Magister Ilmu Gizi

Sekolah Pascasarjana
IPB University

MK. PENILAIAN STATUS GIZI LANJUT

PENILAIAN STATUS VITAMIN B6

(Buku Principal of Nutritional Assessment oleh
Rosalind S.Gibson)

OLEH :
LIYA PUTRI RAHMANIYA (I1504221016)

Sabtu, 17 Desember 2022

Latar Belakang
Sebagian besar vitamin B6 dalam tubuh dalam Ketiga bentuk vitamin B6 ini kemudian diubah, setelah
bentuk piridoksal-5'-fosfat (PLP) dalam otot penyerapan, menjadi piridoksal-5’-fosfat (PLP) atau
yang terikat pada fosforase piridoksamin-5'-fosfat (PMP), dua bentuk koenzim aktif vitamin
B6.
Peran penting PLP dalam tubuh :

• reaksi transaminasi dan hubungannya dengan

glikogen fosforilase, sintesis fosfolipid dan karnitin
membutuhkan serin palmitoyltransferase;
• enzim yang bergantung pada PLP dalam
Vitamin B6 ditemukan dalam makanan metabolisme lipid;
• mempengaruhi sistem kekebalan tubuh, baik
terutama sebagai piridoksal (aldehida),
respons imun humoral dan yang dimediasi sel dapat
piridoksamin (amina), dan piridoksin (alkohol) terpengaruh;
• berperan dalam memodulasi aksi beberapa hormon
steroid, sehingga mempengaruhi penyakit yang
dimediasi endokrin;
• koenzim untuk aminolevulinate sintase, enzim yang
terlibat dalam sintesis heme -> kekurangan vitamin
B6 yang parah, terjadi anemia mikrositik hipokromik.
 Lanjutan …
kecanduan alkohol, terapi
Kelompok populasi rentan yang berisiko
Perubahan status vitamin B6 estrogen, uremia, dan
terkena kekurangan Vitamin B6 : penyakit hati, obat-obatan,
• lansia, dewasa, wanita hamil dan dan zat yang berlawanan
Pasien dengan rheumatoid
menyusui, dan mungkin penyapihan arthritis dan mereka yang dengan vitamin B6 dalam
terinfeksi HIV juga tampaknya beberapa makanan
Kekurangan Vitamin B6 pada manusia berisiko, meskipun tampaknya
asupan makanan yang memadai.
dapat menyebabkan :
Kekurangan vitamin B6 juga dapat terjadi
kelelahan dan sakit kepala, kejang epileptiform, dan dengan defisiensi riboflavin, seperti
dermatitis seboroik, lesi mulut depresi dan kebingungan disebutkan sebelumnya, karena riboflavin
(glositis, cheilosis, stomatitis diperlukan untuk pembentukan PLP
sudut) koenzim

Anemia hipokromik, mikrositik Cacat genetik tertentu Melihat pentingnya peranan Vitamin B6 dalam tubuh, diperlukan adanya
penilaian biokimia status vitamin B6, karena tanda-tanda klinis dan gejala
(homosistinuria dan kekurangan vitamin B6 sangat tidak spesifik
sistationuria, xanturenat • Tiga tes biokimia yang paling banyak digunakan ialah koefisien
asiduria (cacat kinureninase), aktivasi untuk enzim eritrosit aspartat aminotransferase,
dan cacat pada ornithine konsentrasi PLP plasma, dan ekskresi urin produk degradasi vitamin
aminotransferase yang B6, khususnya asam piridoksilat urin. Dari ketiga tes tersebut, PLP
plasma mungkin merupakan ukuran tunggal terbaik karena
menghasilkan atrofi gyrate) mencerminkan simpanan jaringan.
Kriteria Interpretatif
Dewan Pangan dan Nutrisi AS (IOM, 2000) -> Indikasi ketidakcukupan : batas <20
nmol/L PLP plasma, berdasarkan ada tidaknya data yang menunjukkan
konsekuensi klinis atau fungsional pada atau di atas tingkat ini

• Eoronut SENECA investigators (1991) -> studi tentang orang tua yang tinggal di 11 negara
Eropa : prevalensi keseluruhan defisiensi 23%, ketika batas <20 nmol /L digunakan,
meskipun prevalensinya sangat bervariasi di antara pusat-pusat geografis yang berbeda.
• Penyelidik Belanda -> Batas yang sedikit lebih rendah (<19 nmol/L) : prevalensi hanya
3%-7% untuk nilai PLP plasma rendah di antara 444 orang dewasa berusia 20-79 tahun
(Brussaard et al., 1997)

Nilai PLP plasma  pada neonatus dan bayi : simpanan vitamin B6 Leklem (1990) dan Hansen et/ al (2001) -> penggunaan <30
nmol/L sebagai indikasi kekurangan biokimia, sedangkan batas
dalam tubuh yang cukup atau, sebagai alternatif, status normal yang lebih tinggi (yaitu, < 34,4 nmol/L) dipilih untuk digunakan
untuk usia ini dalam dua studi Inggris (Bailey et al., 1997; Bates et al., 1999).

Data sangat diperlukan untuk lebih mendefinisikan kriteria interpretatif untuk kadar PLP plasma yang didasarkan
pada studi yang mencakup ukuran penanda biokimia lain dari status vitamin B6, serta hasil kesehatan fungsional
yang merugikan (Hansen et al., 2001).
Pengukuran Plasma Piridoksal-5’-Fosfat

Prosedur normal : Tirosin apodekarboksilase (EC 4.11.25)

(Leklem, 1990; Euronut SENECA Investigators, 1991)

Dilakukan di bawah cahaya kuning untuk mencegah fotodekomposisi.

Metode ini sekarang sudah terstandarisasi dengan baik.

Berbagai metode menggunakan HPLC juga telah dicoba untuk memisahkan

dan mengukur PLP plasma, baik HPLC pertukaran kation dan kromatografi
kolom terbuka pertukaran kation diikuti oleh uji fluorometri telah
digunakan. (Sharma dan Dakshinamurti, 1992).

Masalah ekstraksi sampel, sensitivitas, dan throughput sampel

masih membatasi penerapan metode HPLC saat ini.

