MANAJEMEN KESEHATAN DAERAHWISATA

Uefriman Djafri*

1. LATARBELAKANG
Istilah yang menyatakan bahwaduniasemakinscmpit bukanlah
semata perumpaan semata. Ini menandakan bahwa akses dan jarak
bukan menjadi kendala lagi bagi orang-orang unluk mendatangi
suatu tempat. Ukuran jauh atau dekat menjadi sanngat relatif.
Peijalanan lintas daerah, lintas negara bahkan lintas benua dapat
dilakukan dalam waktn relatif singkat daripada perjalanan
konvensional yang pernah dilakukan. Teknologi transportasi sangat
membantu manusia dari berbagai profesi yang menjadi langganan
"penikmat bepergian”

Perlu diperhatikan pula kondisi kesehatan serta para pelancong

yang membutuhkan pelayanan khusus karena kondisi
kesehatannya. Dapat kita kelompokkan dalam kategori umur,
kondisi hamil, cacat, pengidap penyakit
kronik.(l)

Perlu diingat bahwapara pelancongakanterpajan dan berada

pada kondisi dan situasi berada pada lingkungan dengan faktor
risiko kesehatan yang tidak biasa mereka hadapi pada lingkungan
asalnya. Terutama pada mereka yang karena profesinya memang
dituntut untuk banyak melakukan perjalanan keluar daerah.
 Belum begitu disadarinya kehadiran risiko kesehatan pada
daerah-daerah wisata dan transit atau berada pada jalur sibuk
perjalanan hendaknya dapat ditindaklanjuti dengan serius dalam
bentuk upaya peringatan, pencegahan dan kewaspadaan dini yang
terintegrasi.

Tingkat risikoyang bersifat globalhendaknya menjadi perhatian

para ahli medis, profesi kesehatan masyarakat tapijuga dialamatkan
kepada para penyedia pelayanan jasa wisata, usaha penerbangan
dan transportasi air. Diharapkan dapat menjadi suatu perhatian yang
pada akhirnya akan membentuk suatu sikap dan antisipasi
menyeluruh dan terpadu.

2. PEMBAHASAN

Risiko Kesehatan YangTerkait DenganPerjalanan

Berdasarkan International Travel and Health,2003:

1 dinyatakan bahwa risiko yang mungkin akan memapar para

pelancong ialah; daerah tujuan, lamanya perjalanan, tujuan
perjalanan, standard akomodasi dan saniatasi
makanan dan perilaku. Tentu saja hal tersebut akan berhubungan
dengan usaha perjalanan dan wisata yang banyak mengunjungi kota
dan pusat wisata.

* PSIKM Fakultas Kedoktcran Universitas Andalas

 Bayi dan anak-anak memiliki kebutuhan khusus yang mengacu
pada vaksinasi dan perlindungan antimalaria. Mereka sebagai
kelompok rentan terhadap berbagai penyakit infeksi.

Contohnya, bayi akan merasa tidak nyaman saat penerbangan

karena perubahan tekanan udara.

Risiko kesehatan Pada Perjalanan Udara

Memilih untuk bepergian dengan menggunakan

pesawat mengatasnamakan eflsiensi dan efektifitas. Penghematan
waktu merupakan keuntungan yang jelas lebih unggul dibandingkan
transportasi lain,walaupun dari segi biaya relative lebih mahal.

" Menurut International Civil Aviation Organization,jumlah

penumpang pesawat melebihi 1562 juta pada tahun 1999 dan
1647juta pada tahun2000."(l)
Penerbangan terutama untukjarakjauh tentu saja akan
memberikan efek pada kesehatan dan kenyamanannya, terutama
pada penumpangyang telahmempunyai keluhan kesehatan
ataumengidap penyakit sebelumnya danmereka termasuk dalam
kelompok yang lebih rentan.

Menurut WHO International Travel andhealth,2003: 12,

dinyatakan bahwa ada beberapa faktor yang dapat mempengaruhi
kesehatan penumpang, antara lain;
1. Tekanan udara kabin
" tekanan udara kabin setara dengan tekanan udara
padaketinggian 1500-2500 m(5000-8000 kaki) di atas permukaan
laut. Schingga persediaan oksigen berkurang dan bertambahnya
 gas dalam tubuh. Namun efeknya akan dapat ditoleransi oleh
penumpang yang berada dalam kondisi sehat."

2. Kelembabankabin
Sepcrti dinyatakan dalam WHO, 2003 : 13 bahwa kelembaban
kabin pesawat biasanyarendah, kurangdari 20%. Halinidapat
menyebabkanketidaknyamanan pada mata, mulut,dan hidungtapi
hanyasedikit berisiko pada kesehatan. Keluhan tersebut dapat
diatasi dengan konsumsi air yang cukup sebelum dan selama
poenerbangan, memakai pelembab kulit atau memakai kacamata
dibandingkan dengan memakai lensa kontak.
Jurnal Kesehatan Masyarakat, September 2008 - Maret 2009, Vol.

3. Dehidrasi

Sangat tidak dianjurkanmengkonsumsi alcohol sebelum atau saat

penerbangan. Alkohol berperan untuk menyebabkan dehidrasi.

4. Radiasi sinar kosmis dan ozon

TheInternational Commisionon Radiological Protection telah

menetapkan 1 mSV per tahun sebagai standard batas aman untuk
melindungi tubuh dari bahaya radiasi ion.

Ozon dapat dengan mudah terkonversi menjadi oksigen oleh

panas dan beberapa proses katalitik sedangkan sianar kosmis
pada ketinggian penerbangan terdiri dari radiasi ion energi tinggi
dan netron. Selain keempat hal tersebut ada juga beberapa hal
yang sering dihadapi penumpang seperti ; motion sickness,
dilakukan pelancong untuk mengurangi risiko terlibat atau menjadi
korbandari kecelakaan lalulintas,antara lain:

1.memiliki asuransi yang meliputi keseluruhan risiko atas sakit,

cedera dan kecelakaan.
2 memiliki surat izin mengemudi internasional setidaknya berlaku
untuk nasional.

3.mendapatkan informasi mengenai peraturan lalulintas negara

terkait dan perawatan mesin pada negara yang akan dikunjungi.

4. tidak mengemudi pada jalanan yang tidak dikenal dengan baik.

 5. tidak mengemudi setelah meminum alcohol.
6. mengemudi dalam batas kecepatan yang tepat.
7. selalu menggunakan sabuk pengaman

masalah immobilitas dan sirkulasi sertajet lagi. Masalah psikologi

juga dapat terjadi dalam bentuk stress dan takut terhadap
penerbangan (flightphobia).

Transmisi Penyakit Infeksi

Risiko kesehatan yang juga perlu diperhatikan pada perjalanan
udara ialah adanya risiko transmisi penyakit. Kuman penyakit
ataupun vektor perantara penyakit dapat saja ikut serta secara
tidak sengaja dalam pesawat atau memang ada penumpang
yang telah mengidap penyakit menular tertentu. Kualitas udara
pada kabin pesawat dikontrol dengan seksama. Transmisi agen
penyakit infeksi melalui udara antar pesawat jarang terjadi dan
kalaupun terjadi berada pada jarak yang dekat dengan sumber
infeksi. Contohnya untuk penyakit influenza dapat berpindah
antar pesawat yang duduk berdekatan. (1)

Kecelakaan,Cedera dan Kekerasan

Orang-orangyang sedang dalam perjalanan dapat saja
mengalami kecelakaan, cedera atau mengalami kekerasan.
Kecelakaan lalu lintas penyebab tertinggi kematian pada para
pelancong. Kecelakaan lalu lintas dan kekerasan merupakan
risiko yang cukup penting diperhatikan terutama pada negara
berkembang dan dapat saja terjadi pada daerah wisata seperti,
kolam renang, wisata selam dan berlayar. Para pelancong dapat
mengurangi kemungkinan risiko melalui kesadaran akan
 bahaya dan menindaklanjuti dengan upaya pencegahan yang
tepat.

Kecelakaan LaluLintas

Menurut International Travel and Health, 2003

dinyatakanbahwa lebihdari satujuta orngmeninggal dalam
kecelakaan lalulintas di seluruh dunia padatahun 1998 dan lebih
dari 10juta orang mengalami cedera. Terutama pada negara
berkembang yang peraturan lalulintasnya belum ditegakknaya
dengan sepenuhnya. Kemacetan lalulintas, pejalan kaki berada
pada jalan yang sama dengan kondisi jalan yang tidak memadai
termasuk rambu, penerangan dan perilaku menyetir yang
kurang baik.

Ada beberapa tindakan pencegahan yang dapat

Cedera dan Kecelakaan Pada Rckrcasi Air

Rekreasiair termasuk pemandian airpanas,danau, sungai,
kolam renang dan spa. Risiko bahaya yang berhubungan dengan
rekreasi air dapat diminimalisasi dengan perilaku yang aman dan
tindakan pencegahan dasar. Bahaya kesehatan yang paling penting
pada rekreasiair ialah tenggelam dan cedera terutama pada kepala
dan tulang.
Ada beberapa tindakan pencegahan yang dapat
kiitalakukanuntuk mengatasi bahaya kesehatan pada saat berada di
daerahwisata perairan, (1) antara lain:
1. Praktekkan perilaku aman, menggunakan jaket
pelampung,perhatikan arus dankecuraman, danhindari bagian
outlet dari spa dan kolam renang.
2 Pastikan anak-anak tidak luput dari pengawasanoranng dewasa
selama berada di tempat rekreasi.

3.hindari konsumsi alcohol sebelum melakukan kegiatan di daerah

rekreasi

4. Periksa terlebih dahulu kedalaman air sebelum menyelam, dan

hindari menyelam atau melompat ke permukaan yang keruh

5. Tidak melompat ke dalam air .

Penyakit InfeksiSebagai Faktor Risiko Potensial

Para pelancong memiliki risiko untuk terpajan beberapa

penyakit infeksi. Risiko yang dihadapi akan tergantung dari tujuan,
standar akomodasi, hygiene dan sanitasi termasuk juga perilaku
pelancong saat bepergian. Pada beberapa kasus penyakit dapat
dicegah dengan vaksinasi namun ada juga yang belum tersedia
vaksinnya.

Tindakan pencegahan harus dilakukan dengan sebaiknya

walaupun ada vaksin atau tidak ada vaksin dan tindakan
medis yang tersedia. (1)
Menurut buku International Travel and Health ada beberapa
modeltransmisi penyakit infeksi, antara lain :
a. Penyakit bersumber makanan (foodborne disease) dapat
ditularkan melalui konsumsi makanan dan minuman yang
terkontaminasi. Contohnya; HepatitisA, demamtyphoid dan kolera.
Tentu saja dapat dicegah dengan menjaga hygiene makanan,
minuman dan air minum serta menghindari
Jurnal Kesehatan Masyarakat, September 2008 - Maret 2009, Vol.
3, No. 1

kontak dengan air pada tempat rekreasi yang terkena

polusi.

b.Penyakit bersumber vektor ( vectorborne disease) penyakit jenis

ini dapat ditularkan melalui serangga dan vector. Dapat dicegah
dengan menghindari gigitan serangga seperti memakai lotion anti
serangga (repellant) dan kontak dengan serangga pada daerah
yang
dicurigai sebagai daerah rawan penyakit. Contohnya;

c.Penyakit bersumber hewan (zoonoses)

Zoonesis terdiri dari penyakit infeksi yang dapat ditularkan melalui
gigitan hewan atau kontak dengan cairan tubuh atau kotoran
hewan yang terkontaminasi dapat juga bersumber dari konsumsi
daging dan susu, Contohnya Rabies, Brucellosis, dan
Leptospirosis.

d. Penyakit menular seksual

penyakit ini dapat ditularkan karena perilaku seksual yang tidak
aman. Namun dapat dihindari dengan berperilaku seksual yang
aman seperti menggunakan kondom.Contoh penyakit antara
lain;Hepatitis B, HIV/ AIDS dan Syphilis

e.Penyakit bersumber darah (bloodborne disease) dapat ditularkan

melalui kontak langsung dengan darah atau cairan tubuh yang
terkontaminasi. Bisa dicegah dengan menghindari kontak
langsung dengan darah dan caiaran tubuh yang terkontaminasi,
 selalu mengganti jarum suntik dan memakai peralatan medis yang
steril terutama pada operasi dan bedah kosmetik.,seperti pada
praktek tato, tindik dan akupuntur. Contoh penyakit ini

antara lain; Hepatitis B, HIV/AIDS dan Malaria.

f Penyakit bersumber udara (airborne disease) ditularkandari

orangke orangmelaui aerosoldan droplet dari hidung dan mulut.
Untuk mencegahnya maka kita harus menghindari kontak pada
daerah yang padat dan tempat tertutup. Contoh penyakit ini antara
lain; influenza,TBC

g.Penyakit yang ditularkan melalui tanah penyakit jenis ini

termasuk didalamya penyakit yang discbabkan dari dormantforms
(spora) dari agen yang terinfeksi, yang dapat menyebabkan infeksi
bila terjadi kontak dengan kulit yang terbuka missal karenaadanya
luka atau goresan. Sehingga sangat penting untuk melindungi kulit
kontak langsung dengan tanah yang terkontaminasi. Contoh
bakteri yang ditularkanmelalui tanah seperti Anthrax dan Tetanus
serta parasit pada pencemaan seperti Ascariasis dan Trichuriasis.

Pendekatan Upaya Manajemen

Untuk menyiasati tindakan pencegahan dan manajemen faktor-

faktor risiko yang dapat terjadi pada daerah wisata, maka kita dapat
melakukan pendckatan teori

Simpul. Ke-4 simpulyang ada dapat dijadikan tuntutan dalam

mengidentiftkasi populasi yang berisiko.
 Teori simpul dari Untar Fahmi Ahmadi dapat digambarkan
sebagai berikut (2)

Pada simpul pertama dari sumber yang ada

misalnyahewan,tumbuhan,manusia, virus, bakteri, cacing, parasit,
dapat dikenali jenis-jenis sumber yang dapat membahayakan atau
berpotensi menjadi sumberpenularan penyakit pada daerah wisata.
Kondisi daerah yang menjadi tujuan wisata haruslah melengkapi diri
dengan informasi yang jelas mengenai penyakit endemik, kondisi
wabah/ KLB yang terakhir serta hal-hal penting yang harus
diperhatikan parawisatawan atau calon wisatawan berkenaan
dengan pencegahan.

Sedangkan pada simpul 2 yang merupakan media perantara,

dapat berupa udara, air, tanah, makanan, minuman, serangga, atau
vektor. Sehingga penyakit-penyakit yang memakai media penularan
tersebut dapat dikontrol melalui media perantaranya, misalnya
kegiatan Inject Control yang secara rutin, inspeksi sanitasi,
monitoring kualitas udara, tanah, dan air.

