ISOLASI DAN IDENTIFIKASI KOMPONEN KIMIA SECARA KROMATOGRAFI
LAPIS TIPIS PREPARATIF, KROMATOGRAFI KOLOM
DAN SPEKTROFOTOMETRI UV-VISIBEL
BAB I
PENDAHULUAN
Fitokimia adalah ilmu yang
mempelajari berbagai senyawa organik yang
dibentuk dan disimpan oleh tumbuhan yaitu,
tentang struktur kimia, biosintesis dan
perubahan metabolisme, penyebaran secara
alami dan fungsi biologis, dari senyawa
organik. Fitokimia atau kadang disebut
fitonutrient, dalam arti luas adalah segala
jenis zat kimia atau nutrien yang diturunkan
yang diturunkan dari sumber tumbuhan
termasuk sayuran dan tumbuh-tumbuhan
(Hermanto,2013).
Dalam penggunaan umum, fitokimia
memiliki definisi yang lebih sempit,
fitokimia biasanya digunakan untuk merujuk
pada senyawa yang ditemukan pada
tumbuhan yang tidak dibutuhkan untuk
fungsi normal tubuh, tapi memiliki efek yang
menguntungkan bagis kesehatan atau
memiliki peran aktif bagi pencegahan
penyakit. Karenanya zat-zat ini berbeda
dengan apa yang diistilahkan sebagai nutrien
dalam pengertian tradisional, yaitu bahwa
mereka bukan suatu kebutuhan bagi
metabolisme normal,dan ketiaadaan zat ini
tidak akan mengakibatkan penyakit defisiensi
paling tidak, dalam jangka waktu yang
normal untuk defisinisi (Hermanto,2013).
Simplisia adalah bahan alamia yang
dipergunakan sebagai obat yang belum
mengalami pengolahan apan juga dan kecuali
dinyatakan lain,upa bahan yang telah
dikeringkan (Depkes RI, 1977-1980).
Simplisia ada yang lunak seperti
bunga, daun, akar kelembak dan ada yang
keras seperti biji, kulit kayu, kulit akar.
Simplisia yang lunak mudah direbus oleh
cairan penyari, karena itu pada penyarian
1 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12
tidak perlu diserbuk sampai halus.
Sebaliknya pada simplisia yang keras, perlu
dihaluskan terlebih dahulu sebelum
dilakukan penyarian (Sediaan galenika,
2012)
Tanaman alpukat (Persea americana
Mill) merupakan salah satu tanaman yang
memiliki manfaat sebagai obat tradisional.
Hampir semua bagian dari tanaman ini
memiliki khasiat sebagai sumber obat-
obatan. Bagian buah famili Lauraceae ini
memiliki kandungan gizi yang tinggi, bagian
daun digunakan untuk ramuan obat penyakit
ginjal, hipertensi. Daun merupakan bagian
tanaman alpukat yang memiliki manfaat
sebagai obat tradisional. Berdasarkan
penelitian, daun Persea americana Mill
memiliki aktifitas antioksidan dan membantu
dalam mencegah atau memperlambat
kemajuan berbagai oksidatif stres yang
berhubungan dengan penyakit (Owalabi dkk,
2010).
Kaempferia galanga L. adalah nama latin
dari Kencur. Nama “Kencur” sendiri bukan tanpa
arti. Ia berasal dari bahasa sanskerta yang
diartikan sebagai temu putih. Dari nama kencur
tersebut, secara sederhana kita bisa
menyimpulkan bahwa kencur ini masuk ke dalam
kerabat suku temu-temuan atau yang dikenal
dengan sitilah Zingiberaceae. Dengan demikian,
ia berkerabat dekat dengan temulawak, Pulkra,
Kunir, Kunci Pepet dan masih banyak lagi
lainnya (Anonim, 2013)
Daun sukun (Artocarpus altilis)
adalah salah satu obat tradisional yang telah
banyak dikenal masyarakat Indonesia.
Flavonoid, asam hidrosianat, asetilcolin,
tannin, riboflavin, saponin, phenol, quercetin,
champerol dan kalium merupakan kandungan
kimia daun sukun yang berkhasiat sebagai
obat penyakit seperti ginjal, jantung, tekanan
darah tinggi, liver,pembesaran limpa,
kencing manis, asma, dan kanker. Kalium
merupakan kation penting dalam cairan
intraselular yang berperan dalam
keseimbangan pH dan osmolaritas. Tubuh
mengandung kalium 2,6 mg/kg berat badan
bebas lemak. Sel-sel syaraf dan otot
mengandung banyak kalium dan dalam
jumlah kecil kalium dijumpai dalam cairan
ekstraselular, dan kadar kalium dalam serum
adalah 14-22 mg/100 ml. Kalium mempunyai
kemampuan menerobos membran sel lebih
besar dibanding natrium, dan diperlukan
dalam metabolisme karbohidrat dan
proteinKekurangan kalium umumnya
disebabkan karena ekskresi yang berlebihan
melalui ginjal dan juga dapat terjadi karena
muntah-muntah yang berlebihan atau diare
yang hebat (Suhardjo,1992).
Meskipun pada waktu sekarang banyak
obat-obatan yang dibuat secara sintetik,
tetapi tak boleh kita abaikan arti tumbuhan
sebagai penghasil bahan yang berkhasiat
obat, seperti dapap kita lihat sendiri dari
banyaknya antibiotic yang diperkenalkan
dalam dunia pengobatan, dan boleh
dikatakan semua zat tersebut berasal dari
tumbuhan, seperti antara lain : penisilin,
Streptomisin, Kloromisetin, dan lain-lain.
Kami yakin, bahwa masih banyak tumbuhan
lain yang sampai sekarang belum dikenal
sebagai tumbuhan yang berkhasiat obat.
Kalau kita meninjau banyaknya tumbuhan
yang bahannya dipakai dalam obat
tradisional oleh mereka yang tak mengenal
ilmu pengobatan modern, maka rasanya
tinggal dilakukan suatu penyelidikan ilmiah
saja, untuk memperoleh kepastian bahw
penduduk yang mempergunakan macam-
macam bahan tumbuhan itu memang
berasalan, meskipun pemakaian dari bahan-
bahan tersebut tidak memakai dasar-dasar
ilmiah yang dapat dipertanggung jawabkan
(Tjitrosoepomo, G. 2005).
Penyarian adalah kegiatan penarikan
zat yang dapat larut dari bahan yang tidak
dapat larut dengan pelarut cair. Simplisia
yang disari, mengandung zat aktif yang
2 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12
dapat larut dan zat yang tidak larut seperti
serat, karbohidrat, protein dan lain-lain.
Penyarian disamping memperhatikan sifat
simplisia dan sifat zat aktifnya, harus juga
memperhatikan zat-zat yang sering terdapat
dalam simplisia seperti protein, karbohidrat
lemak dan gula (Sediaan galenika, 2012).
Pada tahan-tahan terakhir ini fitokimia
atau kimia tumbuhan telah berkembang
menjadi satu disiplin tersendiri, berada
diantara kimia organic bahan alam dan
biokimia tumbuhan, serta berkaitan erat
dengan keduanya. Bidang perhatiannya ialah
aneka ragam senyawa organic yang dibentuk
dan ditimbun oleh Tumbuhan, yaitu
mengenai struktur kimianya, biosintesisnya,
perubahan serta metabolismenya,
penyebarannya secara alamiah, dan fungsi
biologisnya (Harbone, JB. 1987).
Pada semua pekerjaan tersebut
diperlukan metode pemisahan, pemurnian,
dan identifikasi kandungan yang terdapat
dalam tumbuhan yang sifatnya berbeda-beda
dan yang jumlahnya banyak itu. Jadi,
kemajuan pengetahuan kita mengenai
berkaitan langsung dengan keberhasilan
memanfaatkan teknik yang sudah dikenal dan
meneruskan pengembangan teknik baru
untuk menyelesaikan masalah yang menonjol
bila timbul. Salah satu tantangan fitokimia
adalah melaksanakan semjua pekerjaan
diatas itu dengan menggunakan bahan yang
makin lama makin sedikit. Sering pemecahan
masalah biologi, misalnya pengaturan
tumbuh tanaman, biokimia antraksi
tumbuhan-hewan atau pemahaman asal fosil
tumbuhan, bergantung pada identifikasi
sejumlah struktur kimia yang rumit yang
mungkin saja hanya tersedia beberapa
microgram yang telaah (Harbone, JB. 1987).
Tujuan utama ekstraksi adalah
mendapatkan atau memisahkan sebanyak
mungkin zat-zat yang memilih khasiat
pengobatan (concentrata) dari zat-zat yang
tidak berfaedah, agar lebih mudah
dipergunakan (kemudahan diabsorpsi, rasa, Adapun prinsip percobaan percobaan
pemakaian, dan lain-lain adalah berdasarkan cara pengolahan sampel
dan disimpang dibandingkan simplisia asal serta cara mengekstraksi, mengisolasi,
dan tujuan pengobatan lebih terjamin mengidentifikasi kompenen kimia dari
(Syamsuni, 2006). sampel Tanaman alpukat (Persea americana
Ada 4 teknik kromatografi yang Mill), rimpang kencur (Kaempferia galanga
digunakan untuk pemisahan dan pemurnian L.), kulit batang kakao/coklat (Theobroma
kandungan tumbuhan atau biasa juga cacao, L.), dan daun sukun (Artocarpus
dilakukan dengan gabungan dari empat altilis) dengan metode ekstraksi yang sesuai
teknik tersebut. Keempat teknik dan secara spektrofotometri UV-Visibel serta
kromatrografi tersebut yaitu kromatografi Kromatografi Lapis Tipis.
kertas, kromatografi lapis tipis, kromatografi
gas cair, dan kromatografi kinerja tinggi BAB II
(Harborne, 1989). TINJAUAN PUSTAKA
Diantara berbagai jenis teknik
kromatografi, kromatografi lapis tipis (KLT) A. Uraian Tanaman
adalah yang paling cocok untuk analisis obat 1. Alpukat
di laboratorium farmasi karena hanya 1.1. Klasifikasi (Anonim, 2012)
memerlukan investasi yang kecil untuk Regnum : Plantae
perlengkapan, waktu analisis relatif singkat, Divisi : Spermatophyta
jumlah cuplikan yang diperlukan sedikit, Kelas : Magnoliopsida
selain itu kebutuhan ruang minimum serta Ordo : Laurales
penanganannya sederhana (Stahl, 1985). Famili : Lauraceae
Penggunaan KLT biasa untuk tujuan Genus : Persea
uji kualitatif dapat menggunakan pereaksi Spesies : Persea americana P.
kimia atau sinar ultraviolet atau gabungan Mill.
keduanya. (Soemarno, 2001).
Adapun maksud percobaan adalah
untuk mengetahui dan memahami cara
pengambilan, pengolahan, mengekstraksi,
mengisolasi, mengidentifikasi kompenen
kimia yang berkhasiat sebaga yang
terkandung suatu sampel atau simplisia.
Adapun tujuan percobaan adalah (Gambar 1. Tanaman daun alpukat
untuk mengatahui dan memperoleh cara (Persea americana P.Mill)
pengolahan sampel serta mengetahui cara
mengekstraksi, mengisolasi, mengidentifikasi 1.2. Nama daerah (Anonim, 2013)
Alpuket (Jawa Barat), alpokat (Jawa
kompenen kimia dari sampel Tanaman
Tengah dan Jawa Timur), apokat dan
alpukat (Persea americana Mill), rimpang jambu wolanda (sebutan di lain-lain
kencur (Kaempferia galanga L.), kulit batang daerah).
kakao/coklat (Theobroma cacao, L.), dan Nama asing : Kencur, sikur
daun sukun (Artocarpus altilis) dengan (Indonesia), cikur, cekor (Melayu), disul
metode ekstraksi yang sesuai dan secara (Fliphina), shan nai (China) (Bambang,
spektrofotometri UV-Visibel serta Ismawan, 2013)
Kromatografi Lapis Tipis.

