laporan +PPT = 82

LAPORAN RESMI PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI

PRAKTIKUM VII
REVIEW JURNAL PEMBUATAN MEDIA

Kelompok : 7

Anggota : Alfina Damayanti (M3519004)

Fathia Fajar Nur Azizah (M3519020)

Ning Ratih (M3519046)

Wahyu Triwidiyastuti (M3519060)

Tanggal Praktikum : 27 Oktober 2020

Asisten Praktikum : Sherly Vega Andwi

PROGRAM STUDI D3 FARMASI

SEKOLAH VOKASI
UNIVERSITAS SEBELAS MARET
SURAKARTA
2020
 LAPORAN RESMI PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI
PRAKTIKUM VII
REVIEW JURNAL PEMBUATAN MEDIA

I. TUJUAN 5
Tujuan dari percobaan ini adalah melakukan pembuatan media dan
mempersiapkan peralatan untuk kerja mikrobiologi.
II. DASAR TEORI
10
Media kultur digunakan di laboratorium untuk penanaman mikroorganisme dan
memberi nutrisi yang dibutuhkan untuk pertumbuhan dan pemeliharaan mikroorganisme
(Rizki dan Syahnita, 2019). Penggunaan media dalam cabang ilmu biologi yaitu
mikrobiologi sangat penting untuk menumbuhkan, isolasi, perhitungan jumlah, dan
pengujian sifat-sifat fisik bakteri sehingga suatu bakteri dapat diidentifikasi (Rismaya
dkk., 2019). Medium adalah suatu bahan yang terdiri dari campuran nutrisi untuk
menumbuhkan mikroorganisme. Selain untuk menumbuhkan mikroorganisme, medium
dapat digunakan untuk isolasi, pengujian sifat-sifat fisiologi, dan perhitungan jumlah
mikroorganisme (Rakhmawati, 2012).
Media pertumbuhan mikroorganisme adalah suatu bahan yang terdiri dari
campuran zat-zat makanan atau nutrisi yang diperlukan oleh mikroorganisme untuk
pertumbuhannya. Mikroorganisme memanfaatkan nutrisi di dalam media berupa
molekul-molekul kecil yang dirakit untuk menyusun komponen sel. Dengan media,
pertumbuhan dapat dilakukan dengan isolasi mikroorganisme menjadi kultur murni dan
juga memanipulasi komposisi media pertumbuhannya. Bahan dasar adalah air (H2O)
sebagai pelarut dari agar-agar (rumput laut) dimana agar-agar tersebut berfungsi sebagai
pemadat media (Suhardi dkk., 2015). Media biakan yang mampu mendukung
optimalisasi pertumbuhan mikroorganisme harus dapat memenuhi persyaratan nutrisi
bagi mikroorganisme. Unsur tersebut berupa garam organik, sumber energi (karbon),
vitamin dan zat pengatur tumbuh (ZPT). Selain itu dapat pula ditambahkan komponen
lain seperti senyawa organik dan senyawa kompleks lainnya (Suardana dkk., 2014).
III. ALAT DAN BAHAN 5
1. Alat
a. Timbangan (1 buah)
b. Lemari pengering (1 buah)
c. Blender (1 buah)
d. Wadah (1 buah)
e. Autoklaf (1 buah)
f. Tabung reaksi (3 buah)
g. Jarum ose steril (2 buah)
h. Inkubator (1 buah)
2. Bahan
a. Media nutrient agar (23 gram)
b. Media nutrient agar steril (3 mL)
c. Media nutrient broth (8 gram)
d. Aquadest (Secukupnya)
IV. CARA KERJA
7
1. Medium Nutrien Agar
kok cakernya ngga semua ditulis, dari jurnal yang dikutip nggak cuma caker ini aja lo

2. Medium Nutrien Broth

3. Medium Nutrien Agar Miring

 2
V. HASIL PENGMATAN
hasil percobaannya mana?
bedain antara hasil sama caker

No. Metode Cara Kerja

1 Pembuatan media Sebanyak 23 g media nutrien Agar dilarutkan dalam air

nutrient agar miring suling steril kemudian volumenya dicukupkan hingga 1 L
dengan bantuan pemanasan sampai semua bahan terlarut.

Disterilkan dalam autoklaf pada temperatur 121℃ selama

15 menit

Dimasukkan 5 ml ke dalam tabung reaksi steril, kemudian

diamkan pada temperatur kamar sampai sediaan memadat
pada posisis miring kira-kira 45℃

Kemudian disimpan dalam lemari pendingin 5℃

Setelah media NA mengeras dalam bentuk miring,

digoreskan koloni bakteri pada media tersebut dengan
menggunakan jarum ose steril

Kemudian diinkubasi dalam inkubator pada suhu 36-37℃

selama 18-24 jam.

2 Pembuatan media Ditimbang media Nutrient Broth (NB) sebanyak 8 g, lalu

nutrient broth dilarutkan dalam air suling steril sedikit demi sedikit,
kemudian dicukupkan volumenya hingga 1 L dengan
bantuan pemanasan sampai semua terlarut sempurna

Disterilkan dalam autoklaf pada temperatur 121℃ selama

15 menit.

Setelah disterilkan didiamkan media hingga dingin,

kemudian masukan 10 ml kedalam tabung reaksi steril dan
ambil koloni bakteri dari stok kultur dengan menggunakan
jarum ose lalu disuspensikan dalam tabung reaksi yang
telah berisi 10 ml larutan Nutrien broth.

3 Pembuatan media Sebanyak 23 g media nutrien Agar dilarutkan dalam air

nutrient agar suling steril kemudian volumenya dicukupkan hingga 1 L
dengan bantuan pemanasan sampai semua bahan terlarut.

Disterilkan dalam autoklaf pada temperatur 121℃ selama

15 menit

Dimasukkan 5 ml ke dalam tabung reaksi steril, kemudian

diamkan pada temperatur kamar sampai sediaan memadat
 Kemudian disimpan dalam lemari pendingin 5℃

Setelah media NA mengeras, digoreskan koloni bakteri

pada media tersebut dengan menggunakan jarum ose steril

Kemudian diinkubasi dalam inkubator pada suhu 36-37℃

selama 18-24 jam.

