TIM Praktikum Hematologi

Poltekkes kemenkes Banten

ANALISIS PEMERIKSAAN
COMPLETE BLOOD
COUNT
(HEMATOLOGI RUTIN)
PENDAHULUAN
Patologi Klinik/Lab Medicine:
Cabang ilmu patologi yang berkaitan dg
pemeriksaan spesimen pasien (darah, urine,
cairan tubuh lain)
Klinik: Rutin, kimia, hematologi,
imunoserologi, mikrobiologi.
Metode pemeriksaan: kualitatif,
semikuantitatif, kuantitatif
Dilakukan scr: manual, semi otomatik,
otomatik
PENDAHULUAN
Tujuan tes laboratorium
Skrining
Menegakkan Diagnosis
Menunjang D/:
Menentukan berat penyakit
Menentukan perjalanan penyakit
Membantu Menentukan indikasi rawat/pulang
Menentukan terapi/follow up
Prognosis
Membantu proses hukum

PENDAHULUAN
Tahap tahap tes Lab:

Pra analitik/ pra instrumen:

Analitik/ instrumen:

Pasca analitik/pasca instrumen:
PENDAHULUAN
Tahap prainstrumen

1. Persiapan pasien
4. Penampungan bahan
3. Penyimpanan
5. Pengiriman

2. Pengambilan bahan
Tahap prainstrumen

Persiapan pasien:
Makan/puasa
Hamil: hemodilusi
Obat
Transfusi

PENDAHULUAN
Tahap prainstrumen
Pengambilan bahan
Siapkan alat perlengkapan
Isi formulir lengkap
Posisi penderita
Bahan pemeriksaan
Bendungan
Cara pengambilan
waktu

PENDAHULUAN
CARA PENGAMBILAN
CARA PENGAMBILAN
Tahap prainstrumen
3. Penyimpanan :
waktu,
tempat,
tutup BP
4. Penampungan bahan:
cara,
syarat darah,
antikoagulan
ANTICOAGULANTS
1. E.D.T.A (ETHYLINE DIAMINE TETRA ACETATE)
Tdk mempengaruhi besar/bentuk eri, leko
Mencegah trombo menggumpal
Pemakaian: kristal 1 mg: 1 ml drh
larutan 10%
2. HEPARIN
anti trombin
AGD
Pemakaian: 1 mg: 10ml drh
3. SODIUM CITRAT 3,8%
Pemeriksaan hemostasis: 1:9
LED: 1:4
tanpa
ANTICOAGULANT
Dgn
ANTICOAGULANT
SERUM
BLOOD CLOT
PLASMA
WBC
RBC
perbedaan:
FIBRINOGEN -
+
HEMOLYSIS
SERUM
PLASMA
+
+
Tahap prainstrumen
5. Pengiriman:
segera,
formulir,
label

Tahap Instrumen
Pengukuran Spesimen: tepat
Reagen berkualitas/ aquades: tdk
kadaluarsa/ memenuhi standar
Alat memenuhi baku mutu
Suhu yang sesuai
Pengerjaan sesuai pedoman
Pasca Instrumen
Pelaporan hasil: cepat,teliti, akurat
Analisis hasil:
Komunikasi bila tdp masalah

Istilah lain
Pemeriksaan hematologi rutin
Pemeriksaan darah lengkap
Complete Blood Count (CBC)
Sysmex (???)
Komposisi Darah
Cairan darah
(55%)
Sel darah
(45%)
air
(90%)
SUBSTANSI
(10%)
PROTEIN :
- ALBUMIN
- GLOBULIN
- FIBRINOGEN
CARBOHYDRATE
LIPID
VITAMIN
MINERAL
ENZYM
Pemeriksaan hematologi rutin
Memberikan informasi penting
tentang macam dan jumlah eritrosit,
leukosit dan trombosit
Bagian dari pemeriksaan fisik rutin
Membantu :
Evaluasi gejala (lemah, lelah, berat
badan turun dll)
Diagnosa keadaan/ penyakit (anemia,
infeksi/leukemia)
Monitor respons pengobatan
Parameter pemeriksaan
1. Hemoglobin
2. Hematocrit
3. Hitung jenis darah:
Hitung leukosit/ diff count
Hitung eri/indeks eri (MCV, MCH, MCHC)
Hitung trombo
4. Apus darah tepi
5. LED
Hemoglobin
Komponen utama eri
Transportasi O
2
and CO
2
.
Memberi warna merah sel darah
Menurun anemia

Indeks eri
3 indeks eri :
1. MCV (Mean Corpuscular Volume)
2. MCH (Mean Corpuscular Hemoglobin)
3. MCHC (Mean Corpuscular Hemoglobin
Concentration).