3 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

1.3. Morfologi
Tanaman alpukat memiliki
lebih kurang 60 anggota kerabat.Wujud
atau bentuk pohonnya bermacam-
macam, mulai dari pohon lurus dengan
batang yang kokoh, kuat sampai pohon-
pohon kecil merimbun seperti
semak.Batang tanaman ini bercabang
rendah dengan tajuk pohon berdaun
rapat.Daunnya berwarna hijau tua
berbentuk runcing sampai agak
berbentuk melebar sepanjang 10-20 cm.
sedangkan berat buah bervariasi antara
100-2.300 gram. (Anonim, 2014)

1.4. Kandungan Kimia

Buah dan daun alpukat
mengandung saponin, alkaloida dan
falavanoida, serta tanin. Daun alpukat
mengandung polifenol, quersetin, dan
gula alkohol. Alpukat juga mengandung
beta karoten, klorofil, vitamin E, dan 2.2. Gambar 2.Rimpang Kencur (Kaempferia
vitamin B kompleks yang berlimpah galanga L)
dalam alpukat. (Anonim, 2009)
2.3. Nama Daerah
1.5. Khasiat
Alpukat mampu menurunkan Nama daerah kencur
resiko stroke dan serangan jantung, (Indonsia), Cikur (Sunda), Ceuko
karena alpukat merupakan satu-satunya (Aceh), Kencor (Madura), Cekuh (Bali),
buah yang kaya lemak, bahkan kadarnya Kencur Sukung (Minahasa), Asauli
lebih dari dua kali kandungan lemak (Ambon), Cekir (Sumba), Cendo, Tekur,
dalam durian. Kaciwer, Kopuk, Ccakue, Cokur
(Sumatera). (Anonim, 2011)
2. Rimpang Kencur
2.1. Klasifikasi Rimpang Kencur
(Kaempferia galanga L) 2.4. Morfologi
Regnum : Plantae Habitus : semak semusim,
Divisi : Magnoliophyta tinggi 30-70 cm. Akar : bergerombol,
Kelas : Liliopsida bercabang-cabang, serabut putih, coklat
Ordo : Zingiberales kegelapan, berkesan mengkilap. Batang :
Family : Zingiberaceae lunak, berpelepah, membentuk rimpang,
Genus : Kaempferia hitam keabu-abuan. Daun: tunggal,
Spesies : Kaempferia galanga L lanset, ujung runcing, pangkal
(Anonim, 2012) berpelepah, tulang menonjol, panjang
kira-kira 70 cm, hijau muda, jumlah
helaian daun tidak lbih dari 2-3 lembar
dengan susunan berhadapan, bulat
melebar, ujung mengecil, berwarna hijau
gelap. Bunga : majemuk, berbentuk
tabung kelopak lanset, panjang kira-kira

