Machine Translated by Google

Ilmu Lingkungan dan Penelitian Pencemaran (2019) 26:17427–17437

https://doi.org/10.1007/s11356-019-05100-6

ARTIKEL PENELITIAN

Paparan kronis terhadap zat pemutih gigi karbamid peroksida 35%

menginduksi perubahan histologis dan hematologis, stres oksidatif,
dan peradangan pada tikus

Gadah Al-Basher1 & Hind Al-Motiri1 & Saleh Al-Farraj1 & Fatimah Al-Otibi2 & Nouf Al-Sultan1 & Noorah Al-Kubaisi2 & Dalia Al-Sarar2 & Monerah
Al-Dosary2 & May Bin-Jumah3 & Ayman M. Mahmoud4

Diterima: 9 Desember 2018 / Diterima: 4 April 2019 / Diterbitkan online: 24 April 2019
# Springer-Verlag GmbH Jerman, bagian dari Springer Nature 2019

Abstrak
Studi sebelumnya telah menunjukkan efek samping dari pemutih gigi pada mukosa lambung. Namun, dampak produk pemutih gigi pada hati, ginjal, dan
jantung masih belum jelas. Penelitian ini menyelidiki potensi toksik dari 35% karbamid peroksida (CPO) yang mengandung produk pemutih gigi (TWP)
pada hati, ginjal, jantung, dan perut tikus, menunjuk pada peran stres oksidatif dan peradangan. Tikus menerima 250 atau 500 mg/kg berat badan CPO-
TWP secara oral selama 3 minggu dan sampel dikumpulkan untuk dianalisis. Kedua dosis CPO-TWP menginduksi peningkatan yang signifikan pada
penanda fungsi hati, ginjal, dan jantung yang bersirkulasi. Tikus yang diberi CPO-TWP menunjukkan beberapa perubahan histologis dan peningkatan
yang signifikan pada tingkat peroksidasi lipid hati, ginjal, jantung, dan lambung bersama dengan berkurangnya glutathione, superoksida dismutase, dan
katalase. Selain itu, pemberian CPO-TWP memicu anemia, leukositosis, dan peningkatan yang signifikan dalam kadar sitokin pro inflamasi yang
bersirkulasi. Kesimpulannya, paparan 35% CPO-TWP menginduksi perubahan fungsional, histologis, dan hematologis, stres oksidatif, dan peradangan
pada tikus. Oleh karena itu, penggunaan bahan pemutih gigi yang sering harus dipantau dengan sangat hati-hati untuk menghindari penggunaan jumlah
yang berlebihan serta asupannya.

Kata kunci Karbamid peroksida . Stres oksidatif . Peradangan. Toksisitas. Pemutihan gigi

Perkenalan produk pemutih (TWP) dengan konsentrasi hidrogen peroksida (H2O2)