MCV
Ukuran eri

Ht X 1000
MCV = ----------------------------------- fL
RBC (in million per L)


MCH
Berisi Hb eri

Hb (g/L)
MCH = ----------------------------- pg
RBC (in million per L)

MCHC
Konsentrasi Hb

Hb (g/dL)
MCHC = ----------------- g/dL
Ht

Hb
Ht
eri
MCV
-menurun microcyter
-Normal normocyter
-meningkat macrocyter
MCV
MCH/C
-menurun hypochrom
-Normal normochrom
Metode pemeriksaan
hemoglobin
1.Cyanmethemoglobin method*
2.Acid hematin method
3.Tallqvist scale
4.Specific gravity method
Cyanmethemoglobin
Prinsip:
Darah dicampur K
3
Fe(CN)
6
and KCN
HiCN

Reagen:
R/ NaHCO3 : 1.0 gr
KCN : 0.05 gr
K3Fe(CN)6 : 0.20 gr
AQUA : 1000 ml
MATERIAL :
SPECTROPHOTOMETER
PIPETS & TUBES
Reagen
CYAN MET Hb STANDARD
METHOD :

Tabung:
5 ml DRABKIN + 0.02 ml
Campur biarkan 5 menit
PHOTOMETRIC (l : 520 nm)
ABSORBANCE OF SAMPLE
ABSORBANCE OF STANDARD
X Hb STANDARD ( 15 g/dL)
1. TALLQVIST METHOD
MATERI : - BLOOD LANCET
- TALLQVIST BOOK
PRINSIP :
Membandingkan warna darah terhadap
skala warna
100% 15.8 gr %
Hb : %
2. METODE SAHLI
PRINSIP : Hb + HCl HEMATINE ACID (warna coklat)
Warna yang tebentuk dibandingkan dengan standar
METHOD:
Eror dalam hemoglobinometry
1. Error dalam penanganan sample
2. Errors dalam pemeriksaan
3. Errors dalam alat
4. Error operator
Arti Klinis
Normal tergantung faktor2: umur,
kelamin, ketinggian, kehamilan
Menurun anemia
Meningkat hemoconcentration:
Kehilangan cairan
Suplai oksigen menurun
Polycythemia vera
Meningkat/menurun: membutuhkan
pemeriksaan lebih lanjut.
Nilai rujukan Hb(g/dl)

Cord blood 13,5-20,5
Hari 1 kelahiran 15,0-23,0
6 bulan-6 tahun 11,0-14,5
6-14 tahun 12,0-15,5
Pria dewasa 13,0-17,0
Wanita dewasa 12,0-15,5
Kehamilan 11,0-14,0
Anemia ringan : 10-11g Hb/dl
Moderate anemia : 7-11
Anemia berat : < 7
Hematokrit
Ratio volume eritrosit terhadap volume darah
% (conventional)
(SI units) L/L
Packed Cell Volume (PCV)
Pengukuran :
Direct centrifus (micromethod &
macromethod)
Indirect automated instrument
MCV X RBC count

sumber error:
- Centrifugation
- Sample
- other
Micrometho
d
CREATOSEAL
1
2
3
READING
DEVICE
TOP OF PLASMA
TOP OF RBC
THE BOTTOM OF RBC
READ : USING READING DEVICE
NORMAL : MEN : 40 - 54%
WOMEN : 37 - 47%
METHOD :
BLOOD EDTA
makrohematokrit
Arti Klinis
Sama dengan hemoglobin
PEM HITUNG JUMLAH :
Manual :
Hemocytometer
Kalkulasi untuk indeks eri
Automatik (hematologic analyzer)
Hitung leukosit
konsetrasi sel per unit volume darah(mm
3
).
meningkat leucocytosis
Menurun leucopenia

LEUKOCYTE ERYTHROCYTE
1. THOMAS PIPET
2. COUNTING CHAMBER
3. DILUTING FLUID
4. HEMOLANCET
COTTON + 70% ETHANOL
TURK
..
- HAYEM
- FORMOL CITRATE
COUNTING CHAMBER = IMPROVED NEUBAUER
BURKER , ETC.
COLOUR BAND
&
NEWTONS RING
CHAMBER DEPTH = 0.1 mm
..
E L
IMPROVED NEUBAUER
LEUKOCYTES COUNT :
4 CORNER SQUARES ( L ) = 1 X 1 X 0.1 mm
3

