KIMIA ANALITIK

MODUL

PUTRI NINGSI A. PANONTJI. S.Pd A20221012

 DAFTAR ISI

DAFTAR ISI . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . i

DAFTAR TABEL . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ii

DAFTAR GAMBAR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . iii

BAB 1. ANALISIS KUALITATIF DAN KUANTITATIF. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1

A. PENGERTIAN KIMIA ANALITIK . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1

B. PENGGOLONGAN KIMIA ANALITIK . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2
C. METODE ANALISIS KUANTITATIF . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4

BAB 2. PEMISAHAN ANALITIK. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8

A. DESTILASI . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . 8
B. PEMISAHAN DENGAN PENGENDAPAN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19
C. KROMATOGRAFI. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 21

i
 DAFTAR TABEL

Tabel 1. Pemisahan berdasarkan pengaturan pH . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20

Tabel 2. Pengendapan sulfida-sulfida pada pengontrolan pH . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20

Tabel 3. Klasifikasi kromatografi berdasarkan fase diam dan fase gerak . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24

ii
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Diagram titik didih, kesetimbangan fasa cair-gas (Tham, 1997) . . . . . . . . . . . . . . . 9

Gambar 2. Diagram titik didih, kesetimbangan fasa cair-gas (Tham, 1997) . . . . . . . . . . . . . . . 11
Gambar 3. Ilustrasi hubungan antara tekanan suhu dan fraksi mol, contoh campuran heksana
dan heptana. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .12
Gambar 4. Ilustrasi percobaan Tsweet. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22
Gambar 5. Ilustrasi fenomena partisi dalam kromatografi. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24
Gambar 6. Ilustrasi fenomena adsorbsi dalam kromatografi. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25
Gambar 7. Ilustrasi fenomena eksklusi dalam kromatografi. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26
Gambar 8. Ilustrasi fenomena pertukaran ion dalam kromatografi. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27
Gambar 9. Ilustrasi fenomena affinitas dalam kromatografi. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28
Gambar 10. Ilustrasi cara elusi dalam kromatograf. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29
Gambar 11. Ilustrasi Cara Frontal dalam kromatograf. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 31
Gambar 12. Ilustrasi cara displacement dalam kromatograf. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 33
Gambar 13. Kurva isotermal ideal (linier) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 34
Gambar 14. Kurva isotermal cembung (tailing) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 35
Gambar 15. Kurva isotermal cekung (fronting) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 35

iii
BAB 1. ANALISIS KUALITATIF DAN KUANTITATIF

A. PENGERTIAN KIMIA ANALITIK

Kimia Analitik merupakan cabang dari ilmu kimia yang mempelajari teori dan cara-
cara melakukan analisis kimia terhadap suatu bahan atau zat kimia termasuk di dalamnya
pemisahan, identifikasi dan penentuan komponen dalam sampel. Analisis kimia dapat berupa
analisis kualitatif dan analisis kuantitatif serta dapat diterapkan pada kimia anorganik maupun
kimia organik.
Analisis kualitatif bertujuan untuk menemukan dan mengidentifikasi suatu zat,
sedangkan analisis kuantitatif bertujuan untuk menentukan jumlah/banyaknya zat. Jadi
analisis kualitatif berhubungan dengan unsur, ion atau senyawa apa yang terdapat dalam
suatu sampel, sedangkan analisis kuantitatif berhubungan dengan berapa banyaknya suatu
zat tertentu yang ada dalam sampel. Zat yang ditetapkan disebut konstituen yang diinginkan
atau analit. Sedangkan jumlah banyaknya suatu zat tertentu dalam sampel biasanya
dinyatakan sebagai kadar atau konsentrasi, misalnya persen berat, molar, gram per liter, atau
ppm.
Contoh perbedaan analisis kualitatif dan kuantitatif adalah sebagai berikut: Misalnya
kita akan menganalisis kapur.

TUGAS ANALISIS KUALITATIF

Mengetahui Jenis Unsur Yang TUGAS ANALISIS KUANTITATIF
Terdapat Dalam Kapur Tersebut
Menunjukkan berapa presentasi
Kesimpulan Yang Ditemukan,
dari Ca2+ dan CO32-
Kapur Tersebut Terdiri dari
Ca2+(kation) dan CO32- (anion)
KAPUR

1
 Dengan dua analisis ini (kualitatif dan kuantitatif) lengkaplah pengetahuan kita
tentang zat tersebut. Jadi analisis kimia dapat digunakan untuk mengidentifikasi unsur dan
senyawa serta mengukur konsentrasinya. Pada dasarnya, sebelum suatu bahan dianalisis
secara kuantitatif, perlu dilakukan terlebih dahulu analisis kualitatif, terutama bila sampel
yang akan diperiksa sama sekali belum diketahui sebelumnya. Baik dalam analisis kualitatif
maupun analisis kuantitatif, reaksi-reaksi kimia memegang peranan penting. Banyak reaksi-
reaksi kimia yang berguna dalam analisis kualitatif dapat digunakan untuk keperluan
analisis kuantitatif, tetapi ada pula reaksi-reaksi kimia yang penting dalam analisis
kuantitatif namun tidak dapat digunakan untuk keperluan analisis kualitatif.

B. PENGGOLONGAN KIMIA ANALITIK

Pada bagian A sudah disebutkan bahwa analisis kimia dapat berupa analisis kualitatif
dan analisis kuantitatif serta dapat diterapkan pada kimia anorganik maupun kimia organik.
Salah satu contoh yang termasuk ke dalam analisis kualitatif adalah analisis kualitatif
anorganik dengan cara H2S. Analisis kualitatif anorganik dapat dilakukan pada skala makro,
semi mikro atau mikro. Pada analisis makro, jumlah zat yang dianalisis adalah 0,5 – 1 gram
dengan volume larutan sekitar 20 mL. Dalam analisis semi mikro, jumlah zat yang dianalisis
dikurangi faktor 0,1 − 0,05, yaitu sekitar 0,05 gram dengan volume larutan sekitar 1 mL.

Sedangkan untuk analisis mikro. (kadang-kadang disebut analisis miligram), skala

operasinya dikurangi dengan faktor  0,01 yaitu 5 mg dan volume 0,1 mL. Sebetulnya tidak
ada batas yang jelas antara analisis semi mikro dan mikro, tetapi yang harus diingat adalah
walaupun skala operasi dikurangi (berat sampel yang dianalisis dikurangi) namun
perbandingan berat sampel dengan volume dipertahankan sebagai konsentrasi ion-ion dan
spesi-spesi tetap.

Selain itu analisis kualitatif dapat menggunakan dua macam uji yaitu reaksi kering dan
reaksi basah. Reaksi kering dapat diterapkan untuk zat-zat padat dan dilakukan dalam
keadaan kering yaitu tanpa melarutkan sampel, contohnya: uji nyala, dan uji mutiara
boraks. 2
 Sedangkan reaksi basah diterapkan untuk zat-zat dalam larutan di mana suatu reaksi
berlangsung ditandai dengan terbentuknya endapan, pembebasan gas, atau adanya
perubahan warna. Pada umumnya analisis kualitatif dilakukan dengan cara basah.

Seperti halnya dalam analisis kualitatif, pada analisis kuantitatif pun tipe analisis dapat
dikelompokkan antara lain berdasarkan sifat informasi yang dicari, ukuran sampel yang ada
dan proporsi konstituen yang akan ditetapkan.

