Efek Postabsorpsi dan Dosis Intravena

Untuk dosis intravena, konsentrasi obat di organ penghilang akan selalu relatif rendah karena efek
pengenceran volume distribusi, dibandingkan dengan konsentrasi obat dalam usus. Oleh karena itu,
saturasi transporter (dan enzim) akan minimal, jika sama sekali, dan pertimbangan kelarutan akan
menjadi tidak penting ketika konsentrasi sistemik obat yang terukur tercapai.

Obat dengan rasio ekstraksi tinggi, di mana pembersihan mendekati aliran darah, terutama
terbatas pada senyawa Kelas 1 (dan mungkin beberapa senyawa Kelas 2 yang ditunjuk karena
kelarutannya rendah pada pH rendah; lihat Perhatian d). Ini akan menjadi kenyataan karena
metabolisme obat-obatan tersebut tidak dibatasi oleh pembubaran atau permeabilitas.

Pasca penyerapan usus dan setelah pemberian intravena, baik pengangkut maupun pengangkut
eflux dapat menjadi penentu penting dari disposisi untuk senyawa Kelas 2, 3, dan 4. Mereka juga
akan penting untuk senyawa Kelas 1 di mana hasil permeabilitas tinggi dari pengangkut serapan
(Perhatian c).

Sekresi bilier obat induk dapat menjadi komponen penting disposisi untuk senyawa Kelas 3 dan 4.
Sekresi bilier dari sebagian besar obat induk Kelas 1 dan 2 akan diabaikan karena metabolisme yang
luas, meskipun ekskresi empedu metabolit dapat menjadi penting.

Penghapusan ginjal senyawa Kelas 3 dan 4 dapat dipengaruhi oleh kedua pengangkut serapan dan
eflux. Selain itu, metabolisme senyawa Kelas 3 dan 4 dalam ginjal, dan interaksi transporter-enzim,
mungkin penting untuk obat-obatan di mana transporter serapan spesifik ginjal (vs. hati) terlibat
(mis., Furosemide). Metabolisme senyawa Kelas 2 (dan mungkin Kelas 1) dapat menjadi penting di
ginjal, ketika enzim spesifik ginjal seperti CYP3A5 diidentifikasi (mis., Tacrolimus dan siklosporin).

Upaya untuk menggunakan penanda proses enzimatik (mis., Tes napas midazolam vs
erythromycin) untuk memprediksi metabolisme substrat lain tidak dapat diharapkan berfungsi
ketika obat uji berada dalam kelas BCS yang berbeda. Bahkan ketika dua substrat enzimatik
berada di kelas yang sama, ada sedikit peluang untuk mendeteksi korelasi potensial ketika dua
senyawa uji substrat untuk pengangkut serapan dan eflux yang berbeda. Banyak, banyak makalah
yang menyelidiki potensi satu substrat untuk memprediksi metabolisme substrat lain oleh enzim
yang sama. Hampir semua upaya ini gagal, dan kami percaya bahwa alasan kurangnya korelasi
adalah karena perbedaan dalam kerentanan transporter. Misalnya, eritromisin adalah substrat untuk
pengangkut serapan dan eflux serta CYP3A4. Jelas bahwa kemampuan metabolisme eritromisin
untuk memprediksi metabolisme senyawa CYP3A4 lainnya akan dikompromikan jika perbedaan
dalam transportasi tidak diidentifikasi dan sepenuhnya diperhitungkan.

Interaksi Obat-Obat

Interaksi obat-obat tidak terbatas pada proses enzimatik tetapi sering dapat dimediasi oleh
interaksi transporter dan sering melibatkan interaksi transporter-enzim untuk senyawa Kelas 2.
Menggunakan sistem seluler Caco-2 CYP3A4 kami yang ditransfusikan (27), kami menunjukkan
bahwa untuk fluks dalam arah apikal ke basolateral, penghambatan P-glikoprotein menyebabkan
penurunan rasio ekstraksi K77 (28) dan sirolimus (29), kedua substrat untuk CYP3A4 dan
Pglycoprotein, meskipun dalam kondisi yang sama ada 16 Wu dan Benet tidak ada perubahan dalam
rasio ekstraksi untuk felodipine dan midazolam, substrat hanya untuk CYP3A4 dalam sistem seluler
ini.

