TUGAS BAKTERIOLOGI I

MEDIA DAN STERILISASI

Dosen Pembimbing :
Leka Lutfiatina, S.KM., MS
Disusun Oleh :
Fadia (P07134216228)
Muhammad Akbar Ramadhan (P07134216237)
Melisha Monanda Regavita (P07134216240)
Rabiatul Adawiyah (P07134216256)

Politeknik Kesehatan Kementrian Kesehatan

Banjarmasin
Jurusan Analis Kesehatan Prodi DIV
Tahun 2016/2017
 MEDIA
Istilah Mengenai Media
Istilah Definisi
Medium Sebuah media yang ciri-ciri kimia dan jumlah yang tepat dari
gambaran semua bahan yang diketahui

Medium Sebuah media di mana setidaknya satu bahan yang belum

undefined diketahui ciri-ciri atau jumlahnya.
(kompleks)
Medium Sebuah media yang berisi inhibitor untuk mencegah atau
selektif memperlambat pertumbuhan organisme yang tidak diinginkan.

Medium Sebuah media yang dirumuskan sedemikian rupa perbedaan

diferensial biokimia / fisiologi antara organisme akan terdeteksi.

Tempat Media

Simpan stok media yang disiapkan pada suhu ruangan dari sinar matahari
langsung; Lemari itu ideal tapi rak terbuka cukup memuaskan. Media dalam
pembuluh yang ditutup dengan sumbat wol / tutup plastik yang disimpan untuk
penggunaan di masa depan akan dikenai penguapan pada suhu kamar; Hindari
pemborosan dengan menggunakan botol tutup sekrup. Campurkan kembali media
agar disimpan dalam bak air mendidih, pressure cooker atau oven microwave.
Setelah dilelehkan, agar bisa disimpan cair dalam rendaman air pada suhu 50 C
sampai siap digunakan. Pelat agar steril dapat dituang terlebih dahulu dan
disimpan dalam kantong plastik yang disegel dengan baik (alas yang mengandung
media paling penting untuk menghindari kondensasi berat pada tutupnya).

Prinsip Media Budaya Mikrobiologi

Kelangsungan hidup dan pertumbuhan mikroorganisme bergantung pada
ketersediaan nutrisi dan lingkungan pertumbuhan yang baik. Di laboratorium,
sediaan nutrisi yang digunakan untuk pembiakan mikroorganisme disebut media
(tunggal, medium). Tiga bentuk fisik yang digunakan: cairan, atau kaldu, media;
Media semipadat; Dan media padat. Perbedaan utama di antara media ini adalah
bahwa media padat dan semipadat mengandung zat penguat (biasanya agar),
sedangkan media cair tidak. Media cair, seperti kaldu nutrisi, kaldu kedelai
tryptic, atau kaldu infus otak-hati dapat digunakan untuk menyebarkan sejumlah
besar mikroorgan-isme dalam studi fermentasi dan untuk berbagai uji biokimia.
Media semisolid juga dapat digunakan dalam studi fermentasi, dalam menentukan
motilitas bakteri, dan dalam mempromosikan pertumbuhan anaerob. Media padat,
seperti agar nutrien atau agar darah, digunakan (1) untuk pertumbuhan surut
pertumbuhan mikroorganisme untuk mengamati penampilan koloni, (2) untuk
isolasi kultur murni, (3) untuk penyimpanan kultur, dan (4) mengamati reaksi
biokimia spesifik.
Sementara dalam keadaan cair, media padat bisa dituangkan ke dalam
tabung uji atau petri plate (piring). Jika media dalam tabung reaksi diijinkan
mengeras pada posisi miring, tabung tersebut diberi kemiringan agar (gambar
13.1b, c); Jika tabung diijinkan mengeras dalam posisi tegak lurus, tabung
tersebut diberi tabung agar dalam (ara ure 13.1d); Dan jika agar-agar itu
dituangkan ke dalam piring petri, piring tersebut ditunjuk sebagai piring agar.
Agar menuangkan (sama dengan agar dalam) yang mengandung sekitar 15 sampai
16 ml media sering digunakan untuk menyiapkan agar-agar.
Mikroorganisme dapat dikultur dengan menggunakan dua jenis media
yang berbeda. Media yang didefinisikan secara kimiawi, atau sintetis, terdiri dari
jumlah murni yang diketahui bahan kimia Media semacam itu sering digunakan
untuk membiakkan mikroorganisme autotrofik seperti alga atau heterotrof yang
tidak menular. Dalam latihan laboratorium bakteriologi rutin, kompleks, atau
nonsintetik, media dipekerjakan Ini terdiri dari bahan kompleks yang kaya akan
vitamin dan nu-trients. Tiga komponen yang paling umum digunakan adalah
ekstrak daging sapi, ekstrak ragi, dan pepton. Sumber media komersil dan
komposisi media budaya yang digunakan dalam manual ini diberikan dalam
lampiran J.
 Media Kimia
Bahan Kuantitas
Dipotassium phosphate, K2HPO4 7g
Potassium phosphate,
2g
monobasic, KH2PO4
Hydrated magnesium sulfate,
0.2 g
MgSO4 7H2O
Ammonium sulfate, (NH4)2SO4 1g
Glucose 5g
Distilled water 1 liter
Tabel 1.1
Media Kompleks
Bahan Kuantitas
Casein peptone 17 g
Soybean peptone 3g
NaCl 5g
Dipotassium phosphate, K2HPO4 2.5 g
Glucose 2.5 g
Distilled water 1 liter
Tabel 1.2

