BIOTEKNOLOGI MIKROBA
OLEH :
.
1.2. Rumusan Masalah
1. Apakah yang dimaksud dengan mikoorganisme ?
2. Bagaimanakah struktur mikroorganisme ?
3. Bagaimanakah Pemanfaatan dari mikroorganisme ?
4. Bagaimanakah Aplikasi mikroba dalam kehidupan sehari-hari ?
5. Bagaimanakah penggunaan Vaksin dari Mikroorganisme ?
6. Bagaimanakah genom dari mikroorganime ?
7. Bagaimana mikroba dalam mendignosa penyakitt pada manusia ?
8. Bagaimnakah peran mikroba dalam Memerangi bioterorisme ?
A. Pengertian mikroorganisme
Mikroorganisme, atau mikroba, adalah organisme yang sangat kecil untuk melihat
individu tidak dapat dilihat dengan mata telanjang harus dengan bantuan mikroskop.
Meskipun mikroorganisme yang paling banyak adalah bakteri, mikroba juga termasuk
virus; jamur seperti ragidan cetakan; ganggang; dan organisme bersel tunggal disebut
protozoa. Bakteri telah ada di bumi selama ini 3,5 miliar tahun, dan mereka jauh melebihi
jumlah manusia. Diperkirakan mikroba terbentuk 50% dari materi kehidupan bumi.
Namun kurang dari 1% darisemua bakteri telah diidentifikasi, dikultur, dan dipelajari di
laboratorium dan Kita dikelilingi oleh bakteri. Mereka hidup di kulit, di mulut, dan di
usus; mereka ada di udara dan di hampir setiap permukaan yang kita sentuh. Bakteri juga
beradaptasi untuk hidup di beberapa lingkungan ekstrim di planet ini seperti es di kutub,
gurun, mata air panas, dan di bawahnya tekanan luar biasa tinggi dalam ventilasi laut
dalam di bawah permukaan laut.
Bakteri merupakan mikroorganisme yang masuk ke dalam golongan prokariot.
Hal itu disebabkan karena bakteri mempunyai struktur yang sangat sederhana dan
berukuran sangat kecil. Ukuran bakteri berkisar antara 0,1–10 µm (1µm=106m).
Kebanyakan bakteri bulat berdiameter antara 0,5–2 µm dan bakteri batang berukuran
lebar 0,2–2 µm, panjang 1–10 µm. Bakteri yang berukuran paling kecil misalnya
ricketsia, chlamidia, dan mycoplasma, hampir sama dengan ukuran virus yang paling
besar (poxvirus), sedangkan ukuran bakteri yang paling besar (beberapa bakteri batang)
mempunyai panjang yang hampir sama dengan diameter beberapa sel eukariot. Sel
prokariotik yaitu bakteri mempunyai struktur sel yang unik, di mana sel bakteri tidak
mempunyai ruangan yang cukup untuk mitokondria, nukleus, apparatus golgi, lisosom,
retikulum endoplasma, seperti yang ada dalam satu sel eukariot, pada sel bakteri hanya
memiliki ruangan kira-kira seluas mitokondria. Hal inilah yang membuat sel bakteri
sangat berbeda dengan sel lainnya. Walaupun mempunyai ukuran sel yang sangat kecil
dan struktur yang sangat sederhana, tetapi sel bakteri mampu bertahan hidup dan
bereproduksi di lingkungannya serta mempunyai siklus hidup yang lebih cepat dari sel
eukariot.
jenis Vaksin
Vaksin subunit dibuat dengan menyuntikkan sebagian dari struktur virus atau bakteri,
biasanya protein atau lipid dari mikroba, yang direspon oleh sistem kekebalan tubuh. Vaksin
yang cukup efektif melawan virus hepatitis B adalah salah satu contoh pertama vaksin
subunit, dan vaksin untuk penyakit tetanus, antraks, dan meningokokus juga merupakan
vaksin subunit.
Vaksin yang dilemahkan melibatkan penggunaan bakteri hidup atau virus yang telah
dilemahkan atau dengan mengubah kondisi pertumbuhan mereka untuk mencegah replikasi
mereka setelah diperkenalkan ke penerima. Vaksin Sabin untuk polio adalah vaksin yang
dilemahkan.Begitu juga vaksin MMR, tuberkulosis, kolera, dan cacar air (varicella) serta
banyak lainnya.
Vaksin yang tidak aktif (terbunuh) disiapkan dengan membunuh patogen dan
menggunakan mikroorganisme yang mati atau tidak aktif untuk vaksin. Campuran dari virus
polio yang tidak aktif digunakan dalam vaksin Salk melawan polio. Vaksin rabies
diberikandengan menyuntikkan ke anjing, kucing, dan manusia, DPTvaksin, dan vaksin
influenza (flu), yangtelah menjadi umum dalam beberapa tahun terakhir, jugacontoh vaksin
yang tidak aktif. Flu yang tidak aktifVaksin juga dapat diberikan sebagai semprotan hidung.
