MAKALAH

MEDIA PADAT
(Agar Darah, Agar Coklat, Lowenstein Jenssen Agar, dan Loeffler Agar)
Disusun untuk memenuhi praktikum Mata Kuliah Media
Dosen Pengampu : Isti Sofia Insani, S.Si.,M.Kes

Disusun Oleh :

Ariq Martin Rahman 2111E1047

Chairul Yasir Nugraha 2111E1004
Melisa Laila Supina Siregar 2111E1020
Muhammad Rafif Dzaki 2111E1039
Raflina Mahmudah 2111E1041
Rafly Arrachman 2111E1023
Rika Herayani 2111E1046
Yanneswita 2111E1048
Yuniar Dillyana Said 2111E1045

PROGRAM STUDI D3 ANALIS KESEHATAN

SEKOLAH TINGGI ANALIS BAKTI ASIH BANDUNG
Jl. Padasuka Atas No. 233 Bandung 40192
 KATA PENGANTAR
Puji dan syukur atas kehadirat Allah SWT yang telah memberikan nikmat dan rahmat-
Nya, sehingga kami dapat menyelesaikan tugas mata kuliah Media (Praktikum) dengan
judul “Media Padat (Agar Darah, Agar Coklat, Lowenstein Jenssen Agar, dan Loeffler
Agar)”. Shalawat dan salam tidak lupa kami haturkan kepada junjungan alam, Nabi Besar yakni
Nabi Muhammad SAW yang telah membawa kita dari zaman kegelapan menuju zaman yang
penuh dengan ilmu pengetahuan seperti saat ini.
Dalam penyususunan makalah ini kami menyadari bahwa penulisan ini tidak dapat
terselesaikan tanpa adanya bantuan dan dukungan dari berbagai pihak secara moril maupun
material. Oleh karena itu, pada kesempatan ini izinkan kami sampaikan ucapan terima kasih
kepada Ibu Isti Sofia Insani, S.Si.,M.Kes selaku Dosen mata kuliah Media (Praktikum). Semoga
tugas yang telah diberikan ini dapat menambah pengetahuan dan wawasan penulis dibidang studi
yang kami tekuni. Serta terima kasih kepada semua pihak yang telah membantu proses
penyusunan makalah ini.
Kami menyadari bahwa makalah ini dapat diselesaikan namun jauh dari kata sempurna
dikarenakan terbatasnya pengalaman dan pengetahuan yang kami miliki. Kritik dan saran yang
membangun dari pembaca sangatlah diharapkan bagi kesempurnaan tugas ini nantinya. Terutama
dari Dosen Pembimbing mata kuliah yang bersangkutan.

Bandung, 9 September 2022

Tim Penyusun

1
 DAFTAR ISI

DAFTAR ISI.............................................................................................................................................2
BAB I......................................................................................................................................................3
PENDAHULUAN......................................................................................................................................3
1.1 Latar Belakang........................................................................................................................3
1.2 Rumusan Masalah...................................................................................................................4
1.3 Tujuan.....................................................................................................................................5
BAB II.....................................................................................................................................................6
LANDASAN TEORI...................................................................................................................................6
2.1 Pengertian Media....................................................................................................................6
2.2 Pengertian Media Padat..........................................................................................................7
2.3 Media Padat Agar Darah (AD).................................................................................................8
2.3.1 Pengertian.......................................................................................................................8
2.3.2 Fungsi..............................................................................................................................8
2.3.1 Penggolongan..................................................................................................................8
2.3.3 Komposisi........................................................................................................................8
2.3.4 Cara Pembuatan..............................................................................................................9
2.3.5 Media Saat Sebelum dan Setelah Inokulasi Bakteri.........................................................9
2.3.6 Contoh Bakteri..............................................................................................................11
2.4 Agar Coklat............................................................................................................................12
2.4.1 Pengertian.....................................................................................................................12
2.4.2 Fungsi............................................................................................................................12
2.4.3 Penggolongan................................................................................................................12
2.4.4 Komposisi Media...........................................................................................................12
2.4.5 Cara Pembuatan Media.................................................................................................13
2.4.6 Media Saat Sebelum dan Setelah Inokulasi Bakteri.......................................................14
2.4.7 Contoh Bakteri..............................................................................................................14
2.5 Lowenstein Jenssen Agar......................................................................................................14

