Jurnal Agrica Ektensia

Info Artikel Received: Vol. No. Tahun .....

Revised : ISSN:
Accepted : E-ISSN:

KAJIAN KULTUR JARINGAN UJUNG TUNAS

Mamanda Silitonga1, Fadhillah Rahma Purba2

1
Fakukltas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Negeri Medan, Jl. William Iskandar Ps. V Deli
Serdang, Sumatera Utara, Indonesia
2.
Fakukltas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Negeri Medan, Jl. William Iskandar Ps. V Deli
Serdang, Sumatera Utara, Indonesia

Koresponden Email: mamandasilitonga05@gmail.com

Abstrak.
Pembibitan tanaman merupakan upaya dalam penyediaan bibit tananam yang dimana terdapat proses
produksi. Pembibitan membutuhkan bibit yang memiliki varietas unggul, seragam, bebas pathogen, bebas hama
Kultur jaringan merupakan salah satu teknik kultur in vitro yang dimana merupakan teknik perbanyakan alternatif
pada tanaman yang dapat digunakan untuk menghasilkan bibit dalam jumlah banyak, waktu yang relative dan mirip
dengan induknya. Metode yang digunakan pada pembahasan ini adalah metode kultur jaringan ujung tunas. Kultur
ujung tunas merupakan eksplan bakal tunas apikal atau tunas aksilar, berukuran 3-20 mm, menyertakan beberapa
primordia daun dan jaringan pembuluh. Pada penggunaan metode kultur ujung tunas dibagi menjadi dua yaitu kultur
pucuk dan kultur akar. Kultur pucuk merupakan perbanyakan secara vegetatif secara in vitro pada pucuk atau tunas
aksilar sebagai eksplan yang ditanaman pada medium hara. Eksplan bakal pucuk dapat berupa ‘nodal segment’
(irisan buku). Sedangkan Kultur jaringan akar adalah kultur ujung radikal yang dipotong dari benih yang
berkecambah secara aseptik dalam media cair di mana benih tersebut diinduksi untuk tumbuh secara mandiri di
bawah kondisi yang terkendali. Eksplan yang digunakan harus hidup pada suatu media buatan yang mengandung
nutrisi yang steril untuk menjadi tanaman secara utuh. Media yang paling umum digunakan pada kultur in vitro
adalah media Murashige dan Skoog (MS) yang mengandung hara makro, mikro dan vitamin lengkap. Keuntungan
penggunaan kultur ujung tunas adalah dapat diterapkan pada banyak jenis tanaman dengan prinsip yang sama,
menghasilkan tanaman baru dari pucuk/akar yang bebas virus, tanaman baru secara genetik seragam dan sesuai
dengan tipenya dan memiliki tingkat perbanyakan yang tinggi.
Kata Kunci: Kultur Jaringan, Kultur Jaringan Tunas, Kultur Pucuk, Kultur Akar

Abstract.
Plant nurseries are an effort in providing plant seeds where there is a production process. Nurseries need
seeds that have superior varieties, uniform, free of pathogens, free of pests. Tissue culture is one of the in vitro
culture techniques which is an alternative propagation technique in plants that can be used to produce seeds in large
quantities, relative time and similar to the parent. The method used in this discussion is the shoot tip tissue culture
method. The shoot tip culture is explants of apical buds or axillary shoots, measuring 3-20 mm, including some leaf
primordia and vascular tissue. In the use of the shoot tip culture method, it is divided into two namely shoot culture
and root culture. Shoot culture is vegetative propagation in vitro on shoots or axillary shoots as explants planted on
nutrient medium. Explants of shoots can be in the form of 'nodal segments' (slices of books). Whereas root tissue
culture is a radical tip culture cut from aseptically germinated seeds in a liquid medium in which the seeds are
induced to grow independently under controlled conditions. The explants used must live on an artificial medium
containing sterile nutrients to become a complete plant. The most commonly used media for in vitro culture is
Murashige and Skoog (MS) media which contains complete macro, micro and vitamin nutrients. The advantage of
using shoot tip culture is that it can be applied to many types of plants with the same principle, producing new plants
from virus-free shoots/roots, new plants are genetically uniform and according to their type and have a high
propagation rate.
Keyword : Tissue Culture, Shoot Tissue Culture, Shoot Culture, Root Culture