Untuk simpul 3, yang menunjukkan kelompok orang-orang

yang berada pada kondisi sehat dan menjadi populasi yang berisiko.
Pemeriksaan prakunjungan atau pasca mengunjungi daerah wisata
dengan peringatan akan adanya resiko suatu penyakit, dengan
pemeriksaan bio marker pada darah, urin, tinja, atau tindakan
pencegahan melaluivaksinasi.
Adanya nota atau tanda bukti kelengkapan melakukan vaksinasi
yang dilegitimasi melalui peraturan internasional dapat menjadi
syarat untuk memasuki wilayah tertcntu, misalnya : Vaksinasi
terhadap Campak, Yellow Fever. Bila telah terjadi kondisi sakit dan
sudah terjadi korban, maka upaya kuratif dan rehabilitatif serta
pencegahan scgera penularan berlanjut. Upaya karantina dan
menutup pintu-pintu masuk suatu wilayah melalui udara, air, laut
dapat dilakukan dengan kerjasama antar regional, negara dan
internasional. Hal itu pernali terjadi saat terjadi kasus Flu Burung
pertama kalidi Hongkong, penyakit Mulut dan Kuku.

Adanya tingkat penderita sakit dimulai adari penderita akut, subklinik

dan samar, sehingga penanggulangan yang diperlukan juga
berbeda. Bila dibandingkan dari segi jumlah, maka penderita
dengan gejala samar, jumlahnya paling banyak, hal ini dapat
diakibatkan karena pemaparan pada lingkungan dengan dosis kecil
atau intensitas rendah. Misalnya, sekelompok orang yang
mengkonsumsi makanan dengan pewarna sintetis yang berbahaya,
atau pestisida, kelompok samar ini dapat bcrkembang menjadi
gangguan kesehatan lain, misalnya gajala kanker dan bersifat
Karsinogen.

3
Jurnal Kesehatan Masyarakat, September 2008 - Maret 2009, Vol.

Hal yang perlu dicermati dalam memanajemen kesehatan

apada daerah wisata ialah kondisi rentan yang memang telah ada
terlebih dahulu, kondisi saat ini yang memungkinkanuntukteijadi
makanisme transisi penyakit dan sarana serta upaya pelayanan
kesehatan yang terseia nntuk mencegah dan mengatasi
kemungkinan yang dapat terjadi pada suatu daerah wisata.
Andaikata suatu daerah yang pada awalnya belum terbuka
atau terpublikasi secara regional, nasional, atau intemasional
kemudian dibuka dan terkenal sebagai daerah wisata . contoh : di
Pulau Bali, Lombok, ataupun Batam, kondisi endemik yang ada dari
dahulu seperti penyakit malaria, diare, sudah biasa dan pemerintah
telah punya rencana

1. Informasi yang lengkap mengenaipenyakit spesifik

endemik, status kesehatan dan lokasi rawan penyakit
merupakan prasyarat untuk mengendalikan penularan
penyakit

2. Pendekatan teori Simpul dapat digunakan dalam

Manajemen Kesehatan DaerahWisata

3. Upayaterintegrasi dan secara global diperlukan untuk

melakukan tindakan pcncegahan penulatan penyakit
melalui daerah wisata

Persiapannya, Dengan dibukanya daerah tersebut lain lintas

perjalanan antar wilayah dan negara membuka kesempatan luas
tcrjadinya mekanisme penularanberbagai penyakit.
Penyakit menular antar manusia, seperti Seksual Sexual
Transmitted Diseases (STD) yang sangat mengkhawatirkan seperti
HIV/AIDS di PulauBali sudah sangat terkenal istilah Sun, Sand, Sex,
yang menandakan resiko untuk terjadi STD sangat besar, belum
lagipenyakit karena Vektor dan lingkungan. Dibukanya suatu
daerah sebagai daerah wisata pasti akan berdampak terhadap
pembangunan fisik,

Sosbud, Ekonomi, ekosistem alam yang tidak lagi pada kondisi

stabil karena adanya pembangunan membcrikan keseimbangan
baru termasuk terhadap habitat, ekosistem alam. Halini dapat
menjadi faktor risikotertentu terhadap jenis binatang yang dapat
menjadi media perantara penyakit, misalnya, ditemukan strain baru
nyamuk Aedes yang menyebabkan dcmamberdarah yang lebih
kompleks.

Prinsip dari sebuah aplikasi epidemiologi pada faktor risiko

lingkunganmenurut WHO, 1993:28,dinyatakan bahwa metode
epidemiologi dikembangkan untuk menyelidikidistribusi
dandeterminan daripenyakitmenular, namun ruang lingkupnya pada
saat sekarang telah mcluas hingga kesemua aspek kesehatan dan
kesejahteraan yang berhubungan dengan agen biologi dan non-
biologi.

Berkaitan dengan manajemen kesehatan pada daerah wisata,

agen penyakit dapat saja terdiri dari agen kimia, fisik, biologi yang
memerlukan pengukuran, pengamatan danpencegahan dengan
cara berbeda. Daerah wisata dapat menjadi daerah transit
penularan yang potensial untuk beberapa penyakit menular.
 Upaya yang terintegrasi dan komprehensif sangat diperlukan
karena dapat melibatkan kebijakan antar negara. Think
Globally, Act Locally, merupakan upaya dan pemahaman yang
harus diterapkan dalam manajemen kesehatan pada daerah
wisata.

KESIMPULAN

1. Daerah Wisata merupakan sumber potensial penularan

penyakit
2. Jalur transportasi harus diawasi dan dikontrol sebagai
mediatransmisi penularan penyakit
DAFTAR P'USTAKA

1. WHO . International Travel And Health. WHO,

Geneva.(2003)

2. Achmadi, Umar Fahmi. Transformasi Kesehatan

Lingkungan dan Kesehatan Kerja di Indonesia. FKM
UI,Jakarta (1991).

3. IPCS International Programme On Chemical Safety . Env

Health Criteria 27 Guideline On Studies In
EnvironmentalEpidemiology. WHO,Geneva(1983).
 KAJIAN PELAKSANAAN KEBIJAKAN PENGENDALIAN

PENYAKIT AVIAN INFLUENZA DI LAPANG

ABSTRAK

Merebaknya kasus penyakit Avian Influenza (AI) sejak tiga tahun yang lalu di
berbagai wilayah Indonesia mempunyai dampak yang cukup serius mengingat dampak
sosial dan ekonomi yang ditimbulkannya. Berbagai upaya pemerintah untuk mencegah
penyebaran virus dan mengendalikan penyakit AI telah dilakukan, diantaranya dengan
membentuk Komite Nasional pengendalian flu burung. Dasar hukum berupa aturan
telah dilaksanakan melalui kebijakan strategis yang terdiri dari 9 (sembilan) tindakan
yang harus dilakukan secara simultan melalui Surat Keputusan Dirjen Bina Produksi
Peternakan No. 17/Kpts/PD.640/F/02/04 tentang Pedoman Pencegahan,
Pengendalian dan Pemberantasan Penyakit Hewan Menular AI pada unggas.
Meskipun strategi nasional yang disesuaikan dengan standar WHO, FAO dan
Organisasi Kesehatan Hewan Internasional (OIE) sudah dimiliki Indonesia, namun
kenyataannya penyakit AI belum dapat dikendalikan secara optimal, dan masih banyak
kendala dalam mengimplementasikan strategi tersebut. Kajian dan evaluasi terhadap
pelaksanaan kebijakan 9 strategi pengendalian AI di lapang menunjukkan bahwa
kendala utama adalah keterbatasan peternak dan petugas kesehatan hewan dalam
melakukan 3E: Early detection, Early reporting dan Early respons, yang berpengaruh
pada penyebaran kasus AI. Ini akibat penyuluhan dan sosialisasi tentang penanganan
dan pencegahan penyakit AI yang belum menjangkau seluruh lapisan masyarakat
sehingga tingkat pengetahuan peternak tentang AI kurang memadai. Lemahnya
koordinasi antar instansi terkait dan seluruh lapisan masyarakat menjadi faktor utama
penyebab hal ini. Oleh karena itu sosialisasi dan penyuluhan yang tepat, seimbang
dan komprehensif kepada masyarakat, peternak dan petugas lapang perlu dilakukan
secara berkelanjutan tidak hanya saat terjadi wabah.

Kata kunci: Avian influenza (AI), kajian, pengendalian

PENDAHULUAN

Penyakit Avian Influenza (AI) atau lebih populer dengan flu burung yang mewabah di
Indonesia sejak bulan September tahun 2003 telah menimbulkan kerugian bagi banyak pihak.
Penyakit ini menjadi perhatian dunia karena telah menular ke manusia pada tahun 1997 di
Hongkong. Setelah itu flu burung ditemukan di sejumlah negara Asia, yaitu Korea Selatan,
China, Jepang, Malaysia, Thailand, dan Vietnam. Penularan dari hewan ke manusia yang
menyebabkan kematian menimbulkan kekhawatiran terjadinya pandemi (wabah penyakit
infeksi yang menyebar ke seluruh dunia atau dalam wilayah yang luas) seperti pandemi yang
terjadi pada tahun 1918-1919 di kenal sebagai Spanish Flu (Influenza Spanyol), dan dianggap
sebagai wabah terbesar (SOEHADJI et al., 2006).

Penyakit AI disebabkan oleh virus Influenza Tipe A, dan berdasarkan patogenitasnya

dibedakan menjadi dua bentuk yaitu Low Pathogenic Avian Influenza (LPAI) dan High
Pathogenic Avian Influenza (HPAI). Selain menyerang ayam ras, penyakit AI juga menyerang
berbagai jenis unggas termasuk unggas eksotik yang dipelihara di kebun binatang. Banyak
pakar melaporkan bahwa unggas air seperti entog, angsa dan itik bertindak sebagai carrier
virus AI, sehingga dapat berperan sebagai ’inkubator’ virus, sementara ternak babi dapat
bertindak sebagai intermediate host dan diduga burung-burung liar dapat menyebarkan virus.
Realitas ini memungkinkan terjadinya penyebaran penyakit lebih luas termasuk penularan
pada manusia, karena AI merupakan salah satu penyakit zoonosis. Sejauh ini belum
dilaporkan terjadinya penularan langsung dari manusia ke manusia. Namun bagi para ahli
influenza di organisasi kesehatan dunia – WHO, kondisi di Asia cukup mengkhawatirkan,
karena kultur kehidupan di Asia, dimana manusia, ayam dan dapat hidup bersama-sama
dalam atu habitat. Hal ini merupakan lahan iseal untuk terjadinya mutasi silang .

Di Indonesia, virus LPAI sudah diisolasi dari itik dan burung Pelikan pada tahun 1983 dan
diidentifikasi sebagai H4N6 dan H4N2 (RONOHARDJO, 1983; RONOHARDJO et al., 1985
dan 1986). Penyebab wabah peyakit AI yang terjadi di Indonesia pada tahun 2003 telah dapat
diisolasi, dan selanjutnya dikarakterisasi sebagai virus AI dengan subtipe H5N1 yang sangat
patogen (DAMAYANTI et al., 2004; DHARMAYANTI et al., 2004; WIYONO et al., 2004).

Beberapa strain virus LPAI mampu bermutasi pada kondisi lapang menjadi virus HPAI.
Virus HPAI bersifat sangat infeksius dan dapat menyebabkan kematian hingga 100% dalam
waktu yang cepat pada unggas dengan atau tanpa gejala klinis, dan dapat menyebar dengan
cepat antar flock. Penularan ke unggas lain terjadi melalui kontak langsung dengan sumber
penularan sekresi hidung, mata dan feses dari unggas terinfeksi, udara di daerah tercemar,
peralatan kandang tercemar atau secara tidak langsung melalui pekerja kandang, kendaraan
pengangkut, pakan, dan lain-lain yang berasal dari daerah tercemar. Feses yang
terkontaminasi virus AI dapat tahan sampai waktu yang sangat lama terutama dalam keadaan
sejuk dan lembab (CIDRAP, 2004).

Wilayah Indonesia yang terjangkit AI pada tahun 2003 adalah 9 propinsi, meliputi 51
kabupaten. Pada akhir tahun 2004 tercatat 16 propinsi yang mencakup 100 kabupaten/kota
dan pada Desember 2005 HPAI telah endemis di 25 dari 33 propinsi di Indonesia
(ANONIMMUS, 2005). Sampai bulan Juli 2006 penyakit AI telah menyebar di 27 propinsi, dan
sekitar 20 juta unggas mati atau dimusnahkan, belum termasuk kematian di peternakan rakyat
(sektor 4) karena tidak ada data dukung yang akurat (NAIPOSPOS, 2006). Kekhawatiran akan
terjadinya pandemi flu burung tidak hanya berlaku di Indonesia dan Asia, namun telah menjadi
kekhawatiran global, karena kasus yang sama juga telah dilaporkan terjadi di Afrika dan
beberapa negara di Eropa (HADIYANTO, 2006).
 Merebaknya kasus penyakit AI di berbagai wilayah Indonesia diduga mempunyai dampak
yang cukup serius secara lintas sektoral,mengingat dampak sosial ekonomi yang
ditimbulkannya. Hal ini meliputi: (a) Keterpurukan industri perunggasan dan sarana
pendukungnya; (b) Meningkatnya impor produk peternakan; (c) Kepanikan masyarakat, yang
berakibat sebagian menghindari konsumsi telur dan daging ayam.

HERNOMO (dalam POULTRY INDONESIA, edisi Mei 2006), menyatakan bahwa kepanikan yang
terjadi di masyarakat bukan karena kurangnya sosialisasi yang dilakukan media, akan tetapi karena
materi dan pelaksanaan sosialisasi keliru. Sebagai contoh, sebelum merebaknya AI, jika ada kasus
pneumonia diarahkan ke Tuberkolosis, tetapi sekarang hal tersebut diarahkan menuju kasus
penyakit AI. Pemberitaan yang berlebihan tentang flu burung ternyata memiliki ekses bagi
perunggasan nasional. Kerugian yang dialami oleh masyarakat perunggasan bukan disebabkan
dampak langsung dari wabah flu burung, melainkan akibat pemberitaan yang berlebihan, tidak
proporsional, dan informasi yang parsial.

STRATEGI PENCEGAHAN, PENGENDALIAN DAN PEMBERANTASAN PENYAKIT AI

Sejak awal tahun 2004, pemerintah telah mengeluarkan kebijakan yang bersifat strategis dalam
rangka pencegahan penyebaran virus, terdiri dari 9 (sembilan) tindakan yang harus dilakukan secara
simultan. Kebijakan tersebut ditetapkan melalui Surat Keputusan Dirjen Bina Produksi Peternakan
No. 17/Kpts/PD.640 /F/02/04 tentang Pedoman Pencegahan, Pengendalian dan Pemberantasan
Penyakit Hewan Menular Avian Influenza (AI) pada unggas. Inti dari program tersebut adalah
pelaksanaan sembilan tindakan strategis yang mencakup (1) Peningkatan biosekuriti; (2) Vaksinasi;
(3) Depopulasi (pemusnahan terbatas) di daerah tertular; (4) Pengendalian lalu lintas unggas, produk
unggas dan limbah peternakan unggas; (5) Surveilans dan Penelusuran; (6) Pengisian kandang
kembali (restocking); (7) Stamping out (pemusnahan menyeluruh) di daerah tertular baru; (8)
Peningkatan kesadaran masyarakat (public awareness); dan (9) Monitoring dan evaluasi.