Penyusunan media dari produk komersial dehy-drated sederhana dan mudah.

Setiap botol medium dehidrasi memiliki petunjuk untuk persiapan labelnya.
Misalnya, untuk menyiapkan satu liter kaldu kedelai tryptic, tunda 30 g medium
dehidrasi dalam 1.000 ml air suling. Campurkan dengan labu Erlenmeyer 2 liter
(selalu gunakan termos yang menampung dua kali volume media yang Anda
siapkan). Dispensasikan dan sterilkan selama 15 sampai 20 menit pada 121 C
(tekanan 15 lbs). Seperti dicatat, jumlah bubuk untuk 1.000 ml air akan
ditunjukkan.
Jika medium kekurangan agar, bedak biasanya akan larut tanpa pemanasan.
Jika mengandung agar-agar, Anda harus memanaskan medium sampai mulai
mendidih atau mendidih agar benar-benar melarutkan agar-agar. Instruksi
pemanasan khusus diberikan untuk setiap jenis media. Misalnya, untuk
menyiapkan satu liter agar Vogel-Johnson, tunda 61 g medium dehidrasi dalam
satu liter air suling. Campur sampai suspensi seragam diperoleh. Panaskan dengan
agitasi dan biarkan mendidih selama 1 menit. Dispense dalam jumlah 100 ml ke
dalam labu 250 ml dan sterilisasi dengan au-toclaving pada suhu 121 C selama
20 menit.
Sebagian besar latihan yang akan Anda lakukan dalam manual ini akan
melibatkan penggunaan media steril dalam tabung budaya. Biasanya, 18 - 150
mm, 16 - 125 mm, atau 13 - 100 mm bakteriologis bakteri tabung akan digunakan.
Tabung ini harus ditutup agar media sterilitas tetap terjaga. Hal ini dapat
dilakukan dengan menggunakan busi kapas, busi busa plastik, atau tutup plastik
atau logam (mis., Penutupan Morton atau Bacti Capalls). Semua kapsul ini
membuat kultur bebas dari kontaminasi sambil membiarkan udara masuk ke
dalam tabung kultur, dan pada saat yang sama, meminimalkan penguapan. Hal ini
kadang-kadang de-sirable untuk menggunakan tabung klep sekrup-topi. Hal ini
sangat penting bila budaya, seperti dalam kasus kemiringan, dapat disegel dan
disimpan dalam waktu lama.
Kaldu kaldu dapat disalurkan dengan mesin pipet, semprit otomatis, atau pipet
biasa. Seseorang juga dapat memilah-milah volume yang tepat kaldu atau agar-
agar ke dalam satu tabung kultur dan kemudian tuangkan kira-kira volume media
yang sama (dengan menggunakan tabung awal sebagai panduan) ke dalam
sejumlah tabung lain yang berbaris dalam tes yang sama- Rak tabung Pendekatan
ini cepat, nyaman, dan relatif akurat.
Setelah sterilisasi tabung miring, tabung dipindahkan kembali dari autoklaf
sementara agar-agar masih dilelehkan dan diletakkan dengan hati-hati di atas meja
dengan sepotong kayu, tabung vakum, atau logam yang mengangkat ujung yang
tertutup. Beberapa rak uji coba juga disiapkan khusus untuk ini. Tabung kemudian
diijinkan untuk tetap di undis-turbed sampai agar-agar telah didinginkan dan
dikeraskan. Slants harus disimpan dalam posisi vertikal.
Agar tabung dalam bisa disimpan setelah sterilisasi untuk digunakan dalam
pembuatan petri plate bila dibutuhkan. Beberapa lapisan dalam mungkin disimpan
pada suhu kamar selama tujuh hari sebelum digunakan. Jika diperlukan
penyimpanan yang lebih lama, sebaiknya ditempatkan di kulkas untuk mencegah
