Nama Dosen:
TIM DOSEN ELUSIDASI STRUKTUR
27/09/2022 1
AGENDA
1. PENDAHULUAN
2. TUJUAN PURIFIKASI
3. METODE-METODE PURIFIKASI
4. UJI KEMURNIAN (Purity test)
5. KESIMPULAN
27/09/2022 2
PENDAHULUAN
• Tumbuhan, hewan, mikroorganisme dan mineral mengandung senyawa bahan
alam yang sangat kompleks.
• Purifikasi adalah proses pemurnian senyawa dari campuran senyawa kompleks
dan/atau pengotor.
27/09/2022 3
TUJUAN PURIFIKASI
• Untuk memperoleh senyawa murni.
• Memudahkan proses elusidasi struktur.
• Memudahkan penentuan dosis dalam penemuan obat.
27/09/2022 4
METODE-METODE PURIFIKASI SENYAWA BAHAN ALAM
27/09/2022 5
1. Kromatografi: HPLC
27/09/2022 6
Proses pemurnian dengan HPLC
Peak dikoleksi
berdasarkan RT 10 menit
Peak dikoleksi
berdasarkan
threshold
27/09/2022 7
1. Kromatografi: TLC-P (KLTP)
• Pemisahan berupa pita
berdasarkan tingkat kepolaran.
• Pita yang terisolasi diambil dan
dimasukkan ke vial.
• Serbuk mengandung senyawa
terisolasi dan silika gel.
• Senyawa kemudian dipisahkan
dengan pelarut yang cocok.
27/09/2022 8
2. REKRISTALISASI
• Senyawa harus larut pada
solvent panas dan tidak larut
saat dingin.
• Metode ini didasarkan pada
perbedaan kelarutan antara
senyawa dengan pengotor.
27/09/2022 9
3. DESTILLASI
• Pemurnian senyawa yang
berbentuk cair, misalnya mintak
atsiri.
• Proses purifikasi berdasarkan
perbedaan titik didih.
27/09/2022 10
UJI KEMURNIAN
1. KLT ANALITIK
2. KLT 2 DIMENSI
3. KLT MULTI ELUEN
4. HPLC
5. NMR
6. MS
27/09/2022 11
1. KLT-analitik
• Senyawa murni menunjukkan
single spot pada lempeng KLT.
27/09/2022 12
2. KLT-2D
• Pemastian kemurnian diuji berdasarkan konsistensi spot tetap tunggal
dengan 2x penegmbangan.
Isolat
27/09/2022 13
3. KLT-ME
• Pemastian kemurnian diuji berdasarkan konsistensi spot tetap tunggal
dengan berbagai variasi eluen.
27/09/2022 14
4. HPLC
Impure compound
• Peak yang terdeteksi
harus menunjukkan peak
tunggal.
Pure compound
27/09/2022 15
5. NMR
27/09/2022 16
KESIMPULAN
1. Purifikasi senyawa bahan alam dapat dilakukan dengan beberapa
metode, yaitu: kromatografi, destillasi dan rekristalisasi.
2. Senyawa bahan alam yang telah dimurnikan akjan memudahkan
dalam proses menentukan struktur dan dosis senyawa bahan alam.
27/09/2022 17
Terima kasih
27/09/2022 18