PENDAHULUAN menggunakan pembibitan secara cangkok, stek,

Pembibitan tanaman merupakan upaya
dalam penyediaan bibit tananam yang dimana
terdapat proses produksi. Pembibitan
membutuhkan bibit yang memiliki varietas
unggul, seragam, bebas pathogen, bebas hama.
Namun metode yang pembibitan umum masih
biji dsb. Hal ini tentunya membuthkan waktu
dalam proses pembuatannya.Oleh karena itu,
teknik kultur jaringan, menjadi pilihan yang
plaing efisiensi dalam pembibitan tanaman.
Kultur jaringan tanaman adalah suatu
teknik menumbuhkan sel, jaringan ataupun irisan

DOI :

Info Artikel Received:
Revised :
Accepted :
organ tanaman di laboratorium pada suatu media
buatan yang mengandung nutrisi yang steril
untuk menjadi tanaman secara utuh (Dynami,
2015). Steril merupakan syarat keberhasilan
dalam pelaksanaa kultur jaringan. Dalam
mengkultur bila terdapat 1 bakteri atau spora
maka media tersebut akan gagal dan tidak
menghasilkan tanaman baru. Metode kultur
jaringan menghasilkan tanaman baru dalam
jumlah banyak tanpa memerlukan jumlah induk
yang banyak dan waktu yang relative singkat.
Kultur jaringan tanaman didasari oleh teori
totipotensi sel (cellular totipotency) yang artinya
setiap sel tanaman memiliki kapasitas untuk
beregenerasi membentuk tanaman secara utuh.
Tanaman baru yang diperoleh bersifat identik
dengan induknya atau dapat disebut plantlet.
Jumlah tanaman baru yang dihasilkan tidak
hanya satu, tapi bisa puluhan hingga ratusan (dari
satu bahan tanam atau eksplan) sehingga teknik
kultur jaringan digunakan sebagai metode
perbanyakan tanaman. Metode perbanyakan
tanaman yang dilakukan dengan teknik kultur
jaringan tergolong perbanyakan vegetatif, artinya
tidak melibatkan adanya fertilisasi antara sel telur
dan sel kelamin jantan seperti halnya
pembentukan biji pada tanaman, itu sebabnya
plantlet yang dihasilkan identik dengan induknya.
Perbanyakan tanaman dengan teknik kultur
jaringan disebut juga mikropropagasi atau
perbanyakan mikro. Kata ‘mikro’ mengacu pada
bahan tanam awal yang digunakan yaitu eksplan
yang berukuran kecil (micro=kecil), bahkan
dapat mencapai ≤ 1 mm pada kultur meristem.
1Kultur Jaringan dimanfaatkan untuk
beberapa tujuan, diantaranya :
1. Sebagai rekayasa geentika/ transfromasi
genetik.
Transformasi genetik / rekayasa genetika
dalam transfer gen dapat dilakukan dengan
teknik kultur jaringan secara in vitro.
Menumbuhkan target transformasi berupa
‘kalus’, ‘protocorm like bodies’ maupun ‘tunas in
vitro’ untuk menjadi kandidat plantlet transgenik,
membutuhkan keahlian kultur jaringan.