Secara umum, studi mikrosomal in vitro yang menunjukkan perubahan metabolisme untuk obat
ketika substrat yang berinteraksi ditambahkan akan menjadi prediksi interaksi in vivo, tetapi tidak
akan selalu menghasilkan prediksi kuantitatif. Namun, ketika sebuah studi mikrosomal in vitro
tidak menunjukkan interaksi metabolik, tidak dapat disimpulkan bahwa interaksi metabolik in
vivo tidak akan terjadi, terutama untuk senyawa Kelas 2 di mana interaksi transporter-enzim
dapat mengakibatkan perubahan metabolisme yang signifikan karena penghambat transporter.

Setelah pemberian oral, interaksi signifikan yang signifikan akan terjadi untuk obat Kelas 2 yang
merupakan substrat untuk kedua enzim usus (mis., CYP3A, UGTs) dan transporter efluks apikal
usus (mis. P-glikoprotein, MRP2, BCRP). Ini karena penghambatan enzim usus secara bersamaan
dan transporter eflux apikal keduanya menyebabkan metabolisme usus yang lebih sedikit dengan
cara yang secara sinergis dapat meningkatkan konsentrasi obat sistemik (Tabel II).

Interaksi pengangkut enzim-eflux yang sangat penting dalam usus tidak akan sama pentingnya di
hati (dan ginjal) karena urutan terbalik di mana molekul obat menemukan dua protein. Seperti
yang baru-baru ini kami rangkum (47), dalam usus obat penyerap bertemu transporter eflux apikal
pertama dan kemudian enzim, sehingga penghambatan transporter eflux mengurangi akses ke
enzim dengan mencegah daur ulang (Gbr. 5). Berbeda dengan hati (atau ginjal), molekul obat
bertemu dengan enzim sebelum transporter eflux apikal (Gbr. 5). Peningkatan metabolisme hepatik
karena penghambatan transporter eflux hepatik mungkin memiliki implikasi untuk efek makanan
berlemak tinggi yang diamati dengan senyawa Kelas 2, seperti yang dibahas sebelumnya.

Penghambatan transport uptake hati dapat menyebabkan peningkatan konsentrasi obat sistemik
secara signifikan untuk senyawa Kelas 2 yang tidak dapat diprediksi dari studi interaksi metabolik
mikrosomal in vitro. Di sini, penghambatan enzim hati dan transporter influx basolateral akan
menghasilkan peningkatan sinergis dalam konsentrasi sistemik (Gambar 5 dan Tabel II). Studi in vitro
kami baru-baru ini menggunakan hepatosit tikus sebagai model untuk menjelaskan efek gagal ginjal
pada eliminasi eritromisin hepatik menunjukkan bahwa satu toksin uremik, indoksil sulfat, memiliki
potensi untuk menghambat cyp3a, sedangkan toksin uremik kedua, CPMF, poten menghambat
transport uptake transporter oatp2 (38).

Penghambatan transport serapan hati dan ginjal dapat menyebabkan peningkatan yang signifikan
dalam konsentrasi sistemik senyawa Kelas 3 dan 4. Kami berharap interaksi ini menjadi berkurang
besarnya dibandingkan dengan yang berpotensi melibatkan interaksi transporter-enzim untuk
senyawa Kelas 2, di mana kemungkinan efek penghambatan sinergis pada enzim dan pengangkut
dapat terjadi (Tabel II).

Interaksi obat-obat untuk senyawa Kelas 1 terutama akan bersifat metabolik, dengan interaksi
transporter-enzim hanya menjadi penting bagi obat-obatan tersebut di mana permeabilitas yang
tinggi merupakan hasil dari pengambilan transporter yang cepat daripada Log P yang tinggi
(Perhatikan c).

Kami menduga bahwa beberapa interaksi obat-obat, yang sebelumnya dikaitkan dengan perubahan
pH atau perubahan waktu transit usus, terutama untuk senyawa Kelas 3, mungkin terbukti dimediasi
oleh transporter.

SISTEM KLASIFIKASI DISPOSISI PEMBUANGAN BIOPHARMASI

Pengembangan BCS adalah langkah besar dalam membawa ilmu pengetahuan rasional ke
regulasi, memungkinkan pengabaian bioavailabilitas in vivo dan pengujian bioekivalensi
(“biowaiver”) dari bentuk sediaan lepas langsung untuk obat dengan kelarutan tinggi, kemampuan
tinggi ketika produk obat tersebut juga menunjukkan pembubaran cepat (1,2). Aplikasi sains ini
menghasilkan penurunan beban regulasi.
 FDA telah menyarankan berbagai kemungkinan ekstensi biowaiver (15). Kami akan mendukung
pengurangan persyaratan kinerja tinggi dari 90% menjadi 85% terserap tetapi mengusulkan ekspansi
lebih lanjut di bawah ini. Kami prihatin dengan kemungkinan ekstensi biowaiver untuk senyawa BCS
Kelas 2, 3, dan 4 senyawa seperti yang telah kami nyatakan di atas.

