LAPORAN PRAKTIKUM

MIKROBIOLOGI

Disusun oleh :

Fahrul Hadi (AKF20100)

AKFAR 4D

AKADEMI FARMASI PUTRA

INDONESIA MALANG
 2022

BAB I

PENDAHULUAN

1.1. Tujuan

MEDIA PERTUMBUHAN MIKROBA, TEKNIK

ASEPTIS DAN STERILISASI

 TUJUAN PRAKTIKUM

1.  1. Mampu melakukan cara sterilisasi alat dan

media.
2. Mampu menggunakan autoklaf dalam
mensterilisasi alat dan media.
3. Mampu mempelajari macam-macam
teknik sterilisasi
4. Mampu mempelajari cara pembuatan
media mikroba
Dasar teori
Media untuk pertumbuhan mikroba

Media adalah campuran nutrien atau zat

makanan yang dibutuhkan
oleh mikroorganisme untuk pertumbuhan. Me
 dia selain untuk menumbuhkan mikroba juga
dibutuhkan untuk isolasi & inokulasi mikroba
serta untuk uji fisiologi dan biokimia mikroba.
Jenis-jenis media pembiakan bakteri yaitu
Nutrient Agar (NA), Nutrient Broth, Tryptic
Soya Broth (TSB), Tryptic Soya Agar (TSA),
MacConkey Agar, media agar darah (Pratiwi,
2011). Media Nutrient Agar (NA) sering
digunakan untuk media biakan bakteri di
laboratorium.
Media semi sintetis
Komposisinya sebagian diketahui secara pasti,
sebagian lagi tidak disebut juga media setengah
buatan misalnya potato dextrose agar, nutrient agar
dan lain-lain.
Berdasarkan Bentuknya

a. Media cair
media yang mengandung
larutan cair dari satu atau lebih
konstituen. Terkadang partikel padat
dapat ditambahkan pada medium
cair tersebut.
b. Media padat

 Media yang digunakan untuk

kultur/pertumbuhan bakteri atau mempelajari
koloni bakteri dalam bentuk padat, dapat
diletakan di petri disk ataupun tabung. Media
dapat berbentuk padat datar, padat tegak
maupun padat miring.
c. Media semi padat
Untuk mengetahui pertumbuhan mikroba atau mengetahui
motilitas bakteri.

 Macam-macam Media berdasar Kegunaannya

Ada banyak macam. Macam-macam media berdasarkan
kegunaan atau tujuannya. yaitu media untuk pembiakan
secara umum, media yang diperkaya, media pembiakan
selektif, media pembiakan diferensiasi, serta media kombinasi
selektif dan diferensiasi. Penjabaran media tersebut sebagai
berikut:

 a. Media Umum
 Media umum merupakan media padat yang
mengandung bahan-bahan semi alamiah,
digunakan untuk pembiakan secara umum
mengandung unsur-unsur untuk pertumbuhan
mikroorganisme secara umum tanpa
mengandung unsur penghambat tertentu. Dapat
digunakan untuk menumbuhkan bakteri dan
jamur.

b. Media Transport
Media transport adalah media yang digunakan untuk
membawa spesimen dari suatu tempat ke tempat lain, agar
mikroba yang ada di dalamnya (akan diperiksa), tetap terjaga
kehidupannya sehingga memudahkan untuk mendiagnosis
atau untuk keperluan lain. 

c. Media Diperkaya
Media diperkaya/media kaya adalah media yang ditambahkan
zat-zat organik yang diperoleh dari makhluk hidup misal
darah, telur dan lain-lain. Media ini dipergunakan untuk
pertumbuhan bakteri yang tidak dapat tumbuh pada media
sederhana misal Gonococcus, Streptococcus dan
Pneumococcus.

d. Media Selektif
Media pembiakan selektif mendukung pertumbuhan
mikroorganisme jenis tertentu dan menghambat pertumbuhan
flora campuran lain. Selektifitas ini diperoleh dengan
 menambahkan bahan kimia, pewarna, atau antibiotik pada
media. 