2. Memperbanyak GM (Genetically Modifi ed)
Tanaman dikenla sebagai tanaman
transf=genik yang memiliki karakter agronomi
dengan spesifik yang sesuai. Perbanyakn
dilakukan secara vegetative sehingga anakannya
dapat sesaui dengan indukannya.
3. Perbanyakan tanaman hibrid yang memiliki
sifat-sifat unggul
Tanaman hibrid adalah hasil persilangan
antara dua tanaman yang masing-masing
membawa karakter berbeda, sehingga hasil
DOI :
Jurnal Agrica Ektensia
Vol. No. Tahun .....
ISSN:
E-ISSN:
karakter yang akan dimiliknya merupakan
perpaduan atau kombinasi yang berasal dari dua
tetua. Tanaman hibrid harus diperbanyak secara
vegetatif untuk mempertahankan sifat unggul
yang dimilikinya.
4. Tanaman bebas virus dari kultur meristem
Meristem adalah bagian tanaman yang sel-
selnya bersifat meristematik (aktif membelah).
Meristem terletak di ujung tunas (apikal maupun
aksilar) dan ujung akar.
5. Fusi Protoplas
Fusi protoplas adalah untuk menyilangkan
(crossing) tanaman yang dilakukan secara in
vitro.
6. Embryo Rescue
Pada beberapa spesies tanaman embrio
tidak berkembang setelah terjadinya fertilisasi.
Maka dilakukan kultur embrio untuk
menyelamatkan embrio melalui sehingga hal ini
dapat disebut embryo rescue.
7. Menghasilkan tanaman double haploid melalui
kultur mikrospora
Dihasilkannya tanaman double haploid yang
homozigot melalui kultur mikrospora atau kultur
anther memiliki arti yang sangat penting bagi
bidang pemuliaan tanaman karena cara ini dapat
mempersingkat waktu yang dibutuhkan pemulia
tanaman secara konvensional.
Ada beberapa tipe kultur jaringan yaitu
Kultur meristem (meristem cultures) , Kultur
ujung tunas (shoot-tip cultures), Kultur embrio
(Embrio cultures), Kultur dan fusi protoplas
(Protoplast cultures and fussion), Kultur
mikrospora (microspore cultures), Kultur Kalus
dan Kultur Suspensi (Callus Cultures and
Suspension cultures), Kultur Biji (Seed Cultures).
Kultur organ adalah jenis kultur
jaringan yang melibatkan isolasi organ untuk
pertumbuhan in vitro. In vitro disini maksudnya
adalah pengujian yang terjadi di luar tubuh
makhluk hidup. Pada kultur ini, organ tanaman
apa saja dapat digunakan sebagai ekspaln untuk
proses kultur. Seperti pucuk, akar, daun dan
bunga.
Metode kultur organ ini
digunakan untuk melestarikan
sruktur dan fungsi organ tersebut
agar menyerupai dan
mempertahankan karakterisrik
yang dimilikinya.
Setelah itu, terjadi
pertumbuhan baru namun organ
tersebut tetap mempertahankan
ciri fisiologisnya. Dengan begitu
organ membantu memberikan
informasi tentang pola

