Halaman 1

Penulis yang sesuai: farizzharfanharis@gmail.com

Pengaruh penambahan vitamin E pada semen banteng Simmental

beku
extender pada kualitas pasca pencairan
Fariz Zharfan Haris 1 * , Yon Soepri Ondho 2 , dan Daud Samsudewa 3
1 Fakultas Peternakan dan Ilmu Pertanian, Universitas Diponegoro
Abstrak. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengevaluasi kualitas post-thawing (motilitas sperma, mortalitas dan
kelainan) dari semen banteng Simmental beku-cair dengan penambahan vitamin E dalam extender. Itu
Bahan yang digunakan untuk penelitian adalah semen dari dua sapi jantan Simmental yang dipilih. Vitamin E sebagai pengobatan
tambahan
untuk extender terdiri dari T0 (tidak ada tambahan vitamin E), T1 (0,134 gram / 100 ml extender), T2 (0,268
gram / 100 ml extender) dan T3 (0,402 gram / 100 ml extender). Evaluasi pasca pencairan dilakukan 24 jam
setelah proses pembekuan dan diamati setelah proses pencairan dalam 37 ° C water bath selama 30 detik.
Parameter yang diamati dalam penelitian ini adalah kualitas semen semen Simmental beku yang dicairkan pasca-pencairan
berdasarkan persentase motilitas, mortalitas dan abnormalitas. Motilitas sperma dievaluasi menggunakan mikroskop dengan
Pembesaran 100x dan 400x, mortalitas sperma diamati menggunakan pembesaran 400x dan dihitung berdasarkan 0,2%
eosin-negrosin pewarnaan, kelainan sperma diamati menggunakan pembesaran 400x dan dihitung berdasarkan
jumlah sel sperma yang secara morfologis abnormal. Motilitas semen pasca pencairan tidak dipengaruhi secara signifikan oleh
penambahan vitamin E dari T1, T2 dan T3 (P <0,05). T1 dan T2 mampu menurunkan angka kematian secara signifikan
persentase dibandingkan dengan T0 dan T3 (P <0,05). T1 dan T2 juga sangat signifikan mempengaruhi penurunan
persentase kelainan dibandingkan dengan T0 dan T3 (P <0,01). T1 umumnya memberikan hasil terbaik pada
peningkatan motilitas pasca pencairan dan penurunan persentase mortalitas dan abnormalitas sperma.
1. PERKENALAN
Pusat inseminasi buatan telah didirikan
beberapa provinsi di Indonesia dalam rangka memenuhi
perlunya semen beku untuk inseminasi buatan
proses. Inseminasi buatan sebagian besar di Indonesia
diaplikasikan pada sapi dan kambing. Inseminasi buatan adalah
juga salah satu program utama pemerintah untuk meningkat
populasi sapi potong secara nasional. Semen beku
kualitas adalah salah satu dari banyak indikator yang mempengaruhi keberhasilan
tingkat inseminasi buatan. Beberapa faktor yang bisa
menentukan kualitas semen beku adalah genetik
kualitas banteng, proses produksi semen dan
implementasi inseminasi buatan [1]. Simmental
semen banteng adalah salah satu jenis semen yang paling banyak digunakan oleh
beberapa inseminator di Indonesia.
Produksi semen beku terdiri dari serangkaian
proses termasuk pengenceran semen dalam extender,
pembekuan, penyimpanan dingin dan evaluasi pasca pencairan.
Selama proses pendinginan dan pembekuan, sel-sel sperma
rentan mendapatkan efek berbahaya dari ketidakseimbangan
tekanan osmotik, denaturasi protein, asidosis seluler,
kehilangan energi, kerusakan membran, kristalisasi
sel tubuh, destabilisasi sitoskeleton dan
pembentukan radikal bebas atau spesies oksigen reaktif
(ROS) [2].
Vitamin E adalah antioksidan yang bermanfaat
molekul pada sel sperma dengan menetralkan H 2 O 2 dan
menghambat reaksi dengan radikal bebas. Vitamin E bisa
mematahkan reaksi berantai dan melindungi membran
dari kerusakan yang disebabkan oleh ROS [3]. Vitamin E sebagai
antioksidan juga dapat mencegah peroksidasi lipid. Lipid
peroksidasi pada spermatozoa akan menyebabkan hilangnya
motilitas, penurunan fruktolisis sel dan respirasi
aktivitas dan kebocoran cairan sel melalui rusak
selaput. Antioksidan seperti vitamin E diketahui
karena kemampuan mereka untuk memberikan perlindungan pada sperma
membran dengan menghambat pembentukan ROS dan lipid
peroksidasi [2].
Tujuan utama dari penelitian ini adalah untuk mengevaluasi
kualitas pasca pencairan (motilitas sperma, mortalitas, dan
semen abnormal dari semen banting Simmental beku-cair
dengan penambahan vitamin E dalam extender. Ini
penelitian mungkin memiliki manfaat meningkatkan
kualitas semen Simmental banteng setelah
penambahan vitamin E dalam extender semen dan menghasilkan
peningkatan produksi semen beku di buatan
pusat inseminasi.
2. BAHAN-BAHAN DAN METODE-METODE
Penelitian ini telah dilakukan pada bulan September
hingga November 2018 di Pusat Inseminasi Buatan
Ungaran, Kompleks Distrik Sidomulyo, Semarang
Kabupaten. Bahan utama yang digunakan untuk penelitian adalah
semen dari dua sampel banteng Simmental terpilih yang
dapat menghasilkan semen dengan kualitas yang konsisten selama
koleksi standar. Semen dikumpulkan dua kali seminggu menggunakan
prosedur standar. Bahan lain yang digunakan untuk semen
pengolahan adalah vitamin E, eosin-negrosin 0,2%, aqua
dest, gliserol 96%, pasar bebas penisilin dan
antibiotik streptomisin, kuning telur - skim extender dan
nitrogen cair. Alat yang digunakan untuk pemrosesan semen
dan observasi adalah pipet, konter tangan, mikroskop,
gelas ukur, gelas kimia, pengaduk, objek-kaca,
termometer, pendingin, sedotan mini, mesin pembekuan
dan mesin penyegel pengisi .
E3S Web of Conferences 142 , 02002 (2020)
https://doi.org/10.1051/e3sconf/202014202002
ICAL 2019
© The Authors, diterbitkan oleh EDP Sciences. Ini adalah artikel akses terbuka yang didistribusikan di bawah ketentuan Atribusi Creative Commons
Lisensi 4.0 (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).