4 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

 4 cm, lebar 2-3,5 cm, mahkota panjang
19 cm benang sari, putik kecil, putih,
tersusun dengan setengah duduk dengan
mahkota bunga berjumlah antara 4-12
buah, bibir bunga berwarna lembayung
dengan warna putih dominan. Daging
buah : mempunyai daging buah paling
lunak, tidak berserat, berwarna putih,
kulit luar berwarna coklat. Habitat :
tumbuh subur didataran rendah atau
pegunungan yang tanahnya gembur dan
tidak terlalu banyak air, dapat ditanam
pada pot atau kebun yang cukup sinar
matahari, tidak terlalu basah dan
ditempat terbuka. (Anonim, 2012)
2.5. Kandungan Kimia
Rimpang kencur (Kaempferia
galanga L) mengandung saponin,
flavonoida dan senyawa-senyawa
polifenol, disamping minyak atsiri (2,4-
3,9 %) yang mengandung sineol,
borneol, kampfer, etil alkohol, asam
metil-kaneelat dan senyawa-senyawa
pentadekan (Harbone, 1987).
2.6. Khasiat
Rimpang kencur (Kaempferia
galanga L) digunakan untuk mengobati
radang lambung, radang anak telinga,
influenza pada bayi, masuk angin, sakit
kepala, menghilangkan darah kotor,
diare, memperlancar haid, mata pegal,
keseleo, lelah, kejang perut, mual,
penawar racun, serta sbagai obat batuk.
Juga dipakai untuk mengobati infeksi
telinga, sakit kulit, bisul, dan sebagai
roboransia. Kencur kadang-kadang juga
digunakan sebagai bioinsektisida
(Harbone, 1987).
5 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12
3. Kulit Batang Sukun
3.1. Klasifikasi dari kulit batang sukun
Artocarpus communis Forst
Kingdom : Plantae
Divisio : Magnoliophyta
Class : Magnoliopsida
Ordo : Urticales
Familia : Moraceae
Genus : Artocarpus
Spesies : Artocarpus communis Forst
Gambar 3. Pohon Sukun Artocarpus
communis Forst
3.2. Morfologi
Artocarpus communis (sukun)
adalah tumbuhan dari genus Artocarpus
dalam famili Moraceae yang banyak
terdapat di kawasan tropika seperti
Malaysia dan Indonesia. Ketinggian
tanaman ini bias mencapai 20 meter. Di
pulau Jawa tanaman ini dijadikan
tanaman budidaya oleh masyarakat.
Buahnya terbentuk dari keseluruhan
kelopak bunganya, berbentuk bulat atau
sedikit bujur dan digunakan sebagai
bahan makanan alternatif . Sukun bukan
buah bermusim meskipun bias anya
berbunga dan berbuah dua kali setahun.
Kulit buahnya berwarna hijau
kekuningan dan terdapat segmen-segmen
petak berbentuk poligonal. Segmen
poligonal ini dapat menentukan tahap
kematangan buah sukun
3.3. Nama Daerah
Kulur ( Bahasa Sunda)
atau kluwih (bahasa Jawa), kulu (bahasa
Aceh), kalawi(Minang),jeneponto,Makas
sar (Bakkara)
3.4. Kandungan Kimia
Buah sukun mengandung
niasin, vitamin C, riboflavin,
karbohidrat, kalium, thiamin, natrium,
kalsium, dan besi . Pada kulit kayunya
ditemukan senyawa turunan flavanoid
yang terprenilasi, yaitu artonol B dan
sikloartobilosanton. Kedua senyawa
terebut telah diisolasi dan diuji
bioaktivitas antimitotiknya pada cdc2
kinase dan cdc25 kinase .Kayu yang
dihasilkan dari tanaman sukun bersih
dan berwarna kuning, baik untuk
digergaji menjadi papan kotak, dapat
digunakan sebagai bahan bangunan
meskipun tidak begitu baik. Kulit
kayunya digunakan sebagai salah satu
bagian minuman di Ambon kepada
wanita setelah melahirkan.Flavanoid
adalah senyawa polifenol yang secara
umum mempunyai struktur
phenylbenzopyrone (C6-C3-C6).
Flavanoid dan derivatnya terbukti
memiliki aktivitas biologi yang cukup
tinggi sebagai cancer prevention.
Berbagai data dari studi laboratorium,
investigasi epidemiologi, dan uji klinik
pada manusia telah menunjukkan bahwa
Flavanoid memberikan efek signifikan
sebagai cancer chemoprevention dan
pada chemotheraphy
3.5. Khasiat
Buahnya yang masak dimakan dengan
cara merebus, membakar atau
menggorengnya. Semacam biskuit dapat
dibuat dari potongan buahnya yang
masak dan dikeringkan di bawah sinar
matahari atau di oven. Di beberapa
tempat di Pasifik sukun disimpan dengan
6 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12
cara menguburnya. Buah yang telah
difermentasi tersebut dapat diubah
menjadi makanan yang bergizi dengan
bau seperti keju, dan dapat dibuat untuk
membuat kue. Di Polinesia, buah sukun
digunakan sebagai bahan makanan
pokok. Kulit batangnya yang berserat
digunakan untuk pakaian tradisional.
Getahnya yang putih sering dipakai
sebagai lem untuk pembuatan perahu,
namun dipakai juga untuk pemikat
burung dan sebagai bahan baku permen
karet. Bila getahnya dicampur dengan air
hujan dapat digunakan untuk obat diare.
Daunnya yang muda bila dipamah dapat
dipakai untuk mencegah keracunan
makanan. Pohon sukun baik ditanam
sebagai peneduh di kebun kopi dan juga
penahan angin.
4. Coklat
4.1. Klasifikasi Coklat (Theobroma cacao)
(Anonim, 2014)
Regnum : Plantae
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnoliopsida
Ordo : Malvales
Family : Malvaceae
Genus : Theobroma
Spesies : Theobroma cacao
Gambar 4. Coklat (Theobroma cacao)
4.2. Morfologi Tumbuhan
Kakao merupakan tumbuhan
tahunan (perennial) berbentuk pohon, di
alam dapat mencapai ketinggian 10m.
Meskipun demikian, dalam
pembudidayaan tingginya dibuat tidak
lebih dari 5m tetapi dengan tajuk
 menyamping yang meluas. Hal ini
dilakukan untuk memperbanyak cabang
produktif.
Bunga kakao, sebagaimana
anggota Sterculiaceae lainnya, tumbuh
langsung dari batang (cauliflorous).
Bunga sempurna berukuran kecil
(diameter maksimum 3cm), tunggal,
namun nampak terangkai karena sering
sejumlah bunga muncul dari satu titik
tunas. Bunga kakao tumbuh dari batang.
Penyerbukan bunga dilakukan
oleh serangga (terutama lalat kecil
(midge) Forcipomyia, semut bersayap,
afid, dan beberapa lebah Trigona) yang
biasanya terjadi pada malam hari1.
Bunga siap diserbuki dalam jangka
waktu beberapa hari.
Kakao secara umum adalah
tumbuhan menyerbuk silang dan
memiliki sistem inkompatibilitas-sendiri
(lihat penyerbukan). Walaupun
demikian, beberapa varietas kakao
mampu melakukan penyerbukan sendiri
dan menghasilkan jenis komoditi dengan
nilai jual yang lebih tinggi.
Buah tumbuh dari bunga yang
diserbuki. Ukuran buah jauh lebih besar
dari bunganya, dan berbentuk bulat
hingga memanjang. Buah terdiri dari 5
daun buah dan memiliki ruang dan di
dalamnya terdapat biji. Warna buah
berubah-ubah. Sewaktu muda berwarna
hijau hingga ungu. Apabila masak kulit
luar buah biasanya berwarna kuning.
Biji terangkai pada plasenta
yang tumbuh dari pangkal buah, di
bagian dalam. Biji dilindungi oleh salut
biji (aril) lunak berwarna putih. Dalam
istilah pertanian disebut pulp.
Endospermia biji mengandung lemak
dengan kadar yang cukup tinggi. Dalam
pengolahan pascapanen, pulp
difermentasi selama tiga hari lalu biji
dikeringkan di bawah sinar matahari
(Anonim, 2013)
4.3. Kandungan kimia
Cokelat mengandung
alkaloid-alkaloid seperti teobromin,
fenetilamina, dan anandamida, yang
memiliki efek fisiologis untuk tubuh.
Kandungan-kandungan ini banyak
7 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12
dihubungkan dengan tingkat serotonin
dalam otak. Menurut ilmuwan, cokelat
yang dimakan dalam jumlah normal
secara teratur dapat menurunkan tekanan
darah [8] . Cokelat hitam akhir-akhir ini
banyak mendapatkan promosi karena
menguntungkan kesehatan bila
dikonsumsi dalam jumlah sedang,
termasuk kandungan anti oksidannya
yang dapat mengurangi pembentukan
radikal bebas dalam tubuh (Anonim,
2013).
4.4. Khasiat
Cokelat ternyata telah
dikonsumsi sejak dulu kala. Berbagai
manfaat cokelat untuk kesehatan
manusia telah ditemukan melalui
serangkaian penelitian ilmiah yang valid.
Cokelat merupakan kategori
makanan yang mudah dicerna oleh tubuh
dan mengandung banyak vitamin seperti
vitamin A1, B1, B2, C, D, dan E serta
beberapa mineral seperti fosfor,
magnesium, zat besi, zinc, dan juga
tembaga.
Cokelat juga terkenal
mengandung antioksidan dan flavonoid
yang sangat berguna untuk mencegah
masuknya radikal bebas ke dalam tubuh
yang bisa menyebabkan kanker.
Cokelat juga mengandung
lemak yang memiliki fungsi yang sama
dengan minyak zaitun dan mengandung
mineral esensial untuk memperkuat
tulang, kuku, rambut, dan juga kulit. Hal
tersebut sangat membantu untuk
mencegah proses penuaan.
Meskipun dianggap sebagai
makanan yang mampu menambah berat
badan, cokelat juga dianggap sebagai
salah satu makanan yang mampu
mengusir rasa stres.
B. Uraian Ekstraksi
1. Pengertian Ekstrak
Ekstrak adalah sediaan kering,
kental aatu cair dibuat dengan menyari
simplisisa nabati atau hewani menurut
cara yang cocok, diluar pengaruh
cahaya matahari langsung. Ekstrak
kering harus mudah digerus menjadi
serbuk (Depkes RI, 1979)
2. Macam-macam Ekstrak yaitu sebagai
berikut:
a. Ekstrak Cair
Ekstrak cair adalah Ekstrak
cair biasanya masih mengandung
sejumlah pelarut tertentu (kadar air
> 20%.
b. Ekstrak Kental
Ekstrak kental adalah ,
merupakan ekstrak yang pelarutnya
telah diuapkan sampai batas tertentu
(kadar air > 10-20%, bahkan 30%).
c. Ekstrak Kering
Ekstrak kering adalah
ekstrak kering adalah ekstrak yang
ditambahkan serbuk pengisi, seperti,
laktosa, avicel, maltodekstrin,
amilum atau bahan pengisi lain yang
inert dengan perbandingan tertentu,
kemudian dikeringkan dalam lemari
pengering (oven) (Sediaan
galenik,1979).
Tujuan ekstraksi adalah
untuk menarik komponen-
komponen kimia yang terdapat
dalam simplisia, proses ekstraksi
didasarkan atas perpindahan massa
komponen-komponen zat padat dari
simplisia kedalam pelarut, setelah
pelarut menembus permukaan
dinding sel, kemudian berdifusi
sehingga terjadi perbedaan di luar
dan di dalam sel.
3. Jenis-jenis Ekstraksi yaitu sebagai
berikut:
a. Metode Maserasi
8 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12
Istilah maserasi berasal dari
bahasa latin “macerace”yang artinya
merendam. Merupakan proses yang
sederhana dan paling tepat dimana
bahan yang sudah halus
memungkinkan untuk direndam
sampai meresap dan melunakkan
susunan sel, sehingga zat-zat yang
mudah larut akan larut.
Mekanisme kerja dari metode
maserasi adalah cairan penyari akan
menembus dinding sel dan masuk
kedalam rongga sel yang
mengandung zat aktif. Zat aktif akan
larut dank arena adanya perbedaan
konsentrasi antara larutan zat aktif
di dalam sel dengan diluar sel, maka
larutan yang terpekat di desak
keluar. Peristiwa itu berulang
sehingga terjadi keseimbangan
konsentrasi antara larutan diluar sel
dengan larutan di dalam sel (Sediaan
Galenika,1986).
Cairan penyari yang
digunakan dapat berupa air, etanol,
methanol, air-etanol atau jenis
pelarut yang lain. Maserasi ini
dilakukan dalam satu bejana yang
berisi cairan penyari, dibiarkan
selama lima hari sambil berulang-
ulang diaduk, kemudian disaring
(Sediaan Galenika,1986).
Maserasi dapat dilakukan
modifikasi, misalnya :
1) Modifikasi maserasi digesti, yaitu
maserasi yang dilakukan dengan
menggunakan pemanasan lemah
dengan suhu 40-50°C. Cara
maserasi ini hanya dapat
dilakukan untuk simplisia yang
zat aktifnya tahan terhadap
pemanasan.
2) Maserasi dengan mesin
pengaduk. Proses ini dilakukan
dengan menggunakan pengaduk
yang berputar secara terus-
 menerus dan dapat mempercepat
proses ekstraksi sehingga dalam
waktu 6-24 jam maserasi dapat
selesai.
3) Remaserasi, yaitu penyarian yang
dilakukan dengan membagi dua
cairan penyari kemudian seluruh
serbuk simplisia dimaserasi
dengan cairan penyari yang
pertama.
4) Maserasi melingkar, yaitu
penyarian yang dilakukan dengan
menggunakan cairan penyari
yang selalu bergerak dan
menyebar (Sediaan
Galenika,1986).
b. Metode Perkolasi
Perkolasi adalah cairan
penyarian yang dilakukan dengan
mengalirkan cairan penyari melalui
serbuk simplisia yang telah dibasahi
(Sediaan Galenika,1986).
Dalam metode ini serbuk
simplisia ditempatkan dalam suatu
bejana silinder, yang bagian
bawahnya diberi sekat berfori.
Cairan penyari dialirkan dari atas ke
bawah melalui serbuk simplisia
tersebut, cairan penyari akan
melarutkan zat aktif yang terdapat
pada sel-sel yang dilalui sampai
mencapai keadaan jenuh. Gerak
kebawah disebabkan oleh kekuatan
gaya beratnya sendiri dan cairan
yang ada di atasnya, dikurangi oleh
gaya kapiler yang cenderung untuk
menahan (Sediaan Galenika,1986).
c. Metode Soxhletasi
Penarikan komponen kimia
yang dilakukan dengan cara serbuk
simplisia ditempatkan dalam
klonsong yang telah dilapisi kertas
saring sedemikian rupa, cairan
penyari dipanaskan dalam labu alas
bulat sehingga menguap dan
dikondensasikan oleh kondensor
9 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12
bola menjadi molekul-molekul
cairan penyari yang jatuh ke dalam
klonsong menyari zat aktif di dalam
simplisia dan jika cairan penyari
telah mencapai permukaan sifon,
seluruh cairan akan turun kembali
ke labu alas bulat melalui pipa
kapiler hingga terjadi sirkulasi.
Ekstraksi sempurna ditandai bila
cairan di sifon tidak berwarna, tidak
tampak noda jika di KLT, atau
sirkulasi elah mencapai 20-25 kali.
Ekstrak yang diperoleh
dikumpulkan dan dipekatkan.
d. Metode Refluks
Penarikan komponen kimia
yang dilakukan dengan cara sampel
dimasukkan ke dalam labu alas bulat
bersama-sama dengan cairan
penyari lalu dipanaskan, uap-uap
cairan penyari terkondensasi pada
kondensor bola menjadi molekul-
molekul cairan penyari yang akan
turun kembali menuju labu alas
bulat, akan menyari kembali sampel
yang berada pada labu alas bulat,
demikian seterusnya berlangsung
secara berkesinambungan sampai
penyarian sempurna, penggantian
pelarut dilakukan sebanyak 3 kali
setiap 3-4 jam. Filtrat yang
diperoleh dikumpulkan dan
dipekatkan.
e. Metode Perkolasi
Percolare berasal dari kata “
colara” = to strain, artinyamenyerkai
dan “ Per” = through, artinya
meenembus. Dengan demikian
perkolasi adalah suatu cara
penarikan memakai alat yang yang
disebut perkolator yang
disimplisianya terendam dalam
cairan penyari, zat-zat akan terlarut
dan larutan tersebut menetes secara
beraturan sampai memenuhi syarat
 yang telah ditetapkan (Syamsuni,
2006).
Prinsip perkolasi adalah
sebagai berikut: serbuk simplisia
ditempatkandalam suatu bejana
silinder, yang bagian bawahnya
diberi sekat berpari. Cairan penyari
diberikan dari atas kebawah melalui
serbuk tersebut, cairan penyari akan
melarutkan zat aktif sel-sel yang
dilalui sampai mencapai keadaan
jenuh. Gerakan bawah disebabkan
oleh kekuatan gayanya sendiri dan
cairan diatasnya, dikurangi dengan
daya kapiler yang cenderung untuk
menahan (Sediaan galenika, 2012).
Kekuatan yang berperan
pada perkolasi antara lain gaya
berat, kekentalan, daya larut,
tegangan permukaan, difusi,
osmosa, adesi, daya kapiler dan
daya geseran (friksi) (Sediaan
galenika, 2012).
Bentuk perkolator ada 3
macam yaitu sebagai berikut:
1. Perkolator bentuk tabung
2. Perkolator bentuk paruh
3. Perkolator bentuk corong
(Sediaan galenika, 2012).
Jenis-jenis perkolasi yaitu
sebagai berikut:
1. Perkolasi Biasa
Simplisia yang telah
ditentukan derajat kehalusannya
direndam degan cairan penyari,
dimasukkan kedalam perkolator,
dan diperkolasi sampai didapat
perkolator tertentu.
2. Perkolasi Bertingkat/Reperkolasi
Reperkolasi adalah suatu
cara perkolasi biasanya, tetapi
dalam prosesnya dipakai
beberapa perkolator.
3. Perkolasi dengan Tekanan
Perkolasi dengan tekanan
ini hampir tidak perna
10 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12
dipergunakan pada pembuatan
resmi sediaan alatnya disebut
diakolator.
4. Perkolasi Kesinambung
Sebetulnya mirip memasak,
karena pada perkolasi
kesinambung ini dipergunakan
alat soxhlet, yang dengan penyari
sedikit saja penyarian dapat
berlangsung sempurna (Sediaan
Galenika, 2012).
C. Uraian Kromatografi Lapis Tipis
(KLT)
Kromatografi digunakan untuk
memisahkan substansi campuran menjadi
komponen-komponennya. Seluruh bentuk
kromatografi berkerja berdasarkan prinsip
ini. Kromatografi adalah teknik
pemisahan campuran berdasarkan
perbedaan kecepatan perambatan
komponen dalam medium tertentu. Pada
kromatografi, komponen-komponennya
akan dipisahkan antara dua buah fase
yaitu fase diam dan fase gerak. Fase diam
akan menahan komponen campuran
sedangkan fase gerakakan melarutkan zat
komponen campuran (Astawan, 2006).
Komponen yang mudah tertahan
pada fase diam akan tertinggal. Sedangkan
komponen yang mudah larut dalam fase
gerak akan bergerak lebih cepat. Semua
kromatografi memiliki fase diam (dapat
berupa padatan, atau kombinasi cairan-
padatan) dan fase gerak (berupa cairan
atau gas). Fase gerak mengalir melalui
fase diam dan membawa komponen–
komponen yang terdapat dalam campuran
(Astawan, 2006).
Dalam fase gerak digunakan
sistem pelarut campuran.Sistem ini
biasanya dibuat dengan mencampur air
dengan pelarut organik dalam corong
pisah. Setelah kedua fase itu terpisah,
keduanya digunakan untuk penjenuhan
bejana pengembang dan fase organic
 bertindak sebagai fase gerak(Astawan, yang dipakai untuk pemisahan campuran
2006). lipofil maupun senyawa hidrofil.
Jarak pengembangan senyawa ketebalan adsorben yang paling sering
pada kromatografi biasanya dinyatakan digunakan ialah 0,5 – 2 mm. pembatasan
dengan angka Rf atau hRf yaitu : ketebalan lapisan dan ukuran plat sudah
Jarak titik pusat noda dari titik penotolan tentu mengurangi jumlah bahan yang
R=
Jarak yang ditempuh eluen dari titik penotolan
dapat dipisahkan dengan KLTP. Ukuran
Angka Rf (Rate of Flow)
partikel dan porinya kurang lebih sama
menyatakan besaran perbandingan
dengan ukuran tingkat mutu KLT
kecepatan bergeraknya komponen terlarut
(Hostettmann, 2006).
terhadap fase gerak (pelarut).
Pada kromatografi lapis tipis
Beberapa faktor yang
preparatif, cuplikan yang akan dipisahkan
mempengaruhi nilai Rf, antara lain :
ditotolkan berupa garis pada salah satu sisi
1. Ukuran partikel dari zat penyerap
pelat lapisan besar dan dikembangkan
2. Derajat keaktifan zat penyerap
secara tegak lurus pada garis cuplikan
3. Kemurnian pelarut
sehingga campuran akan terpisah menjadi
4. Kejenuhan chamber (Astawan, 2006).
beberapa pita. Pita ditampakkan dengan
D. Uraian Kromatografi Lapis Tipis
cara yang tidak merusak jika senyawa itu
Preparatif
tanwarna, dan penyerap yang
Salah satu metode pemisahan
mengandung senyawa pita dikerok dari
yang memerlukan biaya paling murah dan
pelat kaca. Kemudian cuplikan dielusi dari
memakai peralatan sangat sederhana ialah
penyerap dengan pelarut polar. Cara ini
kromatografi lapis tipis preparatif
berguna untuk memisahkan campuran
(KLTP). Walaupun KLTP dapat
reaksi sehingga diperoleh senyawa murni
memisahkan dalam jumlah gram,sebagian
untuk telaah pendahuluan, untuk
besar pemakaian hanya dalam jumlah
menyiapkan cuplikan analisis, untuk
miligram. KLT preparatif dilakukan
meneliti bahan alam yang lazimnya
dengan menggunakan lapisan tebal
berjumlah kecil dan campurannya rumit
(sampai 1 mm) sebagai pengganti lapisan
dan untuk memperoleh cuplikan yang
penyerap yang tipis (Nasution, 2010).
murni untuk mengkalibrasi kromatografi
Kromatografi Lapis Tipis
lapis tipis kuantitatif (Nasution, 2010).
merupakan teknik pemisahan cara lama
Proses isolasi kromatografi lapis
yang digunakan secara luas, terutama
tipis preparatif terjadi berdasarkan
dalam analisis campuran yang rumit dari
perbedaan daya serap dan daya partisi
sumber alam. Tetapi dalam kuantisasi
serta kelarutan dari komponen-komponen
belakangan ini kromatografi lapis tipis
kimia yang akan bergerak mengikuti
digantikan oleh “HPLC” (High
kepolaran eluen, oleh karena daya serap
Performance Thin-layerChromatography)
adsorben terhadap komponen kimia tidak
atau Kromatografi Lapis Tipis Kinerja
sama, maka komponen bergerak dengan
Tinggi (Munson, 2010).
kecepatan yang berbeda sehingga hal
Meski banyak terdapat metode
inilah yang menyebabkan pemisahan
seperti yang telah disebutkan di atas,
(Nasution, 2010).
terdapat metode lain yang pembiayaannya
Adsorben yang paling banyak
paling murah dan memakai peralatan
digunakan dalam kromatografi lapis tipis
paling dasar yaitu Kromatografi Lapis
adalah silika gel dan aluminium oksida.
Tipis Preparatif (KLTP). adsorben yang
Silika gel umumnya mengandung zat
paling banyak digunakan yaitu silika gel

