Mengukur Fiksasi

Nitrogen Secara
Kuantitatif dengan
Metode Reduksi Asetilen-
Etilen
Pemahaman yang mendalam tentang fiksasi nitrogen secara biologis sangat
penting untuk memenuhi kebutuhan pangan dunia yang terus meningkat.
Sayangnya, metode pengukuran kuantitatif fiksasi nitrogen di lapangan masih
terbatas. Artikel ini memperkenalkan sebuah metode baru yang sensitif dan akurat
menggunakan reduksi asetilen menjadi etilen sebagai indikator aktivitas enzim
nitrogenase, yang berperan kunci dalam fiksasi nitrogen.

By: Poppy Lariski

Metode Pengukuran Aktivitas Reduksi
Asetilen-Etilen
1 Pertumbuhan Sel Bakteri
Sel bakteri penambat nitrogen ditumbuhkan dalam media yang sesuai untuk
menghasilkan biomassa yang kaya akan enzim nitrogenase. Ekstrak sel kemudian
disiapkan untuk analisis aktivitas enzim.

2 Analisis Asetilen dan Etilen

Sampel ekstrak enzim direaksikan dengan asetilen, dan produk reduksi berupa etilen
dianalisis menggunakan kromatografi gas dengan detektor ionisasi nyala hidrogen.
Teknik ini memungkinkan pengukuran kuantitatif aktivitas nitrogenase dengan
sensitivitas tinggi.

3 Bahan dan Reagen

Berbagai bahan dan reagen digunakan, seperti media kultur, sumber energi,
pereduksi, serta standar asetilen dan etilen untuk kalibrasi. Semua komponen ini
dirancang untuk mendukung aktivitas reduksi asetilen oleh nitrogenase secara
optimal.
Karakteristik Reduksi Asetilen oleh
Nitrogenase
1 Persyaratan Reduksi Asetilen
Reduksi asetilen oleh nitrogenase
membutuhkan ketersediaan ekstrak
enzim, sumber energi seperti ATP, dan
agen pereduksi seperti ferredoksin atau
flavodoksin.
3 Efek Penghambatan Asetilen
Asetilen bersifat kompetitif menghambat
aktivitas fiksasi nitrogen oleh
nitrogenase, sehingga dapat digunakan
sebagai indikator aktivitas enzim.
2 Produk Reduksi
Produk utama dari reduksi asetilen
adalah etilen, yang dapat dideteksi dan
diukur secara kuantitatif.
4 Kinetika Reaksi
Reaksi reduksi asetilen oleh nitrogenase
mengikuti kinetika Michaelis-Menten,
dengan parameter kinetik yang dapat
ditentukan.
Validasi Metode Asai Asetilen-Etilen
Korelasi dengan Metode
Lain
Metode asai asetilen-etilen
telah divalidasi dengan
membandingkan hasilnya
terhadap metode
pengukuran fiksasi nitrogen
lainnya, seperti pengukuran
langsung nitrogen
terakumulasi atau metode
asetilena reduksi tradisional.
Pengaruh Faktor
Lingkungan
Berbagai faktor lingkungan
seperti cahaya dan suhu
juga telah dievaluasi untuk
menentukan seberapa
besar pengaruhnya
terhadap aktivitas reduksi
asetilen, sehingga dapat
menyesuaikan pengukuran
di lapangan.
Aplikasi di Lapangan
Metode ini telah berhasil
diaplikasikan untuk
mengukur fiksasi nitrogen
pada berbagai tanaman
legum, seperti kedelai, serta
oleh mikroba penambat
nitrogen bebas di tanah.
Manfaat Metode Asai Asetilen-Etilen
Sensitif dan Akurat
Metode ini memiliki sensitivitas dan
akurasi yang tinggi dalam mengukur
aktivitas nitrogenase, sehingga dapat
mendeteksi perubahan fiksasi
nitrogen yang kecil sekalipun.
Cepat dan Sederhana
Prosedur analisisnya relatif cepat dan
tidak memerlukan peralatan yang
rumit, sehingga dapat diterapkan
secara luas di laboratorium maupun
lapangan.

Kuantitatif
Hasil pengukuran dinyatakan dalam nilai kuantitatif, memungkinkan perbandingan
langsung antara sampel dan kondisi yang berbeda.
Aplikasi Metode di Berbagai Kajian
Fiksasi Nitrogen
Studi Tanaman Legum
Metode ini telah digunakan untuk mempelajari fiksasi nitrogen pada berbagai
tanaman legum, seperti kedelai, dengan mengukur aktivitas nitrogenase pada akar
dan nodul.

Pengaruh Lingkungan
Dampak faktor lingkungan seperti cahaya dan suhu terhadap fiksasi nitrogen pada
tanaman legum dapat dievaluasi secara kuantitatif menggunakan metode ini.

Survei Mikroba Tanah

Metode ini juga telah diterapkan untuk mengukur fiksasi nitrogen oleh mikroba
penambat nitrogen bebas yang hidup di tanah, memberikan gambaran aktivitas
fiksasi nitrogen di ekosistem.
Standarisasi dan Peluang Pengembangan
Standarisasi Prosedur
Diperlukan standarisasi
prosedur analisis agar dapat
membandingkan hasil
antarlab dan mencapai
keseragaman data fiksasi
nitrogen.
Pengembangan Lebih
Lanjut
Metode ini memiliki potensi
untuk terus dikembangkan
dan diaplikasikan secara lebih
luas dalam mempelajari
fiksasi nitrogen di berbagai
sistem biologis.
Kolaborasi Multidisiplin
Kerja sama antara ahli
biologi, kimia, dan pertanian
diperlukan untuk
mengoptimalkan penerapan
metode ini dan memahami
fiksasi nitrogen secara
komprehensif.
Kesimpulan
Metode Baru yang Unggul
Metode asai asetilen-etilen yang
diperkenalkan dalam artikel ini menawarkan
cara pengukuran fiksasi nitrogen yang sensitif,
cepat, sederhana, dan kuantitatif. Metode ini
memiliki potensi besar untuk memperluas
pemahaman kita tentang proses fiksasi
nitrogen di berbagai sistem biologis.
Peluang Aplikasi Luas
Metode ini telah terbukti dapat diterapkan di
laboratorium maupun di lapangan, baik untuk
mempelajari fiksasi nitrogen pada tanaman
legum maupun oleh mikroba penambat
nitrogen bebas di tanah.