Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

Kimia Organik dan Obat

Jurnal Internasional
ISSN 2474-7610

Pendapat Kimia Organik & Obat IJ

Volume 7 Edisi 2 - Juni 2018 DOI:
Hak Cipta © Semua hak dilindungi oleh Anupam Maurya
10.19080/OMCIJ.2018.07.555710

Kromatografi Cair Vakum: Sederhana,

Teknik Pemisahan yang Efisien dan
Serbaguna untuk Produk Alami

Anupam Maurya1*, Komal Kalani2, Subash Chandra Verma1, Ravinder Singh1 dan Anupam Srivastava3
1 Komisi Farmakope untuk Pengobatan dan Homoeopati India, Kementerian AYUSH, Ghaziabad, India

2 Departemen Farmakologi dan Toksikologi, Pusat Biosains Higuchi, Universitas Kansas, AS

3Kementerian AYUSH, Pemerintah. dari India, India

Penyerahan: 11 Juni 2018; Diterbitkan: 15 Juni 2018

*
Penulis yang sesuai: Anupam Maurya, Komisi Farmakope untuk Pengobatan dan Homoeopati India, Kementerian AYUSH, Pemerintah.
India, Ghaziabad, India 201002, Telp: ; Surel:

Pendapat

Hampir 50% obat secara langsung atau tidak langsung berasal dari produk Alami, yang digunakan untuk kesejahteraan manusia. Produk alami
Kromatografi Cair Vakum (VLC)
(fitomolekul) ada dalam matriks tanaman sebagai campuran yang sangat kompleks, dari mana produk yang diinginkan diisolasi dan dimurnikan. Untuk
VLC pertama kali digunakan untuk pemisahan diterpen di
isolasi produk alami dari sumber tanaman, pemilihan teknik dan pendekatan yang tepat sangat penting. Pentingnya teknik isolasi dan pemurnian yang
Australia. Pada tahun 1997 deskripsi singkat tentang metode
tepat telah diketahui dengan baik untuk tanaman obat dan aromatik. Di antara berbagai teknik pemisahan produk alam, teknik kromatografi yang
isolasi diterpene dari karang lunak Australia diterbitkan, tetapi
cepat, cepat dan banyak digunakan dalam pemisahan. Untuk alasan ini dan juga dengan tujuan menemukan solusi sederhana untuk masalah
tidak ada peralatan dan detail metode yang dilaporkan. Nama
pemisahan yang kompleks, sejumlah metode kromatografi baru, baik analitis maupun preparatif telah dikembangkan. Sebagian besar pemisahan
Kromatografi Cair Vakum (VLC) pertama kali diciptakan oleh
dilakukan dalam dua langkah. Pada langkah pertama pemisahan minyak mentah dicapai dengan beban tinggi pada fase diam yang murah. Secara
Targett et al. [2]. VLC dianggap sebagai kromatografi lapis tipis
tradisional untuk tujuan ini ekstraksi cair-cair dan fraksinasi dilakukan terlebih dahulu, yang kemudian diikuti dengan pemisahan kromatografi cair-
preparatif (PTLC) karena pemisahan dilakukan pada silika gel kelas
padat (kromatografi planar & kolom) di atas silika gel atau alumina dll. Di antara semua teknik kromatografi, kromatografi Cair Vakum (VLC). ) paling
TLC atau aluminium oksida dan kolom dikeringkan setelah setiap
efisien baik dalam pemisahan kasar maupun halus dari campuran produk sintetis dan alami yang kompleks. Dalam dekade terakhir VLC telah semakin
fraksi seperti pada pelat PTLC dikeringkan dan dijalankan kembali
diterapkan di bidang produk alami maupun kimia sintetik karena kesederhanaan operasinya [1]. Pada langkah pertama pemisahan minyak mentah
untuk meningkatkan pemisahan. Kolom VLC yang dikemas dapat
dicapai dengan beban tinggi pada fase diam yang murah. Secara tradisional untuk tujuan ini ekstraksi cair-cair dan fraksinasi dilakukan terlebih dahulu,
digunakan kembali untuk pemisahan yang sama atau serupa
yang kemudian diikuti dengan pemisahan kromatografi cair-padat (kromatografi planar & kolom) di atas silika gel atau alumina dll. Di antara semua
secara menyeluruh mencuci kolom dengan metanol dan
teknik kromatografi, kromatografi Cair Vakum (VLC). ) paling efisien baik dalam pemisahan kasar maupun halus dari campuran produk sintetis dan
membuang bahan atau pita polar yang terdekomposisi dari
alami yang kompleks. Dalam dekade terakhir VLC telah semakin diterapkan di bidang produk alami maupun kimia sintetik karena kesederhanaan
bagian atas kolom adsorben. Elusi gradien sangat efektif dan
operasinya [1]. Pada langkah pertama pemisahan minyak mentah dicapai dengan beban tinggi pada fase diam yang murah. Secara tradisional untuk
dapat digunakan untuk pemisahan campuran dalam jumlah kecil
tujuan ini ekstraksi cair-cair dan fraksinasi dilakukan terlebih dahulu, yang kemudian diikuti dengan pemisahan kromatografi cair-padat (kromatografi
maupun besar. Berbagai aplikasi tersedia untuk pemisahan dan
planar & kolom) di atas silika gel atau alumina dll. Di antara semua teknik kromatografi, kromatografi Cair Vakum (VLC). ) paling efisien baik dalam
isolasi diterpen, isobenzofuranon, triterpen glikosida, limonoid,
pemisahan kasar maupun halus dari campuran produk sintetis dan alami yang kompleks. Dalam dekade terakhir VLC telah semakin diterapkan di
xanthanoes, iridoid, glikosida flavonoid dan alkaloid [3].
bidang produk alami maupun kimia sintetik karena kesederhanaan operasinya [1]. yang kemudian diikuti dengan pemisahan kromatografi cair-padat