Pemutihan gigi banyak digunakan untuk memutihkan gigi atau
menghilangkan perubahan warna gigi. Pemutihan gigi di kantor atau di
rumah merupakan pendekatan pemutihan yang efektif dan konservatif
yang dilakukan oleh dokter gigi (Majeed et al. 2015). Beberapa gigi
Editor yang bertanggung jawab: Philippe Garrigues
* Ayman M. Mahmoud
ayman.mahmoud@science.bsu.edu.eg
1
Departemen Zoologi, Sekolah Tinggi Sains, Universitas King Saud,
Riyadh, Arab Saudi
2
Departemen Botani dan Mikrobiologi, Fakultas Sains, King
Universitas Saud, Riyadh, Arab Saudi
3
Jurusan Biologi Sekolah Tinggi Ilmu Pengetahuan Putri Nourah Binti
Universitas Abdulrahman, Riyadh, Arab Saudi
4
Divisi Fisiologi, Departemen Zoologi, Fakultas Sains, Universitas
Beni-Suef, Salah Salim St., Beni-Suef 62514, Mesir
atau karbamid peroksida (CPO) yang berbeda tersedia di pasaran (Matis
et al. 2013). CPO digunakan dalam teknik berbasis baki untuk pemutihan
gigi dan terdisosiasi menjadi H2O2 dan urea (da Costa et al. 2012; da
Silva Marques et al.
2012). Untuk mengurangi waktu pemaparan gigi, zat pemutih dengan
konsentrasi tinggi digunakan selama proses pemutihan (Rezende et al.
2016). Meskipun tingkat keberhasilan bahan pemutih dalam menghilangkan
perubahan warna gigi tinggi, penggunaan yang salah atau aplikasi dalam
jumlah yang berlebihan dapat menyebabkan efek samping yang tidak
diinginkan (Cherry et al. 1993; Dahl dan Becher 1995; Paula et al. 2015).
Tingkat efek samping tergantung pada teknik pemutihan yang digunakan,
frekuensi, konsentrasi H2O2 atau CPO dan keteraturan kontrol yang
dilakukan oleh profesional gigi (Matis et al. 2006). Sensitivitas gigi adalah
efek samping umum dari bahan pemutih yang mengandung H2O2
konsentrasi tinggi (Matis et al. 2009).
Jika dibandingkan dengan CPO, H2O2 memiliki resiko lebih besar dan
dapat menyebabkan nekrosis gingiva atau luka bakar kimia (Al Shethri et al.
2003; Pugh Jr. dkk. 2005).
Machine Translated by Google
17428
Toksisitas in vitro dan in vivo dari bahan pemutih gigi telah
dilaporkan dalam penelitian yang berbeda. Paparan in vitro dari sel-
sel MDPC-23 seperti odontoblas untuk perawatan berturut-turut dari
10% CPO gel meningkatkan efek toksik yang parah (Lima et al.
2013). Sepuluh persen CPO yang diaplikasikan pada dentin dan
cakram enamel-dentin menginduksi perubahan morfologis dan secara
signifikan mengurangi laju metabolisme sel seperti sel odontoblas
(Lima et al. 2010 ; Soares et al. 2011). Mekanisme pasti yang
mendasari toksisitas produk pemutih gigi tidak dipahami; namun,
beberapa penelitian menunjukkan peran spesies oksigen reaktif
(ROS) dan stres oksidatif. H2O2 yang dilepaskan dari bahan pemutih
dapat berdifusi melalui jaringan gigi ke ruang pulpa dan menimbulkan
efek toksik (Gokay et al. 2004; Gokay et al. 2000). Selain itu, aplikasi
CPO 10% setiap hari menyebabkan inflamasi ringan pada pulpa gigi
premolar (Fugaro et al. 2004). In vivo, ulserasi mukosa lambung tikus
telah dibuktikan sebagai efek berbahaya paparan akut CPO dan
pemutih gigi yang mengandung CPO (Dahl dan Becher 1995).
Pemberian pemutih gigi yang mengandung H2O2 6% menginduksi
perubahan histologis pada mukosa lambung tikus (Paula et al. 2015).
Cherry et al. telah menunjukkan hilangnya refleks meluruskan, sesak
napas, urin berdarah, dan manifestasi lainnya pada tikus betina
terkena konsumsi pemutih gigi akut (Cherry et al. 1993). Dalam uji
klinis yang melibatkan sekelompok kecil 15 pengguna, penggunaan
terus menerus TWP selama 6 bulan untuk menghilangkan noda
tetrasiklin tidak menimbulkan efek buruk pada rongga mulut (Leonard
Jr. et al. 2003) .
Sampai saat ini, dampak in vivo TWP pada organ lain selain
mukosa lambung belum diteliti. Karena TWP dapat tertelan selama
prosedur pemutihan, diperlukan penelitian untuk menyelidiki apakah
menelan pemutih gigi ini menghasilkan efek toksik. Oleh karena itu,
penelitian ini dirancang untuk mengevaluasi efek pemberian kronis
CPO 35%.
mengandung TWP pada hati, ginjal, jantung, dan perut tikus,
menunjukkan peran stres oksidatif dan peradangan.
Bahan dan metode
Hewan percobaan dan perawatan
Tikus albino Swiss jantan berusia delapan minggu dengan berat
25-27 g, diperoleh dari kandang hewan di Fakultas Farmasi,
Universitas King Saud (Riyadh, Arab Saudi), digunakan dalam
penelitian ini. Tikus ditempatkan di kandang standar pada suhu
normal (23 ± 2 ° C) dan siklus terang / gelap 12 jam dan dilengkapi
dengan diet standar dan air ad libitum. Semua eksperimen dan
protokol telah disetujui oleh Komite Etika untuk Eksperimen Hewan
Universitas King Saud.
Hewan-hewan tersebut secara acak dialokasikan ke dalam 3 kelompok (n =
6) sebagai berikut:
Kelompok I (kontrol): mencit diberi air suling secara oral selama
3 minggu.
Environ Sci Pollut Res (2019) 26:17427–17437
Kelompok II (250 mg/kg CPO-TWP): tikus menerima 250 mg/kg
berat badan 35% karbamid peroksida yang mengandung produk
pemutih gigi (CPO-TWP; Opalescence®) yang dilarutkan dalam
air suling secara oral selama 3 minggu.
Kelompok III (500 mg/kg CPO-TWP): tikus menerima 500 mg/
kg berat badan 35% CPO-TWP yang dilarutkan dalam air suling
secara oral selama 3 minggu.
Dosis CPO-TWP disesuaikan dengan perubahan berat badan.
Kedua dosis tersebut dipilih berdasarkan penelitian sebelumnya
dimana telah digunakan dosis 500 mg/kg berat badan CPO-TWP
(Dahl dan Becher 1995). Kami menerapkan 500 mg/kg sebagai dosis
tinggi dan CPO TWP 250 mg/kg sebagai dosis rendah. Larutan CPO-
TWP dibuat baru sebelum pemberian dan terlindung dari cahaya
untuk mencegah dekomposisi peroksida.
Di akhir percobaan, mencit dikorbankan dengan anestesi dan
sampel segera diambil. Sampel darah dikumpulkan pada EDTA untuk
uji hematologi dan sampel lainnya dibiarkan menggumpal untuk
pemisahan serum.
Tikus dibedah; dan hati, ginjal, jantung, dan perut dipotong dan dicuci
