Teknik Pembuatan

Preparat Histologi
Histologi adalah ilmu yang mempelajari struktur jaringan tubuh secara detail
menggunakan mikroskop. Pembuatan preparat histologi merupakan
serangkaian proses penting untuk menghasilkan sediaan yang dapat diamati
di bawah mikroskop. Dari fiksasi, pemotongan, hingga pewarnaan, setiap
tahap harus dilakukan dengan cermat untuk mendapatkan hasil yang akurat
dan berkualitas.

pa
by poppy lariski
Fiksasi Jaringan
Tujuan Fiksasi 1
Fiksasi bertujuan untuk
mempertahankan struktur dan
komposisi jaringan agar tidak 2 Jenis Cairan Fiksatif
mengalami perubahan selama proses Beberapa cairan fiksatif yang umum
pembuatan preparat. Fiksasi digunakan adalah larutan formalin
mencegah kerusakan bentuk, 10%, larutan Bouin, dan larutan
struktur, dan hubungan antar sel Zenker-formol. Pemilihan cairan
akibat pembusukan atau fiksatif bergantung pada jenis
perpindahan. jaringan dan pewarnaan yang akan
digunakan.
Faktor yang Mempengaruhi 3
Efektivitas fiksasi dipengaruhi oleh
suhu, waktu penetrasi, dimensi
spesimen, rasio volume fiksatif, dan
pH larutan. Semua faktor ini harus
diperhatikan untuk mendapatkan
hasil fiksasi yang optimal.
Proses Dehidrasi dan Penjernihan
Dehidrasi
Dehidrasi adalah proses
mengeluarkan seluruh cairan
yang terdapat dalam jaringan
setelah fiksasi. Jaringan
direndam dalam seri alkohol
dengan konsentrasi
meningkat untuk
menghilangkan air dari
dalam sel.
Penjernihan Impregnasi
Penjernihan adalah tahap Impregnasi adalah proses
mengeluarkan alkohol dari menggantikan xylol dengan
jaringan dan menggantinya parafin cair agar jaringan
dengan larutan yang dapat dapat diiris tipis
berikatan dengan parafin. menggunakan mikrotom.
Xylol adalah cairan Parafin akan mengisi ruang
pembening yang umum yang ditinggalkan oleh air
digunakan pada tahap ini. dan alkohol.
Pemotongan Blok Preparat
1 Blocking
Jaringan yang telah diimpregnasi
parafin dimasukkan ke dalam cetakan
logam untuk membuat blok preparat
yang siap dipotong.
2 Sectioning
Blok preparat dipotong tipis
menggunakan mikrotom untuk
menghasilkan sediaan jaringan yang
siap diwarnai.

3 Floating
Sediaan jaringan yang terpotong diletakkan di atas air hangat agar merata dan dapat
direkatkan pada gelas objek.
Pewarnaan Hematoksilin-Eosin
Prinsip Pewarnaan
Pewarnaan hematoksilin-eosin (H&E)
adalah salah satu teknik pewarnaan
paling umum digunakan dalam histologi.
Hematoksilin akan mewarnai inti sel biru,
sementara eosin akan mewarnai
sitoplasma dan matriks ekstraseluler
merah muda.
Tahapan Pewarnaan
Sediaan jaringan akan melalui
serangkaian tahap pewarnaan, mulai dari
deparafinisasi, pewarnaan hematoksilin,
pewarnaan eosin, dehidrasi, dan
mounting dengan entelan.

Hasil Pengamatan
Hasil pewarnaan H&E akan memperlihatkan struktur sel dan jaringan secara jelas. Inti sel
berwarna biru, sitoplasma dan matriks berwarna merah muda, sehingga memudahkan
identifikasi komponen jaringan.
Pewarnaan Giemsa

Fiksasi Pewarnaan Mounting Hasil

Sediaan apus Sediaan direndam Sediaan diberi Pewarnaan Giemsa
difiksasi dengan dalam larutan Giemsa entelan dan ditutup akan memberikan
metanol sebelum yang telah diencerkan dengan cover glass warna biru pada inti
pewarnaan Giemsa. selama 30 menit. sebelum diamati. sel dan sitoplasma.
Hasil Pengamatan Preparat Histologi

Asidofilik
Struktur yang bersifat asidofilik akan terwarnai oleh eosin, memberikan warna
merah muda.

Basofilik
Struktur yang bersifat basofilik akan terwarnai oleh hematoksilin, memberikan
warna biru.

Kontras Warna
Kombinasi pewarnaan hematoksilin-eosin menghasilkan kontras warna yang
memudahkan identifikasi komponen jaringan.
Aplikasi Preparat Histologi
Jaringan Pankreas Pengamatan struktur pulau Langerhans untuk
diagnosis diabetes melitus

Jaringan Kolon Identifikasi produksi mukus pada sel goblet

untuk mendeteksi kondisi patologis

Jaringan Kulit Evaluasi perubahan struktur epidermis dan

dermis pada berbagai kondisi

Jaringan Ginjal Analisis histologi ginjal untuk mendiagnosis

penyakit ginjal