REVIEW JURNAL FORMULASI DAN EVALUASI SEDIAAN HIDROGEL

OPTALMIK KLORAMFENIKOL

Dibuat Untuk Memenuhi Tugas Mata Kuliah

Teknologi Formulasi Sediaan Steril

Disusun Oleh:
Tesa Novitasari
A 171 049
Reguleh pagi A

PROGRAM STUDI FARMASI

SEKOLAH TINGGI FARMASI INDONESIA
YAYASAN HAZANAH
BANDUNG
2020
 BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Dalam menghadapi infeksi mata, ada berbagai optalmik konvensional formulasi
di pasar seperti tetes mata, suspensi, dan salep yang mengandung antibiotik. Namun,
sediaan konvensional memiliki kekurangan yang menyebabkan bioavailabilitas obat
yang buruk dalam rongga mata. Hal ini karena obat yang dikirim ke mata,
mengalami pengeringan oleh nasolacrimal, dan penyerapan kornea produktif
menurunkan kontak waktu dengan mata. Berbagai pendekatan telah dilakukan untuk
meningkatkan bioavailabilitas dan waktu kontak dengan obat di mata. Salah satu
caranya adalah dengan desain sediaan optalmik dalam bentuk hidrogel yang bisa
memaksimalkan penyerapan obat di mata dan meminimalkan kekurangan obat
sebelum penetrasi kornea.
Hidrogel adalah suatu preparasi yang menambahkan polimer pada pemanjangan
retensi obat di mata, menurunkan pengeringan nasolacrimal dan meningkatkan
bioavailabilitas. Polimer mampu menyerap besar jumlah air. Karena itu, ketika
menetes ke mata, hidrogel memiliki mukoadhesif baik pada lapisan mukosa sampai
pengiriman obat ke mata dapat dioptimalkan. Salah satu antibiotik yang biasa
digunakan dalam formulasi sediaan optalmik adalah Kloramfenikol, karena itu
memiliki spektrum bakteri Gram-positif yang sangat luas, Gram-negatif, dan bakteri
anaerob. Penetrasi intraokular Kloramfenikol sangat baik karena kelarutan lemaknya
yang tinggi.

1.2 Tujuan Penelitian

Untuk merancang formulasi sediaan hidrogel optalmik kloramfenikol sebagai
sistem pengiriman obat mata yang memiliki khasiat terapeutik yang baik dalam
mengobati infeksi mata dengan menggunakan Hydroxypropyl Methylselulosa
(HPMC) sebagai dasar pembentuk gel.
 BAB II
METODE PENELITIAN