Penunjukan rute utama eliminasi obat sebagai bagian atau alih-alih kriteria permeabilitas (seperti
yang ditunjukkan pada Gambar. 6) akan mengurangi beban regulasi untuk lebih banyak senyawa
Kelas 1, akan menghilangkan ambiguitas dan kesulitan dalam menentukan 90% (atau 85%) )
penyerapan untuk senyawa Kelas 1 dan 2, dan akan memungkinkan prediksi karakteristik
penyerapan dan disposisi obat di keempat kelas Biopharmaceutics Sistem Disposisi Obat
Klasifikasi (BDDCS), seperti yang dijelaskan dalam 20 generalisasi miring tebal di bagian sebelumnya
makalah ini.

Kami menemukan bahwa hal tersebut tidak konsisten dalam menyarankan bahwa produk yang
mengandung obat BCS Kelas 3 harus memenuhi syarat untuk studi bioekivalensi pelepasan in vivo
berdasarkan studi disolusi (5,15). Sebagai kriteria pertama yang mendefinisikan "metabolisme luas"
(Gbr. 6) untuk mengklasifikasikan obat sebagai BDDCS Kelas 1 atau 2, kami mengusulkan 50%
metabolisme dosis oral in vivo pada manusia, tetapi percaya bahwa pada analisis lebih lanjut,
breakpoint ini mungkin berubah ± 10%.

Kami percaya, akan lebih mudah dan tidak ambigu untuk menentukan penugasan kelas BDDCS
berdasarkan tingkat metabolisme daripada menggunakan permeabilitas (mis., Tingkat penyerapan)
dalam penugasan BCS. Di sini, kami dapat menghapus ambiguitas (daftar ganda / rangkap tiga) pada
Tabel I menggunakan penentuan kelarutan Lindenberg et al. (18), dalam banyak kasus, dan tingkat
nilai metabolisme dari literatur (Rujukan. 20 dan 21 dan sumber-sumber asli). Karena tujuan utama
dari makalah ini adalah untuk memfasilitasi prediktabilitas interaksi transporter-enzim dan potensi
interaksi antara obat-obat dan penyakit-obat untuk substrat tertentu, pada Tabel III kami
mencantumkan dalam huruf tebal senyawa-senyawa tersebut di Kelas 1 dan 2 yang mungkin
diharapkan untuk menunjukkan first-pass metabolisme usus yang signifikan. Kami menunjuk dengan
superskrip “U” obat-obatan yang telah diidentifikasi sebagai substrat untuk transporter
pengambilan.

Keuntungan lain dari BDDCS adalah bahwa tugas kelas pendahuluan untuk NME dapat diperoleh dari
ukuran metabolisme pada hepatosit manusia, sebelum studi in vivo pada manusia. Seperti dibahas di
atas, penentuan ini harus dilakukan dalam sistem seluler yang menjaga hubungan serapan dan
mengangkut eflux dengan enzim metabolik (mis., Studi mikrosom tidak akan cukup untuk
menentukan penugasan kelas BDDCS) (37. Perhatikan bahwa parameter yang dibutuhkan di sini
bukanlah clearance metabolik yang dapat diprediksi dari pengukuran in vitro dari intrinsik clearance,
pengikatan protein, dan aliran darah, melainkan fraksi dari total clearance yang bersifat metabolik,
parameter yang sebelumnya tidak ditandai dengan baik dari dalam studi vitro. Penghapusan
metabolisme obat yang lengkap dapat terjadi untuk zat yang menunjukkan pembersihan yang sangat
rendah (mis., Warfarin).

Tentu saja, akan lebih mudah untuk menetapkan kelas pada Gambar 6 dengan benar jika metodologi
in silico divalidasi.