Perhatian pemerintah dalam menangani flu dengan membentuk kelembagaan di tingkat

Burung ditunjukkan dengan dibentuknya
Komite Nasional Pengendalian Flu Burung
melalui Peraturan Presiden (PP) No. 7/2006,
setelah beberapa waktu sebelumnya Presiden
memanggil enam gubernur, yang kemudian
ditindaklanjuti dengan sweeping unggas oleh
Pemda di wilayah Jabotabek (Jakarta, Bogor,
Depok, Tangerang dan Bekasi). Hal ini
dilakukan mengingat komunitas kesehatan
manusia dan hewan di luar maupun di dalam
negeri, termasuk WHO, FAO juga PBB
berkeyakinan bahwa dunia akan menghadapi
pandemi flu burung. Pemerintah Indonesia juga
serius dalam menghadapi pandemi, antara lain
Menko Kesra ”Task Force Flu Burung”, serta
menyiapkan perangkat hukum dan
meningkatkan sistem deteksi dini. Rapat
koordinasi di Bappenas awal Desember 2005,
telah menghasilkan ”Rencana strategis
pengendalian flu burung dan kesiapsiagaan
menghadapi pandemi influenza”. Strategi
nasional ini terbagi 2 (dua) yaitu 10 strategi di
hulu dan 5 strategi di hilir (Tabel 1). Sepuluh
strategi pengendalian AI di hulu menjadi
tanggung jawab Departemen Pertanian, dan
lima strategi kesiapsiagaan menghadapi
pandemi influenza di hilir di tangani
Departemen Kesehatan.
Tabel 1. Rencana strategi nasional
pengendalian flu burung dan
kesiapsiagaan menghadapi pendemi
influenza
No Departemen pertanian (hulu) Departemen kesehatan (hilir)
1. Pengendalian penyakit pada hewan Penguatan manajemen berkelanjutan
Penatalaksanaan kasus pada
2. hewan Penguatan surveilans pada manusia
Perlindungan kelompok resiko
3. tinggi Pencegahan dan pengendalian
Surveilans epidemiologi pada Penguatan kapasitas respon pelayanan
4. hewan kesehatan
Restrukturisasi sistem industri
perunggasan Komunikasi, informasi dan edukasi

1. Komunikasi, informasi dan edukasi

2. Penguatan dukungan peraturan
3. Peningkatan kapasitas
4. Penelitian kaji tindak
5. Monitoring dan evaluasi

Sumber: Trobos, edisi Januari 2006

 STUDI KASUS DI WILAYAH OUTBREAK

DAN PRODUSEN UNGGAS

Survei lapang menggunakan metode RRA (Rapid Rural Appraisal) dilakukan pada bulan
Desember 2005, di 7 (tujuh) propinsi yang memiliki kasus potensial, yaitu Propinsi Banten, Jawa
Barat, Jawa Timur, Sumatera Utara, Jambi, Riau dan Sulawesi Selatan. Survei ini bertujuan untuk
mendapatkan informasi lapang maupun persepsi dari lembaga dan instansi terkait di lokasi contoh
dalam menyikapi kasus penyakit AI melalui pendekatan “sembilan langkah” pencegahan,
pengendalian, dan pemberantasan penyakit AI dengan terbitnya SK Ditjennak Nomor
17/Kpts/PD.640/F/02.04. Pengumpulan data dilakukan dengan alat bantu kuesioner yang terdiri dari
kuesioner untuk peternak dan untuk Dinas Peternakan atau yang terkait dengan
HADIYANTO (2006) mengungkapkan bahwa, momentum ini penting bagi bangsa
Indonesia untuk mencoba belajar mengimplementasikan health communication, yang tidak hanya
melakukan penyadaran kepada masyarakat, tetapi sekaligus berupaya agar masyarakat secara sadar dan
bertanggungjawab untuk mengubah kebiasaan hidup sehari-hari menuju masyarakat yang peduli kesehatan
diri dan lingkungannya. Sehubungan dengan hal-hal tersebut di atas, suatu studi untuk melakukan
pengkajian penanganan dalam pengendalian penyakit AI di lapang telah dilakukan fungsi kesehatan hewan.
Sejumlah 266 peternak (sebagai responden) yang terdiri dari peternak/pemelihara ayam ras (pedaging dan
petelur), itik, ayam lokal, dan burung puyuh dari 13 kabupaten/kota dan mencakup 53 kecamatan telah
diwawancara (Tabel 2) dengan menggunakan kuesioner terstruktur. Jumlah responden yang diwawancara
berdasarkan jenis unggas yang dipelihara disajikan pada Tabel 3. Kegiatan ini

Tabel 2. Lokasi dan jumlah responden yang diwawancara

No Kabupaten/Kota (Provinsi) Jumlah Kecamatan Jumlah responden

1 Kota Tangerang (Banten) 5 10
2 Kota Sukabumi (Jawa Barat) 6 12
3 Kabupaten Sukabumi (Jawa Barat) 5 13
4 Kabupaten Kediri (Jawa Timur) 2 34
5 Kabupaten Blitar (Jawa Timur) 3 16
6 Kota Jambi (Jambi) 3 14
7 Kabupaten Batanghari 2 25
8 Kota Binjai (Sumatera Utara) 5 27
9 Kota Medan (Sumatera Utara) 2 28
10 Kota Pekanbaru (Riau) 3 16
11 Kabupaten Kampar (Riau) 4 21
12 Kabupaten Pinrang (Sulawesi Selatan) 8 22
13 Kabupaten Wajo (Sulawesi Selatan) 5 28
Jumlah 13 53 266
Tabel 3. Jumlah responden berdasarkan jenis unggas yang dipelihara

Jumlah peternak (responden)

Unggas air
No Kabupaten/Kota Ayam buras Broiler Layer (petelur) Burung puyuh
(Itik/entog)
1. Kota Tangerang 3 2 1 4 -
2. Kota Sukabumi 10 - 2
3. Kabupaten Sukabumi 4 7 1 - 1
4. Kabupaten Kediri 9 - 34 15 -
5. Kabupaten Blitar 10 - 7 - 1
6. Kota Jambi 12 1 - 2 1
7. Kota Batanghari 24 - - 1 -
8. Kota Binjai 25 - - 2 -
9. Kota Medan 28 - - - -
10. Kota Pekanbaru 2 13 1 - -
11. Kabupaten Kampar 6 15 - 3 -
12. Kabupaten Pinrang 4 3 16 - -
13. Kabupaten Wajo 2 25 1 - -
Jumlah (%) 122; (46%) 66; 25%) 63 (24%) 12 (4%) 3 (1%)

Sebagian besar responden menyatakan bahwa beternak unggas yang mereka usahakan
sebagai sumber utama mata pencaharian mereka dengan skala usaha yang bervariasi
tergantung dari ketersediaan sumberdaya (lahan, tenaga kerja dan modal) yang dimiliki.
Namun, bagi pemelihara ayam buras (backyard farm), memelihara ayam hanya merupakan
sampingan dan mereka tidak menyediakan sumberdaya (input) secara khusus.

Hasil kajian dan evaluasi menunjukkan bahwa kendala utama dalam penerapan 9
(sembilan) strategi pengendalian AI di lapang adalah keterbatasan peternak dan petugas
kesehatan hewan melakukan 3E: Early Detection (ED), Early Reporting (ERp) dan Early
Respons (ERs). Kelemahan dalam melakukan 3E ini sangat berpengaruh pada penyebaran
kasus AI ke daerah lain. Untuk itu beberapa hal penting yang harus dilakukan adalah: segera
melaporkan kasus diduga AI, segera melakukan deteksi dini (ED): Klinis, PA, laboratoris,
melaporkan segera hasil diagnosis positif (ERp), segera melakukan tindakan/gerak cepat
(ERs), dan penyakit AI wajib dilaporkan. Sehubungan dengan adanya gejala klinis dan
perubahan patologik yang bervariasi, maka diagnosis definitif AI hanya didasarkan atas isolasi
dan identifikasi virus. Diagnosis sangkaan dapat didasarkan atas riwayat kasus, gejala klinik,
perubahan patologik, dan tidak adanya penyakit pernafasan lain, khususnya Newcastle
disease (ND) dan kolera unggas.

Dari 9 strategi pengendalian, hanya 6 (enam) strategi yang dapat dilaksanakan oleh Dinas
Peternakan atau Dinas terkait yang membidangi fungsi kesehatan hewan. Aksi yang telah
dilakukan untuk pengendalian dan pencegahan penyakit AI antara lain vaksinasi, biosekuriti
dengan penyemprotan di kandang-kandang peternak, sosialisasi (public awareness) kepada
masyarakat melalui penyuluhan, brosur, maupun membentuk posko pengendalian penyakit AI,
pengendalian lalulintas ternak termasuk unggas, surveilans, monitoring dan pelaporan.
Sementara depopulasi, restocking dan stamping out hanya dilakukan pada kasus tertentu,
misalnya di Kota Tangerang pada tahun 2004, dan Kota Dumai yang melakukan stamping out
pada bulan Desember 2005. Pada kenyataannya pelaksanaan depopulasi (pemusnahan
selektif di daerah endemis tidak mudah dilakukan karena terkait dengan kompensasi yang
belum jelas.
Kalau dicermati, terdapat kelemahan mendasar dari penerapan kebijakan pemerintah
dalam penanggulangan AI, sehingga kebijakan tersebut berjalan kurang optimal. Menurut para
ahli hal ini disebabkan lemahnya koordinasi dari pusat hingga ke daerah, serta prioritas
penanganan yang tidak tepat, yaitu penekanan pada kesehatan manusia daripada hewan
sumber penyakit. Dalam kesempatan diskusi yang diprakarsai oleh Harian Kompas
bekerjasama dengan Food and Agribusiness Center (FAC) 12 Juni 2006 di Jakarta, Komnas
penanggulangan flu burung mengakui bahwa meskipun Indonesia sudah memiliki strategi
nasional yang disesuaikan dengan standar WHO, FAO dan Organisasi Kesehatan Hewan
Internasional (OIE), namun persoalan terbesar adalah pada implementasi strategi tersebut.
Dalam diskusi terungkap: (i) tidak ada riset terpadu dan terarah mengenai dinamika virus AI di
Indonesia, padahal virus AI termasuk labil secara genetik dan mudah beradaptasi untuk
menghindari pertahanan tubuh inang, (ii) tingkat pengetahuan masyarakat peternak sektor 3
dan 4 mengenai AI masih rendah, (iii) titik kritis lain adalah keterbatasan pengetahuan tenaga
kesehatan hewan yang menjadi ujung tombak penanggulangan AI.
Secara umum masyarakat belum memperoleh informasi yang utuh tentang upaya
penanganan dan pencegahan penyakit AI dari petugas maupun dari media baik elektronik atau
cetak. Meskipun sebenarnya dari pihak pemerintah daerah setempat.
(Petugas Dinas Peternakan) telah melaksanakan upaya penanganan penyakit AI (vaksinasi
dan penyemprotan), namun upaya tersebut kadang tidak disertai penjelasan tentang maksud
dan tujuannya, akibatnya pada saat ada kasus AI pada ternak unggas, masyarakat belum
dapat melakukan pelaporan secara dini kepada petugas yang berwenang. Kegiatan sweeping
dari rumah ke rumah sebaiknya dilakukan secara bijaksana dengan didahului kegiatan
komunikasi, informasi, edukasi (KIE) tidak dilakukan secara gegabah agar tidak menimbulkan
kecemasan/ kekhawatiran yang semakin memuncak. Seharusnya kegiatan komunikasi,
informasi, edukasi (KIE) tentang flu burung direncanakan secara matang dan komprehensif
agar memberikan dampak jangka panjang dan berkesinambungan (HADIYANTO, 2005).
Dari pengamatan dan wawancara langsung menunjukkan bahwa penyuluhan dan
sosialisasi tersebut belum menjangkau seluruh lapisan masyarakat. Sehingga tingkat
pengetahuan peternak tentang AI masih kurang memadai. Hal ini juga terjadi di lokasi lain di
Pulau Sumatera dan Kalimantan seperti yang dilaporkan oleh Tim Kajian AI FKH IPB (2005).
Hal ini menyebabkan peran aktif masyarakat umum dalam program pengendalian AI masih
sangat rendah dan sistem pelaporan penyakit/kematian unggas masih lemah. Selain tidak ada
kejelasan program kompensasi bagi peternak yang memusnahkan unggasnya yang terinfeksi,
ternyata banyak peternak yang diam-diam menjual unggasnya yang sakit ke pasar dan bukan
memusnahkannya. Walaupun demikian, sebagian besar responden menyatakan
kekhawatirannya dengan penyebaran penyakit AI (flu burung), karena disamping akan
merugikan usaha mereka, hal ini juga terkait dengan penularan kepada manusia. Mereka
masih awam tentang penyebaran penyakit flu burung ini baik pada ternak maupun manusia.
Masyarakat tidak tahu apa yang harus dilakukan dan berusaha menebak-nebak sendiri
sehingga yang muncul kepanikan. Untuk itu diperlukan penyuluhan yang komprehensif, tepat
dan seimbang dalam memberikan informasi-informasi yang relevan tentang penyakit AI.
 Seperti telah diketahui bahwa tindakan vaksinasi merupakan salah satu pilihan untuk
mencegah dan mengurangi penyebarluasan penyakit AI terutama pada daerah-daerah tertular
dan terancam. Deptan lebih memilih vaksinasi massal, karena jika stamping out yang dipilih,
berarti pemerintah harus memusnahkan seluruh ayam yang ada di Jawa karena flu burung
telah menyebar di seluruh wilayah ini. Pulau Jawa menyumbang 60% dari populasi ternak
unggas Indonesia sehingga kalau stamping out dilakukan akan memukul industri unggas
nasional (KOMPAS, 1 Oktober 2005). Vaksinasi AI harus dilaksanakan secara terpadu dengan
aspek penanggulangan yang lain, artinya vaksinasi AI pada unggas bukan merupakan strategi
yang berdiri sendiri (NAIPOSPOS, 2006). Cakupan vaksinasi lebih dari 70% terhadap unggas
di sektor 4 di lokasi survei sulit dilakukan, demikian pula monitoring hasil vaksinasi, sehingga
daya perlindungan vaksin belum diketahui dengan pasti. Banyak ahli berpendapat bahwa
vaksinasi AI pada unggas pada satu sisi dapat menekan kejadian/kerugian akibat AI, tetapi
pada sisi lain mempunyai efek yang merugikan pada kesehatan unggas dan manusia (TABBU,
2005). Vaksinasi AI tidak dapat menghilangkan infeksi virus, namun penggunaan vaksin
berkualitas yang didukung oleh biosekuriti ketat diharapkan dapat menekan pencemaran dan
tantangan virus AI di lapang, sehingga viral shedding (penyebaran virus) dan pencemaran
virus pada lingkungan dapat dicegah (NAIPOSPOS, 2006; TABBU, 2005). Akan tetapi jika
pelaksanaannya tidak benar bisa menimbulkan epidemik (CAPUA dan MARANGON, 2004).
OIE dan FAO dalam pertemuan di Roma 2004 merekomendasi program vaksinasi AI pada
unggas untuk mengendalikan penyebaran AI di negara-negara tertular dengan wabah yang
berat dan telah meluas. Sektor 4 merupakan tempat hidup berbagai jenis unggas dengan
kepekaan yang berbeda terhadap virus AI, sehingga cenderung sebagai carrier virus. Karena
antibodi AI/virus AI ditemukan pada kelompok unggas di sektor 4 yang tidak divaksinasi, maka
diduga unggas di sektor 4 mempunyai peran sebagai sumber penularan berbagai kasus flu
burung (TABBU, 2005). Program pengendalian akan semakin sulit apabila vaksinasi tidak
dilaksanakan serentak, bersamaan dan massal yang mencakup seluruh populasi terancam di
daerah tertular, terutama unggas rakyat. WIBAWAN dan MAHARDIKA (2005) menyarankan,
vaksinasi hendaknya disertai dengan strategi untuk memantau virus ganas yang mungkin
masih beredar di kandang dan sekitarnya. Dengan demikian, kebijakan vaksinasi hendaknya
disertai penyediaan dan pelaksanaan prosedur pemantauan virus yang pathogen pada ternak
yang divaksin. Sarana untuk menyimpan vaksin sebelum didistribusikan juga menjadi kendala,
misalnya kulkas terlalu kecil sehingga tidak cukup untuk menyimpan vaksin, jumlah spuit
otomatis sangat terbatas, sarana kendaraan untuk mobilitas ke lapangan belum terpenuhi
sehingga jangkauan sangat terbatas, selain itu insentif bagi petugas vaksinator di sektor 4
belum memadai.
Lalulintas ternak antar daerah (kabupaten/kota) maupun propinsi susah dikontrol. Jumlah
personil/petugas masih sangat terbatas. Di Kabupaten Kampar, misalnya banyak masyarakat
memelihara ikan lele, mereka menggunakan limbah ayam seperti kulit, usus dsb sebagai
pakan ikan yang didatangkan dari Sumatera Barat. Sementara di pos-pos pemeriksaan
lalulintas ternak pada malam hari tidak ada penjaga. Hal ini perlu dicarikan solusi agar
pengawasan lalulintas unggas dan produk unggas bisa optimal.
Faktor lain yang mempersulit penanganan AI diantaranya adalah kurang terkoordinasi
kerjasama yang harmonis antara beberapa instansi terkait. Lemahnya langkah-langkah
biosekuriti (di sektor 3 masih kurang, sedangkan di sektor 4 tidak menerapkan biosekuriti),
 tingginya prevalensi di sektor 3 dan 4 di daerah padat penduduk, tidak adanya kepercayaan
kalangan produsen terhadap kemampuan pemerintah untuk mengatasi masalah AI di
lapangan, serta kepanikan masyarakat akibat kebijakan pemerintah yang belum sepenuhnya
dipahami menjadi faktor-faktor penyebab kurang berhasilnya pengendalian penyakit AI
(SOEHADJI et al., 2006). Menurut SUDIRMAN (dalam TROBOS, Oktober 2006), penerapan
compartment base dalam penanggulangan AI di sector perunggasan dapat dipertimbangkan,
mengingat AI telah menyebar di hampir semua propinsi di Indonesia, oleh karena itu strategi
penanggulangan sebaiknya dimulai dari yang kecil agar lebih fokus. Compartment adalah
sebagai satu subpopulasi yang memiliki manajemen dan sistem biosekuriti yang sama (OIE
dalam situs www.oie.int), ini berbeda dengan zona yang lebih berdasarkan pada status
geografi suatu wilayah; cakupan compartment tidak ada batasan untuk setiap
perusahaan/industri. Kelompok tani kecil bisa masuk dalam satu compartment jika memiliki
sistem manajemen biosekuriti dan surveilans yang sama, dengan demikian pemberantasan AI
bisa lebih sederhana dan terarah.

