Kromatografi Lapis Tipis Preparatif

KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS PREPARATIF
BAB I
PENDAHULUAN
A. LatarBelakang
Analisis fitokimia merupakan bagian dari ilmu farmakognosi yang
mempelajari metode atau cara analisis kandungan kimia yang terdapat dalam
tumbuhan atau hewan secara keseluruhan atau bagian-bagiannya, termasuk
carai solasi atau pemisahannya.
Dalam menentukan suatu senyawa murni pada suatu sampel pada fraksi
daun waru di lakukan metode isolasi dengan salah satu cara yaitu dengan
metode kromatografi lapis tipis preparatif (KLTP) dimana metode ini
merupakan metode yang sederhana dan tidak membutuhkan biaya yang
mahal untuk mendapatkan isolate murni.
Dari proses metode kromatografi lapis tipis preparative ini berdasarkan
perbedaan daya serap dan daya partisi serta kelarutan dari komponen
komponen kimia yang akan bergerak mengikuti kepolaran eluen, oleh karena
daya serap adsorben terhadap komponen kimia tidak sama, maka komponen
bergerak dengan kecepatan yang berbeda sehingga terjadi pemisahan.
Pemisahan komponen kimia dengan metode kromatografi lapis tipis
preparative pada dasarnya sama dengan kromatografi lapis tipis biasa,
namun perbedaan yang nyata ialah pada KLT preparative menggunakan
lempeng yang berukuran besar (ukuran 20 x 20 cm ) dengan ketebalan 0,5
2 mm.
SYARIFAH ZAHRA AL-MAHDALY NUR REZKY KHAIRUN NISAA S.FARM

15020140076
Untuk itu dalam praktikum kali ini dilakukan metode kromatografi lapis tipis
preparative untuk mendapatkan isolate murni dari sampel fraksi daun waru
kcv (kromatografi cair vakum) dan kkk (kromatografi kolom konvensional)
yang telah dilakukan sebelumnya.
B. MaksudPraktikum
Adapunmaksuddilakukannyapraktikuminiyaituuntukmengetahuidanmema
hamicarapemisahansenyawapadafraksisampeldenganmenggunakan KLTP
(kromatografi lapis tipis preparatif).
C. TujuanPraktikum
Adapuntujuandilakukkannyapraktikuminiyaituuntukmelakukanpemisahank
omponenkimiadenganmenggunakanmetode KLTP (kromatografi lapis tipis
preparatif).

15020140076
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
HasilPengamatan
Dari praktikumKromatografilapis tipis
preparatifdidapatkanhasilsebagaiberikut :
Eluen Fraksi Pengamatan UV 254 Jumlah
8:2 dan UV 366 pita
(N-heksan: etil asetat) KKK Orange,biru,kuning, 4
dan hijau
(N-heksan: etil asetat) KCV Biru, hijau, orange dan 4
ungu muda
Pembahasan
Kromatografiadalahteknikpemisahancampuranberdasarkanperbedaan
kecepatanperambatankomponendalam medium tertentu.Padakromatografi,
komponen-
komponennyaakandipisahkanantaraduafaseyaitufasediamdanfasegerak.
Fasediamakanmenahankomponencampuransedangkanfasegerakakanmelaru
tkanzatkomponencampuran. Komponen yang
mudahtertahanpadafasediamakantertinggal, sedangkankomponen yang
mudahlarutdalamfasegerakakanbergeraklebihcepat.

15020140076
Proses isolasikromatografi lapis tipis
preparatifterjadiberdasarkanperbedaandayaserapdandayapartisisertakelaruta
ndarikomponen-komponenkimia yang
akanbergerakmengikutikepolaraneluen,
olehkarenadayaserapadsorbenterhadapkomponenkimiatidaksama,
makakomponenbergerakdengankecepatan yang berbedasehinggahalinilah
yang menyebabkanpemisahan
Pemisahansuatusenyawadarisenyawa lain dalamsuatuekstrak,
dimanasenyawa-senyawaituakanterpartisisesuaitingkatkepolarannya,
Adapunmaksuddaripraktikuminiadalahuntukmengetahuicaradanidentifikasise
nyawaaktiifdarifraksipakuhatamenggunakankromatografi lapis tipis
preparative.
Sedangkantujuandaripraktikuminiadalahuntukmelakukanpemisahansenyawa
aktifdarifraksipakuhatamenggunakankromatografi lapis tipis preparative.
Hal yang
pertamadilakukandalampraktikuminiadalahskiriningeluenuntukmengetahuielu
endenganperbandinganberapa yang cocokdenganfraksi yang di gunakan.
Cara kerjadaripraktikuminiyaitu, Disiapkanalatdanbahan yang akan di
gunakankemudiandimasukkanlempeng yang telah ditotoldalam chamber
yang berisieluen. Diamatieluen yang naiksampaibatastanda,
kemudiandiamatipadalampu UV 254 nm dan 366 nm
Selanjutnya di lakukanskiriningfraksitujuannyauntukmemilihfraksi yang
senyawanyaaktif, hal yang pertamadilakukanadalahmemilih 5
fraksidarikcvdankkk yang berbedakelompokfraksinyaselanjutnyatiapfraksi di