Halaman 2
2
1.1 Desain Eksperimental
Desain eksperimental yang digunakan untuk penelitian ini adalah
menyelesaikan desain eksperimen acak dengan 4
perawatan dan 6 pengulangan. Perawatan untuk penelitian ini
Terdiri dari :
T0: tidak ada tambahan vitamin E
T1: 0,134 gram / 100 ml extender
T2: 0,268 gram / 100 ml extender
T3: 0,402 gram / 100 ml extender
Parameter yang diamati dalam penelitian ini adalah
kualitas pencairan semen banteng Simmental beku-cair
berdasarkan persentase motilitas, mortalitas dan abnormalitas.
2.1 Prosedur
Prosedur penelitian terdiri dari persiapan semen,
proses perawatan, evaluasi semen segar, pasca pencairan
observasi motilitas, pengamatan mortalitas, dan
observasi kelainan
1.2.1 Persiapan semen
Proses persiapan dimulai dengan membuat semen
extender. Extender digunakan untuk semen banteng Simmental
adalah kuning telur dan campuran susu sebagai larutan stok.
Awalnya, extender dibagi menjadi extender A dan
extender B terdiri dari volume 100 ml untuk masing-masing
extender. Extender A terdiri dari 10 g bubuk skim,
aquadest, 10% kuning telur, 1% glukosa dan 1% glukosa
antibiotik penisilin dan streptomisin. Extender B
dibagi menjadi 4 jenis dari masing-masing perawatan, masing-masing
mereka terdiri dari 10 gram bubuk skim, aquadest,
10% kuning telur, 1% glukosa, 16% gliserol, 1%
antibiotik penisilin dan streptomisin dan vitamin E.
Total volume ekstender dapat dihitung oleh
rumus berikut [4]:
Total Volume Extender =
- V
V : Volume semen (ml)
M : motilitas Semen (%)
K : Konsentrasi semen
1.2.2 Proses perawatan
Semen dikumpulkan dari banteng di tabung silinder ditempatkan
dalam bak air dengan suhu 37 ° C. Air mani itu
dievaluasi secara makroskopis berdasarkan volume, warna,
konsistensi, bau, pH dan berdasarkan mikroskopis
motilitas massa, motilitas individu dan konsentrasi.
Volume semen diperlukan untuk membuat 4 sedotan semen beku
untuk setiap perlakuan adalah 0,3 ml. Semen dicampur dengan
extender A kemudian disimpan sementara di cool top with
Suhu 5 ° C. Extender B ditambahkan ke dalam campuran
extender A dan semen 50 menit kemudian disimpan lagi
di atas dingin untuk proses keseimbangan selama 3 jam.
Setelah proses ekuilibrasi, semen akan keluar
campuran masuk ke mesin pengisi dan penyegelan menjadi
disimpan dalam sedotan mini, kemudian ke dalam mesin pembekuan. Pos-
evaluasi pencairan dilakukan 24 jam setelah pembekuan
proses dan diamati setelah proses pencairan di 37 ° C
mandi air selama 30 detik.
1.2.3 Evaluasi semen segar
Semen segar dikumpulkan dari banteng Simmental terpilih
dua kali seminggu. Semen dievaluasi berdasarkan makroskopis
pada volume, warna, bau, pH, konsistensi dan
mikroskopis berdasarkan motilitas massa, individu
motilitas, dan konsentrasi sperma.
1.2.4 Observasi motilitas semen post-thawing
Motilitas semen setelah pencairan diamati sebelumnya
distribusi sebagai bagian dari prosedur kontrol kualitas.
Semen beku yang diambil dari nitrogen cair
penyimpanan harus dicairkan dalam bak air dengan suhu 37 ° C
suhu selama 30 detik. Semen kemudian akan
dievaluasi menggunakan mikroskop dengan 100x dan 400x
memperbesar untuk mengamati motil spermatozoa individu
gerakan. Sel sperma yang dikategorikan sebagai motil
akan memiliki gerakan cepat dan lurus. Pengamatan
dilakukan dalam lima bidang pandang yang berbeda dan kemudian
menghitung persentase rata-rata.
1.2.5 Pengamatan mortalitas semen
Persentase kematian dihitung dengan mengamati semen
Sampel yang telah diwarnai dengan pewarna reagen
eosin-negrosin 0,2% menggunakan mikroskop dengan 400x
pembesar. Pengamatan dilakukan pada lima berbeda
bidang pandang dengan jumlah spermatozoa yang dihitung harus
lebih besar atau sama dengan 200 sel. Spermatozoa fana
Sel akan terlihat dalam warna ungu gelap atau merah selama
pengamatan. Itu karena spermatozoa fana
menunjukkan bahwa membrannya tidak berfungsi sebagaimana mestinya
normal untuk menyaring beberapa zat berbahaya.
1.2.6 Pengamatan kelainan semen
Pengamatan kelainan semen dilakukan dengan menggunakan a
mikroskop dengan pembesaran 400x pada lima bidang pandang.
Total spermatozoa yang dihitung harus lebih besar atau sama
hingga 200 sel.
3 HASIL DAN PEMBAHASAN
3.1 Evaluasi Semen Segar
Semen segar dikumpulkan dari sapi Simmental sementara
disimpan dalam botol sperma untuk diangkut ke laboratorium untuk
proses evaluasi. Hasil semen segar banteng Simmental
evaluasi ditunjukkan pada Tabel 1.
2
E3S Web of Conferences 142 , 02002 (2020)
https://doi.org/10.1051/e3sconf/202014202002
ICAL 2019

Halaman 3
3
Tabel 1 . Hasil pengamatan banteng Simmental segar
evaluasi semen
Hasil pada Tabel 1. menunjukkan bahwa Simmental bull segar
semen memiliki volume 6,90 ± 0,91 ml, warna krem, sedang
konsistensi, bau spermin, pH 6,43 ± 0,20, motilitas massa
+++ dan 1.864 ± 170,56 juta per ml sperma
konsentrasi. Kualitas semen makroskopis menunjukkan
karakteristik yang sesuai dengan sebagian besar semen banteng
kualitas secara umum. Sebagai perbandingan makroskopis
karakteristik banteng Jawa yang sebagian besar memiliki 3,6 -
11,6 ml volume, dengan semen berwarna krem, sedang
konsistensi, memiliki bau sperma dan konsentrasi semen
antara 700 - 1.300 x 10 6 sel / ml [5]. Umumnya, banteng
dapat menghasilkan semen segar dengan volume 5 - 8 ml per
ejakulasi dan konsentrasi mulai dari 800 hingga 2000
juta per ml semen [6]. Perbedaan makroskopis
kualitas untuk beberapa sapi jantan dapat dipengaruhi oleh variasi
usia. Penelitian dari Nyuwita et al. telah menunjukkan itu
Sapi jantan simmental dengan kelompok umur mulai dari 3 hingga
4 tahun mampu menghasilkan lebih banyak volume dan
konsentrasi semen dibandingkan dengan sekelompok sapi jantan
dengan usia 7 hingga 8 tahun [7].
Evaluasi mikroskopik persentase motilitas
memiliki hasil rata-rata 73,01 ± 1,78%. Ini hasil dari
persentase motilitas semen sesuai dengan semen
standar motilitas untuk banteng. Menurut
Standar Nasional Indonesia banteng, semen segar harus
memiliki persentase motilitas minimum 70%
untuk diproses sebagai semen beku [8]. Sebagian besar Simmental
dan limousin bulls memiliki persentase motilitas semen
mulai dari 60 hingga 70%. Banteng simmental yang diangkat
pada kondisi tropis biasanya memiliki motilitas semen yang rendah
persentase [9]. Penelitian dari Muada et al. melaporkan itu
motilitas semen banteng dikumpulkan di daerah beriklim tropis
memiliki persentase lebih rendah dari standar normal segar
motilitas semen dengan rata-rata 58,80 ± 14,35% [10].
3.2 Motilitas Semen Pasca Pencairan
Standar motilitas pasca pencairan menurut bahasa Indonesia
Standar Nasional, harus lebih dari atau sama dengan 40%
untuk mencapai tingkat keberhasilan buatan yang lebih tinggi
inseminasi [8]. Hasil pengamatan semen
motilitas pencairan ditunjukkan pada Tabel 2.
Tabel 2 . Tabulasi data semen semen jantan Simmental
observasi motilitas pencairan
Hari air mani
koleksi
Perawatan
T0
T1
T2
T3
----------------------------% ---------------
-----------
1
41,21 43,33 43,50 38,76
2
40,33 45,50 43,67 41,47
3
38,50 46,85 45,00 40,33
4
41,50 41,67 43,50 40,71
5
40,23 43,50 41,50 38,67
6
48,33 49,50 51,23 45,50
Berarti
41,68
45,06 44,73 40,91
Hasil evaluasi semen pada post-thawing
motilitas menunjukkan bahwa T0, T1, T2 dan T3 tidak
secara signifikan mempengaruhi persentase motilitas
(P <0,05). Namun, T1 dan T2 dengan penambahan vitamin E
pada level 0,134 gram / 100 ml extender dan 0,268
gram / 100 ml extender menunjukkan sedikit peningkatan pada
persentase motilitas pasca pencairan dibandingkan dengan T0 dan
T3. Penambahan vitamin E dengan extender tertentu
level akan memberikan efek positif pada daya tahan
semen untuk menjaga persentase motilitas stabil hingga akhir
pemrosesan untuk produksi semen beku. Penelitian dari
Lukman et al . melaporkan bahwa penambahan vitamin E ke tris -
yolk extender dengan dosis 0,2 - 0,6 untuk 100 ml
extender dapat memberikan peningkatan signifikan pada sapi jantan Bali
motilitas sperma dengan hasil terbaik pada level 0,4
gram / 100 ml [11]. Vitamin E memberi efek instan
motilitas karena sifatnya yang mudah larut
lipid dari skim - yolk extender. 85). Vitamin E sebagai
Antioksidan memiliki peran penting dalam memberikan perlindungan
membran. Vitamin E bisa memberi efek positif pada
peningkatan motilitas sperma, integritas membran
dan potensial membran [2]. Kehadiran vitamin E di
semen extender memiliki peran penting sebagai sperma
senyawa antioksidan untuk mencegah reaksi peroksidasi
pada membran sperma. Membran Spermatozoa kebanyakan
dibangun dari beberapa rantai lemak tak jenuh ganda
asam yang sangat rentan terhadap radikal bebas
reaksi ketika terpapar di udara bebas. Zubair et al . dilaporkan
bahwa vitamin E sebagai antioksidan telah terbukti mampu
mengurangi efek reaksi dengan oksigen reaktif
spesies (ROS) dan peroksidasi lipid (LPO) spermatozoa
membran sehingga kualitas semen akan terjaga selama
seluruh proses produksi atau penyimpanan dingin [3, 12].
Spesies oksigen reaktif (ROS) adalah beberapa oksida
senyawa yang dapat diproduksi oleh spermatozoa pada
kondisi aerobik dalam bentuk hidrogen peroksida
(H 2 O 2 ), anion superoksida (O 2
- ) dan hidroksil radikal

