REVIEW JURNAL

Judul : METRONIDAZOLE BIOADHESIVE VAGINAL

SUPPOSITORIES: FORMULATION, IN VITRO AND IN
VIVO EVALUATION
Jurnal : International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical
Sciences
Volume dan Halaman: ISSN- 0975-1491 Vol 4, Issue 1, 2012 , 344-353
Penulis : HAIDY ABASS, RABAB KAMEL dan AHMED
ABDELBARY
Tahun : 2012
Tanggal : Received: 29 Aug 2011, Revised and Accepted: 26 Nov 2011

INTRODUCE
Penggunaan vagina tablet yang dianggap sebagai alternatif untuk pasien saat ini
tidak dapat mentolerir sebagai perawatan oral. Banyak penelitian telah menunjukkan
keunggulan vagina daripada rute oral dalam hal minimalisasi dramatis efek samping
umum dan gastrointestinal.
Kemunculan bioteknologi telah menjadi minat dalam menggunakan membran
mukosa sebagai tempat pengiriman obat non invasif. Pemberian obat melalui
membran mukosa, termasuk membran vagina dan dubur, memiliki keuntungan
dengan melewati metabolisme hepatogastrointestinal pertama yang berhubungan
dengan pemberian oral.
Secara umum, supositoria adalah bentuk sediaan padat yang dimaksudkan untuk
dimasukkan ke dalam lubang tubuh di mana mereka meleleh, melunakkan atau larut
dan memberikan efek lokal atau sistemik.
Supositoria biasanya digunakan secara rektum atau vagina, kadang-kadang
urethrally dan jarang aurally dan nasal. Mereka memiliki berbagai bentuk dan bobot.
Bentuk dan ukuran supositoria harus dapat dengan mudah dimasukkan ke target yang
dimaksud. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk merumuskan supositoria
Metronidazole menggunakan basis yang larut dalam air dan emulsi. Supositoria
disiapkan untuk dievaluasi karakteristik fisik mereka serta pelepasan obat in-vitro
dalam pH 4 (simulasi pH vagina) menggunakan metode non-membran, analisis
kinetik dari data rilis juga dilakukan orifice tanpa menyebabkan distensi yang tidak
semestinya.

MATERIALS AND METHODS

Materials
 Metronidazole dibeli dari perusahaan kimia El-Nasr, Mesir. Polietilen glikol
600, Polietilen glikol4000, polietilen glikol 1500Polietilen glikol 6000,
polietilen glikol200. Mentega cokelat. Witepso1 H15, Ovucire WL 3460 dan
SuppocireAM dengan baik dipasok dari Gattefosse etäblissements, Prancis.
 Gelatin dibeli dari The General Chemical dan Pharmaceutical C0., LTD,
Inggris. Propy1ene glikol dibeli dari Evans Chem. C. Mesir. G1ycero1 (grade
B.P).
 Sodium alginat dan Sodium carboxy methyl cellulose dibeli dari General
Chemical dan CO farmasi; LTD, Inggris).
 Cellophane, mw-cutoff 10.000 dibeli dari Diachema, Jerman. Secnidazole
diperoleh dari Sigma-Aldrich (USA) B No.20040626.
 Flagy Vaginal Suppository® yang mengandung 500 mg Metronidazole.
Metanol dan asetonitril, kadar HPLC, Sigma-Aldrich (AS).
 Sabouraud Dextrose Agar dibeli dari Oxoid, Inggris; rumus khasnya (g / l)
pepaya mikologis 10.0; glukosa 40.0; Agar 15.0, pH 5,6 ± 02 Lot / CH, -B:
340 53683.
 Media cair suab dibeli dari Oxoid, England.Candida. Albicans diisolasi dari
apusan vagina pasien dengan cadidiasis vagina yang tidak menerima terapi
 antijamur. Kalium dihidrogen fosfat dan disodium monhydrogen fosfat,
Sigma-Aldrich (AS)

