4.

2 Pemilihan Pelarut
Dalam KLT, fase bergerak (fase gerak) memiliki dua tugas penting, yaitu:
• Ia harus memindahkan solute dari adsorben sehingga solute dapat dibawa dalam fase gerak
melewati plat/lempengan.
• Ia harus membantu untuk memisahkan suatu campuran solute (sampel), sehingga ia dapat
dideposit (disimpan) pada tempat yang berbeda dan dapat diidentifikasi. Ini mengacu kepada
pemilihan pelarut. Efektifitas suatu pelarut dalam memindahkan solute (sampel) dari suatu
adsorben disebut dengan kekuatan eluen. Pada masa kromatogradi adsorpsi dahulu, dikenal
suatu daftar pelarut yang dipublikasikan nilai ‘eluting powernya’ untuk zat-zat yang
disdsorpsi oleh silica gel, yang kini sudah menurun pemakaiannya. Pelarut-pelarut tersebut
adalah: air murni, methanol, ethanol, propan, ethyl ethanoat, ethoxyethan, triklomromethan,
dikloromethan, benzene, methylbenzen, trikloroethan, tetrakloromethan, sikloheksan,
heksana.

3. Penanganan Eluen
Pemilihan eluen merupakan faktor yang paling berpengaruh pada sistem KLT. Eluen dapat terdiri dari
satu pelarut atau campuran dua sampai enam pelarut. Campuran pelarut harus saling sampur dan tidak
ada tanda-tanda kekeruhan.
Fungsi eluen dalam KLT :
 Untuk melarutkan campuran zat
 Untuk mengangkat atau membawa komponen yang akan dipisahkan melewati sorben fase diam
sehingga noda memiliki Rf dalam rentang yang dipersyaratkan
 untuk memberikan selektivitas yang memadai untuk campuran senyawa yang akan dipisahkan.

Eluen juga harus memenuhi persyaratan sebagai berikut:

 memiliki kemurnian yang cukup,
 stabil,
 memiliki viskositas rendah,
 memiliki partisi isotermal yang linier,
 tekanan uap yang tidak terlalu rendah atau tidak terlalu tinggi,
 toksisitas serendah mungkin
Pemilihan eluen yang cocok dapat dilakukan melalui tahapan optimasi eluen. Optimasi eluen diawali
dengan menentukan sifat fisika kimia analit yang akan dianalisis dan jenis sorben fase diam yang
digunakan. Misalnya sorben dengan prinsip pemisahan berdasarkan muatan ion diperlukan data
tentang jenis dan intensitas muatan ion analit dalam pemilihan komposisi eluen. Pada sorben dengan
prinsip pemisahan berdasarkan polaritas dibutuhkan nilai koefisien partisi (P atau log P) dan tetapan
dissosiasi (pKa) analit dalam penentuan eluen. Nilai koefisien partisi analit digunakan untuk
menentukan afinitas analit terhadap fase diam dan fase gerak. Nilai tetapan disosiasi (pKa) digunakan
untuk menentukan bentuk analit (ion atau molekul) pada pH lingkungan tempat analit berada. Bila
analit berada pada pH dibawah pKa, analit akan berbentuk molekul. Bila analit berada pada pH diatas
pKa, analit berbentuk ion. Saat analit berbentuk molekul afinitas analit terhadap fase diam dan fase
gerak akan sesuai dengan nilai koefisien partisinya tetapi ketika analit.