(OH - ). Oksida ini diketahui menyebabkan parah

kerusakan spermatozoa sebagai akibat dari peroksidasi lipid
membran plasma dengan ROS. Pembentukan ROS aktif
spermatozoa disebabkan oleh reaksi berantai pada membran
peroksidasi dengan oksida lain seperti hidrogen
peroksida dan gangguan metabolisme pada spermatozoa
sel. ROS mampu menghambat metabolisme dan sel
pemanfaatan ATP dari mitokondria sel [2, 13].
Kurangnya ketersediaan ATP dalam sel dapat mengurangi
Parameter kualitas
Hasil
Volume (ml)
6,90 ± 0,91
Warna
Krim
Konsistensi
Medium
Bau
Spermin
pH
6,43 ± 0,20
Motilitas massa
+++
Konsentrasi (10 6 sperma / ml)
1.864 ± 170,56
Motilitas individu (%)
73,01 ± 1,78
3
E3S Web of Conferences 142 , 02002 (2020)
https://doi.org/10.1051/e3sconf/202014202002
ICAL 2019
 Halaman 4
4
motilitas progresif dari pergerakan sperma. Spermatozoa
dengan membran yang rusak akibat reaksi ROS lebih rendah
viabilitas dan motilitas pasca pencairan dibandingkan dengan
spermatozoa dengan membran utuh penuh [14].
Vitamin E adalah salah satu molekul yang tidak mungkin
disintesis oleh spermatozoa. Itu harus ditambahkan
secara terpisah pada semen extender untuk menyediakan ketersediaan
antioksidan untuk spermatozoa. Mekanisme vitamin E
pada menghambat peroksidasi adalah dengan memecah oksida
rantai ROS dan radikal bebas lainnya dengan demikian penerima manfaatnya
kapasitas sebagai antioksidan yang menghasilkan peningkatan
motilitas sperma, viabilitas dan membran mitokondria
fungsionalitas [15].
3.3 Mortalitas Semen
Rasio kematian atau kematian spermatozoa adalah rasionya
antara jumlah spermatozoa fana dengan total
jumlah spermatozoa yang diamati. Hasil pengamatan
mortalitas semen dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3 . Tabulasi data semen banteng Simmental
persentase kematian
Hari
air mani
koleksi
Perawatan
T0
T1
T2
T3
-------------------------% --------------------
1
8,50
7,62
10,32
12,50
2
10,15
10,50
8,67
13,50
3
12,33
4,50
5,67
18,21
4
10,50
6,53
7,50
8,42
5
14,50
9,23
12,50
17,20
6
14,83
8,33
4,95
7,67
Berarti
11,80 a
7,79 b
8,27 b
12,92 a
Hasil pengamatan menunjukkan bahwa ada a
efek signifikan dari penambahan vitamin E pada extender
persentase kematian (P> 0,05). Kematian terendah
Persentase ditunjukkan pada T1 dan T2 dengan vitamin E
penambahan pada 0,134 gr / 100 ml extender dan 0,268 gr / 100
ml extender. Kematian sperma umumnya disebabkan oleh a
membran plasma rusak selama produksi
proses semen beku. Proses pembekuan semen
biasanya memberi dampak signifikan pada membran plasma
kerusakan yang mengarah pada peningkatan kematian
persentase. Selama proses pembekuan, sperma
membran harus menanggung efek merusak lipid
peroksidasi dan sengatan dingin. Menjatuhkan suhu
proses pembekuan menyebabkan penyumbatan fosfolipid
gerakan lateral dan perubahan fase dari cair ke gel,
membuat membran menjadi lebih kaku dan rapuh
dalam proses [3]. Suplemen vitamin E untuk air mani
extender dapat memberikan tambahan nutrisi
spermatozoa dalam bentuk antioksidan untuk melindungi
membran dari reaksi berbahaya dengan radikal bebas.
Penambahan vitamin E pada ekstender semen telah terbukti
bermanfaat untuk meningkatkan viabilitas, konsentrasi dan
menjaga motilitas spermatozoa selama kriopreservasi
dalam wadah nitrogen cair [16].
Tingginya persentase kematian pada spermatozoa
disebabkan oleh perubahan mendadak pada tekanan osmotik, di dalam
solusi extender. Solusi extender tinggi
sebaliknya konsentrasi akan menyebabkan kerusakan parah pada
membran plasma dan gangguan pada sifat permeabilitas
membran sel yang menyebabkan kelebihan kapasitas
zat yang telah diserap oleh sel spermatozoa.
Semen extender dengan tekanan osmotik berlebihan dapat menyebabkan
kerusakan simultan pada membran sperma yang
akan menyebabkan penurunan motilitas dan
viabilitas [17]. Tekanan dan konsentrasi osmotik tinggi
juga dapat disebabkan karena penambahan dosis yang berlebihan
vitamin E untuk semen extender. Penambahan vitamin E sangat banyak
dosis tinggi akan menjadi racun dan berbahaya bagi
spermatozoa. Penambahan vitamin E dengan extender
peningkatan level sebaliknya akan memberikan dampak negatif pada
kualitas semen secara keseluruhan karena lebih terkonsentrasi
extender akan mempengaruhi tekanan osmotik di dalamnya
sel yang dapat menyebabkan kerusakan mebrane [17, 18].
Penelitian dari Lecewicz et al . juga menunjukkan itu pada beberapa
Penambahan vitamin E pada tingkat tertentu, pasti akan positif
mempengaruhi peningkatan viabilitas dan pelestarian
motilitas spermatozoa pada persentase standar,
Namun demikian, suplementasi vitamin E tingkat tinggi akan terjadi
alih-alih menjadi berbahaya dan dapat menyebabkan penurunan yang signifikan
pada persentase motilitas sperma [18].
3.4 Abnormalitas Sperma
Kelainan sperma sebagian besar merupakan bentuk cacat fisik
pada tubuh sel spermatozoa. Kelainan primer adalah
suatu bentuk pembelotan pada kepala sel sperma dan akrosom
topi, sedangkan kelainan sekunder adalah bentuk pembelotan
sebagian besar pada bagian ekor sel sperma [2, 19]. Ini
Penelitian difokuskan terutama pada kelainan sekunder
yang sebagian besar terjadi selama semen beku
produksi. Hasil pengamatan motilitas sperma
ditunjukkan pada Tabel 4.
Tabel 4 . Tabulasi data semen banteng Simmental
persentase kelainan
Hari
air mani
koleksi
Perawatan
T0
T1
T2
T3
-----------------------% ----------------------
1
10,33
5,23
4,67
6,33
2
9,33
6,00
6,33
11.23
3
6,00
5,33
5,50
8,33
4
8,76
5,67
4,33
11,82
5
9,37
5,67
5,33
11,47
6
7,50
5,00
4,57
8,33
Berarti
8,55 a
5,48 b
5,12 b
9,59 a
Hasil pengamatan menunjukkan pengaruh yang sangat signifikan
penambahan vitamin E pada persentase kelainan sperma
(P <0,01). Persentase kelainan terendah
pada T1 dan T2 dengan penambahan vitamin E 0,134
gram / 100 ml extender dan 0,268 gram / 100 ml exxtender.
Ini hasil persentase kelainan sperma pada T1
dan T2 juga masih dalam kisaran standar normal
4
E3S Web of Conferences 142 , 02002 (2020)
https://doi.org/10.1051/e3sconf/202014202002
ICAL 2019