2.1 Metode
A. Bahan
Kloramfenikol (BioBasic ©), hidroksipropil metilselulosa (HPMC)
(Colorcon®), tween 80 (Brataco®), propilen glikol (Brataco®), metil paraben
(Merck®), gliserin (Brataco®), kalium dihidrogen fosfat (Merck®), natrium
hidroksida (Merck®), Fluid Thioglycollate Media (Merck®),Soybean Casein
Digest (TSB) (Merck®), Nutrient Agar (Merck®), membran selofan (Sigma ©),
Escherichia coli (E.coli) (29998ATCC), etanol (Brataco®), dan aqua bidestilata
steril (Ikapharmindo®).
B. Metode
Laboratorium eksperimental dilakukan secara bertahap
a. Preformulasi
Pemeriksaan zat aktif yang digunakan adalah kloramfenikol dari
monografi Farmakope Indonesia.
b. Penentuan titik lebur bahan aktif
Ditentukan oleh suhu pada saat mulai kloramfenikol mencair hingga
menjadi bentuk cair. Hasilnya dibandingkan dengan kloramfenikol monografi
dalam Farmakope Indonesia.
c. Kurva standar kloramfenikol
Kloramfenikol memiliki berat 500 mg dan dilarutkan dalam 100 ml
buffer fosfat pH 7,4 untuk mendapatkan larutan stok 5000 ppm. Dari larutan
stok dilakukan berbagai pengenceran 6, 8, 10, 12, 14 ppm. Absorbansi diukur
pada panjang gelombang 280 nm dengan spektrofotometer UV / Vis.
Absorbansi yang diperoleh, digunakan untuk membentuk kurva standar
Kloramfenikol
d. Uji potensi kloramfenikol
 Larutan sampel dan larutan standar, yang telah diencerkan diisi ke masing-
masing reservoir sekitar 50μl menggunakan mikropipet. Cawan Petri
diinkubasi pada 37ᵒ C selama 18-24 jam. Diameter diukur dan dicatat Zona
bersih (zona lisis). Menghitung potensi kloramfenikol.
2.2 Evaluasi
A. Pemeriksaan Organoleptis
Diperiksa dengan mengamati perubahan warna, bau, dan kejernihan secara
visual dan pengamatan dilakukan pada hari ke 1, 3, 7, 14, 21 dan 28 hari
penyimpanan
B. Pengukuran pH
Dilakukan pada hari ke 3, 7, 14, 21, dan 28 hari penyimpanan pada suhu
kamar.
C. Pengukuran viskositas
Pengukuran dilakukan pada hari ke 3, 7, 14, 21 dan 28 hari penyimpanan pada
suhu kamar.
D. Penentuan Kloramfenikol
Kadar kloramfenikol ditentukan dengan mengambil formulasi 0,1 ml dan
diencerkan sampai 100 ml dengan dapar fosfat pH 7,4 kemudian dianalisis
absorbansi pada panjang gelombang 280 nm menggunakan spektrofotometri UV-
VIS.
E. Studi kompaktibilitas
Spektrum IR murni (Kloramfenikol) dibandingkan dengan spektrum IR
kombinasi campuran Kloramfenikol dan semua eksipien menggunakan pelet KBR
0,1 mm untuk memeriksa interaksi interaksi yang tidak kompatibel.
F. Tes Sterilisasi
Dilakukan dengan menggunakan media Fluid Thioglycollate Media
(FTM) dan Soybean Casein Digest (SCD). Secara aseptik, diinokulasi langsung
ke setiap preparasi uji ke dalam tabung reaksi FTM dan media SCD dan
kemudian diinkubasi pada 30-35ᵒ C dan 20-25ᵒ C selama tidak kurang dari 14
hari. Terjadinya kekeruhan dalam tabung uji diamati setiap hari
 G. Tes Potensi
Dibuat inokulum dengan memasukkan suspensi bakteri ke dalam Nutrient
Agar (NA) di cawan petri. Cawan Petri sedikit terguncang sehingga larutan
bakteri menutupi permukaan NA dan dibiarkan menggumpal. Permukaan bawah
cawan petri dibagi menjadi empat bidang yang sama ukuran. Diberi label masing-
masing area ini mengikuti Formulasi dosis hidrogel optalmik kloramfenikol (F1,
F2, F3, F4). Secara aseptik, dibuat empat mencetak reservoir dalam cawan petri
menggunakan perforator. Dimuat sebanyak Sampel 50 ml ke masing-masing
reservoir menggunakan mikropipet. Cawan Petri diinkubasi pada 37ᵒC selama 18-
24 jam. Diukur dan dicatat diameternya zona bersih (zona inhibisi lisis) yang
terjadi di sekitar reservoir yang telah telah mengandung antibiotik. Menghitung
potensi antibiotik.
H. Studi disolusi In Vitro
Dilakukan dengan menggunakan alat difusi Franz dan buffer fosfat (pH = 7,4)
sebagai media reseptor. Buffer fosfat dengan pH 7,4 akan mensimulasikan cairan
lachrymal. Temperatur dipertahankan pada 37 + 0,5 ° C dengan kecepatan rotasi
dipertahankan pada 100 rpm. Sampel ditarik pada berbagai interval waktu dan
dianalisis konsentrasi obat menggunakan Spektofotometri UV / Visible.
2.3 Formulasi
Tabel 1. Formula sediaan Hidrogel Oftalmik.
 Keterangan:
F1 : Hidrogel dengan HPMC 0,2%
F2 : Hidrogel dengan HPMC 0,3%
F3 : Hidrogel dengan HPMC 0,4%
F4 : Hidrogel dengan HPMC 0,5%