ERYTHROCYTES COUNT :
1
5
1
5
X X 0.1 mm
3
5 SQUARES ( E )
1
20
1
20
1
10
X X mm
3
80 SQUARES :
LEUKOCYTE COUNT
TURK
SOLUTION
..
COUNT BY MICROSCOPE
CONDENSOR : DOWN WARD
OBJECTIVE : 10 X
CALCULATION :
NORMAL :
Dewasa : 4.000 - 10.000 mm
3

Bayi baru lahir : 10.000 - 12.000 mm
3
1-6 bulan : 4.000 - 15.000 mm
3

4-7 tahun : 4.000 - 11.000 mm
3

8-12 tahun : 4.000 - 10.000 mm
3
IMPROVED NEUBAUER
COUNTING CHAMBER
LARGE CORNER SQUARES
1
10
mm
3
= N. CELLS 4 1 X 1 X
4
10
mm
3
= N. CELLS
1 mm
3
= N X X 20
4
10
= N X CELLS
200
4
Hitung eri
Konsentrasi sel per unit volume darah (mm
3
).
menurun anemia
meningkat polycythaemia

RED BLOOD CELLS COUNT (ERYTHROCYTE)
HAYEM
SOLUTION
6
COUNT BY MICROSCOPE
CONDENSOR : DOWN WARD
OBJECTIVE : 10 X /40X
IMPROVED NEUBAUER
COUNTING CHAMBER
COUNT IN THE RED CELLS IN
5 SQUARES
1
5
1
5
1
10
X X
mm
3

= N.CELLS
VOL = 5 X
1
5
1
5
1
10
X X = mm
3

1
50
1 mm
3
= 50 X 200 X N. CELLS
(WHOLE BLOOD) = 10.000 X N. CELLS
NORMAL :
MEN 4.5 - 5.5 million/mm
3

WOMEN 4.0 - 6.0 million/mm
3

Hitung trombosit
Konsentrasi sel per unit volume darah (mm
3
).
menurun thrombocytopenia
meningkat thrombocytosis
6. THROMBOCYT COUNT
MATERIALS :
- PIPET THOMA FOR ERYTHROCYTE
- 1 % AMM. OXALAT SOLUTION
- HAEMOCYTOMETER (IMPROVED NAUBAUER)
1 mm
3
= N X 50 X 100
=N X 5000 CELLS
NORMAL= 150.000 - 400.000 / mm
3

Apus Darah Tepi
Memberi informasi tentang ukuran,
warna, bentuk, mofologi, and
jumlah sel darah (erythrocyte,
leukocyte and platelet)
2 methods :
Slide-to-slide / push smear
Automatic spinner
Pewarnaan: Romanowsky

METHOD
SMEAR OF BLOOD
TAIL
(THIN)
HEAD
THICK


GEIMSA
FIXATI 96% METHANOL 2 - 3
warnai dengan GIEMSA (IN 1 : 10) 20
Cuci dengan air mengalir

Diffcount
5 macam jenis sel leukosit
Masing2 jenis berperan dalam
mempertahankan tubuh
Jumlah setiap jenis penting dalam
memberikan informasi sistem imun.
%
Peningkatan/penurunan: memberi identitas::
infeksi (neutrophilia, lymphocytosis)
Allergi or toxic reaksi (eosinophilia)
Keganasan (leukemia)

DIFFERENTIAL CELLS (LEUKOCYTE) COUNT
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 COUNT NORM
BASOPHILS - - - - - - - - - - - 0 - 1
EOSINOPHILS I - - - - - - - - II 3 1 - 3
STAB. II II - - - - - - - - 4 2 - 6
SEGMENT IIII I IIII IIII II IIII I IIII II IIII IIII I IIII IIII I IIII 58 50 - 70
LYMPHOCITE I II II IIII III IIII IIII IIII IIII III 33 20 - 40
MONOCYTE - I I - - - - - - - 2 2 - 8
COUNT 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 100


NORMAL ABNORMAL

1. BASOPHILS 0 - 1 % BASOPHILIA -
2. EOSINOPHIL 1 - 3% EOSINOPHILIA ALLERGIC CONDITION
PARACITIC INVESTATION
SCARLET FEVER
LEUKEMIA
3. STAB CELL 2 - 6% SHIFT TO THE LEFT INFECTION
4. SEGMENT 50 - 70% NEUTROPHILIA APPENDICITIS ACUTE
BACTERIAL INFECTION
LEUKEMIA
5. LYMPHOCYTE 20 - 40% LYMPHOCYTOSIS VIRAL INFECTION
LEUKEMIA
6. MONOCYTE 2 - 8 % MONOCYTOSIS BRUCELLOSIS
TUBERCULOSIS
LEUKEMIA
3. NEUTROPHIL CELL
BASOPHIL CELL
. EOSINOPHIL CELL
A. STAB CELL
4. LYMPHOCYTE CELL
B. LARGE LYMPHOCYTE CELL