(kromatografi planar & kolom) di atas silika gel atau alumina dll. Di antara semua teknik kromatografi, Kromatografi Cair Vakum (VLC) paling efisien baik Aparat
dalam pemisahan kasar maupun halus dari kompleks sintetis. dan campuran produk alami. Dalam dekade terakhir VLC telah semakin diterapkan di
Tidak ada persyaratan khusus untuk peralatan VLC (Gbr.1). Ini dapat dengan
bidang produk alami maupun kimia sintetik karena kesederhanaan operasinya [1]. yang kemudian diikuti dengan pemisahan kromatografi cair-padat
mudah dibuat dengan peralatan gelas yang tersedia di laboratorium. Ini
(kromatografi planar & kolom) di atas silika gel atau alumina dll. Di antara semua teknik kromatografi, Kromatografi Cair Vakum (VLC) paling efisien baik
membutuhkan corong kaca sinter dengan kelas fritted disk G3 (15-40μ) atau G2
dalam pemisahan kasar maupun halus dari kompleks sintetis. dan campuran produk alami. Dalam dekade terakhir VLC telah semakin diterapkan di
(40-90), G1 (90-150). Sebuah pompa air laboratorium atau aspirator air untuk
bidang produk alami maupun kimia sintetik karena kesederhanaan operasinya [1].
menyediakan vakum 20-70 mmHg diperlukan untuk penyedotan. Perangkat
dipasang seperti yang ditunjukkan pada Gambar 1.