KESIMPULAN DAN SARAN

Program ’9 (sembilan) tindak strategis’ yang telah dicanangkan oleh Pemerintah sudah
sangat baik, namun dalam kenyataannya implementasi langkah tersebut masih perlu diperkuat
dan dilaksanakan dengan penuh kebersamaan oleh berbagai pihak terkait. Oleh karena itu
sosialisasi perlu terus dilakukan, terutama kepada masyarakat, peternak dan petugas lapang.
Penyuluhan yang tepat, seimbang dan komprehensif perlu dilakukan secara berkelanjutan, tidak
hanya saat terjadi wabah.

Diperlukan koordinasi yang lebih baik antar instansi terkait (Departemen Pertanian,
Kesehatan dan Pemerintah Daerah) dan seluruh lapisan masyarakat sangat diperlukan untuk
mencapai sinergisme yang kondusif dalam menanggulangi penyakit AI. Demikian pula halnya
dengan penataan ulang kebijakan bagi back yard farm (sektor 4), dan strategi untuk
meningkatakan cakupan vaksinasi dan monitoring post vaksinasi.

Dalam pengaturan lalu lintas unggas dan produknya harus dilakukan secara ketat, untuk itu
perlu komitmen yang konsisten dari pelaku/pedagang unggas untuk mendapat surat keterangan
kesehatan hewan (SKKH) secara legal. Kasus flu burung menjadi momentum untuk melakukan
pembenahan banyak hal, termasuk mengubah perilaku masyarakat dan sistem peternakan ke
arah yang lebih sehat.
 DAFTAR PUSTAKA

ANONIMMUS. 2005. National Strategic Work Plan for the Progressive Control of Highly Pathogenic
Avian Influenza in Animals. Avian Influenza Control Campaign 2006-2008. An Indicative
Outline. Ministry of Agriculture, Jakarta, Indonesia. December 2005.

CAPUA, I. and S. MARANGON. 2004. Vaccination for Avian Influenza in Asia. Vaccine. 22:4137-
4138.
CIDRAP (Center for Infectious Disease Reseacrh & Policy). 2004. Highly Patthogenic Avian
Influenza (Fowl Plaque). Academic Health Center, University of Minnesota. pp 14.

DAMAYANTI, R., A. WIYONO, R. INDRIANI, N.L.P.I.

DHARMAYANTI dan DARMINTO. 2004. Gambaran Klinis dan Patologis pada Ayam
Terserang Flu Burung sangat Pathogenic (HPAI) di Beberapa Peternakan di Jawa Timur
dan Jawa Barat. JITV 9 (1): 128-135.

DHARMAYANTI, N.L.P.I., R. DAMAYANTI, A. WIYONO, R. INDRIANI dan DARMINTO. 2004. Identifikasi

Virus Avian Influenza Isolat Indonesia dengan Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction (RT-
PCR). JITV 9 (1): 136-143.

HADIYANTO. 2006. Komnas Flu Burung dan Urgensi

KIE. Poultry Indonesia, Edisi Mei 2006.
KOMPAS. 2005. Pemberantasan Flu Burung Terganjal Koordinasi. Kompas, 1 Oktober 2005.

NAIPOSPOS, T.S.P. 2006. Poultry Vaccination: A Key Tool in the Control of Avian Influenza. Paper
Presented at International Symposium on the Challenge and Implication of Avian Influenza on Human
Security: Sharing Problems, Sharing Solutions. Jakarta, 13-14 July 2006.

POULTRY INDONESIA. 2006. FPUI Konsisten Peduli Unggas. Poultry Indonesia, Edisi Mei 2006.
RONOHARDJO, P. 1983. Penyakit Cengesan atau Selesma pada Itik Tegal, Bali dan Alabio.
Penyakit Hewan (25) Semester 1: 61-71

RONOHARDJO, P., S. HARDJOSWORO, S. PARTOATMOJO and M.

PARTADIREDJA, 1985. The Identification and Distribution of
Influenza a Virus in Indonesia. Penyakit
Hewan XVII (29), Semester I : 249-257.
RONOHARDJO, P., S. PARTOUTOMO, S. HASTIONO, N. GINTING and S. POERNOMO. 1986.
The Status of Duck Disease in Indonesia. Penyakit Hewan XVIII (31). Semester 1: 86-93.

SOEHADJI, A. JAELANI , G.M.S. NOOR dan R.P.A. LELANA. 2006. Analisis Opini Publik:
Perkembangan Wabah Flu Burung di Indonesia. Hemera Zoa 83(1): 1-6.

TABBU, C.R. 2005. Vaksinasi sebagai Satu Paket Penanggulangan AI. Poultry Indonesia, Edisi Mei
2005.

TIM KAJIAN AVIAN INFLUENZA FKH-IPB. 2005. Kajian Seroepidemiologi Penyakit Avian Influenza
serta Strategi Penanggulangan dan Pencegahannya di Sumatera dan Kalimantan. Laporan
akhir. Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor bekerja sama dengan Departemen
Pertanian 2005.

TROBOS. 2006. Pergeseran Paradigma Penanganan

AI. Trobos, Edisi Januari 2006, Tahun ke VII,

No. 76.

TROBOS. 2006. Compartment Base: Strategi Kendali

AI. Trobos, Edisi Oktober 2006, Tahun ke

VII, No. 85

WIBAWAN, I.W.T. dan G.N. MAHARDIKA. 2005. Mekanisme Kekebalan terhadap Avian Influenza.
Hemera Zoa 83(1):7-17.

WIYONO, A., R. INDRIANI, N. L. P. I. DHARMAYANTI, R. DAMAYANTI dan DARMINTO. 2004.

Isolasi dan Karakterisasi Virus Highly Pahtogenic Avian Influenza Subtipe H5 dari Ayam Asal
Wabah di Indonesia. JITV 9 (1): 61-71.
 KARAKTERISASI DAN IDENTIFIKASI VIRUS AVIAN INFLUENZA (AI)

ABSTRAK

Avian Influenza merupakan suatu penyakit yang disebabkan oleh virus Influenza tipe A, termasuk famili
Orthomyxoviridae. Virus Influenza tipe A adalah suatu virus RNA beruntai tunggal yang mempunyai envelope
dengan delapan segmen, berpolaritas negatif dan berbentuk bulat atau filamen dengan diameter 50 – 120
nm x 200 – 300 nm. Virus Influenza tipe A ditemukan pada unggas, manusia, babi, kuda dan kadang-kadang
pada mamalia seperti cerpelai dan ikan paus. Virus ini dibedakan menjadi beberapa subtipe berdasarkan
protein antigen yang melapisi permukaan virus yaitu Haemaglutinin (HA) dan Neuraminidase (NA). Sehingga
penamaan subtipe berdasarkan HA dan NA yaitu HxNx, sebagai contoh H5N1,H9N2 dan lain-lain. Menurut
patogenitasnya dapat dibedakan menjadi 2 bentuk yaitu Highly Pathogenic Avian Influenza (HPAI) dan Low
Pathogenic Avian Influenza (LPAI). Penularan virus Avian Influenza telah terjadi di benua Amerika, Eropa,
Afrika dan Asia. Wabah Avian Influenza ini menyebabkan angka kematian yang tinggi pada unggas
peliharaan dan juga telah dilaporkan adanya kasus kematian pada manusia yang disebabkan oleh virus
Avian Influenza subtipe H5N1. Untuk mengantisipasi kondisi seperti ini, perlu adanya suatu usaha
pencegahan terhadap penyebaran Avian Influenza. Usaha-usaha strategi itu meliputi peningkatan
biosekuriti, depopulasi, vaksinasi, pengendalian lalu lintas unggas, surveilans burung dan evaluasi. Diagnosa
laboratorium berperan penting terhadap keberhasilan program pencegahan, pengendalian dan
pemberantasan Avian Influenza. Sekarang ini terdapat dua macam metode diagnostik terhadap virus Avian
Influenza yaitu metode konvensional (aspek virologi) dan metode molekuler. Metode konvensional biasanya
digunakan untuk diagnosis awal infeksi virus Avian Influenza. Metode konvensional biasanya membutuhkan
lebih banyak waktu dan biaya. Oleh karena itu, sekarang telah dikembangkan metode molekuler yang lebih
efektif dibandingkan metode konvensional. Berdasarkan teknik diagnostik yang ada, pada prinsipnya
diagnosis virus Avian Influenza dilakukan dengan uji serologi, isolasi dan identifikasi virus serta uji
patogenitas.

Kata kunci: Avian Influenza, Karakterisasi, Identifikasi, Diagnosa Laboratorium

PENDAHULUAN

Virus Influenza merupakan suatu virus RNA beruntai tunggal yang mempunyai envelope dengan
delapan segmen, berpolaritas negatif dan berbentuk bulat atau filamen dengan diameter 50 – 120 nm x 200

– 300 nm. Virus ini termasuk ke dalam famili Orthomyxoviridae. Berdasarkan perbedaan antigen
nukleoprotein dan matrik yang menyusunnya, virus ini diklasifikasikan menjadi tiga tipe yaitu virus Influenza
tipe A, B dan C. Virus Infuenza A ditemukan pada unggas, manusia, babi, kuda dan kadang-kadang pada
mamalia lain, misalnya cerpelai, anjing laut dan ikan paus. Sedangkan virus Influenza B dan C hanya
ditemukan pada manusia (OIE, 2004).
 Penyakit Avian Influenza yang terjadi benua Amerika, Eropa, Afrika dan Asia disebabkan virus Influenza
tipe A. Penyakit ini pertama kali ditemukan di Italia pada tahun 1878. Penyakit Avian Influenza ini ada yang
tergolong Highly Pathogenic Avian Influenza (HPAI) dan Low Pathogenic Avian Influenza (LPAI). Penyakit
HPAI ini terdaftar sebagai penyakit list A pada OIE manual (OIE, 2006).

Penelitian Avian Influenza di Indonesia pernah dilaporkan oleh

RONOHARDJO (1983); RONOHARDJO et al. (1985);
RONOHARDJO et al. (1986) yang berhasil mengisolasi virus LPAI dari itik, burung pelikan, bebek dan
diidentifikasi sebagai virus AI subtipe H4N6 dan H4N2. Namun semenjak itu tidak lagi terdengar beritanya
sampai kemudian pada bulan September-Oktober 2003 di Jawa Timur dan Jawa Barat terjadi wabah flu
burung pada ayam dengan mortalitas mencapai 100%. Wabah ini kemudian segera diikuti dengan wabah
serupa di Jawa Tengah, Daerah Istimewa Yogyakarta (DIY), Sumatera Barat, Lampung, Bengkulu, Bali,
Kalimatan Selatan, Kalimantan Barat dan yang terbaru terjadi wabah di Sulawesi Tenggara pada bulan Maret
2005 (DAMAYANTI et al., 2005). Laporan terakhir juga menyebutkan bahwa Avian Influenza menyebabkan
kematian pada manusia.