A. Fungsi masing- masing zat

Kloramfenikol sebagai zat aktif karena karena itu memiliki spektrum bakteri
Gram-positif yang sangat luas, Gram-negatif, dan bakteri anaerob. Penetrasi
intraokular Kloramfenikol sangat baik karena kelarutan lemaknya yang tinggi.
HPMC sebagai gelling agent karena HPMC stabil pada pH 3 – 11, gel yang
dihasilkan jernih, bersifat netral serta viskositasnya yang stabil meski disimpan
pada jangka waktu yang yang lama dan HPMC tidak dimetabolisme oleh tubuh.
Propilenglikol digunakan sebagai humektan karena akan mempertahankan
kandungan air dalam sediaan sehingga sifat fisik dan stabilitas sediaan selama
penyimpanan dapat dipertahankan, selain itu propilen glikol memiliki stabilitas
yang baik pada pH 3-6 oleh karena itu propilen glikol dapat digunakan sebagai
humektan dalam sediaan gel.
Gliserin berfungsi sebagai kosolven. Penambahan gliserin pada konsentrasi
tertentu dapat meningkatkan kelarutan zat aktif didalam air sebagai pelarut gel
dengan sifat fisik yang stabil. Penambahan kosolven dalam formula gel juga dapat
mempengaruhi sifat fisik sediaan yang diketahui mampu meningkatkan viskositas
gel secara signifikan.
Tween 80 berfungsi sebagai Emulsifying agent karena dapat menurunkan
tegangan permukaan antara dua zat cair yang tidak saling bercampur sehingga
salah satu cairan akan terdispersi pada cairan lainnya.
Metil paraben berfungsi sebagai pengawet karena efektif pada konsentrasi
rendah, tidak toksik, tidak mengiritasi dan juga sifatnya sebagai anti mikroba pada
spectrum luas dan pada pH dengan rentang yang besar . Metil paraben dapat
mencegah kontaminasi mikroba karena tingginya tingginya kandungan air pada
sediaan gel dan dikombinasi propilen glikol atau propil paraben dapat
menghasilkan kombinasi pengawet dengan aktivitas antimikroba yang kuat.
Dapar fosfat 7,4 digunakan sebagai pendapar karena sediaan obat mata harus
mempunyai pH dan isotonisnya yang sesuai dengan cairan mata. Maka
ditambahkan dapar fosfat 7,4 untuk mempertahankan pH sediaan.
Air berfungsi sebagai pelarut. Air yang digunakan pada sedian steril seperti
sediaan pada mata yaitu Aqua bidestilata steril karena dibuat dengan memenuhi
persyaratan untuk menjadi pelarut dalam sediaan steril yaitu berbentuk cairan
jernih, steril, bebas pirogen, tidak berbau, tidak berwarna, tidak berasa serta tidak
mengandung logam berat dan zat pereduksi dengan pH dikisasaran 5-7.
B. Prosedur Formulasi Hidrogel
Formulasi yang berbeda disiapkan dengan berbagai konsentrasi HPMC seperti
yang dijelaskan pada Tabel 1. Larutan obat ditambahkan ke dasar hidrogel sambil
diaduk. Sehingga tidak ada busa yang diamati. Larutan Buffer ditambahkan ke
formulasi, dan dengan tambahan air suling hingga 100 ml. Formulasi yang telah
dibuat disimpan dalam 10 ml botol tertutup. Formulasi ini akhirnya disterilkan
oleh autoklaf pada 121ᵒC selama 15 mnt
 BAB III
HASIL DAN PEMBAHASAN

3.1 Preformulasi Hidrogel

a. Hasil pemeriksaan titik leleh kloramfenikol
Menentukan titik leleh zat aktif kloramfenikol ada pada table 2.
Tabel 2. Hasil pemeriksaan titik leleh Kloramfenikol