Kimia Organik & Obat IJ 7 (2): OMCIJ.MS.ID.555710 (2018) 001

 Jurnal Internasional Kimia Organik dan Obat
Gambar 1: Kromatografi Cair Vakum (VLC).
Sampel dan Ukuran Kolom
Untuk berbagai pemisahan skala, jumlah sampel dan ukuran kolom
diberikan di bawah ini:
ukuran kolom (Internal
jumlah sampel
diameter x panjang)
<100mg 0,5-1,0 x 4cm
0,5- 1,0g 2,5x4cm
1- 10g 5x5cm
Pemisahan skala besar lebih lanjut dapat dilakukan pada
250, 500 dan 1000 ml corong sinter. Untuk aplikasi yang lebih nyaman,
tinggi kolom juga dapat ditingkatkan sesuai kebutuhan pengguna
dengan menggabungkan tabung kaca berdiameter serupa
[4].
Adsorben dan operasi
Dalam VLC, umumnya digunakan silika gel bebas pengikat grade
TLC (silica gel H) atau aluminium oksida, tetapi adsorben lain juga
dapat dicoba berdasarkan profil KLT mereka. Pengepakan VLC, kolom
mudah dan sederhana. Adsorben kering dimuat ke dalam corong
sinter dan pertama-tama dibiarkan mengendap di bawah gravitasi
dengan mengetuk kolom dengan lembut dengan tabung karet seperti
dalam kasus Kromatografi Kolom (CC). Lapisan dapat ditekan terlebih
dahulu dengan sumbat kaca atau karet. Setelah adsorben
mengendap, vakum harus diterapkan dan lapisan adsorben harus
ditekan lebih lanjut dengan stopper untuk akhirnya mengemas kolom
yang seragam dan rapat. Untuk memeriksa keseragaman kolom,
vakum harus dilepaskan dan dengan cepat pelarut non-polar (seperti
heksana) harus dituangkan di atas adsorben dan vakum diterapkan.
Pelarut harus melewati secara seragam melalui kolom jika tidak maka
harus dikemas ulang. Sebelum pemuatan sampel, kolom harus
dikeringkan di bawah vakum [4].
Cara mengutip artikel ini: Anupam M, Komal K, Subash CV, Ravinder S, Anupam S K. Kromatografi Cair Vakum: Teknik Pemisahan Sederhana, Efisien dan
002
Serbaguna untuk Produk Alami. Kimia Organik & Obat IJ. 2018; 7(2): 555710. DOI:10.19080/OMCIJ.2018.07.555710.
Memuat Sampel
Di VLC, pemuatan sampel cair lebih disukai karena mudah dan cepat.
Namun pembebanan padat dalam bentuk slurry juga dapat dilakukan. Jika
sampel yang dimuat adalah cair, dapat dimuat seperti itu jika tidak dalam
kasus padatan, sampel harus dilarutkan dalam pelarut yang paling tidak
polar. Sampel yang terlarut dengan baik harus dimasukkan ke permukaan
adsorben dengan bantuan pipet. Harus dicatat bahwa selama pemuatan
sampel kolom harus tanpa vakum. Setelah sampel total telah dimasukkan,
maka vakum harus diterapkan. Dengan cara ini sampel dimuat sebagai pita
bagus yang seragam pada adsorben. Semakin kecil pitanya, semakin baik
pemisahannya. Kolom dibiarkan vakum selama 5-10 menit untuk
mengeluarkan pelarut polar yang digunakan untuk melarutkan sampel.
Kolom kemudian dijalankan dengan campuran pelarut yang sesuai di
bawah vakum. Vakum moderat dari 20-70mmHg harus digunakan untuk
mencegah hilangnya pelarut karena penguapan. Fraksi dapat dikumpulkan
dalam labu alas bulat sambungan standar. Setelah masing-masing fraksi
pelarut ditambahkan ke bagian atas kolom dan kemudian diterapkan
vakum. Untuk menghentikan penyaluran, disarankan untuk menyedot
kolom kering setelah setiap fraksi [2,4,5].
Elusi Kolom
Meskipun elusi gradien kolom lebih disukai tetapi elusi isokratik juga
dapat dilakukan. Kehilangan pelarut yang mudah menguap dapat
diminimalkan dengan menggunakan corong kaca sinter ukuran pori besar
atau dengan meningkatkan laju aliran.
Aplikasi
Produk Alami yang Dimurnikan diperlukan untuk
pengembangan obat dan penyediaan standar farmasi otentik
untuk pekerjaan sintetik dan analitis. VLC berhasil diterapkan
untuk isolasi dan pemurnian produk alami seperti
hopeaphenol (1) dan -viniferin (2) daripantai ovalis,
Beta-sitosterol (3) dari Kulit Sarcocephalus latifolius
dan rotenon (4) dari Derris elliptika. VLC juga digunakan dalam
konsentrasi karoten sawit dari minyak sawit mentah [1,6,7]
(Gambar 2).
Gambar 2.
Epilog
Karena senyawa alami ada sebagai campuran yang sangat
kompleks dalam matriks, ada kebutuhan konstan dalam kimia organik
untuk memisahkan campuran dalam jumlah besar dan kecil secara
efisien dengan cepat dan murah. Kami telah berhasil menerapkan VLC
