PCR (Polymerase chain reaction)

Resta Mahesa
Apa itu PCR????
PCR (Polymerase chain reaction)
 PCR adalah reaksi polimerase
berantai, yaitu reaksi yang melibatkan
enzim polimerase yang dilakukan secara
berulang-ulang.
 Apa kegunaan PCR??
Polymerase Chain Reaction (PCR) dapat
digunakan untuk:
amplifikasi urutan nukleotida.
menentukan kondisi urutan nukleotida
suatu DNA yang mengalami mutasi.
bidang kedokteran forensik.
melacak asal-usul sesorang dengan
membandingkan finger print.
 Prinsip PCR

Polymerase Chain Reaction (PCR)

adalah metode untuk amplifikasi
(perbanyakan) primer oligonukleotida
diarahkan secara enzimatik urutan
DNA spesifik.
 Tahap Penggandaan

1.Denaturation
2.Annealing
3.Extention
 Bagian - Bagian PCR
Polymerase Chain Reaction (PCR) dapat
digunakan untuk:
amplifikasi urutan nukleotida.
menentukan kondisi urutan nukleotida
suatu DNA yang mengalami mutasi.
bidang kedokteran forensik.
melacak asal-usul sesorang dengan
membandingkan finger print.
Komponen Komponen PCR
Enzim DNA Polymerase
DNA cetakan/ DNA target
Primer
Buffer
dNTP
 Perawatan
Simpan alat pada tempat yang
datar
Lakukan kalibrasi secara berkala
Setelah pemakaian bersihkan alat
menggunakan lap bersih
 Aplikasi PCR di Bidang Klinis

Aplikasi PCR utama dibidang klinis

adalah untuk diagnosis, dan kloning. Yang
paling sering dipakai di bidang klinis saat ini
adalah untuk diagnosis, yaitu untuk deteksi
patogen infeksius dan identifikasi mutasi
pada gen yang berkaitan dengan faktor
resiko penyakit.
 Manfaat Teknik PCR
Memperkuat gen spesifik sebelum diklon.
Membuat fragmen gen DNA secara berlimpah
Dapat mendeteksi DNA gen virus yang sulit untuk
dideteksi
Dapat mendeteksi/ mendiagnosis DNA sel
embrionik yang mengalami kelainan sebelum
dilahirkan.
Bidang kedokteran forensik. Contohnya mendeteksi
penyakit yang dapat menginfeksi, variasi
dan mutasi dari gen.
Mengetahui hubungan kekerabatan antar spesies
atau untuk mengetahui dari mana spesies tersebut
berasal.
Melacak asal usul seseorang dengan
membandingkan finger print
 Apakah Kelebihan
dan Kelemahan PCR???
 Kelebihan
Memiliki spesifisitas tinggi
Sangat cepat, dapat memberikan
hasil yang sama pada hari yang
sama
Dapat membedakan varian
mikroorganisme
Mikroorganisme yang dideteksi
tidak harus hidup
Mudah di set up
 Kelemahan
Sangat mudah terkontaminasi
Biaya peralatan dan reagen mahal
Interpretasi hasil PCR yang positif
belum tervalidasi untuk semua
penyakit infeksi (misalnya infeksi
pasif atau laten)
Teknik prosedur yang kompleks dan
bertahap membutuhkan keahlian
khusus untuk melakukannya.