11 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

 tambahan Kalsium sulfat untuk
mempertinggi daya lekatnya. Zat ini
digunakan sebagai adsorben universal
untuk kromatografi senyawa netral, asam
dan basa. Aluminum iksida mempunyai
kemampuan koordinasi dan oleh karena
itu sesuai untuk pemisahan senyawa yang
mengandung gugus fungsi yang berbeda.
Aluminium okida mengandung ion alkali
dan dengan demikianbereaksi sebagai
basa dalam suspensi air. Disamping kedua
adsorben yang sangat aktif ini dalam hal
tertentu dapat digunakan “kieselgur” yang
kurang aktif sebagai lapis sorpsi (Munson,
2010).
Pengembangan plat KLTP
biasanya dilakukan dalam bejana kaca
yang dapat menampung beberapa plat.
Keefisienan pemisahan dapat ditingkatkan
dengan cara pengembangan berulang.
Harus diperhatikan bahwa semakin lama
senyawa berkontak dengan penyerap
maka semakin besar kemungkinan
penguraian (Nasution, 2010).
Pemisahan komponen kimia
dengan metode kromatografi lapis tipis
prepaaratif pada dasarnya samadengan
kromatografi lapis tipis, biasa yaitu
prinsip adsorbsi dan partisi. Namun
perbedaan yang nyata adalah KLT
prefaratif menggunakan lempeng yang
besar (20 x 20 cm) , dan sampai ditotolkan
berupa garis pada salah satu sisi lempeng
(Penuntun, 2015).
Lempeng yang sudah ditotolkan
dikembangkan pada chamber yang jenuh
dengan cairan pengembangan yang cocok
secara tegak lurus sehingga komponen
kimia akan terpisah membentuk pita-pita
berupa garis Horizontal yang tampak
dibawah sinar UV. Pita-pita yang
terbentuk ditandai dengan pensil,
kemudian di keruk dan di tampung
sebagai fraksi-fraksi (Penuntun, 2015).
E. Uraian Kromatografi Kolom (KK)
12 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12
Kromatografi kolom adalah
kromatografi yang menggunakan kolom
sebagai alat untuk memisahkan
komponen-komponen dalam campuran.
Alat tersebut berupa pipa gelas yang
dilengkapi suatu kran dibagian bawah
kolom untuk mengendalikan aliran zat
cair. Ukuran kolom tergantung dari
banyaknya zat yang akan dipindahkan.
Secara umum perbandingan panjang dan
diameter kolom sekitar 8 : 1, sedangkan
jumlah penyerapannya adalah 25-30 kali
berat bahan yang dipisahkan. Meskipun
tersedia sebagai macam kolom dari bahan
gelas, namun kadang-kadang buret juga
dapat digunakan (Yazid Estien, 2005).
Untuk menahan penyerapan
(adsorben) di dalam kolom dapat
digunakan gelas wool atau kapas.
Adsorbennya dapat digunakan adsorben
anorganik seperti alumina, bauksit,
magnesium silikat, silika gel dan tanah
diatomae. Sedangkan adsorben organik
seperti arang gula, karbon aktif paling
sering digunakan (Yazid Estien, 2005).
1. Prinsip Kromatografi Kolom Adsorpsi
Pemisahan kromatografi kolom
adsorpsi didasarkan pada adsorpsi
komponen-komponen campuran dengan
afinitas berbeda-beda terhadap permukaan
fase diam (Yazid Estien, 2005).
Kromatografi kolom adsorpsi
termasuk pada cara pemisahan cair padat.
Substrat padat (adsorben) bertindak
sebagai fase diam yang sifatnya tidak larut
dalam fasa cair. Fase bergeraknya adalah
cairan (pelarut) yang mengalir membawa
komponen campuran sepanjang kolom.
Pemisahan tergantung pada
kesetimbangan yang terbentuk pada
bidang antar muka diantara butiran-
butiran adsorben dan fase bergerak serta
kelarutan relatif komponen pada fase
bergeraknya. Antara molekul-molekul
komponen dan pelarut terjadi kompetisi
untuk teradsorpsi pada permukaan
 adsorben sehingga menimbulkan proses
dinamis. Keduanya secara bergantian
tertahan beberapa saat dipermukaan
adsorben dan masuk kembali pada fase
bergerak (Yazid Estien, 2005).
Pada saat teradsorpsi komponen
dipaksa untuk berpindah oleh aliran fase
bergerak yang ditambahkan secara
kontinyu. Akibatnya hanya komponen
yang mempunyai afinitas lebih besar
terhadap adsorben akan secara selektif
tertahan. Komponen dengan afinitas
paling kecil akan bergerak lebih cepat
mengikuti aliran pelarut (Yazid Estien,
2005).
2. Teknik Pemisahan Kromatografi
Kolom
Untuk memisahkan campuran,
kolom yang telah dipilih sesuai ukuran
diisi dengan bahan penyerap (adsorben) Gambar 5. Seperangkat Alat Kromatografi
Kolom
seperti alumina dalam keadaan kering atau
F. Uraian Spekrofotometri
dibuat seperti bubur dengan pelarut.
Spektrofotometri UV/visibel
Pengisian dilakukan dengan bantuan
adalah metode standar untuk menentukan
batang pemanpat (pengaduk) untuk
sifat fisikokimia molekul obat sebelum
memanpatkan adsorben dan gelas wool
formulasi dan untuk mengukur
pada dasar kolom. Pengisian harus
pelepasannya dari formulasi (Watson
dilakukan secara hati-hati dan sepadat
David G., 2010).
mungkin agar rata sehingga terhindar dari
Skala panjang gelombang suatu
gelembung-gelembung udara. Untuk
Spektrofotometri UV/visibel diperiksa
membantu homogenitas pengepakan
dengan penentuan panjang gelombang
biasanya kolom setelah disi divibrasi,
maksimum tertentu larutan holmium
diketok-ketok atau dijatuhkan lemah pada
perkolat 5% b/v. Skala panjang
pelat kayu (Yazid Estien, 2005).
gelombang juga dapat di kalibrasi sesuai
dengan garis-garis spektrum deuterium
ataau lampu pelepasan merkuri dan uji-uji
tersebut dapat dilaakukan dalam beberapa
instrumen (Watson David G., 2010).
Penggunaan Spektrofotometri
UV/visibel untuk menentukan nilai pKa.
Ketika terjadi pergeseran UV yang
tergantung Ph, pergeseran tersebut dapat
digunakan untuk menentukan pKa gugus
dapat terionisasi yang menyebabkan
pergeseran. Pada fenilefrin, nilai pKa
gugus fenolik dapat mudah ditentukan

13 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

 dari absorbans pada 292 nm,, karena
absorbans spesies molekul yang gugus
fenoliknya tidak terionisasi diabaikan
pada panjang gelombang ini. Ini tidak
berlaku untuk semua molekul (Watson
David G., 2010).
Metode farmakope dapat
mengandalkan analisis sederhana dengan
Spektrofotometri UV/visibel untuk
menentukan bahan aktif dalam formulasi.
Metode-metode ini biasanya berdasarkan
pada penggunanan nialai A (1%, 1cm)
stndar untuk bahan aktif yang sedang diuji
dan ini mengandalkan Spektrofotometer
UV yang dikalibrasi secaraa akurat
(Watson David G., 2010).
Komponen-komponen pokok dari
spektrofotometer meliputi :
( Sastrohamidjojo, H, 1985)
1. Sumber tenaga radiasi yang stabil
2. Sistem yang terdiri atas lensa-lensa,
cermin, cela-cela, dll.
3. Monokromator untuk mengubah radiasi
menjadi komponen-komponen panjang
gelombag tunggal
4. Tempat cuplikan yang transparan
5. Detektor radiasi yang dihubungkan
dengan sistem meter atau
6. pencatat.
Diagram sederhana dari
spektrofotometer adalah sebagai berikut :
Uraian bagaian spektrofotometer Uv-Vis
( Sastrohamidjojo, H, 1985).
1. Sumber radiasi.
Sumber-sumber radiasi
ultraviolet yang kebanyakan
digunakan adalah lampu hidrogen dan
lampu deuterium. Sumber radiasi
cahaya tampak yang paling umum
14 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12
dipakai adalah lampu pijar tungsten.
Lampu tungsten merupakan
campuran dari filament tungstein dan
gas iodine (halogen). Sumber radiasi
ini dapat memancarkan radiasi
kontinyu antara 380-780 nm.
2. Monokromator.
Monokromator merupakan
serangkaian alat optic yang
menguraikan radiasi polikromatik
menjadi jalur-jalur yang
efektif/panjang gelombang-
gelombang tunggalnya dan
memisahkan panjang gelombang-
gelombang tersebut menjadi jalur-
jalur yang sengat sempit.
3. Tempet cuplikan
Cuplikan yang dipakai pada
dearah ultraviolet atau terlihat yang
biasanya berupa gas atau larutan
ditempatkan dalam sel atau cuvet.
Untuk daerah ultraviolet biasanya
digunakan Quartz atau sel dari silika
yang dilebur, sedangkan untuk daerah
terlihat digunakan gelas biasa atau
quartz. Sel yang digunakan untuk
cuplikan yang berupa gas mempunyai
panjang lintasan dari 0,1 hingga 100
nm, sedangkan sel untuk larutan
mempunyai panjang lintasan tertentu
dari 1 hingga 10cm.
4. Detektor atau pencatat.
Setiap detector menyerap
tenaga foton yang mengenainya dan
mengubah tenaga tersebut untuk
dapat diukur secara kualitatif seperti
sebagai arus listrik atau perubahan-
perubahan panas. Kebanyakan
detector menghasilkan sinyal listrik
yang dapat mengaktifkan meteran
atau pencatat . setiap pencatat harus
menghasilkan yang secara kualitatif
berkaitan dengan tanaga cahaya yang
mengenainya.
BAB III
METODE PRAKTIKUM