e. Media Diferensial
Sedangkan media diferensial adalah media
yang mengandung unsur yang memungkinkan
untuk mengidentifikasi mikroorganisme jenis
tertentu dari kultur murni atau campuran.
Identifikasi ini biasanya berdasarkan
penampakan dari mikroorganisme, seperti
warna koloni atau adanya presipitat.
f. Media Kombinasi
Media jenis ini dapat berupa media yang tidak
diperkaya, seperti Trypticase Soy Agar,
maupun media yang diperkaya, misalnya
Trypticase Soy Agar dengan 5% darah domba.

Sterilisasi

Sterilisasi didefinisikan sebagai upaya untuk

membunuh mikroorganisme termasuk dalam
bentuk spora.

 JENIS STERILISASI DAN FUNGSINYA

Sterilisasi dapat dilakukan baik dengan metode fisika maupun
kimia (Tille, 2017).
a. Sterilisasi dengan metode fisika dapat dilakukan dengan
cara:

1). Pemanasan

A. Pemanasan kering
i. Pemijaran
Metode ini dengan memanaskan alat biasanya
berupa ose di atas api bunsen sampai ujung ose
memijar.
 ii. Pembakaran
Pembakaran dilakukan untuk alat-alat dari
bahan logam atau kaca dengan cara
dilewatkan di atas api bunsen namun tidak
sampai memijar. Misalkan: a) melewatkan
mulut tabung yang berisi kultur bakteri di atas
api Bunsen; b) memanaskan kaca objek di
atas api busnen sebelum digunakan; c)
memanaskan pinset sebelum digunakan untuk
meletakkan disk antibiotic pada cawan petri
yang telah ditanam bakteri untuk pemeriksaan
uji kepekaan antibiotik.
iii. Hot air oven
Sterilisasi dengan metode ini digunakan untuk
benda-benda dari kaca/gelas, petri, tabung
Erlenmeyer, tidak boleh bahan yang terbuat
dari karet atau plastic. Oven Suhu 160-1800C
selama 1.5-3 jam. Alat-alat tersebut terlebih
dahulu dibungkus menggunakan kertas
sebelum dilakukan sterilisasi.
B. Pemanasan basah
Merupakan pemanasan dengan tekanan tinggi,
contohnya adalah dengan menggunakan
autoklav. Sterilisasi dengan metode ini dapat
digunakan untuk sterilisasi biohazard (bakteri
limbah hasil praktikum) dan alat-alat yang
tahan terhadap panas (bluetip, mikropipet),
pembuatan media, dan sterilisasi cairan.
Pemanasan yang digunakan pada suhu 1210C
selama 15 menit 
i. Autoklaf manual
Metode ini menggunakan ketinggiian air harus tetap
tersedia di dalam autoklaf. Sterilisasi menggunakan
autoklaf manual tidak dapat ditinggal dalam waktu lama.
Autoklaf manual setelah suhu mencapai 1210C setelah 15
menit, jika tidak dimatikan maka suhu akan terus naik, air
dapat habis, dan dapat meledak.
ii. Autoklaf digital/otomatis
Alat ini dapat diatur dengan suhu mencapai 1210C
selama 15 menit. Setelah suhu tercapai, maka suhu akan
otomastis turun sampai mencapai 500C dan tetap stabil
pada suhu tersebut. Jika digunakan untuk sterilisasi
media, suhu ini sesuai karena untuk emmbuat media
diperlukan suhu 50-700 C.
2). Radiasi
Radiasi ionisasi digunakan untuk mensterilkan
alat-alat berupa bahan plastic seperti kateter,
plastic spuit injeksi, atau sarung tangan
sebelum digunakan. Contoh radiasi ionisasi
adalah metode pada penggunaan microwave
yaitu dengan menggunakan panjang
gelombang pendek dan sinar gamma high
energy.