2
 2.5.1 Pengertian.....................................................................................................................14
2.5.2 Fungsi............................................................................................................................15
2.5.3 Penggolongan................................................................................................................15
2.5.4 Komposisi Media...........................................................................................................15
2.5.5 Cara Pembuatan Media.................................................................................................16
2.5.6 Media Saat Sebelum dan Setelah Inokulasi Bakteri.......................................................16
2.6 Loeffler Agar..........................................................................................................................17
2.6.1 Pengertian.....................................................................................................................17
2.6.2 Fungsi............................................................................................................................18
2.6.3 Penggolongan................................................................................................................18
2.6.4 Komposisi Media...........................................................................................................18
2.6.5 Cara Pembuatan Media.................................................................................................18
2.6.6 Media Saat Sebelum dan Setelah Inokulasi Bakteri.......................................................19
2.6.7 Contoh Bakteri..............................................................................................................19
BAB III..................................................................................................................................................20
PENUTUP..............................................................................................................................................20
3.1 Kesimpulan...........................................................................................................................20
3.2 Saran.....................................................................................................................................21
DAFTAR PUSTAKA................................................................................................................................22

3
 BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Makhluk hidup yang ada di bumi tidak hanya terdiri dari makhluk hidup yang
dapat dilihat oleh mata telanjang, tetapi ada juga mikroorganisme yang berukuran kecil
dan hanya dapat dilihat dengan menggunakan teknik dan peralatan khusus.
Mikroorganisme (jasad renik) merupakan jasad hidup yang mempunyai ukuran sangat
kecil. Mikroorganisme mempengaruhi kehidupan manusia baik secara langsung maupun
tidak langsung yang bisa berperan sebagai kawan maupun lawan bagi kehidupan
manusia. Mikroorganisme juga merupakan makhluk hidup, untuk memeliharanya
dibutuhkan medium yang harus mengandung semua zat yang diperlukan untuk
pertumbuhannya, antara lain senyawa-senyawa organic (protein, karbohidrat, lemak,
mineral dan vitamin).
Mikroorganisme atau mikroba adalah organisme yang memiliki ukuran sangat
kecil sehingga untuk mengamatinya diperlukan alat bantuan. Mikroorganisme disebut
juga organisme mikroskopik. Mikroorganisme seringkali bersel tunggal (uniseluler)
maupun bersel banyak (multiseluler). Namun, beberapa protista bersel tunggal sedang
terlihat oleh mata telanjang dan hadir beberapa spesies multisel tidak terlihat mata
telanjang. Virus juga termasuk ke dalam mikroorganisme walaupun tidak bersifat
seluler. Ilmu yang mempelajari mikroorganisme disebut mikrobiologi
Upaya pembiakan mikroorganisme memerlukan kondisi lingkungan yang sesuai
agar bakteri dapat berkembang dengan baik. Dalam pertumbuhannya, mikroorganisme
memerlukan bahan-bahan organik dan ion-ion pendukung sebagai sumber energi dan
katalis (Morse & Meitzner, 2010).
Faktor-faktor yang penting bagi proses pembiakan mikroorganisme yaitu nutrisi,
oksigen dan gas lain, kelembaban, pH media, suhu, serta kontaminan. Media yang baik
untuk pembiakan mikroorganisme harus mengandung unsur-unsur seperti karbon,
nitrogen, fosfat inorganic, sulfur, logam, air, dan mineral (Zimbro et al. 2009).
Inokulasi merupakan kegiatan pemindahan mikroorganisme baik berupa bakteri
maupun jamur dari tempat atau sumber asalnya ke medium baru yang telah dibuat dengan
tingkat ketelitian yang sangat tinggi dan aseptis
4
1.2 Rumusan Masalah
1. Apa yang dimaksud dengan media?
2. Apa yang dimaksud dengan media padat?
3. Apa pengertian media padat Agar Darah, Agar Coklat, Lowenstein Jenssen Agar,
dan Loeffler Agar?
4. Apa fungsi media padat Agar Darah, Agar Coklat, Lowenstein Jenssen Agar, dan
Loeffler Agar?
5. Bagaimana penggolongan media padat Agar Darah, Agar Coklat, Lowenstein
Jenssen Agar, dan Loeffler Agar?
6. Apa saja komposisi dalam pembuatan media padat Agar Darah, Agar Coklat,
Lowenstein Jenssen Agar, dan Loeffler Agar?
7. Bagaimana cara membuat media padat Agar Darah, Agar Coklat, Lowenstein
Jenssen Agar, dan Loeffler Agar?
8. Bagaimana keadaan media padat Agar Darah, Agar Coklat, Lowenstein Jenssen
Agar, dan Loeffler Agar saat sebelum dan setelah inokulasi?
9. Bakteri apa saja yang dapat diinokulasi pada media padat Agar Darah, Agar Coklat,
Lowenstein Jenssen Agar, dan Loeffler Agar?