Beberapa kehilangan PLP terjadi ketika plasma dibekukan pada

suhu -20 °C (yaitu, 2,2%), tetapi ketika disimpan pada -30 °C, PLP
plasma stabil hingga 2 tahun (Borschel et al., 1987)
 Eritrosit Piridoksal 5’-Fosfat

Studi Metabolik Hansen et al. (2001) secara eksperimental

Situs fungsi
koensim PLP
Total Vit. B6 Plasma
Asupan makanan
Konsentrasi Total Vit.B6 dlm urin vitamin B6 pada janin
PLP eritrosit dan bayi
berhubungan Asam 4-piridoksat
Intraseluler dengan : Juga berkorelasi
Aktiv. Basal AIAT eritrosit (Heiskanen et al.,
1994)

Konsentrasi Kapasitas
konsentrasi PLP PLP eritrosit pengikatan
Dosis Vit.B6 
eritrosit mungkin  jauh Hb  untuk
merupakan indeks
yang menjanjikan lebih tinggi PLP.
dari status vitamin
B6
Daripada yang dicatat
untuk PLP plasma
(Bhagavan et al., 1975)
Lanjutan …
• Heiskanen et al., 1995 -> Rentang referensi untuk konsentrasi PLP eritrosit
telah diterbitkan untuk ibu menyusui Finlandia dan untuk anak-anak berusia
dari 2 bulan hingga 11 tahun
• Kant et al. (1988) -> Konsentrasi PLP eritrosit pada orang dewasa untuk tiga
kelompok usia: 25-35 tahun, 45-55 tahun, dan 65-75 tahun
• Pekerjaan lebih lanjut diperlukan untuk memvalidasi PLP eritrosit -> ukuran
status vitamin B6 pada manusia dan untuk menetapkan kriteria
interpretatif. Modifikasi metode Reinken (1972) yang digunakan untuk PLP
serum telah digunakan untuk pengujian ini.
• Konsentrasi piridoksal-5'-fosfat dalam darah utuh, disimpan pada -20 °C,
tetap tidak berubah selama setidaknya beberapa bulan.
 Vitamin B6 dalam Urin
Konsentrasi dalam urin :
Mencerminkan asupan makanan baru-baru ini daripada
50%-75% hadir
cadangan jaringan vitamin
Vitamin B6 yang
dieksresikan dalam bentuk
“bebas”, sisanya Dari asupan harian vitamin B6, sekitar 8% hingga 1%
dalam Urin
terikat diekskresikan sebagai bentuk bebas dan terikat.

Beberapa studi penipisan-replesi eksperimental pada
orang dewasa :
• Eksresi vitamin B6 “bebas” dalam urin
mencerminkan asupan makanan baru-
baru ini, tetapi hanya sampai titik
kritis.
• Di bawah tingkat ini pengurangan lebih
lanjut dalam asupan hanya
menghasilkan perubahan kecil dan
variabel dalam ekresi vitamin B6 dalam
urin. (Sauberlich, 1981; Kretsch et al.,
1995)
 variabilitas antara subjek untuk eksresi vitamin B6
total dan bebas dalam urin
• Subjek mengikuti diet metabolisme dalam studi
penipisan-replesi (Kretsch et al., 1995).
• Vitamin B6 total dan “bebas” dalam urin, dan
konsentrasi PLP plasma merespon mirip dengan
penipisan, dan lebih cepat daripada eritrosit
aminotransferase, sehingga pengukuran total
atau bebas vitamin B6 dalam urin dapat
digunakan.
Tren serupa telah dicatat untuk
jumlah total vitamin ("bebas"
ditambah vitamin B6 "terikat") yang
diekskresikan dalam urin (Gambar
21.5).
 Dalam studi populasi : Dalam studi individu :

o Sampel urin puasa pagi lebih disukai untuk o Beberapa koleksi urin 24 jam lebih dari 1-3 minggu
meminimalkan variasi yang terkait dengan asupan diperlukan untuk mencerminkan dengan benar status
cairan dan aktivitas fisik, yang dikumpulkan dalam vitamin B6 jangka panjang, membatasi kegunaan
beberapa survei awal (misalnya, Survei Nutrisi Sepuluh konsentrasi vitamin B6 dalam urin sebagai ukuran status
Negara Bagian AS) dan total konsentrasi vitamin B6 pada tingkat individu (Leklem, 1990).
dalam urin ditentukan -> B6 urin per μg/g kreatinin. o Obat-obatan seperti isoniazid, penicillamine, dan
cycloserine meningkatkan ekskresi vitamin B6 dalam
urin, mengacaukan penggunaan konsentrasi urin sebagai
ukuran status vitamin B6 .
Konsentrasi vitamin B6 berdasarkan
sampel urin biasa tampaknya terkait
dengan stimulasi persentase AIAT
eritrosit (Sauberlich, 1981), seperti
yang ditunjukkan pada Gambar 21.6.
Umumnya, dalam sampel urin 24 jam, ekskresi urin dari total vitamin B6
<0,5 μmol/hari adalah indikasi kekurangan (Leklem, 1990). Ketika sampel
urin biasa dikumpulkan, kriteria interpretatif tersedia untuk tingkat
vitamin B6 “bebas” dalam urin yang dinyatakan sebagai kreatinin μg/g
dan ini ditunjukkan pada Tabel 21.6.
 Pengukuran Vitamin B6 Urin
Untuk menganalisis total vitamin B6 :

Vitamin B6 Analisis total dan “bebas” vitamin B6 dalam urin biasanya dilakukan oleh uji mikrobiologis
terikat dalam menggunakan ragi Saccharomyces uvarum (Sacch. Carlsbergensis, ATCC No. 9080) sebagai
organisme uji (Miller dan Edwards, 1981).
urin

Di masa depan, HPLC dapat digunakan, asalkan masalah ekstraksi

sampel, sensitivitas, dan throughput dapat diselesaikan

Menjadi
bentuk
“bebas”
Dengan hidrolisis asam
 Asam 4-Piridoksat Urin

Asupan vitamin B6 oleh orang

Beberapa studi penipisan-replesi
dewasa berkisar dari sekitar 1 proporsi berubah seiring eksperimental
hingga 5 mg, sekitar 40% hingga bertambahnya usia dan sifat
60% diekskresikan sebagai asam 4-
piridoksat diet (Pannemans et al., 1994).
Asam 4-piridoksat
urin dan asupan vit
B6 dan rasio vit B6

Ada
Konsentrasi asam 4-piridoksat dalam urin : korelasi
yang kuat

protein makanan
telah dilaporkan
Asupan makanan baru-baru ini daripada cadangan jaringan pada asupan mulai
dari 1 hingga 2,7
mg/hari.