pengeringan agar-agar. Bila petri plate dibutuhkan, lapisan agar-agar dilelehkan
baik dalam bak air mendidih atau dengan membawanya ke 121 C dalam
autoclave selama 30 sampai 60 detik dan kemudian melepaskan uap di bawah
knalpot yang lambat. Setelah agar-agar telah meleleh, menuangkan ditransfer ke
mandi air 48 sampai 50 C dan disimpan di sana setidaknya selama 5 sampai 10
menit sebelum digunakan. Tepung agar harus didinginkan sampai sekitar 50 C
sebelum digunakan untuk meminimalkan jumlah uap kondensasi pada tutup petri
setelah agar-agar telah dituangkan. Agar tidak mengeras sampai suhu turun
sampai sekitar 42 C. Bila kedalamannya mencapai 50 C, yang diambil dari bak
mandi dan bagian luar dikeringkan dengan handuk kertas. Kapalnya dilepas dan
bagian atasnya dinyalakan sebentar dengan menggunakan pembakar Bunsen. Agar
segera dituangkan ke dalam piring petri kering dan kering sambil memegang
bagian atas dengan hati-hati di atas dasar petri untuk menghindari kontaminasi.
Ganti bagian atas, biarkan agar-agar agar mendingin dan mengeras, dan simpan
piring petri dalam posisi terbalik. Saat menyimpan petri plate, jangan
menumpuknya lebih dari tiga tinggi, atau gunakan tempat penyimpanan petri plate
khusus.
 Sterilisasi Media dan Peralatan
Sterilisasi adalah proses rendering medium atau material bebas dari segala
bentuk kehidupan. Ada tiga cara mendasar di mana sterilisasi media dan
persediaan dapat dicapai. Pendekatan yang paling berguna adalah autoclav-ing,
dimana item disterilkan dengan paparan uap pada tekanan 121 C dan 15 lbs
selama 15 menit atau lebih, tergantung pada sifat dari barang tersebut. Dengan
kondisi ini, mikroorganisme, bahkan endospora, tidak akan bertahan lebih lama
dari sekitar 12 sampai 13 menit. Cara ini cepat dan bisa diandalkan. Modern auto-
claves dirancang untuk memastikan bahwa semua udara telah dikeluarkan dan
hanya uap yang ada di ruang auto-clave. Mereka juga dikontrol dengan cermat.
Hampir semua media dan hal lain yang akan melawan suhu 121 C dan uapnya
bisa disterilkan dengan cara ini.
Seringkali, gelas kering seperti pipet dan petri harus disterilkan. Uap
cenderung mengikis gelas dan juga membuatnya lembab. Karena itu, barang
semacam itu pada umumnya kering-panasnya disterilkan. Barang pecah belah
ditempatkan dalam oven listrik yang dioperasikan antara 160 dan 170 C.
Karena panas kering tidak seefektif panas basah, gelas harus disimpan pada suhu
ini sekitar 2 jam atau lebih. Suhu oven tidak boleh naik di atas 180 C atau kapas
atau kertas hadir akan menjadi char.
Terkadang media harus dibuat dari komponen yang tidak tahan pemanasan
pada suhu 121 C. Media semacam itu dapat disterilisasi dengan cara
melewatinya melalui filter bac-teriological, yang secara fisik menghilangkan
bakteri dan mikroorganisme yang lebih besar dari larutan dan dengan demikian
mensterilkannya tanpa panas. Filter kaca yang disinter dengan ultrafine, cakram
berlapis (ukuran pori 0,9 sampai 1,4 m) dan soket asbes asbes filter (setebal 3 mm
dengan pori 0,1 m) keduanya cukup efektif dalam larutan sterilisasi. Namun, jika