1. Sifat informasi yang dicari

Berdasarkan informasi yang diberikan, tipe analisis kimia dapat digolongkan sebagai
berikut:

a. Analisis proksimat (”proximate analysis”), banyaknya masing-masing unsur dalam suatu

sampel ditetapkan tanpa memperhatikan senyawa yang sebenarnya ada dalam sampel
tersebut.

b. Analisis parsial (”partial analysis”) mencakup penetapan konstituen-konstituen terpilih

dalam sampel tersebut.

c. Analisis konstituen runutan (”trace constituent analysis”), merupakan contoh khusus

analisis parsial, di mana yang ditetapkan adalah komponen-komponen khusus yang
jumlahnya sangat kecil.

d. Analisis lengkap (”complete analysis”), bila proporsi tiap komponen dalam sampel
ditetapkan

2. Ukuran sampel

Berdasarkan banyaknya sampel yang dianalisis, metode analisis dikelompokkan

sebagai berikut:

a. Analisis makro, bila sampel yang dianalisis adalah lebih dari 0,1 gram. 1.6 Kimia Analitik
1

b. Analisis semi mikro (meso), bila jumlah sampel antara 0,01 gram sampai 0,1 gram.

3
 c. Analisis mikro, bila jumlah sampel antara 1 mg sampai 10 mg.

d. Analisis ultra mikro, bila jumlah sampelnya kurang dari 1 mg (setingkat mikrogram)

3. Proporsi sampel

Selain berdasarkan sifat informasi yang dicari dan ukuran sampel dapat juga
dikelompokkan pada konstituen penyusunnya. Zat yang ditetapkan dapat merupakan
konstituen utama, konstituen kecil atau konstituen runutan. Jadi dapat merupakan
sebagian besar atau sebagian kecil dari sampel yang dianalisis. Apabila konstituen yang
ditetapkan dalam analisis kadarnya lebih besar dari 1% maka disebut analisis konstituen
utama (major), tetapi apabila kadarnya antara 0,01 – 1% disebut analisis konstituen kecil
(minor), serta bila kadarnya kurang dari 0,01% disebut analisis konstituen runutan (trace).

C. METODE ANALISIS KUANTITATIF

Teknik utama yang digunakan dalam analisis kuantitatif anorganik didasarkan pada:

a. penampilan kuantitatif reaksi-reaksi kimia yang cocok dan/atau pengukuran banyaknya

pereaksi yang diperlukan untuk menyempurnakan reaksi atau pemastian banyaknya
hasil reaksi yang mungkin;

b. pengukuran sifat-sifat kelistrikan;

c. pengukuran sifat optik tertentu;

d. kombinasi pengukuran optik atau listrik dan reaksi kimia kuantitatif.

Secara rinci teknik-teknik tersebut diuraikan sebagai berikut:

1. Penampilan kuantitatif reaksi kimia (Kesetaraan zat yang bereaksi)

Pelaksanaan kuantitatif reaksi kimia merupakan dasar dari analisis kimia metode
konvensional yaitu gravimetri, titrimetri atau volumetri.

4
a. Gravimetri

Dalam analisis gravimetri, zat yang akan ditetapkan diubah terlebih dahulu menjadi
suatu endapan yang tidak larut kemudian dikumpulkan dan ditimbang, misalnya
konsentrasi perak dalam sampel logam dapat ditetapkan secara gravimetri dengan cara
mula-mula melarutkan sampel tersebut dalam asam nitrat kemudian ke dalam larutan
tersebut ditambahkan ion klorida secara berlebihan sehingga semua ion perak yang ada
dalam larutan mengendap sebagai perak klorida. Setelah dilakukan pencucian, endapan
perak klorida dikeringkan dan akhirnya ditimbang.

b. Titrimetri

Dalam analisis titrimetri (sampai sekarang sering disebut analisis volumetri), zat yang
akan ditetapkan dibiarkan bereaksi dengan suatu pereaksi yang ditambahkan sebagai
larutan standar, kemudian volume larutan standar yang diperlukan diukur. Tipe reaksi
yang biasa digunakan dalam titrimetri adalah:

1) reaksi penetralan (asam basa)

Contoh: jika asam (HA) ditetapkan dengan basa (BOH) maka reaksinya adalah: HA +
OH- → A - + H2O

2) Reaksi pembentukan kompleks Contoh: reaksi antara ion perak dengan sianida Ag+ +
2CN- → Ag(CN)2 –

3) Reaksi pengendapan Contoh: pengendapan kation perak dengan anion halogen,

reaksinya adalah: Ag+ + X- → AgX(p)

4) Reaksi oksidasi-reduksi Contoh: besi(II) dalam larutan asam dititrasi dengan larutan
kalium permanganat (KMnO4) reaksinya adalah: 5Fe2+ + MnO4 - + 8H+ → 5Fe3+ + Mn2+
+ 4H2O

5
 Karena pada dasarnya pekerjaan titrimetri diakhiri dengan menentukan volume zat
yang bereaksi, maka titrimetri sering juga disebut dengan volumetri. Sedangkan
volumetri atau gasometri didasarkan pada pengukuran volume gas yang dibebaskan
atau diserap dalam suatu reaksi kimia

2. Pengukuran sifat kelistrikan

Dalam metode analisis yang didasarkan pada sifat-sifat kelistrikan, melibatkan

pengukuran arus, voltase atau tahanan dalam hubungannya dengan konsentrasi spesi
tertentu dalam larutan. Metode yang dimaksud adalah:

a. Voltametri (pengukuran arus pada suatu mikro elektroda pada voltase yang
ditentukan).

b. Koulometri (pengukuran arus dan waktu yang diperlukan untuk menyempurnakan

suatu reaksi elektrokimia atau untuk menghasilkan cukup bahan untuk bereaksi
secara sempurna dengan suatu pereaksi khusus).

c. Potensiometri (pengukuran potensial suatu elektroda dalam kesetimbangan dengan

suatu ion yang akan ditetapkan).

d. Konduktometri (pengukuran daya hantar listrik suatu larutan).

3. Pengukuran sifat optik

Dalam metode optik, analisis bergantung pada pengukuran banyaknya energi

cahaya yang diserap oleh sampel pada panjang gelombang tertentu; atau emisi energi
cahaya dan pengukuran banyaknya energi suatu panjang gelombang tertentu yang
dipancarkan. Metode serapan biasanya diklasifikasikan sesuai dengan panjang
gelombang yang terlibat, misalnya spektrofotometri sinar tampak (Visible
spectrophotometry) dan spektrofotometri sinar ultra violet (Ultra Violet
spectrophotometry).

6
 Berdasarkan uraian di atas, secara garis besar analisis kuantitatif dapat dilakukan
dengan berbagai cara yaitu gravimetri, titrimetri (volumetri), dan instrumentasi
(misalnya potensiometri dan spektrofotometri). Walaupun pada saat ini analisis lebih
sering dilakukan dengan cara-cara instrumen, namun penetapan dengan cara gravimetri
dan volumetri masih tetap penting. Hal ini disebabkan karena:

1. Peralatan untuk prosedur konvensional atau klasik murah dan mudah didapat
dalam semua laboratorium, sedangkan instrumen umumnya mempunyai harga
yang mahal.
2. Instrumen umumnya memerlukan kalibrasi menggunakan zat pembanding. Zat
pembanding ini biasanya ditentukan dengan metode konvensional.
3. Metode instrumen lebih cocok untuk penetapan rutin yang jumlahnya besar

7
BAB 2. PEMISAHAN ANALITIK
A. Destilasi
1. Pengertian Destilasi

Sejarah menunjukkan bahwa destilasi pertama kali berasal dari peralatan (Terracotta
Distillation) pada tahu 3000 Sebelum Masehi di Lembah Indus Pakistan, kemudian destilasi
digunakan oleh orang-orang abilonia di Mesopotamia. Awalnya destilasi digunakan untuk
membuat parfum. Destilasi untuk minuman dan alkohol muncul kemudian ketika Ahli Kimia
Arab Al-Kindi mendistilasi alkohol pada abad ke-9 di Irak, kemudian muncul destilasi alkohol
sebagai minuman pada abad ke-12 di Italia dan China (Allchin, 1979; Forbes, 1970).