1.3 Tujuan
1. Mengetahui pengertian media.
2. Mengetahui pengertian media padat.
3. Mengetahui pengertian media padat Agar Darah, Agar Coklat, Lowenstein Jenssen
Agar, dan Loeffler Agar.
4. Mengetahui fungsi media padat Agar Darah, Agar Coklat, Lowenstein Jenssen Agar,
dan Loeffler Agar.
5. Mengetahui penggolongan media padat Agar Darah, Agar Coklat, Lowenstein
Jenssen Agar, dan Loeffler Agar.
6. Mengetahui komposisi pembuatan media padat Agar Darah, Agar Coklat,
Lowenstein Jenssen Agar, dan Loeffler Agar.

5
7. Mengetahui prosedur dalam pembuatan media padat Agar Darah, Agar Coklat,
Lowenstein Jenssen Agar, dan Loeffler Agar.
8. Mengetahui gambar media padat Agar Darah, Agar Coklat, Lowenstein Jenssen
Agar, dan Loeffler Agar sebelum dan setelah inokulasi.
9. Mengetahui contoh bakteri yang termasuk ke dalam media padat Agar Darah, Agar
Coklat, Lowenstein Jenssen Agar, dan Loeffler Agar.

BAB II

6
 LANDASAN TEORI
2.1 Pengertian Media
Media adalah suatu bahan yang terdiri dari campuran zat-zat hara (nutrient) yang
digunakan untuk membiakkan mikroba. Media terdapat bermacam-macam yang dapat
digunakan untuk isolasi, perbanyakan, pengujian sifat-sifat fisiologis dan perhitungan
jumlah mikroba maupun untuk transport specimen dari suatu tempat ke tempat
pemeriksaan mikrobiologi. Mikroorganisme memanfaatkan nutrisi media berupa
molekul-molekul kecil yang dirakit untuk menyusun komponen sel. Dalam pemeriksaan
mikrobiologi, media menjadi suatu hal yang penting agar mikroba yang dapat hidup dan
menentukan bahwa mikroba yang diperiksa adalah benar-benar mikroba yang dicari atau
yang diharapkan.
Media pertumbuhan mikroorganisme adalah suatu bahan yang mengandung
berbagai nutrisi yang dibutuhkan oleh mikroorganisme untuk pertumbuhannya. Nutrien
yang terdapat dalam media dimanfaatkan mikroorganisme untuk menyusun komponen-
komponen sel. Media pertumbuhan dapat digunakan untuk mendapatkan kultur murni
dari isolasi mikroorganisme (Krihariyani dkk, 2016).
Media berdasarkan bentuk dibedakan menjadi:
1. Media Padat : Yaitu media yang mengandung agar 15% sehingga setelah dingin
media menjadi padat. Contohnya : (Agar Darah, Agar Coklat, Lowenstein Jenssen
Agar, Loeffler Agar).
2. Media Setengah Padat : Yaitu media yang mengandung agar 0,3 – 0,4 % sehingga
menjadi sedikit kenyal, tidak padat, tidak begitu cair. Mediasemi-solid dibuat
dengan tujuan supaya pertumbuhan mikroba dapat menyebar ke seluruh media
tetapi tidak mengalami percampuran sempurna jika adanya getaran.Contohnya :
NfB (Nitrogen free Bromthymol Blue).
3. Media Cair : Yaitu media yang tidak mengandung agar. Contohnya NB
(NutrientBroth), LB (LactoseBroth).

2.2 Pengertian Media Padat

7
 Media padat adalah media cair yang mengandung substansi pemadat (misal agar-agar dan
gelatin) dengan konsentrasi yang berbeda. Konsentrasi bahan pemadat ini akan membuat
media setelah dingin menjadi padat.
Media padat berguna untuk menjaga sel agar tidak berpindah tempat sehingga
akan mudah dihitung dan dipisahkan jenisnya ketika tumbuh menjadi koloni.