Halaman 5
5
persentase kelainan sperma. Abnormalitas sperma
persentase harus kurang dari 10% di orfer untuk mendapatkan
kualitas semen beku [19]. Vitamin E
Selain itu dengan terlalu banyak level rendah atau tinggi sebagai gantinya
meningkatkan persentase kelainan sperma di atas normal
standar. Penelitian dari Daramola et al . menunjukkan bahwa
semen beku dengan penambahan vitamin E pada tingkat yang tepat
akan memberikan hasil yang signifikan pada penurunan sperma
persentase kelainan, namun pada dosis yang lebih tinggi
Persentase kelainan akan meningkat secara bertahap
dengan peningkatan dosis [20].
Abnormalitas sperma dapat dikategorikan sebagai primer atau
kelainan sekunder keduanya memiliki penyebab berbeda.
Kelainan utama o ccurred pada spermatogenesis yang
proses di dalam testis karena proses pematangan
Sperma tidak berfungsi dengan baik, sementara sekunder
kelainan sering terjadi setelah sel sperma pergi
seminiferus tubular atau di luar reproduksi utama
organ [21]. Kelainan sperma pada semen beku
umumnya diklasifikasikan sebagai kelainan sekunder yang
disebabkan oleh beberapa pembelotan di beberapa bagian
Tubuh sel sperma terutama pada ekor sperma. Selama
Proses pembekuan semen, spermatozoa harus dipertahankan
beberapa reaksi kimia dengan oksigen dan nitrogen,
perbedaan tekanan osmotik dan perubahan suhu
yang bisa memberi dampak merusak pada sel sperma [22].
Kelainan sebagian besar disebabkan b berbagai perawatan y dan
proses mekanik selama produksi semen beku dapat
diminimalkan dengan menambahkan vitamin E ke semen extender
sebagai suplemen antioksidan. Vitamin E
suplemen dalam extender semen akan memberikan
perlindungan terhadap membran sel dari radikal bebas sehingga itu
juga akan mengurangi kemungkinan kerusakan yang bisa terjadi
menyebabkan kelainan dan mortalitas sel sperma [23]. Air mani
proses pembekuan berkontribusi terbesar pada sel sperma
dampak kerusakan akibat reaksi oksidasi dengan
oksigen bebas dan nitrogen cair. Suhu drastis
perubahan juga menyebabkan kejutan dingin pada spermatozoa yang
bisa mengurangi kekakuan dan permeabilitas plasma
selaput. Zhao et al . melaporkan bahwa penambahan vitamin E
pada pembekuan semen beku dapat meningkatkan enzimatik
aktivitas dalam metabolisme sel sperma, memperkuat
lapisan dalam membran sel sperma dan mengurangi
kemungkinan reaksi oksidasi selama pembekuan semen
proses [16].
4. KESIMPULAN
Penambahan vitamin E untuk semen banteng Simmental
extender dengan level 0,134 gram / 100 ml extender
memberikan hasil terbaik pada peningkatan post-thawing
kualitas termasuk motilitas, mortalitas dan kelainan
persentase .
UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada semua pejabat dan
anggota staf Pusat Inseminasi Buatan Ungaran
dan pihak terkait lainnya yang telah membantu kami menyelesaikan ini
penelitian yang sesuai.
REFERENSI
1. E. Diany, Suryahadi, T. Muhandri. Pemasaran
strategi distribusi semen beku banteng di BIB
Lembang. J. Manajemen IKM . 11 (1), 62 - 71.
(2016)
2. MR Ugur, AS Abdelrahman, HC Evans, A.
A. Gilmore, M. Hitit, RI Arifiantini, B.
Purwantara, A. Kaya, E. Memili. Uang muka di
cryopreservasi sperma banteng. Depan. Dokter hewan. Sci.
6 (268), 1 - 15. (2019)
3. M. Hussain, SS Begum, MK Kalita, KU
Ahmed, R. Nath. Aditif digunakan dalam semen
pelestarian pada hewan. Intl. J. Chem. Studi . 6 (5),
354 - 361. (2018)
4. Feradis. Peran antioksidan pada pembekuan semen
proses. J. Peternakan . 6 (2), 63 - 70. (2009)
5. LN Varasofiari, ET Setiatin, Sutopo. Evaluasi
kualitas semen segar sapi Jawa berdasarkan
durasi penyimpanan. J. Anim. Agric . 2 (1), 201 - 208.
(2013)
6. JL Schenk. Ulasan: Prinsip memaksimalkan
produksi semen banteng di pusat genetika. Intl. J.
Anim. Biosci. 12 (1), 142 - 147. (2018)
7. A. Nyuwita, T. Susilawati, N. Isnaini. Air mani
kualitas dan produksi semen beku Simmental
banteng di berbagai usia. J. Ternak Tropika . 16 (1), 61
- 68. (2015)
8. Standar Nasional Indonesia. Semen Beku Banteng.
SNI 4869-1-2017 . Badan Standar Nasional,
Jakarta. (2017)
9. S. Lestari, DM Saleh, Maidaswar. Limousin banteng
profil kualitas semen dengan variasi umur
Pusat Inseminasi Buatan Lembang Jawa Barat.
J. Ilmiah Peternakan . 1 (3), 1165 - 1172. (2013)
10. DB Muada, U. Paputungan, MJ Hendrik, SH
Turangan. Limousin dan semen banteng Simmental
karakteristik dalam Inseminasi Buatan Lembang
Pusat. J. Zootek . 37 (2), 360 - 369. (2017)
11. HY Lukman, W. Busono, S. Wahyuningsih, S.
Suyadi. Motilitas dan viabilitas sperma setelah α-
pengenceran tokoferol dalam tris aminomethane-base
extender selama penyimpanan dingin di bali banteng.
Internasional J. Chem. Tech. Res . 6 (14), 5726 -
5732. (2014)
12. M. Zubair dan M. Ali. Efek selenium dan
vitamin E pada kriopreservasi semen dan
kinerja reproduksi hewan (ulasan). J.
Ento. Zool. Studi . 3 (1), 82 - 86. (2015)
13. M. Hezavehei, M. Sharafi, HM Kouchesfahani,
R. Henkel, A. Agarwal, V. Esmaeili, A. Shahverdi.
Cryopreservasi sperma: ulasan saat ini
cryobiologi molekuler dan pendekatan lanjutan.
Repro. Bio. Med. Online . 37 (3), 327 - 339. (2018)
14. A. Kumaresan, A. Johannisson, EM Al-Essawe,
JM Morrell. Kelangsungan sperma, oksigen reaktif
spesies, dan indeks fragmentasi DNA digabungkan
5
E3S Web of Conferences 142 , 02002 (2020)
https://doi.org/10.1051/e3sconf/202014202002
ICAL 2019

Halaman 6
6
dapat membedakan antara di atas dan di bawah
rata-rata banteng kesuburan. J. Dairy Sci . 100 (7), 5824 -
5836. (2017)
15. M. Motemani, M. Chamani, M. Sharafi, R.
Masoudi. Alpha-tocopherol meningkatkan pembekuan-
mencairkan kualitas sperma dengan mengurangi hidrogen
peroksida selama cryopreservasi semen banteng.
Spanyol J. Agric. Res. 15 (1), 1 - 7. (2017)
16. XL Zhao, YK Li, SJ Cao, JH Hu, WH
Wang, RJ Hao, LS Gui, LS Zan. Pelindung
efek asam askorbat dan vitamin E pada
aktivitas enzim antioksidan dari bekuan beku
semen dari sapi jantan qinchuan. Jenderal Mol. Res . 14 (1),
2572 - 2581. (2015)
17. OI Azawi dan EK Hussein. Efek vitamin c
atau suplementasi untuk pengencer tris pada semen
kualitas ram awassi disimpan pada suhu 5 ˚C. Dokter hewan. Res.
Forum . 4 (3), 157 - 160. (2013)
18. M. Lecewicz, R. Strzeżek, W. Kordan, A.
Majewska. Pengaruh suplementasi ekstender dengan
antioksidan rendah molekul berat pada terpilih
parameter kualitas taring cryopreserved
spermatozoa. J. Vet. Res . 62 (1), 221 - 227. (2018)
19. WA Khalil, MA El-Harairy, AEB Zeidan,
MAE Hassan, OM Elsaeed. Evaluasi banteng
spermatozoa selama dan setelah cryopreservasi:
wawasan struktural dan ultrastruktural. Intl. J. Vet.
Sci. Med. 6 , 49 - 56. (2018)
20. JO Daramola, EO Adekunle, OE Oke, O.
Ogundele, EA Saanu, AJ Odeyemi. Efek dari
vitamin E pada sperma dan parameter stres oksidatif
dari dolar kambing kurcaci Afrika barat. Tropis. Sub.
Agroeco . 19 , 151 - 158. (2016)
21. S. Ahmed, MIR Khan, M. Ahmad, S. Iqbal.
Efek usia pada peroksidasi lipid segar dan
semen beku kerbau kerbau Nili-Ravi.
Aku ta. J. Anim. Sci. 17 (3), 730 - 735. (2018)
22. PK Mittal, M. Anand, AK Madan, S. Yadav, J.
Kumar. Kapasitas antioksidan vitamin E,
vitamin C dan kombinasinya dalam cryopreserved
semen bhadavari banteng. Dokter hewan. Dunia . 7 (18), 1127-
1131. (2014)
23. HA Pour, AM Tahmasbi, AA Naserain. Itu
pengaruh vitamin E pada karakteristik semen
ghezel menabrak selama proses pendinginan dan beku.
Euro. J. Zool. Res . 2 (5), 94 - 99. (2013)
6
E3S Web of Conferences 142 , 02002 (2020)
https://doi.org/10.1051/e3sconf/202014202002
ICAL 2019
Halaman 1
Penulis yang sesuai: farizzharfanharis@gmail.com