Destilasi adalah proses pemisahan komponen dalam suatu campuran berdasakan

perbedaan titik didih dari komponen individunya, dengan catatan merupakan larutan dan
campurannya homogen. Dengan demikian maka metode atau teknik destilasi adalah
pemisahan campuran larutan yang homogen dan dapat diuapkan berdasarkan perbedaan
titik didihnya. Dasar utama pemisahan dengan cara destilasi adalah perbedaan titik didih
cairan pada tekanan tertentu. Prinsip dasar dari destilasi sederhana adalah perbedaan titik
didih yang cukup jauh dari zat-zat cair dalam campuran zat cair tersebut sehingga zat yang
memiliki titik didih yang lebih rendah akan menguap terlebih dahulu. Proses destilasi
biasanya melibatkan suatu penguapan campuran dan diikuti dengan proses pendinginan dan
pengembunan. Sebagai contoh ada sebuah campuran yang di dalamnya terdapat dua zat,
yaitu zat A dan zat B. Zat A mempunyai titik didih sekitar 120° C, sedangkan zat B mempunyai
titik didih sebesar 80° C. Zat A dapat dipisahkan dengan zat B dengan cara mendestilasi
campuran tersebut pada suhu sekitar 80° C. Pada suhu tersebut, zat B akan menguap
sedangkan zat A tetap tinggal. Selain tergantung kepada titik didih, proses destilasi juga
tergantung pada konsentrasi komponen-komponen penyusun campuran. Proses destilasi
juga tergantung pada karakteristik tekanan uap campuran liquid (Tham, 1997)

8
 Komponen-komponen dalam campuran hanya bisa di destilasi apabila ada
keseimbangan fasa gas dan fasa cair. Diagram titik didih pada gambar 13 menunjukkan
bagaimana komposisi kesetimbangan dari komponen– komponen dalam suatu campuran
liquid berdasarkan variasi temperatur pada tekanan tetap. Misalkan suatu campuran liquid
yang mengandung 2 komponen (A dan B) sebuah campuran biner.

Titik didih komponen A adalah titik di mana fraksi mol A adalah 1. Titik didih
komponen B adalah di mana fraksi mol A adalah 0. Dalam contoh ini, A adalah komponen
yang lebih mudah menguap karena memiliki titik didih yang lebih rendah titik dari B. Kurva
bagian atas pada diagram disebut kurva titik embun (dew point curve), sedangkan kurva yang
lebih rendah disebut kurva titik gelembung (buble point curve). Titik embun adalah suhu di
mana uap jenuh mulai mengembun sedangkan titik gelembung adalah suhu di mana cairan
mulai mendidih.

Daerah di atas kurva titik embun menunjukkan komposisi kesetimbangan uap

superheated sedangkan daerah di bawah kurva titik gelembung menunjukkan komposisi
kesetimbangan dari cairan subcooled

Gambar 1. Diagram titik didih, kesetimbangan fasa cair-gas (Tham, 1997)

Misalnya, ketika cairan subcooled dengan fraksi mol A = 0,4 (titik A) dipanaskan,
konsentrasinya tetap konstan hingga mencapai titik gelembung (titik B), ketika mulai
mendidih.

9
 Uap yang berevolusi selama pendidihan memiliki komposisi kesetimbangan yang
diberikan oleh titik C, kira-kira 0,8 fraksi mol A. Ini kira-kira 50% lebih kaya A daripada cairan
aslinya. Perbedaan antara komposisi cairan dan uap inilah yang menjadi dasar untuk Teknik
Distilasi (Tham, 1997) . Jadi jika kita mempunyai campuran dua larutan biner, tekanan uap
komponen A merupakan fungsi dari fraksi mol komponen A di dalam campuran. Demikian
pula tekanan uap komponen B merupakan fungsi fraksi mol komponen B, yang menurut
Hukum Raoult digambarkan sebagai:

PA = xA . PA o , di mana PA o adalah tekanan uap jenuh larutan A dan P B = xB . PB o

Jadi misalkan kita mempunyai dua campuran heksanaq (A) dan heptane (B) di mana
masing-masing memiliki PA o dan PB o , maka tekana uap campuran adalah :

P = PA +PB

P = xA.PA o + xB.PB o

Keadaan tersebut hanya berlaku untuk larutan ideal biner, di mana:

• Interaksi komponen sejenis sama dengan interaksi antar komponen yang tak sejenis

• Homogen pada semua sistem mulai dari mol fraksi 0 sampai mol fraksi 1

• Tidak ada entalpi pencampuran pada komponen-komponen yang dicampur membentuk

larutan (∆H percampuran =0)

• Tidak ada beda volume pencampuran, artinya volume larutan sama dengan jumlah volume
komponen yang dicampurkan (∆V percampuran =0)

• Berlaku Hukum Raoult

Ilustrasi terkait campuran heksana dan heptane di mana masing-masing memiliki

tekanan uap tetapi setelah percampuran akan memberikan tekanan total tekanan total (P)
yang merupakan akumilasi dari tekanan uap masing-masing (PA+PB) dan fraksi mol dapat
dilihat pada gambar 14 dapat dijelaskan, jika P A lebih besar dari PB maka titik didih komponen
A lebih kecil daripada titik didih komponen B.

10
 Sebagai ilustrasi lain dapat dilihat pada Merkuri (Hg) yang memiliki tekanan uap yang
sangat besar sehingga mempunyai titik didih yang sangat kecil

Gambar 2. Diagram titik didih, kesetimbangan fasa cair-gas (Tham, 1997)

Selanjutnya, apabila kita telaah lebih lanjut tentang campuran heksana dan heptana,
Gambar 3 memberikan gambaran hubungan antara tekanan, suhu dan komposisi
(heptana), di mana pada tekanan total 760 Torr, maka:

• Bila campuran mendidih pada 70o C, maka yang akan mendidih naik ke fase uap adalah
2,5% mol heptana

• Bila campuran mendidih pada 80o C, maka yang akan mendidih naik ke fase uap adalah
46% mol heptana

• Bila campuran mendidih pada 90o C, maka yang akan mendidih naik ke fase uap adalah
78% mol heptane

11
 Gambar 3. Ilustrasi hubungan antara tekanan suhu dan fraksi mol, contoh campuran
heksana dan heptana

Jika heksana pada fase cair adalah xA dan pada fase uap adalah yA, sedangkan heptana
pada fase cair adalah xB dan pada fase uap adalah yB, banyaknya komponen A dalam fase
uap adalah perbandingan PA dan PT pada tekanan dan suhu yang ditentukan.

sehingga volatilitas relatif A terhadap B dalam campuran biner adalah

12
 Atau

Jika PA lebih besar dari PB, maka :

Sehingga, bila tekanan uap A lebih besar dari tekanan uap B, maka perubahan
komponen A dan komponen B dalam fase uap lebih besar dari fasa cair. Akibatnya, fase
uap dalam kesetimbangan di atas fase cair akan lebih kaya mengandung komponen uap
yang lebih volatil. Fenomena ini kemudian menjadi Prinsip dasar Destilasi Fraksinasi. Bila
proses pendidihan tetap berlangsung untuk fase uap akan lebih diperkaya oleh komponen
yang lebih volatile

2. Penerapan Destilasi

Aplikasi destilasi dapat dibedakan menjadi dua jenis yaitu skala laboratorium dan skala
industri. Perbedaan utama destilasi skala laboratorium dan industri adalah sistem
berkesinambungan. Pada skala laboratorium, destilasi dilakukan sekali jalan. Dalam artian
pada destilasi skala laboratorium, komposisi campuran dipisahkan menjadi komponen fraksi
yang diurutkan berdasarkan volatilitas, dimana zat yang paling volatil akan dipisahkan
terlebih dahulu. Dengan demikian, zat yang paling tidak volatil akan tersisa pada bagian
bawah. Proses ini dapat diulangi ketika campuran ditambahkan dan memulai proses destilasi
dari awal.

