(UNPRI)
“BIOKIMIA KLINIK”
(1)
“Sintesis, Replikasi dan perbaikan DNA” Sabtu,
(2)
05 Oktober
“Struktur dan fungsi RNA, sintesis RNA” 2019
(3)
“Proses modifikasi RNA”
PROGRAM STUDI MAGISTER SAINS BIOMEDIK
Mengenal,,,menilik,,,mengenang,,,memahami sifat
dan kedirian manusia dari sisi zat kimia penyusun nya
Prof. Dr. Ramlan Silaban, M.Si.
Referensi :
1. Lehninger, Chapter-8 halaman 273- 305
2. Lehninger, Chapter-26 halaman 995 -- Sabtu;
3. Harper, Bagian V, halaman 304 - 415 13 Okt-2018
4. Lainnya
PENGANTAR KULIAH
DNA :
- Biomolecule
- Genotive
- Composed by nucleotides
(G,A,T,C) PROTEIN :
- Macromolecule
RNA :
- Fenotive
- Macromolecule
- Composed by amino
- Genotive
acids (there are 20s
- Composed by nucleotides amino acids composing
(G,A,U,C) protein)
1/26/2020 Prof. Ramlan Silaban 16
There are 6 reactions composing genetics material in
living cell and catalysed by enzymes
Classification Type of reaction catalyzed
BIOKIMIA
Mikrobiologi
BIOKIMIA BIOMEDIK
FISIOLOGI
-
Biomolekul :
Karbohidrat
Proses kimia Farmakologi
- Lemak Aplikasi dalam
-
-
Protein
Asam Nukleat
kehidupan manusia Fisiologi
- Vitamin
Anatomi
MATERIAL GENETIK DAN PROSES EKSPRESINYA
Asam Nukleat
Pengenalan material genetik
Genetic expression :
(central dogma FH Crick
replication
DNA
transcription
RNA
translation
PROTEIN
Apakah ada kaitan antara USIA dengan Bahan Genetik ?
DNA RNA
(deoxyribose nucleic acid) (Ribose nucleic acid)
STRUKTUR NUKLEOTIDA, ASAM NUKLEAT
Perhatikan:
Ikatan gula ribosa dengan basa
nitrogen (pada atom karbon nomor 1).
Ikatan gula ribosa dengan gugus fosfat
(pada atom karbon nomor 5).
Gugus hidroksil pada atom karbon
nomor 2
3
Nukleotida Penyusun RNA
Perangkaian Nukleotida
membentuk asam nukleat
Bagaimana nukleotida-nuleotida
dirangkai atau disusun secara teratur
melalui ikatan fosfodiester
Konformasi B – Konformasi
DNA.
Konformasi A – Konformasi
RNA.
STRUKTUR SEKUNDER DNA dan RNA
PENEMU STRUKTUR DNA
DNA
(sirkuler)
atau
plasmid DNA (linier)
Gen struktur p o
i
Gen Pengendali
Coba saudara jelaskan fungsi setiap gen
• M1 RNA yang
panjangnya 337
nukleotida sebagai
bagian dari enzim RNase RNA berukuran
P (memproses tRNA)
yang dimiliki oleh E. coli besar membentuk
memiliki banyak struktur
hairpin loops struktur kompleks
• Rangkaian RNA acakpun
dapat membentuk
struktur (60-70%)
G-U pairs
Intron T. thermophila,
Suatu ribozim (enzim dari
RNA) (1GRZ)
ANNEALING: HIBRIDISASI
Percobaan: DNA manusia dan lalat yang
mengalami denaturasi total.
Cuplikan DNA terdenaturasi dicampur dan
dibiarkan pada suhu ~ 65 ˚C selama beberapa
jam
Dalam kondisi ini basa-basa yang berpasangan
akan mengalami annealing.
Sebagian besar DNA lalat akan anneal dengan
DNA lalat; sedangkan DNA manusia akan anneal
dengan DNA manusia
Beberapa potongan DNA lalat akan anneal
dengan potongan DNA manusia membentuk
hybrid duplexes.
Hal ini menunjukkan adanya bagian yang sama
antara DNA manusia dan lalat sebagai bukti Bagaimana jika DNA
adanya kesamaan nenek moyang. manusia dan simpanse?