Formulation of Metronidazole Suppositories

Formulasi supositoria Metronidazol. Supositoria MTZ, masing-masing
mengandung 500 mg obat diformulasikan menggunakan basis larut air, emulsi dan
lemak, Tabel (I, II dan III).
Metode fusi diadopsi untuk mempersiapkan batch yang berbeda. Untuk
supositoria yang larut dalam lemak dan air, basa dicairkan terlebih dahulu
menggunakan penangas air pada suhu yang sesuai kemudian bubuk MTZ
ditambahkan ke basa yang dicairkan. Pengadukan perlahan-lahan hingga homogen
untuk memastikan pencampuran sempurna dan untuk meningkatkan pendinginan.
Massa dituangkan ke dalam cetakan logam,pada waktu sebelum massanya
berrkurang.
Supositoria teremulsi dibuat dengan melarutkan surfaktan baik dalam fase
hidrofilik atau lipofilik dan polimer dilarutkan dalam fase air sebelum memulai
emulsifikasi. Basa yang digunakan dicairkan kemudian fase berair ditambahkan,
dengan agitasi kontinyu. akhirnya obat ditambahkan dan massa dituangkan ke dalam
cetakan logam. Setelah pemadatan pada suhu kamar, supositoria disiapkan dikemas
dalam wadah tertutup rapat dan ditempatkan di lemari es. Sebelum digunakan,
supositoria dibiarkan selama 2 jam pada suhu kamar.

Evaluasi Supositoria
Basis supositoria yang disiapkan dikenai tes berikut :

Variasi berat suppositoria

Berat rata-rata dihitung dengan menimbang dua puluh supositoria secara individual
dari setiap formulasi dan tentukan persentase penyimpangan rata-ratanya.

Waktu disintegrasi
Tes dilakukan dalam air suling pada suhu 37 C menggunakan AS (alat disintegrasi
tablet). Waktu disintegrasi dicatat segera setelah supositoria yang ditempatkan dalam
keranjang benar-benar meleleh atau larut. Formulasi yang berbeda menunjukkan
waktu Disintegrasi yang berbeda, mereka dilarutkan atau dilunakkan dan dilebur
dalam kisaran 12-50 menit untuk polietilen glikol, (5-20) untuk gelatin, (15-30) untuk
emulsi dan untuk basis lemak. waktu leleh adalah (3-4) menit.
* Menurut (B.P., 1998) menyatakan bahwa waktu leleh, untuk supositoria berbasis
lemak tidak boleh lebih dari 30 menit, sedangkan waktu disolusi supositoria yang
larut dalam air tidak boleh melebihi 60 menit yang bertepatan dengan hasil di atas.

Penentuan Kekerasan
Tes ini dirancang untuk mengukur kekerasan (kerapuhan) supositoria. Supositoria
disiapkan dan dievaluasi menggunakan Erweka hardness tester di bawah pengaruh
peningkatan tekanan pada suhu kamar. Tujuan evaluasi ini adalah untuk melihat
kemampuan berbagai supositoria yang diformulasikan untuk menahan tekanan
selama penanganan, pengiriman dan pemasangan.
Penentuan rentang lebur
Pengujian dilakukan dengan menggunakan metode kapiler dalam peralatan titik leleh.
Sebuah tabung kapiler lurus, panjang 8-10 cm dan diameter internal 1 hingga 1,2 mm,
dibuka di kedua ujungnya. Salah satu ujung tabung dicelupkan ke dalam basis
supositoria dan jumlah yang cukup lembut dikemas untuk mengisi kolom 1 cm.
Tabung kapiler kemudian ditempatkan di peralatan yang terpasang pada termometer.
Rentang leleh dilihat ketika isi tabung kapiler mulai meleleh. Penentuan titik lebur
mengungkapkan variabilitas yang cukup besar antara formulasi yang diuji. Di antara
basis emulsi, supositoria berbasis witepsol (F19-F22) menunjukkan rentang leleh
yang lebih tinggi daripada supositoria berbasis kakao (F23). Witepsol H15 (F20)
memiliki rentang leleh terendah dibandingkan dengan basis lemak lainnya.

Keseragaman kandungan obat

Metode B.P 1998 yaitu Sepuluh supositoria dipilih secara acak dari masing-masing
formula dan diuji secara individual. suatu supositoria dilelehkan dan didispersikan
dalam 25 ml buffer sitrat pH 4 kemudian tambahkan volume sampai 100 ml oleh
buffer yang sama. Wadah dibiarkan berputar dalam rendaman air suhu konstan pada
suhu 37 ° C + 0,5 selama dua jam. Kemudian ditarik dari fase berair, disaring, secara
sesuai diencerkan dan diuji secara spektrofotometri pada 316 nm terhadap blanko.
Kandungan yang memenuhi persyaratan B.P. 1998, berkisar antara 98-102% dari
jumlah yang dimasukkan.