Berdasarkan pemeriksaan diperoleh bahwa titik leleh dan potensi serta

digunakan dalam formulasi kloramfenikol telah memenuhi persyaratan. Menurut
monografi Kloramfenikol dalam Farmakope Indonesia.
b. Kurva Standar Kloramfenikol
Data kurva standar Kloramfenikol dengan menggunakan spektrofotometri
ultraviolet disajikan pada Tabel 3. Menggunakan persamaan kuadrat dan diperoleh
persamaan garis lurus sebagai berikut: y = 0,0533x - 0,0285.
Tabel 3. Hasil Kurva Standar Kloramfenikol

Gambar 1. Kurva Standar Kloramfenikol

 c. Uji Potensi Kloramfenikol
Data diameter hambat kloramfenikol telah dibandingkan dengan referensi
standar (referensi kerja). Potensi yang didapat terlihat pada Tabel 4.
Tabel 4. Hail Uji Potensi Kloramfenikol

3.2 Evaluasi
a. Hasil pengamatan Organoleptik
Berdasarkan hasil pengamatan selama 28 hari, formulasi empat hidrogel
kloramfenikol tidak berubah dalam organoleptik di mana sediaan tetap tidak
berwarna, jelas dan tidak berbau seperti yang ditunjukkan pada Tabel 5.
Tabel 5. Hasil Pengamatan Organoleptik hydrogel selama penyimpanan dari
waktu ke waktu
Keterangan:
F1 : Hidrogel dengan HPMC 0,2%
F2 : Hidrogel dengan HPMC 0,3%
F3 : Hidrogel dengan HPMC 0,4%
F4 : Hidrogel dengan HPMC 0,5%
C : Tanpa Warna
O : Tanpa Bau
Hasil pengujian evaluasi sebagai berikut empat formulasi hidrogel
kloramfenikol oftalmik (F1, F2, F3, dan F4) dapat dianggap stabil secara fisik
selama 28 hari penyimpanan. Berdasarkan pengamatan visual, tidak ada
pemisahan antara bahan pembentuk hidrogel dengan pembawa (air) untuk
semua preparasi hidrogel kloramfenikol
b. Hasil pengukuran pH
Hasil pengamatam pH hydrogel oftalmik kloramfenikol pada gambar 2.
Gambar 2. Hasil pengkuran pH
Keterangan:
F1 : Hidrogel dengan HPMC 0,2%
F2 : Hidrogel dengan HPMC 0,3%
F3 : Hidrogel dengan HPMC 0,4%
F4 : Hidrogel dengan HPMC 0,5%

Sebagai persiapan diberikan topikal ke mata; hidrogel mata kloramfenikol

harus memiliki kisaran pH yang disesuaikan dengan kisaran pH sediaan
oftalmik secara umum, sehingga tidak akan mengiritasi mata. Ini menunjukkan
bahwa preparat hidrogel kloramfenikol hidrogel memiliki nilai pH yang
disesuaikan untuk sediaan topikal selama 28 hari penyimpanan. Selain itu,
dapat dilihat bahwa nilai pH masing-masing sediaan menurun selama waktu
penyimpanan.
Penurunan pH ini mungkin disebabkan kloramfenikol memiliki kisaran
pH 4,5 hingga 7,5 yang melakukan interaksi dengan eksipien lain dalam
formulasi hidrogel. Sediaan oftalmik harus memiliki kisaran pH 5,0 hingga
7,4, sehingga formulasi akan stabil dan tidak menyebabkan iritasi pada pasien
pada saat pemberian obat. PH hidrogel selama 28 hari penyimpanan tidak
menurun secara drastis karena penambahan buffer fosfat 6,8 dalam formulasi
yang bertindak sebagai penstabil pH.
c. Hasil pengukuran viskositas
Hasil pengamatan viskositas rata – rata dapat dilihat pada gambar 3.
Gambar 3. Hasil pengukuran viskositas
 Keterangan:
F1 : Hidrogel dengan HPMC 0,2%
F2 : Hidrogel dengan HPMC 0,3%
F3 : Hidrogel dengan HPMC 0,4%
F4 : Hidrogel dengan HPMC 0,5%