Pengaruh penambahan vitamin E pada semen banteng Simmental

beku
extender pada kualitas pasca pencairan
Fariz Zharfan Haris 1 * , Yon Soepri Ondho 2 , dan Daud Samsudewa 3
1 Fakultas Peternakan dan Ilmu Pertanian, Universitas Diponegoro
Abstrak. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengevaluasi kualitas post-thawing (motilitas sperma, mortalitas dan
kelainan) dari semen banteng Simmental beku-cair dengan penambahan vitamin E dalam extender. Itu
Bahan yang digunakan untuk penelitian adalah semen dari dua sapi jantan Simmental yang dipilih. Vitamin E sebagai pengobatan
tambahan
untuk extender terdiri dari T0 (tidak ada tambahan vitamin E), T1 (0,134 gram / 100 ml extender), T2 (0,268
gram / 100 ml extender) dan T3 (0,402 gram / 100 ml extender). Evaluasi pasca pencairan dilakukan 24 jam
setelah proses pembekuan dan diamati setelah proses pencairan dalam 37 ° C water bath selama 30 detik.
Parameter yang diamati dalam penelitian ini adalah kualitas semen semen Simmental beku yang dicairkan pasca-pencairan
berdasarkan persentase motilitas, mortalitas dan abnormalitas. Motilitas sperma dievaluasi menggunakan mikroskop dengan
Pembesaran 100x dan 400x, mortalitas sperma diamati menggunakan pembesaran 400x dan dihitung berdasarkan 0,2%
eosin-negrosin pewarnaan, kelainan sperma diamati menggunakan pembesaran 400x dan dihitung berdasarkan
jumlah sel sperma yang secara morfologis abnormal. Motilitas semen pasca pencairan tidak dipengaruhi secara signifikan oleh
penambahan vitamin E dari T1, T2 dan T3 (P <0,05). T1 dan T2 mampu menurunkan angka kematian secara signifikan
persentase dibandingkan dengan T0 dan T3 (P <0,05). T1 dan T2 juga sangat signifikan mempengaruhi penurunan
persentase kelainan dibandingkan dengan T0 dan T3 (P <0,01). T1 umumnya memberikan hasil terbaik pada
peningkatan motilitas pasca pencairan dan penurunan persentase mortalitas dan abnormalitas sperma.
1. PERKENALAN
Pusat inseminasi buatan telah didirikan
beberapa provinsi di Indonesia dalam rangka memenuhi
perlunya semen beku untuk inseminasi buatan
proses. Inseminasi buatan sebagian besar di Indonesia
diaplikasikan pada sapi dan kambing. Inseminasi buatan adalah
juga salah satu program utama pemerintah untuk meningkat
populasi sapi potong secara nasional. Semen beku
kualitas adalah salah satu dari banyak indikator yang mempengaruhi keberhasilan
tingkat inseminasi buatan. Beberapa faktor yang bisa
menentukan kualitas semen beku adalah genetik
kualitas banteng, proses produksi semen dan
implementasi inseminasi buatan [1]. Simmental
semen banteng adalah salah satu jenis semen yang paling banyak digunakan oleh
beberapa inseminator di Indonesia.
Produksi semen beku terdiri dari serangkaian
proses termasuk pengenceran semen dalam extender,
pembekuan, penyimpanan dingin dan evaluasi pasca pencairan.
Selama proses pendinginan dan pembekuan, sel-sel sperma
rentan mendapatkan efek berbahaya dari ketidakseimbangan
tekanan osmotik, denaturasi protein, asidosis seluler,
kehilangan energi, kerusakan membran, kristalisasi
sel tubuh, destabilisasi sitoskeleton dan
pembentukan radikal bebas atau spesies oksigen reaktif
(ROS) [2].
Vitamin E adalah antioksidan yang bermanfaat
molekul pada sel sperma dengan menetralkan H 2 O 2 dan
menghambat reaksi dengan radikal bebas. Vitamin E bisa
mematahkan reaksi berantai dan melindungi membran
dari kerusakan yang disebabkan oleh ROS [3]. Vitamin E sebagai
antioksidan juga dapat mencegah peroksidasi lipid. Lipid
peroksidasi pada spermatozoa akan menyebabkan hilangnya
motilitas, penurunan fruktolisis sel dan respirasi
aktivitas dan kebocoran cairan sel melalui rusak
selaput. Antioksidan seperti vitamin E diketahui
karena kemampuan mereka untuk memberikan perlindungan pada sperma
membran dengan menghambat pembentukan ROS dan lipid
peroksidasi [2].
Tujuan utama dari penelitian ini adalah untuk mengevaluasi
kualitas pasca pencairan (motilitas sperma, mortalitas, dan
semen abnormal dari semen banting Simmental beku-cair
dengan penambahan vitamin E dalam extender. Ini
penelitian mungkin memiliki manfaat meningkatkan
kualitas semen Simmental banteng setelah
penambahan vitamin E dalam extender semen dan menghasilkan
peningkatan produksi semen beku di buatan
pusat inseminasi.
2. BAHAN-BAHAN DAN METODE-METODE
Penelitian ini telah dilakukan pada bulan September
hingga November 2018 di Pusat Inseminasi Buatan
Ungaran, Kompleks Distrik Sidomulyo, Semarang
Kabupaten. Bahan utama yang digunakan untuk penelitian adalah
semen dari dua sampel banteng Simmental terpilih yang
dapat menghasilkan semen dengan kualitas yang konsisten selama
koleksi standar. Semen dikumpulkan dua kali seminggu menggunakan
prosedur standar. Bahan lain yang digunakan untuk semen
pengolahan adalah vitamin E, eosin-negrosin 0,2%, aqua
dest, gliserol 96%, pasar bebas penisilin dan
antibiotik streptomisin, kuning telur - skim extender dan
nitrogen cair. Alat yang digunakan untuk pemrosesan semen
dan observasi adalah pipet, konter tangan, mikroskop,
gelas ukur, gelas kimia, pengaduk, objek-kaca,
termometer, pendingin, sedotan mini, mesin pembekuan
dan mesin penyegel pengisi .
E3S Web of Conferences 142 , 02002 (2020)
https://doi.org/10.1051/e3sconf/202014202002
ICAL 2019
© The Authors, diterbitkan oleh EDP Sciences. Ini adalah artikel akses terbuka yang didistribusikan di bawah ketentuan Atribusi Creative Commons
Lisensi 4.0 (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).