dengan saline buffer fosfat (PBS) dingin. Sampel dari organ yang
dikumpulkan dihomogenkan dalam larutan salin buffer fosfat dingin
(PBS; 10% b/v) yang disen trifugasi dan homogenat bening
dikumpulkan untuk pengujian biokimia. Sampel lain difiksasi dalam
formalin buffer netral 10% untuk pemrosesan histologis.
Penentuan penanda fungsi hati, ginjal, dan
jantung
Alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST),
alkaline phosphatase (ALP), kreatinin, urea, dan kreatinin kinase-MB
ditentukan dalam sampel serum menggunakan kit reagen yang dibeli
dari Spinreact (Spanyol), sesuai dengan instruksi pabriknya.
Penentuan tumor necrosis factor alpha
dan interleukin-1beta
TNF-ÿ dan IL-1ÿ ditentukan dalam serum kontrol dan tikus percobaan
menggunakan kit ELISA spesifik (R&D Systems, USA), mengikuti
instruksi pabriknya.
Penentuan peroksidasi lipid dan antioksidan
Sampel hati, ginjal, jantung, dan lambung yang terkumpul dicuci
dalam PBS dingin, ditimbang, dan dihomogenisasi dalam PBS dingin
(10% b/v). Homogenat disentrifugasi dan supernatan bening
digunakan untuk menguji malondialdehida (MDA; (Ohkawa et al.
1979)), glutathione tereduksi (GSH; (Beutler
Machine Translated by Google
Environ Sci Pollut Res (2019) 26:17427–17437
et al. 1963)), superoksida dismutase (SOD; (Marklund dan Marklund
1974)) dan katalase (CAT; (Aebi 1984)).
Penentuan parameter hematologi
Hitung eritrosit (RBC), kandungan hemoglobin (HB), hematokrit
(Hct), mean corpuscular volume (MCV), mean corpus cular
hemoglobin (MCH), dan jumlah leukosit (WBC) ditentukan dalam
sampel darah yang dikumpulkan dalam tabung EDTA menggunakan
Penganalisis hematologi Genius Kt-6400 (Diamond Diagnostics
Inc., AS).
Histologi
Sampel hati, ginjal, jantung, dan lambung difiksasi dalam formalin
buffer netral 10% selama 24 jam, didehidrasi, dibersihkan, dan
disematkan dalam lilin parafin. Empat bagian mikrometer dipotong
menggunakan mikrotom putar semi-bermotor RM2245 (Leica
Biosystems, Jerman). Irisan tersebut diproses untuk pewarnaan
matoxylin dan eosin (H&E) dan kemudian diperiksa menggunakan
mikroskop Olympus BX51.
Analisis statistik
Data dianalisis menggunakan Graphpad Prism versi 5 (San Diego,
CA, USA) dan dinyatakan sebagai mean ± standard error of the
mean (SEM). Rata-rata dibandingkan dengan menggunakan
ANOVA satu arah diikuti dengan analisis post hoc uji Tukey. Nilai
AP <0,05 dianggap signifikan.
Hasil
CPO-TWP menginduksi disfungsi hati, ginjal, dan jantung
pada tikus
Mencit yang diberi CPO-TWP 250 dan 500 mg/kg 35% menunjukkan
kerusakan hepatosit yang dibuktikan dengan peningkatan signifikan
kadar penanda fungsi hati dalam sirkulasi (Tabel 1). ALT meningkat
secara signifikan dalam serum tikus yang menerima 250 mg/kg (P
<0,01) dan 500 mg/kg (P <0,001) CPO-TWP bila dibandingkan
dengan tikus kontrol. Serum AST dan ALP menunjukkan peningkatan
yang signifikan pada tikus yang menerima 35% CPO-TWP pada
dosis 250 mg/kg (P < 0,01; P < 0,01) dan 500 mg/kg (P < 0,001; P
< 0,01) selama 3 minggu berturut-turut (Tabel 1).
Kadar kreatinin dan urea serum juga meningkat secara
signifikan pada tikus yang menerima 250 mg/kg (P <0,01; P <0,01)
dan 500 mg/kg (P <0,001; P <0,01) 35% CPO-TWP sebagai
perwakilan direpresentasi pada Tabel 1. Penanda fungsi jantung CK-MBmenerima
meningkat secara signifikan dalam serum tikus yang terpapar 250
mg/kg (P <0,01) atau 500 mg/kg (P <0,001) 35% CPO TWP bila
dibandingkan dengan kelompok kontrol (Tabel 1) .
17429
Tabel 1 Pengaruh 35% CPO-TWP terhadap fungsi hati, jantung, dan ginjal mencit
Kontrol CPO-TWP
250 mg/kg 500 mg/kg
ALT (U/L) 25,61 ± 2,98 69,15 ± 3,41** 76,77 ± 6,36***
AST (U/L) 40,79 ± 3,83 79,58 ± 4,32** 93,82 ± 5,09***
ALP (U/L) 58,83 ± 4,97 95,34 ± 6,62** 103,75 ± 7,57**
Kreatinin (mg/dl) 0,49 ± 0,03 0,96 ± 0,06** Urea (mg/dl) 1,14 ± 0,07***
17,48 ± 2,07 40,43 ± 4,14** 44,48 ± 3,37**
CK-MB (U/L) 65,83 ± 3,65 116,94 ± 6,49** 132,60 ± 7,36***
Data dinyatakan sebagai rata-rata ± SEM
Jumlah mencit pada masing-masing kelompok adalah enam ekor
**P <0,01 dan ***P <0,001 versus kontrol
CPO-TWP menyebabkan perubahan histologis pada hati,
ginjal, jantung, dan perut mencit
Disfungsi organ yang diinduksi CPO-TWP selanjutnya dikonfirmasi
oleh temuan histopatologis. Pemeriksaan mikroskopis bagian hati
dari tikus normal mengungkapkan struktur normal lobulus hati,
hepatosit, dan sinusoid seperti yang ditunjukkan pada Gambar. 1A
dan B. Tikus menerima 250 mg/kg (Gambar 1C dan D) atau 500
mg/kg (Gambar .1E dan F) 35% CPO-TWP menunjukkan pembuluh
darah tersumbat, vakuolasi, dan infiltrasi sel inflamasi.
Bagian ginjal tikus normal menunjukkan struktur normal
glomeruli ginjal dan tubulus ginjal (Gambar 2A dan B). Di sisi lain,
degenerasi glomerulus dan infiltrasi sel inflamasi terlihat pada
bagian ginjal tikus yang menerima 250 mg/kg (Gambar 2C dan D)
atau 500 mg/kg (Gambar.
2E dan F) 35% CPO-TWP.
Bagian jantung yang diwarnai dengan H&E dan diperiksa
menggunakan mikroskop cahaya menunjukkan struktur normal
myo cardium dan tidak ada perubahan histologis (Gbr. 3A dan B).
Tikus menerima 35% CPO-TWP pada tingkat dosis 250 mg/kg
(Gambar 3C dan D) dan 500 mg/kg (Gambar 3E dan F) menunjukkan
beberapa gangguan histologis kardiomiosit, kongesti, dan infiltrasi
sel inflamasi.
Laporan sebelumnya telah menunjukkan dampak negatif dari
agen pemutih gigi pada mukosa lambung. Dalam konteks ini, Dahl
dan Becher (Dahl dan Becher 1995) melaporkan bahwa paparan
akut CPO menginduksi ulkus mukosa lambung yang tergantung
dosis. Oleh karena itu, kami meneliti efek pemberian kronis 35%
CPO-TWP pada mukosa lambung (Gbr. 4). Di mana tikus kontrol
menunjukkan mukosa lambung normal (Gambar 4A dan B), tikus
tadi 250 mg/kg (Gambar 4 C dan D) dan 500 mg/kg (Gambar
4E dan F) 35% CPO-TWP menunjukkan darah yang tersumbat
pembuluh darah dan sekresi lendir yang kental.
Machine Translated by Google