Korelasi antara asam 4-piridoksat urin dan vitamin

B6 urin total atau PLP plasma juga kuat (Kretsch et
al., 1995; Huang et al., 1998; Hansen et al., 2001).
Tingkat merespon sangat cepat terhadap
perubahan asupan dalam kisaran normal
(Brown et al., 1975; Leklem, 1990; Huang
et al., 1998; Hansen et al., 2001), tetapi
pada asupan , sensitivitas asam 4-
piridoksat urin buruk (Gambar 21.7).
Pengukuran sampel urin biasa tampaknya menjadi alternatif yang valid untuk pengukuran ekskresi asam 4-
piridoksat dalam sampel urin 24 jam

• Asalkan hasilnya dalam kreatinin

• Ada korelasi positif antara asam 4-piridoksat dan asam 4-piridoksat : rasio kreatinin dalam sampel urin 24 jam
• Rasio asam 4-piridoksat : kreatinin yang berasal dari sampel urin 24 jam dan sampel urin biasa yang diambil
pada hari berikutnya itu serupa

Kriteria Interpretatif Pengukuran asam 4-piridoksat

• Metode yang disukai : menggunakan HPLC dengan deteksi fluorometri.

• tingkat ekskresi asam 4-piridoksat urin
<3,0 μmol/hari pada pria dan wanita
dikaitkan dengan status vitamin B6 yang
tidak memadai (Leklem ,1990)
• Persiapan sampel minimal: sampel urin pertama-tama dilakukan dengan asam
trikloroasetat untuk mengendapkan protein apa pun dan kemudian
disuntikkan langsung ke dalam sistem HPLC. Setelah itu, asam 4-piridoksat
terdeteksi secara fluorometris (Sharma dan Dak shinamurti, 1992).
• Dalam sampel urin yang disimpan pada suhu -20 °C, asam 4-piridoksat stabil
untuk setidaknya 20 bulan (Arend dan Brown, 1981).
Uji Beban Triptofan
Piridoksal fosfat, salah satu bentuk vitamin B6,
adalah koenzim untuk kinureninase dan kinurenin
aminotransferase di jalur kinurenin (Gambar 21.8).
Enzim ini bekerja -> kinurenin dan 3-
hidroksikinurenin untuk membentuk asam
antranilik dan 3-hidroksiantranilik, dan kuinolin
turunan asam kinurenik dan xanturenat.
Uji Beban Triptofan
Dari metabolit yang diekskresikan, asam xanturenat biasanya ditentukan
setelah beban triptofan karena merupakan hal yang paling mudah
Vit B6 , aktiv. Enzim diukur. Lebih dari itu, dilaporkan menjadi tes biokimia yang paling
kinureninase dan sensitif untuk mengevaluasi status vitamin B6 dalam kondisi yang
kinurenin dikendalikan secara eksperimental (Brown, 1981; Kretsch et al., 1995).
aminotransferase 

Hasil dari studi penipisan-replesi :

Terutama jika didahului • Pengukuran asam xanturenat urin bersih

oleh dosis pemuatan
oral triptofan
setelah beban triptofan adalah indeks
biokimia paling sensitif dari status vitamin B6
(Brown, 1981; Kretsch et al., 1995). Tingkat
jauh lebih tinggi setelah 7 hari penipisan.
3-hidroksikinurenin dan kinurenin terakumulasi, • Tes ini tampaknya sensitif terhadap berbagai
yang mengarah pada peningkatan
pembentukan dan ekskresi asam xanturenat
asupan vitamin B6 yang rendah (yaitu <0,8
dan kinurenik, serta kinurenin, mg/hari) (Gambar 21.9).
hidroksikinurenin, dan asam kuinolinik
• Sensitivitas uji beban triptofan terhadap
asupan vitamin B6 dalam kisaran dewasa
normal (1,0 hingga 2,5 mg/hari) tidak
diketahui.
Lanjutan …
• Respon dari pengukuran status vitamin B6 yang lain, seperti PLP plasma, vitamin B6 total dan “bebas” dalam
urin, dan aktivitas aminotransferase, semua tertinggal sekitar 1 minggu di belakang titik penipisan vitamin B6
maksimal yang ditunjukkan oleh ekskresi asam xanturenat urin (Kretsch et al., 1995)
• Langkah-langkah ini merespon lebih lambat terhadap replesi vitamin B6 daripada asam xanturenat urin
(Hansen et al., 1997).
• L-isomer triptofan biasanya diberikan dalam studi manusia karena bentuk D-isomer tidak dimetabolisme
melalui jalur triptofan-niasin.
• Dewasa -> dosis pemuatan 2 atau 5 g L-triptofan cukup untuk menyebabkan peningkatan ekskresi urin
metabolit jalur kinurenin. Untuk bayi dan anak-anak, dosis pemuatan 100 mg/kg berat badan sesuai.
• Triptofan dapat diberikan sebagai tablet atau sebagai bubuk yang ditangguhkan dalam susu, dengan
sarapan, untuk menghindari efek samping seperti kantuk dan mual.
• Koleksi urin lebih dari 6-8 jam mungkin cukup jika asam xanturenat diukur, karena sebagian besar asam
xanturenat diekskresikan selama periode ini. Namun demikian, koleksi urin 24 jam lebih disukai (Luhby et
al., 1971).
 Faktor-faktor yang mempengaruhi ekskresi asam
xanturenat urin

Estrogen
• Secara langsung menghambat aktivitas enzim triptofan oksigenase (triptofan pirrolase) dan karenanya,
tes beban triptofan tidak sesuai untuk subjek hamil dan wanita yang menggunakan agen kontrasepsi oral.