Pelepasan obat In-Vitro dalam Citrate Buffer

Metode pembubaran A.S.P 25
Pelepasan in-vitro dari Metronidazole dari supositoria dilakukan dengan
menggunakan alat disolusi II A.P.P 25 AS (tipe Paddle). Dayung diputar pada 50 rpm
dalam 500 ml buffer sitrat pH 4, dipertahankan pada 37 ± 0,5 ° C. Kandungan
metronidazle ditentukan dengan mengukur absorbansi pada 316 nm terhadap blanko.
Setiap penelitian dilaksanakan tiga kali.

Analisis data pelepasan obat

Data rilis dianalisis secara matematis menggunakan metode regresi linier sesuai
dengan urutan nol, kinetika urutan pertama dan model difusi Higuchi.

Evaluasi Sifat Mukoadhesif Supositoria Vagina Metronidazole

Sifat mukoadhesif dari supositoria vagina yang diformulasikan ditentukan dengan
mengukur kerja adhesi antara selaput lendir vagina kelinci dan supositoria yang
disiapkan menggunakan-INSTRON, Model 2519-103 Serius 3340 Kapasitas 100 N
USA.

Microbiology Study

Kultur 48-jam keruh C. albica.s dibuat dalam 200 ml medium Sabouraud cair,
kekeruhan disesuaikan mengandung sekitar 10 sel / ml. Kemudian set larutan MTZ
pada peningkatan konsentrasi (0,25, 0,5, 0,75 dan 1 mg / mL) disiapkan. Konsentrasi
ini sesuai dengan 25%, 50%, 75% dan 100% MTZ yang dilepaskan dari supositoria
MTZ bioadhesif. Dari setiap konsentrasi MTZ, campuran ragi dan larutan MTZ
dibuat dalam tabung steril masing-masing dengan perbandingan 1:10. Setelah 15 dan
120 mm 100 μl suspensi ragi yang mengandung 0,25 mg / ml MTZ diinokulasi ke
dalam tabung yang mengandung 900 μl media cair Sabouraud. Transfer serupa
dibuat, dari suspensi 0,5 mg / ml setelah 30 dan 120 menit, dari suspensi 0,75mg / ml
setelah 90 dan 120 menit, dan dari suspensi 0,1 mg / ml setelah 120 dan 180 menit.

Studi Bioavailbilitas

Penelitian dilakukan untuk dua formula, yaitu; flagyl ® supositoria vagina

(produk pasar), F23 supositoria vagina. Delapan kelinci betina secara acak dibagi
menjadi empat kelompok, masing-masing berisi dua kelinci. Desain lintas diterapkan
pada dua fase, sehingga masing-masing kelompok menerima dosis tunggal vagina
dari salah satu formula yang diuji di setiap fase. Periode pembersihan tujuh hari
tersisa di antara fase. Formula yang diuji diberikan secara oral kepada kelinci. Kelinci
dipuasakan selama 24 jam sebelum pemberian obat dan terus berpuasa hingga 4 jam
setelah dosis, dengan air yang diizinkan.

Pengambilan Sampel Darah

Sampel darah diambil dari vena telinga marginal kelinci sesaat sebelum
pemberian obat dan pada interval waktu 0,5, 1, 1,5,2, 2,5, 3, 4, 5, 7, 10, dan 24 jam
setelah pemberian obat. Sampel darah ditarik ke tabung dicuci dengan heparin encer
untuk menjaga terhadap pembekuan darah. Sampel darah kemudian disentrifugasi
pada 3000 rpm selama 10 menit dan plasma bening kemudian dikumpulkan dalam
tabung tertutup polietilen dan dibekukan dalam -20 ° C sampai diperlukan untuk
analisis.

Metode Uji HPLC

Metode yang dimodifikasi dari Nasir M et al, (13) M.J. Jessaa et al, (14) dan
J.I.D.Wibawa et al. (15). Diadopsi dengan beberapa modifikasi. Analisis sampel
dilakukan dengan menggunakan sistem Shimadzu HPLC yang dilengkapi dengan
detektor spektrofluorimetri. Fase gerak adalah campuran air dan metanol (70:30 v /
v). Laju aliran adalah 1 ml per menit. Deteksi dilakukan pada 317 nm. Sebagai
panjang gelombang eksitasi dan emisi. Kurva kalibrasi diplot untuk Metronidazole
kisaran 0,01-20 ug / mL. secnidazole digunakan sebagai standar internal.