Vaksin berbasis DNA telah dicoba tetapi sejauh ini belum terbukti efektif. Namun, pada
2005, USDA menyetujui vaksin DNA berlisensi pertama di dunia, vaksin terhadap virus
West Nile (WNV). Dikembangkan oleh Fort Dodge Laboratories dari Fort Dodge, Iowa,
vaksin ini dirancang untuk melindungi kuda dari WNV, a virus yang ditularkan oleh
nyamuk. Infeksi Equine WNV sedang meningkat, dan sekitar sepertiga dari kuda terinfeksi
dengan WNV akan mati atau harus di-eutanasia. Pada 2007, USDA menyetujui yang
pertama vaksin kanker terapeutik di Amerika Serikat untukspesies apa pun, manusia atau
hewan, untuk melanoma taring. Vaksin ini terdiri dari plasmid yang mengandung gen untuk
enzim manusia (tyrosinase).
F. genom mikroorganisme
Pada tahun 1995, Institute for Genomic Research, yang memainkan peran utama dalam
Proyek Genom Manusia, melaporkan urutan lengkap dari mikroba
genom ketika mereka menerbitkan urutan untuk Haemophilus influenzae. Sejak itu, lebih
dari 1.000 genom mikroba telah diterbitkan, dan pekerjaan sedang dilakukan pada genom
selama beberapa ratus mikroba lainnya. Pada tahun 1994, sebagai perpanjangan dari
Manusia Proyek Genom, Departemen Energi A.S. memprakarsai Program Genom
Mikroba (MGP). Tujuan MGP adalah mengurutkan seluruh genom mikroorganisme yang
memiliki aplikasi potensial dalam biologi lingkungan, penelitian, industri, dan kesehatan,
seperti bakteri yang menyebabkan TBC, gonore, dan kolera, serta genom protozoa
patogen seperti organisme (Plasmodium) itu menyebabkan malaria.
Studi Metagenomik Urutan genom dari Komunitas Mikroba
Metagenomics melibatkan pengurutan untuk genom seluruh komunitas mikroba.
Proyek metagenomik adalah sekuensing genom mikroba dari lingkungan sampel air,
udara, dan tanah serta dari lautan di seluruh dunia, gletser, tambang — hampir setiap
orang sudut dunia. Perkiraan juga menunjukkan bahwa lebih dari 99% dari
keanekaragaman mikroba yang diketahui saat ini ada dalam organisme yang tidak dapat
dibudidayakan. Saat ini sejumlah proyek metagenomics telah diluncurkan di seluruh
dunia, yang melibatkan tim penyelidik internasional sequencing mikroba laut dan
mikroba tanah (ada proyek "terragenome" sedang berlangsung). Perintis genom manusia
J. Craig Venter, yang kami dibahas dalam Bab 3, meninggalkan Celera pada tahun 2003
untuk membentuk J. Craig Venter Institute (JCVI), dan dia telah memainkan peran
sentral dalam membangun bidang metagenomik. Salah satu inisiatif institut adalah
ekspedisi global untuk mengambil sampel mikroorganisme laut dan darat dari seluruh
dunia dan mengurutkan genom mereka.
Sebuah studi percontohan yang dilakukan institut di Laut Sargasso lepas dari
Bermuda menghasilkan sekitar 1.800 spesies mikroorganisme baru dan lebih dari 1,2
juta DNA baru urutan Sampel air dari berbagai lapisan dalam kolom air dilewatkan
melalui filter kepadatan tinggi dari berbagai ukuran untuk menyaring mikroba. DNA itu
diisolasi dari mikroba dan digunakan untuk kloning senapan dan kemudian diurutkan
dengan komputer otomatis sequencer yang terus berjalan di papan hamper sekitar jam.
Ekspedisi ini memiliki potensi besar untuk mengidentifikasi mikroba dan gen baru
fungsi, termasuk gen yang berharga secara komersial. fotoreseptor untuk menangkap
energi cahaya menjadi daya fotosintesis. Para ilmuwan tertarik untuk mempelajari lebih
lanjut tentang fotoreseptor untuk membantu mengembangkan cara-cara di mana
fotosintesis dapat digunakan untuk menghasilkan hidrogen sebagai sumber bahan bakar.
Peneliti medis juga sangat tertarik pada fotoreseptor karena, pada manusia dan banyak
spesies lain, fotoreseptor di mata bertanggung jawab atas visi.
Genomik virus
Studi genom virus adalah bidang penelitian panas lainnya (Tabel 5.4, di halaman 149).