Pengembangan Hubungan Antara Disposisi dan Permeabilitas

Aturan Lipinski 5 (22-24) adalah upaya untuk menentukan batas atas lipofilisitas untuk
mengembangkan senyawa "obat". Dari bahan yang disajikan di sini, jelas bahwa hubungan
permeabilitas disposisi (DPR) harus diselidiki dan didefinisikan untuk menandai batas penting antara
senyawa BDDCS Kelas 1 dan 2 yang sangat termetabolisme vs senyawa BDDCS Kelas 3 dan 4 yang
terutama dihilangkan.

Pada tahun 2002, Mandagere et al. (53) melaporkan upaya mereka untuk menggabungkan langkah-
langkah permeabilitas dengan fraksi obat yang tidak dimetabolisme dalam 30 menit dalam inkubasi
dengan mikrosom hati atau fraksi S9 untuk memprediksi bioavailabilitas in vivo. Mereka melaporkan
beberapa keberhasilan tetapi menyarankan bahwa prediktabilitas model “paling baik diterapkan
pada senyawa yang terdifusi secara pasif, yang menyumbang sekitar 80% dari semua senyawa”.
Pada intinya, laporan ini (53) hanya mengkonfirmasi temuan Smith (19) bahwa senyawa lipofilik yang
lebih permeabel membuat substrat yang baik untuk enzim CYP, karena fraksi yang tidak
dimetabolisme dalam 30 menit inkubasi adalah ukuran pembersihan, tetapi metode ini tidak dapat
menjelaskan perbedaan bioavailabilitas untuk senyawa Kelas 2 yang dihasilkan dari interaksi
transporter-enzim, atau untuk obat Kelas 3 di mana transporter uptake akan menjadi penentu
utama bioavailabilitas.

KESIMPULAN

Selama beberapa tahun terakhir, penelitian di laboratorium kami tentang sistem seluler yang
ditransfusikan, hati tikus dan perfusi tikus yang terisolasi, dan studi dalam hepatosit primer telah
membawa kami pada pemahaman yang lebih baik tentang interaksi antara pengangkut, baik
masuknya dan penghabisan, dan enzim metabolik di usus dan hati. Kami menyadari bahwa interaksi
ini dapat berbeda tergantung pada kelarutan obat dan karakteristik permeabilitas seperti yang
tercermin dalam Sistem Klasifikasi Biofarmasi (BCS). Meskipun BCS memiliki efek yang nyata dalam
mengurangi beban regulasi dengan memungkinkan pengabaian studi bioekivalensi in vivo untuk
sejumlah terbatas obat-obatan Kelas 1, sedikit penggunaan prediksi telah dibuat dari Kelas 2, 3, dan
4 dalam kategorisasi BCS. Kami mencatat bahwa, secara umum, BCS Kelas 1 dan 2 sangat
dimetabolisme, sedangkan obat-obatan BCS Kelas 3 dan 4 umumnya diekskresikan tidak berubah
melalui jalur empedu atau ginjal. Oleh karena itu kami menyarankan bahwa mengubah komponen
permeabilitas menjadi rute komponen eliminasi dalam Sistem Klasifikasi Penyebaran Obat
Biofarmasi (BDDCS) akan memfasilitasi prediksi, secara nyata memperluas jumlah obat Kelas 1 yang
memenuhi syarat untuk pengabaian studi bioekivalensi in vivo, dan memberikan wawasan baru.
Kami merinci bagaimana sistem klasifikasi tersebut dapat digunakan dalam mengkategorikan rute
eliminasi; memprediksi efek eflux dan transporter absorptif pada penyerapan obat; memprediksi
kapan interaksi transporterenzim akan menghasilkan efek yang signifikan secara klinis; memprediksi
arah dan pentingnya efek makanan; memprediksi efek transporter setelah pemberian intravena dan
pada tingkat sistemik pasca penyerapan; dan dalam mendefinisikan potensi interaksi obat-obat.
Kami menunjukkan di mana penghambatan enzim dan transporter dapat memiliki efek sinergis dan
di mana ia dapat memiliki efek yang berlawanan. Akhirnya, kami menyarankan bahwa mungkin lebih
mudah untuk menentukan klasifikasi berdasarkan rute utama eliminasi daripada permeabilitas; kami
mengusulkan tingkat kriteria metabolisme untuk pengabaian studi bioekivalensi in vivo; dan kami
menyarankan bagaimana algoritma prediktif dapat dikembangkan hanya dengan menggunakan
metode in vitro atau in silico untuk memfasilitasi tugas kelas dalam BDDCS.