A. Jenis dan Desain Percobaan
Jenis percobaan ini dilakukan secara
eksperimental yang dilakukan
dilaboratorium Fitokimia Fakultas
Farmasi Universitas Indonesia Timur
Makassar dengan desain penelitian yaitu
sampel Tanaman alpukat (Persea
americana Mill), rimpang kencur
(Kaempferia galanga L.), kulit batang
kakao/coklat (Theobroma cacao, L.), dan
daun sukun (Artocarpus altilis) yang
dibuat ekstrak dengan metode ekstraksi
yang sesuai kemudian dilakukan
pemisahan senyawa kimia dengan tehnik
isolasi secara spektrofotometri UV-
Visibel dan Kromatografi Lapis Tipis
(KLT).
B. Waktu dan Tempat Praktikum
Proses ekstraksi, isolasi dan
identifikasi komponen kimia pada
Tanaman alpukat (Persea americana
Mill), rimpang kencur (Kaempferia
galanga L.), kulit batang kakao/coklat
(Theobroma cacao, L.), dan daun sukun
(Artocarpus altilis) dilakukan di
Laboratorium Fitokimia Farmasi Fakultas
Farmasi Universitas Indonesia Timur
Makassar. Praktikum dimulai pada Juni
2015 hingga Agustus 2015, lamanya
praktikum yaitu kurang lebih dua bulan.
C. Alat dan Bahan
1. Alat
Adapun alat-alat yang digunakan dalam
percobaan ini yaitu : Aluminium foil,
batang pengaduk, botol selai kaca,
botol semprot, botol sirup, botol
markisa, buku gambar, chamber,
corong, corong pisah, erlenmeyer,
ember, gabus, gegep besi, gelas kimia,
gelas ukur, gunting, jergen, katter,
keranjang, kertas karkil, kertas karton,
kertas saring, label, lakban, lem foks,
lampu UV 366 ƞm, mesin air, mistar,
objek glass, oven, penotol, pensil,
pensil warna, pipet tetes, pulpen,
15 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12
rotavapor, sandal jepit, selang, selang
infus, spidol, statif, talan, toples kaca,
vial, water bath.
2. Bahan
Adapun bahan-bahan yang digunakan
yaitu : Aquadest, asam sulfat, benzen,
etanol, eter, etil asetat, heksam,
kloroform, methanol, n-butanol, silica
gel, sampel Tanaman alpukat (Persea
americana Mill), rimpang kencur
(Kaempferia galanga L.), kulit batang
kakao/coklat (Theobroma cacao, L.),
dan daun sukun (Artocarpus altilis)
tissue.
D. Tekhnik Pengambilan dan Pengolahan
Sampel
1. Pengambilan Sampel
Bagian tanaman yang digunakan
adalah Tanaman alpukat (Persea
americana Mill) yang berasal dari kel.
pallantikan dan Rimpang kencur
(Kaempferia galanga L.) yang berasal
dari desa Poso kec. Kwandang kab.
Gorontalo dan kulit batang
kakao/coklat (Theobroma cacao, L.),
yang berasal dari kec. kwabdang kab.
Gorontalo dan daun sukun
(Artocarpus altilis) yang berasal dari
Gorontalo Provinsi Gorontalo. Sampel
yang diambil pada pukul 07.00-.10.00
WITA.
2. Pengolahan Sampel
a. Disiapkan alat dan bahan
b. Diambil sampel Tanaman alpukat
(Persea americana Mill), rimpang
kencur (Kaempferia galanga L.),
kulit batang kakao/coklat
(Theobroma cacao, L.), dan daun
sukun (Artocarpus altilis) Dicuci
kulit batang pohon kayu dengan
menggunakan air mengalir
c. Diangin-anginkan tanpa terkena
matahari langsung sampai kering
d. Setelah kering dimasukkan ke dalam
wadah dan ditutup dengan baik.
E. Metode kerja praktikum
1. Penyiapan Alat
Alat-alat yang diperlukan
antara lain percolator (botol markisa),
aluminium foil, batang pengaduk,
gabus, perekat (lilin), kapas, elang
infus, botol 600 ml dan botol-botol
vial.
2. Penyiapan Bahan
Bahan-bahan yang diperlukan
antara lain sampel Tanaman alpukat
(Persea americana Mill), rimpang
kencur (Kaempferia galanga L.), kulit
batang kakao/coklat (Theobroma
cacao, L.), dan daun sukun
(Artocarpus altilis), cairan penyari
metanol.
3. Ekstraksi Sampel dengan
Menggunakan Metode Perkolasi
Perkolator dicuci sampai
bersih, dikeringkan kemudian dibilas
denganmetanol (sekaligus menguji
kebocoran) dan dipasang dengan kuat
pada statif. Simplisia yang telah
diserbuk ditimbang kemudian dibasahi
dengan pelarut yang akan digunakan
misalnya metanol dalam gelas kimia
dan dibiarkan mengembang selama 3
jam. Setelah itu massa dipindahkan
kedalam perkolator dan diratakan
dengan batang pengaduk, kemudian
diberi kertas saring atau kapas pada
bagian atas massa (simplisia) lalu
ditambahkan cairan penyari
(sebaiknya digunakan reservoir cairan
penyari). Setelah perkolator sudah
penuh dengan cairan penyari makan
kran perkolator dibuka dengan tetesan
perkolatornya diatur dengan kecepata
1 ml per menit. Perkolat yang keluar
ditampung dalam wadah penampung,
sementara cairan penyari ditambahkan
pada bagian atas perkolator secara
kotinu. Perkolat dikumpulkan dan
dituangkan semalam. Filtrat dan
endapan diuapkan hingga kering dan
16 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12
diidentifikasi komponen kimianya
secara Kromotografi Lapis Tipis
(KLT).
4. Penguapan Ekstrak
a. Menggunakan Rotavapor
Sampel atau ekstrak cair yang
akan diuapkan dimasukkan ke
dalam labu alas bulat dengan
volume 2/3 bagian dari volume
labu alas bulat yang digunakan
kemudian water bath dipanaskan
sesuai dengan suhu pelarut dari
sampel dengan menekan tombol
off/on water bath.
Setalah suhu tercapai ditandai
dengan padamnya lampu
pengontrol suhu, labu alas bulat
yang telah diisi ekstrak dipasang
dengan kuat pada ujung rotor yang
berhubungan dengan kondensor.
Aliran air pendingin dan pompa
vacum dijalankan kemudian
tombol rator diputar pada angka 5
– 8 putaran per menit. Bila ekstrak
dalam labu alas bulat sudah
menguap atau berkurang ditandai
dengan terbentuknya gelembung-
gelembung pada permukaan
ekstrak dalam labu alas bulat.
b. Penguapan dengan Water Bath
Ekstrak methanol yang
diperoleh dimasukkan ke dalam
botol selai kaca kemudian
diuapkan hingga kering.
5. Ekstraksi dengan Pelarut Dietil Eter
a. Disiapkan alat dan bahan
b. Diambil ekstrak methanol kering,
lalu ditambahkan 50 ml equadest.
c. Dimasukkan ke dalam corong
pisah dan ditambahkan 3 x 50 ml
dietil eter
d. Ditutup corong pisah, lalu dibalik
kemudian dikocok pada satu arah
beberapa kali.
 e. Setelah dikocok, dibuka kran
corong untuk mengeluarkan gas
dari cairan tersebut
f. Ditutup kran corong lalu corong
dibalik seperti semula dan
dibiarkan beberapa saat hingga
terjadi pemisahan lapisan air dan
eter, lalu dikeluarkan dan
ditampung dalam wadah yang
berbeda.
g. Dimasukkan lagi lapisan air
kedalam corong pisah dan
dilakukan seperti semula,
dilakukan 3 kali ekstraksi.
h. Dikumpulkan ekstraksi eter dan
diuapkan.
6. Pembuatan N-butanol Jenuh Air
a. Disiapkan alat dan bahan
b. Diukur aquadest dan n-butanol
masing-masing 300 ml sesuai
dengan perbandingan 1:1
c. Dimasukkan kedalam botol
markisa lalu dikocok hingga
terbentuk suspensi (homogen)
d. Didiamkan hingga terbentuk dua
lapisan yaitu lapisan air dan
lapisan n-butanol jenuh air
e. Lapisan bawah yaitu lapisan air
sedangkan lapisan bawah adalah
lapisan n-butanol jenuh air
f. Diambil lapisan n-butanol dan
lapisan air dibuang
7. Ekstraksi dengan N-butanol
a. Diambil lapisan air dari ekstrak
eter.
b. Dimasukkan dalam corong pisah
dan ditambahkan dengan n-butanol
sebanyak 3 x 50 ml.
c. Ditutup corong pisah, lau dibalik
kemudian dikocok pada satu arah
beberapa kali.
d. Setelah dikocok, dibuka kran
corong untuk mengeluarkan gas
dari cairan tersebut
e. Ditutup kran corong dan corong
dibalik seperti semula dan
17 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12
dibiarkan beberapa saat hingga
terjadi pemisahan lapisan air
dengan n-butanol, lalu dikeluarkan
dan ditampung dalam wadah yang
berbeda.
f. Dimasukkan lagi lapisan air dalam
corong pisah dan dilakukan seperti
semulah, dilakukan 3 kali
ekstraksi.
g. Diambil ekstraksi n-butanol lalu
diuapkan.
8. Pembuatan Fase Diam
a. Disiapkan alat dan bahan.
b. Diambil objek glas dan batang
pengadu dicuci lalu dikeringkan.
c. Dibuat bubur silica gel dengan
perbandingan air : silica gel (2 : 1)
diaduk hingga homogeny jika
kental ditambahkan langsung
sedikit air)
d. Dituang diatas objek glass dan
kaca ukuran 10 x 10 cm yang telah
diatur dan diratahkan dengan
bantuan batang pengaduk, ditarik
satu arah hingga rata.
e. Dibiarkan lempeng hingga kering,
lalu di pindahkan di baki oven dan
di aktifkan dalam oven pada suhu
100° C selama 15 menit.
f. Dikeluarkan lempeng dari oven
dan dibuatkan batas penotolan dan
batas eluen (1 cm dari bagian
bawah lempeh dan 0,5 dari bagian
atas lempeng).
9. Pembuatan Eluen/Fase Gerak
a. Disiapkan Alat dan Bahan
b. Untuk Eluen Polar
1. Kloroform : methanol : air (20
: 6 : 1) sebanyak 250 mL
a. Diambil kloroform
sebanyak 185.18 mL
dimasukkan ke dalam
botol
b. Diambil methanol
sebanyak 55.55 mL dan
dimasukkan kedalam
 botol yang berisi d. Dikocok hingga
kloroform homogen, lalu diberi
c. Diambil aquadest etiket.
sebanyak 9.25 mL lalu 4. Etil asetat : etanol : air (8 : 2 :
dimasukkan ke dalam 1) sebanyak 250 mL
botol yang berisi a. Diambil etil asetat
kloroform dan methanol sebanyak 18.18 mL
d. Dikocok hingga dimasukkan ke dalam
homogen, lalu diberi botol
etiket. b. Diambil etanol sebanyak
2. Kloroform : methanol : air (15 45.45 mL dan
: 6 : 1) sebanyak 250 mL dimasukkan kedalam
a. Diambil kloroform botol yang berisi etil
sebanyak 170.45 mL asetat
dimasukkan ke dalam c. Diambil aquadest
botol sebanyak 22.72 mL lalu
b. Diambil methanol dimasukkan ke dalam
sebanyak 68.18 mL dan botol yang berisi etil
dimasukkan kedalam asetat dan etanol
botol yang berisi d. Dikocok hingga
kloroform homogen, lalu diberi
c. Diambil aquadest etiket.
sebanyak 11.36 mL lalu 5. Etil asetat : etanol : air (7 : 2 :
dimasukkan ke dalam 1) sebanyak 250 mL
botol yang berisi a. Diambil etil asetat
kloroform dan methanol sebanyak 175 mL
d. Dikocok hingga dimasukkan ke dalam
homogen, lalu diberi botol
etiket. b. Diambil etanol sebanyak
3. Kloroform : methanol : air (10 50 mL dan dimasukkan
: 6 : 1) sebanyak 250 mL kedalam botol yang berisi
a. Diambil kloroform etil asetat
sebanyak 147.05 mL c. Diambil aquadest
dimasukkan ke dalam sebanyak 25 mL lalu
botol dimasukkan ke dalam
b. Diambil methanol botol yang berisi etil
sebanyak 88.23 mL dan asetat dan etanol
dimasukkan kedalam d. Dikocok hingga
botol yang berisi homogen, lalu diberi
kloroform etiket.
c. Diambil aquadest 6. Etil asetat : etanol : air (6 : 2 :
sebanyak 14.70 mL lalu 1) sebanyak 250 mL
dimasukkan ke dalam a. Diambil etil asetat
botol yang berisi sebanyak 166.66 mL
kloroform dan methanol dimasukkan ke dalam
botol