17430 Environ Sci Pollut Res (2019) 26:17427–17437

Gambar 1 Fotomikrograf
bagian yang diwarnai H&E di hati
tikus kontrol (A, B) yang
menunjukkan struktur normal
lobulus hati, vena sentral [CV],
hepatosit [HC], dan sinusoid [S];
(C, D) mencit menerima 250 mg/kg
CPO-TWP; dan (E, F) mencit
menerima 500 mg/kg CPO TWP
yang menunjukkan pembuluh darah
padat [ccv], vakuolasi, dan infiltrasi
sel inflamasi [panah kepala]

CPO-TWP memprovokasi stres oksidatif di hati, jantung, ginjal,
dan perut tikus
Untuk menguji asumsi bahwa 35% CPO-TWP dapat
memberikan dampaknya pada jaringan yang berbeda melalui
induksi stres oksidatif, kami menentukan kadar MDA dan
antioksidan di hati, ginjal, jantung, dan perut tikus. Pemberian
CPO-TWP 35% secara oral pada dosis 250 mg/kg dan 500
mg/kg selama 3 minggu menginduksi peningkatan peroksidasi
lipid yang signifikan di hati (P < 0,01; P < 0,001), ginjal (P <
0,01; P <0,001), jantung (P <0,05; P <0,01), dan perut (P
<0,01; P <0,001) tikus, seperti yang digambarkan pada
Gambar. 5A . Sebaliknya, kadar GSH berkurang secara
signifikan di hati (P <0,05; P <0,001), ginjal (P <0,01; P
<0,001), jantung (P <0,05; P <0,05), dan lambung (P <0,05; P
< 0,01) mencit menerima 35% CPO-TWP masing-masing
dengan dosis 250 dan 500 mg/kg (Gbr. 5B). Pemberian TWP
CPO pada dosis 250 dan 500 mg/kg selama 3 minggu
mengakibatkan penurunan aktivitas
SOD di hati (P <0,01; P <0,01), ginjal (P <0,05; P <0,05),
jantung (P <0,05; P <0,05), dan perut (P <0,01; P <0,01) tikus
sebagai digambarkan pada Gambar. 5C.
Demikian pula, aktivitas CAT berkurang secara signifikan di
hati, ginjal, jantung, dan perut tikus yang menerima dosis 35%
CPO-TWP (Gbr. 5D).
CPO-TWP menginduksi peradangan pada tikus
Tingkat sirkulasi sitokin TNF-ÿ dan IL-1ÿ diuji untuk
menentukan apakah 35% CPO-TWP memiliki efek pro
inflamasi pada tikus. Pemberian 250 mg/kg dan 500 mg/kg
35% CPO-TWP menginduksi peningkatan serum TNF-ÿ yang
signifikan (P <0,05; P <0,01) bila dibandingkan dengan tikus
kontrol, seperti yang digambarkan pada Gambar 6A . CPO-
TWP memberikan efek tergantung dosis pada kadar serum
TNF-ÿ. IL-1ÿ secara signifikan meningkat dalam serum tikus
yang menerima 250 mg/kg (P <0,05) dan 500 mg/kg (P <0,01)
35% CPO-TWP jika dibandingkan dengan tikus kontrol (Gbr. 6B) .
Machine Translated by Google

Environ Sci Pollut Res (2019) 26:17427–17437 17431

Gambar 2 Fotomikrograf
bagian yang diwarnai H&E
pada ginjal tikus kontrol (A, B)
yang menunjukkan struktur normal
glomeruli ginjal [G] dan tubulus
ginjal [T], (C, D) tikus menerima
250 mg/kg CPO-TWP , dan (E, F)
mencit menerima 500 mg/kg CPO
TWP yang menunjukkan degenerasi
glomerulus dan infiltrasi sel inflamasi
[panah]

CPO-TWP menginduksi perubahan hematologis pada tikus Diskusi

Tikus yang menerima 250 atau 500 mg/kg 35% CPO-TWP Teknik pemutihan gigi mungkin memiliki efek samping yang berbeda,
menunjukkan penurunan yang signifikan dalam jumlah sel darah tergantung pada frekuensi dan teknik yang digunakan (Matis et al.
merah (P <0,05; P <0,01) jika dibandingkan dengan tikus kontrol (Gbr. 2006). Dengan demikian, Paula et al. telah menunjukkan efek produk
7A) . Kandungan Hb menurun secara signifikan pada tikus yang pemutih gigi yang mengandung 6% H2O2 pada histologi mukosa
menerima 250 (P <0,05) dan 500 mg/kg (P <0,01) CPO TWP selama lambung pada tikus (Paula et al. 2015). Penggunaan produk yang
3 minggu, seperti yang ditunjukkan pada Gambar 7B . Demikian pula, mengandung H2O2 6% dikaitkan dengan beberapa lesi histologis,
Hct menunjukkan penurunan yang signifikan pada 250 (P <0,05) atau termasuk fokus nekrosis dan hilangnya lapisan permukaan epitel
500 mg / kg (P <0,01) 35% tikus yang diinduksi CPO-TWP bila mukosa (Paula et al. 2015).
dibandingkan dengan kelompok kontrol (Gbr. 7C) . Pemberian CPO- Selain itu, Dahl dan Becher melaporkan bahwa paparan akut terhadap
TWP 35% secara oral tidak menyebabkan perubahan (P > 0,05) pada CPO menginduksi ulserasi yang tergantung dosis pada mukosa
MCV dan MCH seperti yang digambarkan masing-masing pada Gambar 7Dlambung (Dahl7E.
dan Gambar dan Becher 1995). Namun, studi tentang efek samping
Jumlah leukosit menunjukkan pola yang berbeda di mana ia TWP yang mengandung CPO di hati, ginjal, dan jantung masih langka.
meningkat secara signifikan dalam darah tikus yang menerima 250 Di sini, kami menyelidiki dampak Opalescence 35% CPO pada hati,
(P <0,01) dan 500 mg/kg (P <0,001) CPO-TWP selama 3 minggu jika ginjal, jantung, dan perut tikus. Kami berasumsi bahwa efek toksik
dibandingkan dengan kelompok kontrol (Gbr. 7F ). Dosis CPO-TWP CPO pada organ yang berbeda mungkin diinduksi melalui induksi
yang lebih tinggi menyebabkan peningkatan jumlah WBC yang stres oksidatif dan peradangan.
signifikan (P <0,01) jika dibandingkan dengan dosis yang lebih rendah (Gbr. 7F).
Machine Translated by Google
17432
Gambar 3 Fotomikrograf
bagian yang diwarnai H&E di
jantung (A, B) Tikus kontrol
menunjukkan struktur normal
miokardium [panah]; (C, D) mencit
menerima 250 mg/kg CPO-TWP;
dan (E, F) mencit menerima 500
mg/kg CPO-TWP yang menunjukkan
gangguan histologis kardiomiosit
[panah], kemacetan [kepala panah;
D dan F], dan infiltrasi sel inflamasi
[kepala panah; C dan E]
Pemberian oral 35% CPO-TWP menginduksi
hepatotoksisitas dibuktikan dengan peningkatan yang
signifikan pada level sirkulasi ALT, AST, dan ALP. Enzim ini
terletak di dalam patosit dan dilepaskan ke sirkulasi setelah
kerusakan hepatosit. Dengan demikian, tingkat sirkulasi
enzim ini digunakan sebagai penanda sensitif cedera
hepatosit. Mengingat peran sentral hati dalam membersihkan
obat dan zat beracun, kejadian hepatotoksik adalah reaksi
obat yang merugikan yang paling umum (Reuben et al. 2010).
Efek hepatotoksik CPO-TWP pada tikus telah dikonfirmasi lebih lanjut
Pemeriksaan mikroskopis mengungkapkan perubahan
histologis di hati tikus, termasuk pembuluh darah yang
tersumbat, vakuola dan infiltrasi sel inflamasi. Selain
kerusakan sel hepato, tikus menerima 35% CPO-TWP yang
ditunjukkan dalam kadar serum kreatinin, urea, dan CK-MB
yang meningkat, menunjukkan cedera ginjal serta jantung.
Untuk mendukung hasil ini, ginjal tikus yang diinduksi CPO
35% menunjukkan degenerasi glomerulus dan infiltrasi sel
inflamasi, dan beberapa gangguan tologis kardiomiosit,
kongesti, dan infiltrasi sel inflamasi telah diamati pada
Environ Sci Pollut Res (2019) 26:17427–17437
bagian jantung yang diperiksa. Pemberian akut 500 mg/kg
CPO-TWP sebelumnya telah terbukti tidak berpengaruh pada
histologi hati tikus, sedangkan ginjal tampak lebih hiperemik
(Dahl dan Becher 1995). Namun, pemberian kronis 250 dan
500 mg/kg 35% CPO-TWP dalam penelitian ini menyebabkan
perubahan histologis pada ginjal dan hati tikus. Oleh karena
itu, temuan biokimia dan histologis menunjukkan peran CPO
dalam menginduksi hepato-, nefro-, dan kardiotoksisitas.
Selanjutnya, lambung mencit yang diberi CPO-TWP 35%
menunjukkan
oleh temuanpembuluh
histologis.
darah tersumbat dan sekret lendir
kental. Dampak CPO-TWP pada mukosa lambung sebelumnya
telah dilaporkan oleh Dahl dan Becher (Dahl dan Becher
1995) yang menunjukkan ulserasi tergantung dosis setelah
paparan akut.
Selanjutnya, kami menentukan kadar peroksidasi lipid di
hati, ginjal, jantung, dan lambung mencit yang diinduksi CPO.
Kelebihan produksi ROS telah berimplikasi pada berbagai
kondisi penyakit, termasuk hati (Mahmoud et al. 2017b,
2017c), ginjal (Abd El-Twab et al. 2016; Al-Rasheed et al.
2018), dan cedera jantung (Al- Rasheed et al.2017 ; Hozayen
Machine Translated by Google