Pada destilasi skala industri, senyawa asli (campuran), uap, dan destilat tetap dalam
kondisi konstan. Fraksi yang diinginkan akan dipisahkan dari sistem secara hati-hati, dan
ketika bahan awal habis maka akan ditambahkan lagi tanpa menghentikan proses detilasi.

13
 Destilasi mepunyai peranan yang sangat banyak dalam kehidupan manusia. Destilasi
adalah kunci utama dalam pemisahan fraksi-fraksi minyak bumi. Minyak bumi dipisahkan
menjadi fraksi-fraksi tertentu didasarkan pada perbedaan titik didih. Alkohol yang terbentuk
dari proses fermentasi juga dimurnikan dengan cara destilasi.

Minyak-minyak atsiri alami yang mudah menguap dapat dipisahkan melalui destilasi.
Banyak sekali minyak atsiri alami yang dapat diperoleh dengan cara destilasi, yakni minyak
serai, minyak jahe, minyak cengkeh, dan sebagainya. Minyak kayu putih juga didapatkan
dengan cara destilasi. Selain itu, destilasi juga dapat memisahkan garam dari air laut.

3. Destilasi Bertingkat
a. Pengertian Destilasi Bertingkat

Destilasi bertingkat atau distilasi fraksionasi. Destilasi bertingkat adalah proses

pemisahan dua bahan yang mempunyai titik didih yang tidak berbeda jauh. Fungsi distilasi
fraksionasi adalah memisahkan komponen-komponen cair, dua atau lebih, dari suatu
larutan berdasarkan perbedaan titik didihnya. Tujuannya adalah untuk memisahkan
senyawa dari sutau campuran yang komponen-komponennya memiliki perbedaan titik
didih relative kecil. Destilasi ini digunakan untuk memisahkan camputan aseton-metanol,
karbontetraklorida-toluena, dan lain-lain.

b. Dasar Pemisahan dengan Destilasi Bertingkat

Prinsip dasar pemisahan destilasi bertingkat adalah perbedaan titik didih di antara
fraksi-fraksi minyak mentah. Jika selisih titik didih tidak berbeda jauh maka penyulingan
tidak dapat diterapkan Hidrokarbon yang memiliki titik didih paling rendah akan terpisah
lebih dulu, disusul dengan hidrokarbon yang memiliki titik didih lebih tinggi.

c. Proses Destilasi Bertingkat

Destilasi bertingkat merupakan proses pemurnian zat/senyawa cair dimana zat

pencampurnya berupa senyawa cair yang titik didihnya rendah dan tidak berbeda jauh
dengan titik didih senyawa yang akan dimurnikan.

14
 Dengan perkataan lain, destilasi ini bertujuan untuk memisahkan senyawa-senyawa
dari suatu campuran yang komponen-komponennya memiliki perbedaan titik didih relatif
kecil. Destilasi ini digunakan untuk memisahkan campuran aseton-metanol, karbon tetra

Pada proses destilasi bertingkat digunakan kolom fraksinasi yang dipasang pada labu
destilasi. Tujuan dari penggunaan kolom ini adalah untuk memisahkan uap campuran
senyawa cair yang titik didihnya hampir sama/tidak begitu berbeda. Sebab dengan adanya
penghalang dalam kolom fraksinasi menyebabkan uap yang titik didihnya sama akan sama-
sama menguap atau senyawa yang titik didihnya rendah akan naik terus hingga akhirnya
mengembun dan turun sebagai destilat, sedangkan senyawa yang titik didihnya lebih tinggi,
jika belum mencapai harga titik didihnya maka senyawa tersebut akan menetes kembali ke
dalam labu destilasi, yang akhirnya jika pemanasan dilanjutkan terus akan mencapai harga
titik didihnya. Senyawa tersebut akan menguap, mengembun dan turun/menetes sebagai
destilat.

Cara melakukan destilasi bertingkat yaitu :

1. Susun/set alat destilasi bertingkat.

2. Masukan zat sampel dan batu didih ke dalam labu dasar bulat, panaskan labu dengan
melalui penangas sampai campuran mendidih.
3. Atur pemanasan sehingga destilat yang keluar mendekati 2 mL (60 tetes) per menit.
4. Pasang pada labu dasar bulat 250 mL kolom fraksinasi Vigreux atau kolom lain yang
sesuai.
5. Tutup ujung atas kolom dengan termometer sedemikian rupa sehingga ujung termometer
berada 5-10 mm di bawah pipa pengalir pada kolom fraksinasi.
6. Hubungkan pipa pengalir pada kolom dengan pendingin (panjangnya 60-70 cm) dan
pasang seperti untuk melakukan destilasi sederhana. Siapkan 5 labu erlenmeyer yang
bersih dan kering untuk menampung destilat.

15
 d. Penerapan Destilasi Bertingkat

Proses pengolahan minyak bumi dengan distilasi bertingkat

Minyak bumi ditemukan bersama-sama dengan gas alam. Minyak bumi yang telah
dipisahkan dari gas alam disebut juga minyak mentah (crude oil). Minyak mentah dapat
dibedakan menjadi:

1. Minyak mentah ringan (light crude oil) yang mengandung kadar logam dan belerang rendah,
berwarna terang dan bersifat encer (viskositas rendah).

2. Minyak mentah berat (heavy crude oil) yang mengandung kadar logam dan belerang tinggi,
memiliki viskositas tinggi sehingga harus dipanaskan agar meleleh.

Minyak mentah merupakan campuran yang kompleks dengan komponen utama alkana
dan sebagian kecil alkena, alkuna, siklo-alkana, aromatik, dan senyawa anorganik. Meskipun
kompleks, untungnya terdapat cara mudah untuk memisahkan komponen-komponennya,
yakni berdasarkan perbedaan nilai titik didihnya. Proses ini disebut distilasi bertingkat. Untuk
mendapatkan produk akhir sesuai dengan yang diinginkan, maka sebagian hasil dari distilasi
bertingkat perlu diolah lebih lanjut melalui proses konversi, pemisahan pengotor dalam fraksi,
dan pencampuran fraksi.

Distilasi ini juga dapat digunakan untuk campuran dengan perbedaan titik didih kurang
dari 20 °C dan bekerja pada tekanan atmosfer atau dengan tekanan rendah.Aplikasi dari
distilasi jenis ini digunakan pada industri minyak mentah, Alkohol, dan lain-lain (Fauzanariq,
2012)

4. Perbedaan Destilasi dan Destilasi Bertingkat

Perbedaan distilasi fraksinasi dan distilasi sederhana adalah adanya kolom fraksionasi.
Di kolom ini terjadi pemanasan secara bertahap dengan suhu yang berbeda-beda pada setiap
platnya. Pemanasan yang berbeda-beda ini bertujuan untuk pemurnian distilat yang lebih dari
plat-plat di bawahnya. Semakin ke atas, semakin tidak volatil cairannya.

16
5. Syarat Terjadinya Destilasi

Syarat destilasi bertingkat agar destilasi berjalan dengan sempurna adalah:

✓ Syarat utama agar terjadinya proses destilasi adalah adanya perbedaan komposisi antara
fase cair dan fase uap.
✓ Destilasi dilakukan secara pengolahan secara fisika yang primer
✓ Harus homogen
✓ Zat yang di campurkan atau bercampur tidak boleh menghasilkan panas, warna, ataupun
tanda-tanda reaksi kimia lainnya, karena destilasi ini merupakan pengolahan/pemisahan
secara proses fisika bukan secara proses kimia
✓ Destilasi dilakukan dengan paling banyak sebagai pelarutnya
✓ Zat yang titik didihnya rendah akan memiliki fraksi pada fase uap yang lebih banyak/baik
dari pada fraksi pada fase cair, ataupun sebaliknya.