Persiapan sampel plasma untuk penentuan Metronidazole

Ke 1 ml plasma dalam tabung centrifuge gelas, 1 ml secnidazole ditambahkan

(sebagai standar internal) dan 1 ml asetonitril. Setelah pencampuran (30 detik),
campuran disentrifugasi selama 10 mm pada 300 rpm. Kemudian 20 uml supernatan
disuntikkan ke dalam kromatografi cair. Konsentrasi Metronidazole dalam sampel
yang tidak diketahui dihitung dengan mengacu pada kurva kalibrasi yang disiapkan.
 Untuk kurva kalibrasi, standar plasma disiapkan dengan melonjak satu mL plasma
kelinci bebas obat dengan solusi kerja standar internal (untuk menyiapkan 20ug / mL)
yang mengandung jumlah Metronidazole yang sesuai untuk menghasilkan
konsentrasi 10, 20, 30, 50, 100, 200, 300, 500,1000,2000,3000,5000,10000,20000 ng
/ mL. Standar plasma berduri diproses seperti dijelaskan di atas. Kurva kalibrasi
diperoleh dengan memplot rasio area puncak kromatografi (standar obat / internal)
terhadap konsentrasi Metronidazole nominal yang sesuai yang ditambahkan. Sampel
disiapkan dan disuntikkan pada hari yang sama.

Validasi pengujian

Prosedur pengujian divalidasi dalam hal linearitas dan pemulihan ekstraksi.1-

Linieritas: Linieritas diperiksa dengan menentukan persamaan garis pas terbaik dan
korelasi antara konsentrasi yang ditambahkan dan rasio area puncak yang diukur.2-
Pemulihan ekstraksi: Pemulihan relatif 10, 20, 30, 50, 100, 200, 300, 500, 1000,
2000, 3000, 5000, 10000, 20000 ng / mL dievaluasi dengan menguji standar plasma
seperti yang dijelaskan di atas dan membandingkan rasio area puncak dengan yang
diperoleh dari injeksi langsung dari solusi referensi yang tidak diproses dengan
konsentrasi yang sama.

Penentuan parameter farmakokinetik

Untuk menilai bioavailabilitas Metronidazole, data waktu konsentrasi plasma

dievaluasi, dan parameter farmakokinetik dihitung.

Analisis statistik

Analisis varian dua arah (ANOVA) diterapkan untuk menilai signifikansi

formulasi dan efek periode pada parameter farmakokinetik dari formula yang diuji
dan uji LSD supositoria vaginal Flagyl ® untuk beberapa perbandingan kemudian
dilakukan untuk menentukan sumber perbedaan menggunakan Perangkat lunak
SPSS®, versi 16.0 (SPSS Inc., Chicago, IL). Perbedaan dianggap signifikan pada p =
0,05.

Hasil dan Diskusi

Supositoria yang disiapkan dibentuk dengan baik dengan permukaan
penyinaran yang halus, kecuali F5 yang tidak membeku dan terlalu lunak, sehingga
percobaan ini tidak diuujikan lebih lanjut lagi. sediaan supositoria yang lainnya
terbentuk dengan baik, berwarna putih atau krem (warna putih untuk PEG, basis
lemak dan emulsi, dan kuning untuk basis gelatin). Setelah supositoria dipotong
secara longitudinal, sediaan tidak menunjukkan adanya celah, retakan atau lubang
kontraksi.

Pelepasan in-vitro Metronidazole dari berbagai formulasi supositoria dalam

buffer sitrat PH 4
Tidak ada metode laboratorium standar atau desain peralatan untuk pelepasan
obat supositoria. Metode berikut ini dicoba untuk mengetahui pelepasan MTZ in-
vitro secara berurutan.

1. Metode Disolusi USP 25

Metode ini diadopsi oleh banyak peneliti (17-20). Namun hasil yang
diperoleh dari basis polietilen glikol yang larut dalam air menunjukkan bahwa,
pelepasan MTZ dari formulasi tersebut adalah identik. Hal ini dapat dikaitkan
dengan besarnya volume medium disolusi dan jumlah obat dalam supositoria yang
benar-benar dilepaskan secara sempurna setelah waktu 15 menit (jumlah obat 500
mg). Dengan demikian tes tidak dilanjutkan lagi untuk basis lain.

