TUGAS PENDAHULUAN (TP)

1. Jelaskan mekanisme isolasi pada kromatografi kolom !

2. Apa keuntungan dan kerugian kromatografi kolom, jelaskan !
3. Apa yang menjadi dasar pertimbangan untuk menggunakan metode
kromatografi kolom dalam isolasi ekstrak!
4. Bilakah isolasi dikatakan sempurna pada kromatografi vakum cair?
5. Gambarkan alat yang digunakan pada kromatografi vakum cair beserta
bagian-bagiannya?
Jawaban :
1. Sampel yang akan dipisahkan dilarutkan terlebih dahulu dalam pelarut,
kemudian diletakkan di bagian atas kolom yang telah diisi oleh fasa
diam. Kemudian fasa gerak yang sudah disiapkan dialirkan pelan-pelan
dan dibiarkan mengalir melalui kolom sampai pelarut habis. Fasa gerak
akan membawa campuran komponen ke bawah, sehingga di dalam
kolom terjadi kesetimbangan dinamis antara komponen teradsorbsi
pada fasa diam dengan komponen yang terlarut dalam fasa gerak.
Maka fasa gerak akan mengalir ke bawah. Pelarut (fase gerak)
dibiarkan mengalir melalui kolom karena aliran yang disebabkan oleh
gaya berat ayau gaya gravitasi atau didorong dengan tekanan. Pita,
merupakan senyawa yang larut yang bergerak melalui kolom dengan
laju yang berbeda,jika telah terpisah maka dapat dikumpulkan dalam
vial atau tabung reaksi maupun dalam botol UC yang hasilnya berupa
fraksi ketika keluar dari kolom.

2. Adapaun keuntungan dan kerugian dari kromatografi kolom adalah

sebagai berikut :
a. Keuntungan

1. Konsumsi fase gerak KCV hanya 80% atau lebih kecil disbanding
dengan

kolom

konvensional

karena

pada

kolom

mikrobor

kecepatan alir fase gerak lebih lambat (10-100l/menit)

2. Adanya aliran fase gerak lebih lambat membuat kolom mikrobor
lebih ideal jika digabung dengan spectrometer massa.
3. Sensitivitas kolom mikrobor ditingkatkan karena solute lebih
pekat karenanya jenis kolom ini sangat bermanfaat jika jumlah
sampel terbatas missal sampel klinis
b. Kerugian KCV (Kromatografi Vakum Cair) :
1. Membutuhkan waktu yang cukup lama
2. Sampel yang dapat digunakan terbatas
3. Dasar pertimbangan pemilihan kromatografi kolom yaitu :
Pemisahan dengan kromatografi kolom baik untuk memisahkan
campuran dalam jumlah besar( lebih dari 1 gram). Untuk komponen
yang

jumlahnya sangat kecil dapat digunakan kromotografi gas

maupun kromatografi kinerja tinggi, karena dalam kromatografi ini di

gunakan:
1. Adsorben yang lebih kecil dan luas
2. Tekanan dari suatu pompa untuk mendorong pelarut
3. Detektor dapat digunakan untuk analisis kualitatif dan kuantitatif
senyawa- senyawa yang ter elusi
4. Cara cara pengemasan baru adsorben dalam kolom

4. Isolasi pada kromatografi vakum belum bisa dikatakan semurna, karena

pada proses kromatografi vakum masih memisahkan senyawa-senyawa
kimia yang terdapat pada sampel, tapi dalam proses kromatografi ini
senyawa yang kita dapatkan bisa lebih sedikit daripada pada proses KLT
biasa maka dari itu tahap selanjutnya setelah memperoleh fraksi dari
proses kromatografi vakum yaitu dengan melakukan KLT.

5. Gambar alat kromatografi kolom beserta keterangannya :

Cari di 9oo9le aja