2.3 Media Padat Agar Darah (AD)

2.3.1 Pengertian
Agar Darah atau Blood Agar adalah jenis medium diperkaya yang
berfungsi untuk menumbuhkan bakteri atau mikroorganisme dengan ciri-ciri
pertumbuhannya yang lambat dan membutuhkan nutrisi yang tinggi. Media agar
darah disebut juga dengan media universal karena dapat digunakan untuk
menumbuhkan beragam jenis bakteri. Blood Agar awalnya hanya berupa medium
basal umum yang kemudian ditambah 5% darah merah/serum darah yang diambil
dari domba, kuda, kelinci bahkan manusia. Agar darah memungkinkan
membedakan bekteri berdasarkan kemampuan mereka untuk melisiskan sel-sel
darah merah.

2.3.2 Fungsi
Di dunia mikrobiologi medis medium ini sering digunakan untuk
menumbuhkan bermacam-macam bakteri patogen yang sulit ditumbuhkan di
medium biasa. Contohnya Haemophilus influenzae bakteri penyebab flu,
Streptococcus penumoniae bakteri penyebab penumonia, dan Neisseria gonhoroe
bakteri penyebab penyakit kelamin.

2.3.1 Penggolongan
Media Agar Darah merupakan media pertumbuhan bakteri yang dapat
membedakan bakteri pathogen berdasarkan efek exotoksin hemolitik bakteri pada
sel darah merah. Media Agar Darah tergolong kedalam media diperkaya dan
selektif diferenial. Sifat fisik medium adalah padat karena mengandung komposisi
agar.
8
2.3.3 Komposisi
Bahan Jumlah
Nutrient substrate 40 gram
Natrium chloride 5% 5 gram
Agar 15% 10 gram
Fungsi komposisi bahan :
 Nutrient substrate 40 gram : sebagai sumber energi / nutrisi bagi bakteri
 Natrium chloride (Merck) 5% (v/w) : sebagai pengatur kesetimbangan
tekanan osmosis
 Agar 15% : sebagai bahan pemadat media.

2.3.4 Cara Pembuatan

1. Larutkan 40 gram bahan agar darah (medium) dengan 1 liter aquades.
2. Timbang bahan tersebut menggunakan timbangan analitik agar lebih presisi.
3. Larutkan 40 gram medium agar darah kedalam 1 liter aquades dengan cara
dipanaskan pada suhu 80°C sambil diaduk. Pastikan medium larut dengan
sempurna dan tidak meninggalkan gumpalan.
4. Atur pH medium hingga mencapai 7.3 ± 0.2.
5. Masukkan medium kedalam masing-masing tabung erlenmeyer sesuai volume
yang diinginkan dan tutup dengan rapat.
6. Sterilisasi medium menggunakan autoklaf pada suhu 121°C selama 15 menit.
7. Setelah disterilisasi dan medium masih dalam kondisi cair (sekitar suhu 45-50
°C), medium ditambah 5% (v/v) darah aduk hingga homogen.
8. Setelah kompenen tambahan terlarut, medium dapat secara langsung dituang
ke masing-masing cawan petri sesuai kebutuhan (tidak lebih dari setengah
cawan petri).

2.3.5 Media Saat Sebelum dan Setelah Inokulasi Bakteri

9
 Sebelum Inokulasi Sesudah Inokulasi

Karakter Hemolisis Bakteri pada Medium Blood Agar

 Hemolisis adalah pecahnya sel darah merah yang disebabkan oleh aktifitas

bakteri yang ditandai terbentuknya zona bening disekitar pertumbuhan koloni.
Karakter hemolitik bakteri dibedakan menjadi 3 macam, yaitu alfa-hemolisis,
beta-hemolisis, gama hemolisis :

 Alfa-hemolisis terjadi karena adanya reduksi hemoglobin sel darah merah

menjadi metahemoglobin dan menyebabkan perubahan warna medium disekitar
koloni bakteri menjadi berwarna hijau atau cokelat. Contoh bakteri alfa-
hemolitik adalah Streptococcus penumoniae.
 Beta-hemolisis didefinisikan sebagai lisisnya sel darah merah secara sempurna
oleh aktifitas bakteri sehingga menyebabkan terbentuknya zona jernih /

10
 transparan disekitar pertumbuhan koloni. Contoh bakteri alfa-hemolitik
adalah Streptococcus pyogenes dan Streptococcus agalactiace.
 Gama-hemolisis ditandai dengan tidak adanya perubahan warna medium
disekitar pertumbuhan koloni bakteri. Zona jernih tidak terbentuk karena tidak
adanya lisis sel darah merah oleh aktifitas bakteri. Contoh bakteri alfa-hemolitik
adalah Enterococcus faecalis.