Info Artikel Received:
Revised :
Accepted :
pertumbuhan serta
perkembangannya. Keuntungan
untuk kultur organ ini adalah
karena kultur ini
mempertahankan orisinalias
tanaman dan menunjukkan
karakteristik yang sama seperti
yang di tunjukkan secara in vivo.
Dalam pembahasan ini
kita akan membahas mengenai
kultur ujung tunas. Kultur ujung
tunas dibagi menjadi dua yaitu
kultur pucuk dan kultur akar .
HASIL DAN PEMBAHASAN
Kultur Ujung Tunas
Kultur ujung tunas merupakan eksplan
bakal tunas apikal atau tunas aksilar, berukuran
3-20 mm, menyertakan beberapa primordia daun
dan jaringan pembuluh. Kultur ujung tunas dibagi
menjadi dua yaitu kultur pucuk dan kultur akar.
1. Kultur Pucuk
Kultur pucuk adalah untuk perbanyakan
secara vegetatif pada tanaman secara in vitro
pada teknik mikropropagasi yang dilakukan
dengan mengkulturkan eksplan yang
mengandung meristem yaitu pada pucuk atau
tunas aksilar sebagai eksplan yang ditanaman
pada medium hara. Pucuk merupakan eksplan
yang paling baik digunakan untuk pebanyakan
tanaman (George dan Sherington, 1984). Eksplan
bakal tunas aksilar dapat berupa ‘nodal segment’
(irisan buku) karena pada irisan buku (buku
merupakan bekas tempat daun tumbuh) terdapat
bakal tunas aksilar. Robbins pada tahun 1922
merupakan orang pertama yang melakukan kultur
pucuk, setelah itu perkembangannya lambat.
Baru tahun 1970-an banyak dipublikasikan hasil
penelitian dengan menggunakan teknik ini.
. Eksplan ditanam pada media induksi
tunas (media dengan kandungan sitokinin) untuk
memunculkan ‘pre-existing’ tunas yang ada
dalam eksplan. Tunas dalam jumlah banyak bisa
muncul (multiplikasi tunas), namun bisa juga
hanya dihasilkannya satu tunas dari satu eksplan.
Jika dihasilkannya banyak tunas, tunas-tunas
tersebut disubkultur ke media. Pengaruh
dominansi apikal dapat dihilangkan dengan
menggunakan ZPT terutama Sitokinin kedalam
medium, yang akan menghasilkan jumlah tunas
yang banyak. Pertumbuhan tunas terbaik
DOI :
Jurnal Agrica Ektensia
Vol. No. Tahun .....
ISSN:
E-ISSN:
diperoleh pada medium MS (Murashige and
Skoog) ditambahan zat pengatur tumbuh kinetin
dan kombinasi IAA (indol acetic acid) dan BA
(benzyl adenine). Selain itu juga penggunaan
auksin, asama giberelat (GA) juga merupakan
kombinasi yang tepat dalam mempengaruhi
keberhasilan kultur pucuk. Ukuran pucuk
mempengaruhi keberhasilan kultur ini, pucuk
berukuran lebih besar lebih cepat berkembang
dan lebih tahan sehingga lebih banyak
menghasilkan tunas aksilar.
Pada kultur pucuk, banyak digunakan
medium dengan konsentrasi sitokinin tinggi
untuk mendorong pembentukan tunas aksilar.
Pada rasio auksin dan sitokinin tinggi akan
merangsang pebentukan akar, sebaliknya ila
rendah akan merangsanag pembentukan tunas
dan bila mendekati nilai satuan maka akan
meransang pembentukan kalus (Krokorian, dkk
1987). Teknik kultur mata tunas lebih
menguntungkan untuk diterapkan jika
mempunyai tujuan mengelirninir perubahan
genetik, narnun laju multiplikasinya lebih rendah
dibanding dengan kultur pucuk.
Pada perbanyakan kentang skala besar
dalarn rangka mendapatkan kentang bebas
fusarium, kultur ini sudah diterapkan di PAU IPB
(Wattimena, 2000) pada penggunaan kultur
pucuk.
Perbanyakan tanaman melalui kultur pucuk
telah banyak dilakukan pada laboratorium kultur
jaringan komersial. Faktor-faktor yang
menyebabkan penggunaan teknik kultur pucuk
untuk tujuan komersial adalah:
1. Diterapkan pada banyak jenis tanaman dengan
prinsip yang sama pada metode kultur jaringan
2. Mengasilakan tanaman baru dari pucuk yang
bebas virus.
3. Tanaman baru secara genetik seragam dan
sesuai dengan tipenya
4. Memiliki tingkat perbanyakan yang tinggi
Ada beberapa tahap Culture of shoot tip
culture menurut murashige dan SKOG :
Tahap 1 adalah tahap pembentukan kultur ketika
eksplan dapat berkembang menjadi tunas tunggal
atau tunas ganda. Pada tahap ini eksplan adalah
suplemen dengan sitokinin seperti BA, kinetin
dan 2iP.
Tahap 2 tujuannya adalah untuk memperbanyak
propagul dan untuk ini diikuti proliferasi tunas
ketiak karena mempertahankan stabilitas genetik
yang lebih tinggi.
Tahap 3 tujuannya adalah regenerasi akar
adventif dari pucuk yang diperoleh pada tahap 2
Sejumlah penelitian menunjukkan bahwa NAA