ukuran pori yang lebih besar dari 0,22 m digunakan, ada kemungkinan sangat
tinggi bahwa filtrat tidak akan steril. Sejauh ini, pendekatan yang paling berguna
dan populer adalah penggunaan membran steril, selulosa atau polikarbonat yang
disiapkan secara khusus dari ukuran pori yang sesuai. Umumnya, selaput dengan
pori 0,22 m digunakan dalam sterilisasi. Sejumlah besar perangkat yang berbeda
tersedia secara komersial untuk sterilisasi membran baik volume besar maupun
kecil. Sebagai contoh, seseorang dapat menggunakan labu saringan dengan vakum
atau semprit dengan tekanan positif untuk memaksa cairan melalui pemegang
filter membran khusus.
Dua teknik sterilisasi lainnya menggunakan radiasi ultraviolet dan etilen
oksida. Radiasi ultraviolet (UV) sekitar 260 nm sangat mematikan bagi banyak
mikroorganisme tapi tidak menembus kaca, film kotoran, air, dan zat lainnya
dengan sangat efektif. Karena kelemahan ini, UV digunakan sebagai agen
sterilisasi hanya dalam beberapa situasi tertentu. Misalnya, lampu UV kadang-
kadang diletakkan di langit-langit kamar atau di lemari pengaman biologis untuk
mensterilkan udara dan permukaan yang terbuka.
Banyak item sensitif panas seperti petri petelur plastik sekali pakai dan alat
suntik, jahitan, dan kateter sekarang disterilkan dengan gas etilen oksida. Etilen
oksida keduanya bersifat mikrobisida dan sporicidal dan membunuh dengan
melekat secara kovalen ke protein sel. Ini adalah agen sterilisasi yang efektif
karena cepat menambal bahan pengemas, bahkan bungkus plastik.
Prosedur
Mempersiapkan Media Kimia
1. Siapkan 500 ml kaldu garam glukosa-mineral untuk kultur E. coli dengan
menggunakan resep yang digariskan pada tabel 13.1. Untuk labu Erlenmeyer 1
liter tambahkan 375 ml air suling. Timbang keluar dan tambahkan setiap bahan ke
dalam air sesuai urutan yang tercantum dan aduk setelah setiap penambahan
sampai bahannya benar-benar larut. Ingatlah untuk mengurangi separuh jumlah
masing-masing bahan. Tambahkan sisa 125 ml air untuk mencuci bagian dalam
labu.
2. Sesuaikan pH menjadi 7,2 sampai 7,4 dengan menambahkan cukup sedikit
HCl atau tetes demi tetes NaOH (lihat lampiran E).
3. Keluarkan 3 sampai 5 ml kaldu garam glukosa-mineral ke dalam masing-
masing 10 tabung reaksi menggunakan pipet 10 ml dan kemudian tutup tabung
secara longgar. Siswa lain dapat menggunakan sisa kaldu 450 ml untuk tabung
mereka. Tempatkan tabung Anda di rak tabung uji atau keranjang. Tempatkan
keranjang atau rak di autoclave.
 Prosedur untuk Autoclaving
1. Instruktur Anda akan menunjukkan penggunaan autoclave.
2. Muat otoklaf dengan media kultur yang baru disiapkan.
3. Tutup dan kunci pintu autoclave.
4. Atur waktu autoclave selama 15 menit atau lebih dan pilih tingkat knalpot
yang lambat.
5. Pastikan suhu autoklaf diatur ke 121 C.
6. Jalankan autoclave dengan menekan tombol start atau memutar kenop ke
posisi start.
7. Bila periode sterilisasi selesai dan tekanan di ruangan membaca 0, buka
pintu dengan hati-hati dan lepaskan wadahnya, dengan menggunakan sarung
tangan tahan panas.