Melihat kondisi seperti ini maka Pemerintah Indonesia mengeluarkan kebijakan bahwa Avian Influenza
termasuk dalam kategori penyakit strategis di Indonesia. Untuk itu perlu adanya pencegahan, pengendalian
dan pemberantasan yang serius terhadap penyebaran virus Avian Influenza di Indonesia. Langkah-langkah
strategis telah dilakukan Pemerintah Indonesia untuk penanggulangan wabah Avian Influenza. Karakterisasi
dan identifikasi virus Avian Influenza secara cepat dan akurat merupakan bagian dari langkah-langkah
strategis tersebut.

Laboratorium-laboratorium di Indonesia yang mempunyai tugas mendiagnosis Avian Influenza berperan

penting terhadap keberhasilan program pencegahan, pengendalian dan pemberantasan Avian Influenza.
Oleh karena itu, perlu adanya suatu pengetahuan dan kemampuan pengujian dari masing-masing
laboratorium sesuai dengan standar OIE. Dalam makalah ini penulis mencoba melakukan kajian pustaka
tentang bagaimana cara mengidentifikasi virus Avian Influenza secara laboratorium sesuai dengan standar
OIE. Makalah ini diharapkan dapat memberikan manfaat untuk aplikasi diagnosis Avian Influenza pada skala
laboratorium.

KARAKTERISASI DAN IDENTIFIKASI VIRUS AVIAN INFLUENZA

Morfologi virus Avian Influenza

Avian Influenza atau flu burung merupakan suatu penyakit yang disebabkan oleh virus yang termasuk
virus Influenza tipe A. Masing-masing segmen dari virus Influenza tipe A terdiri dari protein Polymerase
component 2 (PB2), Polymerase component 1 (PB1) dan Polymerase component (PA) yang mengkodekan
Polymerase, Haemaglutinin (HA), Nucleocapsid (NP), Neuraminidase (NA), Matrix Protein 1 (M1), Matrix
Protein 2 (M2), Non Structural Protein 1 (NS1) dan Non Structural Protein 2 (N2). Protein-protein tersebut
mempunyai peran masing-masing terhadap kehidupan virus Influenza tipe A. Gambar 1 menunjukkan
struktur gen yang dimiliki oleh virus Influenza.

Diantaranya protein HA berperan dalam proses interaksi langsung dengan reseptor yang ada di
permukaaan sel (attachment). Sedangkan protein NA berperan dalam proses pelepasan virus dari sel
(budding). Disamping peran yang disebutkan di atas, protein HA dan NA juga berfungsi sebagai antigen.
Berdasarkan atas sifat antigen dari protein Haemaglutinin (HA) dan Neuraminidase (NA) yang menyusun
Influenza tipe A maka virus ini dapat diklasifikasikan lagi menjadi beberapa subtipe. Sehingga penamaan
subtipe virus Infuenza tipe A berdasarkan HA dan NA ini yaitu HxNx, sebagai contoh H5N1, H9N2 dan lain-
lain. Sampai saat ini ditemukan 15 jenis HA (H1 – H16) dan 9 jenis NA (N1– N9) (HARDER dan WERNER,
2006). Virus Infuenza tipe A yang menginfeksi manusia, babi dan kuda mempunyai protein HA dan NA yang
berbeda sedangkan pada burung dapat ditemukan semua subtipe HA dan NA. Sehingga pada unggas
kemungkinan bisa ditemukan 144 kombinasi antigen yang mampu membentuk subtipe yang berbeda
(HALMINTON, 2007).

DYAH AYU HEWAJULI et al.: Karakterisasi dan Identifikasi Virus Avian Influenza (AI)

Influenza A virus

Haemaglutinin (HA)

Gambar 1. Struktur gen virus Avian Influenza

Sumber: WELLENBERG (2006)

Karakterisasi virus Avian Influenza

Sifat Mutasi Virus Avian Influenza

Awalnya virus Avian Influenza bersifat host specific, artinya subtipe virus tertentu hanya spesifik
terhadap induk semang tertentu. Host specific ini ditentukan oleh struktur reseptor yang berbeda diantara
induk semang. Reseptor asam sialat alpha 2,3-galaktosa ditemukan pada unggas sedangkan asam sialat
alpha 2,6-galaktosa terdapat pada manusia. Sebagai contoh subtipe H5N1 biasanya menginfeksi unggas
sedangkan H1N1 ditemukan pada manusia. Namun demikian, akhir-akhir ini sering terjadi laporan kasus
Avian Influenza pada manusia yang disebabkan oleh subtipe H5N1. Hal ini terjadi karena virus Avian
Influenza mampu bermutasi melalui dua cara yaitu antigenic drift dan antigenic shift. Antigenic drift terjadi
karena perubahan struktur antigen yang bersifat minor pada antigen permukaan HA atau NA. Pola
mekanisme mutasi melalui antigenic drift ini hanya menyebabkan penambahan atau pengurangan urutan
nukleotida antigen HA, NA atau keduanya tanpa menghasilkan subtipe virus baru. Sedangkan antigenic shift
terjadi karena perubahan struktur antigen yang bersifat dominan pada antigen permukaan HA atau NA
melalui aktivitas dua macam subtipe virus Avian Influenza sehingga mampu menghasilkan virus subtipe baru
sebagai hasil rekombinasi genetik (HARDER dan WERNER, 2006).

Berdasarkan uraian di atas, virus Avian Influenza mempunyai sifat mudah mengalami mutasi sehingga
keadaan ini dapat membuat virus menjadi lebih patogen atau kurang patogen. Virus Avian Influenza
berdasarkan patogenitasnya dapat dibedakan menjadi dua bentuk yaitu Highly Pathogenic Avian Influenza
(HPAI) dan Low Pathogenic Avian Influenza (LPAI). Bentuk HPAI ditandai dengan angka kematian hampir
100% pada unggas terutama ayam buras dan ras dengan atau tanpa menunjukkan gejala klinis sebelum
terjadi kematian. Di Asia, virus Avian Influenza subtipe H5N1 termasuk virus strain HPAI. Unggas air dan
burung liar merupakan reservoir alami HPAI, tanpa menunjukkan gejala klinis, sehingga kedua unggas ini
merupakan salah satu media perantara yang dapat menyebarkan virus strain HPAI menjadi semakin luas.
Sedangkan bentuk LPAI ditunjukkan dengan gejala klinis yang lebih ringan, diantaranya gangguan saluran
pernafasan, depresi dan penurunan produksi telur. Namun demikian, virus strain LPAI dapat bermutasi
menjadi strain HPAI. Proses mutasi ini kemungkinan terjadi setelah virus strain LPAI yang terdapat di ungags
liar ditularkan pada ungags pemeliharaan.

Kemudian strain virus ini bersirkulasi selama beberapa bulan dalam unggas peliharaan. Hasil penelitian
menunjukkan bahwa virus strain LPAI mengalami mutasi antigenic drift selama bersirkulasi dalam tubuh
unggas peliharaan. Berdasarkan alasan ini maka World Organization for Animal Health (OIE) sekarang
menetapkan sistem penamaan HPAI dan LPAI menjadi hanya Avian Influenza. Avian Influenza termasuk
dalam daftar A di OIE, karena Avian Influenza merupakan suatu penyakit yang sangat berbahaya bagi
kesehatan hewan dan manusia (EID, 2006).

Sifat biologis virus Avian Influenza

Virus Avian Influenza tetap infektif dalam feses selama 30 – 35 hari pada temperatur 4°C dan selama 7
hari pada temperatur 20°C. Hal ini menunjukkan bahwa virus Avian Influenza dapat bertahan di lingkungan
dalam kurun waktu dan suhu tertentu. Sifat tersebut memungkinkan terjadinya penyebaran virus Avian
Influenza di alam ini. Penularan virus Avian Influenza dapat terjadi melalui kontak langsung antara ayam
sakit dengan ayam yang peka. Unggas yang terinfeksi virus Avian Influenza mengeluarkan virus dari saluran
pernafasan, konjungtiva dan feses. Penularan dapat juga terjadi secara tidak langsung misalnya melalui
udara yang tercemar material atau debu yang mengandung virus Avian Influenza (aerosol), makanan atau
minuman, alat atau perlengkapan peternakan, kandang, pakaian, kendaraan, peti telur, egg tray, burung,
mamalia, dan insekta yang mengandung virus Avian Influenza (TABBU, 2000).

Penyebaran virus Avian Influenza

Penularan virus Avian Influenza telah terjadi di benua Amerika, Eropa, Afrika dan Asia. Wabah Avian
Influenza telah dilaporkan di Vietnam, Thailand, Kamboja, Cina, Indonesia, Malaysia, Jepang, Laos dan
Korea Selatan. Wabah Avian Influenza ini menyebabkan angka kematian yang tinggi pada unggas
peliharaan dan juga telah dilaporkan adanya kasus kematian pada manusia yang disebabkan oleh virus
Avian Influenza subtipe H5N1 (HARDER dan WERNER, 2006). Di Indonesia, wabah Avian Influenza
pertama kali terjadi pada bulan Agustus 2003 di Kabupaten Pekalongan dan Tangerang. Wabah ini
menyerang ayam ras petelur, ayam ras pedaging, burung puyuh, ayam kampung dan itik. Angka kesakitan
(morbiditas) dan angka kematiannya (mortalitas) sangat tinggi yaitu mencapai 90%. Penyebaran wabah ini
berlangsung sangat cepat. Dalam waktu yang sangat singkat, hampir seluruh wilayah Indonesia tertular
Avian Influenza.
Penelitian yang dilakukan oleh DHARMAYANTI et al. (2004) menunjukkan bahwa wabah Avian Influenza
yang terjadi di Indonesia telah dapat diidentifikasi dan ditentukan subtipenya berdasarkan metode Reverse
Transcriptase Polymerase Chain Reaction (RT-PCR). Hasil menunjukkan bahwa semua isolat Jawa Timur
1, Jawa Timur 2, Jawa Barat 1, Jawa Barat 2, Jawa Barat 3, Jawa Barat 4, Jawa Barat 5, Jawa Barat 6 dan
DKI adalah virus Avian Influenza dengan subtipe H5. Kasus Avian Influenza yang menyebabkan kematian
manusia di Indonesia dilaporkan pada bulan Juli 2005 (DHARMAYANTI et al., 2004). Data setiap tahun
menunjukkan bahwa terjadi penambahan jumlah kasus kematian pada manusia yang disebabkan oleh Avian
Influenza di Indonesia. Akhir tahun 2006 wabah Avian Influenza kembali terjadi di Indonesia. Data terakhir
menyebutkan bahwa kasus Avian Influenza pada manusia masih terjadi (KOMPAS, 2007). Melihat kondisi
seperti ini, perlu adanya suatu usaha pencegahan terhadap penyebaran Avian Influenza supaya tidak
meluas.

Metode diagnosis Avian Influenza

Gejala klinis dan perubahan patologi yang ditimbulkan oleh Avian Influenza sangat bervariasi. Sehingga
Avian Influenza mempunyai diagnosis banding dengan beberapa penyakit lain diantaranya New Castle
Diseases, Infectious Laringotracheitis, Fowl Plaque, Fowl Cholera dan penyakit sistemik lainnya. Untuk itu
diperlukan suatu diagnosis definitif berdasarkan hasil diagnosis laboratorium. Faktor-faktor penting yang
perlu diperhatikan sebelum melakukan diagnosis laboratorium adalah jenis sampel dan cara penanganannya
(HARDER dan WERNER, 2006). Sampel yang akan diperiksa dapat diperoleh dari unggas hidup maupun
mati. Jenis sampel yang biasa diambil dari unggas mati meliputi organ (trakea, air sac, usus, ginjal, paru,
otak, hati), swab kloaka, swab oro-nasal dan feses. Sedangkan yang dapat digunakan dari unggas hidup
adalah swab kloaka, swab trakea, feses dan serum. Sampel swab kloaka dan organ ditempatkan dalam
media transpor yang telah berisi larutan Phosphate Buffer Saline (PBS) dengan pH 7,0 – 7,4 dan antibiotik
(penisilin 2000 unit/ml, streptomisin 2 mg/ml, gentamisin 50 µg/ml dan mycostatin 1000 unit/ml). Konsentrasi
media transpor dinaikkan menjadi 5 kali lipat apabila digunakan untuk sampel swab kloaka dan feses.
Sampel harus segera diperiksa setelah diinkubasi selama 1 sampai 2 jam dalam suhu ruangan. Tetapi
apabila sampel tidak memungkinkan untuk dikerjakan secepatnya, maka sampel harus disimpan pada suhu
4°C selama 4 hari. Untuk jangka waktu penyimpanan lebih dari 4 hari, sampel harus disimpan pada suhu -
80°C (OIE, 2004).

89
 DYAH AYU HEWAJULI et al.: Karakterisasi dan Identifikasi Virus Avian Influenza (AI)

Pada saat ini, terdapat dua macam metode diagnostik yang diterapkan untuk infeksi virus Avian
Influenza yaitu metode konvensional (aspek virologi) dan metode molekuler. Sampai saat ini metode
konvensional merupakan metode yang masih rutin dilakukan di laboratorium-laboratorium diagnostik.
Metode ini biasanya digunakan untuk diagnosis awal infeksi virus Avian Influenza. Akan tetapi uji-uji yang
termasuk metode konvensional biasanya membutuhkan lebih banyak waktu dan biaya. Untuk itu sekarang
telah dikembangkan suatu metode molekular yang lebih efektif dibandingkan metode konvensional
(HARDER dan WERNER, 2006). Berdasarkan teknik diagnostik yang ada, pada prinsipnya diagnosis virus
Avian Influenza dilakukan dengan uji serologi, isolasi dan identifikasi virus serta uji patogenitas. Gambar 2 di
bawah ini menunjukkan tahapan deteksi dan klasifikasi virus Avian Influenza dalam laboratorium.

Metode konvensional

Uji serologi digunakan untuk mendeteksi titer antibodi terhadap virus Avian Influenza. Uji ini
menggunakan sampel serum dari hewan yang diduga terinfeksi virus Avian Influenza. Sampel serum yang
telah diperoleh dapat diuji dengan uji Haemagglutination (HA) dan Haemagglutination Inhibition (HI),
Neuraminidase Inhibition (NI), Agar Gel Immunodiffusion (AGID), Serum Neutralisation (SN) dan Enzyme-
Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Dalam makalah ini hanya dibahas tentang uji HA, HI, NI, AGID dan
ELISA berdasarkan standar referensi OIE.