Obat-obatan tertentu
• Hidrokortison juga mengganggu uji beban triptofan dengan meningkatkan aktivitas oksigenase triptofan di hati dan karenanya, ekskresi
kinurenin urin. Beberapa obat juga mengganggu prosedur analitis (misalnya, sulfonamid dan asam para-aminosalisilat). Metode kolorimetri
dalam kaitannya dengan kromatografi penukar ion sangat terpengaruh (Price et al., 1965).

Kanker dan Faktor lainnya

• Cenderung meningkatkan ekskresi urin asam xanturenat dan metabolit triptofan lainnya setelah beban triptofan (Rose dan
Randall, 1973). Faktor-faktor lain, seperti asupan protein, olahraga, dan massa tubuh tanpa lemak juga dapat mengganggu
tes (Bender, 1987).
 Kriteria Interpretatif : Pengukuran asam xanturenat

o Tingkat > 65 μmol/hari setelah beban triptofan 2-g o Teknik yang paling sering digunakan menggunakan lapisan tipis
menunjukkan status vitamin B6 yang tidak memadai atau kromatografi penukar ion untuk pemisahan asam
pada orang dewasa (Lekhem, 1990) xanturenat, diikuti oleh kolorimetri, spektrofotometri, atau
o Penyelidik lain yang mempelajari orang dewasa telah fluorometri. Metode-metode ini mampu menganalisis banyak
menggunakan dosis yang lebih besar hingga 5 g L- sampel dengan cepat dan juga sensitif, spesifik, dan dapat
direproduksi (Brown, 1981; Liu et al., 1996).
triptofan (Sauberlich, 1999)
o Sampel urin yang digunakan untuk pengukuran ekskresi asam
xanturenat atau asam kinurenik harus diasamkan menjadi pH 3-
4 untuk mengurangi pertumbuhan bakteri dan untuk
menstabilkan metabolit. Sampel harus dibekukan pada suhu -
15°C. Metabolit triptofan stabil untuk 2-3 bulan jika dibekukan,
setelah itu kerugian yang signifikan dari 3-hidroksikinurenin dan
asam 3-hidroksiantranilik dapat terjadi.
 Uji beban Kinurenin dan Metionin
Uji beban Kinurenin
• Tes beban kinurenin dikembangkan untuk digunakan dengan
wanita hamil dan subjek dengan penyakit atau di bawah tekanan,
ketika interpretasi uji beban triptofan sulit yang melewati
enzim triptofan oksigenase (triptofan pirrolase) (Gambar 21.8).
• Dosis oral 200 mg L-kinurenin sulfate menghasilkan peningkatan
sederhana dan dapat direproduksi dalam ekskresi beberapa
metabolit urin pada subjek normal.
• Tingkat ekskresi 3-hidroksikinurenin, kinurenin, dan asam
quinolinic sebanding dengan yang terlihat setelah beban
triptofan 2,0 g, meskipun tidak terjadi peningkatan ekskresi asam
xanturenat.
• Tes ini juga telah digunakan dengan pengguna kontrasepsi oral
dan wanita pascamenopause yang menerima dosis kecil estradiol
(Brown, 1981). Namun, karena tingginya biaya L-kinurenin
sulfate, uji beban ini telah menerima sedikit penggunaan.
• Eksresi kinurenin setelah beban triptofan pada wanita yang diberi
diet protein konstan dengan berbagai tingkat vitamin B6. Variasi
dalam ekskresi kinurenin di antara subjek begitu besar sehingga
meskipun tren penurunan diamati dengan meningkatnya asupan
asupan vitamin B6, perubahannya tidak signifikan (Hansen et.al,
1997)
Uji beban Metionin
• Dalam kekurangan vitamin B6, ada juga peningkatan ekskresi sistationin yang dapat
dicegah dengan suplementasi vitamin B6. Sistationin adalah metabolit metionin dan
tergantung pada vitamin B6 untuk sintesis dan degradasi.
• Ekskresi urin sistationin, sistein, asam sistein-sulfinik, dan homosistein semua
meningkat dalam keadaan kekurangan vitamin B6 setelah dosis pemuatan 3 g L-
metionin, sedangkan ekskresi taurin berkurang (Park dan Linkswiler, 1970). Sampel
urin harus dikumpulkan lebih dari 24 jam untuk tes.
• Tes beban metionin telah digunakan pada wanita hamil, pada pria dewasa yang
menderita neuropati, dan pada pasien yang dirawat dengan hidrazia asam isonitinat
(Park and Linkswiler, 1970; Kshnaswamy, 1972; Shin dan Linkswiler, 1974).
• Telah digunakan dalam hanya beberapa studi eksperimental penipisan-replesi
vitamin B6. Berdasarkan hasil ini, konsentra ekskresi sistationin > 350 μmol/hari
telah disarankan untuk sementara sebagai menunjukkan kekurangan vitamin B6
(Lekhem, 1990).
• Penggunaan tes dosis-respons dalam studi populasi sulit karena sampel urin
berjangka waktu diperlukan. Analisis metabolit metionin dalam urin secara
konvensional menggunakan penganalisis asam amino.
• Modifikasi uji beban metionin baru-baru ini dikembangkan oleh Graham et al. (1997).
Untuk tes ini, 100 mg metionin per kg berat badan diberikan -> sampel darah puasa
diambil dan 6 jam setelah dosis pemuatan, untuk analisis homosistein plasma dan
PLP Plasma. Setiap peningkatan plasma homosistein pasca beban dinilai dalam
kaitannya dengan status vitamin B6, berdasarkan plasma PLP.
Gambar 21.10 menunjukkan langkah-
langkah yang bergantung pada PLP
dalam jalur metabolisme metionin yang
disingkat.
 Beberapa Indeks

Minimal 3 tes biokimia yang dianjurkan untuk

mengevaluasi status vitamin B6 secara Tes biokimia ini harus disertai dengan :
memadai, dalam berbagai asupan

• PLP Plasma
• Koefisien aktivasi untuk eritrosit ASAT
• Metabolit urin
asam 4-piridoksat urin, ukuran
jangka pendek yang
Studi epidemiologis mencerminkan asupan
makanan baru-baru ini, harus
digunakan
• Penilaian diet dari asupan vitamin B6 dan protein yang
biasa.
• Perawatan harus diambil untuk memastikan bahwa
faktor-faktor yang diketahui dapat mengacaukan tes
biokimia ini dapat diperhitungkan ketika menafsirkan
hasilnya.
Saat ini, tidak ada tes fungsional fisiologis yang dapat diandalkan untuk
menilai status vitamin B6 subklinis. Namun, di masa depan, tes fungsi
limfosit berdasarkan proliferasi limfosit dapat digunakan dalam
kombinasi dengan tes biokimia (Kwak et al., 2002).