VI. PEMBAHASAN
25
Penelitian ini bertujuan untuk melakukan pembuatan media dan mempersiapkan
peralatan untuk kerja mikrobiologi. Media pertumbuhan mikroorganisme adalah suatu
bahan yang terdiri dari campuran zat-zat makanan atau nutrisi yang diperlukan oleh
mikroorganisme untuk pertumbuhannya. Mikroorganisme memanfaatkan nutrisi di dalam
media berupa molekul-molekul kecil yang dirakit untuk menyusun komponen sel.
Dengan media, pertumbuhan dapat dilakukan dengan isolasi mikroorganisme menjadi
kultur murni dan juga memanipulasi komposisi media pertumbuhannya (Suhardi dkk.,
2015). Media mikroorganisme pada dasarnya digunakan untuk menumbuhkan,
mengisolasi, menguji sifat-sifat fisiologi, hingga sebagai alat dalam menghitung jumlah
mikroorganisme (Lay, 1994).
Media pertumbuhan dapat berupa cair (Broth), padat (agar), atau semisolid.
Media pertumbuhan pada media cair ditandai dengan kekeruhan media, sedangkan pada
media padat ditandai dengan terbentuknya koloni. Media semisolid umumnya
dipergunakan untuk melihat motilitas bakteri (Murwani, 2015). Persyaratan yang harus
dipenuhi dalam penyiapan media supaya mikroorganisme dapat tumbuh baik antara lain
(Dwidjosaputra, 2005):
1. Mengandung nutrisi yang mudah digunakan oleh mikroba
2. Mempunyai tegangan osmose, tegangan permukaan, dan pH yang sesuai
3. Tidak mengandung zat-zat penghambat
4. Steril.
Media yang digunakan pada praktikum kali ini adalah jenis media Nutrient Agar
(NA), Nutrient Broth (NB), dan media nutrient agar miring. NA (Nutrient Agar) adalah
medium yang digunakan sebagai media pertumbuhan bakteri. NA dibuat dengan
komposisi agar-agar yang sudah dipadatkan sehingga NA juga bisa disebut sebagai
nutrisi padat yang digunakan untuk menumbuhkan bakteri. Fungsi agar-agar hanya
sebagai pengental namun bukan zat makanan pada bakteri, agar dapat mudah menjadi
padat pada suhu tertentu. Medium Nutrient Agar adalah salah satu medium padat yang
memiliki komposisi yaitu agar-agar yang telah dipanaskan dan mencair dengan suhu
95℃ (Sandra, 2013). Komposisi untuk media NB sama dengan NA tetapi tidak memakai
agar sebagai pemadat. Proses pembuatannya pun lebih sederhana, tidak memerlukan
panas, peptone dan beef extract akan mudah larut sempurna pada air suhu kamar jika
diaduk (Yunilas, 2017). Perbedaan konsentris antara Nutrient Agar dengan Nutrient
Broth yaitu nutrient agar berbentuk padat dan Nutrient Broth berbentuk cair sehingga
disebut juga dengan media cairan nutrisi atau kaldu nutrisi (Munandar, 2016). Sedangkan
agar miring (​Slants Agar​) merupakan media yang dibuat meletakkan miring tabung reaksi
pada saat pendinginan dengan memperhatikan kemiringan luas permukaan yang kontak
dengan udara, yaitu tidak terlalu sempit atau tidak terlalu lebar serta jarak media tidak
terlalu dekat dengan mulut tabung karena memperbesar resiko kontaminasi. Media yang
diisi pada tabung reaksi berkisar 1/3 bagian dari tabung (Yunilas, 2017).
Nutrien Agar dibuat dengan cara, sebanyak 23 g media nutrien Agar dilarutkan
dalam air suling steril kemudian volumenya dicukupkan hingga 1 L dengan bantuan
pemanasan sampai semua bahan terlarut. Disterilkan dalam autoklaf pada temperatur
121℃ selama 15 menit. Sehingga diperoleh Nutrien Agar steril dan siap digunakan
sebagai media kultur bakteri. Teknik sterilisasi menggunakan autoklaf dipilih karena
koefisien dan sifat dari alat tersebut tidak merusak kandungan yang ada pada media
pertumbuhan yang dipakai (Permatasari dkk., 2013). good
Autoclave adalah alat yang digunakan untuk mensterilkan alat atau bahan dengan
uap air panas bertekanan. Tekanan yang digunakan pada umumnya 15 Psi atau sekitar 2
atm dan dengan suhu 121°C (250°F). Prinsip autoclave yaitu dengan menggunakan uap
air panas bertekanan untuk membunuh dan menghilangkan kotoran dan mikroba yang
terdapat pada alat atau bahan yang akan disterilkan (Andriani, 2016).
Nutrien Broth dibuat dengan cara, ditimbang media Nutrient Broth (NB)
sebanyak 8 g, lalu dilarutkan dalam air suling steril sedikit demi sedikit, kemudian
dicukupkan volumenya hingga 1 L dengan bantuan pemanasan sampai semua terlarut
sempurna. Disterilkan dalam autoklaf pada temperatur 121​℃​selama 15 menit. Setelah
 dilengkapi lagi, disesuaikan jurnalnya juga.
disterilkan didiamkan media hingga dingin. Sehingga diperoleh Nutrien Broth steril dan
siap digunakan sebagai media kultur bakteri. Teknik sterilisasi menggunakan autoklaf
dipilih karena koefisien dan sifat dari alat tersebut tidak merusak kandungan yang ada
pada media pertumbuhan yang dipakai (Permatasari dkk., 2013).
Media Agar Miring dibuat dengan cara, kedalam tabung reaksi steril dimasukkan
sebanyak 3 ml media Nutrien Agar steril, didiamkan pada temperatur kamar sampai
sediaan memadat pada posisi miring kira kira kemiringan 45oC. Kemudian disimpan
dalam lemari pendingin pada suhu 50℃. Sehingga diperoleh Media Agar Miring dan siap
digunakan sebagai media kultur bakteri. Tujuan dari diletakkan miring adalah untuk
memperluas permukaan sehingga banyak bakteri yang tumbuh. Hal yang harus
diperhatikan dari kemiringan media yaitu luas permukaan yang kontak dengan udara
tidak terlalu sempit atau tidak terlalu lebar, serta harus menghindari jarak media yang
terlalu dekat dengan mulut tabung karena memperbesar resiko kontaminasi.
Setelah bakteri dioleskan ke media, dilakukan inkubasi selama 24 jam. Inkubasi
bakteri dilakukan selama 24 jam karena pada waktu tersebut bakteri dimungkinkan telah
berada pada fase logaritmik atau eksponensial, pada fase tersebut bakteri melakukan
pembelahan secara konstan dan jumlah sel meningkat. Waktu 24 jam merupakan waktu
panen, dimana waktu tersebut telah berada pada fase logaritmik atau eksponensial yang
jumlah selnya terbanyak yaitu mencapai 10 sampai 15 milyar sel bakteri per mililiter
(Pelczar dan Chan, 2008). pembahasan hasil ujinya?

