Aminoglycosides and aminocyclitols

Antibiotik aminoglikosida terdiri dari sekelompok besar senyawa polikationik semi

sintetik yang terjadi secara alami. Anggota kelompok yang penting secara terapi memiliki gula
amino yang secara glikosidik terkait dengan aminocyclitol - alkohol siklik yang juga disubstitusi
dengan fungsi amino.

Streptomycin adalah aminoglikosida pertama, yang diidentifikasi pada tahun 1944 oleh
kelompok Waksman sebagai produk alami dari bakteri tanah, Streptomyces griseus. Ini diikuti
oleh penemuan neomycin oleh kelompok yang sama pada tahun 1949 dan kanamisin oleh
Umezawa dan rekan-rekannya pada tahun 1957. Gentamicin, aminoglikosida yang paling
penting yang digunakan saat ini, pertama kali dilaporkan pada tahun 1963

Klasifikasi

Pada sebagian besar aminoglikosida dalam penggunaan klinis reguler, gugus

aminocyclitol adalah 2-deoxystreptamine; senyawa-senyawa ini dapat dibagi lagi menjadi
kelompok neomisin, di mana terdapat substitusi karbohidrat pada posisi 4 dan 5 dari 2-
deoksistreptamin, dan gugus kanamisin dan gentamisin, di mana aminocyclitol 4,6-disubstitusi.
Dalam streptomisin, cincin aminocyclitol adalah turunan lain dari streptamine, streptidine.
Beberapa senyawa yang kurang penting menunjukkan variasi struktural lain pada tema
aminoglikosida-aminokliklitol.

Nomenklatur struktur aminoglikosida diilustrasikan oleh kanamycin B:

 Atom karbon dalam cincin 2-deoxystreptamine diberi label 1 hingga 6; mereka yang
berada dalam gula amino yang tersubstitusi pada posisi 4 diberi label 1 ′ hingga 6 ′ dan mereka
yang berada dalam gula amino 6-posisi 1 ″ hingga 6 ″. Beberapa aminoglikosida alami terdiri
dari campuran senyawa yang berkaitan erat. Sebagai contoh, ada empat gentamisin utama, tiga
kanamisin dan dua neomisin, sering dengan variabilitas antarbanding dalam rasio ini dalam
sediaan farmasi.

Selain itu, ada hubungan erat antara beberapa senyawa yang dinamai berbeda.

Sebagai contoh, tobramycin adalah 3′-deoxykanamycin B dan substitusi amino untuk gugus
hidroksil di paromomycin I memberikan neomycin B. Perbedaan kimia sangat penting dalam
menentukan sensitivitas senyawa terhadap inaktivasi oleh enzim pengubah bakteri
aminoglikosida.

Aktivitas anti microbial

Aktivitas aminoglikosida yang lebih penting terhadap patogen umum dirangkum dalam Tabel
12.1
 Mereka aktif dengan derajat yang berbeda terhadap Staphylococcus aureus, staphylococci
coagulase-negatif dan Corynebacterium spp., Tetapi aktivitas melawan banyak bakteri Gram-
positif lainnya, termasuk streptokokus, umumnya terbatas. Namun, mereka berinteraksi secara
sinergis dengan antibiotik seperti penisilin terhadap streptokokus, enterokokus, dan beberapa
organisme lain, dan kombinasi ini digunakan sebagai terapi lini pertama pada endokarditis
enterokokus.

Sebagai sebuah kelompok, mereka banyak aktif melawan Enterobacteriaceae dan basil
Gram-negatif aerobik lainnya termasuk, untuk beberapa senyawa, Pseudomonas aeruginosa.
Beberapa, termasuk streptomisin, aktif melawan Mycobacterium tuberculosis dan beberapa
mycobacteria lainnya.

Aminoglikosida membutuhkan ambang potensial membran untuk melintasi membran sel

bakteri dan, karena ini berkurang dalam kondisi anaerob, aminoglikosida tidak aktif terhadap
bakteri anaerob. Mereka umumnya bakterisida dalam konsentrasi dekat dengan konsentrasi
penghambatan minimum (MIC) dan tingkat pembunuhan meningkat secara langsung dengan
konsentrasi, hingga sekitar 10 kali nilai MIC. Aktivitas ditingkatkan dengan konsentrasi Mg2 +
dan Ca2 + yang rendah dan berkurang pada kondisi anaerob atau hiperkapnic

Transport aminoglycoside

Difusi senyawa kationik yang sangat polar seperti itu melintasi membran sel bakteri
sangat terbatas dan akumulasi obat intraselular dibawa melalui transportasi aktif, yang terjadi
dalam tiga fase:
• Pengikatan awal independen energi dari senyawa ke bagian luar sel, yang dihambat oleh ion
Ca2 + dan Mg2 +.

• Bergantung pada energi fase I (disebut demikian karena dihilangkan oleh molekul yang
menghambat metabolisme energi), di mana aminoglikosida didorong melintasi membran
sitoplasma oleh perbedaan potensial listrik negatif melintasi membran.

