MAKALAH FITOKIMIA

EKSTRAKSI, ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA

ALKALOID

Kelas A

Kelompok 2

Adinda Adelia W 051611133086

Arina Rahma O 051611133107

Muhammad Hisyam 051611133119

I Nengah Budi S 051611133123

Nailul Fithriyah 051611133131

Gusti Ayu Manik S P 051611133135

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS AIRLANGGA

SURABAYA

2019
 Daftar Isi
Daftar Isi ............................................................................................................................ 1
Pengantar ............................................................................................................................ 3
Isolasi dan ekstraksi ............................................................................................................ 3
Metodologi .......................................................................................................................... 4
Evaluasi Farmakognostik .................................................................................................... 4
Bahan tanaman .................................................................................................................... 4
Identifikasi .......................................................................................................................... 5
Persiapan herbarium............................................................................................................ 5
Persiapan & penyimpanan .................................................................................................. 5
Studi morfologi: .................................................................................................................. 5
Analisis mikroskopis:.......................................................................................................... 5
Analisis fluoresensi ............................................................................................................. 6
Prosedur: ............................................................................................................................. 6
Ash Value (Nilai Abu) ........................................................................................................ 6
Penentuan Total Abu (Total Ash) ....................................................................................... 7
Penentuan Abu Tidak Larut Asam ...................................................................................... 7
Penentuan Abu Larut Air .................................................................................................... 7
1. Analisis Unsur Abu: .............................................................................................. 7
2. Uji untuk Kalsium: ............................................................................................... 7
3. Uji untuk Besi:....................................................................................................... 8
4. Uji untuk Magnesium: .......................................................................................... 8
5. Uji untuk Potassium: ............................................................................................ 8
6. Uji untuk Sulphate:............................................................................................... 8
7. Uji untuk Fosfat: ................................................................................................... 8
8. Uji untuk Klorida: ................................................................................................ 8
Kelembaban ........................................................................................................................ 8
Nilai Ekstraktif .................................................................................................................... 9
A. Ekstraktif larut alkohol: ............................................................................................. 9
B. Ekstraktif yang larut dalam air .................................................................................. 9
Metodologi Ekstraksi: ......................................................................................................... 9
A. Pilihan pelarut untuk ekstraksi: ................................................................................ 9
1. Air ...................................................................................................................... 10
2. Aseton................................................................................................................ 10

1
 3. Alkohol ............................................................................................................. 11
4. CHCl3 :.............................................................................................................. 11
5. Eter : ................................................................................................................. 12
Preparasi obat mentah untuk ekstraksi : ..................................................................... 12
Prosedur ekstraksi : ........................................................................................................ 12
Kromatografi Lapis Tipis............................................................................................... 12
Kromatografi Cair Kinerja Tinggi ................................................................................ 12
Hasil dan Pembahasan ..................................................................................................... 13
Penutup ............................................................................................................................ 15

2
 Isolasi dan karakterisasi Vasicine dari Adhatoda
vasica (Adusa)

Pengantar
Adhatoda vasica, umumnya dikenal sebagai Vasaka, adalah tanaman
terapi vital yang telah digunakan sebagai bagian dari obat selama lebih dari 3.000
tahun. Dalam perspektif potensi restoratifnya yang berubah, ia juga menjadi subjek
pertimbangan logis yang mengesankan saat ini.

Daun vasaka adalah konstituen lebih dari 200 definisi dalam resep
Ayurveda, Siddha & Unani, yang digunakan sebagai bagian dari perawatan
berbagai penyakit fisiologis. Vasica muncul dalam monografi WHO tentang
Tanaman Obat Terpilih & American Herbal Pharmacopeia.