Mempersiapkan Plat Agar

1. Seperti yang diuraikan sebelumnya dan pada gambar table 1.2, gunakan
beberapa agar kedelai tryptic yang telah disterilkan untuk menyiapkan piring agar-
agar.
2. Bila lempeng dingin (agar dipadatkan), membalikkannya untuk mencegah
kelembapan uap kondensasi agar tidak terakumulasi pada permukaan agar-agar.
3. Semua piring dan tabung harus diinkubasi selama paling sedikit 24 jam
untuk memastikan kemandulan sebelum Anda menggunakannya.

Catatan :
(1) Jangan membebani ruang otoklaf. Berikan ruang yang cukup antara
keranjang media untuk memungkinkan sirkulasi uap. (2) Anda harus membawa
media mendidih dan kemudian, dengan menggunakan sarung tangan tahan panas,
segera lepaskan media dari pembakar Bunsen atau piring panas untuk mencegah
perebusan. Jangan goyang atau putar labu saat Anda mengeluarkannya dari panas
karena goncangan semacam itu bisa menyebabkan media mendidih. (3) Sebelum
membuka pintu pada kliret otomatis, Anda harus selalu memakai sarung tangan
tahan panas, berdiri di lengan, dan perlahan membuka pintu. Ini akan mencegah
dua masalah terjadi: (a) uap yang terperangkap akan hilang ke langit-langit
dengan cara yang terkontrol tanpa membakar kulit, dan (b) media tidak akan
mendidih keluar dari wadah yang tersumbat karena perubahan yang terlalu cepat.
Dalam tekanan internal di termos.

Macam-Macam Media

Tujuan
Bacteroides fragilis adalah bakteri paling banyak ditemukan dalam usus besar
manusia,mencapai kepadatan 1.011 sel per gram tinja! Ini adalah yang paling
umum patogen anaerobik pada manusia. BBE Agar merupakan media selektif
dan diferensial digunakan untuk isolasi dan dugaan identifikasi B. fragilis dan
kerabat dekat (B. fragilis kelompok).
Prinsip
Nutrisi dipasok oleh media dasar agar kedelai
tryptic, yang mencerna kasein (protein susu) dan
bungkil kedelai. Anaerob lainnya di sampel
dihambat oleh oxgall (empedu). anaerob fakultatif,
juga melimpah di feses, bersaing dengan anaerob
obligat ketika tumbuh anaerobik. Dihambat oleh gentamisin antibiotik. Media
juga mencakup esculin, yang B. fragilis mampu menghidrolisis untuk
menghasilkan esculetin. Esculetin pada gilirannya bereaksi dengan ion besi dalam
medium untuk menghasilkan warna cokelat di sekitar Pertumbuhan fragilis B.
identifikasi dugaan Fragilis didasarkan pada kemampuannya untuk tumbuh pada
BBE dan menggelapkan menengah.