2. Metode 2-Dialisis
Teknik kedua yang dicoba adalah metode membran dialisis. Jumlah
MTZ yang dikeluarkan dari berbagai basis polietilen glikol sangat rendah setelah 8
jam. Penurunan yang drastis dalam pelepasan obat dengan metode ini dapat
dikaitkan dengan berat molekul (Mwt: obat yang tidak dapat dihantarkan melalui
membran selofan (Ozyazici M, et al).
Pada metode ini digunakan tiga metode disolusi yang berbeda untuk
mengevaluasi pelepasan obat in vitro dari formulasi supositoria Vagina (dari
metronidazole), yang telah disiapkan dengan menggunakan enam basis berbeda
seperti Witepsol H15, Cremao, Ovucire WL2944, Ovucire WL3264, PEG
1500, PEG 6000. Tetapi peneliti menemukan bahwa studi difusi yang dilakukan
melalui sintetik (cellophane) dan membran alami (vagina kelinci), menunjukkan
bahwa obat tidak menunjukkan permeasi yang baik.
Pelepasan MTZ in-vitro dari basis polietilen glikol (Fl sampai F14)
disajikan pada Gambar 1. Gambar tersebut menjelaskan bahwa pelepasan obat
dipengaruhi oleh efek kelarutan propilen glikol dan cairan PEG 600 pada obat, dan
pada kandungan PEG padat (20000, 6000 atau 4000) dalam supositoria yang
berkontribusi terhadap peningkatan kelarutan dan disolusi dalam media berair.
Dengan meningkatkan konsentrasi PEG padat dan mengurangi konsentrasi
PEG 600 atau propilen glikol dalam basis, menghasilkan peningkatan titik leleh
dan meningkatkan kekerasan basis, sehingga memperlambat pelepasan obat secara
in-vitro dan sebaliknya. Secara relatif, basis supositoria (F4) yang mengandung
80% propilen glikol memberikan pelepasan obat tertinggi sementara (F5)
dikeluarkan karena terlalu lunak dan tidak membeku. Hal ini juga sesuai dengan
penelitian Vromans H et al., yang mempelajari penyerapan rektal obat
metronidazol dari suspensi berair dengan menyiapkan supositoria lemak dan tiga
supositoria polietilen glikol yang berbeda dan mempelajarinya pada sukarelawan
sehat dan kemudian membandingkannya dengan penyerapan dari larutan oral.
Peneliti tersebut menemukan bahwa supositoria polietilen glikol memberikan
tingkat plasma puncak tertinggi.
Fig. 1: In-Vitro Release of Metronidazole from Different Poly Ethylene Glycol
Suppository Bases in Citrate Buffer PH 4 at 37o C

Pelepasan in-vitro Metronidazole dari basis gliserogelatin

Gambar (2) merupakan pelepasan obat dari basis gelatin yang berbeda. Basis
yang diuji dapat diatur sesuai dengan tingkat rilis, sebagai berikut F18> F15> F17>
F16. Persentase MTZ yang dilepaskan dari sediaan adalah 95 %, 94,2%., 90% dan
89,6% masing-masing setelah satu jam (sesuai dengan penelitian Ofoefule SI et al.,)
yang menemukan profil disolusi in vitro tinggi dari supositoria metronidazole
gliserogelatin.
Pengamatan ini juga dapat dijelaskan dengan dasar bahwa meningkatkan
konsentrasi propilen glikol menyebabkan penurunan waktu disolusi, sehingga
meningkatkan laju pelepasan. Selain efek peningkatan propilen glikol pada kelarutan
obat seperti yang dilaporkan.
Pelepasan in-vitro Metronidazole dari basis lemak suppositoria

Hasilnya dapat dilihat dari gambar grafik 3 dan 4. Laju pelepasan dari basis
lemak lebih rendah jika dibandingkan dengan basis yang larut air maupun basis
emulsi. Pola pelepasan ini dikarenakan adanya afinitas yang tinggi dari sifat
hidrofobisitas MTZ dengan basis yang bersifat lipofilik. Laju pelepasan dari lemak
coklat (F24) lebih rendah dari suppocire AM (F26) dan Witepsol H15 (F25). Hal ini
dapat dikarenakan adanya agen pengemulsi diri yang terdapat di dalam basis yang
dapat memfasilitasi obat untuk berdispersi ke medium yang ada di sekitarnya. Hal ini
sesuai dengan pernyataan Hosny et al yang menyatakan bahwa pelepasan basis yang
bersifat hidrofilik lebih cepat jika dibandingkan dengan basis yang bersifat lipofilik.