6. Destilasi Pada Campuran Ideal Dan Non Ideal

a. Campuran Ideal

Campuran ideal adalah sebuah campuran yang menaati hukum Raoult. Sebenarnya
tidak ada campuran yang bisa dibilang ideal. Tapi beberapa campuran larutan kondisinya
benar-benar mendekati keadaan yang idea. Dalam sebuah larutan, beberapa molekul
yang berenergi besar dapat menggunakan energinya untuk mengalahkan daya tarik
intermolekuler permukaan cairan dan melepaskan diri untuk kemudian menjadi uap.
Semakin kecil daya intermolekuler, semakin banyak molekul yang dapat melepaskan diri
pada suhu tertentu. Pada suhu tertentu, sebagian dari molekul-molekul yang ada akan
mempunyai energi yang cukup untuk melepaskan diri dari permukaan larutan.

Pada sebuah campuran ideal dari kedua larutan tersebut, kecenderungan dari dua
macam molekul di dalamnya untuk melepaskan diri tidak berubah. Jadi, apabila proporsi
dari tiap jenis molekul yang melepaskan diri tetap sama maka hanya ada separuh dari tiap
jenis molekul yang dapat melepaskan diri dari campuran larutan pada suatu waktu
tertentu.

17
 Apabila komposisi tersebut berubah, kecenderungan molekul untuk melepaskan
diri juga akan berubah. Oleh karena itu, campuran yang disebut larutan ideal biasanya
adalah campuran dua jenis zat yang memiliki besar molekul yang hampir sama dan
mempunyai daya tarik Van der Waals yang sama. Namun besar molekul keduanya tidak
persis sama sehingga walaupun campuran ini mendekati campuran ideal, tetap saja bukan
merupakan campuran ideal. Campuran ideal dari dua larutan akan mempunyai energi
entalpi sebesar nol. Jadi, apabila suhu campuran naik atau turun pada saat keduanya
dicampur berarti campuran tersebut bukan campuran ideal.

b. Campuran non ideal

Campuran – campuran non ideal ini mengalami penyimpangan/deviasi dari hukum

Raoult. Terdapat dua macam penyimpangan hukum Raoult, yaitu:

✓ Penyimpangan positif

Penyimpangan positif hukum Raoult terjadi apabila interaksi dalam masing–masing

zat lebih kuat daripada interaksi dalam campuran zat ( A – A, B – B > A – B). Penyimpangan
ini menghasilkan entalpi campuran (ΔHmix) positif (endotermik) dan mengakibatkan
terjadinya penambahan volume campuran (ΔVmix > 0). Larutan ini menghasilkan titik didih
maksimum pada sistem campuran. Contoh penyimpangan positif terjadi pada campuran
etanol dan n– hekasana (Oxtoby,1997).

✓ Penyimpangan negatif

Penyimpangan negatif hukum Raoult terjadi apabila interaksi dalam campuran zat
lebih kuat daripada interaksi dalam masing–masing zat ( A – B > A – A, B – B). Penyimpangan
ini menghasilkan entalpi campuran (ΔHmix) negatif (eksotermik) dan mengakibatkan
terjadinya pengurangan volume campuran (ΔVmix < 0). Larutan menghasilkan titik didih
minimum pada sistem campuran.

18
B. Pemisahan dengan Pengendapan

pengendapan adalah suatu metode klasik untuk pemisahan logam, biomolekul seperti
protein, polisakarida, dan enzim. Jika dikombinasikan dengan pengukuran massa endapan,
metode analisis kuantitatif ini disebut dengan gravimetri . Zat pengendap (presipitan)
ditambahkan ke dalam larutan yang mengandung logam yang akan dipisahkan sehingga
bereaksi dengan logam tersebut membentuk padatan yang tidak larut.

Pemisahan dengan pengendapan diperlukan adanya perbedaan kelarutan yang tinggi

antara analit dan pengganggu.

Pemisahan dengan cara pengendapan dapat dilakukan berdasarkan:

1. pengaturan pH;

2. penambahan pereaksi sulfida;

3. penambahan pereaksi anorganik;

4. penambahan pereaksi organik;

5. pengendapan secara elektrolisis.

1. Pemisahan Berdasarkan Pengaturan pH

Kelarutan hirdoksida-hidroksida, oksida-oksida basa dan oksida-oksida asam berbagai

macam unsur mempunyai perbedaan kelarutan yang cukup besar. Selain itu konsentrasi ion
hidrogen atau ion hidroksida dapat divariasikan dengan faktor 10 15 atau lebih dan dapat
dengan mudah dikontrol dengan penambahan buffer.

Pemisahan berdasarkan pengaturan pH pada praktiknya dikelompokkan dalam tiga

kategori, yaitu:

a. larutan dibuat dalam asam kuat yang relatif pekat;

b. larutan dibuffer pada pH pertengahan;

c. larutan dibuffer pada pH tinggi.

19
Untuk lebih jelasnya dapat dilihat pada Tabel 1

Tabel 1. Pemisahan berdasarkan pengaturan pH

2. Pemisahan Berdasarkan Penambahan Pereaksi Sulfida

Kebanyakan ion-ion logam membentuk senyawa sulfida yang tak larut kecuali
logam-logam alkali dan alkali tanah. Karena konsentrasi ion sulfida dalam larutan
mudah dikontrol dengan pengaturan pH maka pemisahan berdasarkan pengendapan
sulfida banyak dilakukan. Pemisahan ion-ion logam dengan hidrogen sulfida pada
pengontrolan pH dapat dilihat pada Tabel 2

Tabel 2. Pengendapan sulfida-sulfida pada pengontrolan pH

1 : HCl 3M;

2 : HCl 0,3M

3 : dibuffer hingga pH 6

4 : dibuffer hingga pH 9

20
 3. Pemisahan Berdasarkan Penambahan Pereaksi Anorganik

Ion-ion posfat, karbonat dan oksalat sering digunakan sebagai presipitan untuk
kation tetapi tidak selektif, oleh karena itu pemisahan biasanya dipakai sebagai tahap
pendahuluan. Klorida dan sulfat digunakan karena selektivitasnya tinggi. Ion-ion ini
dapat digunakan untuk memisahkan ion perak dari ion-ion logam lainnya, sedangkan
ion sulfat dapat digunakan untuk isolasi kation timbal, barium, dan stronsium.

4. Pemisahan Berdasarkan Penambahan Pereaksi Organik

Pereaksi organik terseleksi untuk isolasi berbagai ion anorganik telah dibicarakan
pada gravimetri seperti dimetilglioksima selektivitasnya sangat baik dalam
pembentukan endapan dengan sedikit ion. Lainnya 8-hidroksikuinolin, dan Na-
tetrafenilboron.

5. Pemisahan Berdasarkan Pengendapan Secara Elektrolisis.

Pengendapan secara elektrolisis (secara mendalam dibahas pada elektrokimia)

disebut juga dengan elektrodeposisi secara luas digunakan untuk menyempurnakan
pemisahan. Pada proses ini digunakan elektroda merkuri sebagai katoda; di mana
logam-logam yang mudah tereduksi dari seng akan menempel pada katoda; sedangkan
ion-ion logam seperti aluminium, berilium, alkali tanah dan alkali akan tinggal dalam
larutan. Metode ini akan menjadi efektif bila potensial elektroda kerja dikontrol
sebelumnya

C. Kromatografi
1. Pengenalan Kromatografi

Istilah kromatografi pada awalnya berasal dari dua kata yaitu cromatos yang berarti
warna dan graphien yang berarti menulis yang jika diterjemahkan bebas dapat diartikan
dengan “menulis dengan warna”.

21
 Istilah ini tentu tidak terlepas dari penelitian dan penemuan oleh Michael Tsweet (atau
Mikhail Semyonovich Tsvet) pada tahun 1903, seorang botanis Russia-Italia, pada saat
melakukan riset terkait pigmen tanaman. Tsweet menggunakan kromatografi kolom dengan
kalsium karbonat sebagai adsorben dan campuran petroleum eter/etanol sebagai eluen untuk
memisahkan klorofil dan karotenoid.