Haemagglutination (HA) dan Haemagglutination Inhibition (HI)

Uji HA dan HI dilakukan berdasarkan sifat virus Avian Influenza yang dapat mengaglutinasi sel darah
merah (RBC) dan kemampuan antibodi spesifik untuk menghambat aglutinasi tersebut. Hemaglutinasi
merupakan proses penggumpalan sel darah merah yang terlihat seperti butir-butir pasir. Uji ini merupakan
salah satu uji serologi standar yang direkomendasikan OIE untuk mendeteksi keberadaan antibodi yang
terdapat pada serum yang diperiksa. Pada prinsipnya uji HI adalah reaksi ikatan antara antibodi yang
terkandung dalam serum yang diperiksa dan jumlah antigen hemaglutinin Avian Influenza yang digunakan
sebanyak 4 HAU (Haemagglutination Unit). Umumnya uji ini cukup sensitif dan mampu memberikan hasil
yang spesifik terhadap subtipe antigen virus Avian Influenza. Reaksi silang heterolog kemungkinan bisa
terjadi antara subtipe-subtipe virus Influenza tipe A. Namun demikian, reaksi homolog akan selalu
menunjukkan hasil yang lebih sering terjadi daripada reaksi heterolog.

Inkubasi
4–7
hari,
Sampel – swab 37°C
trakea/kloaka/fes
es/organ SPF/SAN
Inokulasi ke telur Hemagluti
berembrio nasi
 umur 9 – 11
hari

HA (-)
pasase
kedua

HA (+)

Identifikasi subtipe

Klasifikasi HI and NI

HPAI/LPAI

Reverse
Patogenitas transcriptase PCR
Intravenous
Karakterisasi pathogenicity RT-PCR
HAO cleavage
side Index (IVPI)

Gambar 2. Deteksi dan klasifikasi Avian Influenza (OIE edisi kelima, 2004)

Sumber: WELLENBERG (2006)

 Disamping yang telah disebutkan di atas, uji HA dan HI juga masih mempunyai beberapa kelebihan dan
kekurangan lainnya. Kelebihan dari uji ini adalah relatif simpel, murah serta reagen dan RBC yang diperlukan
untuk pengujian dapat dipersiapkan dengan mudah oleh masing-masing laboratorium. Sedangkan
kekurangan-kekurangan yang dimiliki uji ini diantaranya titrasi antigen harus dilakukan setiap pengujian,
interpretasi hasil uji memerlukan keahlian khusus serta adanya prosedur yang berbeda dari masing-masing
laboratorium dapat memberikan hasil yang berbeda (SELLECK, 2007).

Prosedur standar dalam uji HI menggunakan microtiter plate V dengan ukuran 0,075 ml. Reagen yang
diperlukan dalam uji ini adalah PBS 0,1 M dalam kondisi pH 7,0 – 7,2. RBC dapat diambil dari minimal 3
ayam Specific Pathogen Free (SPF). Tetapi apabila tidak tersedia ayam SPF, maka RBC dapat diperoleh
dari ayam Specific Antibody Neutralisation (SAN). Kemudian RBC yang telah diperoleh dilarutkan dalam
larutan Alsever dengan perbandingan volume sama. Selanjutnya RBC harus dicuci dengan PBS sebanyak
3 kali sebelum digunakan sebagai suspensi RBC 1%. Untuk mengidentifikasi antigen Avian Infuenza maka
diperlukan panel antigen AI subtipe H1-H16, apabila uji HI yang dilakukan menggunakan salah satu subtipe
antigen AI serta mampu menginhibisi terjadinya aglutinasi maka positif terhadap subtipe tersebut. Setiap
melakukan pengujian HI harus selalu menggunakan kontrol positif dan negatif terhadap antigen dan antisera
(OIE, 2004).

Hasil uji HI dapat diintepretasikan sebagai antibodi negatif terhadap subtipe antigen AI apabila serum
kontrol menunjukkan aglutinasi serta serum yang diuji tidak mengalami inhibisi. Serum yang menunjukkan
inhibisi pada pengenceran 1 : 16 atau lebih besar dari 4HAU maka antigen dinyatakan positif mengandung
antibodi yang memadai. Namun demikian, ada beberapa laboratorium yang lebih memilih menggunakan
8HAU dalam melakukan uji HI (OIE, 2004). Pengujian HI di Balai Besar Penelitian Veteriner menggunakan
4HAU. Hasil titer antibodi AI dianggap rendah apabila <4 log 2, titer antibodi AI sedang antara 4 – 7 log2,
titer antibodi AI tinggi apabila > 7 log 2. Peraturan Menteri Pertanian No 28/OT 140/5/2008 menyatakan
pemeriksaan serologi yang dilakukan dengan uji HI yang menggunakan antigen H5 pada unggas yang
divaksinasi dengan vaksin AI dianggap protektif apabila titer bereaksi positif ≥ 4 log2. Namun demikian pada
kondisi lapangan, titer yang dianggap protektif bervariasi tergantung dari kondisi peternakan tersebut.
Penelitian yang dilakukan INDRIANI dan DHARMAYANTI (2006) untuk mendeteksi antibodi AI H5N1 dari
ayam yang mendapat program vaksinasi menggunakan vaksin inaktif AI H5N1 pada sampel kuning telur
memperlihatkan sampel ekstrak kuning telur dan serum baik dari flok yang divaksinasi dengan vaksin AI
A/Chicken/West Java/67-2/2003, maupun flok yang divaksinasi dengan vaksin komersial memberikan hasil
positif antibodi virus AI H5N1 dengan uji HI. Hasil titer antibodi virus AI H5N1 terlihat berkisar antara 2 – 9
log2 pada ekstrak kuning

Gambar 3. Visualisasi hambatan hemaglutinasi dari hasil uji HI. Bentuk butir darah merah yang menyerupai
tetesan air mata menandakan reaksi aglutinasi hambat yang disebabkan oleh antibodi anti
hemaglutinin di dalam sampel uji dengan antigen virus AI

Sumber: WELLENBERG (2006)

DYAH AYU HEWAJULI et al.: Karakterisasi dan Identifikasi Virus Avian Influenza (AI)

Telur dan serum berkisar 4 – 8 log2. Perbedaan ini mungkin disebabkan kandungan antibodi yang diturunkan
oleh induk dalam kuning telur mempunyai titer antibodi lebih rendah dari kandungan titer antibodi yang
terdapat di dalam serum induk. BECK et al. (2003) menyatakan juga bahwa antibodi AI dapat dideteksi lebih
awal dari ayam yang terinfeksi virus hidup daripada ayam yang divaksinasi AI adjuvan.

Neuraminidase Inhibition (NI)

Neuraminidase Inhibition merupakan suatu uji serologi untuk mengetahui titer antibodi dari hewan yang
terinfeksi virus Avian Influenza serta untuk mengidentifikasi subtipe Neuraminidase dari isolat virus Avian
Influenza. Prinsip dasar dari uji ini adalah adanya suatu ikatan antara antibodi dalam serum yang diperiksa
dan subtipe antigen Neuraminidase tertentu. Reaksi silang heterolog antara subtipe-subtipe virus Influenza
A tidak ditemukan dalam uji ini. Uji Neuraminidase Inhibition ini biasanya dilakukan sebagai Differentiating
Infected from Vaccinated Animal (DIVA) untuk mendeteksi spesifik antibodi anti-N (OIE, 2004). Pada
pengujian ini, enzim virus Neuraminidase bereaksi dengan substrat (fetuin) dan melepaskan sialic acid.
Adanya sialic acid ditentukan secara chemis dan oleh thiobarbituric acid yaitu dihasilkan warna merah muda.
Chromiphor warna merah muda ini dibaca dengan spektrofotometer dengan panjang gelombang 549 nm
(WRININGATI, 2006).

Uji Neuraminidase Inhibition ini tidak umum dilakukan oleh laboratorium-laboratorium diagnostik dikarenakan
lebih sulit, lebih lama dan diperlukan suatu keahlian khusus untuk interpretasi hasil serta membutuhkan
microtiter plate tertentu. Gambar 4 menunjukkan visualisasi hasil uji Neuraminidase Inhibition. Timbulnya
warna merah muda menunjukkan hasil negatif sedangkan tidak berwarna menunjukkan hasil positif. Kontrol
fetuin harus menunjukkan warna merah muda.

Agar Gel Immunodiffusion (AGID)

Semua virus Influenza tipe A memiliki kemiripan dengan antigen protein Nukleokapsid dan Matrik. Hal
inilah yang menjadi dasar dilakukan uji AGID. Uji AGID merupakan uji untuk mendeteksi antibodi terhadap
kelompok virus Influenza tipe A. Dalam pelaksanaannya, uji ini relatif mudah dan murah sehingga uji AGID
ini lebih banyak diaplikasikan di laboratorium-laboratorium diagnostik. Di Indonesia, terdapat beberapa
laboratorium veteriner yang melakukan uji AI dengan AGID, diantaranya adalah Balai Besar Penelitian
Veteriner, Balai Besar Veteriner, serta Balai Penyidikan dan Pengujian Veteriner. Akan tetapi, uji ini kurang
sensitif serta tidak spesifik terhadap subtipe virus Avian Influenza (SELLECK, 2007). BECK et al. (2003)
mendeteksi antibodi dari serum dan kuning telur yang berasal dari 21 hari pasca vaksinasi AI dengan adjuvan
memperlihatkan antibodi terdetekasi lebih awal dengan uji AGID daripada uji HI.
 Gambar 4. Uji Neuraminidase inhibition

Sumber: WELLENBERG (2006)

WARTAZOA Vol. 18 No. 2 Th. 2008

Bahan-bahan yang dibutuhkan dalam pengujian ini adalah 8% NaCl dalam 0,1 M larutan PBS, 1%
agarose, antigen, antiserum positif dan serum yang akan diperiksa. Suspensi agarose dengan larutan PBS
dituang sebanyak 2 – 3 mm dalam cawan petri. Padatan agar yang telah terbentuk kemudian dibuat lubang
dengan pola 6 lubang heksagonal mengelilingi 1 sentral lubang. Lubang sentral untuk pengenceran antigen,
lubang no. 1, 3 dan 5 untuk pengenceran antiserum positif sedangkan lubang no. 2, 4 dan 6 untuk
pengenceran serum. Antigen yang digunakan dalam pengujian ini diperoleh dari cairan chorio-allantois telur
SPF umur 10 hari yang telah diinfeksi dengan virus Influenza tipe A yang sudah mengalami inaktivasi.
Aktivasi cairan ini menggunakan larutan 0,1% formalin atau 1% beta propiolakton. Antigen dan antiserum
positif yang akan digunakan sebaiknya dititrasi terlebih dahulu untuk menentukan working solution nya (OIE,
2004).

Interpretasi hasil dari AGID dilakukan setelah cawan petri tersebut diinkubasikan selama 24 – 48 jam.
Plate diperiksa pada iluminator lapang gelap untuk melihat keberadaan garis presipitasi pada antiserum
positif. Apabila garis presipitasi pada antiserum positif belum terbentuk selama inkubasi 24 jam maka plate
diinkubasikan kembali setelah 24 jam. Serum positif antibodi ditunjukkan dengan adanya garis presipitasi
penuh atau sebagian dengan ciri yang sama dengan
garis presipitasi yang terbentuk oleh antiserum positif. Apabila garis presipitasi terlihat tidak penuh atau
berbelok dari antiserum positif maka diinterpretasikan sebagai serum positif lemah. Sedangkan serum
negatif antibodi akan menunjukkan tidak ada garis presipitasi dengan anti serum positif. Masing-masing hasil
interpretasi diberi skor dari negatif (-) sampai positif kuat (> 3+) tergantung pada kuat dan jarak garis
presipitasi yang terbentuk (OIE, 2004).

Enzym Linked Immunosorbent Assay (ELISA)

Prinsip metode immunoassay adalah reaksi antara antigen dan antibodi spesifik dimana hasil reaksi
dapat diamati dengan menggunakan suatu label atau marker. ELISA merupakan salah satu metode immuno
assay yang paling banyak digunakan. Pada uji ini reaksi terjadi dengan mengabsorbsikan antigen atau
antibodi pada suatu solid phase serta dengan memberi label suatu enzim. Enzim yang paling banyak
digunakan adalah Horseradish peroxidase dan Alkaline phosphatase. Enzim ini dapat dilabel baik pada
antibodi maupun antigen yang akan membentuk warna dengan penambahan suatu substrat. Pengujian
secara kuantitatif dapat dilakukan dengan mengamati intensitas warna yang terbentuk (BURGESS, 1988).

Gambar 5. Uji agar immunodifusi

Sumber: PESONA SCIENTIFIC (2005)

DYAH AYU HEWAJULI et al.: Karakterisasi dan Identifikasi Virus Avian Influenza (AI)

Saat ini ELISA sudah tersedia dalam bentuk kit komersial sehingga mudah diaplikasikan. Uji ini juga
sesuai untuk pengujian dalam jumlah banyak dikarenakan satu kit ELISA dapat digunakan untuk menguji
sebanyak 48 sampel dalam satu kali pengujian. Spesifisitas dan sensitivitas dari uji ini dapat ditingkatkan
sehingga dapat digunakan untuk mendeteksi antigen atau antibodi yang lebih spesifik. Akan tetapi uji ini
membutuhkan biaya dan peralatan yang mahal (SELLECK, 2007)

Teknik pengujian dengan metode ELISA dapat dilakukan dalam beberapa format, pemilihan format
tergantung dari besar molekul yang akan dideteksi serta tingkat sensitivitas dan spesifisitas yang
dikehendaki. Terdapat dua format dalam metode ELISA yaitu Competitive ELISA dan Non Competitive
ELISA. Competitive ELISA merupakan format yang banyak dipakai untuk pengujian antigen, toksin serta
senyawa dengan molekul kecil. Competitive ELISA dapat dibedakan menjadi Direct Competitive dan Indirect
Competitive. Non Competitive Sandwich ELISA terutama digunakan untuk mendeteksi makromolekul. Tetapi
format ini kurang sensitif untuk mendeteksi senyawa dengan berat molekul kecil seperti antigen dan toksin
(BURGESS, 1988).

Avian Influenza competitive ELISA (AIVc-ELISA) dikembangkan untuk menggantikan Agar Gel
Immunodiffusion Assay (AGID) sebagai uji untuk mendeteksi antibodi terhadap kelompok Influenza tipe A.
AIVc-ELISA dapat diterapkan pada serum ayam, babi, kuda dan manusia. Uji AIVc-ELISA lebih sensitif
dibandingkan dengan uji AGID dan HI (ZHOU et al., 1997).

Antigen dan antibodi monoklonal yang akan digunakan harus distandardisasi terlebih dahulu untuk
menentukan pengenceran yang tepat. Antigen distandardisasi pada pengenceran 1 : 200, 1 : 400, 1 : 800, 1
: 1600, 1 : 3200, 1 : 6400 dan 1 : 12800 sedangkan standardisasi antibodi monoklonal dilakukan pada
pengenceran 1 : 200, 1 : 400, 1 : 800, 1 : 1600 dan 1 : 3200. Pengenceran yang paling tepat untuk digunakan
dalam pengujian ini dilihat berdasarkan nilai tertinggi dari Optical Density (OD) dan Percentage Inhibition
(PI). Hasil titer antibodi dari serum yang diuji dengan AIVc-ELISA dihitung berdasarkan PI. PI merupakan
persentase penghambatan dari antibodi monoklonal (yang secara normal tidak berada dalam serum) oleh
antibodi yang ada dalam serum. Pengujian Avian Influenza dengan ELISA di Balai Besar Penelitian Veteriner
hanya diaplikasikan untuk keperluan penelitian.