Status vitamin B6 subklinis kemungkinan akan dikaitkan dengan defisiensi riboflavin.

Studi eksperimental uji beban triptofan Koeksistensi dari dua kekurangan vitamin ini akan menyebabkan konsekuensi yang
sangat merugikan karena riboflavin terlibat dalam metabolisme vitamin B6. Oleh
berbasis lab. lebih disukai. karena itu, studi epidemiologi masa depan pada status vitamin B6 harus mencakup
penilaian status vitamin B6 dan riboflavin.

• Sebuah studi tentang orang tua Irlandia yang hidup bebas -> 21%
status suboptimal untuk vitamin B6 dan riboflavin. Suplementasi
riboflavin dikoreksi baik defisiensi riboflavin dan konsentrasi PLP
plasma rendah (Madigan et al., 1998).
 Referensi terkini terkait Penilaian Status
Vitamin B6

Status vitamin B6 yang abnormal, ditandai dengan kurangnya konsentrasi intraseluler

piridoksal fosfat (PLP), diklasifikasikan sebagai biomarker langsung berdasarkan
signifikansi biomedisnya. Namun, tidak ada metode langsung untuk mengukur status
vitamin B6 dalam sel utuh.

• Piridoksal-5’- Fosfat (PLP), diakui sebagai bentuk vitamin B6

yang paling aktif, berfungsi sebagai kofaktor untuk lebih dari
140 aktivitas enzim yang bergantung pada PLP yang berbeda
dalam sel (~4% dari semua aktivitas khusus).

Aktivitas yang bergantung pada PLP sangat penting untuk biosintesis asam
amino dan katabolisme, dan kofaktor juga berkontribusi pada biosintesis
asam lemak, pemecahan senyawa penyimpanan tertentu, sintesis
neurotransmiter, dan pendinginan spesies oksigen reaktif (ROS).

Sumber : (Jun et al., 2020)

 Referensi terkini terkait Penilaian Status
Vitamin B6
Penilaian status Vitamin B6 dalam sel
• Diklasifikasikan sebagai biomarker langsung
• Tergantung pada konsentrasi intraseluler PLP
-> Hasil dari fosfatase/kinase dan proses
interkonversi lainnya
Sumber : (Jun et al., 2020)
Metode yang paling banyak digunakan
untuk menilai status vitamin B6
Konsentrasi PLP plasma, berdasarkan asumsi
bahwa itu mencerminkan penyimpanan
seluler/jaringan.
Yang dilakukan dengan HPLC (High
Performance Liquid Chromatography)
• Dari bahasan mengenai penilaian status vitamin B6 pada jurnal dapat dilihat
bahwa jurnal tersebut mendukung pernyataan mengenai penilaian status
vitamin B6 yang telah dibahas dalam Buku Principles of Nutritional Assessment
yaitu penilaian status vitamin B6 dengan mengukur PLP Plasma bisa dengan
menggunakan HPLC (High Performance Liquid Chromatography)
 Referensi terkini terkait Penilaian Status
Vitamin B6

Untuk mengidentifikasi kekurangan vitamin B-6 yang

sebenarnya, penilaian tambahan biomarker fungsional
vitamin B6 diperlukan, terutama pada populasi yang
ditandai oleh peradangan seperti RTR (renal
transplant recipients)

Status Vitamin B6 secara rutin dinilai melalui :

• Konsentrasi plasma dari isoform B6 piridoksal-5’-fosfat (PLP) yang
penting secara biokimia.
• PLP plasma dipengaruhi oleh berbagai faktor terkait keadaan
penyakit, termasuk peradangan -> Konsentrasi PLP plasma  tidak
selalu menunjukkan < vitamin B6 yang sebenarnya.
Secara khusus, rasio antara 3-hidroksikinurenin (3-
HK) dan asam xanturenat (XA) telah disarankan
sebagai indikator yang menjanjikan dalam menilai
kekurangan vitamin B6 secara fungsional

Sumber : (Minović et al., 2017)