Pada awalnya, kromatografi hanya dapat memisahkan komponen yang berwarna.

Terjadinya pemisahan berdasarkan pada kecepatan migrasi komponen-komponen dalam
sampel yang berbeda. Perbedaan mingrasi ini disebabkan karena adanya perbedaan
kesetimbangan distribusi dalam fasa diam dan fase gerak untuk setiap senyawa.

Berbeda dengan metode ekstraksi pada Metode Craig, pada kromatografi, ada fase diam
(stasioner) dan ada fase mobil (gerak). Komponen akan bermigrasi karena adanya fase mobil
yang terus menerus bergerak (oleh Craig, hanya bergerak jika dipindahkan) sehingga cocok
atau relevan dengan ekstraksi counter current oleh Craig. Kromatografi adalah istilah yang
umum untuk teknik pemisahan yang didasarkan pada partisi atau distribusi sampel (terlarut)
di antara fase gerak (fase mobil) dan fase diam (fase stasioner).

Kromatografi dapat dipandang sebagai serangkaian proses kesetimbangan antara fase

mobil dan fase stasioner. Interaksi relatif dari terlarut dengan kedua fasa ini digambarkan
sebagai koefisien partisi (K) atau koefisien distribusi (D) (Perbandingan konsentrasi terlarut
dalam fase stasioner dengan konsentrasi terlarut pada fase mobil) (Ismail & Nielsen, 2010).

Gambar 4. Ilustrasi percobaan Tsweet

22
 Fase mobil dapat berupa gas (Gas Chromatography/GC), atau liquid (Liquid
Chromatography/LC) ataupun berupa Supercritical Fluid (Supercritical Fluid
Chromatography/SFC). Sementara fase mobil dapat berupa liquid dan lebih sering berupa
padatan.

Pada kromatografi dikenal istilah jumlah plat (plate number) yaitu suatu segmen
imajiner tempat terjadinya migrasi. Pada kromatografi, harga K dan D tergantung pada: (1)
perbedaan kelarutan, (2) perbedaan adsorpsi, dan (3) perbedaan volatilitas. Komponen yang
akan dipisahkan berada dalam sistem yang dinamis dengan melakukan pengaliran dan selama
itu akan terjadi proses pelarutan, adsorpsi, dan penguapan.

Proses pelarutan terjadi akibat adanya perbedaan atau distribusi terlarut dalam dua
pelarut yang tidak saling bercampur (ingat Hukum Nernst). Dalam hal ini terjadi peristiwa
partisi selama proses ini. Proses Adsorpsi dapat terjadi misalnya bila suatu senyawa yang ada
di dalam larutan dimasukkan adsorben (misalnya arang aktif), sebagian komponen dalam
larutan akan teradsorp dan sebagian yang lain tidak teradsorp. Dalam hal ini, peristiwa yang
terjadi adalah peristiwa pelarutan dan peristiwa adsorpsi.

Selanjutnya, proses penguapan (volatilitas) dapat terjadi jika suatu senyawa volatile
dimasukkan ke dalam larutan, kemudan dituangkan ke dalam lempeng lalu diberi adsorben
berupa lapisan tipis. Pada keadaan ini sebagian komponen akan diadsorb, sebagian dalam
larutan dan sebagian lainnya yang volatile akan menguap. Dalam hal ini terjadi peristiwa
pelarutan, adsorpsi dan volatilitas.

Tujuan dari penggunaan kromatografi setidaknya ada dua: pertama untuk keperluan
analisis, yaitu penentuan komposisi kimia dari suatu sampel dan kedua untuk keperluan
preparatif, yaitu pemurnian dan pengambilan satu atau lebih komponen dari suatu sampel.
Jadi kromatografi memiliki kemampuan untuk memisahkan molekul–molekul dengan cara
menahannya pada fase diam (stasioner) yang dibawa oleh arus fase gerak. Sekali molekul
tersebut terpisahkan dari campuran maka molekul tersebut dapat diidentifikasi (kualitatif),
diisolasi (preparative) dan di kuantifikasi (kuantitatif).

23
2. Klasifikasi Kromatografi Jenis-jenis

kromatografi ada bermacam-macam tergantung kepada dasar pengklasifikasiannya.

a. Berdasarkan fase mobil dan fase diam yang terlibat, maka kromatografi diklasifikasikan
menjadi 4 bagian masing-masing sebagaimana tercantum pada tabel 3 berikut :

Tabel 3. Klasifikasi kromatografi berdasarkan fase diam dan fase gerak

b. Berdasarkan fenomena yang terjadi, kromatografi dibagi menjadi 5 jenis masing-masing

partisi, adsorpsi, eksklusi, pertukaran Ion, dan afinitas.

Gambar 5. Ilustrasi fenomena partisi dalam kromatografi

- Patisi adalah fenomena yang terjadi di mana dua pelarut yang tidak saling bercampur
dimasukkan terlarut maka terlarut akan terdistribusi di antara dua fasa yang tidak saling
bercampur. Perbedaan distribusi yang terjadi berdasarkan pada kelarutan terlarut
terhadap dua fasa tersebut. Gambar 5 menunjukkan fenomena partisi di mana proses
pemisahannya berdasakan kemampuan adsorpsi analit (partikel terlarut) pada lapisan
tipis cairan yang dilapiskan pada partikel padatan inert fase diamnya.

24
 Prinsip utama pemisahan berdasarkan perbedaan kelarutan antara komponen
sampel pada fase diamnya (gas chromatography), atau berdasarkan perbedaan
kelarutan komponen dalam fase gerak dengan fase diamnya (liquid chromatography).
Keuntungan metode kromatografi partisi ini adalah distribusinya tidak bergantung pada
konsentrasi sehingga pemisahan dapat terjadi lebih baik

Gambar 6. Ilustrasi fenomena adsorbsi dalam kromatografi

- Adsorpsi yaitu fenome-na di mana larutan yang mungkin terdiri atas lebih dari satu
komponen yang homogen, kemudian dimasukkan adsor-ben, maka komponen-
komponen tersebut akan teradsorb tergantung pada kecenderungan komponen-
komponen tersebut. Pemisahan didasarkan pada perbedaan sifat afinitas adsorpsi dari
komponen sampel pada permukaan padatan aktif. Kromatografi adsorpsi menggunakan
fase gerak cairan maupun padatan yang mampu teradsorp pada permukaan fase
diamnya. Pada gambar 6 ini ditunjukkan interaksi adsorpsi antara analit pada fase gerak
dengan permukaan fase diamnya.
- Eksklusi yaitu fenomena pemisahan yang didasarkan pada ukuran partikel. Biasanya
digunakan untuk memisahkan molekul-molekul yang besar (makromolekul) seperti
protein. Tipe ini tidak banyak dipengaruhi oleh interaksi antara fase diam dengan zat
terlarutnya

25
 Gambar 7. Ilustrasi fenomena eksklusi dalam kromatografi

- Proses pemisahan berdasarkan volume hidrodinamik dari molekul atau partikel.