Environ Sci Pollut Res (2019) 26:17427–17437 17433

Gambar 4 Fotomikrograf bagian

yang diwarnai H&E di perut tikus
kontrol (A, B) yang menunjukkan
mukosa lambung normal dengan
lubang lambung normal [GP] dan sel
lambung [GC]; (C, D) mencit menerima
250 mg/kg CPO-TWP; dan (E, F)
mencit menerima 500 mg/kg CPO-
TWP yang menunjukkan perubahan
lubang lambung [panah tipis], kelenjar
lambung [kepala panah], sel mukosa
permukaan [panah tebal], dan
pembuluh darah padat [panah
melengkung]

et al. 2019). ROS dapat menginduksi kerusakan pada molekul makro
seluler, termasuk DNA, protein, dan lipid, yang mengakibatkan kematian
sel. Peroksidasi lipid membran adalah salah satu efek merusak dari
ROS. Mengingat adanya ikatan rangkap karbon-karbon dalam asam
lemak tak jenuh ganda dari lipid membran, mereka rentan terhadap
kerusakan oleh ROS (Ghosh et al.
2015). Peroksidasi lipid dapat menyebabkan gangguan membran sel
dan inaktivasi protein yang terikat membran (Birben et al. 2012). Dalam
penelitian kami, pemberian oral 35% CPO-TWP menginduksi
peningkatan MDA yang signifikan, produk peroksidasi lipid, di hati,
ginjal, dan jantung tikus.
Oleh karena itu, dapat diasumsikan bahwa stres oksidatif memainkan
peran kunci, setidaknya sebagian, dalam toksisitas CPO-TWP pada tikus.
Stres oksidatif merupakan kondisi akibat ketidakseimbangan antara
kadar ROS dan sistem pertahanan antioksidan seluler (Liu et al. 2014).
Pertahanan antioksidan, baik enzimatik maupun non-enzimatik,
memberikan perlindungan terhadap efek merusak dari ROS dan oksidan
lainnya. ROS dapat mempromosikan ilasi karbon protein dan hilangnya
fungsinya (Suzuki et al.
2010). Kerusakan protein oksidatif ini dapat menurunkan kapasitas
antioksidan seluler melalui perubahan fungsi dan strukturnya (Pavloviÿ
et al. 2016). Oleh karena itu, penurunan kadar antioksidan dalam sel
merupakan penanda stres oksidatif. Di sini, tikus yang diinduksi CPO
menunjukkan kandungan GSH yang berkurang secara signifikan, dan
aktivitas enzim antioksidan SOD dan CAT. Selain itu, kami menunjukkan
peningkatan peroksidasi lipid dan penurunan antioksidan dalam perut
tikus yang diinduksi CPO. Meskipun CPO-TWP telah dilaporkan
menyebabkan tukak lambung pada tikus (Dahl dan Becher 1995),
mekanisme yang mendasari efeknya pada mukosa lambung masih
belum jelas. Dengan menunjukkan potensi CPO-TWP untuk menginduksi
stres oksidatif, temuan kami memberikan penjelasan tentang efek
buruknya pada mukosa lambung. Potensi pro oksidan CPO-TWP dapat
dijelaskan dengan H2O2 yang dihasilkan selama disosiasi. H2O2 yang
dihasilkan mewakili sekitar sepertiga dari konsentrasi CPO, dan urea
terurai menjadi amonia dan air (da Costa et al. 2012; da Silva Marques
et al. 2012).
Machine Translated by Google