Viskositas dari empat formula hidrogel telah mengalami sangat sedikit

penurunan selama 28 hari penyimpanan. Persiapan F3 dan F4 telah
menunjukkan nilai viskositas yang relatif lebih besar daripada persiapan F1
dan F2. Ini bisa dipengaruhi oleh perbedaan jumlah jumlah HPMC yang
digunakan dalam formulasi mempengaruhi viskositas pembuatan hidrogel.
Dengan demikian, dapat dilihat bahwa semakin besar jumlah HPMC
digunakan, semakin besar viskositas nilai yang dihasilkan. Viskositas secara
langsung tergantung pada konsentrasi polimer dalam formulasi. Juga, nilai
viskositas dalam kisaran 5 cPs -100 cPs secara signifikan meningkatkan
waktu kontak formulasi pada permukaan kornea, dan nilai viskositas yang
lebih tinggi tidak memberikan manfaat yang signifikan, tetapi cenderung
meninggalkan residu pada kelopak mata.
d. Penentuan preparasi kadar hydrogel oftalmik kloramfenikol
Penentuan tingkat hasil persiapam hydrogel kloramfenikol selama 28 hari
penyimpanan dapat dilihat pada gambar 4.
Gambar 4. Hasil Preparasi khidrogel oftalmik kloramfenikol selama 28 hari waktu
penyimpanan
Keterangan:
F1 : Hidrogel dengan HPMC 0,2%
F2 : Hidrogel dengan HPMC 0,3%
F3 : Hidrogel dengan HPMC 0,4%
F4 : Hidrogel dengan HPMC 0,5%

Tingkat kloramfenikol dalam formula yang telah dibuat dapat ditentukan

dengan menggunakan spektrofotometer UV / Visible. Pengukuran absorbansi
dilakukan terhadap panjang gelombang yang dapat ditunjukkan penyerapan
maksimumnya adalah 280 nm. Penentuan masing-masing formula dilakukan
dengan memasukkan nilai absorbansi ke dalam persamaan kurva standar yang
dibuat pada preformulasi. Berdasarkan analisis kuantitatif dengan metode
spektrofotometri ultraviolet, pada Gambar 4 dapat dilihat bahwa kadar
kloramfenikol dalam empat formula di atas telah menunjukkan hasil tingkat
yang relatif besar, yaitu antara 120,45% hingga 124,32%. Kisaran tingkat
pada empat formula menunjukkan bahwa distribusi obat yang seragam.
Selama 28 hari waktu penyimpanan, tingkat empat persiapan formula hidrogel
telah sedikit menurun. Namun, keempat formula tersebut masih memenuhi
syarat karena ukuran yang ditunjukkan oleh persyaratan Farmakope
Indonesia, yang tidak kurang dari 90% dan tidak lebih dari 130% dari jumlah
yang tercantum pada label.
e. Studi kompatibilitas
Spektrum Inframerah kloramfenikol. HPMC, dan campuran kloramfenikol
dengan HPMC yang diperoleh dapat dilihat pada Tabel 6 dan gambar 5.
 Tabel 6. Area Serapan gugus fungsional kloramfenikol

Gambar 5. Spektrum Inframerah kloramfenikol, HPMC dan kombinasi

Kloramfenikol dengan HPMC (warna merah)

Spektrum inframerah kloramfenikol, HPMC, dan kombinasi

kloramfenikol dengan HPMC yang diperoleh ditunjukkan pada Gambar 5.
Semua puncak karakteristik Kloramfenikol dapat dilihat dalam grafik
spektrum inframerah, yang menunjukkan kompatibilitas obat dan polimer.
Spektrum yang dihasilkan menegaskan bahwa tidak ada perubahan signifikan
dalam integritas kimia obat
f. Hasil pengujian sterilitas
Data sterilitas dari sediaan hydrogel oftalmik kloramfenikol terdapat pada
tabel 7.
Tabel 7. Hasil Uji sterilitas
 Keterangan:
F1 : Hidrogel dengan HPMC 0,2%
F2 : Hidrogel dengan HPMC 0,3%
F3 : Hidrogel dengan HPMC 0,4%
F4 : Hidrogel dengan HPMC 0,5%
FTM : Media Fluid thioglycollate untuk pertumbuhan bakteri
TSB : Trypticase soybean broth untuk pertumbuhan fungi
+ve : Menemukan pertumbuhan mikroorganisme
-ve : Tidak menemukan pertumbuhan mikroorganisme