18 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

 b. Diambil etanol sebanyak b. Diambil etil asetat
55.55 mL dan sebanyak 90 mL lalu
dimasukkan kedalam dimasukkan ke dalam
botol yang berisi etil botol yang telah berisi
asetat benzen
c. Diambil aquadest c. Dikocok hingga
sebanyak 27.77 mL lalu homogen, lalu diberi
dimasukkan ke dalam etiket.
botol yang berisi etil 4. Benzen : etil asetat (6 : 4)
asetat dan etanol sebanyak 300 mL
d. Dikocok hingga a. Diambil benzen sebanyak
homogen, lalu diberi 180 mL dan dimasukkan
etiket. ke dalam botol
c. Untuk Eluen Non Polar b. Diambil etil asetat
1. Benzen : etil asetat (9 : 1) sebanyak 120 mL lalu
sebanyak 300 mL dimasukkan ke dalam
a. Diambil benzen sebanyak botol yang telah berisi
270 mL dan dimasukkan benzen
ke dalam botol c. Dikocok hingga
b. Diambil etil asetat homogen, lalu diberi
sebanyak 30 mL lalu etiket.
dimasukkan ke dalam 5. Heksan : etil asetat (9 : 1)
botol yang telah berisi sebanyak 250 mL
benzen a. Diambil heksan sebanyak
c. Dikocok hingga 225 mL dan dimasukkan
homogen, lalu diberi ke dalam botol
etiket. b. Diambil etil asetat
2. Benzen : etil asetat (8 : 2) sebanyak 25 mL lalu
sebanyak 300 mL dimasukkan ke dalam
a. Diambil benzen sebanyak botol yang telah berisi
240 mL dan dimasukkan heksan
ke dalam botol c. Dikocok hingga
b. Diambil etil asetat homogen, lalu diberi
sebanyak 60 mL lalu etiket.
dimasukkan ke dalam 6. Heksan : etil asetat (8 : 2)
botol yang telah berisi sebanyak 250 mL
benzene a. Diambil heksan sebanyak
c. Dikocok hingga 200 mL dan dimasukkan
homogen, lalu diberi ke dalam botol
etiket. b. Diambil etil asetat
3. Benzen : etil asetat (7 : 3) sebanyak 50 mL lalu
sebanyak 300 mL dimasukkan ke dalam
a. Diambil benzen sebanyak botol yang telah berisi
210 mL dan dimasukkan heksan
ke dalam botol

19 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

 c. Dikocok hingga chamber, didiamkan hingga
homogen, lalu diberi jenuh.
etiket. 12. Teknik Penotolan Ekstrak
7. Heksan : etil asetat (7 : 3) a. Disiapkan alat dan bahan
sebanyak 250 mL b. Dibuat garis atas 0,5 dan garis
a. Diambil heksan sebanyak bawah 0,1 pada tiap-tiap lempeng
175 mL dan dimasukkan c. Ditotolkan ekstrak pada lempeng
ke dalam botol pada batas bawah dengan
b. Diambil etil asetat menggunakan penotol pipa
sebanyak 75 mL lalu kapiler secara tegak lurus
dimasukkan ke dalam d. Dimasukkan lempeng yang telah
botol yang telah berisi ditotolkan ekstrak kedalam
heksan chamber yang telah jenuh dengan
c. Dikocok hingga posisi miring, diusahakan sampel
homogen, lalu diberi yang telah ditotol tidak terendam
etiket. dalam cairan pengelusi, lalu
8. Heksan : etil asetat (6 : 4) chamber ditutup
sebanyak 250 mL e. Dibiarkan sampel terelusi sampai
a. Diambil heksan sebanyak batas atas lempeng, lalu
150 mL dan dimasukkan dikeluarkan dalam chamber.
ke dalam botol 13. Pengamatan Bercak Noda pada Lampu
b. Diambil etil asetat UV
sebanyak 100 mL lalu a. Diambil lempeng yang telah
dimasukkan ke dalam ditutupkan ekstrak yang telah
botol yang telah berisi mencapai batas atas lempeng
heksan b. Diamati dibawah sinar lampu UV
c. Dikocok hingga 366/366 nm
homogen, lalu diberi c. Digambar noda yang
etiket. berflourensi, pada kertas karkil,
10. Pembuatan Pereaksi Semprot H2SO4 lalu diwarnai sesuai warna noda,
10% yang diamati sinar UV.
a. Disiapkan alat dan bahan 14. Pengamatan Bercak Noda pada
b. Dipipet H2SO4 pekat sebanyak Penyemprotan H2SO4
51,35 ml dimasukkan ke dalam a. Diambil lempeng yang telah
labu ukur 500 diamati dibawah sinar UV
c. Ditambahkan aquadest hingga b. Disemprotkan lempeng dengan
batas 500 ml lalu dikocok hingga larutan H2SO4 10%, lalu difiksasi
homogen diatas Bunsen dengan
11. Penjenuhan Fase Gerak/Eluen menggunakan gegep
a. Disiapkan alat dan bahan c. Digambar noda yang tampak
b. Dimasukkan masing-masing pada lempeng, pada kertas
eluen kedalam tiap-tiap chamber karkil.
c. Dimasukkan kertas saring 15. Perhitungan Nilai Rf
kedalam masing-masing chamber a. Diukur jarak noda pada lempeng
kemudian ditutup dengan tutup dan jarak eluen

20 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

 b.
Dihitung nilai Rf-nya dengan Fraksi Nilai Rf Warna Noda
A - -
menggunakan rumus :
B 0,353 Orange
Jarak noda dari titik penotolan C - -
Rf =
Jarak yang ditempuh eluen D - -

Tabel 5 : Hasil KLT 2 dimensi ektrak

BAB IV Rimpang kencur (Kamferia galanga) dengan
HASIL DAN PEMBAHASAN eluen Benzen : Etil Asetat dan penampak
noda UV 366 ηm.
Sebelum diputar 900 Sesudah diputar 900
A. Hasil Praktikum Nilai Rf Warna Noda Nilai Rf Warna Noda
Berdasarkan hasil praktikum tentang 0,353 Orange 0,471 Orange
isolasi dan identifikasi komponen kimia dari
beberapa sampel secara kromatografi lapis 2. Ekstrak Eter kulit batang kakao/coklat
tipis preparatif, kromatografi kolom dan (Theobroma cacao, L)
spektrofotometri UV-Visibel diperoleh hasil Tabel 6 : Hasil KLTP ektrak eter kulit batang
sebagai berikut : kakao/coklat (Theobroma cacao, L) dengan
1. Ekstrak Eter Rimpang kencur (Kamferia eluen Benzen : Etil Asetat (7 : 3) dan
penampak noda UV 366 ηm.
galanga). Fraksi Warna Noda
Tabel 1 : Hasil KLTP ektrak eter Rimpang A Orange
kencur (Kamferia galanga) dengan eluen B Ungu
Benzen : Etil Asetat (7 : 3) dan penampak C Biru
noda UV 366 ηm. D Hijau
Fraksi Warna Noda
A Merah Tua 3. Tabel 7 : Hasil KLT ektrak eter Tanaman
B Merah ke Orange
alpukat (Persea americana Mill) dengan
C Orange
eluen Benzen : Etil Asetat (7 : 3) dan
D Orange agak Hijau
penampak noda UV 366 ηm.
Nilai Rf Warna Noda
Tabel 2 : Hasil KLT ektrak eter Rimpang
Noda A B C D A B C D
kencur (Kamferia galanga) dengan eluen 1. 0,95 0 0 0 Ung. - - -
Benzen : Etil Asetat (7 : 3) dan penampak
noda UV 366 ηm.
N Nilai Rf Warna Noda 4. Tabel 8 : Hasil KLT ektrak Tanaman
o A B C D A B C D alpukat (Persea americana Mill) dengan
1 - 0,23 0,41 0,41 - Org Org Hij eluen Benzen : Etil Asetat (7 : 3) dan
2 - - 0,6 0,52 - - Org Org
penampak noda H2SO4 10 %
Nilai Rf Warna Noda
Tabel 3 : Hasil KLT ektrak eter Rimpang
Noda A B C D A B C D
kencur (Kamferia galanga) dengan eluen 1. 0 0 0 0 - - - -
Benzen : Etil Asetat (7 : 3) dan penampak
noda H2SO4 10 %
N Nilai Rf Warna Noda 5. Tabel 9 : Hasil isolasi KLT ektrak eter
o A B C D A B C D Tanaman alpukat (Persea americana Mill)
1 - 0,23 0,49 0,41 - Hij Hij Hij dengan eluen Benzen : Etil Asetat (7 : 3)
2 - - 0,6 0,52 - - Org Org
dan penampak noda UV 366 ηm.
Fraksi Nilai Rf Warna Noda
Tabel 4 : Hasil isolasi KLT ektrak eter A 0,94 Putih
Rimpang kencur (Kamferia galanga) dengan B - -
eluen Benzen : Etil Asetat (7 : 3) dan C - -
penampak noda UV 366 ηm. D - -

21 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

6. Tabel 10 : Hasil KLT 2 dimensi ektrak 12. Ekstrak n-Butanol Tanaman alpukat
eter Tanaman alpukat (Persea americana (Persea americana Mill)
Mill) dengan eluen Benzen : Etil Asetat Tabel 13 : Hasil KLTP ektrak n-butanol
dan penampak noda UV 366 ηm. Tanaman alpukat (Persea americana Mill)
Sebelum diputar 900 Sesudah diputar 900 dengan eluen Etil Asetat : Etanol : Air (8 : 2 :
Nilai Rf Warna Noda Nilai Rf Warna Noda 1) dan penampak noda UV 366 ηm.
0,94 Putih 0,87 Putih Fraksi Warna Noda
A Kuning
7. Ekstrak n-Butanol Tanaman alpukat
B Pink
(Persea americana Mill)
Tabel 11 : Hasil KLTP ektrak n-Butanol
Tabel 14 : Hasil KLT ektrak n-Butanol
daun sukun (Artocarpus altilis) dengan eluen Tanaman alpukat (Persea americana Mill)
Benzen : Etil Asetat (7 : 3) dan penampak dengan eluen Etil Asetat : Etanol : Air (8 : 2 :
noda UV 366 ηm. 1) dan penampak noda UV 366 ηm.
Fraksi Warna Noda Nilai Rf Warna Noda
A Hijau kekuningan Noda A B C D A B C D
1. 0,95 0 0 0 Kun. - - -

8. Tabel 12 : Hasil KLT ektrak n-Butanol

rimpang kencur (Kaempferia galanga L.) Tabel 15 : Hasil KLT ektrak n-Butanol
Tanaman alpukat (Persea americana Mill)
dengan eluen Benzen : Etil Asetat (7 : 3)
dengan eluen Etil Asetat : Etanol : Air (8 : 2 :
dan penampak noda UV 366 ηm. 1) dan penampak noda H2SO4 10 %
Nilai Rf Warna Noda
Nilai Rf Warna Noda
Noda A B C D A B C D
Noda A B C D A B C D
1. 0,945 0 0 0 Kun. - - -
1. 0,92 0 0 0 Kun. - - -

9. Tabel 13 : Hasil KLT ektrak n-Butanol Tabel 16 : Hasil KLT 2 dimensi ektrak n-
rimpang kencur (Kaempferia galanga L.) Butanol Tanaman alpukat (Persea americana
dengan eluen Benzen : Etil Asetat (7 : 3) Mill) dengan eluen Etil Asetat : Etanol : Air
dan penampak noda H2SO4 10 % (8 : 2 : 1) dan penampak noda UV 366 ηm.
Sebelum diputar 900 Sesudah diputar 900
Nilai Rf Warna Noda
Nilai Rf Warna Noda Nilai Rf Warna Noda
Noda A B C D A B C D
0,79 Kuning 0,69 Kuning
1. 0,854 0 0 0 Kun. - - -

10. Tabel 14 : Hasil isolasi KLT ektrak n- 13. Ekstrak Eter rimpang kencur
Butanol rimpang rimpang kencur (Kaempferia galanga L.)
(Kaempferia galanga L.) dengan eluen Tabel 17 : Hasil KLT fraksi kromatografi
kolom ektrak eter rimpang kencur
Benzen : Etil Asetat (7 : 3) dan penampak
(Kaempferia galanga L.) dengan eluen
noda UV 366 ηm. Benzen : Etil Asetat (7 : 3) dan penampak
Fraksi Nilai Rf Warna Noda
noda UV 366 ηm.
A 0,945 Kuning
Fraksi/Vial Nilai Rf Warna Noda
1 0,96 Orange
11. Tabel 15 : Hasil KLT 2 dimensi 2 0,9 Orange
ektrak n-Butanol rimpang rimpang kencur 3 0 -
4 0 -
(Kaempferia galanga L.) dengan eluen
5 0,98 Biru
Benzen : Etil Asetat dan penampak noda 6 0 -
UV 366 ηm. 7 0 -
Sebelum diputar 900 Sesudah diputar 900 8 0 -
Nilai Rf Warna Noda Nilai Rf Warna Noda 9 0 -
0,875 Kuning 0,875 Kuning 10 0 -