17434 Environ Sci Pollut Res (2019) 26:17427–17437

Gambar 5 CPO-TWP memicu

stres oksidatif pada hati, jantung,
ginjal, dan perut tikus.
CPO-TWP menginduksi peningkatan
yang signifikan dalam peroksidasi
lipid (A) dan penurunan yang signifikan
dalam GSH (B), SOD (C) dan CAT
(D). Data dinyatakan sebagai rata-
rata ± SEM, n = 6. *P <0,05, **P
<0,01, dan ***P <0,001 versus kontrol.
CPO, karbamid peroksida; TWP,
produk pemutih gigi; MDA,
malondialdehid; GSH, mengurangi
glutathione; SOD, dismutase
superoksida; KUCING, katalase

Stres oksidatif yang diinduksi CPO dalam penyelidikan ini dikaitkan
dengan peningkatan level sirkulasi dari sitokin pro inflamasi, TNF-ÿ dan
IL-1ÿ. Peningkatan kadar mediator inflamasi ini menunjukkan peran
peradangan pada toksisitas CPO-TWP pada tikus. Dalam penelitian
terbaru, produk pemutih gigi yang mengandung H2O2 38% memicu
peradangan pulpa sedang setelah 24 jam penerapannya pada tikus,
sedangkan peradangan parah dan nekrosis diamati setelah 10 hari (Silva-
Costa et al. 2018) . Peradangan telah dibuktikan dengan peningkatan
pewarnaan imunohistokimia TNF-ÿ dan IL-1ÿ (Silva-Costa et al. 2018).
Mekanisme pasti yang mendasari potensi pro-inflamasi TWP tidak
diketahui.
Namun, efek pro-oksidan dari pemutih gigi mungkin saja
terlibat dalam peradangan yang diinduksi. ROS yang berlebihan bisa
mengaktifkan redoks-sensitif faktor nuklir-kappaB (NF-ÿB), faktor
transkripsi yang mengontrol ekspresi dan produksi beberapa mediator
inflamasi, termasuk TNF-ÿ dan IL-1ÿ (Mahmoud dan Al Dera 2015) .
Peningkatan sitokin pro inflamasi dalam hubungannya dengan stres
oksidatif telah dilaporkan pada model hewan yang berbeda dari hati
(Alqahtani dan Mahmoud 2016; Mahmoud 2014; Mahmoud et al. 2017a),
ginjal (Abd El-Twab et al. 2016), dan jantung (Al Rasheed et al. 2016; Al-
Rasheed et al. 2017; Hozayen et al. 2019) kerusakan seperti yang kami
laporkan sebelumnya.
Selain stres oksidatif dan peradangan, pemberian TWP CPO
dikaitkan dengan hematologis

Gambar. 6 CPO-TWP
menginduksi peningkatan serum
TNF-ÿ (A) dan IL-1ÿ (B) yang
signifikan. Data dinyatakan sebagai
rata-rata ± SEM, n = 6. *P <0,05 dan
**P <0,01 versus kontrol, dan #P
<0,05 versus 250 mg/kg CPO-TWP.
CPO, karbamid peroksida; TWP,
produk pemutih gigi; TNF-ÿ, tumor
necrosis factor alpha; IL 1ÿ,
interleukin-1beta
Machine Translated by Google

Environ Sci Pollut Res (2019) 26:17427–17437 17435

Gambar. 7 CPO-TWP
menginduksi perubahan hematologis pada tikus.
CPO-TWP memprovokasi penurunan
yang signifikan dalam jumlah sel darah
merah, konten Hb, dan Hct, dan
peningkatan jumlah sel darah putih
yang signifikan. MCV dan MCH tidak
diubah secara signifikan pada tikus
yang diinduksi CPO-TWP. Data
dinyatakan sebagai rata-rata ± SEM, n
= 6. *P < 0,05, **P <0,01, dan ***P
<0,001 versus kontrol, dan ##P <0,01
versus 250 mg/kg CPO-TWP.
CPO, karbamid peroksida; TWP,
produk pemutih gigi; Hb, hemoglobin;
Hct, hematokrit; MCV, volume sel
hidup rata-rata; MCH, berarti hemoglobin
korpuskular