2.3.6 Contoh Bakteri

Bakteri yang dapat dilakukan inokulasi pada media Agar darah, yaitu :
1. Streptococcus penumoniae adalah diplokokus Gram-posistif yang
merupakan penghuni normal pada saluran pernapasan bagian atas
manusia. Bakteri ini sering berbentuk bulat hingga lanset atau tersusun
dalam bentuk rantai, mempunyai simpai polisakarida yang mempermudah
penentuan tipe dengan antiserum spesifik.
2. Streptococcus pyogenes merupakan bakteri kokus yang tersusun seperti
rantai, termasuk bakteri Gram positif, tidak membentuk spora dan tidak
bergerak atau nonmotile.
3. Streptococcus agalactiace merupakan bakteri yang diwaspadai sebagai
penyebab mastitis subklinis. Bakteri ini dapat menyebabkan penyakit
tonsilitis dan meningitis pada manusia yang mengkonsumsi susu tercemar
tanpa penanganan yang baik. Streptococcus agalactiae diketahui telah
resisten terhadap beberapa jenis antibiotik.
4. Enterococcus faecalis adalah bakteri yang biasa ditemukan dalam saluran
akar dan tetap bertahan di dalamnya meskipun telah dilakukan perawatan.
Bakteri ini sering ditemukan sebagai bakteri tunggal yang terisolasi dalam
saluran akar.

11
2.4 Agar Coklat
2.4.1 Pengertian
Chocolate agar (CHOC) atau agar darah coklat ( CBA ), adalah media
pertumbuhan nonselektif yang diperkaya yang digunakan untuk isolasi bakteri
patogen. Ini adalah varian dari piring agar darah , yang mengandung sel darah
merah yang telah dilisiskan dengan pemanasan perlahan hingga 80°C.
Bakteri ini membutuhkan faktor pertumbuhan, seperti NAD dan hematin, yang
berada di dalam sel darah merah, Agar coklat sama seperti agar darah tetapi pada
agar coklat,darah yang digunakan di lisiskan terlebih dahulu sebelum dimasukan
ke larutan agar. Setelah darah lisis sel eritrosit mengeluarkan bahan-bahan
intraseluler seperti haemoglobin, hemin,dan koenzim nicotinamide adenine
dinucleotida (NAD) yang dapat digunakan oleh bakteri yang sukar tumbuh. Darah
yang lisis memberikan warna coklat pada media sehingga disebut dengan agar
coklat.

2.4.2 Fungsi
Kegunaannya adalah untuk menumbuhkan bakteri yang sulit tumbuh
pada perbenihan sederhana dan biasanya dipakai untuk menumbuhkan golongan
Neisseria dan Haemophilus influenzae.

2.4.3 Penggolongan
Agar coklat termasuk media diperkaya dengan darah yang diberi
perlakuan panas (40-50°C), yang beubah menjadi coklat dan memberi warna
pada media sesuai namanya.

2.4.4 Komposisi Media

Bahan Jumlah
Nutrient substrate 40 gram
Natrium chloride 5% 5 gram
Agar 15% 10 gram
12
 Fungsi komposisi bahan :
 Nutrient substrate 40 gram : sebagai sumber energi / nutrisi bagi bakteri
 Natrium chloride (Merck) 5% (v/w) : sebagai pengatur kesetimbangan
tekanan osmosis
 Agar 15% : sebagai bahan pemadat media.