VII. KESIMPULAN isinya kok caker semua, hadehh 3

Media pertumbuhan mikroorganisme adalah suatu bahan yang terdiri dari

campuran zat-zat makanan atau nutrisi yang diperlukan oleh mikroorganisme untuk
pertumbuhannya. Pada penelitian ini dilakukan pembuatan 3 jenis media yaitu media NA,
NB, dan media agar miring. Pembuatan media NA dilakukan dengan cara 23 g media
nutrien agar dilarutkan dalam air suling steril kemudian volumenya dicukupkan hingga 1
L dengan bantuan pemanasan sampai semua bahan terlarut. Larutan disterilkan dalam
autoklaf pada temperatur 121℃ selama 15 menit. Media NB dapat dibuat dengan cara
ditimbang media Nutrient Broth (NB) sebanyak 8 g, lalu dilarutkan dalam air suling steril
sedikit demi sedikit, kemudian dicukupkan volumenya hingga 1 L dengan bantuan
 pemanasan sampai semua terlarut sempurna. Larutan disterilkan dalam autoklaf pada
temperatur 121​℃ selama 15 menit. Setelah disterilkan didiamkan media hingga dingin.
Sedangkan media agar miring dibuat dengan cara kedalam tabung reaksi steril
dimasukkan sebanyak 3 ml media Nutrien Agar steril, didiamkan pada temperatur kamar
sampai sediaan memadat pada posisi miring kira kira kemiringan 45​℃ untuk
memperluas permukaan sehingga banyak bakteri yang tumbuh. Kemudian disimpan
dalam lemari pendingin pada suhu 50℃.

VIII. DAFTAR PUSTAKA 10

Andriani, R. 2016. Pengenalan Alat-Alat Laboratorium Mikrobiologi Untuk Mengatasi
Keselamatan Kerja dan Keberhasilan Praktikum.​ Jurnal Mikrobiologi.​ 1(1) :1-7.
Dwidjosaputra. 2005. ​Dasar-dasar Mikrobiologi. J​ akarta: Djambatan.
Lay, B. 1994. ​Analisis Mikroba di Laboratorium. ​Jakarta: Raja Grafindo Persada.
Munandar, K. 2016. ​Pengenalan Laboratorium IPA-Biologi Sekolah.​ Bandung: Refika
Aditama.
​ alang: UB Press.
Murwani, S. 2015. ​Dasar-dasar Mikrobiologi Vteriner. M
Permatasari, T. D. A., Sumarlan, S. H., dan Susilo, B. Uji Pembuatan Marning Jagung
dengan Menggunakan Autoclave. ​Jurnal Keteknikan Pertanian Tropis dan
Biosistem,​ 1(1): 69-75.
Pelczar, Michael J., dan Chan, E. C. S. 2008. ​Dasar-Dasar Mikrobiologi Jilid I.​ Jakarta:
UI Press.
Rakhmawati, A. 2012. ​Penyiapan Media Mikroorganisme​. Yogyakarta: UNY Press.
Rismaya, K., Iis, K., Dewi, N., dan Asep, D. Pemanfaatan Air Rebusan Umbi Kuning dan
Ungu sebagai Media Alternatif Pertumbuhan ​Escherichia Coli dan
Staphylococcus Aureus.​ ​Jurnal Riset Kesehatan,​ 11(1): 269-276.
Rizki, Z. dan Syahnita, H. 2019. Pemanfaatan Bengkuang (​Pachhyrrhizus Erosus​) dan
Tauge (​Vigna Radiate)​ sebagai Media Alternatif untuk Pertumbuhan Bakteri
Escherichia Coli dan ​Staphylococcus Aureus. ​Jurnal Penelitian Kesehatan​, 6(1):
1-9.
Sandra. 2013. ​Mikrobiologi Umum.​ Jakarta: Erlangga.
 Suardana, I. W., Utama, I. H., dan Wibowo, M. H. 2014. Identifikasi ​E Colli 0157:H7
dari Feses Ayam dan Uji Profil Hemolisisnya pada Media Agar Darah. ​Jurnal
kedokteran hewan,​ 8(1): 1-5.
Suhardi, S. H., Koesnandar, D. K., Indriani, H., dan Arnaldo. 2015. ​Biosafety Pedoman
Keselamatan Kerja di Laboratorium Mikrobiologi dan Rumah Sakit.​ Jakarta: PT.
Multazam Mitra Prima.
Yunilas. 2017. ​Petunjuk Praktikum Mikrobiologi Peternakan.​ Medan: USU Press.

IX. LAMPIRAN 5
- Jurnal

Mengetahui Surakarta, 26 Oktober 2020

Asisten Pembimbing Praktikan

(Sherly Vega Andwi) (Kelompok 7)

 BioLink Vol. 4 (1) Agustus 2017 p-ISSN: 2356-458x e-ISSN:2597-5269

BioLink
JURNAL BIOLOGI LINGKUNGAN, INDUSTRI, KESEHATAN

Available online http://ojs.uma.ac.id/index.php/biolink

SKRINING FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK

ETANOL DAUN SANGITAN (Sambucus javanica Reinw) TERHADAP
PERTUMBUHAN BAKTERI Eschericia coli DAN Salmonella thypi
Scrining Fitochemism And Test of Antibacterial Activity of Extract
Etanol Leaf Leaves (Sambucus javanica Reinw) on Growth Bacteria
Eschericia coli and Salmonella thypi
Eva Sartika Dasopang
Fakultas Farmasi, Universitas Tjut Nyak Dhien
Gg. Rasmi No.28, Sei Sikambing C. II, Medan Helvetia, Kota Medan