Dalam teknik ini, gel nonionik dengan uku-ran pori yang sama digunakan untuk
memisahkan campuran berdasarkan perbedaan ukuran molekulnya (BM).
Diilustrasikan pada gambar 7 di mana molekul-molekul yang kecil akan memasuki pori-
pori dari gel sedangkan molekul besar akan melewati sela-sela gel lebih cepat bila
dibandingkan dengan molekul yang melewati pori-porinya. Jadi urutan elusi mula-mula
adalah molekul yang lebih besar, molekul sedang, dan terakhir molekul yang paling
kecil. Apabila fasa diamnya adalah gel yang hidrofil maka teknik ini disebut gel filtration
chromatography dan bila digunakan gel yang hidrofob (polystyrene-divinylbenzene)
disebut gel permeation chromatography.
- Penukaran Ion yaitu fenomena yang didasarkan pada interaksi muatan positif dan
negatif antara molekul spesifik dengan matriks yang barada di dalam kolom
sebagaimana diilustrasikan pada Gambar 7. Terdiri atas dua fenomena yaitu
pertukaran kation bila molekul spesifik yang diinginkan bermuatan positif dan kolom
kromatografi yang digunakan bermuatan negatif, dan pertukaran anion bila molekul
spesifik yang diinginkan bermuatan negatif dan kolom kromatografi yang digunakan
bermuatan positif. Sangat bermanfaat untuk menganalisis anion dan kation anorganik
(seperti anion klorida dan nitrat dan kation kalium dan natrium). Selain itu juga dapat
menganalisis ion orga-nik serta dapat diguna-kan untuk pemurnian protein karena
protein memuat molekul ber-muatan pada nilai pH tertentu.
26
 Pada cara ini digunakan fase diam padat tempat partikel bermuatan dapat me-
nempel (seperti resin kopolimer polistiren-divinilbenzena). Fasa diam memiliki ion
tetap seperti anion sulfat atau kation amina kuaterner. Masing-masing harus
diasosiasikan dengan ion counter (ion dengan muatan berlawanan) jika kita ingin
menjaga netralitas sistem ini. Jika ion counter adalah kation, sistem tersebut
dinamakan resin penukar kation. Namun, jika ion counternya adalah anion, maka
sistemnya adalah resin penukar anion. Secara umum terdapat lima langkah utama
dalam kromatografi pertukaran ion yaitu (1) tahap awal, (2) adsorpsi target, (3)
memulai elusi, (4) akhir elusi, dan (5) regenerasi

Gambar 8. Ilustrasi fenomena pertukaran ion dalam kromatografi

- Affinitas kromatografi bekerja berdasarkan pada interaksi spesifik antara satu jenis
molekul zat terlarut dengan jenis molekul lain yang terimmobilisasi dalam fase diam.
Sebagai contoh, molekul yang terimmobilisasi dapat menjadi antibodi untuk beberapa
protein yang spesifik. Saat zat terlarut yang me-ngandung campuran protein melewati
molekul ini, hanya protein tertentu saja yang akan bereaksi dengan antibodi yang
terimmobilisasi pada fase diam. Gambar 9 memberikan ilustrasi sederhana terkait
fenomena afinitas tersebut.
27
 Gambar 9. Ilustrasi fenomena affinitas dalam kromatografi
c. Berdasarkan teknik pemisahan, kromatografi terdiri atas kromatografi kolom dan
kromatografi planar (kertas dan lapis tipis).

- Kromatografi kolom, adalah kromatografi di mana fase diamnya terdeposisi pada pipa
yang berbentuk kolom, kemudian komponen yang akan dipisahkan bergerak bersama
fase gerak melalui kolom tersebut dan kemudian setiap komponen akan terpisahkan
pada fase diamnya. Oleh fase mobil membuat setiap komponen yang keluar dari kolom
dengan waktu yang berbeda dan kemudian akan masuk ke detektor untuk dideteksi dan
dianalisis lebih lanjut.
- Kromatografi Planar (biasanya berupa kromatografi lapis tipis) merupakan jenis
kromatografi di mana fase diamnya berupa film atau lapisan tipis dengan partikel padat
yang terikat bersama melalui kekuatan mekanik pada senyawa pengikat seperti kalsium
sulfat. komponen yang akan dipisahkan bergerak bersama fase gerak dalam sebuah
bidang datar (planar). Senyawa yang bergerak terlihat seperti noda (spot) yang dapat
diidentifikasi. Posisi noda menunjukkan identitas suatu komponen/senyawa (kualitatif),
sedangkan besar atau intensitas noda menunjukkan konsentrasinya (kuantitatif).

d. Berdasarkan metode pengembangan, kromatografi didasarkan pada teknik elusi,

metode frontal dan metode pergeseran/ displacement.
28
- Cara Elusi
Secara umum, dalam ilmu khususnya kimia analitik dan kimia organik, elusi dapat
diartikan sebagai proses ekstraksi suatu bahan dari bahan lainnya dengan cara mencuci
menggunakan pelarut; seperti dalam pencucian resin penukar ion yang telah jenuh
untuk menghilangkan ion atau analit yang tertangkap didalamnya. Dalam percobaan
kromatografi sebagai contoh, suatu analit umumnya dijerap/diadsorb, atau “terikat”
pada fase diam di dalam kolom kromatografi. Elusi adalah proses menyingkirkan analit
dari adsorben dengan mengalirkan suatu pelarut yang disebut dengan “eluen”. Eluen
ini melewati kompleks adsorben-analit. Seiring dengan “elusi” molekul pelarut, atau
pergerakan turun eluen melalui kromatografi kolom, pelarut atau eluen melewati
kompleks adsorben-analit dan kemudian menggantikan analit dalam berikatan dengan
adsorben. Setelah molekul pelarut penggantikan analit, analit dapat dikeluarkan dari
kolom untuk dianalisis.

Gambar 10. Ilustrasi cara elusi dalam kromatograf

Mekanisme proses elusi dapat digambarkan pada skema di samping (Gambar 10)
dengan keterangan sebagai berikut :
a) Dimasukkan sampel A dan B
b) Kemudian dialiri eluen (elusi)
29
c) Elusi kemudian terjadi, di mana pelarut/eluen bergerak sepanjang fasa diam karena
adanya aliran pelarut baru
d) Pelarut terus bergerak sepanjang aliran menembus fasa diam
e) Selama pelarut bergerak, selama itu akan terdistribusi antara dua fasa
f) Bila laju alir pelarut tetap, maka gerakan komponen A dan B akan bergantung pada
koefisien distribusi

Jika Ka < KB, A terelusi lebih dahulu, A kemudian akan bergerak lebih cepat daripada
B, hal ini kita sebut migrasi differensial. Semakin panjang kolom, A semakin jauh akan
meninggalkan B. Semakin besar perbedaan K, A dan B semakin mudah terpisah karena
akan semakin pendek transfer yang diperlukan. Jika panjang kolom, fasa diam dan laju alir
tetap, komponen A akan keluar dari kolom dalam waktu yang selalu sama, atau waktu
retensi selalu sama. Letak puncak pada waktu retensi tertentu akan menentukan atau
spesifik untuk suatu komponen (kualitatif), sedangkan secara kuantitatif tergantung pada
luas segitiganya (peak/puncak).

- Cara Frontal
Metode frontal analisis sangat jarang digunakan secara umum, dan kemungkinan
hanya digunakan pada studi akademis atau riset saja. Cara inipun hanya secara efektif
dapat digunakan dalam sistem kromatografi kolom. Sampel dimasukkan secara terus-
menerus ke dalam kolom dalam bentuk larutan encer dalam fase gerak. Hal ini berbeda
dengan cara elusi, di mana sampel yang akan dipisahkan ditempatkan dalam sistem
kromatografi dan pemisahan berlangsung secara bergantian. Pada analisis frontal, kita
dapat memisahkan suatu campuran sampel dengan hasil yang relatif murni hanya untuk
komponen sampel yang pertama kali keluar dari sistem kromatografi, sedangkan setiap
komponen sampel berikutnya tercampur dengan komponen yang terelusi didepannya.
30
 Gambar 11. Ilustrasi Cara Frontal dalam kromatograf
Gambar 11 memberikan ilustrasi terkait cara frontal ini, dengan penjelasan sebagai
berikut:
a. Sampel A dan B (A+B) dimasukkan pada ujung atas kolom secara terus menerus
b. Bila perbandingan Kd antara A dan B sangat besar, maka A yang berada pada sampel
akan bergerak lebih cepat
c. Semakin besar harga Kd komponen B maka makin lambat pergerakanya. Biasanya
cara ini digunakan untuk menyaring unsur/senyawa tertentu dan diaplikasikan dalam
kromatografi Gas-Padat (GSC)