Ini sebagian benar karena banyak virus mematikan bermutasi dengan cepat di
tanggapan terhadap vaksin dan perawatan antivirus. Antiviral obat dirancang untuk
bekerja dalam beberapa cara. Beberapa obat antivirus menghalangi virus dari
pengikatan ke permukaan sel dan menginfeksi sel; yang lain memblokir replikasi virus
setelah virus menginfeksi sel-sel tubuh. Penelitian pada genom virus membantu para
ilmuwan mempelajari bagaimana virus menyebabkan penyakit dan mengarah pada
pengembangan obat antivirus baru dan efektif.
Ekstraksi DNA genom bakteri
Hasil isolasi bakteri diperoleh 38 isolat murni, selanjutnya diidentifikasi keragaman
genetik bakteri tersebut. Langkah pertama yaitu ekstraksi DNA genom. Pengekstraksian
DNA dilakukan menggunakan larutan cetyltrimetyl ammonium bromide(CTAB)
(modifikasi Murray & Thompson, 1980). Isolat bakteri yang telah murni ditanam dalam
media cair Luria Bertani (LB), dikocok selama 24 jam pada suhu 28 °C dengan
kecepatan 140–160 rpm. Kemudian bakteri dipanen sebanyak 5 mL ke dalam tabung
mikro, disentrifugasi dengan kecepatan 12000 rpm selama satu menit dan supernatannya
dibuang. Pelet yang telah mengendap dalam tabung mikro dikeringkan dengan cara
dibalikkan di atas kertas tisu. Pelet bakteri ditambahkan 500 µL 1× TE bufer, kemudian
diresuspensi dan disentrifugasi dengan kecepatan 12.000 rpm selama lima menit.
Supernatan dibuang dan pelet sel diresuspensikan kembali dengan 1× TE bufer sebanyak
500 µL, ditambahkan 100 µL lysozym (50 mg/µL) dan diinkubasi pada suhu 37 °C
selama satu jam (setiap 15 menit dibolak-balik). Setelah itu ditambahkan 100 µL NaCl
5M dan 100 µL CTAB, kemudian divorteks dan diinkubasi pada suhu 65 °C selama 20
menit. Selanjutnya ditambahkan 500 µL phenol:chloroform:isoamylalkohol (25:24:1),
divorteks selama 30 detik, kemudian disentrifugasi pada kecepatan 10.000 rpm selama
lima menit. Supernatan diambil dan dipindahkan ke dalam tabung mikro steril yang
telah berisi 600 µL isopropanol/etanol absolutdingin (-20 °C) dan dibolak-balik hingga
timbul benang-benang DNA. DNA dalam bentuk pelet dicuci dengan 1 mL etanol 70%
dingin dan dikeringkan diudara selama empat sampai 24 jam untuk menguapkan etanol
yang masih tersisa. Langkah terakhir dalam ekstraksi DNA adalah penambahan 1×TE
bufer 20–30 µL tergantung jumlah pelet yang terbentuk. Kemudian DNA disimpan pada
suhu -20 °C untuk keperluan selanjutnya.
Mikroorganisme atau mikroba adalah organisme yang sangat kecil untuk melihat individu
tidak dapat dilihat dengan mata telanjang harus dengan bantuan mikroskop. Meskipun
mikroorganisme yang paling banyak adalah bakteri, mikroba juga termasuk virus; jamur
seperti ragidan cetakan; ganggang; dan organisme bersel tunggal disebut protozoa. Sel-sel
bakteri jauh lebih kecil (1-5 mikrometer, atau μm; 1 mm 50.001 milimeter) daripada sel
eukariotik (10–100 mm) dan memiliki struktur yang jauh lebih sederhana Sel prokariotik
yaitu bakteri mempunyai struktur sel yang unik, di mana sel bakteri tidak mempunyai
ruangan yang cukup untuk mitokondria, nukleus, apparatus golgi, lisosom, retikulum
endoplasma, seperti yang ada dalam satu sel eukariot, pada sel bakteri hanya memiliki
ruangan kira-kira seluas mitokondria.
DAFTAR PUSTAKA
Cano, R.J. dan Colom, J.S. (1986). Microbiology. St. Paul, MN: West Publishing
Company.
De Schryver P, Sinha AK, Kunwar PS, Baruah K, Verstraete W. 2010. Applied Microbiology
and Biotechnology 86: 1.535–1.541.
Fardiaz, S. (1989). Mikrobiologi Pangan. Institut Pertanian .Bogor, Indonesia: Pusat Antar-
Universitas Pangan dan Gizi.
Tortura, G.J., Funke, B.R. dan Case, C.L. Microbiology. An Introduction. Menlo Park,
CA.: The Benjamin/Cummings Publishing Company, Inc.