22 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

 11 0 - (Kaempferia galanga L.) dengan eluen
12 0 - Benzen : Etil Asetat (7 : 3) dan penampak
13 0,56 Biru noda H2SO4 10 %.
14 0 - Fraksi/Vial Nilai Rf Warna Noda
15 0 - 1 0,96 Orange
16 0,54 Kuning 2 0,9 Orange
17 0,94 Putih 3 0 -
18 0,90 Putih 4 0 -
19 0,87 Putih 5 0,98 Biru
20 0,94 Putih 6 0 -
21 0,92 Putih 7 0 -
22 0 - 8 0 -
23 0,98 Biru 9 0 -
24 0,98 Putih 10 0 -
25 0,96 Biru 11 0 -
25 0,98 Putih 12 0 -
27 0,96 Putih 13 0,56 Biru
28 0 - 14 0 -
29 0 - 15 0 -
30 0 - 16 0,76 Kuning
31 0,96 Putih 17 0,96 Kuning
32 0,96 Putih 18 0,94 Kuning
33 0,98 Putih 19 0,94 Kuning
34 0,94 Hijau 20 0,94 Kuning
35 0,98 Putih 21 0,96 Kuning
36 0,90 Kuning Kehijauan 22 0,96 Kuning
37 1 Kuning 23 0,94 Kuning
38 0,96 Kuning Kehijauan 24 0,98 Kuning
39 0,94 Kuning 25 0,98 Kuning
40 0,94 Kuning 25 0,96 Kuning
41 0,96 Kuning 27 0,94 Kuning
42 1 Kuning 28 0,96 Kuning
43 0,96 Kuning 29 0,98 Kuning
44 0,94 Kuning 30 0,94 Kuning
45 1 Kuning 31 1 Kuning
46 1 Orange 32 1 Kuning
47 1 Orange 33 1 Kuning
48 0 - 34 0,90 Kuning
49 0 - 35 0,96 Putih
50 0,89 Orange 36 1 Hijau
51 0 - 37 1 Kuning Kehijauan
52 A 0,96 Orange 38 1 Hijau
B 0,6 Kuning Coklat 39 1 Hijau Kekuningan
53 A 0,09 Orange
40 1 Kuning
B 0,73 Orange
54 A 1 Orange 41 1 Kuning
B 0,73 Orange 42 1 Kuning
55 0,64 Pink Ungu 43 1 Kuning
56 0,64 Pink Ungu 44 1 Kuning
57 0,64 Pink Ungu 45 1 Kuning
58 0 - 46 1 Kuning
59 0,73 Orange 47 0 -
60 0 - 48 1 Kuning
49 0 -
Tabel 18 : Hasil KLT fraksi kromatografi 50 0 -
kolom ektrak eter rimpang kencur 51 0 -

23 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

 52 0,96 Kuning pada lempeng begitupun dengan
53 1 Kuning
54 1 Kuning perbandingan 9 : 1.
55 0 - Untuk ekstrak n-butanol dengan
56 0 - menggunakan cairan pengelusi yang bersifat
57 0 -
polar seperti (CHCl3: etanol : air dan etil
58 0 -
59 0 - asetat : etanol : air ). Penampakan noda UV
60 0 - 366 nm diperoleh pada pengelusi CHCl3 :
etanol : air perbandingan 10 : 6 : 1 memiliki
B. Pembahasan nilai Rf yang tinggi yaitu 0,90 dengan warna
Ekstraksi atau penyarian adalah suatu kuning, setelah penyemprotan H2SO4 10 %
cara yang dilakukan untuk mengeluarkan perbandingan 10 :6 : 1 memiliki nilai Rf
atau menarik zat aktif yang terdapat didalam yang tinggi yaitu 0,854 dengan warna
sel bahan alam dengan menggunakan metode kuning. Sedangkan pada penampakan noda
ekstraksi dan pelarut pengekstraksi yang UV 366 nm diperoleh pada pengelusi etil
sesuai. Bahan alam dapat berupa tumbuh- asetat : etanol : air perbandingan 8 : 2: 1
tumbuhan, hewan, mineral, dan biota laut memiliki nilai Rf yang tinggi yaitu 0,9
merupakan sumber bahan baku obat dengan warna kuning, setelah penyemprotan
khususnya obat tradisional salah satu H2SO4 10 % perbandingan 8: 2 : 1 memiliki
contohnya adalah rimpang kencur nilai Rf yang tinggi yaitu 0,927 dengan
(Kaempferia galanga L.) warna merah jambu
rimpang kencur (Kaempferia galanga Untuk ekstrak metanol digunakan eluen
L.) yang telah diserbukkan, diekstraksi secara kloroform : metanol : air, etil asetat : etanol :
perkolasi dengan pelarut methanol, karena air, hexan : etil asetat dan benzen : etil asetat.
metanol merupakan pelarut yang dapat Untuk pengelusi kloroform : metanol : air
melarutkan senyawa polar maupun senyawa perbandingan 20 : 6 : 1 memiliki nilai Rf
non polar. Ekstrak yang dihasilkan kemudian yang tinggi yaitu 0,964 dengan warna
diidentifikasi dengan metode kromatografi cokelat, setelah penyemprotan H2SO4 10 %
lapis tipis (KLT). perbandingan 20 : 6 : 1 memiliki nilai Rf
Ekstrak eter yang dielusi menggunakan yang tinggi yaitu 0,964 dengan warna
cairan pengelusi yang bersifat non polar cokelat.
seperti (benzen : etil asetat dan heksan : etil Untuk eluen polar etil asetat : etanol :
asetat). Penampakan noda UV 366 nm air pada perbandingan10 : 2 : 1 memiliki
diperoleh pada pengelusi n-heksan: etil asetat nilai Rf yang tinggi yaitu 0,854 dengan
yang memiliki nilai paling tinggi Rf adalah warna kuning, sedangkan setelah
pada perbandingan 8 : 2 yaitu 0,09 dengan penyemprotan H2SO4 10 % perbandingan 6 :
warna abu-abu. Namun setelah 2 : 1 memiliki nilai Rf yang tinggi yaitu
penyemprotan dengan H2SO4 10% 0,763dengan warna ungu.
perbandingan 7 : 2 memiliki nilai Rf yang Untuk ekstrak metanol digunakan eluen
paling tinggi yaitu 0,963 dengan warna non polar heksan : etil asetat, benzen : etil
kuning. Sedangkan pada benzen : etil asetat asetat. Pada semua perbandingan tidak
dengan penampakan noda UV 366nm memiliki penampakan noda sehingga tidak
perbandingan 6 : 4 memiliki nilai Rf yang memiliki nilai Rf. Begitu pula setelah
paling tinggi yaitu 0.963 dengan warna penyemprotan H2SO4 10 % tidak memiliki
orange, setelah penyemprotan H2SO4 10 % penampakan noda sehingga tidak memiliki
perbandingan 6 : 4 tidak memiliki nilai Rf nilai Rf pula. Hal ini menujukkan bahwa
karena tidak memiliki penampakan noda sampel bunga rimpang kencur (Kaempferia

24 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

galanga L.) tidak memiliki atau hanya
memiliki sedikit senyawa kandungan kimia
yang yang larut pada senyawa non polar.
Sedangkan pada senyawa polar memiliki
banyak penampakan noda dimana
menunjukkan banyak senyawa kandungan
kimia yang larut.
Pada UV 366 nm, lempeng akan
berflouresensi sedangkan sampel akan
tampak berwarna gelap. Penampakan noda
pada lampu UV 366 nm adalah karena
adanya daya interaksi antara sinar UV
dengan indikator fluoresensi yang terdapat
pada lempeng. Fluoresensi cahaya yang
tampak merupakan emisi cahaya yang
dipancarkan oleh komponen tersebut ketika
elektron yang tereksitasi dari tingkat energi
dasar ke tingkat energi yang lebih tinggi
kemudian kembali ke keadaan semula sambil
melepaskan energi.
Adapun kesalahan-kesalahan pada
saat praktikum :
1. Proses ekstraksi yang kurang sempurna
2. Pembuatan lempeng yang tidak rata
3. Penotolan yang kurang baik
4. Penguapan ekstrak yang kurang
sempurna.
BAB V
PENUTUP
A. Kesimpulan
Berdasarkan percobaan yang telah
dilakukan maka dapat disimpulkan bahwa:
1. Komponen kimia dari ekstrak rimpang
kencur (Kaempferia galanga L.) dengan
menggunakan metode perkolasi dan
Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dapat
diketahui bahwa memiliki komponen
kimia yang lebih banyak larut dalam
senyawa polar ditandai dengan
banyaknya penampakan noda pada
lempeng dari semua perbandingan
pengelusi polar. Sedangkan komponen
kimia rimpang kencur (Kaempferia
25 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12
galanga L.) yang larut dalam non polar
sedikit
2. Jumlah noda yang didapatkan dari
ekstrak methanol adalah 27 noda
3. Jumlah noda yang didapatkan pada
ekstrak eter adalah 6 noda
4. Jumlah noda yang didapatkan pada
ekstrak n butanol adalah 18 noda
5. Nilai Rf yang didapat berbeda-beda
setiap perbandingan sesuai cairan
pengelusi yang digunakan.
B. Saran
Disaran agar dilakukan penarikan
senyawa kimia tunggal dengan metode yang
sesuai agar diperoleh senyawa kimia yang
dapat dikaji sebagai bahan pengetahuan baru
yang lebih bermanfaat bagi masyarakat.
DAFTAR PUSTAKA
Anonim. 2014. “Tanaman Obat Indonesia”
http ://www. iptek.net.id/ind/pd_
tanobat/view.php?mnu=2&id=36.
Diakses tanggal 10 Desember 2014
Anonim. 2014 . “ Tumbuhan “. http ://www.
Wikipedia.com/Tumbuhan. Diakses
tanggal 10 Desember 2014
Anonim. 2014. “Ekstraksi dan ekstrak” .http
:// wailineal.blogspot. com201205
ekstraksi-dan-ekstrak.html . Diakses
tanggal 10 Desember 2014
Anonim. 2014. “ Kandungan kimia pada
rimpang” http: //www. blogbiol
oginew. blogspot.com/feed/ posts/
default?alt-rss
Anonim. 2014. “Farmasiklopedia”. http://
farmasiklopedia.blogs pot.com /fa
vicon.ico. Diakses tanggal 10
Desember 2014
Anonim.2014. “metode Ekstraksi bahan
alam”http://imgv2-4.scribdassets
.com/ img/ worddocument /947
90764/164x212/084902a8f1/134199
4945. Diakses tanggal 10 Desember
2014

Astawan Made. 2006. “ Khasiat warna-warni

makanan”. PT. Gramedia pustaka
utama ; Jakarta

Mulyono.HAM.2008. ”Membuat reagen

kimia dilaboratorium”. Bumi aksara
;Jakarta

Thomas A.N.S. 1992 . “Tanaman Obat

Tradisional 2”. Kanisius
Yogyakarta ; Yogyakarta

Syamsuni. 2006. “Ilmu Resep”. Penerbit

buku kedokteran (EGC); Jakarta

26 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

 LAMPIRAN

Simplisia Tanaman alpukat (Persea americana Mill), rimpang

kencur (Kaempferia galanga L.), kulit batang kakao/coklat
(Theobroma cacao, L.), dan daun sukun (Artocarpus altilis)

Ditimbang 500 g
Diektraksi secara perkolasi

Ekstrak methanol cair

Diuapkan dengan alat rotavafor, diperoleh ekstrak

pekat, dilanjutkan penguapan di atas waterbacthc
sampai diperoleh ekstrak kering.