Melanjutkan diskusi tentang
Struktur dan biokimia
Bahan Genetik
Lechninger;
Chapter 8, halaman 273 --
dan
Chapter-22 halaman 862 –
Bacalah Buku tersebut sesuai pembagian tugas (lebih bagus
jika diskusi) , diberikan waktu 30 menit,,, tuliskanlah
rangkuman atau intisarinya dalam Buku Catatan mu,,,, jika
ada yang mau menjelaskan ke depan,,,silahkan
(1)
“Sintesis, Replikasi dan perbaikan DNA”
(2)
“Struktur dan fungsi RNA, sintesis RNA”
(3)
1/26/2020 “ProsesProf.modifikasi
Ramlan Silaban RNA” 47
(1)
“Sintesis, Replikasi dan perbaikan DNA”
Telah dikemukakan sebelumnya :
Asam Nukleat
Dalam untai DNA :
• Terdapat informasi genetik dalam bentuk Urutan
Nukeotida
• 1 gen satu sifat
• Terdapat ribuan gen (tanya google : Human genome,
berapa banyak sifat manusia)
• Ketika satu sifat hendak diekspresi, terlebih dahulu gen
penyandi nya diperbanyak (d-replikasi)
• Replikasi : hanya terjadi pada Gen
• Pada manusia : replikasi semi konservatif : 2; 4; 8; 16,
dst
REPLIKASI DNA
• Pada replikasi DNA, masing-masing untai DNA
berfungsi sebagai cetakan untuk sintesis untai
pasangannya yang baru, menghasilkan dua
molekul DNA.
• Cara ini disebut cara replikasi semikonservatif.
• Replikasi cara semikonservatif membutuhkan
pemisahan untai DNA (pelelehan sebagian,
atau denaturasi) sehingga untai tetua menjadi
cetakan.
DNA Replication
– Nucleotides added &
new strand forms at
replication forks
– DNA helicase (enzyme)
uncoils & breaks the
weak hydrogen bonds
between
complementary bases
(strands separate)
– DNA polymerase adds
new nucleotides to the
exposed bases
953 Leh
DNA Replication
• DNA ligase helps join
segments together
DNA Replication
– DNA polymerase
proofreads the new
DNA checking for errors
& repairing them; called
excision repair
– Helicase recoils the
two, new identical DNA
molecules
Molekul Gula pada Nukleotida
Ribosa merupakan molekul
gula pada RNA
2-Deoksiribosa merupakan
molekul gula pada DNA
Perhatikan:
Ikatan gula ribosa dengan basa
nitrogen (pada atom karbon nomor 1).
Ikatan gula ribosa dengan gugus fosfat
(pada atom karbon nomor 5).
Gugus hidroksil pada atom karbon
nomor 2
Perhatikan pasangan A-
U di RNA
DNA juga
dapat
membentuk
struktur
seperti ini.
mRNA
• Messenger RNA
• Single, uncoiled, straight strand of nucleic acid
• Found in the nucleus & cytoplasm
• Copies DNA’s instructions & carries them to the
ribosomes where proteins can be made
• mRNA’s base sequence is translated into the amino
acid sequence of a protein
• Three consecutive bases on mRNA called a codon
(e.g. UAA, CGC, AGU)
• Reusable
tRNA
• Transfer RNA
• Single stranded molecule containing 80
nucleotides in the shape of a cloverleaf
• Carries amino acids in the cytoplasm to
ribosomes for protein assembly
• Three bases on tRNA that are
complementary to a codon on mRNA are
called anticodons (e.g. codon- UUA;
anticodon- AAU)
• Amino Acid attachment site across from
anticodon site on tRNA
• Enters a ribosome & reads mRNA codons
and links together correct sequence of
amino acids to make a protein
• Reusable
rRNA
• Ribosomal RNA
• Globular shape
• Helps make up the structure of
the ribosomes
• rRNA & protein make up the
large & small subunits of
ribosomes
• Ribosomes are the site of
translation (making
polypeptides)
• Aids in moving ribosomes along
the mRNA strand as amino acids
are linked together to make a
prote
RNA
Sintesis RNA
Proses Transkripsi
• Tanskripsi