• Fase II yang lebih cepat dan bergantung pada energi, yang dimulai setelah aminoglikosida
berikatan dengan ribosom dan tampaknya merupakan efek, bukannya sebagai penyebab, aksi
mereka pada sel.

Penyerapan sangat dipengaruhi oleh pH rendah dan mengurangi tekanan oksigen karena
mempengaruhi potensi membran. Akibatnya, aktivitas obat-obatan in vitro berkurang dalam
media asam atau kondisi anaerob dan dengan adanya kation divalen; itu  kerentanan Ps.
aeruginosa sangat sensitif terhadap konsentrasi kation. Karena efek pH pada aktivitas, sulit untuk
memastikan bahwa MIC yang relatif tinggi terlihat untuk organisme yang membutuhkan karbon
dioksida benar-benar mencerminkan tingkat resistensi mereka.

Acquired Resistance

Banyak strain dengan plasmid-encoded diperpanjang spektrum β-laktamase dan resistensi

lainnya juga resisten terhadap aminoglikosida, sehingga berjangkitnya infeksi dengan strain
semacam itu dapat mengakibatkan peningkatan tingkat resistensi aminoglikosida.

Resistensi bakteri terhadap aminoglikosida biasanya dimediasi melalui satu, atau lebih,
dari tiga mekanisme utama:

• Perubahan pada ikatan ribosomal obat

• Pengurangan penyerapan

• Penonaktifan oleh enzim pengubah aminoglikosida spesifik.

Resistensi Ribosom

Strain bakteri dengan ribosom yang memiliki afinitas menurun untuk streptomisin dapat
muncul selama terapi dengan streptomisin dan MIC seringkali lebih dari 1000 mg / L.
Perlawanan seperti itu dihasilkan dari perubahan protein ribosom tunggal atau rRNA, biasanya
pada gen rpsL, dan terjadi pada tingkat mutasi alami 10-5 per generasi di Escherichia coli.
Sebaliknya, resistensi ribosom terhadap amino-glikosida lain yang bermanfaat secara klinis tidak
ditemukan selama terapi, karena resistensi biasanya membutuhkan mutasi pada dua atau tiga
situs pengikatan ribosom. Perubahan ribosom memberikan resistensi tingkat tinggi terhadap
aminoglikosida yang dengannya mereka dipilih (dan yang terkait erat), tetapi tidak
aminoglikosida lainnya. Resistensi semacam itu tidak dapat ditransfer ke bakteri lain.
 REDUCED UPTAKE

Resistansi yang dihasilkan dari berkurangnya kemampuan untuk mengakumulasi

aminoglikosida terjadi sebagai akibat dari perubahan metabolisme energi atau struktur membran
luar, dan mungkin signifikan secara klinis.

Resistansi tersebut disebabkan oleh pemilihan mutasi kromosomal di beberapa lokus

selama paparan obat dan dapat menyebabkan resistansi silang terhadap aminoglikosida lain,
termasuk yang resisten terhadap enzim pengubah aminoglikosida.

Isolat sering menunjukkan kemampuan yang berubah untuk menggabungkan fosforilasi

oksidatif ke transpor elektron dan tingkat resistensi yang diberikan umumnya sederhana; mereka
sering tumbuh lambat dan mengurangi patogenisitas. Namun, pada isolat Pseudomonas
perubahannya relatif stabil dan umumnya disebabkan oleh perubahan pada sistem eflux
multidrug MexXY. Isolat semacam itu relatif umum dan sering ditemukan pada isolat dari pasien
fibrosis kistik

Aminoglycoside-Modifying Enzymes

Produksi enzim pengubah biasanya memberikan tingkat resistensi yang tinggi dan
merupakan mekanisme resistensi yang paling umum. Enzim biasanya dikodekan plasmid dan
resistensi yang diberikan sering ditransfer. Seperti halnya produksi β-laktamase, organisme
berutang kelangsungan hidup mereka karena inaktivasi agen yang tetap rentan secara intrinsik
dan sejumlah besar enzim telah diidentifikasi dari spesies bakteri yang berbeda.

Ada tiga kelas enzim pemodifikasi aminoglikosida, yang berbeda dalam sifat situs yang
dimodifikasi:

• N-acetyltransferases (AAC) memodifikasi gugus amino

• O-phosphotransferases (APH) memodifikasi gugus hidroksil

• O-nucleotidyltransferases (ANT) memodifikasi gugus hidroksil .

Situs serangan enzim ini pada gentamisin ditunjukkan di bawah ini:

 Posisi gugus yang diserang dan cincin yang membawanya ditunjukkan oleh jumlah
enzim: dengan demikian AAC (3) adalah asetiltransferase yang memodifikasi gugus amino
dalam posisi 3 pada cincin aminocyclitol sementara ANT (2 ′ ′) memodifikasi gugus hidroksil
pada posisi 2 ′ ′ - pada aminosugar.