Dari hasil uji sterilitas yang dilakukan, ditemukan bahwa tidak ada
pertumbuhan mikroorganisme, dari situ dapat disimpulkan bahwa sediaan
hidrogel oftalmik kloramfenikol telah memenuhi persyaratan sterilitas. Karena
hasilnya tidak menunjukkan pertumbuhan bakteri dan jamur dalam persiapan
selama 14 hari waktu pengujian.
g. Hasil pengujian potensi
Nilai potensi kloramfenikol yang telah diperoleh dapat dilihat pada tabel
8.
 Tabel 8. Hasil Pengujian potensial pada sediaan optalmik kloramfenikol
hydrogel

Potensi sediaan hydrogel oftalmik kloramfenikol telah ditentukan dengan

menghitung potensi dosis terhadap bakteri Escherichia coli yang sebanding
dengan nilai potensial kloramfenikol sebelum digunakan dalam formulasi.
Berdasarkan data kami dapat menyimpulkan bahwa preparat hydrogel
oftalmik kloramfenikol memiliki potensi untuk membunuh atau menghambat
pertumbuhan mikroba sesuai dengan persyaratan dalam Farmakope Indonesia
h. Studi disolusi in vitro
Tes profil yang dirilis dari sediaan kloramfenikol dapat dilihat pada
gambar 6.
Gambar 6. Grafik pelepasan dari sediaan hydrogel oftamik kloramfenikol

Pengujian pelepasan kloramfenikol dilakukan dengan menggunakan sel

difusi Franz in vitro. Dari hasil tes, diperoleh bahwa pada F4 dimana jumlah
kloramfenikol yang telah menyebar setidaknya dalam 5 menit, di mana kadar
kloramfenikol dipisahkan sekitar 11,01%, dan pada waktu 8 jam kadar
kloramfenikol dipisahkan sekitar 71,13%. Di F1, jumlah terbesar rilis
kloramfenikol daripada F2, F3, dan F4 di mana jumlah kloramfenikol
dilepaskan setelah 5 menit adalah 14,73% dan setelah 8 jam sekitar 80,30%.
Itu karena penambahan konsentrasi polimer HPMC yang berbeda dalam setiap
formula
Dari data dapat dihitung laju pelepasan kloramfenikol dari sediaan
hidrogel. Formula memiliki tingkat pelepasan tertinggi untuk F1 = 0,828
(mg / l), diikuti oleh F2 = 0,811 (mg / l), F3 = 0,812 (mg / l) dan F4 0,759 (mg
/ l). Berdasarkan data tersebut, laju pelepasan sediaan hidrogel oftalmik
kloramfenikol yang dilepaskan, dapat disimpulkan bahwa F4 memiliki waktu
retensi yang lebih lama dibandingkan F1, F2, dan F3. Penambahan HPMC
pada sediaan hydrogel oftalmik dapat memperpanjang retensi obat di mata
dan mengurangi lewatnya obat di mata sebelum penetrasi ke dalam kornea.
Perpanjangan retensi obat di mata akan meningkatkan bioavailabilitas okular,
frekuensi dosis dapat dikurangi, dan kepatuhan pasien mungkin akan
meningkat. Empat formula dapat ditunjukkan rilis berkelanjutan selama 8 jam.
Level pelepasan kloramfenikol dapat dioptimalkan untuk viskositas tinggi.
Dapat disimpulkan bahwa F4 memiliki bioavailabilitas paling baik, diikuti
oleh F3, F2, dan F1

BAB IV
KESIMPULAN
 Sediaan hidrogel optalmik kloramfenikol yang diformulasikan dengan HPMC
telah menunjukkan karakteristik yang baik, dan profil pelepasan berkelanjutan yang
dapat diterima yang dapat memperluas penyerapan obat untuk memastikan
ketersediaan hayati yang optimal di lokasi kerja. Temuan penelitian ini menunjukkan
bahwa sediaan hydrogel optalmik kloramfenikol untuk perawatan mata efektif dan
aman