Tujuan
Biggy Agar merupakan media selektif dan diferensial digunakan untuk
mengisolasi spesies ragi Candida. identifikasi presumtif Candida sp, dapat juga
dimungkinkan karena hasil diferensial. Candida albicans merupakan penghuni
umum dari flora normal oral rongga, saluran pencernaan, dan vagina, tetapi juga
merupakan oportunistik patogen, terutama pada individu immunocompromised.
 Prinsip
Karbon, nitrogen, dan nutrisi lain yang
disediakan oleh ekstrak ragidan dekstrosa,
sedangkan glisin merangsang pertumbuhan.
Selama autoklaf,natrium sulfit dan bismuth
amonium sitrat bereaksi membentuk bismut
sulfit, yang menghambat untuk sebagian besar
bakteri, tapi tidak spesies Candida.spesies
Candida mengurangi sulfit bismuth (di sedikit asam atau netral pH) dan
menghasilkan pigmen coklat dalam, dan kadang-kadang sekitar,koloni.

Tujuan
Chocolate II Agar digunakan untuk isolasi dan budidaya Neisseria dan spesies
Haemophilus.
Prinsip
Chocolate II Agar dibuat dengan campuran kasein, pepton, fosfat penyangga, pati
jagung, dan hemoglobin sapi. Hal ini juga berisi pengayaan suplemen amino dan
asam nukleat untuk mendorong pertumbuhan Neisseria spesies dan memberikan X
dan V faktor darah yang dibutuhkan oleh Haemophilus spesies (Gambar 12-28).
Media berlapis ini biasanya bergaris untuk isolasi dan diinkubasi pada 37 C
dalam lingkungan aerobik diperkaya dengan karbon dioksida. sub-budaya koloni
kemudian dapat tumbuh pada media miring dan digunakan untuk tujuan
diagnostik.
 Tujuan
Columbia CNA dengan 5% Agar Sheep Blood digunakan untuk mengisolasi dan
membedakan stafilokokus, streptokokus, dan enterococci, terutama dari spesimen
klinis.
Prinsip
Columbia CNA dengan 5% Agar Sheep Blood adalah didefinisikan,
diferensial,dan medium selektif yang memungkinkan pertumbuhan Gram-positif
organisme (terutama Staphy lococci, streptokokus, dan enterococci)dan berhenti
atau menghambat pertumbuhan sebagian besar organisme Gram-negatif (Gambar
2-9). Kasein, mencerna jaringan hewan, ekstrak daging sapi, ragi ekstrak, pati
jagung, dan darah domba menyediakan berbagai karbon dan sumber energi untuk
mendukung berbagai organisme. Selain itu, darah domba memasok faktor X
(heme) dan ragi Ekstrak memberikan B-vitamin.
Antibiotik colistin dan nalidiksatacid (CNA)
bertindak sebagai agen selektif terhadap
organisme Gram-negatif dengan mempengaruhi
integritas membran dan mengganggu replikasi
DNA,masing-masing. Mereka sangat efektif
terhadap Klebsiella,Proteus, dan Pseudomonas
spesies. Selanjutnya, darah domba membuat
diferensiasi organisme Gram-positif berdasarkan hemolitik Reaksi.
 Tujuan
Desoxycholate (DOC) Agar digunakan untuk isolasi dan diferensiasi antara
Enterobacteriaceae. Hal ini juga digunakan untuk mendeteksi bakteri coliform
dalam produk susu.
Prinsip
Desoxycholate Agar merupakan media selektif dan diferensial mengandung
laktosa, natrium desoxycholate, dan merah netral pewarna. Laktosa adalah
karbohidrat difermentasi, desoxycholate adalah inhibitor Gram-positif, dan merah
netral, yang tidak berwarna di atas pH 6,8 dan merah di bawah, ditambahkan
sebagai indikator pH.
Merah netral akan mengungkapkan fermentasi laktosa (Gambar 2-10) dengan
memutar merah pertumbuhan bakteri di mana produk asam telah menurunkan pH
(Angka 2-11 dan 2-12). nonfermenters laktosa akan tetap warna alami atau warna
medium. Dengan demikian, karakteristik untuk mencari di DOC yang kualitas
pertumbuhan dan warna produksi.
6. Salmonella-Shigella Agar
Tujuan
Salmonella Shigella (SS) Agar adalah media selektif awalnya
digunakan untuk isolasi Salmonella dan banyak spesies Shigella
(yaitu, laktosa non fermentasi bakteri enterik) dari laktosa fermentasi
enterics (yang coliform). Hal ini tidak lagi direkomendasikan untuk
isolasi Shigella, karena Hektoen dan XLD lebih efektif, tetapi masih
digunakan dalam mengisolasi spesies salmonella.
Prinsip
Salmonella-Shigella Agar adalah undefined, diferensial, dan selektif
menengah dengan garam empedu dan brilian pewarna bertindak hijau
sebagai selektif agen terhadap Gram-positif dan banyak Gram-negatif.
Laktosa dimasukkan sebagai karbohidrat difermentasi dan natrium
tiosulfat menyediakan sumber sulfur reduceable.merah netral adalah
indikator pH dan besi sitrat bereaksi dengan H2S untuk membentuk
endapan hitam, sehingga menunjukkan sulfur pengurangan.fermentor
laktosa akan menghasilkan koloni kemerahan sebagai netral
Perubahan merah dari berwarna merah di pH rendah. Salmonella dan
Shigella spesies akan warna alami karena mereka tidakmampu untuk
memfermentasi laktosa. Salmonella dan spesies Proteus biasanya
mengurangi sulfur, yang ditandai dengan koloni dengan pusat hitam.
7. Tellurite Glycine Agar
Tujuan
Tellurite Glycine Agar merupakan media undefined, selektif, dan
diferensial digunakan untuk isolasi koagulase-positif staphylococci
dari berbagai sumber. Yang paling umum dan klinis penting
koagulase-positif staphylococcus adalah Staphylococcus aureus.
Prinsip
Di antara bahan-bahan dari Tellurite Glycine Agar adalah
karbohidrat manitol, kalium tellurite, dan lithium khlorida.
Organisme, seperti
Staphylococcus aureus
koagulase-positif, mampu
memfermentasi manitol dan
mengurangi tellurite tersebut.
Ketika tellurite berkurang
menghasilkan endapan yang
ternyata koloni hitam.Oleh
karena itu, sebuah organisme yang tumbuh dengan baik pada
media dan menghasilkan koloni hitam mungkin S. aureus dan
dengan demikian itu adalah perbedaan dari staphylococci
koagulase-negatif dan Gram-negatif bakteri.