Dalam Ayurveda, Vasica umumnya memiliki ramuan yang kuat,

menenangkan, meremajakan. Tanaman umumnya digunakan untuk memajukan
kehidupan yang energik, berkelanjutan, kualitas & kesejahteraan. mempertahankan
komponen waktu tubuh & memperluas penciptaan cairan kunci, lemak otot, darah,
getah bening, semen & sel. Dapat diperbandingkan antara sifat-sifat terapeutik ini
& sifat-sifat dari akar ginseng. Singkatnya, akar Vasaka disebut kacang Malabar.
Bunganya berwarna putih atau ungu. Nama dagangnya Vasaka berdasarkan pada
nama Sansekerta. Inflorescence aksilikus cymes, berbunga padat; peduncles bracts
secara luas berbentuk bulat telur, foliaceous. Daun, bunga, ruitcess dan akar banyak
digunakan untuk mengobati batuk pilek, batuk rejan, sebagai obat penenang,
ekspektoran, antispasmodik, bronkitis kronis dan asma.

Tumbuh di bagian kering di daerah sub-tropis. Rajasthan, Punja, Haryana,

Uttar Pradesh, Gujarat, Maharashtra & Madhya Pradesh. Konstituen aktif adalah
Alkaloid: Vasicine, Vasicinone, Vasicinol, Vasicol dll

Isolasi dan ekstraksi

Isolasi dilakukan dengan cara baru maupun konvensional. 200gram bubuk
Vasaka (Akar dan daun) diletakkan pada 2 L Round Bottom Flask (R.B.F).
Kemudian ditambahkan petroleum eter sebanyak 75 mL. Refluks pada suhu 60o C

3
selama 90 menit. Setelah itu, bahan disaring dan ditambahkan 800 mL metanol 75%
dan dilanjutkan refluks pada suhu 60o C selama 4 jam. Setelah itu, diamkan bahan
dan saring cairannya.

Kurang lebih 750 mL ekstrak dalam metanol yang dikumpulkan diletakkan

pada corong pisah. Lalu, ekstraksi dengan air (100 mL) dan dilanjutkan dengan
ekstraksi menggunakan diklorometana (3 x 200 mL). Ambil bagian bawah lapisan,
masukkan beaker glass 1 L (dengan total 600 mL larutan). Tambahkan 8-10 gram
arang aktif ke beaker glass tersebut dan panaskan di penangas air selama 10 menit.

Lalu, saring menggunakan kertas saring Whattmann. Warna kekuningan

yang dihasilkan setelag penyaringan yang menguap saat pemanasan di penangas
air. Lakukan pengeringan di penangas air lalu dinginkan dengan evaporasi selama
10 menit pada suhu ruang. Warna kehitaman ditemukan pada endapan di dasar
wadah. Endapan tersebut dicuci dan hilang dengan penambahan 70-80 mL n-
heksana, kocok, diamkan 5 menit, lalu tuang heksana ke tempat lain (buang di
wadah terpisah) karena kemungkinan n-heksana mengandung endapan hitam. 70
ml n-heksana ditambahkan ke wadah yang berisi endapan kehitaman. Bahan
dihancurkan dengan pengeringan menggunakan mortar pastel. Bubuk berwana
hijau kekuningan digunakan untuk KLT (identifikasi) dan KCKT (pemurnian).

Metodologi

Evaluasi Farmakognostik
Data tentang morfologi luar, struktur kehidupan & informasi mikrometrik
dari susunan bahan tanaman dapat dengan tepat digunakan sebagai bagian dari bukti
nyata dari bahan tanaman. Terlebih lagi untuk parameter fisiko-sintetik tertentu,
contoh harga ekstraktif, fiery debris value dan sebagainya bisa memberikan
pemikiran yang tidak menyenangkan tentang kualitas & kebajikan obat-obatan
yang tidak dimurnikan.

Bahan tanaman
Buah & akar batang Withania somnifera & daun Adhatoda vasica
dikumpulkan dari Sariska, Bharahthari, Distrik Alwar, dan Rajasthan, India.

