LAPORAN MIKROBIOLOGI LINGKUNGAN

MODUL I

ENUMERASI BAKTERI

Disusun Oleh :
Michelle Natasya Tanuwijaya
1806148971 – Kelompok 5

Asisten Praktikum : Ainayya Salsabiyla

Tanggal Praktikum : 20 April 2020

Tanggal Dikumpulkan : 23 April 2020

Nilai Laporan :

Paraf Asisten :

DEPARTEMEN TEKNIK SIPIL

FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS INDONESIA
DEPOK
2020
Nama : Michelle Natasya Tanuwijaya
NPM : 1806148971
Kelompok 5 – Mikrobiologi Lingkungan TL01

Summary Video Enumerasi Bakteri

Percobaan enumerasi bakteri melakukan perhitungan CFU (Colony Forming Units)
dengan metode serial dilution dan menggunakan teknik spread plate. Sebelum melakukan
percobaan, praktikan harus melakukan prosedur keselamatan yaitu menggunakan jas lab
sebagai alat pelindung diri, mencuci tangan, menyemprotkan alkohol ke tangan agar tidak
terkontaminasi bakteri lain sebelum dan menggunakan sarung tangan (lateks) sebelum
melakukan percobaan, menggunakan kacamata pelindung. Dalam percobaan, pratikan
harus menerapkan teknik aseptik yaitu teknik yang digunakan dalam pencegahan
kontaminasi selama membuat dan mensterilkan medium kultur. Selain itu, praktikan juga
menerapkan teknik little finger. Tabung reaksi dipegang di tangan kiri, pipet dipegang
tangan kanan, sedangkan jari kelingking kanan digunakan untuk memegang penutup
tabung. Usahakan praktikan melakukan percobaan dekat dengan api untuk mencegah
kontaminasi (pembakar spiritus).

Setelah melakukan persiapan, praktikan selanjutnya melakukan dilusi atau

pengenceran terhadap kultur bakteri. Tahapan saat melakukan dilusi adalah sebagai berikut.

1. Mensterilkan peralatan yang akan digunakan dengan memanaskannya menggunakan

pembakar spiritus.
2. Memipet 9 ml air kedalam setiap wadah menggunakan pipet ukur yang telah disteril.
Wadah yang digunakan adalah tabung kaca lengkap dengan tutup sebanyak lima buah.
Setiap mengambil air dari wadahnya, praktikan harus langsung menutup kembali untuk
mencegah kontaminasi bakteri lain.
3. Memipet larutan yang berisi bakteri ke dalam wadah pertama, kedua, ketiga, keempat,
dan kelima berurutan dengan tingkat pengenceran 10-1 hingga 10-5. Pada wadah
pertama, rasio air dan kultur bakteri adalah 1:9.
4. Memipet 1 ml sampel dari wadah pertama ke dalam wadah kedua. Lakukan berurutan
sampai wadah kelima sehingga diperoleh pengenceran bertingkat (series of dilution).
5. Melakukan teknik spread plate pada lima buah cawan petri menggunakan spreader.
Masing-masing cawan petri akan berisi kelima sampel yang telah dilakukan serial
dilution pada langkah sebelumnya. Saat memindahkan sampel ke dalam cawan petri,
praktikan harus mengusahakan tidak membuka cawan petri terlalu lebar untuk
menghindari kontaminasi sampel, serta tetap berada dekat dengan api panas (pembakar
spiritus).
6. Menghitung koloni bakteri yang tumbuh pada cawan petri dengan memberikan tanda
pada bagian luar-bawah cawan petri menggunakan spidol. Cawan petri yang digunakan
adalah cawan petri dengan koloni bakteri 30-300.
7. Setelah melakukan perhitungan koloni bakteri, wadah cawan petri yang telah digunakan
diletakkan dalam autoclave untuk membunuh bakteri yang tersisa.