Nama : Ayu Novita (11180950000098)

-
-
-
Kelas : 4C-2
Kelompok : 5C2

MIKROSKOP FLUORESCENT

PENGERTIAN

Mikroskop sebenarnya merupakan alat yang digunakan untuk melihat objek dengan ukuran
kecil, karena sangat kecilnya objek yang diamati sehingga tidak bisa dilihat dengan mata
telanjang. 

Mikroskop sendiri merupakan serapan dari bahasa Yunani, yakni :

 Micro yang berarti kecil, dan

 Scopein yang berarti melihat

“Mikroskop (bahasa Yunani: micros = kecil dan scopein = melihat) adalah sebuah alat
untuk melihat objek yang terlalu kecil untuk dilihat secara kasat mata. Mikroskop
merupakan alat bantu yang dapat ditemukan hampir diseluruh laboratorium untuk dapat
mengamati organisme berukuran kecil (mikroskopis). Ilmu yang mempelajari benda kecil
dengan menggunakan alat ini disebut mikroskopi, dan kata mikroskopik berarti sangat kecil,
tidak mudah terlihat oleh mata”

PENGERTIAN MIKROSKOP FLUORENSI

Mikroskop fluoresensi (fluorescence microscope) adalah jenis mikroskop cahaya yang
digunakan untuk mendapatkan gambar obyek yang memiliki karakteristik fluoresensi.
Fluoresensi disini bermakna menyerap cahaya pada panjang gelombang tertentu dan meng-
emisi lainnya

Mikroskop fluorescence hampir sama dengan mikroskop cahaya biasa dengan

tambahan fitur untuk meningkatkan kemampuannya.
•Mikroskop konvensional menggunakan cahaya tampak (400-700 nanometer) untuk
iluminasi dan menghasilkan gambar sampel yang diperbesar.
•Mikroskop fluorescence sebaliknya, menggunakan intensitas cahaya yang lebih tinggi,yang
mengeksitasi bagian berpendar pada sampel.
Mikroskop Fluoresensi, bila zat tertentu disinari cahaya dengan panjang gelombang yang
sesuai, maka zat tersebut dapat memancarkan cahaya dengan panjang gelombang yang
lebih panjang. Fenomena ini disebut fluoresensi. Pada mikroskopi fluoresensi, sediaan
jaringan disinari denagn sinar ultra violet dan emisinya terdapat pada bagian spektrum
cahaya tampak. Zat fluoresen tampak seperti partikel halus yang mengkilap dengan
backround gelap.Dalam hal ini, diperlukan mikroskop dengan sumber cahaya ultra violet
yang kuat dan filter khusus yang menyeleksi cahaya dengan berbagai panjang
gelombang yang dipancarkan oleh zat.

Mikroskop Fluoresensi adalah mikroskop yang digunakan untuk memeriksa spesimen

dengan sifat luminescent, atau spesimen yang telah disiapkan dengan zat yang membuat
sifat luminescent. 

KEGUNAAN
Mikroskop Pender (Fluorescence Microscope) yaitu mikroskop yang digunakan
untuk mengamati dan mendeteksi benda asing atau anti gen seperti bakteri,
rickettsia atau virus.Mikroskop jenis ini banyak digunakan dalam dunia riset
terutama dunia kedokteran dan medis. Mikroskop pender dalam aplikasinya lebih
memanfaatkan fosforesensi, panjang gelombang dan fluoresensi.

PENGGUNAAN MIKROSKOP
Mikroskop Fluoresensi merupakan mikroskop yang digunakan untuk memeriksa
spesimen dengan sifat luminescent, atau spesimen yang telah disiapkan dengan zat yang
membuat sifat luminescent. Dengan mikroskop ini, spesimen itu sendiri yang akan menjadi
sumber cahaya. Banyak informasi dapat dikumpulkan dengan menggunakan mikroskop
fluoresensi ini. Mikroskop flouresensi juga dapat digunakan untuk membuat gambar yang
sangat jelas pada struktur yang sangat detail.
Mikroskop ini memanfaatkan sifat-sifat senyawa kimia tertentu. Ketika mendapatkan
sumber cahaya dengan panjang gelombang yang tepat, maka bahan kimia ini akan menyala
seperti sinar ultraviolet. Jika kilatan cahayanya singkat, maka disebut sebagai fluoresensi,
sedangkan periode cahayanya lebih lama, maka disebut fosforesensi. Antara flouresensi dan
fosforesensi, warna cahaya berbeda, tergantung pada bahan kimia yang digunakan.
Dalam mikroskop fluoresensi, cahaya dengan panjang gelombang tertentu dilewatkan
melalui kondensor mikroskop khusus yang memfokuskan cahaya menjadi sinar yang sangat
kecil. Ketika cahaya mengenai spesimen, senyawa luminescent menjadi berekasi dan mulai
memancarkan cahaya. Cermin dichroic digunakan untuk memfilter cahaya yang digunakan
untuk merangsang spesimen. Sehingga peneliti dapat melihat dengan jelas luminescence
dan membuat catatan tentang sifat-sifatnya, atau mengambil foto dari spesimen di
mikroskop untuk referensi di masa mendatang.