2.4.5 Cara Pembuatan Media

1. Larutkan 40 gram bahan media ddengan 1 liter aquadest.
2. Timbang bahan tersebut menggunakan timbangan analitik agar lebih presisi.
3. Larutkan 40 gram medium agar darah kedalam 1 liter aquades dengan cara
dipanaskan pada suhu 80°C sambal daiduk. Pastikan medium larut dengan
sempurna dan tidak meninggalkan gumpalan.
4. Atur pH medium hingga mencapai 7,3 ± 0,2.
5. Masukkan medium kedalam masing-masing tabung Erlenmeyer sesuai
volume yang diinginkan dan tutup dengan rapat.
6. Sterilisasi medium menggunakan autoklaf pada suhu 121°C selama 15
menit.
7. Setelah disterilisasi dan medium masih dalam kondisi cair (sekitar suhu 45-
50°C), medium ditambah 5% (v/v) darah aduk hingga homogen.
8. Setelah penambahan darah, di panaskan kembali di waterbath sampai 80-
90% selama 5-15 menit sampai berwarna coklat.
9. Masukkan kedalam cawan petri sesuai keinginan, biarkan pada suhu kamar
beberapa menit sampai media memadat (tidak lebih dari setengah cawan
petri).
Prosedur kerjanya sama dengan pembuatan Blood Agar, hanya setelah
penambahan darah, di panaskan kembali sampai 80-90% selama 5-15 menit
sampai berwarna coklat. Semua ini di kerjakan dalam water bath. Bahan dari
coklat agar sama dengan bahan pada media Blood Agar.
Mengapa medianya berwarna coklat ? hal tersebut di sebabkan oleh suhu yang
lebih sehingga kepanasan dan media berwarna coklat. Mengapa media ini
13
 kecoklatan ? hal tersebut di karenakan bakteri N. Conarhoe dan Haemophylus
suka di coklat agar.

2.4.6 Media Saat Sebelum dan Setelah Inokulasi Bakteri

Sebelum Inokulasi Setelah Inokulasi

2.4.7 Contoh Bakteri

 Haemophillus spp
Haemophillus spp termasuk ke dalam kelompok bakteri Gram negatif yang
berbentuk kokobasil (menyerupai batang pendek) dan filamen. Bakteri ini sering
disebut juga sebagai bakteri pencinta darah (the blood lover) sesuai dengan asal
kata Haemophilus yaitu Haima yang berarti darah (blood) dan philus yang berarti
pencinta (friend, lover).
 Neisseria Meningitis
Neisseria Meningitis adalah bakteri gram-negatif penyebab penyakit meningitis
dan meningococcemia. Bakteri ini pertama kali diisolasi pada tahun 1887.
Karakteristik dari N.meningitidis adalah aerobik dan berbentuk diplokokus.
Bakteri ini dapat menghasilkan kapsul polisakarida dan enzim oksidase.

14
2.5 Lowenstein Jenssen Agar
2.5.1 Pengertian
Medium Lowenstein-Jensen, lebih dikenal sebagai medium LJ, adalah
medium berbasis telur selektif yang khusus digunakan untuk kultur dan isolasi
spesies Mycobacterium, termasuk Mycobacterium tuberculosis dari spesimen
klinis. 
Media LJ awalnya diformulasikan oleh Lowenstein yang menggabungkan
congo red dan malachite green untuk menghambat bakteri yang tidak
diinginkan. Formulasi saat ini mencakup media gliserin berbasis telur dan
didasarkan pada modifikasi Jensen. Jensen memodifikasi media Lowenstein
dengan memodifikasi kadar sitrat dan fosfat, menghilangkan pewarna merah
kongo dan meningkatkan konsentrasi hijau perunggu. Gruft selanjutnya
memodifikasi media LJ dengan penambahan penisilin, asam nalidiksat dan asam
ribonukleat (RNA) untuk meningkatkan selektivitas. Media ini mendorong
pertumbuhan berbagai macam mikobakteri dan juga dapat digunakan untuk uji
niasin. Kadar penisilin dan asam nalidiksat yang rendah hadir dalam media LJ
untuk menghambat pertumbuhan bakteri Gram-positif dan Gram-negatif,
membatasi pertumbuhan hanya untuk spesies Mycobacterium.

2.5.2 Fungsi
1. Media Lowenstein Jenssen Agar digunakan untuk diagnosis infeksi
Mycobacterial.
2. Digunakan untuk meguji kerentanan antibiotic dari isolat.
3. Digunakan untuk membedakan spesies mikobakterium yang berbeda
(berdasarkan morfologi koloni, laju pertumbuhan, karakteristik biokimia dan
mikroskop).

2.5.3 Penggolongan
Media Lowenstein merupakan media selektif yang umumnya digunakan
untuk menumbuhkan bakteri pengikat nitrogen.