15020140076
totolpadalempengkemudian di elusi di dalam chamber yang
berisieluenmenggunakan n-heksan : etilasetat. Di amatieluen yang
naiksampaibatastanda, kemudian di amatipadalampu UV 254 dan 366 nm
dikemudian disemprot dengan DPPH.
Padapraktikum KLTP digunakan 2 hasiljenisfraksiyaitufraksidarihasil
KKK dan KCV.Dimanafraksi KKKdan KCV yang
diambilitufraksiberwarnaputihkarena di putihitulahadasenyawa yang aktif di
bandingkandengansenyawa yang
berwarnakuningatauhijau.Kemudianhasildari KKK dan KCV di
totoldenganberbentukgarislurus (pita) padalempengkaca yang berukuran 20 x
20 cm (10 cm untuk KKK dan 10 cm untuk KCV) laludielusidalam chamber
yang
sesuaidenganukuranlempenghinggaeluennaiksampaibatastandahinggaterben
tu pita dandiamati di UV 254 dan 366 nm. Selanjutnya KLTP
sebagianditutupdenganalfoldan di semprot DPPH diamati di sinartampakdan
di beritandamenggunakanpensil. Pita yang telah di
tandaikemudiandikerukdan di
masukkankedalamtabungsentrifugedenganpenambahan methanol sebanyak
5 mL kemudian di sentrifugedengankecepatan 500-1000 rpm selama 10
menit. Jikasudahterbentukendapanmakaendapankemudian di
saringdanfiltratnya di tamping dalam vial yang telahmenjadiisolat.
Berdasarkanpraktikum yang dilakukandidapatkanhasildari KKK dan
KCV masingterbentuk 4 pita/noda yang dimanadarimetode KKK dan KCV
masing-masingdiambil 2

15020140076
pita/nodauntukdikerukdanselanjutnyadimasukkankedalam vial
dandilakukansentrifugeuntukmengetahuisenyawa yang
terbentukpadalempeng
BAB V
PENUTUP
A. Kesimpulan
Dari praktikum yang
dilakukanmakadapatditarikkesimpulanbahwadarifraksipadametode KKK
terbentuk 4 pita/nodadanpadametode KCV terbentuk 4
pita/nodasetelahdiamatipada UV 254 dan 366 nm dandipilih 2 darimasing-
masingmetodeuntukselanjutnyadisentrifuge.
B. Saran
Diharapkanperlengkapanalatdanbahandilakukansebelumpraktikum
agar pengerjaan yang dilakukanpadasaatpraktikumlebihcepat

15020140076
LAMPIRAN
SkemaKerja
a. Skriningeluen
Fraksidarimetode KKK
dan KCV
o Dipilihfraksidarimetode KKK dan KCV

o Ditotolkanpadalempeng KLT ukuran 7 x 1 cm
o Dielusidenganeluen n-heksan: etilasetat 8:2
dalam 5 mL
o Diamatipada UV 254 dan UV 366 nm
Terbentuknoda
b. Skriningfraksi
Fraksidarimetode KKK dan

KCV

dalam 5 mL
o Disemprotdengan DPPH
Terjadiperubahanwarnaku
ningberlatarungu
c. Kromatografi lapis tipis preparatif (KLTP)
Fraksi yang aktifdarimetode

KKK dan KCV
15020140076

dalam 5 mL
o Disemprotdengan DPPH
Terbentuk pita/noda
isolat
GAMBAR

15020140076
a. Skriningeluen
(pada UV 254 nm) (pada UV 366 nm)
b. Skriningfraksi

15020140076
(sebelumdiamatipadalampu UV)

15020140076
c. Kromatografi lapis tipis preparatif (KLTP)
1. Dari metode KKK
2. Dari metode KCV

15020140076

Kromatografi Lapis Tipis Preparatif

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Kromatografi Lapis Tipis Preparatif

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS PREPARATIF

Analisis fitokimia merupakan bagian dari ilmu farmakognosi yang

tumbuhan atau hewan secara keseluruhan atau bagian-bagiannya, termasuk

carai solasi atau pemisahannya.

metode kromatografi lapis tipis preparatif (KLTP) dimana metode ini

merupakan metode yang sederhana dan tidak membutuhkan biaya yang

mahal untuk mendapatkan isolate murni.

Dari proses metode kromatografi lapis tipis preparative ini berdasarkan

bergerak dengan kecepatan yang berbeda sehingga terjadi pemisahan.

Pemisahan komponen kimia dengan metode kromatografi lapis tipis

preparative pada dasarnya sama dengan kromatografi lapis tipis biasa,

namun perbedaan yang nyata ialah pada KLT preparative menggunakan

lempeng yang berukuran besar (ukuran 20 x 20 cm ) dengan ketebalan 0,5

SYARIFAH ZAHRA AL-MAHDALY NUR REZKY KHAIRUN NISAA S.FARM

kcv (kromatografi cair vakum) dan kkk (kromatografi kolom konvensional)

yang telah dilakukan sebelumnya.