Karena cahaya yang digunakan dalam mikroskop fluoresensi berbahaya untuk mata, maka
penggunaannya harus difilter menggunakan filter polarisasi sehingga cahayanya tidak
merusak mata pengguna. Filter polarisasi juga dapat digunakan untuk meperbaiki warna
atau untuk meningkatkan kontras, sehingga pendaran lebih jelas terlihat. Seperti mikroskop
lainnya, ketajaman gambar dapat disesuaikan dengan memfokuskan komponen mikroskop,
dan tingkat pembesaran juga dapat dinaikkan atau diturunkan sesuai kebutuhan.

Dalam beberapa kasus, spesimen mungkin secara alami bisa bercahaya, seperti dalam
kasus beberapa mineral yang akan berpendar atau mengalami fosforesensi dengan panjang
gelombang cahaya tertentu. Bisa juga ada spesimen yang termasuk ke dalam jenis
bermolekul fluorophores. Molekul-molekul ini dapat membentuk struktur tertentu dalam
spesimen, menciptakan citra neon dengan struktur tertentu ketika spesimen bereaksi karena
cahaya mikroskop.

HOW MIKROSKOP FLUOresen WORK

Mikroskop fluoresensi menggunakan lampu merkuri atau xenon untuk menghasilkan cahaya

ultraviolet. Cahaya masuk ke mikroskop dan mengenai cermin dichroic - cermin yang

memantulkan satu rentang panjang gelombang dan memungkinkan jangkauan lain untuk

melewatinya. Cermin dichroic memantulkan cahaya ultraviolet ke spesimen. Sinar ultraviolet

merangsang fluoresensi di dalam molekul dalam spesimen. Lensa objektif mengumpulkan

cahaya panjang gelombang fluoresen yang dihasilkan. Cahaya fluoresens ini melewati cermin
dichroic dan filter penghalang (yang menghilangkan panjang gelombang selain fluorescent),

membuatnya ke lensa mata untuk membentuk gambar.

Molekul fluoresen dalam spesimen dapat terjadi secara alami atau

dimasukkan. Misalnya, Anda dapat menodai sel dengan pewarna yang disebut calcein / AM.

Dengan sendirinya, pewarna ini tidak berpendar. Bagian AM dari molekul menyembunyikan

sebagian dari molekul calcein yang mengikat kalsium, yang berfluoresensi. Saat Anda

mencampur calcein / AM dengan larutan yang membasahi sel, zat pewarna akan menyilang

ke dalam sel. Sel-sel hidup memiliki enzim yang menghilangkan bagian AM, menjebak

calcein di dalam sel dan memungkinkan calcein untuk mengikat kalsium sehingga bercahaya

hijau di bawah sinar ultraviolet. Sel-sel mati tidak lagi memiliki enzim ini. Karena itu, sel-sel

hidup akan berfluoresensi hijau, dan sel-sel mati tidak akan berfluoresensi. Anda dapat

melihat sel-sel mati dalam spesimen yang sama jika Anda mencampur pewarna lain yang

disebut propidium iodida, yang hanya menembus sel-sel mati. Propidium iodida berikatan

dengan DNA dalam nukleus dan berpendar merah di bawah sinar ultraviolet. Teknik

pewarnaan ganda ini digunakan dalam studi toksikologi untuk menentukan persentase

populasi sel yang terbunuh ketika dirawat dengan beberapa bahan kimia lingkungan, seperti

pestisida.

APLIKASI NYA

 Untuk mengidentifikasi struktur dalam sampel biologis tetap dan hidup.

 Mikroskopi fluoresensi adalah alat umum untuk penelitian sains kehidupan saat ini

karena memungkinkan penggunaan pewarnaan multicolor, pelabelan struktur dalam

sel, dan pengukuran keadaan fisiologis sel.