Pelepasan in-vitro Metronidazole dari basis emulsi suppositoria

Hasilnya data dilihat dari grafik 3 dan 4. Dalam hal ini, tercipta hubungan
terbalik antara jumlah obat yang dilepaskan, titik leleh, dan waktu disolusi
suppositoria. Titik leleh yang lebih rendah dan waktu disolusi suppositoria yang
singkat akan menghasilkan laju pelepasan yang tinggi. Jika witepsol H15, lemak
coklat dan ovucire WL 3460 digunakan sebagai fase minyak dalam pembentukan
basis emulsi dengan rentang titik leleh yang lebih rendah dan waktu disolusi yang
lebih pendek, maka hasil menunjukkan bahwa suppositoria yang mengandung basis
witepsol H15 dan ovucire WL 3460 menghasilkan pelepasan yang lebih tinggi jika
dibandingkan dengan basis lemak coklat. Hal ini sesuai dengan penelitian yang
dilakukan oleh E. Bergogne et al yang menemukan bahwa suppositoria yang
mengandug witepsol H15 saja atau dengan penambahan tween 80 (1%) dengan atau
tanpa natrium diklofenak secara signifikan dapat meningkatkan penyerapan dengan
bioavailabilitas 72%. Ketika PEG 1500 dengan PEG 600 digunakan sebagai fase air
daalm suppositoria seperti dalam formula F21 dan F22, maka laju pelepasannya lebih
tinggi jika dibandingkan dengan suppositoria emulsi lainnya. Tingkat pelepasan yang
tinggi dapat dikarenakan keterkaitan antara waktu disolusi yang cepat dengan efek
dari PEG dan PPG terhadap kelarutan obat.

Analisis kinetic dari data pelepasan

Tabel : (IV) Pelepasan metronidazole dari basis PEG mengikuti model

pelepasan orde pertama dan Higuchi, basis gelatin dan emulsi megikuti model
pertama. Pelepasan obat dari basis lemak mengikuti model ore pertama atau Higuchi.

Evaluasi SIfat Mukoadesif Metronidazole Suppositoria Vagina

Suppositoria yang diformulasikan dengan PEG, basis emulsi tanpa aditif dan
basis coklat tanpa aditif tidak menunjukkan aktivitas bioadesif, sedangkan
suppositoria dengan basis gelatin, basis emulsi degan aditif dan basis lemak coklat
dengan aditif (F15-F20 dan F26) menunjukkan adanya aktivitas bioadesif.

Tabel (V) da, gambar (5a) dan gambar (5b) menunjukkan bahwa bioadesif yang lebih
tinggi adalah untuk supositoria gelatin F15> F16> F17> F18 karena propilen glikol
menurunkan kekuatan bioadesif pada formula F20> F19> F26
Studi Mikroba

Hasil dari studi mikroba

Inkubasi 24 jam dari suspensi 1:10 C.albicans telah berkontak sebanyak 0,25 mg/ml
larutan MTZ selama 15 menit menghasilkan pertumbuhan ragi pada piring SDA.
Sedangkan inkubasi selama 24 jam dari 0,5 mg/ml selama 120 menit, dan 0,75 mg/ml
selama 120 dan 180 menit tidak menghasilkan pertumbuhan ragi.

Dengan kata lain:

Konsentrasi MTZ 0,25 mg/ml tidak efektif pada C.albicans dalam 15 menit tetapi
menunjukan efek fungistatik dalam 120 menit, konsentrasi MTZ 0,5 mg/ml tidak efektif
pada C.albicans dalam 30 menit tetapi menunjukan efek fungistatik dalam 120 menit,
konsentrasi MTZ 0,5 mg/ml menunjukan efek fungistatik pada C.albicans dalam 90 dan
120 menit, dan konsentrasi MTZ 1 mg/ml menunjukan efek fungi-static pada C.albicans
dalam 120 dan 180 menit.
Pada bagian penelitian mikrobiologis ini, 0,25 mg konsentrasi obat benar-benar
menghambat pertumbuhan C.albicans dalam 120 menit secara bersamaan. Dapat
dinyatakan bahwa formula bioadhesif yang melepaskan konsentrasi 0,25 mg/ml obat dan
mempertahankan konsentrasi selama 120 mm dapat efektif pada C.albicans.