*Corresponding author: E-mail: evasartikadasopang@yahoo.com

Abstrak
Daun sangitan (Sambucus javanica Reinw) sering dijumpai tetapi kurang diperhatikan. Bagian daun dari tumbuhan
sangitan digunakan untuk mengobati pembengkakan, insektisida, antidiare, antiinfeksi, luka, menghaluskan kulit
karena mengandung senyawa kimia flavonoid, glikosida, glikosida antrakinon, saponin, steroid/ triterpenoid dan
tanin. Hasil skrining ekstrak etanol daun sangitan (Sambucus javanica Reinw) mengandung senyawa alkaloid,
flavonoid, glikosida, glikosida antrakinon, saponin, steroid/triterpenoid dan tanin. Ekstraksi daun sangitan
dilakukan dengan maserasi menggunakan etanol 96%. Pengujian aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun
sangitan dilakukan secara in vitro dengan metode difusi sumuran dengan konsentrasi 500, 400,300,200 dan 100
mg/ml. Penelitian ini menggunakan cotrimosazole sebagai pembanding dan etanol 96% sebagai kontrol negatif.
Ekstrak etanol daun sangitan menunjukan aktivitas anti bakteri terhadap bakteri Eschericia coli dan Salmonella
thypi pada konsentrasi 500 mg/ml masing masing 16,11 mm dan 17,04 mm yang tergolong kuat tetapi jika
dibandingkan dengan antibiotik cotrimosazole 10 mg/ml terlihat diameter hambat ekstrak etanol daun sangitan
masih jauh lebih rendah yaitu 30,35 mm pada bakteri Eschericia coli dan 33,15 mm pada bakteri Salmonella thypi
sedangkan ekstrak etanol tidak menunjukan daya hambat.

Kata kunci:Skrining Fitokimia, Salmonella thypi, ekstrak daun sangitan, Eschericia coli

Abstract
Leaves of sangitan (Sambucus javanica Reinw) are often found but noticed. The leaf part of the sangitan plant is used
to treat swelling, insecticides, antidiarrheal, antiinfectives, wounds, smoothing the skin as it contains flavonoid
chemical compounds, glycosides, anthracton glycosides, saponins, steroids / triterpenoids and tannins. Screening
results of ethanol extract of sour leaves (SambucusjavanicaReinw) contain alkaloid compounds, flavonoids, glikosida,
antrakinon glycosides, saponins, steroids / triterpenoids and tannins. The extraction of sangitan leaves was done by
maceration using 96% ethanol. Examination of antibacterial activity of ethanol extract of sangitan leaves was done in
vitro by diffusion method of wells with concentrations of 500, 400, 300, 200 and 100 mg / ml. This study used
cotrimosazole as a comparator and 96% ethanol as a negative control. The extract of ethanol leaves sangitan showed
anti bacterial activity against bacteria Eschericia coli and Salmonella thypi at concentration 500 mg / ml respectively
16,11 mm and 17,04 mm which is classified strong but when compared with antibiotic cotrimosazole 10 mg / ml
visible diameter of inhibit ethanol extract Leaves sangitan still much lower that is 30,35 mm in bacterium Eschericia
coli and 33,15 mm in Salmonella thypi bacteria whereas ethanol extract do not show inhibitory power.

Keywords: Phytochemical Screening, Salmonella thypi, Sebitan leaf extract, Escherichia coli