Halaman 2
2
1.1 Desain Eksperimental
Desain eksperimental yang digunakan untuk penelitian ini adalah
menyelesaikan desain eksperimen acak dengan 4
perawatan dan 6 pengulangan. Perawatan untuk penelitian ini
Terdiri dari :
T0: tidak ada tambahan vitamin E
T1: 0,134 gram / 100 ml extender
T2: 0,268 gram / 100 ml extender
T3: 0,402 gram / 100 ml extender
Parameter yang diamati dalam penelitian ini adalah
kualitas pencairan semen banteng Simmental beku-cair
berdasarkan persentase motilitas, mortalitas dan abnormalitas.
2.1 Prosedur
Prosedur penelitian terdiri dari persiapan semen,
proses perawatan, evaluasi semen segar, pasca pencairan
observasi motilitas, pengamatan mortalitas, dan
observasi kelainan
1.2.1 Persiapan semen
Proses persiapan dimulai dengan membuat semen
extender. Extender digunakan untuk semen banteng Simmental
adalah kuning telur dan campuran susu sebagai larutan stok.
Awalnya, extender dibagi menjadi extender A dan
extender B terdiri dari volume 100 ml untuk masing-masing
extender. Extender A terdiri dari 10 g bubuk skim,
aquadest, 10% kuning telur, 1% glukosa dan 1% glukosa
antibiotik penisilin dan streptomisin. Extender B
dibagi menjadi 4 jenis dari masing-masing perawatan, masing-masing
mereka terdiri dari 10 gram bubuk skim, aquadest,
10% kuning telur, 1% glukosa, 16% gliserol, 1%
antibiotik penisilin dan streptomisin dan vitamin E.
Total volume ekstender dapat dihitung oleh
rumus berikut [4]:
Total Volume Extender =
- V
V : Volume semen (ml)
M : motilitas Semen (%)
K : Konsentrasi semen
1.2.2 Proses perawatan
Semen dikumpulkan dari banteng di tabung silinder ditempatkan
dalam bak air dengan suhu 37 ° C. Air mani itu
dievaluasi secara makroskopis berdasarkan volume, warna,
konsistensi, bau, pH dan berdasarkan mikroskopis
motilitas massa, motilitas individu dan konsentrasi.
Volume semen diperlukan untuk membuat 4 sedotan semen beku
untuk setiap perlakuan adalah 0,3 ml. Semen dicampur dengan
extender A kemudian disimpan sementara di cool top with
Suhu 5 ° C. Extender B ditambahkan ke dalam campuran
extender A dan semen 50 menit kemudian disimpan lagi
di atas dingin untuk proses keseimbangan selama 3 jam.
Setelah proses ekuilibrasi, semen akan keluar
campuran masuk ke mesin pengisi dan penyegelan menjadi
disimpan dalam sedotan mini, kemudian ke dalam mesin pembekuan. Pos-
evaluasi pencairan dilakukan 24 jam setelah pembekuan
proses dan diamati setelah proses pencairan di 37 ° C
mandi air selama 30 detik.
1.2.3 Evaluasi semen segar
Semen segar dikumpulkan dari banteng Simmental terpilih
dua kali seminggu. Semen dievaluasi berdasarkan makroskopis
pada volume, warna, bau, pH, konsistensi dan
mikroskopis berdasarkan motilitas massa, individu
motilitas, dan konsentrasi sperma.
1.2.4 Observasi motilitas semen post-thawing
Motilitas semen setelah pencairan diamati sebelumnya
distribusi sebagai bagian dari prosedur kontrol kualitas.
Semen beku yang diambil dari nitrogen cair
penyimpanan harus dicairkan dalam bak air dengan suhu 37 ° C
suhu selama 30 detik. Semen kemudian akan
dievaluasi menggunakan mikroskop dengan 100x dan 400x
memperbesar untuk mengamati motil spermatozoa individu
gerakan. Sel sperma yang dikategorikan sebagai motil
akan memiliki gerakan cepat dan lurus. Pengamatan
dilakukan dalam lima bidang pandang yang berbeda dan kemudian
menghitung persentase rata-rata.
1.2.5 Pengamatan mortalitas semen
Persentase kematian dihitung dengan mengamati semen
Sampel yang telah diwarnai dengan pewarna reagen
eosin-negrosin 0,2% menggunakan mikroskop dengan 400x
pembesar. Pengamatan dilakukan pada lima berbeda
bidang pandang dengan jumlah spermatozoa yang dihitung harus
lebih besar atau sama dengan 200 sel. Spermatozoa fana
Sel akan terlihat dalam warna ungu gelap atau merah selama
pengamatan. Itu karena spermatozoa fana
menunjukkan bahwa membrannya tidak berfungsi sebagaimana mestinya
normal untuk menyaring beberapa zat berbahaya.
1.2.6 Pengamatan kelainan semen
Pengamatan kelainan semen dilakukan dengan menggunakan a
mikroskop dengan pembesaran 400x pada lima bidang pandang.
Total spermatozoa yang dihitung harus lebih besar atau sama
hingga 200 sel.
3 HASIL DAN PEMBAHASAN
3.1 Evaluasi Semen Segar
Semen segar dikumpulkan dari sapi Simmental sementara
disimpan dalam botol sperma untuk diangkut ke laboratorium untuk
proses evaluasi. Hasil semen segar banteng Simmental
evaluasi ditunjukkan pada Tabel 1.
2
E3S Web of Conferences 142 , 02002 (2020)
https://doi.org/10.1051/e3sconf/202014202002
ICAL 2019

Halaman 3
3
Tabel 1 . Hasil pengamatan banteng Simmental segar
evaluasi semen
Hasil pada Tabel 1. menunjukkan bahwa Simmental bull segar
semen memiliki volume 6,90 ± 0,91 ml, warna krem, sedang
konsistensi, bau spermin, pH 6,43 ± 0,20, motilitas massa
+++ dan 1.864 ± 170,56 juta per ml sperma
konsentrasi. Kualitas semen makroskopis menunjukkan
karakteristik yang sesuai dengan sebagian besar semen banteng
kualitas secara umum. Sebagai perbandingan makroskopis
karakteristik banteng Jawa yang sebagian besar memiliki 3,6 -
11,6 ml volume, dengan semen berwarna krem, sedang
konsistensi, memiliki bau sperma dan konsentrasi semen
antara 700 - 1.300 x 10 6 sel / ml [5]. Umumnya, banteng
dapat menghasilkan semen segar dengan volume 5 - 8 ml per
ejakulasi dan konsentrasi mulai dari 800 hingga 2000
juta per ml semen [6]. Perbedaan makroskopis
kualitas untuk beberapa sapi jantan dapat dipengaruhi oleh variasi
usia. Penelitian dari Nyuwita et al. telah menunjukkan itu
Sapi jantan simmental dengan kelompok umur mulai dari 3 hingga
4 tahun mampu menghasilkan lebih banyak volume dan
konsentrasi semen dibandingkan dengan sekelompok sapi jantan
dengan usia 7 hingga 8 tahun [7].
Evaluasi mikroskopik persentase motilitas
memiliki hasil rata-rata 73,01 ± 1,78%. Ini hasil dari
persentase motilitas semen sesuai dengan semen
standar motilitas untuk banteng. Menurut
Standar Nasional Indonesia banteng, semen segar harus
memiliki persentase motilitas minimum 70%
untuk diproses sebagai semen beku [8]. Sebagian besar Simmental
dan limousin bulls memiliki persentase motilitas semen
mulai dari 60 hingga 70%. Banteng simmental yang diangkat
pada kondisi tropis biasanya memiliki motilitas semen yang rendah
persentase [9]. Penelitian dari Muada et al. melaporkan itu
motilitas semen banteng dikumpulkan di daerah beriklim tropis
memiliki persentase lebih rendah dari standar normal segar
motilitas semen dengan rata-rata 58,80 ± 14,35% [10].
3.2 Motilitas Semen Pasca Pencairan
Standar motilitas pasca pencairan menurut bahasa Indonesia
Standar Nasional, harus lebih dari atau sama dengan 40%
untuk mencapai tingkat keberhasilan buatan yang lebih tinggi
inseminasi [8]. Hasil pengamatan semen
motilitas pencairan ditunjukkan pada Tabel 2.
Tabel 2 . Tabulasi data semen semen jantan Simmental
observasi motilitas pencairan
Hari air mani
koleksi
Perawatan
T0
T1
T2
T3
----------------------------% ---------------
-----------
1
41,21 43,33 43,50 38,76
2
40,33 45,50 43,67 41,47
3
38,50 46,85 45,00 40,33
4
41,50 41,67 43,50 40,71
5
40,23 43,50 41,50 38,67
6
48,33 49,50 51,23 45,50
Berarti
41,68
45,06 44,73 40,91
Hasil evaluasi semen pada post-thawing
motilitas menunjukkan bahwa T0, T1, T2 dan T3 tidak
secara signifikan mempengaruhi persentase motilitas
(P <0,05). Namun, T1 dan T2 dengan penambahan vitamin E
pada level 0,134 gram / 100 ml extender dan 0,268
gram / 100 ml extender menunjukkan sedikit peningkatan pada
persentase motilitas pasca pencairan dibandingkan dengan T0 dan
T3. Penambahan vitamin E dengan extender tertentu
level akan memberikan efek positif pada daya tahan
semen untuk menjaga persentase motilitas stabil hingga akhir
pemrosesan untuk produksi semen beku. Penelitian dari
Lukman et al . melaporkan bahwa penambahan vitamin E ke tris -
yolk extender dengan dosis 0,2 - 0,6 untuk 100 ml
extender dapat memberikan peningkatan signifikan pada sapi jantan Bali
motilitas sperma dengan hasil terbaik pada level 0,4
gram / 100 ml [11]. Vitamin E memberi efek instan
motilitas karena sifatnya yang mudah larut
lipid dari skim - yolk extender. 85). Vitamin E sebagai
Antioksidan memiliki peran penting dalam memberikan perlindungan
membran. Vitamin E bisa memberi efek positif pada
peningkatan motilitas sperma, integritas membran
dan potensial membran [2]. Kehadiran vitamin E di
semen extender memiliki peran penting sebagai sperma
senyawa antioksidan untuk mencegah reaksi peroksidasi
pada membran sperma. Membran Spermatozoa kebanyakan
dibangun dari beberapa rantai lemak tak jenuh ganda
asam yang sangat rentan terhadap radikal bebas
reaksi ketika terpapar di udara bebas. Zubair et al . dilaporkan
bahwa vitamin E sebagai antioksidan telah terbukti mampu
mengurangi efek reaksi dengan oksigen reaktif
spesies (ROS) dan peroksidasi lipid (LPO) spermatozoa
membran sehingga kualitas semen akan terjaga selama
seluruh proses produksi atau penyimpanan dingin [3, 12].
Spesies oksigen reaktif (ROS) adalah beberapa oksida
senyawa yang dapat diproduksi oleh spermatozoa pada
kondisi aerobik dalam bentuk hidrogen peroksida
(H 2 O 2 ), anion superoksida (O 2
- ) dan hidroksil radikal