4
Identifikasi
Bahan tanaman diautentikasi dari Dr. Arvind S Dhabe Babasaheb
Ambedkar Marathwada University, dan Aurangabad. Bahan tanaman yang
dikumpulkan dikeringkan dalam tray dryer pada 55°C selama 24 jam dan
dihaluskan

Persiapan herbarium
Herbarium disiapkan sesuai praktik kuratorial Internasional. Spesimen
yang terkumpul ditempatkan dalam baki pengering dengan hati-hati. Spesimen
ditempatkan di plant press dengan tekanan seragam. Selama 15 hari, fresh dryer
digunakan setiap hari untuk menghilangkan kelembaban seluruhnya. Setelah ini,
spesimen menjadi sasaran untuk perlakuan dengan merkuri klorida dalam alkohol
selama sekitar dua menit. Sekali lagi, spesimen ini dikeringkan. Spesimen
disebarkan pada lembar herbarium ukuran 11,5 x 16 cm dan tempelkan dengan lem
yang sesuai. Setelah identifikasi, lembar herbarium ditempatkan di tutup spesies
yang tertutup dalam penutup genus. Spesimen diberi nomor oleh otoritas
pengidentifikasi tanaman adalah 0780 (Bet nomor referensi/2010-11).

Persiapan & penyimpanan

Produk baru dari kulit kayu dipilih untuk ditinjau secara mikroskopis.
Makanan yang tumbuh dari kulit kayu dikeringkan dengan udara dan dihaluskan
dengan menggunakan mortar metalik & alu dengan penghancuran mekanis. Obat
bubuk kemudian disimpan pada suhu kamar & digunakan untuk mikroskop bubuk
& ekstraksi.

Studi morfologi:
Morfologi luar dikonsentrasikan oleh strategi. Mikroskop sederhana
digunakan untuk melakukan studi makroskopis. Parameter morfologis seperti
bentuk, ukuran, bau, warna & rasa buah & kulit batang dipelajari.

Analisis mikroskopis:
Bahan tanaman segar digunakan untuk mengambil bagian tangan dari buah
serta kulit akar & kemudian diwarnai dengan beberapa zat pewarna kimia sesuai
dengan metode yang dioptimalkan. Disintegrasi bahan tanaman dilakukan dengan

5
metode standar. Dalam skala pendek dihancurkan dengan memanaskan dalam 5%
b/v Larutan NaOH selama 5 menit. Setelah pendinginan dicuci dengan air, bagian
yang hancur kemudian direaksikan dengan 25% v/v larutan asam kromat pada suhu
kamar selama setengah jam. Potongan dibersihkan dengan cara memperlakukan
menggunakan larutan chloral hydrate & diwarnai dengan campuran toluidine biru
& phloroglucinol-HCL (1: 1) 5.

Bahan-bahan tanaman bubuk dari buah & kulit akar direaksikan secara
terpisah dengan larutan phloroglucinol-HCL (1: 1), larutan iodin & asam asetat
untuk mengetahui terjadinya serat lignifikasi, butiran pati & kristal kalsium oksalat.
Serangkaian gambar digital diambil dengan menggunakan mikroskop Motic Digital
yang memiliki aksesori pencitraan kamera CCD 1/3 '& dengan bantuan perangkat
lunak analisis Motic Images 2000 (versi 1.3).

Analisis fluoresensi
Ketika studi mikroskopis fluoresensi dilakukan untuk setiap obat herbal
dengan menggunakan mikroskop fluoresensi, itu menyediakan fluoresensi yang
dipancarkan dari jaringan obat herbal di bawah penerangan. Jaringan herbal
mengandung banyak metabolit sekunder atau struktur kimia & mereka memiliki
kemampuan untuk memancarkan cahaya dengan panjang gelombang tertentu.

Prosedur:
sampel bubuk digunakan untuk analisis fluoresensi. Pada slide kaca
sampel, bubuk kering buah & kulit akar diambil secara terpisah & direaksikan
dengan berbagai tetes reagen kimia tertentu & dalam beberapa menit diamati di
bawah lampu UV.

Ash Value (Nilai Abu)

Ash Value ini mengindikasi banyaknya material asing yang terdapat di
dalam suatu obat. Dengan mengetahui adanya ash value pada bahan organik yang
biasanya mengganggu dalam penentuan secara analitikal. Umumnya, pembakaran
abu tersebut mengandung fosfat dan karbonat dengan kalsium, kalium, natrium, dan
magnesium di dalam silikat format.