How to Cite: Dasopang, E.S. 2017, Skrining Fitokimia dan Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun
Sangitan (Sambucus javanica Reinw), Jurnal BioLink, Vol. 4 (1): Hal. 54-62
54
 BioLink, Vol. 4 (1) Agustus 2017: hal. 54-62
PENDAHULUAN
Tumbuhan yang digunakan untuk
pengobatan sangat banyak namun yang
mempunyai data ilmiah sedikit. Salah
satu tumbuhan yang dikenal dengan
memiliki khasiat untuk pengobatan
adalah tumbuhan sangitan (Sambucus
javanica Reinw) sangatlah perlu
diperoleh data ilmiah untuk meyakinkan
akan khasiat tumbuhan tersebut. Bagian
yang digunakan sebagai obat adalah
akar, batang daun dan bunga yang
dijemur sampai kering dan disimpan.
Kandungan yang dimiliki daun sangitan
adalah alkaloid, saponin, flavonoid, beta
sitosterol. Daun sangitan ini sangat
pahit, kelat berkhasiat menghilangkat
pembengkakan, insektisida, diare,
antiinfeksi, luka , menghaluskan kulit.
Melihat kandungan kimia dan
kegunaan daun sangitan salah satunya
sebagai antidiare, maka saya ingin
meneliti aktivitas antibakteri daun
sangitan terhadap bakteri penyebab
diare yaitu Salmonella thypi dan
Eschericia coli. Diare sering dianggap
gangguan penyakit yang ringan, namun
penanganan yang tidak tepat atau
terlambat sering kali menimbulkan
kematian.
Bakteri Eschericia coli adalah
bakteri yang termasuk dalam
enterobakteriaceae yaitu kelompok
besar batang gram negatif yang
heterogen, yang habitat alamiahnya ada
di saluran pencernaan manusia dan
hewan. Salmonella thypi merupakan
bakteri gram negatif, tidak berspora,
tanpa fimbria, dan mempunyai flagel
peritrik. Infeksi Salmonella thypi terjadi
pada saluran cerna dan kadang
menyebar lewat peredaran darah
keseluruh organ tubuh.
55
METODE PENELITIAN
Penelitian dilakukan di
Laboratorium Mikrobiologi Fakultas
Farmasi Universitas Tjut Nyak Dhien.
Waktu penelitian dilakukan selama lebih
kurang 4 (empat) bulan terhitung dari
bulan Mei 2016 sampai Agustus 2016.
Metode penelitian dilakukan
secara eksperimental dan deskriptif.
Penelitian eksperimental yaitu untuk
mengetahui pengaruh variabel bebas
dengan variabel terikat. Dalam
penelitian ini yang dimaksud dengan
variabel bebas adalah konsentrasi
ekstrak etanoll daun sangitan
(Sambucus javanica Reinw) dengan
konsentrasi 500,400,300,200 dan 100
mg/ml, sedangkan variabel terikatnya
adalah diameter daerah hambat yang
diukur dalam satuan milimeter (mm).
Penelitian desktiptif dimaksud untuk
mengidentifikasi senyawa aktif yang
terkandung di dalam daun sangitan
menggunakan skrining fitikimia.
Pengambilan sampel daun pandan
wangi dilakukan secara purposif yaitu
tanpa membandingkan dengan
tumbuhan serupa dari daerah lain.
Sampel yang digunakan adalah daun
sangitan (Sambucus javanica Reinw)
yang masih segar yang diambil di desa
Sionggang Tengah Kec. Lumban Julu
Sumatera Utara.
Prosedur kerja
Biakan uji mikroba
Biakan bakteri murni Salmonella
Typhi dan Escherichia coli diperoleh
dari Laboratorium Kesehatan Daerah
(LAB.KESDA) Medan.
 Dasopang, E.S, Skrining Fitokimia dan Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun
Identifikasi tumbuhan
Identifikasi tumbuhan dilakukan di
Herbarium Mendanense (MEDA)
Universitas Sumatera Utara, Medan.
Pengolahan Bahan Simplisia
Bahan sampel yang di gunakan
adalah Daun Sangitan sebanyak 5 kg
yang masih segar, dicuci bersih dengan
air mengalir, ditiriskan lalu dikeringkan
dalam lemari pengering pada suhu 400C
hingga kering. Daun sangitan dianggap
kering bila rapuh (diremas menjadi
hancur), kemudian daun sangitan kering
diserbuk dengan menggunakan blender
dan ditimbang berat serbuk keringnya.
Serbuk simplisia disimpan dalam wadah
tertutup baik terlindung cahaya
matahari dan terhindar dari panas.
Pembuatan larutan pereaksi
Larutan Asam Klorida 2 N
Sebanyak 16,67 ml asam klorida
pekat diencerkan dalam air suling
sehingga volume 100 ml.
Larutan Asam Sulfat 2N
Sebanyak 5,4 asam sulfat pekat
diencerkan dalam air suling hingga
volume 100 ml.
Larutan Besi (III) Klorida 1%
Sebanyak 1 g besi (III) klorida
dilarutkan sedikit demi sedikit dalam
asam klorida 0,5 N dan volume
dicukupkan hingga 100 ml.
Pereaksi Bouchardart
Sebanyak 4 gr kalium Iodida
dilarutkan dalam air suling kemudian 2
g iodium dilarutkan sedikit demi sedikit
kedalamnya, setelah semuanya larut
56
ditambahkan air suling hingga volume
100 ml.
Pereaksi Dragendrorff
Sebanyak 0,85 g bismuth (III)
nitrat dilarutkan sedikit demi sedikit
dalam asetat glasial hingga volume 100
ml kemudian ditambahkan 40 ml air
suling. Pada wadah lain 8 g kalium
iodide dilarutkan sedikit demi sedikit
dalam air suling hingga voliume 20 ml,
kedua larutan dicampur sama banyak.
Kemudian ditambahkan 20 ml asam
asetat glasial dan diencerkan dengan air
suling hingg 100 ml.
Pereaksi Mayer
Sebanyak 1,35 g raksa (II) klorida
dilarutkan sedikit demi sedikit dalam air
suling hingga volume 60 ml. Kemudian
pada wadah lain sebanyak 5 g kalium
iodida dalam 10 ml air lalu kedua
larutan dicampurkan dan volume
dicukupkan dengan air suling hingga
100 ml.
Pereaksi Molish
Sebanyak 3 g alfa naftol ditimbang,
kemudian dilarutkan dalam asam nitrat
0,5 N hingga volume 100 ml.
Larutan Natrium Hidroksida 2 N
Sebanyak 8,002 g natrium
hidroksida pelet dilarutkan sedikit demi
sedikit dalam air suling hingga volume
100 ml.
Larutan Timbal (II) Asetat 0,4 M
Sebanyak 15,17 g timbal (II) asetat
dilarutkan sedikit demi sedikit dalam air
suling bebas karbondioksida hingga
volume 100 ml.
 BioLink, Vol. 4 (1) Agustus 2017: hal. 54-62
Pembuatan ekstrak
Pembuatan ekstrak etanol daun
sangitan dilakukan dengan metode