(OH - ). Oksida ini diketahui menyebabkan parah

kerusakan spermatozoa sebagai akibat dari peroksidasi lipid
membran plasma dengan ROS. Pembentukan ROS aktif
spermatozoa disebabkan oleh reaksi berantai pada membran
peroksidasi dengan oksida lain seperti hidrogen
peroksida dan gangguan metabolisme pada spermatozoa
sel. ROS mampu menghambat metabolisme dan sel
pemanfaatan ATP dari mitokondria sel [2, 13].
Kurangnya ketersediaan ATP dalam sel dapat mengurangi
Parameter kualitas
Hasil
Volume (ml)
6,90 ± 0,91
Warna
Krim
Konsistensi
Medium
Bau
Spermin
pH
6,43 ± 0,20
Motilitas massa
+++
Konsentrasi (10 6 sperma / ml)
1.864 ± 170,56
Motilitas individu (%)
73,01 ± 1,78
3
E3S Web of Conferences 142 , 02002 (2020)
https://doi.org/10.1051/e3sconf/202014202002
ICAL 2019

Halaman 4
4
motilitas progresif dari pergerakan sperma. Spermatozoa
dengan membran yang rusak akibat reaksi ROS lebih rendah
viabilitas dan motilitas pasca pencairan dibandingkan dengan
spermatozoa dengan membran utuh penuh [14].
Vitamin E adalah salah satu molekul yang tidak mungkin
disintesis oleh spermatozoa. Itu harus ditambahkan
secara terpisah pada semen extender untuk menyediakan ketersediaan
antioksidan untuk spermatozoa. Mekanisme vitamin E
pada menghambat peroksidasi adalah dengan memecah oksida
rantai ROS dan radikal bebas lainnya dengan demikian penerima manfaatnya
kapasitas sebagai antioksidan yang menghasilkan peningkatan
motilitas sperma, viabilitas dan membran mitokondria
fungsionalitas [15].
3.3 Mortalitas Semen
Rasio kematian atau kematian spermatozoa adalah rasionya
antara jumlah spermatozoa fana dengan total
jumlah spermatozoa yang diamati. Hasil pengamatan
mortalitas semen dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3 . Tabulasi data semen banteng Simmental
persentase kematian
Hari
air mani
koleksi
Perawatan
T0
T1
T2
T3
-------------------------% --------------------
1
8,50
7,62
10,32
12,50
2
10,15
10,50
8,67
13,50
3
12,33
4,50
5,67
18,21
4
10,50
6,53
7,50
8,42
5
14,50
9,23
12,50
17,20
6
14,83
8,33
4,95
7,67
Berarti
11,80 a
7,79 b
8,27 b
12,92 a
Hasil pengamatan menunjukkan bahwa ada a
efek signifikan dari penambahan vitamin E pada extender
persentase kematian (P> 0,05). Kematian terendah
Persentase ditunjukkan pada T1 dan T2 dengan vitamin E
penambahan pada 0,134 gr / 100 ml extender dan 0,268 gr / 100
ml extender. Kematian sperma umumnya disebabkan oleh a
membran plasma rusak selama produksi
proses semen beku. Proses pembekuan semen
biasanya memberi dampak signifikan pada membran plasma
kerusakan yang mengarah pada peningkatan kematian
persentase. Selama proses pembekuan, sperma
membran harus menanggung efek merusak lipid
peroksidasi dan sengatan dingin. Menjatuhkan suhu
proses pembekuan menyebabkan penyumbatan fosfolipid
gerakan lateral dan perubahan fase dari cair ke gel,
membuat membran menjadi lebih kaku dan rapuh
dalam proses [3]. Suplemen vitamin E untuk air mani
extender dapat memberikan tambahan nutrisi
spermatozoa dalam bentuk antioksidan untuk melindungi
membran dari reaksi berbahaya dengan radikal bebas.
Penambahan vitamin E pada ekstender semen telah terbukti
bermanfaat untuk meningkatkan viabilitas, konsentrasi dan
menjaga motilitas spermatozoa selama kriopreservasi
dalam wadah nitrogen cair [16].
Tingginya persentase kematian pada spermatozoa
disebabkan oleh perubahan mendadak pada tekanan osmotik, di dalam
solusi extender. Solusi extender tinggi
sebaliknya konsentrasi akan menyebabkan kerusakan parah pada
membran plasma dan gangguan pada sifat permeabilitas
membran sel yang menyebabkan kelebihan kapasitas
zat yang telah diserap oleh sel spermatozoa.
Semen extender dengan tekanan osmotik berlebihan dapat menyebabkan
kerusakan simultan pada membran sperma yang
akan menyebabkan penurunan motilitas dan
viabilitas [17]. Tekanan dan konsentrasi osmotik tinggi
juga dapat disebabkan karena penambahan dosis yang berlebihan
vitamin E untuk semen extender. Penambahan vitamin E sangat banyak
dosis tinggi akan menjadi racun dan berbahaya bagi
spermatozoa. Penambahan vitamin E dengan extender
peningkatan level sebaliknya akan memberikan dampak negatif pada
kualitas semen secara keseluruhan karena lebih terkonsentrasi
extender akan mempengaruhi tekanan osmotik di dalamnya
sel yang dapat menyebabkan kerusakan mebrane [17, 18].
Penelitian dari Lecewicz et al . juga menunjukkan itu pada beberapa
Penambahan vitamin E pada tingkat tertentu, pasti akan positif
mempengaruhi peningkatan viabilitas dan pelestarian
motilitas spermatozoa pada persentase standar,
Namun demikian, suplementasi vitamin E tingkat tinggi akan terjadi
alih-alih menjadi berbahaya dan dapat menyebabkan penurunan yang signifikan
pada persentase motilitas sperma [18].
3.4 Abnormalitas Sperma
Kelainan sperma sebagian besar merupakan bentuk cacat fisik
pada tubuh sel spermatozoa. Kelainan primer adalah
suatu bentuk pembelotan pada kepala sel sperma dan akrosom
topi, sedangkan kelainan sekunder adalah bentuk pembelotan
sebagian besar pada bagian ekor sel sperma [2, 19]. Ini
Penelitian difokuskan terutama pada kelainan sekunder
yang sebagian besar terjadi selama semen beku
produksi. Hasil pengamatan motilitas sperma
ditunjukkan pada Tabel 4.
Tabel 4 . Tabulasi data semen banteng Simmental
persentase kelainan
Hari
air mani
koleksi
Perawatan
T0
T1
T2
T3
-----------------------% ----------------------
1
10,33
5,23
4,67
6,33
2
9,33
6,00
6,33
11.23
3
6,00
5,33
5,50
8,33
4
8,76
5,67
4,33
11,82
5
9,37
5,67
5,33
11,47
6
7,50
5,00
4,57
8,33
Berarti
8,55 a
5,48 b
5,12 b
9,59 a
Hasil pengamatan menunjukkan pengaruh yang sangat signifikan
penambahan vitamin E pada persentase kelainan sperma
(P <0,01). Persentase kelainan terendah
pada T1 dan T2 dengan penambahan vitamin E 0,134
gram / 100 ml extender dan 0,268 gram / 100 ml exxtender.
Ini hasil persentase kelainan sperma pada T1
dan T2 juga masih dalam kisaran standar normal
4
E3S Web of Conferences 142 , 02002 (2020)
https://doi.org/10.1051/e3sconf/202014202002
ICAL 2019