6
Penentuan Total Abu (Total Ash)
Ditimbang seberat 3 gram obat secara akurat dan dipanaskan pada suhu
tidak melebihi 450°C. Kemudian Serbuk obat tersebut kemudian disebarkan di
dalam oven di bawah krus. Kemudian krus yang mengandung obat disimpan dalam
oven & suhu meningkat sampai obat menjadi bebas dari karbon. Krus tersebut
kemudian dipindahakan dari oven lalu disimpan di dedicator setelah dingin dan
dicatat beratnya. Untuk mendapatkan berat yang konstan sama, prosedur diulangi
dan dihitung % jumlah abu mengacu pada obat kering.

Penentuan Abu Tidak Larut Asam

Abu yang diperoleh dalam penentuan total abu kemudian direbus dengan
25 ml dilarutkan pada HCL selama 5 menit & kemudian disaring dengan
menggunakan kertas saring dengan abu lebih sedikit. Abu yang tidak larut pada
kertas saring selanjutnya dicuci dengan air panas dan dipindahkan ke wadah silika.
Kemudian dinyalakan & ditimbang. Metode diulang sampai dua bobot stabil
didapat. % hasil sisa api korosif yang tidak larut kemudian ditentukan.

Penentuan Abu Larut Air

Abu yang diperoleh dari penentuan total abu direbus dengan 25ml air
selama 5 menit & digoyahkan melalui kertas saring dengan sedikit abu.
Materi yang tidak larut kemudian dicuci dengan air panas dan dibiarkan
selama 15 menit pada suhu tidak lebih dari 450°C. Catat berat dari materi yang
tidak larut saat awal dan dikurangi dari berat abu untuk mendapatkan berat asli abu
yang larut dalam air. % hasil dihitung dengan mengacu pada obat kering.
1. Analisis Unsur Abu:
Serbuk obat dari buah dan ranting dipisahkan dan ditaruh ke dalam oven dan
dibakar untuk mendapatkan abu. Kemudian direaksikan dengan HCl 50%
selama setengah jam dan disaring untuk mendapatkan hasil saringan, yang
mana akan digunakan untuk beberapa tes spesifik.
2. Uji untuk Kalsium:
a. Larutan diuji dengan larutan amonium karbonat yang akan
menghasilkan endapan putih, kemudian dipanaskan dan didinginkan
dalam ammonium sulfit yang tetap tidak larut.

7
 b. Larutan uji kemudian direaksikan dengan potasium kromat yang
memberikan endapan kristal berwarna kuning.
3. Uji untuk Besi:
a. Melarutkan HCl dengan potasium permanganat kemudian dicampur
dengan larutan uji yang akan memberikan warna merah muda.
b. Melarutkan HCl dan larutan ammonium tiosianat kemudian dicampur
dengan larutan uji akan memberikan warna merah darah.
4. Uji untuk Magnesium:
a. Bila ditambahkan dengan ammonium karbonat akan memberikan
endapan putih
b. Bila dicampur dengan garam lemah dan sodium fosfat akan
memberikan kristal putih.
5. Uji untuk Potassium:
Larutan uji ditambahkan dengan asam perklorat akan menghasilkan
endapan putih.
6. Uji untuk Sulphate:
a. Ditambahkan beberapa tetes 5% BaCl2 akan memberikan kristal putih
BaSO4
b. Derivat asam asetat akan menghasilkan endapan putih.
7. Uji untuk Fosfat:
Dicampur dengan HNO3 yang bila dipanaskan dan ditambahkan
ammonium molibdat tidak membentuk kristal kekuningan.
8. Uji untuk Klorida:
a. Ditambah dengan HNO3 kemudian dicampur dengan beberapa tetes
10% AgNO3 akan membentuk endapan putih.
b. Bila ditambah dengan asam asetat derivat akan memberikan kristal
putih yang larut dalam air panas.