15
2.5.4 Komposisi Media
Bahan Jumlah
Magnesium Citrate 0,6 gram
Malachite Green 0,4 gram
Magnesium Sulfate 0,24 gram
Glycerol 12 ml

2.5.5 Cara Pembuatan Media

1. Larutkan 37,3 gram medium dalam 600 ml air suling yang mengandung 12
ml gliserol.
2. Panaskan jika perlu untuk melarutkan media sepenuhnya.
3. Autoklaf pada suhu 121°C selama 15 menit.
4. Siapkan 1000 ml suspensi seragam telur segar dalam kondisi aseptik. Hindari
mencambuk udara ke dalam suspensi selama pengumpulan dan
pencampuran.
5. Campur 1000 ml suspensi telur secara aseptik dengan 600 ml Medium
Lowenstein-Jensen steril yang didinginkan hingga 50–60 °C, hindari
gelembung udara.
6. Masukkan media yang sudah jadi ke dalam tabung reaksi tutup ulir steril.
7. Tempatkan tabung dalam posisi miring dan panaskan pada suhu 85°C selama
45 menit.

16
 2.5.6 Media Saat Sebelum dan Setelah Inokulasi Bakteri

2.5.7 Contoh Bakteri

Contoh bakteri yang tumbuh di media Lowenstein Jenssen Agar adalah
Mycobacterium Tuberculosis.

Mycobacterium Tuberculosis (M. tb) adalah spesies bakteri pathogen dalam famili
Mycobacteriaceae serta menjadi penyebab dari tuberculosis (TBC).

2.6 Loeffler Agar

2.6.1 Pengertian
Loeffler agar merupakan modifikasi dari formula asli yang dikembangkan
Loeffler pada tahun 1887. Media Loeffler meningkatkan isolasi primer dan
sekunder dan budidaya mikroorganisme pathogen yang rewel, terutama dari
hidung dan tenggorokan.
Ini juga mengembangkan virulensi dan sifat pengenal lainnya
(mikroskopis dan kolonial) setelah mereka hilang karena inkubasi yang
berkepanjangan atau subkultur yang berulang.
Kandungan serum yang tinggi membantu dalam menentukan aktifitas
proteolitik organisme. Hal ini juga digunakan untuk demonstrasi pigmentasi dan
askospora.
17
2.6.2 Fungsi
Media ini memiliki kegunaan dalam penyelidikan mikrobiologi, yaitu :
1. Nilai utama dari media Loeffler adalah dalam pertumbuhan dan
morfologi karakterisasi anggota genus Corybacterium. Formulasi ini
meningkatkan pembentukan butiran metachromatic dalam sel-sel dari
organisme.
2. Karena kandungan serumnya, media Loeffler dapat digunakan untuk
penentuan kegiatan proteolitik mikroorganisme.
3. Permukaan abu-abu putih medium memberikan latar belakang yang sangat
baik untuk deteksi dan pengamatan pigmentasi kolonial.
4. Media ini dapat digunakan untuk mendeteksi ascospores

2.6.3 Penggolongan
Loefler Agar termasuk kedalam penggolongan media padat.

2.6.4 Komposisi Media

Bahan Jumlah
Pepton Proteosa 2,5 gm
Dekstrosa 2,5 gm
Natrium Klorida 1,25 gm
Ekstrak Daging Sapi 2,5 gm
Serum Kuda 750,0 ml

2.6.5 Cara Pembuatan Media

1. Suspend 8,75 gram dalam 250 ml air suling.
2. Larutkan media sepenuhnya dan sterilkan dengan autoklaf pada tekanan 10
lbs (115 ° C) selama 20 menit.
3. Dinginkan hingga 50-55 °C dan tambahkan secara aseptik 750 ml serum
kuda steril.
4. Aduk rata dan tuangkan secara aseptik ke dalam tabung steril.
18
 5. Sterilkan media dengan penyemprotan pada 80-85 °C selama 2 jam dalam
uap yang mengalir bebas selama minimal 3 hari berturut-turut.
6. Sebelum inokulasi, biarkan media mencapai suhu kamar.
7. Menggunakan gerakan fishtail, secara langsung menginokulasikan spesimen
swab ke media.
8. Inkubasi secara aerobik pada suhu 35ºC. hingga 4 hari.
9. Amati setiap hari untuk morfologi kolonial yang khas dari
10. Lakukan pewarnaan biru metilen untuk memeriksa adanya butiran
metakromatik dan penampilan yang menunjukkan pembentukan sel huruf
Cina.
11. Identifikasi definitif C. diphtheriae dilakukan dengan melakukan uji biokimia
dan toksisitas