5. MONOCYTE CELL
SEGMENT NEUTROPHIL CELL
SMALL LYMPHOCYTE CELL
- NORMAL : SIZE UNIFORM
SHAPE ROUND BICONCAVE
FROM ABOVE FROM SIDE
F 6 - 9 m m (7 m m)
EVALUATION OF MORPHOLOGIC BLOOD CELLS
1. ABNORMALITIES OF SIZE :
ANISOCYTOSIS
A. MICROCYTIC
4 - 6 m m
B. MACROCYTIC
10 - 12 m m
C. SHCIZOCYT
(FRAGMENT)
D. MEGALOCYTIC
( 12- 25 m m)
2. ABNORMALITIES OF SHAPE
(POIKILOCYTOSIS)
A. TARGET CELLS
B. CRENATED CELLS
C. SPHEROCYT
D. ACANTHOCYT
E. BURR CELL
F. CRESCENT BODY
G. OVALOCYT /
ELLIPHTOCYT
H. SICKLE CELL
I. TEAR DROP APP.
J. LEPTOCYT
K. BIZZARE
ERYTHROCYTE
NORMOCHROM NORMOCYTIC
3. ABNORMALITY OF COLOUR :
A. HYPOCHROM
B. HYPERCHROM
C. POLYCHROMATION
D. STOMATOCYTE
4. INCLUSION BODY
A. BASOPHYLIC STIPLING
B. MALARIAL STIPLING
C. SIDEROSIT
D. CABOTS RING
E. HOWEL-JOLLY BODY
ABNORMAL MORPHOLOGIC OF LEUKOCYTE
1. HYPERSEGMENTATION
( 5 OR MORE SEGMENT)
2. DEGENERATED NEUTROPHILS
WITH PIKNOTIC NUCLEUS
3. KARYOREXIS
4. TOXIC GRANULES
(INFECTION POISONING BURN)
5. VACUOLIZATION
6. DOHLES (INCL.) BODIES
INFECTION POSITION BURN
7. AUER RODS
8. BARR BODY
9. PELGER-HUET ANOMALY
( < 2 LOBES)




CRENATED ROULEAUX SMUDGE
CELL FORMATION CELL
ARTEFACT :
BLOOD PARASITES
MALARIAL PARASITE
THIN BLOOD FILM
THICK BLOOD FILM
DRY
FIXATION WITH
96% ETHANOL
DRY
DROP WITH WATER : HAEMOLYSIS
STAIN BY GIEMZA FOR 30
RINSE WITH AQUADEST / BUFFER
DRY
MICROSCOPE EXAMINATION
LOOK FOR : PL ; VIVAX, MALARIAE, FALCIPARUM & OVALE
VIVAX
MALARIAE
FALCIPARUM
OVALE
TR TR TR
SCHIZONT
GAMET
LOOK FOR : PL ; VIVAX, MALARIAE, FALCIPARUM & OVALE
VIVAX
OVALE
TR TR
TR
SCHIZONT
GAMET
Falciparum
Laju Endap Darah
Menghitung pengendapan eritrosit
dalam dalam darah persatuan waktu (1
jam)
Menghitung jarak antara puncak
meniskus plasma darah thd
pengendapan eritrosit.
Tidak terklalu spesifik untuk diagnostik
penyakitDigunakan untuk skrining
inflamasi
Faktor yang mempengaruhi
Ukuran dan bentuk eri
Tingkat Plasma fibrinogen & globulin
Mekanik
Teknik

Metode pemeriksaan LED :
Manual :
Westergren Method
Wintrobe & Landsberg Method
Automatic
1.6 mL BLOOD
0.4 ml 3.8% SOD. CITRATE
Normal :
laki-laki 0-15 mm/j
wanita 0-20 mm/j
Hasil Hematologi Rutin
Nilai normal bervariasi dari lab ke lab
Nilai normal hematologi rutin bervariasi,
tergantung umur, sex, krtinggian, and jenis
sampel of sample.

Denise M. Harmening
Clinical Hematology and
Fundamentals of Hemostasis
Fourth edition
FA Davis Company

Any
questions
???
Thank You