 Referensi terkini terkait Penilaian Status
Vitamin B6
• Dari bahasan mengenai penilaian status vitamin B6 pada jurnal dapat
dilihat bahwa jurnal tersebut mendukung pernyataan mengenai
penilaian status vitamin B6 yang telah dibahas dalam Buku Principles of
Nutritional Assessment yaitu salah satu tes biokimia yang dianjurkan
untuk mengevaluasi/menilai status vitamin B6 secara memadai dalam
berbagai asupan yaitu dengan melihat konsentrasi PLP plasma yang
mana PLP plasma mungkin merupakan ukuran tunggal terbaik karena
mencerminkan simpanan jaringan.
Sumber : (Minović et al., 2017)
• Kemudian, adanya penanda fungsional vitamin B6 seperti 3-
hidroksikinurenin (3-HK) dan asam xanturenat ditunjukkan dalam buku
ini yang mana dalam kekurangan vitamin B6, aktivitas enzim
kinureninase dan kinurenin aminotransferase berkurang yang
berakibat pada terakumulasinya 3-hidroksikinurenin dan kinurenin,
yang mengarah pada peningkatan pembentukan dan ekskresi asam
xanturenat. Beberapa peneliti telah memeriksa respon beberapa
ukuran status vitamin B6, termasuk ekskresi asam xanturenat urin
setelah beban triptofan dengan hasil yang menekankan bahwa
pengukuran asam xanturenat urin bersih setelah beban triptofan
adalah indeks biokimia paling sensitif dari status vitamin B6.
 Referensi terkini terkait Penilaian Status
Vitamin B6
Status Vitamin B6 dinilai dengan konsentrasi PLP Plasma (biomarker Vitamin B6)
• Jurnal ini memiliki tujuan untuk mengidentifikasi dan melihat hubungan
antara biomarker vitamin B6 yaitu PLP plasma dan riboflavin yaitu (status
EGRac).
Diukur dengan fase terbalik, HPLC dengan deteksi fluoresensi. Meskipun terdapat
kurangnya konsensus yang mendefinisikan status vitamin B6 yang memadai, nilai
konsentrasi PLP plasma <20,0 nmol/L dan antara 20,0 dan 30,0 nmol/L umumnya
dianggap kurang mencukupi dan kurang optimal.
Sumber : (Jungert et al., 2020)
Riboflavin memiliki interaksi metabolisme
yang erat dengan vitamin B6 :
Dalam bentuk flavin mononukleotida (FMN), ia
bertindak sebagai kofaktor untuk piridoksin 5 -fosfat
(PNP) oksidase yang diperlukan untuk konversi PNP dan
pyridoxamine 5 -phosphate (PMP) ke bentuk B6 yang
aktif secara fungsional, piridoksal 5 -fosfat (PLP).
Studi hewan memberikan bukti bahwa aktivitas PNP
oksidase responsif terhadap perubahan asupan
riboflavin dan konsentrasi PLP yang rendah dilaporkan
pada tikus yang kekurangan asupan riboflavin.
• Dari bahasan mengenai penilaian status vitamin B6 pada jurnal dapat dilihat
bahwa jurnal tersebut mendukung pernyataan mengenai penilaian status
vitamin B6 yang telah dibahas dalam Buku Principles of Nutritional Assessment
yaitu metode yang digunakan dalam HPLC untuk memisahkan dan mengukur
PLP plasma di antaranya HPLC pertukaran kation dan kromatografi kolom
terbuka pertukaran kation diikuti oleh uji fluorometri yang telah digunakan
 Referensi terkini terkait Penilaian Status
Vitamin B6
Terdapat penanda sebagai representasi dari tahap yang
lebih hilir dari peran metabolisme PLP dibandingkan
dengan konsentrasi yang beredar. Penanda fungsional
yang diusulkan termasuk rasio homosistein:sistein
(Hcy:Cys), sistationin:sistein (Cysta:Cys), dan rasio HK
(HKr), 3-hidroksikinurenin (HK) : [asam kinurenik (KA) +
asam xanturenat (XA) + asam antranilik (AA) + asam 3-
hidroksiantranilik (HAA)],

• Dua yang pertama ialah indikator regulasi jalur

transsulfurasi dan yang ketiga indikator regulasi
katabolisme triptofan. Peningkatan Hcy:Cys, Cysta:Cys,
dan HKr berhubungan dengan konsentrasi substrat
yang relatif lebih tinggi terhadap produk dan
peningkatan regulasi enzimatik.