maserasi menggunakan pelarut etanol
96%. Caranya 200 g serbuk simplisia
dimasukan kedalam sebuah bejana,
dituangi dengan 1500 ml etanol etanol
96% ditutup, dibiarkan selama 5 hari
terlindung dari cahaya sambil di aduk.
Setelah 5 hari campuran tersebut
diserkai. Ampas dicuci dengan etanol
96% secukupnya ingga diperoleh 2000
ml. Pindahkan kedalam bejana tertutup,
dibiarkan ditempat sejuk, terlindung
dari cahaya selama 2 hari. Kemudian
dienap tuangkan. Dipekatkan dengan
alat rotary evaporator pada temperatur
tidak lebih dari 500C sampai diperoleh
ekstrak semi kental, kemudian diuapkan
dengan bantuan penangas air agar
hasilnya kental.
Pembuatan konsentrasi uji ekstrak
etanol daun sangitan dan
cotrimosazole.
Ekstrak etanol ditimbang 5 g
kemudian dilarutkan dengan etanol
sampai dengan 10 ml untuk konsentrasi
500 mg/ml. Setelah itu dilakukan
pengenceran 400,300,200 dan 100
mg/ml. Dan konsentrasi cotrimosazole
10mg/10 ml.
Skrining Fitokimia
Identifikasi alkaloid
Identifikasi alkaloid dilakukan
dengan metode Mayer, Wagner dan
Dragendroff. 0,5 g serbuk simplisia
ditambahkan 20 ml HCl 2N, dipanaskan
diatas penangas air selama 2 menit,
didinginkan dan disaring. Filtrat dibagi
menjadi 3 bahagian dan masing masing
ditambahkan pereaksi Mayer, Wagner
dan Dragendroff.
57
Identifikasi Flavonoid
Sebanyak 10 g serbuk simplisia di
tambahkan 10 ml etanol, direfluks
selama 10 menit, di saring panas melalui
kertas saring. Filtrat diencerkan dengan
10 ml aquadest. Setelah dingin
ditambahkan 5 ml eter minyak tanah,
dikocok hati-hati, lalu didiamkan
sebentar.kemudian di ambil lapisan
etanol, diuapkan pada suhu 400C,
sisanya dilarutkan dalam 5 ml etil
asetat, disaring. Filtratnya digunakan
sebagai larutan uji untuk flavonoid
dengan cara sebanyak 1 ml larutan uji
diuapkan sampai kering, sisa di larutkan
dalam 2 ml etanol 96%, ditambah 0,1 g
serbuk magnesium dan 10 tetes klorida
pekat.
Identifikasi tanin
Sebanyak 1 g serbuk simplisia di
didihkan selama 15 menit dalam 10 ml
aquadest lalu didinginkan dan disaring.
Filtrat diencerkan sampai hampir tidak
berwarna, lalu ditambahkan 1-2 tetes
pereaksi FeCl3 1%.
Pemeriksaan Glikosida
Sedikit serbuk simplisia dimasukan
dalam erlenmeyer ditambah etanol
sampai terendam, direfluks selama 1
jam, didinginkan dan disaring.
Kemudian filtrat ditambahkan timbal
(II) asetat 0,4 M dan aquadest 20 ml:20
ml, didiamkan sampai endapan turun,
disaring. Filtrat disari dengan kloroform
18 ml dan isopropanol 12 ml di dalam
corong pisah, dikocok sampai terbentuk
2 lapisanyaitu lapisan atas (gula) dan
lapisan bawah (non gula).
Lapisan atas:
Sebanyak 1 ml larutan percobaan
dimasukan ke dalam tabung reaksi dan
diuapkan diatas penangas air selama
 Dasopang, E.S, Skrining Fitokimia dan Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun
setengah jam. Kemudian ditambahkan 2
ml air dan 5 tetes pereaksi Molish,
kemudian secara perlahan ditambahkan
2 ml asam sulfat pekat melalui dinding
tabung, terbentuk cincin warna
coklat/coklat keunguan/ungu pada
batas antara kedua cairan menunjukan
adanya ikatan gula.
Lapisan bawah:
Sebanyak 5 ml kedalam cawan
diuapkan sampai kering kemudian
ditambahkan 3 tetes asam asetat
anhidrida dan 3 tetes asam sulfat pekat.
Bila terbentuk warna ungu/ ungu
kemerahan menunjukan adanya steroid.
Uji glikosida bisa juga dilakukan dengan
cara: Sedikit sampel ekstrak etanol
dimasukan kedalam tabung reaksi
ditambah aquades lalu ditambahkan 5
tetes Fehling A dan 5 tetes Fehling B
dipanaskan sampai terbentuk warna
bata/kuning jingga.
Pemeriksaan Glikosida Antrakinon
Sedikit sampel ekstrak etanol
dimasukan kedalam erlenmeyer
ditambahkan etanol sampai terendam,
ditambahkan 2 ml larutan FeCl3 1%
ditambahkan asam klorida pekat sampai
pH asam direfluks selama 30 menit
setelah mendidih. Setelah dingin,
masukan kecorong pisah ditambahkan
10 ml benzen, dikocok ditambah 2 ml
larutan NaOH 2 N, didiamkan. Lapisan
NaOH bewarna merah menunjukan
adanya glikosida antrakuinon.
Identifikasi saponin
Sedikit sampel ekstrak etanol
dimasukan dalam tabung reaksi,
ditambahkan aquades panas,
didinginkan dan dikocok kuat-kuat
selama 10 detik. Jika terbentuk buih
58
yang mantap selama kurang lebih 10
menit setinggi 1 cm sampai 10 cm dan
tidak hilang dengan penambahan 2
tetesasa klorida 2 N menunjukan adanya
saponin.
Identifikasi steroid/triterpenoid
Sedikit sampel ekstrak etanol
dimasukan kedalam erlenmeyer
ditambahkan n heksan sampai terendam
direfluks minimal 2 jam, disaring. Filtrat
10 ml dimasukan kedalam cawan
porselin diuapkan sampai kering,
sisanya ditambahkan pereaksi
Liebermann-Bauchard (asam asetat
anhidrida 3 tetes dan asam sulfat pekat
3 tetes). Bila terbentuk warna
ungu/ungu kemerahan menunjukan
adanya triterpenoid sedangkan bila
terbentuk warna biru/biru hijau
menunjukan adanya steroid.
Pembuatan media
Media Mueller Hinton Agar (MHA)
Sebanyak 23 g media Mueller
Hinton Agar dilarutkan ke dalam air
suling steril yang secara sedikit demi
sedikit, kemudian volumenya
dicukupkan hingga 1 L dengan bantuan
pemanasan sampai terlarut sempurna.
Disterilkan dalam autoklaf pada
temperatur 121oC selama 15 menit.
Media Nutrien Agar (NA)
Sebanyak 23 g media nutrien Agar
dilarutkan dalam air suling steril
kemudian volumenya dicukupkan
hingga 1 L dengan bantuan pemanasan
sampai semua bahan terlarut.
Disterilkan dalam autoklaf pada
temperatur 121oC selama 15
menit.Setelah media NA disterilkan,
masukan sebanyak 5 ml kedalam tabung
 BioLink, Vol. 4 (1) Agustus 2017: hal. 54-62
reaksi steril, kemudian diamkan pda
temperatur kamar sampai sediaan