perubahan. Penilaian parameter hematologi telah digunakan sebagai
indeks awal toksisitas obat (Alya et al. 2015; Germoush et al. 2018).
Mencit yang mendapat CPO-TWP selama 3 minggu menunjukkan
penurunan yang signifikan pada jumlah eritrosit, kadar HB dan Hct. Di sisi
lain, MCV dan KIA
tidak terpengaruh secara signifikan, menunjukkan bahwa penurunan
jumlah sel darah merah adalah hasil dari lisis. Stres oksidatif mungkin
terkait dengan penurunan jumlah sel darah merah pada tikus yang diinduksi CPO.
Di bawah kondisi stres oksidatif, ROS dapat menginduksi lipid per
oksidasi dan menurunkan deformabilitas membran sel darah merah,
Machine Translated by Google
17436
mengakibatkan lisis sel (Kolanjiappan et al. 2002). Berbeda dengan
sel darah merah, tikus yang diinduksi CPO menunjukkan leukositosis
yang signifikan dan tergantung dosis yang berkorelasi positif dengan
peningkatan kadar sitokin proinflamasi serum.
Sebagai kesimpulan, penelitian ini memberikan informasi baru
tentang toksisitas 35% pemutih gigi yang mengandung CPO pada
tikus percobaan. Efek merusak dari pemutih gigi pada mukosa
lambung telah dilaporkan sebelumnya; namun, hasil kami
menunjukkan bahwa CPO-TWP dapat menginduksi hati, ginjal, dan
jantung juri. CPO-TWP memprovokasi perubahan fungsional dan
histologis, peroksidasi lipid, dan penurunan pertahanan antioksidan
pada berbagai organ tikus. Selanjutnya, CPO-TWP menginduksi
peradangan dan perubahan hematologis. Dengan demikian,
penggunaan pemutih gigi yang mengandung CPO selama terapi
pemutihan harus dipantau dengan sangat hati-hati oleh dokter gigi
untuk menghindari penerapan jumlah yang berlebihan serta
asupannya. Namun, perlu dicatat bahwa dosis yang digunakan dalam
penelitian ini lebih tinggi daripada paparan harian TWP pada manusia.
Oleh karena itu, studi lebih lanjut diperlukan untuk mengevaluasi dampak dari dosis yang lebih rendah.
Informasi Pendanaan Penulis menyampaikan penghargaan mereka kepada Deanship
of Scientific Research di King Saud University untuk mendanai pekerjaan ini melalui
kelompok penelitian No (RG-1439-60).
Kepatuhan dengan standar etika
Konflik kepentingan Para penulis menyatakan bahwa mereka tidak memiliki konflik
kepentingan.
Referensi
Abd El-Twab SM, Hozayen WG, Hussein OE, Mahmoud AM (2016) Asam 18beta-
Glycyrrhetinic melindungi terhadap cedera ginjal yang diinduksi metotreksat
dengan mengatur jalur Nrf2/ARE/HO-1 dan antioksidan endogen. Ren Fail 8:1–
12 Aebi H (1984) [13] Katalase in vitro, metode dalam enzim. Academic Press,
Cambridge, pp 121–126 Al Shethri S, Matis BA, Cochran MA, Zekonis R, Stropes M
(2003) Evaluasi klinis terhadap dua produk pemutihan di kantor. Oper Dent
28:488–495
Alqahtani S, Mahmoud AM (2016) Gamma-glutamylcysteine ethyl ester melindungi
dari cedera hati yang diinduksi siklofosfamid dan perubahan hematologis melalui
peningkatan regulasi PPARgamma dan pelemahan stres oksidatif, peradangan,
dan apoptosis. Oxidative Med Cell Longev 2016:4016209 Al-Rasheed NM, Al-
Rasheed NM, Hasan IH, Al-Amin MA, Al-Ajmi HN, Mahmoud AM (2016)
Sitagliptin melemahkan kardiomiopati dengan memodulasi jalur pensinyalan JAK/
STAT pada tikus diabetes eksperimental . Drug Des Devel Ther 10:2095–2107
Al-Rasheed NM, Al-Rasheed NM, Hasan IH, Alamin M, Al-Ajmi HN, Mohammad
RA, Mahmoud AM (2017) Simvastatin memperbaiki kardiomiopati diabetik
dengan mengurangi stres oksidatif dan peradangan pada tikus. Oxid Med Cell Longev
2017: ID Artikel: 1092015 Al-Rasheed NM, Al-Rasheed NM, Bassiouni YA,
Hasan IH, Al-Amin MA, Al-Ajmi HN, Mahmoud AM (2018) Simvastatin
memperbaiki nefropati diabetik dengan melemahkan stres oksidatif dan apoptosis
pada model tikus diabetes tipe 1 yang diinduksi streptozotocin. Apoteker Biomed
105:290–298
Environ Sci Pollut Res (2019) 26:17427–17437
Alya A, Ines DB, Montassar L, Najoua G, Saloua EF (2015) Stres oksidatif, perubahan
biokimia, dan hiperlipidemia pada tikus betina yang diinduksi oleh toksisitas
timbal kronis selama periode pubertas dan pasca pubertas. Jurnal Ilmu
Kedokteran Dasar Iran 18:1034–1043 Beutler E, Duron O, Kelly BM (1963)
Peningkatan metode untuk penentuan
bangsa glutathione darah. J Lab Clin Med 61:882–888 Birben E,
Sahiner UM, Sackesen C, Erzurum S, Kalayci O (2012)
Stres oksidatif dan pertahanan antioksidan. Jurnal Organisasi Alergi Dunia 5:9–
19
Cherry DV, Bowers DE Jr, Thomas L, Redmond AF (1993) Efek ekologi toksik akut
dari pemutih gigi yang tertelan pada tikus betina. J Dent Res 72:1298–1303
da Costa JB, McPharlin R, Hilton T, Ferracane JI, Wang M (2012)
Perbandingan dua produk pemutih di rumah dengan konsentrasi peroksida yang
sama dan metode pengiriman yang berbeda. Oper Dent 37:333– 339
da Silva Marques DN, Silveira JM, Marques JR, Amaral JA, Guilherme NM, da Mata
AD (2012) Pelepasan hidrogen peroksida secara kinetik dari berbagai produk
pemutih. Eur J Esthet Dent 7:344–352
Dahl JE, Becher R (1995) Toksisitas akut karbamid peroksida dan bahan pemutih gigi
yang tersedia secara komersial pada tikus. J Dent Res 74: 710–714
Fugaro JO, Nordahl I, Fugaro OJ, Matis BA, Mjor IA (2004) Reaksi pulp terhadap
pemutihan vital. Oper Dent 29:363–368 Germoush MO, Othman SI, Al-Qaraawi
MA, Al-Harbi HM, Hussein OE, Al-Basher G, Alotaibi MF, Elgebaly HA, Sandhu MA,
Allam AA, Mahmoud AM (2018) Umbelliferone mencegah stres oksidatif, dalam
peradangan dan perubahan hematologis, dan memodulasi pensinyalan glutamat-
nitrat oksida-cGMP pada tikus hiperamonemia.
Apoteker Biomed 102:392–402
Ghosh S, Bhattacharyya S, Rashid K, Sil PC (2015) Kurkumin melindungi hati tikus
dari patofisiologi diabetes yang diinduksi streptozotocin dengan menangkal