Rasio juga telah dikembangkan sebagai indikator

Konsentrasi sirkulasi PLP -> pengukuran umum untuk status vitamin
B6
• PLP sendiri mungkin tidak menangkap variasi biologis yang penting
karena beberapa proses metabolik yang membutuhkan PLP sangat
sensitif terhadap ketidakcukupan vitamin B6 dibandingkan yang
• PAr telah ditetapkan sebagai prediktor peradangan yang
lain.
Sumber : (Clasen et al., 2021)
metabolisme vitamin B6 yang berubah selama
peradangan. Rasio asam 4-piridoksat (PA):[PLP+
piridoksal (PL)], dipersingkat untuk PA-rasio (PAr),
mewakili metabolisme vitamin B6 dalam arti luas,
meliputi variabilitas dalam katabolisme PLP dan
bentuknya yang tidak terfosforilasi (PL) serta
penyerapan jaringan PL.
andal dan sangat berhubungan dengan penanda
sistemik lain dari status inflamasi seperti C-reaktif
protein.
 Referensi terkini terkait Penilaian Status
Vitamin B6
• Dari bahasan mengenai penilaian status vitamin B6 pada jurnal
dapat dilihat bahwa jurnal tersebut mendukung pernyataan
mengenai penilaian status vitamin B6 yang telah dibahas dalam Buku
Principles of Nutritional Assessment yaitu terdapat beberapa tes
biokimia untuk status vitamin B6 yang mana yang paling banyak
digunakan adalah koefisien aktivasi untuk AsAT eritrosit,
konsentrasi PLP plasma, dan ekskresi asam 4-piridoksat urin.
Sumber : (Clasen et al., 2021)
• Kemudian, adanya penanda fungsional vitamin B6 seperti 3-hidroksikinurenin (3-HK)
dan asam xanturenat ditunjukkan dalam buku ini yang mana dalam kekurangan vitamin
B6, aktivitas enzim kinureninase dan kinurenin aminotransferase berkurang yang
berakibat pada terakumulasinya 3-hidroksikinurenin dan kinurenin, yang mengarah
pada peningkatan pembentukan dan ekskresi asam xanturenat. Beberapa peneliti telah
memeriksa respon beberapa ukuran status vitamin B6, termasuk ekskresi asam
xanturenat urin setelah beban triptofan dengan hasil yang menekankan bahwa
pengukuran asam xanturenat urin bersih setelah beban triptofan adalah indeks
biokimia paling sensitif dari status vitamin B6.
 Referensi terkini terkait Penilaian Status
Vitamin B6
Adanya perubahan status vitamin B6 diukur dengan penurunan konsentrasi sirkulasi dari
bentuk aktif vitamin B6 secara metabolik yaitu piridoksal-5’-fosfat (PLP) yang banyak
ditemukan pada kondisi rheumatoid arthritis (RA) serupa dengan kondisi peradangan
lainnya
• Pada pasien dengan RA, PLP yang rendah tidak berhubungan dengan
ketidakcukupan asupan, yang mana menunjukkan perubahan pada status vitamin
B6 berhubungan dengan proses inflamasi/peradangan. Status fungsional vitamin
B6 diukur dengan plasma homosistein setelah beban metionin dan asam
xanturenat urin setelah beban triptofan telah diinvestigasi pada pasien RA.
Sumber : (Sande et al., 2019)
Baru-baru ini, 3-hidroksikinurenin (HK): rasio XA (HK:XA) pada
plasma diusulkan sebagai penanda fungsional vitamin B6.
Hal ini mewakili rasio substrat-produk untuk enzim yang
bergantung pada PLP, kinurenin aminotransferase, dan dapat
mencerminkan ketersediaan PLP intraseluler
• Dari bahasan mengenai penilaian status vitamin B6 pada jurnal dapat dilihat bahwa jurnal
tersebut mendukung pernyataan mengenai penilaian status vitamin B6 yang telah dibahas
dalam Buku Principles of Nutritional Assessment yaitu PLP sebagai koenzim aktif dari vitamin
B6. Kemudian, adanya penanda fungsional vitamin B6 seperti 3-hidroksikinurenin (3-HK) dan
asam xanturenat ditunjukkan dalam buku ini yang mana dalam kekurangan vitamin B6, aktivitas
enzim kinureninase dan kinurenin aminotransferase berkurang yang berakibat pada
terakumulasinya 3-hidroksikinurenin dan kinurenin, yang mengarah pada peningkatan
pembentukan dan ekskresi asam xanturenat. Beberapa peneliti telah memeriksa respon
beberapa ukuran status vitamin B6, termasuk ekskresi asam xanturenat urin setelah beban
triptofan dengan hasil yang menekankan bahwa pengukuran asam xanturenat urin bersih
setelah beban triptofan adalah indeks biokimia paling sensitif dari status vitamin B6.
 Referensi terkini terkait Penilaian Status
Vitamin B6
Vitamin B6 bermain peran dalam karsinogenesis, sejak terlibat pada sintesis DNA,
perbaikan dan metilasi, stabilitas kromosomal, dan stress oksidatif. Status vitamin B6
yang rendah, yang dinilai dengan sirkulasi dari piridoksal-5’-fosfat (PLP), telah
dihubungkan dengan peningkatan risiko kanker paru-paru.
• Hal ini disebabkan karena kadar PLP dapat dipengaruhi
oleh berbagai faktor seperti inflamasi, aktivitas alkalin
fosfatase, serum albumin yang rendah, dan fungsi
ginjal, sehingga mengurangi kegunaan PLP sebagai
penanda dari status vitamin B6.
Sumber : (Theofylaktopoulou et al., 2018)
Penulis menganalisis penanda fungsional
vitamin B6 seperti rasio hidroksikinurenin:asam
xanturenat, yang ditemukan bahwa kadar rasio
HK : KA yang tinggi, indikasi dari gangguan
fungsional vitamin B6, berhubungan dengan
peningkatan risiko kanker paru-paru.
• Dari bahasan mengenai penilaian status vitamin B6 pada jurnal dapat dilihat bahwa
jurnal tersebut mendukung pernyataan mengenai penilaian status vitamin B6 yang telah
dibahas dalam Buku Principles of Nutritional Assessment yaitu terdapat beberapa
ukuran status vitamin B6, termasuk ekskresi asam xanturenat urin dari hasil konversi
hidroksikinurenin yang dikatalisasi oleh enzim PLP-dependent kinurenin
aminotransferase setelah beban triptofan dengan hasil yang menekankan bahwa
pengukuran asam xanturenat urin bersih setelah beban triptofan adalah indeks
biokimia paling sensitif dari status vitamin B6. Selain itu, tes ini tampaknya sensitif
terhadap berbagai asupan vitamin B6 yang rendah.
 Referensi terkini terkait Penilaian Status
Vitamin B6
PLP plasma merupakan pengukuran langsung yang paling
banyak digunakan untuk mengukur status vitamin B6.
Sumber : (Sherwood, 2019)
Metodologi analisis yang paling sering digunakan untuk mengukur PLP
berdasarkan HPLC mengikuti derivatisasi dan menggunakan deteksi fluoresensi.
PLP dikonversi menjadi semikarbazon menggunakan derivatisasi prekolum,
dipisahkan oleh fase terbalik oleh kromatografi pertukaran kation, dan
terdeteksi oleh fluoresensi pada pH basa. Fase terbalik kromatografi dengan
kolom C18 digunakan dan pemisahan dapat dicapai dalam 2,5 menit.
Ketidaktepatan sebesar ~10% dan batas kuantitas sebesar 25,9 nmol/L.
Korelasi yang baik diperoleh dengan metode HPLC konvensional.
• Dari bahasan mengenai penilaian status vitamin B6 pada jurnal dapat
dilihat bahwa jurnal tersebut mendukung pernyataan mengenai penilaian
status vitamin B6 yang telah dibahas dalam Buku Principles of Nutritional
Assessment yaitu metode yang digunakan dalam HPLC untuk
memisahkan dan mengukur PLP plasma di antaranya HPLC pertukaran
kation dan kromatografi kolom terbuka pertukaran kation diikuti oleh
uji fluorometri yang telah digunakan.
 Kesimpulan dan Saran

Vitamin B6 hadir dalam

makanan terutama piridoksal-5’- piridoksamin 5’-
sebagai : fosfat (PLP) fosfat (PMP)
• Piridoksal
• Piridoksin
• Piridoksamin
Diubah setelah
penyerapan Dua bentuk koenzim aktif vitamin B6 yang
mengkatalisasi berbagai sistem enzim yang terlibat
dalam metabolisme protein dan asam amino dan,
Beberapa tes biokimia untuk status vitamin B6 pada tingkat yang lebih rendah, karbohidrat dan lipid.
(tergantung pada tujuan dan karakteristik kelompok
studi) :

Yang paling banyak digunakan : Koefisien aktivasi untuk AsAT eritrosit, konsentrasi PLP plasma, dan ekskresi
asam 4-piridoksat urin.