Info Artikel Received:
Revised :
Accepted :
diikuti oleh IBA,IAA, 2,4-D dan auksin lainnya
digunakan untuk induksi pembentukan akar.
2. Kultur Akar
Kultur akar dapat didefinisikan sebagai
kultur ujung radikal yang dipotong dari benih
yang berkecambah secara aseptik dalam media
cair di mana benih tersebut diinduksi untuk
tumbuh secara mandiri di bawah kondisi yang
terkendali.
Prinsip kultur akar :Kultur akar dapat
berhasil dimulai dari ujung radikula yang
dipotong dari benih yang berkecambah secara
aseptik. Tanaman in vivo yang utuh tidak cocok
untuk isolasi ujung akar yang utuh karena akar
tanaman terkubur dalam-dalam di dalam tanah.
Sekali lagi, ujung akar dari bibit muda sangat
sensitif terhadap sterilan beracun. Jadi lebih baik
untuk menghindari sterilisasi permukaan ujung
akar muda untuk pembentukan kultur akar.
Kultur ujung akar umumnya dipelihara
dalam media cair yang bergerak. Dalam budaya,
ujung akar diinduksi untuk tumbuh seperti sistem
akar tanaman utuh. Klon dari akar yang dipotong
juga dapat dibuat dari kultur akar tunggal dengan
memotong berulang kali dan memindahkan ujung
akar utama atau ujung lateral ke media segar di
setiap subkultur pada interval waktu tertentu.
Pertumbuhan akar yang dipotong dapat
dinyatakan dalam berat segar dan kering,
pertambahan panjang sumbu utama, jumlah
lateral yang muncul dan panjang total lateral per
kultur.
Inisiasi Klon:
Bahan akar yang berasal dari satu ujung
akar dapat digandakan dan dipertahankan dalam
kultur berkelanjutan. Kultur akar yang seragam
secara genetik disebut sebagai klon dari akar
yang terisolasi.
Pentingnya Kultur Akar Dalam Kaitannya
dengan Informasi Dasar:
(1) Kultur akar telah meningkatkan pengetahuan
kita tentang metabolisme karbohidrat, peran ion
mineral, vitamin, dll. dalam pertumbuhan akar.
(2) Kultur akar telah memberikan informasi dasar
mengenai ketergantungan akar pada tunas untuk
hormon pertumbuhan.
(3) Klon akar cocok untuk mempelajari pengaruh
berbagai senyawa terhadap pertumbuhan akar.
Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Kultur akar
1. Sumber Bahan
Sumber bahan harus dipilih dengan benar.
Akan Lebih baik jika tanaman bebas
penyakit.sebeumnya Kultur in vitro yang
DOI :
Jurnal Agrica Ektensia
Vol. No. Tahun .....
ISSN:
E-ISSN:
berhasil telah diamati dengan menggunakan
kambium vaskular, organ penyimpanan, perisikel
akar, endosperma, kotiledon, mesofil daun, dan
jaringan provaskular. Juga, pilihan eksplan
tergantung pada tujuan kultur.jadi lebih baik
memilih eksplan terbaik dulu sebelum kultur
dilakukan.
2. Strerilisasi Sumber Bahan
Sterilisasi permukaan eksplan merupakan
langkah penting yng harus diperhatikan. Eksplan
yang dikumpulkan dari sumber luar dapat
dipenuhi dengan spora atau sel mikroba lainnya.
Dan, jika eksplan tidak disterilkan dengan benar
sebelum dikultur, hal itu akan menyebabkan
kontaminasi di semua kultur dan menyebabkan
hilangnya kultur yang parah. Juga, jika ada
jaringan yang rusak atau mati, bersihkan
seluruhnya sebelum mengkulturkan eksplan pada
media kultur.
3. Persiapan Ekplant
Ukuran dan bentuk eksplan merupakan
faktor penting dalam kultur organ. Jika ukuran
eksplan tidak optimal, dapat menyebabkan
kegagalan induksi kalus dan hilangnya kultur.
Para pembudidaya umumnya lebih menyukai
penggunaan eksplan berukuran besar untuk
mendapatkan kultur yang layak.
4. Media Kultur
Jenis dan komposisi media kultur adalah
beberapa faktor penting yang mempengaruhi
kultur organ. Kultur lebih dipengaruhi oleh
tingkat hormon tanaman—baik endogen maupun
eksogen—dalam medium. Kalus atau kultur
organ umumnya ditanam pada media padat tetapi
terkadang media cair juga lebih disukai.
terkadang menggunakan media cair mengacu
pada kondisi ketika tanaman tidak dapat tumbuh
di media padat. Hal ini dapat terjadi karena
distribusi nutrisi yang tidak merata, pertukaran
gas yang tidak tepat, dan akumulasi produk
limbah beracun yang dapat berkembang antara
kalus dan media.
5. Subculturing
Kultur harus dipindahkan ke media segar
setelah beberapa waktu. Menyimpan kultur pada
satu media untuk waktu yang lebih lama
menyebabkan penumpukan limbah, kehabisan
nutrisi dari media, dan kekeringan media. Jadi,
direkomendasikan bahwa kultur harus
disubkultur setiap 4-6 minggu saat diinkubasi
pada suhu 25°C.
KESIMPULAN