Halaman 5
5
persentase kelainan sperma. Abnormalitas sperma
persentase harus kurang dari 10% di orfer untuk mendapatkan
kualitas semen beku [19]. Vitamin E
Selain itu dengan terlalu banyak level rendah atau tinggi sebagai gantinya
meningkatkan persentase kelainan sperma di atas normal
standar. Penelitian dari Daramola et al . menunjukkan bahwa
semen beku dengan penambahan vitamin E pada tingkat yang tepat
akan memberikan hasil yang signifikan pada penurunan sperma
persentase kelainan, namun pada dosis yang lebih tinggi
Persentase kelainan akan meningkat secara bertahap
dengan peningkatan dosis [20].
Abnormalitas sperma dapat dikategorikan sebagai primer atau
kelainan sekunder keduanya memiliki penyebab berbeda.
Kelainan utama o ccurred pada spermatogenesis yang
proses di dalam testis karena proses pematangan
Sperma tidak berfungsi dengan baik, sementara sekunder
kelainan sering terjadi setelah sel sperma pergi
seminiferus tubular atau di luar reproduksi utama
organ [21]. Kelainan sperma pada semen beku
umumnya diklasifikasikan sebagai kelainan sekunder yang
disebabkan oleh beberapa pembelotan di beberapa bagian
Tubuh sel sperma terutama pada ekor sperma. Selama
Proses pembekuan semen, spermatozoa harus dipertahankan
beberapa reaksi kimia dengan oksigen dan nitrogen,
perbedaan tekanan osmotik dan perubahan suhu
yang bisa memberi dampak merusak pada sel sperma [22].
Kelainan sebagian besar disebabkan b berbagai perawatan y dan
proses mekanik selama produksi semen beku dapat
diminimalkan dengan menambahkan vitamin E ke semen extender
sebagai suplemen antioksidan. Vitamin E
suplemen dalam extender semen akan memberikan
perlindungan terhadap membran sel dari radikal bebas sehingga itu
juga akan mengurangi kemungkinan kerusakan yang bisa terjadi
menyebabkan kelainan dan mortalitas sel sperma [23]. Air mani
proses pembekuan berkontribusi terbesar pada sel sperma
dampak kerusakan akibat reaksi oksidasi dengan
oksigen bebas dan nitrogen cair. Suhu drastis
perubahan juga menyebabkan kejutan dingin pada spermatozoa yang
bisa mengurangi kekakuan dan permeabilitas plasma
selaput. Zhao et al . melaporkan bahwa penambahan vitamin E
pada pembekuan semen beku dapat meningkatkan enzimatik
aktivitas dalam metabolisme sel sperma, memperkuat
lapisan dalam membran sel sperma dan mengurangi
kemungkinan reaksi oksidasi selama pembekuan semen
proses [16].
4. KESIMPULAN
Penambahan vitamin E untuk semen banteng Simmental
extender dengan level 0,134 gram / 100 ml extender
memberikan hasil terbaik pada peningkatan post-thawing
kualitas termasuk motilitas, mortalitas dan kelainan
persentase .
UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada semua pejabat dan
anggota staf Pusat Inseminasi Buatan Ungaran
dan pihak terkait lainnya yang telah membantu kami menyelesaikan ini
penelitian yang sesuai.
REFERENSI
1. E. Diany, Suryahadi, T. Muhandri. Pemasaran
strategi distribusi semen beku banteng di BIB
Lembang. J. Manajemen IKM . 11 (1), 62 - 71.
(2016)
2. MR Ugur, AS Abdelrahman, HC Evans, A.
A. Gilmore, M. Hitit, RI Arifiantini, B.
Purwantara, A. Kaya, E. Memili. Uang muka di
cryopreservasi sperma banteng. Depan. Dokter hewan. Sci.
6 (268), 1 - 15. (2019)
3. M. Hussain, SS Begum, MK Kalita, KU
Ahmed, R. Nath. Aditif digunakan dalam semen
pelestarian pada hewan. Intl. J. Chem. Studi . 6 (5),
354 - 361. (2018)
4. Feradis. Peran antioksidan pada pembekuan semen
proses. J. Peternakan . 6 (2), 63 - 70. (2009)
5. LN Varasofiari, ET Setiatin, Sutopo. Evaluasi
kualitas semen segar sapi Jawa berdasarkan
durasi penyimpanan. J. Anim. Agric . 2 (1), 201 - 208.
(2013)
6. JL Schenk. Ulasan: Prinsip memaksimalkan
produksi semen banteng di pusat genetika. Intl. J.
Anim. Biosci. 12 (1), 142 - 147. (2018)
7. A. Nyuwita, T. Susilawati, N. Isnaini. Air mani
kualitas dan produksi semen beku Simmental
banteng di berbagai usia. J. Ternak Tropika . 16 (1), 61
- 68. (2015)
8. Standar Nasional Indonesia. Semen Beku Banteng.
SNI 4869-1-2017 . Badan Standar Nasional,
Jakarta. (2017)
9. S. Lestari, DM Saleh, Maidaswar. Limousin banteng
profil kualitas semen dengan variasi umur
Pusat Inseminasi Buatan Lembang Jawa Barat.
J. Ilmiah Peternakan . 1 (3), 1165 - 1172. (2013)
10. DB Muada, U. Paputungan, MJ Hendrik, SH
Turangan. Limousin dan semen banteng Simmental
karakteristik dalam Inseminasi Buatan Lembang
Pusat. J. Zootek . 37 (2), 360 - 369. (2017)
11. HY Lukman, W. Busono, S. Wahyuningsih, S.
Suyadi. Motilitas dan viabilitas sperma setelah α-
pengenceran tokoferol dalam tris aminomethane-base
extender selama penyimpanan dingin di bali banteng.
Internasional J. Chem. Tech. Res . 6 (14), 5726 -
5732. (2014)
12. M. Zubair dan M. Ali. Efek selenium dan
vitamin E pada kriopreservasi semen dan
kinerja reproduksi hewan (ulasan). J.
Ento. Zool. Studi . 3 (1), 82 - 86. (2015)
13. M. Hezavehei, M. Sharafi, HM Kouchesfahani,
R. Henkel, A. Agarwal, V. Esmaeili, A. Shahverdi.
Cryopreservasi sperma: ulasan saat ini
cryobiologi molekuler dan pendekatan lanjutan.
Repro. Bio. Med. Online . 37 (3), 327 - 339. (2018)
14. A. Kumaresan, A. Johannisson, EM Al-Essawe,
JM Morrell. Kelangsungan sperma, oksigen reaktif
spesies, dan indeks fragmentasi DNA digabungkan
5
E3S Web of Conferences 142 , 02002 (2020)
https://doi.org/10.1051/e3sconf/202014202002
ICAL 2019

Halaman 6
6
dapat membedakan antara di atas dan di bawah
rata-rata banteng kesuburan. J. Dairy Sci . 100 (7), 5824 -
5836. (2017)
15. M. Motemani, M. Chamani, M. Sharafi, R.
Masoudi. Alpha-tocopherol meningkatkan pembekuan-
mencairkan kualitas sperma dengan mengurangi hidrogen
peroksida selama cryopreservasi semen banteng.
Spanyol J. Agric. Res. 15 (1), 1 - 7. (2017)
16. XL Zhao, YK Li, SJ Cao, JH Hu, WH
Wang, RJ Hao, LS Gui, LS Zan. Pelindung
efek asam askorbat dan vitamin E pada
aktivitas enzim antioksidan dari bekuan beku
semen dari sapi jantan qinchuan. Jenderal Mol. Res . 14 (1),
2572 - 2581. (2015)
17. OI Azawi dan EK Hussein. Efek vitamin c
atau suplementasi untuk pengencer tris pada semen
kualitas ram awassi disimpan pada suhu 5 ˚C. Dokter hewan. Res.
Forum . 4 (3), 157 - 160. (2013)
18. M. Lecewicz, R. Strzeżek, W. Kordan, A.
Majewska. Pengaruh suplementasi ekstender dengan
antioksidan rendah molekul berat pada terpilih
parameter kualitas taring cryopreserved
spermatozoa. J. Vet. Res . 62 (1), 221 - 227. (2018)
19. WA Khalil, MA El-Harairy, AEB Zeidan,
MAE Hassan, OM Elsaeed. Evaluasi banteng
spermatozoa selama dan setelah cryopreservasi:
wawasan struktural dan ultrastruktural. Intl. J. Vet.
Sci. Med. 6 , 49 - 56. (2018)
20. JO Daramola, EO Adekunle, OE Oke, O.
Ogundele, EA Saanu, AJ Odeyemi. Efek dari
vitamin E pada sperma dan parameter stres oksidatif
dari dolar kambing kurcaci Afrika barat. Tropis. Sub.
Agroeco . 19 , 151 - 158. (2016)
21. S. Ahmed, MIR Khan, M. Ahmad, S. Iqbal.
Efek usia pada peroksidasi lipid segar dan
semen beku kerbau kerbau Nili-Ravi.
Aku ta. J. Anim. Sci. 17 (3), 730 - 735. (2018)
22. PK Mittal, M. Anand, AK Madan, S. Yadav, J.
Kumar. Kapasitas antioksidan vitamin E,
vitamin C dan kombinasinya dalam cryopreserved
semen bhadavari banteng. Dokter hewan. Dunia . 7 (18), 1127-
1131. (2014)
23. HA Pour, AM Tahmasbi, AA Naserain. Itu
pengaruh vitamin E pada karakteristik semen
ghezel menabrak selama proses pendinginan dan beku.
Euro. J. Zool. Res . 2 (5), 94 - 99. (2013)
6
E3S Web of Conferences 142 , 02002 (2020)
https://doi.org/10.1051/e3sconf/202014202002
ICAL 2019