Kelembaban
% w / w kehilangan berat yang diakibatkan karena kehilangan air & zat
yang mudah menguap disebut berat kering. Pengeringan dapat dilakukan dalam
kondisi yang sesuai. Jumlah yang ditimbang secara akurat (2 gram) dari masing-
masing buah & batang kulit diambil secara terpisah pada kaca arloji yang terpisah

8
& disimpan untuk dikeringkan dalam oven udara panas pada suhu 105°C sampai
dua bobot konstan tercapai. Perbedaan berat badan mewakili kadar air obat.
Kemudian% hasil ditentukan & dicatat.

Nilai Ekstraktif
Sesuai dengan metode Farmakope India, nilai ekstraktif seperti ekstraktif
larut air & nilai ekstraktif larut alcohol dadap ditentukan.
A. Ekstraktif larut alkohol:
Dalam alat tertutup obat bubuk kering dari kulit buah & batang dimaserasi secara
terpisah dengan 100 ml etanol 90% v / v selama satu hari. Pada hari berikutnya,
itu dengan cepat disaring untuk menghindari kehilangan alkohol. Dalam cawan
penguapan dangkal dengan dasar datar tepatnya 25 ml filtrat diambil & diuapkan
sampai kering pada suhu 105°C & ditimbang.

B. Ekstraktif yang larut dalam air

Dengan cara yang sama, nilai ekstraktif yang larut dalam air juga ditentukan.
Singkatnya, dalam alat tertutup obat bubuk kering dimaserasi dengan 100 ml air
selama satu hari dengan pengocokan berulang-ulang hingga 6 jam pertama &
dibiarkan tidak dikocok selama 18 jam tersisa. Pada hari berikutnya, ekstrak
dengan cepat disaring untuk menghindari kehilangan alkohol. Dalam cawan
penguapan dangkal dengan dasar datar tepatnya 25 ml filtrat diambil & diuapkan
sampai kering pada suhu sekitar 105°C & ditimbang.

Metodologi Ekstraksi:
A. Pilihan pelarut untuk ekstraksi:
Pilihan pelarut tergantung pada sifat bahan tanaman & komponen yang akan
diisolasi. Bahan kering biasanya bubuk sebelum diekstraksi, sedangkan tanaman
segar (daun, dll) dapat dihomogenisasi atau dimaserasi dengan pelarut seperti
alkohol. Latter juga sangat berguna untuk menstabilkan daun segar dengan
menambahkannya ke dalam pelarut mendidih.
Bukti pembeda yang efektif dari campuran dinamis yang restoratif dari bahan
tanaman pada dasarnya bergantung pada jenis yang dapat larut yang digunakan
sebagai bagian dari sistem ekstraksi. Sangat larut untuk ekstraksi tanaman yang

9
menggabungkan sifat-sifat, misalnya, kualitas racun yang rendah, pada
kehangatan rendah, aktivitas aditif, peningkatan asimilasi fisiologis konsentrat
yang cepat, kegagalan konsentrat menjadi kompleks atau terpisah. Ada banyak
variabel yang mempengaruhi keputusan larut adalah jumlah bahan yang akan
diekstraksi, bermacam-macam kualitas dari berbagai campuran yang
dihilangkan, laju ekstraksi, kesederhanaan dari perlakuan selanjutnya dari
konsentrat, perbedaan campuran penghambatan yang dipisahkan, kualitas
beracun yang dapat larut dalam prosedur bioassay, potensi konsentrat (Eloff JN,
1998). Keputusan larut dapat dipengaruhi oleh apa yang diusulkan dengan
konsentrat. Karena hasil akhir akan mengandung petunjuk tentang sisa yang
dapat larut, yang dapat larut seharusnya tidak berbahaya & tidak boleh ikut
bercampur dengan bioassay. Keputusan juga akan bergantung pada fokus pada
campuran yang akan dipisahkan.