Sintesa RNA berdasarkan arahan DNA
[ perintah gen ]
- Saat ini kedua asam nukleat mengguna-
bahasa yg sama shg informasinya langsung
ditranskripsi/disalin dari satu mo-
lekul ke molekul yg lain
- DNA menyediakan suatu cetakan untuk
penyusunan urutan nukleotida RNA
- Molekul RNA yg di hasilkan merupakan
rekaman penuh dari instruksi2 pemba-
ngun protein dari gen disebut m RNA
- Mensintesis semua jenis RNA dari DNA
Translasi
- sintesis polipeptida yg sesungguhnya,
berdasarkan arahan dari m RNA
- tahap ini terjadi perubahan bahasa shg
sel tersebut harus menterjemah/transla
si urutan basa molekul m RNA kedalam
urutan as. amino polipeptida
- tempat ribosom
• Perbedaan transkripsi dan translasi pd
prokariora dan eukarita
- prokariota misal : bakteri
.transk transl terjadi dalam satu ruangan
.DNA tidak dipisahkan dari ribosom dan
pensintesa protein lainnya
.m RNA segera ditranslasi tanpa proses
tambahan
-
eukariota
.transk transl terjadi pd ruangan terpisah yaitu nukleus
dan sitoplasma
.transk terjadi dalam nukleus dengan hasil pra m
RNA,kemudian
diproses dengan berbagai cara oleh enzim sebelum
meninggalkan nukleus sebagai m RNA akhir yg fungsional
.m RNA berpindah dari nukleus ke sitoplasma melalui pori2
diselu
bung nukleus
.jadi transk gen eukariotik menghasilkan pra m RNA dan
pemrosesan
[ RNA prosesing ],menghasilkan RNA akhir
• Tahapan transkripsi
-Dipengaruhi enzim RNA polimerase yg berge
rak disepanjang promoter sampai dibela-
kang terminator
-Enzim ini membuka pilinan kedua untai
DNA sehg terpisah dan mengaitkan nuk-
leotida RNA pd saat molekul ini memben
tuk pasangan basa disepanjang cetakan
DNA
-RNA polimerase dapat menambahkan
nukleotida hanya pd ujung 3’ dari poli-
mer yg sdng tumbuh
-rentangan DNA yg ditranskripsi menjadi
molekul RNA disebut ‘unit transkripsi’
• Bakteri hanya memiliki satu tipe RNA po-
limerase
- Eukariota memiliki 3 tipe RNA polimera
se yg dipakai utk sintesis m RNA ada-
lah RNA polimerase II
• Pengikatan RNA pol dan inisiasi transkrip
- PROMOTER----daerah DNA dimana RNA pol
melekat dan mengawali trans-
kripsi,membentang td bbrp lusin nukleo-
tida dan menentukan untai heliks DNA yg
mana sbg cetakan
• Pd prokariota,RNA pol secara spesifik
mengenali dan berikatan dg promoter
- Pd eukariota,sekumpulan protein disebut
‘ faktor transk’ menjadi perantara pd pengi
katan RNA pol dan inisiasi transk
Setelah faktor transk ttt diikat promoter
barulah RNA pol mengikatkan diri dsbt
‘kompleks inisiasi transkripsi’
- Peran faktor transk dan urutan DNAprom
menjadi penting utk mengenal‘boks TATA’
dalam mem- btk komplek inisiasi
- Begitu RNA pol terikat kuat pd prom,ke-
dua untai DNA mengulur disana dan en
zim mulai mentranskripsi untai cetakan
nya
• Elongasi untai RNA
- Saat RNA pol bergerak disepanjang DNA
,enzim tsb terus membuka puntiran
DNA lebih kurang 10-20 basa DNA seka
li gus berpsngan dg nukleotida RNA
- RNA pol menambahkan nukleotida ke
ujung3’ RNA yg sedang tumbuh
- Pd saat sintesis RNA berlsng heliks gan
da DNA terbentuk kembali,dan mol RNA
yg baru akan lepas dari cetakannya
- Pd eukariota berlangsung dg laju 40 nukl
/detik,krn satu gen tunggal dapat ditransk
secara bersamaan oleh RNA pol
yg saling mengikuti
Terminasi transkripsi
• - Transkripsi berlangsung sp RNA polimerasi
mencapai urutan DNA terminator
- Pd prokariota transk biasanya berhenti tepat pd akhir
terminasi
- Pd eukariot, RNA pol terus melewati sinyal terminasi