memadat pada posisis miring kira-kira
450C. Kemudian disimpan dalam lemari
pendingin 50C.Setelah media NaA
mengeras dalam bentuk miring,
digoreskan koloni bakteri pada media
tersebut dengan menggunakan jarum
ose steril. Kemudian diinkubasi dalam
inkubator pada suhu 36-37 0C selama
18-24 jam.
Media Nutrien Broth (NB)
Ditimbang media Nutrient Broth
(NB) sebanyak 8 g, lalu dilarutkan dalam
air suling steril sedikit demi sedikit,
kemudian dicukupkan volumenya
hingga 1 L dengan bantuan pemanasan
sampai semua terlarut sempurna.
Disterilkan dalam autoklaf pada
temperatur 121oC selama 15 menit.
Setelah disterilkan didiamkan media
hingga dingin, kemudian masukan 10 ml
kedalam tabung reaksi steril dan ambil
koloni bakteri dari stok kultur dengan
menggunakan jarum ose lalu
disuspensikan dalam tabung reaksi yang
telah berisi 10 ml larutan Nutrien broth.
Ukur kekeruhan larutan pada panjang
gelombang 580 nm sampai diperoleh
transmitan 25%( konsentrasi bakteri
1x106 CFU/ml.
Pembuatan Agar miring
Kedalam tabung reaksi steril
dimasukkan sebanyak 3 ml media
Nutrien Agar steril, didiamkan pada
temperatur kamar sampai sediaan
memadat pada posisi miring kira kira
kemiringan 45oC. Kemudian disimpan
dalam lemari pendingin .
59
Pembuatan suspensi standar
Mc.Farland
Larutan asam sulfat 1% 9,5 ml
ditambahkan larutan barium klorida
1,175% b/v 0,5 ml dikocok homogen
sehingga diperoleh suspensi dengan
tingkat kekeruhan yang dikenal dengan
standar Mc.Farland.Apabila kekeruhan
suspensi bakteri uji sama dengan
kekeruhan suspensi standar Mc.farland,
maka konsentrasi suspensi bakteri
adalah 108 CFU/ml.
Pembuatan inokulum
Koloni bakteri yang diremajakan
pada media NA diambil dari stok kultur
dengan menggunakan jarum ose steril,
lalu disuspensikan kedalam tabung
reaksi yang berisi 10 ml larutan media
nutrien broth (NB). Kemudian
kekeruhan dibandingkan dengan
kekeruhan Mc.Farland makan
konsentrasi bakteri 108
CFU/ml.Selanjutnya dipipet 0,1 ml
suspensi bakteri 108 koloni/ml,
dimasukan ke dalam tabung reaksi yang
berisi 10 ml NB, kocok homogen maka
diperoleh suspensi bakteri dengan
konsentrasi 106CFU/ml.
Pengujian antibakteri
Pengujian antibakteri dilakukan
terhadap ekstrak etanol dengan metode
difusi agar menggunakan pencadang
logam.dengan cara sebanyak 0,1 ml
inokulum bakteri dimasukan kedalam
cawan petri steril, dituang 20 ml MHA
pada suhu 45oC, kemudian cawan petri
digoyang hingga permukaan merata,
kemudian dibiarkan sampai media
dingin memadat.pada media yang telah
padat ditanam cincin pencadang logam
dan diatur jaraknya, kemudian pada
masing masing pencadang dimasukan
 Dasopang, E.S, Skrining Fitokimia dan Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun
ekstrak dengan berbagai konsentrasi.
Cawan petri dibungkus dengan
perkamen dan diinkubasi pada suhu 36-
37oC selama 18-24 jam. Setelah 24 jam
diukur dameter daya hambat daerah
bening yang terbentuk disekitar cincin
pencadang logam dengan menggunakan
jangka sorong. Pengujian dilakukan
sebanyak 3 kali pengulangan
Prosedur Kerja
Melakukan pengambilan sampel
yang mengacu pada Rugayah et al.
(2004) dimana diusahakan memperoleh
koleksi yang subur (fertil), dan
mengambil semua bagian yang ada pada
tumbuhan tumbuhan bawah tersebut,
mencatat parameter yang terdapat di
lapangan, antara lain tempat hidup,
warna pada daun, bunga, aroma daun
dan lain–lain. Lalu mengoleksi sampel
tumbuhan dan memberikan label
gantung pada tiap sampel yang
dikoleksi, kemudian dibuat menjadi
spesimen koleksi dengan meletakkan
spesimen di antara kertas koran dan
diawetkan dengan alkohol 70% untuk
mencegah kontaminasi jamur dan
pembusukan.Setelah pengamatan di
lapangan berakhir, tumbuhan bawah
yang telah dikoleksi dibuka kembali dan
disusun sedemikian rupa untuk
dikeringkan dalam oven pengering pada
temperatur ± 60º C selama 24 jam.
Setelah spesimen telah benar-benar
kering diidentifikasi dengan
menggunakan buku-buku identifikasi.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Ekstraksi Tumbuhan
Berdasarkan hasil maserasi 200 g
serbuk sangitan dengan etanol 96%
60
diperoleh ekstrak kental sebanyak 39,7
g. Ekstrak yang diperoleh diuji dengan
berbagai konsentrasi terhadap bakteri
Escherichia coli dan Salmonella typhi.
Hasil skrining Fitokimia
Hasil skrining fitokimia
menunjukkan hasil alkaloid, tanin,
saponin,glikosida, glikosida antrakinon
dan steroid/triterpenoid.Senyawa
senyaewa tersebut tertarik disebabkan
oleh sifat etanol yang memiliki gugus
hidriksil polar dan gugus alkil yang
bersifat non polar.Menurut Robinson
senyawa flavonoid, saponin dan
steroid/triterpenoid merupakan
senyawa kimia yang memiliki potensi
sebagai antibakteri dan antivirus.
Senyawa flavonoid yang terdapat di
dalam serbuk daun sangitan
memanfaatkan gugus alkohol yang
mengandung OH dalam merusak
dinding sel, dan penyusun dinding sel
bakteri yang terdiri atas peptodoglikan,
lipid dan asam amino akan berekasi
dengan gugus alkohl pada senyawa
flavonoid sehingga dinding sel
mengalami kerusakan dan senyawa
tersebut dapat masuk ke dalam inti sel
bakteri dan berkontak dengan DNA
bakteri sehingga sel bakteri mengalami
lisis dan bakteri akan mati.
Saponin adalah senyawa aktif kuat
yang berperan sebagai antibakteri
dengan cara merusak membran
sitoplasma sehingga menyebabkan
bocornya metabolit yang
menginaktifkan sistem enzim bakteri.
Kerusakan pada membran sitoplasma
dapat mencegah masuknya bahan-
bahan makanan atau nutrisi yang
dibutuhkan oleh bakteri untuk
menghasilkan energi dan akibatnya
 BioLink, Vol. 4 (1) Agustus 2017: hal. 54-62