- Cara Displacement
Suatu senyawa atau analit biasanya teradsorbsi ke fase diam atau adsorben. Untuk
analit yang teradsorbsi lebih kuat dapat mendesak keluar atau mengusir senyawa yang
teradsorbsi lebih lemah. Metode ini disebut cara desakan atau pergeseran (cara
displacement). Pita senyawa yang teradsorbsi paling lemah akan meninggalkan kolom
lebih dahulu, kemudian diikuti dengan senyawa berikutnya, hingga senyawa paling akhir
didesak oleh suatu senyawa tertentu yang sengaja dipilih untuk mendesak (misalnya
fenol untuk peptide, efedrin untuk polisakarida).
31
 Cara displacement ini hanya efektif pada fase gerak di mana sampel teradsorbsi
pada permukaan fase diam padat. Jika campuran sampel ditempatkan pada ujung sistem
kromatografi, setiap sampel akan bersaing untuk segera menempati tempat adsorbsi
yang ada. Pada awalnya, semua tempat adsorbsi akan terjenuhi dengan komponen
sampel yang terikat paling kuat terlebih dahulu. Pada saat pita sampel bergerak
melewati sistem, tempat adsorbsi yang ada berikutnya akan dijenuhi dengan komponen
sampel yang teradsorbsi paling kuat berikutnya. Oleh karena itu, komponen-komponen
sampel akan mengatur diri mereka masing-masing sepanjang sistem kromatografi
sesuai dengan kekuatan adsorbsi yang menurun berturut-turut. Jadi komponen yang
teradsorpsi paling lemah, akan bergerak paling jauh.
Komponen-kompunen sampel biasanya terikat sangat kuat pada permukaan fase
diam sehingga mereka akan terelusi sangat lambat atau bahkan tidak terelusi sama
sekali. Akibatnya, sampel harus didesak oleh suatu senyawa yang lebih kuat terikat
daripada sampel-sampel yang diuji (disebut sebagai pendesak). Pendesak, terkandung
dalam fase gerak pada konsentrasi yang rendah, pertama kali akan mendesak komponen
sampel yang paling kuat terikat pada fase diam. Pada gilirannya komponen sampel ini
akan mendesak komponen sampel yang terikat kurang kuat yang berada tepat di
depannya. Jadi, pendesak mendorong komponen-komponen yang teradsorbsi secara
progresif sepanjang sistem kromatografi, setiap komponen akan mendesak satu
komponen lain yang berada di depannya sampai mereka semua melewati sistem
kromatografi.
Setiap sampel akan terkarakterisasi sesuai dengan urutan mereka terelusi serta
jumlah setiap sampel yang ada akan proporsional dengan panjang setiap pita (bukan
pada tingginya). Pada cara displacement ini, sampel tidak pernah benar-benar terpisah
satu sama lain. Sampel meninggalkan sistem berurutan dan bersambung satu sama lain,
masing-masing masih tercampur dengan komponen sampel yang ada di depan dan di
belakangnya. Tipe pengembangan ini sangat jarang digunakan dalam kromatografi cair.
32
 Gambar 12. Ilustrasi cara displacement dalam kromatograf
Gambar 12 menunjukkan secara sederhana ilustrasi bagaimana cara displacement
ini bisa berlangsung dengan ketentuan sebagai berikut :
a. Mengandung displacer (kompo-nen pendorong)
b. Digunakan apabila komponen yang akan dipisahkan mempunyai harga K yang besar
c. Sampel a dan B di-masukkan di ujung kolom
d. Kemudian dialiri pelarut yang mengandung komponen D
e. Cara ini dilakukan bila cara elusi dan frontal mempunyai masalah

Tujuan aplikasi kromatografi adalah untuk analisis kuantitatif sebagai bagian dari
proses pemisahan. Diharapkan diperoleh pemisahan yang memuaskan dari proses
kromatografi berdasarkan interval waktu yang sesuai. Saat ini berbagai macam metode
kromatografi telah dikembangkan, di antaranya adalah (Coskun, 2016):
• Kromatografi Kolom
• Kromatografi Penukar Ion
• Kromatografi Permeasi Gel (Gel-Permeation/Molecular sieve)
• Kromatografi Affinitas
• Kromatografi Kertas
33
 • Kromatografi Lapis Tipis
• Kromatografi Gas
• Kromatografi Dye-Ligand
• Kromatografi Interaksi Hidrofobik
• Kromatografi Pseudo-Affinitas
• Kromatografi Cair Tekanan Tinggi (HPLC)

3. Teori Kromatografi
a. Proses Isotermal pada Kolom (Sistem Elusi)
Apabila suatu komponen atau analit dimasukkan ke dalam kolom, kemudian
digerakkan oleh fasa mobil di mana di dalam kolom terisi fasa diam, maka dala kolom
akan terdiri atas dua fasa (fm dan fs ). Selama elusi terjadi, di setiap segmen akan terjadi
proses keseimbangan, tetapi segmen tersebut imajiner yang sering disebut Plat.

Pada segment tersebut, kita mempunyai harga koefisien distribusi K = Cs /Cm. Jika
diketahui bahwa pada suatu suhu tetap, harga K tetap, dan untuk suatu keadaan apabila
keseimbangan terjadi antara satu plat ke plat berikutnya, bila pemindahan berlangsung
secara ideal, maka akan terjadi kromatografi ideal yang linier

Gambar 13. Kurva isotermal ideal (linier)

34
 Suatu keadaan ideal sangat sulit tercapai yang paling sering terjadi adalah dua
kemungkinan:
1. Bila konsentrasi terlarut terlalu besar maka fraksi terlarut yang lebih besar tetap
tertinggal dalam fase gerak/mobil.
Pada situasi ini, terjadi kurva isothermal yang cembung akibatnya pita elusi tidak
simetris. Proses seperti ini diistilahkan dengan peristiwa tailing. Peristiwa yang terjadi
disini adalah fasa gerak keluar terus-menerus membawa terlarut/analit yang
mengakibatkan terjadinya pergeseran baseline (garis dasar). Peristiwa seperti ini juga
sering terjadi pada AAS (Spektroskopi Serapan Atom), di mana detektor selalu
medeteksi adanya terlarut/ analit. Kemungkinan lain yang dapat menyebabkan hal ini
adalah adanya impuritis (pengotor) atau kontaminan dari fasa mobil.

Gambar 14. Kurva isotermal cembung (tailing)

2. Bila konsentrasi terlarut sangat kecil pada fasa mobil dan lebih besar tertinggal pada
fasa diam/stasioner sehingga yang terjadi adalah keadaan sebaliknya. Semakin tinggi
konsentrasi dalam fase diam/ stasioner, dan konsentrasi fase mobil yang mengandung
sedikit analit semakin besar, maka akan menghasilkan pita serapan cekung yang
disebut fronting, seperti diilustrasikan pada Gambar 15

Gambar 15. Kurva isotermal cekung (fronting)

35
Keadaan linier akan sulit tercapai disebabkan oleh berbagai faktor, di antaranya:
a. Terjadinya proses keseimbangan di setiap plat tidak seperti pada proses Craig.
b. Ketidakseragaman isi kolom dalam hal ukuran, bentuk geometrisnya, cara pengisian.
Perbedaan hal-hal tersebut akan menyebabkan perubahan kecepatan terlarut/analit
yang bergerak sepanjang kolom.
c. Jika pada kondisi ideal keseimbangan terjadi dengan baik dan tidak ada diffuse, pada
kondisi tidak ideal biasanya terjadi diffuse antara terlarut dan fasa air ataupun fasa
organik, hal ini akan mengganggu keseimbangan.
Karena faktor-faktor tersebut di atas sehingga kromatografi yang berlangsung biasanya
non ideal tetapi cenderung linier

36