KELOMPOK III

PENGARUH CHLOROACETAMIDE PADA MEMBRAN PLASMA

ST. ASRIATI HERLINA TANGNGA VITA ANGRIANA SAHRINI RAUF TAJUDDIN KACANG

PENGARUH CHLOROACETAMIDE PADA MEMBRAN PLASMA

Penelitian ini menemukan hubungan biosentesa VLCFAs dengan efek fitotoksik herbisida chloroacetamide Sampel : bibit mentimun

Menggunakan 2 fase pemisahan &masing masing di analisa kandungan asam lemaknya

Chloroacetamide mentimun dalam membran plasma

VLCFAs

VLCFAs yang menjadi sumber pokok pemotongan rantai acyl fungsi membran plasma kematian tanaman.

Bahan Tanaman & Bahan Kimia : -Biji mentimun (varietas delikatess) - [2-14C] Malonate
-Lipid -Monensin -Bahan kimia lainnya - Standar Asam Lemak - Reagen derivatesasi -Pelarut untuk analisa lipid

INKUBASI : Setelah di tumbuhkan & inkubasi 3 hari + metazachlor tumbuhkan lagi 3 hari berikutnya, setiap 16 jam & 8 jam sehari semalam atur pada suhu 28 derajat C PELABELAN BIBIT : Bibit di tumbuhkan di atas vermiculate & kran air +cahaya , suhu sama selama 7 hari. Lalu sampel kotiledon di iris & 24 jam, 20 derajat C di inkubasi dalam cawan petri berisi nutrisi dengan cahaya tanpa henti.

ISOLASI MEMBRAN PLASMA: -Semaian bibit diblender homogen + (N-morpholino)asam propanesulfonic saring & pisahkan dari plastid dengan sentrifugasi selama 20 menit sentrifugasi kembali 1 jam suspensi ulang dalam sukrosa + 2DTT + EDTA pecahan mikrosomal diperoleh sebagai pellet.

Ada 3 analisa yang dilakukan : 1. Analisa asam lemak

- Asam lemak yang dihasilkan dari membran fosolipid dan cerebroside berdasarkan sifat kimianya.

2. Analisa Lipid
- Pecahan membran lipid di ekstraksi dengan modifikasi dari Bigh & Dayer

3.Analisa immunoblot
Analisa immunoblot menggunakan uji sodium dodecylsulfate (SDS-PAGE)

Uji Blot di kembangkan dengan alat deteksi -ECL western blot chemiluminescence
-Hyperfilm ECL film

Hasil dan diskusi : Membran plasma murni dan analisa lipid (lihat tabel 1) Membran tempat diperolehnya VLCFAs ditemukan paling tinggi di membran plasma. (lihat tabel 2)

Komposis asam lemak pada intraseluler membran dan plasma membran dengan dua fase pemisahan :

EFEK METAZACHLOR PADA MEMBRAN PLASMA ASAM LEMAK : -Analisis dari isi membran plasma menunjukkan bahwa metazachlor mengubah komposisi asam lemak (gambar 3)

EFEK METAZACHLOR PADA VLCFAs SINTESIS DE NOVO : Efek inhibitor pada level membran VLCFAs dilakukan : Mengukur penggabungan de novo melonate pertama ke dalam lipid membran intra selular yang menghambat biosintesa VLCFAs dalam RE & GOLGI
Melonate kedua ke dalam lipid membran plasma yang disediakan dengan sintesis VLCFAs segar Radio HPLC temukan plasma membran asam lemak yang sudah di namai. Dengan 1 M metazachlor penggabungan VLCFAs berhenti. Monensin di gunakan sebagai pembanding chloroacetamide (gambar 6)

KESIMPULAN DAN EFEK FITOTOKSIK

Efek metazachlor pada mentimun yang berkecambah :

Berefek pada susunan de novo membran plastid, mitokondria & RE Mengganggu pembelahan sel
Pergeseran asam lemak dapat mengakibatkan kematian sel

Bukti kuat VLCFAs berperan dalam sifat fisik dan fungsi metabolisme pada membran plasma.

SEKIAN DAN TERIMA KASIH