Isolasi dan identifikasi virus Avian Influenza

Sampel yang digunakan untuk isolasi virus Avian Influenza dapat diperoleh dari unggas hidup maupun
mati. Sampel dari unggas hidup dapat berupa swab kloaka, swab trakea dan feses segar sedangkan dari
unggas mati meliputi organ (trakea, air sac, usus, ginjal, paru, otak, hati), swab kloaka, swab oro-nasal dan
feses. Apabila sampel dari feses atau organ maka terlebih dahulu harus disentrifus dengan kecepatan 1000
g untuk memperoleh supernatan. Supernatan yang telah diperoleh kemudian diinokulasikan pada telur ayam
SPF atau SAN yang berumur 9 – 11 hari. Telur
 Gambar 6. Isolasi virus AI dari telur ayam bertunas SPF

WARTAZOA Vol. 18 No. 2 Th. 2008

Gambar 7. Reaksi aglutinasi yang terjadi pada cairan allantois yang mengandung virus AI setelah
direaksikan dengan RBC

Sumber: PESONA SCIENTIFIC (2005)

diamati setiap hari terhadap kematian embrio. Apabila kematian embrio terjadi kurang dari 24 jam pasca
inokulasi maka dianggap sebagai kematian karena faktor non spesifik. Sedangkan telur-telur yang embrionya
mati lebih dari 24 jam pascainokulasi maka harus dilanjutkan dengan pemeriksaan terhadap hemaglutinasi
(HA) untuk mendeteksi virus Influenza tipe A atau Avian Paramyxovirus. Cairan alantois yang tidak
menunjukkan aktivitas hemaglutinasi dianggap sebagai virus negatif hemaglutinasi. Namun demikian,
partikel-partikel virus kemungkinan masih ada sehingga diperlukan pasase II. Tetapi jika pasase II, cairan
alantois tidak menghasilkan aktivitas HA, maka sampel dianggap sebagai virus negatif hemaglutinasi (OIE,
2004).

Saat ini telah dikembangkan suatu uji yang langsung dapat mendeteksi virus Influenza tipe A dalam
waktu 15 menit. Uji ini merupakan metode immunoassay dengan cara melabel enzim pada antibodi
monoklonal sehingga mampu mengikat antigen nucleo protein dari virus Influenza tipe A. Secara komersial
uji ini tersedia dalam bentuk kit (rapid test) dengan beberapa nama dagang. Sensitivitas dari uji ini bervariasi
tergantung dari spesimen yang akan diperiksa. Kekurangan dari uji ini adalah harga kit yang mahal dan tidak
mampu mendeteksi subtipe dari Influenza tipe A (CHAN et al., 2002).

Uji patogenitas virus Avian Influenza

Bentuk Highly Pathogenic Avian Influenza (HPAI) termasuk strain virus yang ganas. Gejala klinis yang
biasanya ditunjukkan oleh HPAI pada ayam adalah leleran mata yang berlebihan, gangguan saluran
pernafasan, sinusitis, pembengkatan pada wajah dan kepala, sianosis pada kulit. Kematian mendadak pada
ayam juga dapat terjadi tanpa menunjukkan gejala klinis. Namun demikian, gejala klinis yang ditimbulkan
sangat bervariasi tergantung dari induk semang, umur, infeksi sekunder dan kondisi lingkungan. Kondisi
lingkungan yang memburuk dapat menyebabkan bentuk LPAI berubah menjadi HPAI (TABBU, 2000). Avian
Influenza termasuk dalam kategori penyakit berbahaya dan dapat menyebabkan angka kematian yang tinggi
pada unggas dan manusia serta dapat ditularkan melalui inhalasi maka pelaksanaan uji patogenitas AI harus
dilakukan dalam Biosafety Level 3 (BSL 3) untuk menurunkan atau mengeliminasi potensi tertularnya virus
AI ke lingkungan sekitar.

Uji patogenitas Avian Influenza dilakukan dengan menginokulasikan 0,2 ml virus Avian Influenza dari
allantoic-fluid yang sebelumnya telah diencerkan 1/10 dalam Phosphate Buffer Saline (PBS) yang
mengandung antibiotika secara intra vena pada 8 ekor ayam berumur 4 – 8 minggu. Setiap melakukan uji
patogenitas Avian Influenza diperlukan kontrol negatif, dengan cara menginokulasikan Phosphate Buffer
Saline (PBS) steril pada 2 ekor ayam berumur 4 – 8 minggu. Pengamatan terhadap gejala klinis yang timbul
dilakukan setiap hari selama 10 hari (OIE, 2004).

Virus Avian Influenza mempunyai beberapa subtipe yang berbeda. Dari sekian banyak subtipe tersebut,
hanya subtipe H5 dan H7 yang bersifat patogen. Namun demikian, tidak semua subtipe H5 dan H7 bersifat
patogen (WELLENBERG, 2006). Klasifikasi

DYAH AYU HEWAJULI et al.: Karakterisasi dan Identifikasi Virus Avian Influenza (AI)

HPAI menurut OIE (2004) berdasarkan beberapa kriteria yaitu pertama, HPAI mampu menyebabkan angka
kematian sebesar 70 – 80% pada ayam berumur 4-8 minggu apabila virus diinokulasikan melalui intra-vena
(Intravenous Pathogenicity Index). Kedua, isolat bukan termasuk HPAI apabila Intravenous Pathogenicity
Index menunjukkan angka kematian hanya 10 – 50% serta tidak ditemukannya Cytopathic Effect (CPE) pada
biakan jaringan yang mengandung tripsin. Ketiga, LPAI tidak akan menimbulkan CPE pada biakan jaringan
yang tidak mengandung tripsin serta hasil sequencing menunjukkan H5 dan H7 yang tidak patogen (OIE,
2004).

Patogenitas dari virus Avian Influenza subtipe H5 dan H7 dapat dikonfirmasi berdasarkan sequencing
genom. Virus Avian Influenza subtipe H5 dan H7 disebut patogen apabila pada sequencing ditemukan
adanya asam amino ganda (arginin atau lisin) pada cleavage site. Sebagai contohnya subtipe H7 LPAI
mempunyai susunan asam amino –PEIPKGR*GLF-atau –PEPKGR*GLF- pada cleavage site. Sedangkan
subtipe H7 HPAI mempunyai susunan asam amino –
PEIPKKKKR*GLF-,PETPKRKRKR*GLF,-PEIPKKR EKR*GLF-,-PETPKRRRR*GLF pada cleavage site
(OIE, 2004). Saat ini sequencing genom virus Avian Influenza sudah dapat dilakukan di Balai Besar
Penelitian Veteriner.

Metode molekuler

Kualitas sampel adalah faktor penting dalam isolasi dan identifikasi virus Influenza. Jaringan yang sudah
mengalami autolisis atau swab yang terkontaminasi dapat mengurangi sensitivitas dan spesifisitas pada
isolasi dan identifikasi virus Influenza sehingga diperlukan uji yang lebih sensitif dan spesifik. Karena alasan
inilah, teknik-teknik yang berkembang saat ini seperti Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction
(RT-PCR) banyak digunakan untuk mendeteksi virus Influenza (OIE, 2004). Waktu yang dibutuhkan juga
lebih cepat apabila dibandingkan dengan isolasi dan identifikasi dengan kultur pada jaringan atau telur SPF.
Hal ini dikarenakan teknik RT-PCR langsung dapat mendeteksi Avian Influenza dari swab kloaka atau swab
trakea dalam media transpor. Selain itu, isolat virus Avian Influenza dari cairan allantois telur SPF juga dapat
digunakan sebagai sampel untuk RT-PCR (SUAREZ et al., 1997).

Avian Influenza adalah virus single-stranded RNA sehingga pada reaksi PCR diperlukan suatu tahap
sintesa copi DNA (cDNA). Tahap ini membutuhkan suatu enzim transcriptase balik (reverse transcriptase)
(DIAMOND, 2006). Beberapa enzim transcriptase balik yang dapat digunakan antara lain Taq DNA
Polymerase, mesophilic viral reverse transcriptase (RTase) dan Tth DNA Polymerase. Taq DNA Polymerase
adalah enzim yang tahan pada suhu tinggi serta mempunyai laju polimerase yang tinggi dan kemampuan
yang tinggi untuk menggabungkan nukleotida dengan suatu primer secara terus menerus tanpa terdisosiasi
dari komplek primer-DNA cetakan (prosesivitas). RTase yang dikode oleh virus avian mycoblastosis (AMV)
atau M-MuLV bersifat sangat prosesif dan mampu mensintesis cDNA sampai sepanjang 10 kb, sedangkan
Tth DNA Polymerase mampu mensintesis cDNA sampai sepanjang 1-2 kb. Berdasarkan alasan di atas,
maka uji ini disebut sebagai Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) (YUWONO,
2006).

Reaksi transkriptase balik dapat dilakukan dengan menggunakan beberapa macam primer yaitu Oligo
(dT), Heksanukleotida Acak dan Urutan Nukleotida Spesifik. Primer Oligo (dT) akan menghasilkan cDNA
yang lengkap sedangkan Heksanukleotida Acak akan didapat cDNA yang tidak lengkap (parsial). Primer
dengan urutan nukleotida spesifik dapat digunakan untuk menyalin mRNA secara selektif (YUWONO, 2006).

Prinsip dari RT-PCR adalah ekstraksi virus RNA disintesis menjadi complementary DNA (cDNA)
dengan menggunakan Reverse Transcriptase. Kemudian cDNA digunakan sebagai template untuk PCR
yang akan menghasilkan complementary double strand (dsDNA) yang dihasilkan melalui siklus denaturasi,
annaelling dan ekstensi yang didukung deng
an adanya primer sense, antisense spesifik dan thermal stable Taq Polymerase (VILJOEN et al., 2005).
Dalam RT-PCR, tahap ekstraksi RNA merupakan tahap yang sering kali menghabiskan banyak waktu
namun demikian merupakan tahap sangat penting dan sangat berpengaruh terhadap degradasi RNA.
Metode ekstraksi RNA dengan phenol chloroform-quanidum (Trizol) merupakan metode yang lebih umum
dilakukan di laboratorium. Namun demikian, masih terdapat beberapa metode ekstraksi RNA yang lain
diantaranya metode pengendapan garam (Purescript) dan spin column (SUAREZ, 1997).

Metode RT-PCR sudah banyak digunakan untuk mendiagnosis virus Avian Influenza. Pengujian RT-
PCR untuk mendiagnosis Avian Influenza dapat dilakukan di Balai Besar Penelitian Veteriner baik untuk
keperluan penelitian maupun diagnostik. Metode RT-PCR ini juga banyak diterapkan di laboratorium-
laboratorium veteriner lain yang terdapat di seluruh wilayah Indonesia untuk keperluan pengujian Avian
Influenza. Biasanya metode ini akan dilanjutkan dengan sequencing DNA untuk melihat lebih jauh tentang
karakter molekul virus ini, seperti mutasi virus, hubungan kekerabatan dan untuk rekayasa genetika lainnya
(DHARMAYANTI et al., 2004). Saat ini terdapat beberapa teknik RT-PCR diantaranya RT-PCR Conventional
dan Real Time RT-PCR. Hasil diagnosis RT-PCR Konvensional ditentukan berdasarkan

amplikon yang terlihat pada gel elektroforesis. Untuk primer Matrik, pita akan berada pada posisi 200 – 300
pasang basa dan pada posisi 500 – 600 pasang basa pada primer H5 (WELLENBERG, 2006). Elektroforesis
adalah proses migrasi dari fragmen DNA di dalam gel yang terendam dalam larutan penyangga. Perjalanan
molekul DNA di dalam gel mengikuti arus listrik dari kutub negatif menuju kutub positif. Penggunaan jenis
gel disesuaikan dengan tujuan yang akan dicapai. Electrophoresis Gel Agarose (AGE) dengan visualisasi
menggunakan ethidium bromide dan Electrophoresis Gel Polyacrilamid (PAGE) dengan visualisasi
menggunakan silver staining (SULANDARI dan ZEIN, 2003).
 Reaksi RT-PCR konvensional selama ini membutuhkan waktu kurang lebih 4 – 5 jam untuk ekstraksi
RNA, proses 40 siklus PCR (denaturasi, annealling dan ekstensi DNA) serta elektroforesis pada gel. Oleh
karena itu, saat ini telah dikembangkan suatu teknik terbaru RT-PCT yaitu Real Time RT-PCR (RRT-PCR).
Dalam teknik ini, tahap elektroforesis dihilangkan dan hasil langsung dapat dibaca di layar monitor komputer
sehingga waktu yang dibutuhkan lebih singkat, kurang lebih 2 jam. RRT-PCR mempunyai sensitivitas 10 –
100 kali lebih tinggi daripada RT-PCR (TRANI et al., 2005).
Prinsip kerja dari RRT-PCR ini hampir sama dengan RT-PCR konvensional yaitu denaturasi, annealling
dan ekstensi. Namun di dalam RRT-PCR perjalanan reaksi dilihat per satuan waktu (siklus) dalam RRT-PCR
digunakan probe (penanda) yang menempel pada cetakan DNA, dimana dalam probe tersebut dilengkapi
dengan reporter (pembawa sinyal) dan quencher (penahan sinyal). Jika primer memulai ekstensi DNA,
selanjutnya ekstensi DNA yang diperantarai oleh enzim polymerase akan menghantam probe DNA
menyebabkan lepasnya ikatan reporter dan quencher. Terlepasnya ikatan ini mengakibatkan terbacanya
emisi sinyal reporter oleh perangkat filter dalam mesin Real Time PCR dalam bentuk sebuah grafik
penambahan kopi DNA per satuan siklus PCR.