8. TCBS Agar
Tujuan
Thiosulfate Citrate Bile Sucrose (TCBS) Agar adalah undefined,
selektif dan Diferensial media yang digunakan untuk isolasi utama
Vibrio species. Spesimen klinis dan non-klinis diduga kontaminasi
tinja yang melesat pada TCBS dalam upaya untuk memulihkan
Vibrio cholerae, patogen paling penting dari genus.
Prinsip
Bromthymol biru pH Indikator dan ferric ammonium citrate
disertakan untuk menunjukkan pengurangan sulfur. medium ini pH
basa (8.6) mendorong pertumbuhan Vibrio spp., terutama yang dari
V. cholerae. Oxgall dan natrium
kolat disertakan untuk menghambat pertumbuhan bakteri Gram-
positif. Sukrosa adalah difermentasi karbohidrat dan natrium
tiosulfat disertakan sebagai elektron akseptor untuk pengecil sulfur
bromthymol biru pH Indikator dan ferric ammonium citrate
disertakan untuk menunjukkan pengurangan sulfur.Fermentor
sukrosa menghasilkan asam produk akhir (seperti Vibrio cholerae)
membentuk koloni kuning sedangkan dari nonfermenters sukrosa
berwarna biru beberapa Enterococci memfermentasi sukrosa tetapi
terhambat oleh oxgall tersebut. Organisme ini, menghasilkan koloni
kuning kecil.jenis ini mampu mengurangi thiosulfate untuk H2S
menghasilkan koloni hitam.
9. Xylose Lysine Desoxycholato Agar
Tujuan
Xylose Lysine Desoxycholate (XLD) Agar adalah selektif dan
Diferensial media yang digunakan untuk mengisolasi dan
mengidentifikasi Shigella dan Providencia dari sampel tinja.
Prinsip
XLD Agar merupakan media
selektif dan diferensial yang
mengandung natrium
desoxycholate, xilosa, L-lisin,
dan besi amunium
sitrat.desoxycholate adalah
inhibitor Gram-positif, xylose
adalah karbohidrat difermentasi,
L-lisin merupakan amino Asam disediakan untuk dekarboksilasi
(See dekarboksilasi, Halaman 67), dan besi amonium sitrat
merupakan indikator untuk menandai kehadiran gas hidrogen
sulfida (H2S) dari belerang pengurangan.fenol merah, yang kuning
ketika asam dan merah atau pink saat basa, ditambahkan sebagai
indikator pH. Organisme yang memfermentasi xylose akan
mengasamkan medium dan menghasilkan koloni kuning.
Organisme mampu menghapus gugus karboksil dari
(dekarboksilasi) L-lisin akan merilis produk alkali dan
menghasilkan koloni merah.organisme mampu mengurangi sulfur
akan menghasilkan endapan hitam di pertumbuhan karena reaksi
dari besi amonium sitrat dengan H2S. Shigella dan Providencia,
yang tidak memfermentasi xylose tapi dekarboksilasi lisin, tampak
merah pada media. spesies salmonella, yang memfermentasi xylose
tapi kemudian mengalami dekarboksilasi lisin juga muncul sebagai
koloni merah tapi dengan pusat hitam karena pengurangan sulfur
untuk H2S. Enterics lain yang biasanya akan kembali ke
dekarboksilasi setelah melelahkan gula dan membasakan medium
 yang dicegah dari melakukannya dengan kadar gula tinggi dan
waktu inkubasi yang singkat.organisme ini muncul kuning di
medium.