Studi Bioavailabilitas

1. Uji Validasi Metronidazole dalam plasma kelinci

Pada uji validasi digunakan Plasma kelinci kosong, dan Plasma kelinci bergigi dengan
metronidazole dan scinidazole (standar internal). Metronidazole dan scinidazole masing-
masing dielusi setelah 5,3 dan 3,38 menit. Pemisahan yang baik dari obat dan standar
internal dicapai di bawah kondisi kromatografi yang ditentukan. Rasio area puncak
metronidazole dengan standar internal dalam plasma kelinci adalah linier, persamaan
regresi linier dari kurva kalibrasi adalah: Y = -0004X - 0,0292. Koefisien determinasi (r2)
antara rasio area puncak dan konsentrasi metronidazole adalah 0,9993 di atas rentang
konsentrasi yang digunakan.

2. Ketersediaan Hayati Metronidazole Dari Formula Yang Diuji

Konsentrasi metronidazol plasma diperoleh setelah pemberian dosis tunggal vagina 500
mg supositor produk pasar (Flagyl®), dan tiga formula terpilih; F23 Supositoria vagina,
tablet vagina bioadhesif C3 dan gel vagina bioadhesif pluronik –cp. Parameter
farmakokinetik individu dan rata-rata yang dihitung dari data waktu konsentrasi plasma
metronidazole kelinci setelah pemberian masing-masing formula yang diuji didapatkan:
Nilai rata-rata untuk konsentrasi plasma maksimum (Cpmax) adalah 13133.1 ±
4846.719634, 12618.025 ± 7444.32, 7501 ± 1204.61 dan 1114.86 ± 186.36 ng / mL
setelah pemberian secara vaginal dari formula yg telah dipasarkan, supositoria yg diuji,
tablet bioadhesif yg diuji dan gel yg diuji. Dari hasil analisis ANNOVA satu arah dan
perhitungan AUC menunjukan hasil yang tidak siginfikan dari setiap variasi sediaan yang
ada.
Dari hasil tersebut, terbukti bahwa dibandingkan dengan produk pasar, supositoria yang
diuji menunjukkan peningkatan penyerapan obat dari supositoria yang diuji tetapi tablet
bioadhesif dan gel, tidak menunjukkan peningkatan bioavailabilitas dibandingkan dengan
produk pasar yang berarti efek samping yang lebih rendah dan efek terlokalisasi di dalam
vagina.

CONCLUSION

Berdasarkan temuan sebelumnya, dapat disimpulkan bahwa basis supositoria

larut air dapat memberikan rilis lebih tinggi dari emulsi dalam buffer sitrat pH 4. Pada
basis PEG (F14), basis gelatin (Fl8) dan basis kakao dengan aditif (F26) memberikan
pelepasan obat tertinggi dan dipilih dalam melakukan investigasi lebih lanjut.
Pelepasan MTZ dari polietilen glikol Basis mengikuti model rilis pertama dan
Higuchi, sementara gelatin dan basis pengemulsi dengan atau tanpa aditif yang
dipatuhi model pertama kecuali f (23) yang mematuhi model Higuchi.

Pelepasan obat dari dasar cocoa butter dengan atau tanpa aditif diikuti model
orde pertama atau Higuchi. Basis yang larut dalam air menunjukkan tidak bioadhesif
sedangkan basa gelatin menunjukkan pekerjaan tertinggi adhesif. Basa mentega
coklat dan basa pengemulsi menunjukkan tidak bioadhesif tetapi penambahan
polimer bioadhesif dapat menyebabkan peningkatan kerja bioadhesifnya.

Analisis ANOVA satu arah untuk AUC (0-∞) menunjukkan bahwa nilai P
adalah 0,0502, dianggap tidak terlalu signifikan. Variasi antar perlakuan berarti tidak
secara signifikan lebih besar dari yang diharapkan secara kebetulan. Diuji supositoria
tidak menunjukkan peningkatan bioavailabilitas dibandingkan dengan produk pasar
yang berarti efek samping yang lebih rendah dan efek terlokalisasi pada sisi vagina
juga dapat dinyatakan demikian formula bioadhesif yang melepaskan konsentrasi
0,25 mg / ml obat dan mempertahankan konsentrasi ini selama 120 menit dapat
efektif pada C. albicans.