suatu urutan poliadenilase [AAUAAA]
didalam pra m RNA
- Pada titik 10-35 nukleotida,pra m RNA
dipotong hingga terlepas
- Tempat pemotongan pra m RNA ----tem
pat untuk menambah ekor poli [A]
Pemrosesan RNA
Yaitu penambahan tutup 5’dan ekor poli
[A],yg dimodifikasi oleh enzim dan terle-
tak pd kedua ujung pra mRNA eukariotik
- Ujung 5’----ditutup nukleotida guanin
- Ujung 3’----terdiri dari 30-200 nukleotida
adenin
Fungsi ujung2
- Melindungi m RNA dari perombakan
oleh e hidrolitik [nukleus]
- Tempat melekat ribosom [sitoplasma]
- Pada saat ini terdapat segmen leader dan
trailer adalah tempat lekat tutup,
RNA yg tidak ditranslasi
- Tahap yg paling mengagumkan dari
pemrosesan RNA didlm nukleus eukario
ta adalah pemindahan sebagian besar
mol RNA yg mula2 disintesis-----pekerja
an potong dan tempel yg disbt penyam-
bungan RNA [RNA splicing]
- Ini terjadi karena panjang DNA 8000
nukl----dibutuhkan 1200 nukl [400 as am]
utk mengkode protein,berarti gen uekari
ota dan transkrip RNA nya memiliki ren-
tangan nukl bukan pengkode
- Lebih mengejutkan lagi bahwa sebagian
besar urutan bukan pengkode tersebar
berselang seling diantara sel pengkode
- Disebut ‘intron’ dan ‘ekson’
- Cara penyambungan RNA,sinyal2 pd
urutan nukleotida pendek diujung intron
• Regulasi transkripsi
– Jika suatu protein (yang dikodekan oleh gen)
diperlukan, maka gen akan ditranskripsi
– Jika suatu protein (yang dikodekan oleh gen)
Tidak diperlukan, maka gen akan Tidak akan
ditranskripsi
89
Unit Transkripsi pada Bakteri
Operon
promoter
operator
-35 TTGACA
-10 TATAAT (Pribnow box)
90
Regulasi pada Transkripsi
91
Regulasi Lac operon
92
Induksi repressed operon
(allolactose)
(lac repressor) (can’t bind)
o
93
Regulasi Lac operon
94
Regulasi Lac operon
Biosynthetic
complex Operons
(Trp Operon)
96
Aktivasi & Deaktivasi Operon
effector
inactive
Activator
complex
97
Regulasi Transkripsi Eukariotik
• Kemampuan untuk aktivasi dan penekanan
gen menjadi bagian yang esensial untuk
memelihara kespesifikan sel
neuron hepatocyte
skin
98
Regulasi Transkripsi Eukariotik
99
(3)
“Proses Modifikasi RNA”
• Jika ada kesalahan pada saat transkripsi dari
DNA ke RNA, maka sel akan melakukan
modifikasi
Pada sel eukariot, proses transkripsi tidak terjadi
secara bersamaan, transkripsi terjadi di dalam inti
sel sedangkan translasi terjadi di dalam sitoplasma.
Proses transkripsi dan translasi pada eukariot lebih
kompleks bila dibandingkan dengan sel prokariot,
termasuk proses pembentukan mRNA.
mRNA pada eukariot diturunkan dari gen primer transkrip
dan melibatkan beberapa proses, yaitu
(1) Pemotongan sebagian besar precursor mRNA (pre-
mRNA) menjadi molekul mRNA yang lebih kecil,
(2) Penambahan kelompok 7-metil guanosin pada ujung 5’
(“topi ujung 5’”)molekul,
(3) Penambahan sekitar 200 nukleotida dengan urutan
adenilat nukleotida ( ujung “poly-A”) yang panjang pada
ujung 3’ molekul,
(4) Pembentukan protein spesifik yang kompleks. Proses
pemotongan melibatkan perubahan pre-mRNA menjadi
molekul mRNA dan juga sering melibatkan pemindahan
urutan utama dari ujung 5’ ke kodon inisial translasi,
dan segmen bukan kodon diantara daerah
kodon.
Jenis modifikasi RNA
• Pemindahan Urutan Intron dari Penyambungan
RNA
• Penyambungan Precursor tRNA
• Penyambungan Autokatalisis Pada Precursor
Tetrahymena tRNA
• Penyambungan Pre-mRNA: snRNAs, snRNPs, dan
Spliceosome
Agar dicari
penjelasannya
Sekian dan Terima Kasih