Info Artikel Received:
Revised :
Accepted :
Pembibitan tanaman merupakan upaya
dalam penyediaan bibit tananam yang dimana
terdapat proses produksi. Pembibitan
membutuhkan bibit yang memiliki varietas
unggul, seragam, bebas pathogen, bebas hama
Kultur Jaringan merupakan salah satu teknik
yang digunakan untuk menghasilkan bibit dalam
jumlah banyak, waktu yang relative dan mirip
dengan induknya. Pengunaan metode kultur
ujung tunas menggunakan eksplan bakal tunas
apikal atau tunas aksilar, berukuran 3-20 mm,
menyertakan beberapa primordia daun dan
jaringan pembuluh. Kultur ujung tunas dibagi
menjadi 2 yaitu kultur pucuk dan kultur akar.
Kultur pucuk adalah untuk perbanyakan secara
vegetatif secara in vitro pada salah satu teknik
mikropropagasi yang dilakukan dengan
mengkulturkan eksplan yang mengandung
meristem pucuk. Sedangkan Kultur akar adalah
kultur ujung radikal yang dipotong dari benih
yang berkecambah secara aseptik dalam media
cair di mana benih tersebut diinduksi untuk
tumbuh secara mandiri di bawah kondisi yang
terkendali. Kultur akar dapat berhasil dimulai
dari ujung radikula yang dipotong dari benih
yang berkecambah secara aseptik. Kultur ujung
akar umumnya dipelihara dalam media cair yang
bergerak. Dalam budaya, ujung akar diinduksi
untuk tumbuh seperti sistem akar tanaman utuh.
Klon dari akar yang dipotong juga dapat dibuat
dari kultur akar tunggal dengan memotong
berulang kali dan memindahkan ujung akar
utama atau ujung lateral ke media segar di setiap
subkultur pada interval waktu tertentu.
Pertumbuhan akar yang dipotong dapat
dinyatakan dalam berat segar dan kering,
pertambahan panjang sumbu utama, jumlah
lateral yang muncul dan panjang total lateral per
kultur.
UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis mengucapkan terimakasih kepada
Tuhan dan serta kepada teman-teman yang
membantu dalam penulisan jurnal ini.
DAFTAR PUSTAKA
Ahuja MR. 1986. Aspen. Dalam: Handbook of
Plant Cell Culture, Volume 4, Techniques
and Applications. DA Evans, WR Sharp and
PV Ammirato (Editors). Macmillan
Publishing Company. New York, him 626-
651.
DOI :
Jurnal Agrica Ektensia
Vol. No. Tahun .....
ISSN:
E-ISSN:
Bhalla-Sarin N and Bagga S. 1983. In Vitro
Culture of Embryos and Other Parts of
Coconut nucifera. Dalam: Proceedings of
National Seminar Plant Tissue Culture, New
Delhi, India, him 132-139.
BhatSB, Chitralekha P and Chandel KPS. 1992.
Regeneration of Plants from Long-term Root
Culture of Lime, Citrus aurantifolia
(Christm.) Swing. Plant Cell Tissue and
Organ Culture 29(1), 19-25.
Chaturvedi HC, Sharm a M and Sharma AK.
1991. Conservation of Plant Genetic
Resources through Excised Root Culture.
Dalam: Conservation of Plant Genetic
Resources through In Vitro Methods. PV
Zakri, MN Normah, AGA Karim and MT
Senawi (Editors). Proceedings of the
MNCPGR-CRC International Worshop on
Tissue Culture for the Conservation of
Biodiversity and Plant Genetic Resources,
Kualalumpur. Malaysia, him 29-41.
Dwiyani, Rindang. 2015. Kultur Jaringan
Tanaman. (Bali : Pelawa Sari “Percetakan &
Penerbit”)
Gassamadia YK and Duhoux E. 1992. Root
Culture and In Vitro Regeneration in Acacia
albida. Dalam: Proceedings of Production de
Varieties Genetiquement Ameliorees, Paris,
France, him 183-194.
Jones LH. 1974. Propagation of Clonal Oil Palm
by Tissue Culture. Oil Palm News 17, 1-8.
Lite RE and Conover RA. 1980. Partial
Organogenesis in Tissue Cultures of
Averrhoa carambola. HortSdence 15(6), 735