FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MEGAREZKY MAKASSAR 2021 1. Jelaskan metode penanaman mikroba secara aerob dan anaerob? Jawab A. Aerob a) Metode Goresan • Membagi cawan petri menjadi 3-4 bagian. Ose steril dilekatkan pada sumber isolat, kemudian menggoreskan ose tersebut pada cawan berisi media steril. • Penggoresan yang sempurna akan menghasilkan koloni yang terpisah. b) Metode Tabur • Teknik ini memerlukan agar yang belum padat (>45ºC) untuk dituang bersama suspense bakteri kedalam cawan petri kemudian dihomogenkan dan dibiarkan memadat. c) Metode Tuang • Isolasi menggunakan media cair dengan cara pengenceran. Dasar melakukan pengenceran adalah penurunan jumlah mikroorganisme sehingga hanya ditemukan satu sel didalam tabung. d) Metode Tusuk • Meneteskan atau menusukkan ujung jarum ose yang didalamnya terdapat inokolum kedalam media. B. Anaerob a) Menggunakan Medium yang Diperkaya Medium diperkaya yang digunakan adalah thioglycolate-cair, thioglycolate-agar, dll. Medium tersebut mengandung bahan yang dapat menyerap oksigen. b) Menghilangkan Oksigen Bebas dengan Pembakaran Diperlukan penyungkup yang dapat ditutup rapat, misalnya eksikator. Dalam penyungkup ditambahkan phosphor murni (P₄), pada dasar penyungkup ditambahkan air. c) Absorpsi Oksigen secara Kimia Yang diperlukan adalah eksikator, asam pirogalol, dan alkali (KOH). Untuk setiap liter eksikator diberi 12,5 cc larutan KOH 20% dan 10 cc larutan asam pirogalol 40%. d) Mendesak Oksigen dengan Gas Inert Menggunakan alat Novy untuk mendesak oksigen secara mekanik dengan gas hydrogen atau gas nitrogen. Indicator adanya oksigen menggunakan campuran larutan NaOH 1/160 N, larutan Methylene blue 0,015% dan larutan Glukosa 6% pada perbandingan volume yang sama. Campuran direbus sebelum digunakan, apabila terdapat oksigen maka methylene blue berwarna biru apabila tidak maka tidak berwarna.
2. Sebutkan hal-hal yang peru diperhatikan dalam proses mengisolasi
mikroba (2 literatur) Jawab Hal-hal yang perlu diperhatikan dalam isolasi mikroorganisme tersebut misalnya prosedur teknik aseptik, jenis medium yang digunakan, teknik isolasi, teknik pemilihan sumber biakan (koloni), dan penyimpanan pasca isolasi mikroorganisme (Harley & Prescott, 2002). Pada penanaman mikroba perlu diperhatikan kebutuhan nutrisi untuk mikroba tersebut sehingga dapat tumbuh dengan baik (Yusmaniar, 2017). Pustaka Harley & Prescott. 2002. Laboratory exercises in microbiology, 5th ed.
Yusmaniar. Dkk. 2017. “Bahan Ajar Farmasi, Mikrobiologi dan Parasitologi”.
Jakarta : Kemenkes RI. Hal :31
3. Apa yang dimaksud dengan teknik isolasi ? (3 literatur)
Jawab Isolasi bakteri adalah memisahkan bakteri dari alam dan menanamnya dalam media baru sebagai biakan murni (Yusmaniar, 2017). Teknik isolasi mikroorganisme adalah suatu usaha untuk menumbuhkan mikroba diluar dari lingkungan alamiahnya (Meganada,dkk. 2017). Pengertian isolasi bakteri yaitu suatu proses mengambil bakteri dari medium atau dari lingkungan asalnya lalu menumbuhkannya di medium buatan sehingga diperoleh biakan yang murni (Gabriella,dkk.2017). Pustaka Yusmaniar. Dkk. 2017. “Bahan Ajar Farmasi, Mikrobiologi dan Parasitologi”. Jakarta : Kemenkes RI. Hal : 31
Sabbathini,Gabriella Christy.dkk. 2017. “ ISOLASI DAN IDENTIFIKASI
BAKTERI GENUS Sphingomonas DARI DAUN PADI (Oryza sativa) DI AREA PERSAWAHAN CIBINONG”. Departemen Biologi, Universitas Diponegoro.
4. Jelaskan perbedaan metode tabur dan metode tuang! (2 literatur)
Jawab A. Metode tabur (Yusmaniar,dkk. 2017) Teknik ini dilakukan dengan menginokulasi medium agar yang sedang mencair pada temperature 45-50ºC dengan suspensi bahan yang mengandung mikroba, dan menuangkannya kedalam cawan petri steril. B. Metode tuang (Meganada,dkk. 2017) Untuk metode tuang dilakukan dengan cara mengencerkan specimen dalam medium agar yang telah dicairkan dan didinginkan (±500C) yang kemudian dicawankan. Pustaka Yusmaniar. Dkk. 2017. “Bahan Ajar Farmasi, Mikrobiologi dan Parasitologi”. Jakarta : Kemenkes RI. Hal : 32
Mikrobiologi”. Jakarta : Kemenkes RI. Hal : 273 5. Jelaskan prinsip kerja dari penanaman dan isolasi mikroorganisme! Jawab Prinsip dari isolasi mikroba adalah memisahkan satu jenis mikroba dengan mikroba lainnya yang berasal dari campuran bermacam-macam mikroba. Hal ini dapat dilakukan dengan menumbuhkannya dalam media padat, sel-sel mikroba akan membentuk koloni sel yang tetap pada tempatnya (Meganada,dkk.2017). Prinsip kerja dari Inokulasi atau penanaman bakteri adalah memindahkan bakteri dari medium lama ke medium baru hal ini dilakukan dalam kondisi aseptic, yakni kondisi dimana semua alat yang ada dalam hubungannya dengan medium dan pengerjaan, dijaga agar tetap steril hal ini untuk menghindari terjadinya kontaminasi (Meganada,dkk.2017). Pustaka Putri, Meganada Hiaranya.dkk. 2017. “Bahan Ajar Keperawatan Gigi, Mikrobiologi”. Jakarta : Kemenkes RI. Hal : 267 & 283