spesies oksigen reaktif dan menghambat aktivasi p53 dan MAPK yang
memediasi jalur respons stres. Toxicol Rep 2:365–376
Gokay O, Tuncbilek M, Ertan R (2000) Penetrasi ruang pulpa oleh bahan pemutih
karbamid peroksida pada gigi yang direstorasi dengan resin komposit. J
Rehabilitasi Lisan 27:428–431
Gokay O, Mujdeci A, Algn E (2004) Penetrasi peroksida ke dalam pulp
dari strip pemutih. J Endod 30:887–889
Hozayen WG, Mahmoud AM, Desouky EM, El-Nahass ES, Soliman HA, Farghali AA
(2019) Toksisitas jantung dan paru dari nanopartikel silika berpori meso dikaitkan
dengan produksi ROS yang berlebihan dan ketidakseimbangan redoks pada
tikus Wistar. Apoteker Biomed
109:2527–2538
Kolanjiappan K, Manoharan S, Kayalvizhi M (2002) Pengukuran lipid eritrosit,
peroksidasi lipid, antioksidan dan kerapuhan osmotik pada pasien kanker serviks.
Clin Chim Acta 326:143–149 Leonard RH Jr, Van Haywood B, Caplan DJ, Tart
ND (2003) Nightguard vital bleaching gigi bernoda tetrasiklin: 90 bulan pasca
perawatan. J Esthet Restor Dent ... [et al.] 15:142–152 Lima AF, Lessa FC,
Mancini MN, Hebling J, Costa CA, Marchi GM (2010) Peran protektif transdentinal
natrium askorbat terhadap efek sitopatik H2O2 yang dilepaskan dari bahan pemutih.
Oral Surg Oral Med Oral Pathol Radiol Oral Endod 109:e70–e76 Lima AF,
Ribeiro AP, Soares DG, Sacono NT, Hebling J, de Souza Costa CA (2013) Efek toksik
dari aplikasi harian 10% karbamid peroksida pada odontoblast-like sel MDPC-23.
Acta Odontol Scand 71:1319–1325
Liu Q, Wang S, Cai L (2014) Kardiomiopati diabetik dan mekanismenya: peran stres
oksidatif dan kerusakan. Journal of diabetes in vestigation 5:623–634
Mahmoud AM (2014) Hesperidin melindungi terhadap hepatotoksisitas yang diinduksi
siklofosfamid dengan peningkatan PPARÿ dan pencabutan stres oksidatif dan
peradangan. Can J Physiol Pharmacol 92: 717–724
Machine Translated by Google
Environ Sci Pollut Res (2019) 26:17427–17437
Mahmoud AM, Al Dera HS (2015) 18ÿ-glycyrrhetinic acid memberikan efek
perlindungan terhadap hepatotoksisitas yang diinduksi siklofosfamid:
peran potensial peningkatan regulasi PPARÿ dan Nrf2. Nutr Gen 10:1–13
Mahmoud AM, Germoush MO, Alotaibi MF, Hussein OE (2017a)
Kemungkinan keterlibatan up-regulasi Nrf2 dan PPARgamma dalam efek
perlindungan umbelliferone terhadap hepatotoksisitas yang diinduksi
siklofosfamid. Biomed Pharmacother 86:297–306 Mahmoud AM, Hozayen
WG, Ramadan SM (2017b) Berberine amelio menilai cedera hati yang diinduksi
metotreksat dengan mengaktifkan jalur Nrf2/HO-1 dan PPARgamma,
serta menekan stres oksidatif dan apoptosis pada tikus. Biomed
Pharmacother 94:280–291 Mahmoud AM, Hussein OE, Hozayen WG,
Abd El-Twab SM (2017c)
Hepatotoksisitas metotreksat dikaitkan dengan stres oksidatif, dan
penurunan regulasi PPARgamma dan Nrf2: efek perlindungan asam
18beta-glisirretinat. Chem Biol Interact 270:59–72 Majeed A, Farooq I,
Grobler SR, Rossouw RJ (2015) Pemutihan gigi: ulasan tentang khasiat dan
efek samping dari berbagai produk pemutih gigi. J Coll Physicians Surg—
Pak: JCPSP 25:891–896 Marklund S, Marklund G (1974) Keterlibatan
radikal anion superoksida dalam autoksidasi pirogalol dan pengujian yang
nyaman untuk superoksida dismutase. FEBS Eur J Biochem 47:469–474
Matis BA, Wang Y, Eckert GJ, Cochran MA, Jiang T (2006) Pemutihan
gigi bernoda tetrasiklin yang diperpanjang: studi 5 tahun. Operasi Penyok 31:
643–651
Matis BA, Cochran MA, Eckert G (2009) Tinjauan efektivitas berbagai sistem
pemutihan gigi. Oper Dent 34:230–235 Matis BA, Matis JI, Wang Y,
Monteiro S, Al-Qunaian TA, Millard R (2013) Konsentrasi bahan pemutih
berlabel vs aktual. Oper Dent 38:334–343 Ohkawa H, Ohishi N, Yagi K
(1979) Uji peroksida lipid dalam jaringan hewan dengan reaksi asam
tiobarbiturat. Anal Biochem 95:351–358 Paula AB, Dias MI, Ferreira MM,
Carrilho T, Marto CM, Casalta J, Cabrita AS, Carrilho E (2015) Efek pada
mukosa lambung yang diinduksi
17437
dengan pemutihan gigi – studi eksperimental dengan 6% hidrogen per
oksida pada tikus. J Appl Ilmu Lisan: Revista FOB 23:497–507
Pavloviÿ D, Saviÿ-Radojeviÿ A, Plješa-Ercegovac M, Radiÿ T, Ristiÿ S, ÿoriÿ V,
Matiÿ M, Simiÿ T, Djukanoviÿ L (2016) Biomarker kerusakan oksidatif dan
aktivitas enzim antioksidan pada pasien nefropati endemik Balkan pra-
dialisis. Int Urol Nephrol 48:257–263 Pugh G Jr, Zaidel L, Lin N, Stranick
M, Bagley D (2005) Hidrogen peroksida tingkat tinggi dalam formula pemutih
gigi semalaman: efek pada enamel dan pulpa. J Esthet Restor Dent [et
al.] 17:40–45 diskusi 46-7
Reuben A, Koch DG, Lee WM (2010) Gagal hati akut yang diinduksi oleh obat:
hasil dari studi prospektif multisenter AS. Hepatologi 52:
2065–2076
Rezende M, Loguercio AD, Kossatz S, Reis A (2016) Faktor prediktif pada
efikasi dan risiko/intensitas gigi sensitif pemutihan gigi: regresi multi dan
analisis logistik. J Dent 45:1–6 Silva-Costa R, Ribeiro AEL, Assunção IV,
Araújo Júnior RF, Araújo AA, Guerra GCB, Borges BCD (2018) Pemutihan gigi
di kantor dengan hidrogen peroksida 38% meningkatkan peradangan
pulpa sedang/berat dan produksi ll-1b, TNF-b, GPX, FGF-2 dan
osteokalsin pada tikus. J Appl Ilmu Lisan 26:e20170367
Soares DG, Ribeiro AP, Sacono NT, Coldebella CR, Hebling J, Costa CA
(2011) Transenamel dan sitotoksisitas transdentinal karbamid per gel
pemutih oksida pada sel MDPC-23 seperti odontoblas. Int Endod
J 44:116–125
Suzuki YJ, Carini M, Butterfield DA (2010) Karbonilasi protein.
Sinyal Redoks Antioksidan 12:323–325
Catatan penerbit Springer Nature tetap netral sehubungan dengan klaim yuris
dictional dalam peta yang diterbitkan dan afiliasi kelembagaan.