Berbagai pelarut yang digunakan untuk ekstraksi:

1. Air
Untuk ekstraksi bahan tanaman, air adalah pelarut universal terutama
dengan tanaman dengan aktivitas antimikroba. Air digunakan oleh
penyembuh tradisional tetapi pelarut organik juga digunakan untuk ekstrak
tanaman & ditemukan aktivitas antimikroba yang lebih konsisten daripada
air. Flavonoid yang larut dalam air tidak memiliki efek antimikroba &
senyawa yang larut dalam air penting sebagai efek antioksidan.

2. Aseton
Aseton digunakan untuk melarutkan banyak senyawa hidrofilik dan
lipofilik. Aseton larut dalam air, memiliki volatilitas dan memiliki toksisitas
rendah untuk penggunaan bioassay. Pelarut ini dianggap sebagai pelarut
yang sangat berguna terutama untuk studi antimikroba di mana lebih banyak
komponen fenolik diperlukan dalam ekstrak. Dalam studi, dilaporkan
bahwa ekstraksi tanin dan senyawa fenolik lainnya ditemukan lebih baik di
dalam air. Aseton dari pada aqu. Ekstrak metanol. Aseton dan methanol juga

10
 dapat dijadikan pelarut yang baik untuk saponin, yang memiliki aktivitas
antimikroba.
3. Alkohol
Ekstrak etanoik ditemukan lebih efektif untuk konten polifenol
dibandingkan dengan ekstrak aqu. Ini berarti ekstrak etanoik lebih efektif
dalam biji & degradasi dinding sel yang memproses karakter unipolar dan
bertanggung jawab atas pelepasan polifenol dari sel. Penolakan aksi
konsentrat aqu. adalah karena kedekatan dari oksidase kimia polifenol yang
menurunkan polifenol dari konsentrat. Sementara jika harus ada metanol &
etanol itu laten. dan Air menyediakan media yang lebih baik untuk
pertumbuhan mikroorganisme dibandingkan dengan alkohol. Flavonoid
adalah kelompok senyawa utama yang ada pada tumbuhan yang terdeteksi
dalam konsentrasi yang lebih tinggi dengan etanol 70% karena polaritasnya
yang tinggi dari pada etanol murni. Polaritas dari etanol dapat ditambahkan
dengan menambahkan 30 % air di alcohol murni. Terlebih lagi, ditemukan
juga bahwa etanol dengan mudah berpenetrasi pada membran selular untuk
ekstraksi bahan intraseluler dari bahan tanaman.

Alkohol dalam banyak kasus adalah pelarut serbaguna yang bagus untuk
ekstraksi awal. Selanjutnya material bias dimaserasi ata difilter. Saat
mengisolasi zat dari jaringan hijau, sukses ekstraksi dengan alcohol secara
langsung terkait dengan luasnya klorofil dihilangkan menjadi pelarut pada
ekstraksi berulang sampai benar-benar bebas dari warna hijau.

4. CHCl3 :
CHCl3, heksana dan methanol digunakan untuk ekstraksi berturut-turut
lakton terepenoid dengan aktivitas terkonsentrasi dalam fraksi CHCl3.
Meskipun tanin dan terepenoid ditemukan di dalam air. Fase, tetapi mereka
diperoleh dengan perlakuan dengan sedikit pelarut polar.

11
 5. Eter :
Umumnya eter digunakan secara selektif untuk ekstraksi coumarin & asam
lemak

Preparasi obat mentah untuk ekstraksi :

Seluruh bahan tanaman dikeringkan dibawah tempat teduh dan kemudian dibuat
bubuk kasar dengan bantuan penggiling mekanik. Serbuk itu dilewatkan pada
saringan No 40 dan disimpan dalam wadah kedap udara untuk ekstraksi

Prosedur ekstraksi :
Di alat soxhlet sekitar 50 g bubuk tanaman diisi di kantung katun dan diekstraksi
berturut-turut dengan bantuan pelarut yang berbeda. Berbagai pelarut ekstraksi
yang digunakan adalah air, petroleum eter (60-80oC), benzene, CHCl3, etil asetat
dan methanol. Bahan bubuk dikeringkan dibawah 50oC dalam oven sebelum
diekstraksi dengan pelarut berikutnya. Pada ekstraksi berturut-turut ini, nilai
ekstraktif dan pendahuluan studi fitomkimia dilakukan.

