐼𝐶50 merupakan konsentrasi dimana ekstrak dapat menangkap radikal bebas sebesar
50%. Hasil persentase inhibisi yang diperoleh dimasukan dalam persamaan regresi linear
dengan persamaan Y=ax+b. Grafik dibuat dengan konsentrasi larutan asam askorbat (ppm)
sebagai sumbu X terhadap persen inhibisi pada sumbu Y.

B. Pengamatan Mikroskop

1. Buatlah preparat sampel untuk pengamatan di mikroskop

2. jika sudah muncul gambar yang ambil foto atau capture dengan alat di PC.

3. cantumkan informasi pembesaran di Mikroskop dan berikan informasi mengenai

ukuran

sel microalgae.

4. setelah itu identfikasi bentuk mikroalga tersebut berdasarkan gmabr yang di dapat dan

studi literatur.