bakteri akan mengalami hambatan Hasil uji aktivitas antibakteri

pertumbuhan dan bahkan kematian. ekstrak etanol daun sangitan (Sambucus
Glikosida yang ditunjukan oleh hasil javanica Reinw) dengan konsentrasi
skrining merupakan glikosida 500,400,300,200 dan 100 ml dilakukan
triterpenoid yang mekanisme untuk mengetahui seberapa besar
antibakterinya sama dengan saponin hambatan terhadap bakteri Escherichia
dalam menghancurkan sel bakteri. coli dan Salmonella typhi pada setiap
Hasil Uji Aktivitas Antibakteri konsentrasinya dapat dilihat pada grafik
Ekstrak Etanol Daun Sangitan Terhadap dibawah ini.
Bakteri Escherichia coli dan Salmonella
typhi.

35
30
25
20
15
Escherichia coli
10
Salmonella typhi
5
0

Gambar 1. Hasil pengukuran Diameter hambatan ekstrak etanol daun sangitan terhadap
bakteri Escherichia coli dan Salmonela typhi
Hasil uji aktivitas antibakteri pada mm. Sedangkan diameter daya hambat
grafik 1 menunjukan semakin besar terhadap bakteri Salmonella typhi dari
konsentrasi ekstrak etanol daun sangitan konsentrasi 500, 400,300,200 dan 100
semakin besar diameter daya hambatan mg/ml adalah 17,04 mm, 15,31 mm,
pertumbuhan bakteri Escherichia coli 13,43 mm, 10,73 mm, 7,81 mm. Terlihat
dan Salmonella typhi. Hal ini disebabkan diameter hambatan pertumbuhan
semakin banyak zat aktif antibakteri bakteri Escherichia coli lebih kecil
yang terkandung di dalamnya dengan dibanding diameter hambatan
meningkatnya konsentrasi.. Dari grafik pertumbuhan bakteri Salmonella typhi.
dapat dilihat konsentrasi 500 mg/ml Berarti ekstrak etanol daun sngitan lebih
menunjukan daya hambat untuk bakteri kuat menghambat bakteri Salmonella
Escherichia coli 16,11mm, pda typhi dibandingkan Escherichia coli
konsentrai 400 mg/ml diameter daya disebabkan kandungan zat aktif yang
hambar 14,06 mm, konsentrasi 300 bersifat antibakteri pada daun sangitan
mg/ml daya hambat sebesar 12,01mm, lebih kuat bekerja terhadap bakteri
pada konsentrasi 200 mg/ml datya Salmonella typhi.
Jika dibandingkan dengan
hambat 10,11mm dan pada konsentrasi cotrimosazole 10mg/10 ml terlihat
100 mg/ml diameter daya hambat 7,31 diameter daya hambat ekstrak etanol
61
 Dasopang, E.S, Skrining Fitokimia dan Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun
daun sangitan masih sangat rendah.Hal
ini disebabkan antibiotik cotrimosazole
sudah dalam keadaan muri dan pelarut
etanol tidak menunjukan daya hambat
terhadap kedua bakteri tersebut.
Berdasarkan Farmakope Indonesia,
syarat daerah hambat efektif apabila
menghasilkan batas daerah hambat
dengan diameter lebih kurang 14 mm.
Menurut Fatmawati dan Wiyono kriteria
kekuatan daya hambat antibakteri adalah
sebagai berikut: diameter zona hambat 5
mm atau kurang dikategorikan lemah,
zona hambat 5-10 mm dikategorikan
sedang, 10-20 mm dikategorikan kuat
dan lebih dari 20 mm dikategorikan
sangat kuat. Berdasarkan keriteria
tersebut ekstrak etanol daun sangitan
mempunyai daya hambat kategori kuat.
SIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian maka
diperoleh kesimpulan bahwa hasil
skrining fitokimia pada serbuk simplisia
daun sangitan (Sambucus javanica
Reinw) meninjukan adanya senyawa
alkaloid, flavonoid, glikosida, glikosida
antrakuinon,saponin, tanin dan
triterpenoid. Hasil uji antibakteri
menunjukan bahwa ekstrak etanol daun
sangitan (Sambucus javanica Reinw)
mempunyai aktivitas antibakteri
terhadap Escherichia coli dan Salmonella
typhi dan semakin besar konsentrasi
ekstrak yang digunakan maka semakin
besar daya hambat yang dihasilkan.
DAFTAR PUSTAKA
Adisastomito,W.2007. Faktor Risiko Diare pada
Balita di Indonesia: Systematyc Review
Penelitian Akademik Bidang Kesehatan
Masyarakat, Makara Kesehatan1 (11) hal 1-
10
62
Ardanaruddin,a., Winarsih dan M.Widayat.2006.
Uji Efektifitas Dekok Bunga Belimbing
Wuluh (Averrhoa bilimbi) sebagai
Antimikroba Terhadap Bakteri Salmonella
typhi Secara In vitro. Jurnal Kedokteran
Brawijaya. Volume 20 (1) hal 3-7
Badan POM RI.2012. Pedoman Teknologi
Formulasi Sediaan Berbasis Ekstrak.
Volume 1.hal 13
Dalimartha.S.2007. Atlas Tumbuhan Obat
Indonesia .Jilid II. Cetakan Kesembilan.
Jakarta: Trubus Agriwidya
Erna.2012. Uji Aktivitas Antibakteri Air Rebusan,
Ekstrak Etil Asetat dan Ekstrak Etanol
Cacing Tanah Terhadap Bakteri
Staphylococcus aureus. Skripsi: Fakultas
Farmasi Universitas Tjut Nyak Dhien
Fatima Yanti dan Wiyono.2012.Uji Aktivitas
Antibakteri Ekstrak Etanol Daun
Mayana(Coleus atropurpureus L)
terhadap Staphylococcus aureus,
Escherichia coli dan Pseudomonas
aeruginosa Secara In vitro.Manado:
Fakultas MIPA Universitas Sam Ratulangi
Fauzia.2013.Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daging
Buah Mahkota Dewa (Phalerimacrocarpa
(Scheff) Boerl) Terhadap Bakteri
Staphylococcus aureus. Jakarta: Fakultas
Farmasi Universitas Indonesia
Kemenkes.2012. Profil Kesehatan Indonesia
Tahun 2011.Kemenkes RI.Jakarta.
Kusmayati dan Agustini. 2007. Uji Senyawa
Antibakteri dari
Mikroalaga(Porphyridium cruentum),J
Biod.8(1). Hal 48-153
Reveny,J.2011.Daya Antimikroba Ekstrak dan
Fraksi Daun Sirih (piper betle Linn) Jurnal
Ilmu Dasar. Vol12(1). Hal 6-12
Robinson,T.1995. Kandungan Organik
Tumbuhan Tingkat Tinggi. Penerbit ITB.
Bandung.Hal 36-45
Radji,M.2010. Buku Ajar Mikrobiologi Panduan
Mahasiswa Farmasi dan
Kedokteran.Jakarta:EGC.Hal 110-130
Zulyusri.2013. Keefektifan Daun Sangitan
(Sambucus javanica Reinw) sebahai
Insektisida Nabati dalam Pengendalian
Rayap Tanah (Coptotermes sp). .
Prosiding Semirata FMIPA Universitas
Lampung.