RRT-PCR dapat dibedakan menjadi dua metode yaitu one-step RRT-PCR dan two-steps RRT PCR.
One step RRT-PCR merupakan metode yang lebih umum dilakukan karena reaksi RT dan reaksi siklus PCR
dilakukan dalam satu langkah. Akan tetapi pada two-steps RRT-PCR, reaksi RT dan reaksi siklus PCR
dilakukan secara terpisah. Two-step RRT-PCR juga menggunakan primer yang berbeda pada masing-
masing reaksi. Umumnya primer yang digunakan pada reaksi RT adalah oligo-dT kemudian dilanjutkan
menggunakan primer Urutan Nukleotida Spesifik pada reaksi siklus PCR. Sedangkan One-step RRT-PCR
hanya memerlukan satu primer yang spesifik terhadap kedua reaksi tersebut (QIAGEN, 2007). RRT-PCR
yang dilakukan dengan metode One step dapat menurunkan resiko terjadinya kontaminasi silang dan waktu
yang dibutuhkan lebih cepat dibandingkan dengan two-steps RRT-PCR. Meskipun demikian One step RRT-
PCR kurang sensitif jika dibandingkan dengan two-step RRT-PCR (TRANI, 2005). Pengujian RRT-PCR
sampel Avian Influenza untuk keperluan penelitian di Balai Besar Penelitian Veteriner dilakukan dengan
metode one step.
M

K
+
H K-
982113 HH

0NN
1657

7
812N3
12NN

627
HHH

243NN
NN
3N
H1

2
M

AvianAA

H5 haemoagglutininHemaglutinin
 H7 Hemaglutininhaemoagglutinin

Analytical specificity – 100%

Analytical specificity – 100%

Gambar 8. Hasil elektroforesis fragmen gen H5 dan H7 virus Avian Influenza. Lajur M adalah penanda
berat molekul (100 bap leader)

Sumber: WELLENBERG (2006)

9
7
 DYAH AYU HEWAJULI et al.: Karakterisasi dan Identifikasi Virus Avian Influenza (AI)

Hal lain yang perlu diperhatikan dalam RT-PCR adalah perencanaan laboratorium. Hal ini berhubungan
dengan alur kerja dalam laboratorium PCR. Alur kerja RT-PCR dimulai dari isolasi RNA dan karakterisasi,
sintesis cDNA, penyesuaian data RT-PCR dan diakhiri dengan evaluasi hasil PCR. Pekerjaan RT-PCR
dilakukan berurutan sesuai dengan alur prosesnya. Hal ini dimaksudkan untuk mencegah dan
meminimalisasi kontaminasi yang dapat mempengaruhi valid atau tidaknya hasil PCR (VILJOEN et al.,
2005).

Metode Imunohistokimia (IHK)

Jenis sampel yang biasanya digunakan untuk pewarnaan histokimia adalah kulit pial dan jengger, otak,
trakea, jantung, otot dada dan paha, paru-paru, proventrikulus, hati, limpa, usus, ginjal dan ovarium. Organ-
organ tersebut dipotong dengan tebal sekitar 0,5 cm dan difiksasi dalam larutan formalin 10% yang sudah
dibufer selama minimal 24 jam. Organ tersebut kemudian diproses menjadi blok parafin sesuai dengan
metode standar. Pewarnaan imunohistokimia biasanya menggunakan metode avidin biotin peroksidase
kompleks (ABC). Prinsip dari perwarnaan imunohistokimia untuk diagnosis Avian Influenza adalah preparat
histopatologi (HP) diaplikasikan dengan antisera terhadap virus AI subtipe H5N1 yang sudah distandarisasi
sebelumnya melalui checker board titration. Antisera H5N1 diaplikasikan dengan konsentrasi 1 : 2000 dan
selanjutnya diberi antibodi sekunder yang sudah dilabel dengan biotin. Setelah itu streptavidin peroksidase
diaplikasikan dan untuk memvisualisasikan antigen yang terdapat pada preparat HP maka ditambahkan
substrat amino ethyl carbazole (AEC) yang berwarna coklat. Suatu preparat dinyatakan positif mengandung
antigen virus Avian Influenza apabila antigen dapat dideteksi secara definitif pada area intra-nuklear (di
dalam inti sel) atau intra-sitoplasmik (di dalam sitoplasma). Substrat yang dipakai yaitu AEC yang berwarna
coklat maka antigen juga berwarna coklat, dengan latar belakang biru hematoksilin. Sebaliknya preparat
dinyatakan negatif jika pada preparat tidak dapat dideteksi warna coklat pada sel definitif sehingga preparat
secara difus berwarna biru saja (DAMAYANTI et al., 2004).

Pewarnaan imunohistokimia memiliki beberapa kelebihan bila dibandingkan dengan pewarnaan

konvensional hematoksilin dan eosin (H&E) yaitu pewarnaan imunohistokimia mampu mendeteksi antigen
virus, reaksi warna yang terjadi pada metode IHK ini tergolong cukup permanen sehingga tidak perlu dilihat
dengan mikroskop fluoresens serta selain visualisasi antigen, jaringan organ yang terinfeksi dan derajat
keparahan lesi dapat terlihat dengan jelas.
Namun demikian pewarnaan ini juga menuntut kualitas yang tinggi untuk reagen yang digunakan,
yakni dimulai pada saat pengambilan sampel hingga saat pengujian (DAMAYANTI et al., 2005).

Penelitian yang dilakukan DAMAYANTI et al. (2005) untuk mendeteksi antigen virus AI subtipe H5N1
secara imunohistokimia terhadap sampel yang berasal dari Provinsi Jawa Barat (Kabupaten Bogor, Bekasi,
Cianjur dan Sukabumi), Provinsi Banten (Kabupaten Tangerang), Provinsi DKI Jakarta dan Provinsi Jawa
Timur (Kabupaten Madiun, Tulung Agung, Blitar dan Kediri) antara bulan Juni 2004 hingga Februari 2005
menunjukkan bahwa dari jumlah total sebanyak 212 sampel unggas, 39 sampel (18,4%) dinyatakan positif
mengandung antigen virus AI subtipe H5N1 (DAMAYANTI et al., 2004).

PENCEGAHAN DAN PENGENDALIAN

AVIAN INFLUENZA
 Upaya-upaya yang dapat dilakukan untuk mencegah penyebaran Avian Influenza diantaranya adalah
pengamanan biologis yang ketat, pelaksanaan aspek-aspek manajemen untuk menghilangkan sumber
infeksi secara optimal serta vaksinasi. Dalam hal ini, pengamanan biologis merupakan upaya pertahanan
yang paling utama. Mengingat bahwa virus Avian Influenza di luar tubuh induk semang mempunyai sifat
mudah diinaktivasi oleh deterjen, formalin, beta-propiolakton, eter, hidroksilamin, ion-ion ammonium, panas,
pH terlalu tinggi, kondisi non-isotonik dan kekeringan. Sifat yang dimiliki virus ini juga merupakan salah satu
faktor yang mendukung program pertahanan pada unggas melalui pengamanan biologis menjadi lebih
efektif. Sedangkan upaya pertahanan melalui vaksinasi akan memperoleh hasil yang lebih efektif apabila
diikuti dengan pengamanan biologis yang ketat (EID, 2006).

Pedoman untuk pencegahan, pengendalian dan pemberantasan Avian Influenza secara lengkap telah
ditetapkan oleh World Organization for Animal Health (OIE) dan World Health Organization (WHO) yang
digunakan sebagai acuan program pencegahan, pengendalian dan pemberantasan Avian Influenza di
seluruh dunia (EID, 2006). Pemerintah Indonesia melalui Dirjen Bina Produksi Peternakan No.
17/Kpts/PD.640/F/02.04 juga telah menetapkan langkah-langkah strategis untuk pencegahan, pengendalian
dan pemberantasan Avian Influenza di Indonesia. Langkah-langkah strategis itu meliputi peningkatan
biosekuriti, depopulasi, vaksinasi, pengendalian lalu lintas, surveilan, restoking, peningkatan kesadaran
masyarakat, monitoring dan evaluasi (SYUKUR, 2006).

98
 WARTAZOA Vol. 18 No. 2 Th. 2008

KESIMPULAN

* Karakterisasi dan identifikasi virus Avian Influenza dilakukan melalui uji laboratorium dan harus
mengacu pada standar prosedur OIE.
* Terdapat dua macam metode karakterisasi dan identifikasi Avian Influenza secara laboratorium yaitu
metode konvensional (aspek virologi) dan metode molekuler.

* Metode konvensional (aspek virologi) biasanya digunakan untuk diagnosis awal Avian Influenza.
Metode ini membutuhkan lebih banyak waktu dan biaya.
* Metode molekuler merupakan metode yang lebih efektif daripada metode konvensional sehingga
metode ini sekarang lebih sering diaplikasikan di laboratorium diagnostik.

DAFTAR PUSTAKA

BECK, J.R., D.E. SWAYNE, S. CASAVANT dan C. GUTIERREZ. 2003. Validation of egg yolk antibody
testing as a method to determine influenza status in White Leghorn Hens. Avian Dis. 47: 1196 –
1199.

BURGESS, G.W. 1988. Basic Principle of ELISA and Variations in configuration. ELISA Technology in
Diagnostic Research. Graduate School of Tropical Veterinery Science James Cook University of
North Queensland Townsville, Australia. pp. 27 – 36.

CHAN, K.H., N. MALDEIS, W. POPE, A. YUP, A. OZINSKAS, J. GILL, W.H. SETO, K. F. SHORTRIDGE
and J.S.M. PEIRIS. 2002. Evaluation of The Direction Flu A and B Test for Rapid Diagnosis of
Influenza Virus Type A and B Infections. American Society for Microbiology.
http://www.pubmedcentral.nih.gov/ articlerender.fcgi/artid=130655. (23 Februari 2002).

DAMAYANTI, R., N.L.P.I. DHARMAYANTI, R. INDRIANI, A. WIYONO dan DARMINTO. 2004. Deteksi
virus Avian Influenza subtipe H5N1 pada organ ayam yang terserang flu burung sangat patogenik
di Jawa Timur dan Jawa Barat dengan teknik imunohistokimia. JITV 9(3): 197 – 203.

DAMAYANTI, R., N.L.P.I. DHARMAYANTI, R. INDRIANI, A. WIYONO dan R.M.A. ADJID. 2005.
Monitoring kasus penyakit Avian Influenza berdasarkan deteksi antigen virus subtipe H5N1 secara
imunohistokimia. JITV 10(4): 322 – 330.

DHARMAYANTI, N.L.P.I., R. DAMAYANTI, A. WIYONO, R. INDRIANI dan DARMINTO. 2004. Identifikasi

virus Avian Influenza isolat Indonesia dengan Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction
(RT-PCR). JITV 9(2): 136 – 142.
DIAMOND, L., R. GARTEN, R.J.P. ERICKSON, J. KUMM, R.O. DONIS and R.W. DAVIS. 2006. Rapid and Highly
Informatif Diagnostic Assay for H5N1 Influenza Viruses. http://www.google.co.id/search/hl=id=Rapid
+and+Informative+Diagnostik+Assay+for+H5N1+In fluenza+Viruses&btnG=Telusur&meta= (6 Februari
2006).

EMERGING INFECTION DISEASES (EID). 2006. Control of Avian Influenza in Poultry. http://www.vetcite.org/
publish/items/003162/idex.html. (12 September 2006).

HALMINTON and. DISTRICT BUDGERIGAR SOCIETY INC. 2007. Avian Flu.

http://www3.sympatico.ca/davehansen/ avianflu.html. (20 Januari 2007).

HARDER, T.C. and O. WERNER. 2006. Avian Influenza. http://www.influenzareport.com/ir/ai.htm. (6 Januari

2006).

INDRIANI, R. dan N.L.P.I. DHARMAYANTI. 2006. Deteksi antibodi Avian Influenza dalam kuning telur ayam
pascavaksinasi (AI) subtipe H5N1. Media Kedokteran Hewan 22: 84 – 88.

KOMPAS CYBER MEDIA. 2007. Ibu dan Anaknya di Madiun Diduga Flu burung. http://www.kompas.com/

OFFICE INTERNATIONAL DES EPIZOOTIES (OIE). 2004. Manual of Diagnostic Test and Vaccines for Terrestrial
Animal. World Organisation for Animal Health 4: 258 – 269.

PESONA SCIENTIFIC. 2005. Avian Influenza A Virus Detection, Direct Molecular Detection Method, Polymerase
Chain Reaction. Paper presented in the Workshop on Polymerase Chain Reaction (PCR) Technique.
Indonesia – Netherlands. Bogor, 20 – 24 November 2006. BPMSOH and Animal Health Service Deventer,
Netherland.

QIAGEN. 2007. Critical factors for successful gene expression assays.

http://www1.qiagen.com/Products/Pcr/Critical Factors.aspx. (24 March 2007).

RONOHARDJO, P. 1983. Penyakit cengesan selesma pada itik Tegal, Bali dan Alabio. Penyakit Hewan 15(25): 61
– 71.

RONOHARDJO, P., S. HARDJOSWORO, S. PARTOATMOJO and M. PARTADIREDJA. 1985. The identification

and distribution of influenza A virus in Indonesia. Penyakit Hewan XVII(29): 249 – 257.

RONOHARDJO, P., S. PARTOUTOMO, S. HASTIONO, N. GINTING and S. POERNOMO. 1986. The status of
duck diseases in Indonesia. Penyakit Hewan XVIII (31): 86 – 93.

SELLECK, P. 2007. Serological Tests for The Detection of Antibodies Againts Avian Influenza. CSIRO Australian
Animal Health Laboratory, Geelong, Australia.
 DYAH AYU HEWAJULI et al.: Karakterisasi dan Identifikasi Virus Avian Influenza (AI)

SUAREZ, D.L. 1997. Molecular diagnostic techniques: Can we identity influenza virus, differentiate subtype
and determine pathogenicity potential of viruses by RT-PCR. Proc. of the Fourth International
Symposium on Avian Influenza, Georgia Center for Continuing Education, The University of Georgia
Athens, Georgia, USA. pp. 318 – 323.

SULANDARI, S. dan M.S.A. ZEIN. 2003. Panduan Praktis Laboratorium DNA. Bidang Zoologi, Pusat
Penelitian Biologi Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia. hlm. 87 – 96.

SYUKUR, D.A. 2006. Situasi Penyakit Flu Burung.

http://www.disnakkeswan-lampung.go.id/index.php?
option=com_content&task=view&id=143&Itemid=9.

(30 Desember 2006).

TABBU, C.R. 2000. Penyakit Ayam dan Penanggulangannya.

Penerbit Kanisius, Yogyakarta 1: 232 – 244.

TRANI, L.D., B.BEDINI, I. DONATELLI, L. CAMPITELLI, B. CHIAPPINI, M. A. DE MARCO, M. DELOGU, C.

BUONAVOGLIA and G. VACCARI. 2005. A Sensitive One-Step Real Time PCR for Detection of Avian
Influenza Viruses Using a MGB Probe and An Internal Positive Control. BioMed central Ltd.
http://www.biomedcentral.com/1471-2334/6/87. (2 April 2005)
VILJOEN, G.J., L.H.NELAND and J.R. CROWTHER. 2005. Moleculer Diagnostic PCR Handbook. Published
by Springer, Dodrecht, The Netherlands.

WELLENBERG, G. 2006. Avian Influenza viruses: Detection methods. Paper presented in the Workshop on
Polymerase Chain Reaction (PCR) Technique. Indonesia – Netherlands. Bogor, 20 – 24 November
2006. BPMSOH and Animal Health Service Deventer, Netherland.

WRINIGATI. 2006. Pengawasan dan diagnosa Avian Influenza.

Bull. Veterinaria Farma 3(6): 16 – 19.

YUWONO, T. 2006. Teori dan Aplikasi Polymerase Chain Reaction. Penerbit Andi, Yogyakarta. hlm. 11 –
12.

ZHOU, E.M., M. CHAN, R.A. HECKERT, J. RIVA and M.F. CANTIN. 1997. A competitive enzyme-linked
immunosorbent assay for Avian Influenza serologic surveillance. Proc. of the Fourth International
Symposium On Avian Influenza.Georgia Center for Continuing Education, The University of Georgia,
Athens, Georgia, USA. pp. 305 – 312.