Aktivitas AsAT eritrosit mencerminkan status vitamin B6 selama sekitar sebulan terakhir. Konsentrasi plasma
PLP memberikan ukuran yang lebih langsung dari koenzim aktif dan mencerminkan asupan makanan dan
status jaringan vitamin B6.
 Lanjutan …
Dalam studi epidemiologi : Uji Beban Triptofan :

Kadar PLP plasma dipengaruhi oleh banyak Tes biokimia fungsional sensitif yang digunakan dalam pengaturan
faktor, membingungkan interpretasi hasil. klinis untuk memberikan ukuran tidak langsung dari kadar vitamin
B6 jaringan rendah

Tingkat ekskresi urin vitamin B6 bebas dan asam

4-piridoksat mencerminkan asupan makanan
vitamin B terbaru daripada tingkat jaringan

Saran :

Saat ini, evaluasi status vitamin B6 harus mencakup kombinasi asupan makanan dan tiga tes biokimia (PLP plasma, AsAT AC eritrosit,
dan metabolit urin). Studi di masa depan mungkin termasuk tes fungsi limfosit berdasarkan proliferasi limfosit selain tiga tes
biokimia yang direkomendasikan.
Diskusi Presentasi

• Pertanyaan 1 : Pertimbangan apa saja yang digunakan dalam tes

biokimia untuk status vitamin B6? (Wardah Willyanti –
I1504212044)

Jawaban : Hal yang dipertimbangkan dalam menggunakan beberapa tes biokimia untuk menilai status vitamin B6 di
antaranya tergantung pada tujuan dan karakteristik kelompok studi yang ingin diujikan. Contohnya seperti tes biokimia
dengan melihat Aktivitas AsAT eritrosit mencerminkan status vitamin B6 selama sekitar sebulan terakhir, tes biokimia
dengan melihat Konsentrasi plasma PLP memberikan ukuran yang lebih langsung dari koenzim aktif dan mencerminkan
asupan makanan dan status jaringan vitamin B6, serta tes biokimia dengan melihat tingkat ekskresi urin vitamin B6 bebas
dan asam 4-piridoksat mencerminkan asupan makanan vitamin B6 terbaru daripada tingkat jaringan. Pertimbangan
lainnya dalam menggunakan tes biokimia tertentu ialah dengan melihat kestabilan dari bahan yang ingin diujikan, seperti
PLP Plasma yang dapat stabil hingga 2 tahun jika disimpan pada suhu -30 dan asam 4-piridoksat urin yang dapat stabil
setidaknya 20 bulan jika disimpan pada suhu -20 .
Diskusi Presentasi

• Pertanyaan 2 : Dari 3 tes biokimia untuk metode penilaian status

vitamin B6 yg paling banyak digunakan tadi, tes mana yang paling
efektif untuk mengetahui kadar vitamin B6 dalam tubuh? (Yunda
Khairunnisa – I1504221007)

Jawaban : Tes yang paling efektif untuk mengetahui kadar vitamin B6 dalam tubuh ialah tes
biokimia dengan melihat konsentrasi PLP plasma. Hal itu disebabkan karena sebagian besar
vitamin B6 yang aktif dalam tubuh dalam bentuk PLP (piridoksal-5’-fosfat) dan juga tes ini
mencerminkan simpanan vitamin B6 dalam jaringan dan asupan makanan.
Diskusi Presentasi

• Tambahan dari Prof. Dr. Ir. Hardinsyah, MS :

Disarankan ada berbagai inovasi dari mahasiswa (baik mahasiswa S2 ataupun S3) dengan
bimbingan dari ahli sensor dari FMIPA untuk membuat alat sensor status vitamin karena hampir
setiap zat gizi diperlukan adanya sensor status vitamin mulai dari vitamin C, B1, B2, B3, B6, B12,
dan asam folat. Alat tersebut nantinya akan sangat membantu dalam menilai status vitamin dan
menjadi solusi dari metode penilaian sebelumnya yang invasif (dengan mengambil darah) dengan
biaya yang mahal.
 Daftar Pustaka

Clasen, J. L., Heath, A. K., Van Puyvelde, H., Huybrechts, I., Park, J. Y., Ferrari, P., Johansson, M., Scelo, G., Ulvik, A., & Midttun, Ø.
(2021). A comparison of complementary measures of vitamin B6 status, function, and metabolism in the European Prospective
Investigation into Cancer and Nutrition (EPIC) study. The American Journal of Clinical Nutrition, 114(1), 338– 347.
Gibson, R.S. (2005). Principles of Nutritional Assessment Second Edition. New York : Oxford University Press, Inc.
Jungert, A., McNulty, H., Hoey, L., Ward, M., Strain, J. J., Hughes, C. F., McAnena, L., Neuhäuser-Berthold, M., & Pentieva, K. (2020).
Riboflavin is an important determinant of vitamin B-6 status in healthy adults. The Journal of Nutrition, 150(10), 2699– 2706.
Minović, I., van der Veen, A., van Faassen, M., Riphagen, I. J., van den Berg, E., van der Ley, C., Gomes-Neto, A. W., Geleijnse, J. M.,
Eggersdorfer, M., & Navis, G. J. (2017). Functional vitamin B-6 status and long-term mortality in renal transplant recipients. The
American Journal of Clinical Nutrition, 106(6), 1366–1374.
Sande, J. S., Ulvik, A., Midttun, Ø., Ueland, P. M., Hammer, H. B., Valen, M., Apalset, E. M., & Gjesdal, C. G. (2019). Vitamin B-6 status
correlates with disease activity in rheumatoid arthritis patients during treatment with TNFα inhibitors. The Journal of Nutrition,
149(5), 770–775.
Sherwood, R. A. (2019). Methods for assessment of vitamin B6. In Laboratory assessment of vitamin status (pp. 181–191). Elsevier.
Theofylaktopoulou, D., Midttun, Ø., Ueland, P. M., Meyer, K., Fanidi, A., Zheng, W., Shu, X., Xiang, Y., Prentice, R., & Pettinger, M.
(2018). Impaired functional vitamin B6 status is associated with increased risk of lung cancer. International Journal of Cancer,
142(12), 2425–2434.
Woong Jun, Y., Hebenbrock, M., & Kool, E. T. (2020). A fluorescent hydrazone exchange probe of pyridoxal phosphate for the assessment
of vitamin B6 status. Chemical Communications, 56(2), 317–320.
 TERIMA KASIH

MK. Penilaian Status Gizi Lanjut

Magister Ilmu Gizi
Sekolah Pascasarjana
IPB University