Jika dua enzim bekerja pada posisi yang sama pada molekul, tetapi berbeda dalam
aminoglikosida yang dimodifikasi, mereka dibedakan oleh angka romawi. Sebagai contoh, AAC
(3) -I menganugerahkan resistensi terhadap gentamisin saja, sedangkan AAC (3) -II
menganugerahkan ketahanan terhadap tobramycin dan netilmicin serta terhadap gentamicin dan
sebagainya (Tabel 12.2).

Banyak enzim pengubah aminoglikosida yang tampaknya identik dalam hal profil
resistensi memiliki urutan asam amino yang berbeda. Huruf kecil setelah angka romawi
digunakan untuk menunjuk subkelompok yang berbeda: dengan demikian, AAC (6 ′) - Ia dan
AAC (6 ′) - Ib adalah dua protein unik yang memberikan profil resistensi yang identik. Akhirnya,
huruf miring huruf kecil digunakan untuk menunjukkan gen yang bertanggung jawab, sehingga
kode gen untuk AAC (6 ′) - Enzim Ia adalah aac (6 ′) Ia.
 Resistensi terhadap aminoglikosida dihasilkan dari interaksi antara tingkat inaktivasi obat
oleh enzim pemodifikasi dan laju transportasi obat. Jadi, fenotip resistansi dari isolat tertentu
tergantung pada kinetika enzim, paling baik ditentukan oleh rasio Vmax ke Km untuk substrat
yang diberikan, dan tingkat penyerapan obat. Konsekuensinya, enzim yang secara tidak aktif
menonaktifkan beberapa aminoglikosida, dan gagal memberikan resistansi terhadapnya, dapat
memberikan resistensi yang relevan secara klinis ketika dikaitkan dengan perubahan
permeabilitas sel.

Distribution Of Modifying Enzymes

Sebagian besar enzim pemodifikasi aminoglikosida dikodekan oleh unsur transposable

pada bakteri resisten; Namun, beberapa ditentukan secara kromosom dengan kehadiran gen, jika
tidak ekspresinya dalam hal profil resistensi, karakteristik spesies.

Contoh yang paling menonjol adalah:

• aac (2 ′) - Ia; karakteristik Providencia stuartii

• aac (6 ′) - Ic; karakteristik Serratia marcescens

• aac (6 ′) - Ii; hadir di semua strain Enterococcus faecium.

Ekspresi gen-gen ini tampaknya diatur dengan ketat. Jadi, meskipun gen kromosom aac
(6 ′) - Ic ditemukan di semua Ser. strain marcescens, kebanyakan aminoglikosida rentan dengan
sedikit atau tanpa aac (6 ′) - Ic mRNA terdeteksi.. Prevalensi masing-masing enzim dalam area
geografis individu biasanya mencerminkan tekanan selektif yang diberikan oleh penggunaan
aminoglikosida di sana.

Dalam banyak kasus ada hubungan dengan penentu resistensi lainnya; misalnya, sebagian
besar resistensi gentamisin terlihat pada Staph. aureus berhubungan dengan Staph yang resisten
methicillin. aureus (MRSA) dan merupakan cerminan dari transmisi dari strain ini daripada
penggunaan gentamicin.
 Karena prevalensi enzim berbeda secara luas dengan wilayah geografis dan dalam
periode waktu yang relatif singkat, yang mencerminkan kebiasaan pemberian antibiotik dan
peluang bagi organisme resisten untuk menyebar, sangat penting bahwa prevalensi resistensi
lokal terhadap agen individual ditetapkan ketika memilih antara aminoglikosida. Ini sangat
penting untuk pengobatan sepsis berat dengan asal yang tidak ditentukan. Identifikasi enzim
pengubah aminoglikosida sering dapat dideduksi dengan tingkat kepercayaan yang bervariasi
dari pola resistensi organisme. Namun, produk diagnostik molekuler yang dapat digunakan untuk
mengidentifikasi enzim yang paling umum tersedia dan kemungkinan bahwa identifikasi yang
lebih akurat akan segera berada dalam kapasitas banyak laboratorium. Selain itu, sebagian besar
sekuens gen telah diterbitkan, dan departemen dengan keahlian yang tepat dapat
mengembangkan tes diagnostik berbasis rantai polimerase (PCR) untuk enzim yang bermasalah
secara lokal. Sekuens genom telah mengidentifikasi beberapa gen resistensi putin
aminoglikosida, bahkan pada organisme yang dikenal peka terhadap obat-obatan ini,
menunjukkan sejarah evolusi yang kompleks untuk enzim-enzim ini. Sebagian besar gen yang
telah dikarakterisasi in vitro tidak mengkode enzim yang resistan terhadap bonafid, tetapi suatu
reservoir substansial dari gen resistansi aminoglikosida potensial mungkin ada dalam genom
bakteri.