Ekstrak methanol Kering Di KLT

Digambar
Hitung nilai Rf

Ekstraksi cair-cair

Tambahkan H2O sebanyak 50 ml

Tambahkan eter 50 ml (3x50 ml)

Fase Air Fase Eter

Tambahkan N-butanol diuapkan

Di KLT
sebanyak 50 ml (3x50 ml)
Ekstrak Eter kering Digambar
Hitung nilai Rf
Fase n-butanol

diuapkan
Di KLT KLTP ISOLASI Lempeng 20 x 20 cm
Ekstrak n-butanol kering Digambar
Hitung nilai Rf
ISOLAT (Fraksi)

Lempeng 7 x 3 cm KLT (Proses Pemurniian)

Senyawa Tunggal (Murni)

Lempeng 10 x 10 cm KLT 2 Dimensi (Penegasan Senyawa Tunggal

Spektrofotometri UV-Visibel

Gambar 2. Ekstraksi dan identifikasi komponen kimia Rimpang kencur (Kaempferia

galanga L.) yang berasal dari Desa Poso kec. Kwandang kab. Gorontalo prov.
Gorontalo secara kromatografi lapis tipis

27 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

Lampiran II : Perhitungan Nilai Rf 0,4
a) Noda Ungu, Rf = 5,5 =
A. Ekstrak Eter
0,072
1. Eluen N-Heksan : Etil asetat
2) Untuk 20 : 6 : 1
a. Penampak noda UV 366 ƞm 1,5
1) Untuk perbandingan 7 : 2 a) Noda Hijau, Rf = 5,5 =
0,2 0,272
a) Noda Coklat, Rf = 5,5 =
0,2
0,036 b) Noda Coklat, Rf = 5,5 =
2) Untuk perbandingan 8 : 2 0,036
0,5 b. Penampak noda H2SO4 10%
a) Noda Abu-abu, Rf = 5,5 =
1) Untuk 10 : 6 : 1
0,09 4,7
b. Penampak noda H2SO4 10% a) Noda Kuning, Rf = 5,5 =
1) Untuk perbandingan 7 : 2 0,854
5,3 1,5
a) Noda Kuning, Rf = 5,5 = b) Noda Ungu, Rf = 5,5 =
0,963 0,273
0,5
2) Untuk perbandingan 8 : 2 c) Noda Coklat, Rf = 5,5 =
0,7
a) Noda Coklat, Rf = 5,5 = 0,091
0,127 2) Untuk 20 : 6 : 1
0,2
2. Eluen Benzen : Etil asetat a) Noda Coklat, Rf = 5,5 =
a. Penampak noda UV 366 ƞm
0,036
1) Untuk perbandingan 9 : 1
− 2. Eluen Etil asetat : Etanol : Air
a) Tidak Ada Noda , Rf = 5,5
a. Penampak noda UV 366 ƞm
=- 1) Untuk 6 : 2 : 1
5
a) Noda Coklat, Rf = 5,5 =
2) Untuk perbandingan 6 : 4
5,3 0,9
a) Noda Orange, Rf = 5,5 = 4,4
b) Noda Coklat, Rf = 5,5 =
0,963
0,3 0,8
b) Noda Coklat, Rf = 5,5 =
2) Untuk 8 : 2 : 1
0,054 5
a) Noda Kuning , Rf = 5,5 =
b. Penampak noda H2SO4 10%
0,9
1) Untuk perbandingan 9 : 1
− 4,5
a) Tidak Ada Noda , Rf = b) Noda Coklat, Rf = 5,5 =
5,5
=- 0,81
4
2) Untuk perbandingan 6 : 4 c) Noda Ungu, Rf = 5,5 =
−
a) Tidak Ada Noda , Rf = 5,5 0,72
=- b. Penampak noda H2SO4 10%
B. Ekstrak N-Butanol 1) Untuk 6 : 2 : 1
5
1. Eluen Kloroform : Etanol : Air a) Noda Coklat, Rf = 5,5 =
a. Penampak noda UV 366 ƞm
0,9
1) Untuk 10 : 6 : 1 4,5
5 b) Noda Coklat, Rf = 5,5 =
a) Noda Kuning, Rf = 5,5 =
0,81
0,90

28 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

 4 4,5
c) Noda Orange, Rf = 5,5 = a) Noda Coklat, Rf = 5,5 =
0,,72 0,81
3) Untuk 8 : 2 : 1 4,2
b) Noda Kuning , Rf = 5,5 =
a) Noda Merah Jambu , Rf =
5,1
0,763
= 0,927 0,8
5,5 c) Noda Coklat, Rf = 5,5 =
4,7
b) Noda Kuning, Rf = 5,5 = 0,145
0,854 3) Untuk 10 : 2 : 1
C. Ekstrak Metanol 4,7
a) Noda Kuning , Rf = 5,5 =
1. Eluen Kloroform : Metanol : Air
0,854
a. Penampak noda UV 366 ƞm 4,5
1) Untuk 10 : 6 : 1 b) Noda Kuning, Rf = 5,5 =
1 0,81
a) Noda Hijau, Rf = 5,5 =
0,7
0,181 c) Noda Coklat, Rf = 5,5 =
0,7 0,127
b) Noda hijau, Rf = 5,5 =
0,127
2) Untuk 20 : 6 : 1
5,3 b. Penampak noda H2SO4 10%
a) Noda Coklat, Rf = 5,5 = 1) Untuk 6 : 2 : 1
0,964 4,2
a) Noda Ungu Rf = 5,5 =
b. Penampak noda H2SO4 10%
0,763
1) Untuk 10 : 6 : 1 3,7
2 b) Noda Ungu, Rf = 5,5 =
a) Noda Kuning, Rf = 5,5 =
0,672
0,36 1
0,7 c) Noda Ungu, Rf = 5,5 =
b) Noda Coklat, Rf = 5,5 =
0,181
0,127 0,6
2) Untuk 20 : 6 : 1 d) Noda Coklat , Rf = 5,5 =
5,3 0,109
a) Noda Coklat, Rf = 5,5 =
2) Untuk 8 : 2 : 1
0,964 1,7
2. Eluen Etil asetat : Etanol : Air a) Noda Ungu, Rf = 5,5 =
a. Penampak noda UV 366 ƞm 0,309
1,2
1) Untuk 6 : 2 : 1 b) Noda Ungu, Rf = =
4,5 5,5
a) Noda Abu-abu, Rf = 5,5 = 0,218
0,8
0,81 c) Noda Ungu, Rf = 5,5 =
4
b) Noda Abu-abu, Rf = 5,5 = 0,145
0,72 3) Untuk 10 : 2 : 1
1,2 1,3
c) Noda Coklat, Rf = 5,5 = a) Noda Coklat, Rf = 5,5 =
0,218 0,236
0,8 1
d) Noda Coklat, Rf = 5,5 = b) Noda Coklat, Rf = 5,5 =
0,145 0,181
2) Untuk 8 : 2 : 1

29 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

 0,5 15 : 6 : 1
c) Noda Merah, Rf = 5,5 =
15
0,091 Untuk CHCl3 = x 250 ml =
17
3. Eluen Benzen : Etil asetat 170,45 ml
6
a. Penampak noda UV 366 ƞm Untuk Metanol = x 250 ml =
17
1) Untuk perbandingan 9 : 1 68,18 ml
−
a) Tidak Ada Noda, Rf = 5,5 1
Untuk Air = 17 x 250 ml = 11,36
=-
ml
2) Untuk perbandingan 8 : 2
− CHCl3 : Metanol : Air
a) Tidak Ada Noda, Rf = 5,5
20 : 6 : 1
=- 20
Untuk CHCl3 = 27 x 250 ml =
3) Untuk perbandingan 7 : 3
− 185,18 ml
a) Tidak Ada Noda, Rf = 5,5 6
Untuk Metanol = 27 x 250 ml =
=-
55,55 ml
4) Untuk perbandingan 6 : 4 1
− Untuk Air = x 250 ml = 6,25
a) Tidak Ada Noda, Rf = 5,5 27

=- ml
b. Penampak noda H2SO4 10% c. Etil Asetat : Etanol : Air
5) Untuk perbandingan 9 : 1 6 : 2 : 1
− 6
b) Tidak Ada Noda, Rf = 5,5 Untuk Etil Asetat = 9 x 250 ml =
=- 166,66 ml
2
6) Untuk perbandingan 8 : 2 Untuk Etanol =9 x 250 ml = 55,55
−
b) Tidak Ada Noda, Rf = 5,5 ml
1
=- Untuk Air = 9 x 250 ml = 27,77
7) Untuk perbandingan 7 : 3 ml
−
b) Tidak Ada Noda, Rf = 5,5 d. Etil Asetat : Etanol : Air
=- 7 : 2 : 1
8) Untuk perbandingan 6 : 4 7
Untuk Etil Asetat = 9 x 250 ml =
−
b) Tidak Ada Noda, Rf = 5,5 175 ml
=- 2
Untuk Etanol = 9 x 250 ml = 50
ml
Lampiran III : Perhitungan Pembuatan 1
Eluen Untuk Air = 9 x 250 ml = 25 ml
1. Eluen Polar e. Etil Asetat : Etanol : Air
a. CHCl3 : Metanol : Air 8 : 2 : 1
8
10 : 6 : 1 Untuk Etil Asetat = 11 x 250 ml =
10
Untuk CHCl3 = 17 x 250 ml = 181,81 ml
2
147,05 ml Untuk Etanol = 11 x 250 ml =
6
Untuk Metanol = x 250 ml = 45,45 ml
17
2
88,23 ml Untuk Air = 11 x 250 ml = 22,72
1
Untuk Air = 17 x 250 ml = 14,70 ml
ml 2. Eluen Non Polar
b. CHCl3 : Metanol : Air a. Hexan : Etil Asetat

30 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

 9 : 1 9 : 1
9 9
Unutuk Hexan = 10 x 250 ml = Unutuk Hexan = 10 x 250 ml =
225 ml 225 ml
1 1
Unutuk Etil Asetat = 10 x 250 ml Unutuk Etil Asetat = 10 x 250 ml
= 25ml = 25 ml
b. Hexan : Etil Asetat f. Benzen : Etil Asetat
8 : 2 8 : 2
8 8
Unutuk Hexan =10 x 250 ml = Unutuk Benzen = 10 x 250 ml =
200 ml 200 ml
2 2
Unutuk Etil Asetat = 10 x 250 ml Unutuk Etil Asetat = 10 x 250 ml
= 50 ml = 50 ml
c. Hexan : Etil Asetat g. Benzen : Etil Asetat
7 : 3 7 : 3
7 7
Unutuk Hexan = 10 x 250 ml = Unutuk Benzen = 10 x 250 ml =
175 ml 175 ml
7 3
Unutuk Etil Asetat = 10 x 250 ml Unutuk Etil Asetat = 10 x 250 ml
= 75 ml = 75 ml
d. Hexan : Etil Asetat h. Benzen : Etil Asetat
6 : 4 6 : 4
6 6
Unutuk Hexan = 10 𝑥 250 𝑚𝑙 = Untuk Benzen = 10 x 250 ml =
150 ml 150 ml
4 4
Unutuk Etil Asetat = 10 𝑥 250 𝑚𝑙 Untuk Etil Asetat = 10 x 250 ml =
= 100 ml 100 ml
e. Hexan : Etil Asetat

31 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

Lampiran IV : Gambar Penampak Noda pada Lempeng KLT

A. Ekstrak eter
1. Eluen Bensen : Etil asetat
a. Penampak noda UV 366 nm

6:4 9:1

b. Penampak noda H2SO4 10 %

6 :4 9:1

32 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

 2. Heksan : etil asetat
a. Pada penampak noda UV 366 nm

7:2 8:2

b. Penampak noda H2SO4 10 %

7:2 8:2

33 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

B. Ekstrak N-Butanol
1. Eluen Polar (Kloroform : Etanol : Eter )
a. Penampakan noda UV 366 nm

10 : 6 : 1 20 : 6 : 1

b. Penampakan noda H2SO4 10%

10 6 : 1 20 : 6 : 1

34 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

 2. Eluen Etil asetat : Etanol : Air
a. Penampakan noda UV 366 nm

6:2:1 8:2:1

b. Penampakan noda H2SO4 10%

6:2:1 8:2:1

35 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

11 Ekstrak Metanol
1. Eluen Polar (Kloroform : Etanol : Air )
a. Penampakan noda UV 366 nm

10 : 6 : 1 20 : 6 : 1

b. Penampakan noda H2SO4 10%

10 : 6 : 1 20 : 6 : 1

36 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

 2. Etil asetat : Etanol : Air
a. Penampakan noda UV 366 nm

6:2:1 8:2:1 10 : 2 : 1

b. Penampakan noda H2SO4 10 %

6 :2:1 8:2:1 10 : 2 : 1

37 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

 3. Eluen Benzen : Etil asetat
a. Penampakan noda UV 366 nm

9: 1 8:2 7:3 6:4

b. b. Penampakan noda H2SO4 10 %

9: 1 8:2 7:3 6:4

38 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

 4. Eluen Heksan : Etil asetat
a. Penampakan noda UV 366 nm

9 :1 8:2 7:3 6:4

b. Penampakan noda H2SO4 10 %

9:1 8:2 7:3 6:4

39 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

Lampiran V : Gambar Alat

Gambar 3. Alat Perkolator

Gambar 4. Alat Rotavavor

Gambar 5. Corong Pisah

40 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12

Lampiran VI : Gambar Alat KLT

Gambar 6. Alat Kromatografi Lapis Tipis

Keterangan Gambar :

1. Penutup
2. Lempeng KLT ( Ukuran 3x 7,5 cm )
3. Chember
4. Cairan Pengelusi
5. Kertas Kalkir

41 | Laboratorium Fitokimia Farmasi – Kelas L.12