Kromatografi Lapis Tipis

Mobile fase : Kloroform : methanol (9,0:1,0)
Larutan tes : Ke 3 g zat yang sedang diperiksa, tambahkan 25 ml metanol,
panaskan di bak air selama 10-15 menit, dinginkan dan saring
Larutan standar : Larutkan 10 mg Vasicine di 10 ml methanol
Prosedur : Terapkan 10 μl masing-masing tes dan solusi standar pada pelat TLC
sebagai pita 10 mm. Kembangkan pelat hingga jarak 8 cm dari garis aplikasi.
Keringkan piring di udara dan periksa di bawah 254 nm. Semprotkan pelat dengan
larutan anisaldehyde sulfuric pereaksi asam. Panaskan pelat pada 110°C untuk
sekitar 5 menit sampai pita terlihat jelas.

Kromatografi Cair Kinerja Tinggi

Kromatografi cair kinerja tinggi dilakukan selama uji coba yang berbeda untuk
metode isolasi. Analisis HPLC dilakukan pada sistem pompa Shimadzu LC-20AD
dilengkapi dengan detektor Shimadzu SPD-20AT UV- Visible dengan panjang
gelombang deteksi diatur pada 230 nm dan 20 μL Loop injektor Rheodyne. Kolom

12
adalah fase terbalik (Luna C18 4,6 mm x 260 mm - ukuran partikel 5μ) dielusi pada
laju 1,0 mL / menit dengan sistem pelarut {asetonitril: 1% Asam asetat glasial - 6:
4 (V / V)}. Sampel disiapkan di Metanol tingkat HPLC.

Hasil dan Pembahasan

Vasicine berhasil diisolasi dari tanaman Adhatodha vasica. Isolasi vasicine

mengahasilkan kemurniaan lebih dari 90% dengan menggunakan HPLC. Noda
hasil isolasi vasicine memiliki nilai Rf yang cocok dengan vaksin standar.
Kromatografi Lapis Tipis dan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi digunakan
untuk identifikasi komponen akhir.

Silica coated TLC tepat dan cocok untuk analisis Vasicinosides termasuk
termasuk vasicine. Silica coated TLC terkadang juga digunakan untuk monitor
fraksi atau pemurniaan akhir Vasicinosides. Kloroform-metanol (95:5) lebih
sering digunakan sebagai system solven untuk aglikon dan kloroform-metanol
(90:10) untuk glikosida.

Komponen murni diharapkan diperoleh menjadi vasicine sehingga fase mobil

untuk sampel TLC dan standar dapat menggunakan kloroform:methanol (9:1)
dengan reagen semprot yang sama. Komponen tunggal dianalisis menggunakan
TLC dengan standar vasicine. Standar vasicine menunjukkan nilai Rf ),65. Dari
data ini, dapat disimpulkan komponen murni tersebut adalah vasicine.

Table 3

13
Komponen murni dikonfirmasi lebih lanjut dengan analisis menggunakan High
Pressure Liquid Chromatography dengan standar vasicine sebagai komponen
pembanding. Analisis standard dan komponen murni vasicine diperoleh puncak
dengan waktu retensi yang sama (3,957) yang berturut-turut ditunjukkan pada
gambar 2 dan 3. Hasil analisis HPLC ditunjukkan pada table 4.

14
Penutup

Dari hasil diatas, dapat disimpulkan Adhathoda vasica mengandung komponen

vasicin yang dieluasi menggunakan tehnik sederhana dengan biaya yang murah
dan dikuantifikasi menggukan tehnik HPLC. Jadi, diperoleh komponen vasicin
yang akan digunakan sebagai penanda untuk analisis komponen yang tidak
deketahui. 500 mikro gram komponen vasicin diperoleh dari kira- kira 200 gram
akar Adhathoda vasica.

15