Pengendalian kualitas media yang disiapkan

1. pengujian pH. PH media yang dipersiapkan tidak perlu diperiksa secara
rutin bila sudah disiapkan dengan benar dari bubuk dehidrasi. Jika media
dibuat dari bahan dasar, sebaiknya dibiarkan mendingin sebelum pH diuji.
Media padat harus diuji dengan elektroda permukaan atau setelah
maserasi pada air suling. Jika pH berbeda lebih dari 0,2 unit dari
spesifikasi, sesuaikan dengan asam atau alkali atau siapkan batch baru.
2. Uji sterilitas. Lakukan tes sterilitas rutin pada media dimana darah atau
komponen lainnya ditambahkan setelah melakukan otoklaf. Ambil 3-5%
dari masing-masing batch dan inkubasi di 35C selama 2 hari. Dinginkan
sisanya. Jika lebih dari dua koloni per piring terlihat, buang seluruh bets.
3. Pengujian kinerja. Laboratorium harus menyimpan serangkaian strain
saham untuk memantau kinerja media. Strain ini dapat diperoleh melalui
pekerjaan rutin, atau dari sumber komersial atau resmi.
 Pengendalian Kualitas Peralatan Sterilisasi
Teknik
Perawatan
Peralatan Pengamatan pemeliharaan
Rutin
dan inspeksi
Autoclave Bersihkan dang Periksa dan atur Setiap 6 bulan
anti air level air
setiap sebelum
bulan digunakan
Catat waktu dan
suhu atau
tekanan
untuk setiap
putaran
Catat kinerja
dengan
spore-strip
mingguan
Oven udara Bersihkan Catat waktu dan Setiap 6 bulan
panas bagian suhu untuk
untuk dalam setiap
sterilisasi setiap putaran
barang bulan
pecah
belah
Inkubator Bersihkan Atur Setiap 6 bulan
bagian temperature
dalam di awal
dinding dan untuk
rak setiap penggunaan
bulan setiap hari