RAPID SLIDE TEST Siapkan slide yang diberi 3 lingkaran Dengan mikropipet masukkan serum ke dalam masing-masing lingkaran dengan volume berturut-turut : 80 ul, 40 ul, dan 20 ul Tambahkan ke dalam masing-masing serum 1 tetes antigen (pengenceran 1:20, 1:40, dan 1:80) Campurkan dengan cara digoyang-goyangkan selama 1 menit Perhatikan aglutinasi yang terjadi. Setiap sampel yang menunjukkan aglutinasi sebaiknya dikonfirmasi dengan Tube Aglutination Test TUBE AGLUTINATION TEST Siapkan 10 tabung reaksi dan susunlah dalam 1 rak. Beri nomor 1 10 Dengan pipet masukkan 1,9 ml NaCl pada tabung 1 Dengan pipet masukkan 1 ml NaCl pada masing-masing tabung 2-10 Masukkan 0,1 ml serum pada tabung 1 dan campur hingga homogen Ambil 1 ml campuran tabung 1 dan masukkan tabung 2. Tabung 2 dicampur hingga homogen, dan ambil 1 ml untuk dimasukkan tabung 3 , dan seterusnya hingga tabung 9 Ambil 1 ml larutan pada tabung 9 dan dibuang Tambahkan setiap tabung 1 tetes antigen. Dengan demikian didapatkan pengenceran pada tabung 1 9 berturut-turut : 1/20, 1/40, 1/80, 1/160, 1/320, 1/640, 1/1280, 1/2560. Tabung 10 hanya berisi NaCl dan antigen, serta berfungsi sebagai kontrol Campur larutan hingga homogen dan inkubasikan sebagai berikut : - Titrasi O : 50o C selama 4 jam - Titrasi H : 50o C selama 2 jam Pada kontrol antigen harus tidak terdapat aglutinasi Hasil : Adanya aglutinasi menunjukkan adanya antibodi INPRESTASI HASIL Titer O yang tinggi (> : 160) atau kenaikan titer menunjukkan infeksi aktif Titer H yang tinggi (> : 160) menunjukkan peran divaksinasi/pernah terinfeksi TUGAS PRAKTIKAN : Melakukan pemeriksaan Widal dengan metode Rapid Slide Test dan Tube Aglutination Test Mengamati contoh hasil pemeriksaan Widal dan menginterprestasikan
ASTO
Pengertian Tujuan Metode Sampel Alat : adalah tata cara pemeriksaan laboratorium untuk menentukan kadar Anti streptolisin O secara kualitatif / semi kuantitatif : diagnosis, evaluasi perjalanan penyakit, evaluasi terapi : slide aglutinasi : serum : Reagen Cara Kerja : a. Mempersiapkan alat- alat yang diperlukan b. Mempersiapkan reagen yang diperlukan, sesuai prosedur yang tertera dalam pedoman insert kit c. Melakukan pemeriksaan : 1. ASTO kualitatif Meneteskan diatas slide 50 ul serum ditambah 50 ul reagen Mencampur dengan stick kemudian menggoyang pada rotator selama 2 menit Membaca aglutinasi Mengencerkan serum dengan buffer glisin dari pengenceran , , dan seterusnya Mengerjakan seperti pada pemeriksaan kualitatif : Rotator Slide dan stick/ pengaduk Clinipette 50 -200 ul, 200 1000 ul Pipet tip
Penilaian 1. Kualitatif
a. ASTO (+) : terjadi aglutinasi (kadar 200 IU /ml) b. ASTO (-) : tidak terjadi aglutinasi 2. Semi kuantitatif
Titer