2.6.6 Media Saat Sebelum dan Setelah Inokulasi Bakteri

Untuk Deteksi Proteolisis Mikroorganisme Aerobik
1. Inokulasi media dengan koloni terisolasi dari organisme yang bersangkutan.
2. Inkubasi secara aerobik pada suhu 35ºC selama 3-4 hari.
3. Amati morfologi kolonial yang khas.
Untuk Deteksi Proteolisis Mikroorganisme Anaerob 13
1. Inokulasi media dengan koloni terisolasi dari organisme yang bersangkutan.
2. Inkubasi secara anaerob pada suhu 35ºC. selama 3-4 hari atau lapisi miring
yang diinokulasi dengan Kaldu Thioglikolat sesaat sebelum inkubasi,
kencangkan tutupnya dan inkubasi secara aerobik.
3. Amati morfologi kolonial yang khas.

2.6.7 Contoh Bakteri

Contoh bakteri yang tumbuh pada media Loeffler Agar adalah Corynebacterium
diphtheriae.
Corynebacterium diphtheriae adalah bakteri pathogen yang menyebabkan difteri.

19
 BAB III
PENUTUP

Kesimpulan

Berdasarkan pembuatan makalah ini, dapat disimpulkan bahwa:

1. Media adalah suatu bahan yang terdiri dari campuran zat-zat hara (nutrient) yang
digunakan untuk membiakkan mikroba. Media terdapat bermacam-macam yang dapat
digunakan untuk isolasi, perbanyakan, pengujian sifat-sifat fisiologis dan perhitungan
jumlah mikroba maupun untuk transport specimen dari suatu tempat ke tempat
pemeriksaan mikrobiologi.
2. Media padat
Media padat adalah media cair yang mengandung substansi pemadat (misal agar-agar
dan gelatin) dengan konsentrasi yang berbeda. Konsentrasi bahan pemadat ini akan
membuat media setelah dingin menjadi padat.
3. Contoh dari media padat yaitu: Agar Darah, Agar Coklat, Lowenstein Jenssen Agar,
dan Loeffler Agar.
4. Agar Darah atau Blood Agar adalah jenis medium diperkaya yang berfungsi untuk
menumbuhkan bakteri atau mikroorganisme dengan ciri-ciri pertumbuhannya yang
lambat dan membutuhkan nutrisi yang tinggi
5. Agar coklat adalah media pertumbuhan nonselektif yang diperkaya yang digunakan
untuk isolasi bakteri patogen.
6. Lowenstein Jenssen Agar lebih dikenal sebagai medium LJ, adalah medium berbasis
telur selektif yang khusus digunakan untuk kultur dan isolasi spesies Mycobacterium,
termasuk Mycobacterium tuberculosis dari spesimen klinis.

Saran
Setelah membuat makalah ini kami menyarankan agar pembaca dapat
mempelajari berulang-ulang hingga betul-betul memahami semua tentang media, dan jika
ingin membuat media lakukanlah secara benar, telaten, berhati-hati, jangan tergesa-gesa,
dan selalu ikuti prosedur yang ada agar mendapatkan hasil yang kita inginkan.

20
 Kami menyadari bahwa dalam penyusunan makalah ini masih jauh dari
sempurna. Oleh karena itu, kami mengharapkan kepada semua pihakuntuk memberikan
kritik dan saran yang membangun demi tercapainya makalah yang lebih baik
kedepannya. Terima kasih

21
 DAFTAR PUSTAKA

Misnadiarly. Pemeriksaan Laboratorium Tuberkulosis dan Mikobacterium Atipik-Identitas

Lengkap Mikobacterium dengan Atlas Berwarna. Dian Rakyat
Pradhika, I (2020, 05 04). Jenis-jenis Media Pertumbuhan. Diambil Kembali dari
https://laboratoriumstandard.com/2020/04/05/jenis-jenis-media-pertumbuhan/
Rizka, Anisa. 2018. OPTIMALISASI AGAR COKLAT DARAH MANUSIA SEBAGAI
MEDIA UJI SENSIVITAS ANTIBIOTIK TERHADAP Haemophilus influenzae:
PERAN PACKED RED CELL. Disertasi. Jawa Tengah: Fakultas Kedokteran Universitas
Diponegoro.
Technologist, M. L. (t.thn.). Media Blood Agar Plate (BAP). Diambil Kembali dari
Teknologilaboratoriummedik.blogspot.com:
https://teknologilaboratoriummedik.blogspot.com/2016/11/media-blood-agar-plate-
bap.html

22