untuk fraksinasi dan isolasi tanaman serta molekul sintetis
 Jurnal Internasional Kimia Organik dan Obat
Sampel tipikal dan rasio dukungan padat yang digunakan dalam VLC adalah dari
30:1 hingga 300:1, sesuai dengan jumlah konstituen dan kompleksitasnya pada
profil TLC, pengguna dapat memilih rasio yang sesuai karena resolusi dapat
ditingkatkan dengan meningkatkan sampel untuk mendukung perbandingan.
Sesuai pengamatan, VLC lebih unggul dari PTLC dan Kromatografi Kolom (CC),
terutama dalam aktivitas bioaktivitas ekstraksi terpandu, fraksinasi dan isolasi
produk alami. Tidak seperti
CC, fase diam dalam VLC dapat mengering dan sampel dapat dimuat
langsung tanpa membuat bubur, setelah mencuci kolom VLC dengan
metanol (10%), dapat digunakan kembali. Pemisahan yang sangat baik
pada VLC adalah karena ukuran partikel halus (rata-rata 10 mikro
meter) yang menyediakan sejumlah besar pelat teoritis. Pemisahan
ekonomis dalam hal dukungan, pelarut, dan waktu membawa
percobaan. Hal ini sangat berguna dalam jumlah besar dan kecil
campuran serta pemisahan kasar dan halus. Ada berbagai jenis
peralatan VLC sesuai dengan aplikasi yang mudah tersedia di setiap
laboratorium dan pasar yang baik, yaitu corong Büchner kaca
sederhana (kolom VLC) dengan frit filter yang berbeda (G1, G2, & G3).
Orang-orang menggunakan berbagai jenis kolom untuk fraksinasi dan
isolasi produk alami, tetapi G1 lebih baik karena dapat bekerja pada
tekanan vakum rendah sementara dalam kasus G2 & G3 (ukuran pori
halus) lebih banyak tekanan hisap perlu diterapkan yang
mengakibatkan beberapa kehilangan pelarut. Berbeda dengan teknik
kromatografi kolom aliran paksa lainnya, bukan tekanan tetapi vakum
diterapkan dalam VLC untuk meningkatkan laju aliran dan karenanya
mempercepat fraksinasi.
Karya ini dilisensikan di bawah Creative
Commons Attribution 4.0 License DOI:
10.19080/OMCIJ.2018.07.555710
Cara mengutip artikel ini: Anupam M, Komal K, Subash CV, Ravinder S, Anupam S K. Kromatografi Cair Vakum: Teknik Pemisahan Sederhana, Efisien dan
003 Serbaguna untuk Produk Alami. Kimia Organik & Obat IJ. 2018; 7(2): 555710. DOI:10.19080/OMCIJ.2018.07.555710.
Pengakuan
Penulis berterima kasih kepada Pharmacopoeia Commission for
Indian Medicine and Homeopathy (PCIM&H), Ghaziabad dan Ministry
of AYUSH, Govt. India untuk menyediakan fasilitas yang diperlukan
untuk menulis artikel ini.
Referensi
1. Bucar F, Wube A, Schmid M (2013) Isolasi produk alami-cara mendapatkan dari
bahan biologis ke senyawa murni. Perwakilan Nat Prod30(4): 525-545.
2. Targett NM, Kilcoyne JP, Green B (1979) Kromatografi cair vakum:
alternatif metode kromatografi umum. J Org Chem 44(26):
4962-4964.
3. Hostettmann K, Mardton A, Hostettmann M (1998) Teknik
Kromatografi Preparatif. springer-verlag berlin heidelberg.
4. Coll JC, Bowden BF (1986) Penerapan Kromatografi Cair Vakum pada
Pemisahan Campuran Terpene. J Nat Prod 49(5): 934-936.
5. Maurya A (2014) Penyelidikan kimia dan pengembangan metode analisis
tervalidasi untuk beberapa tanaman obat terpilih. RML Avadh
University, PhD Tesis, Faizabad, India.
6. Zubairi SI, Sarmidi MR (2004) Pemurnian dan identifikasi rotenon
dari Derris elliptica dengan menggunakan metode kromatografi
cair-cair kromatografi lapis tipis (VLC-TLC). Prosiding 'Simposium
Kimia Analisis Kebangsaan', Swiss Garden Resort, Pahang.
7. 7.Yinusa I, Ilogbulem N, Ayo RG, Yakubu R (2015) Isolasi
Kromatografi Cair Vakum dan Karakterisasi Beta-Sitosterol dari
Kulit Kayu Sarcocephalus Latifolius (Smith Bruce). Jurnal Kimia dan
Ilmu Kimia 5(9): 480-488.
Kiriman Anda berikutnya dengan Juniper Publishers
akan mencapai Anda aset di bawah ini
• Layanan Editorial Berkualitas
• Tinjauan Sejawat Cepat
• Ketersediaan cetak ulang
• Layanan Cetak Elektronik
• Podcast Naskah untuk pemahaman yang nyaman
• Pencapaian global untuk penelitian Anda
• Aksesibilitas naskah dalam berbagai format
( Pdf, E-pub, Teks Lengkap, Audio)
• Layanan pelanggan yang tiada henti
Lacak URL di bawah ini untuk pengiriman satu langkah
https://juniperpublishers.com/online-submission.php