LAPORAN LENGKAP PRAKTIKUM

MATAKULIAH MIKROBIOLOGI

LAPORAN LENGKAP

FATULLAH ALFAYAT

PROGRAM STUDI AGROTEKNOLOGI

FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS TADULAKO
PALU
2022
 LAPORAN LENGKAP PRAKTIKUM
MATAKULIAH MIKROBIOLOGI

LAPORAN LENGKAP

Disusun sebagai Salah Satu Syarat untuk Menyelesaikan

Matakuliah Mikrobiologi Pertanian Fakultas
Pertanian Universitas Tadulako

Oleh
Fatullah Alfayat
E 281 20 096

PROGRAM STUDI AGROTEKNOLOGI

FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS TADULAKO
PALU
2022

ii
 PENGESAHAN

Judul : Laporan Lengkap Praktikum Mata Kuliah Mikrobiologi

Pertanian

Nama : FATULLAH ALFAYAT

Stambuk : E28120095

Kelas : AGT-2

Fakultas : Pertanian

Universitas : Tadulako

Palu, April 2022

Mengetahui,

Koordinator Asisten Asisten Penanggung Jawab

Fitriah Balosi, S.P, M.P Rohman

Lugito
E 281 18 093

Menyetujui,

Dosen Penanggung Jawab

Mata Kuliah Mikrobiologi Pertanian

Ir. Rosmini, M.P

NIP:196007041987012001

iii
 KATA PENGANTAR

Puji syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, yang telah memberikan

rahmat dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan

laporan Mikrobiologi Pertanian. Laporan ini disusun sebagai salah satu syarat

untuk menyelesaikan matakuliah Mikrobiologi Pertanian.

Pada kesempatan ini penulis menyampaikan ucapan terima kasih yang

sebesar-besarnya kepada semua pihak yang telah membantu penyusunan laporan

ini, terutama kepada:

1. Ir. Rosmini, M.P, Sebagai Dosen Penanggung Jawab Praktikum Mata

Kuliah Mikrobiologi Pertanian.

2. Fitriah Balosi, SP Sebagai Koordinator Asisten Praktikum Mata Kuliah

Dasar-Dasar Hortikultura

3. Rohman Lugito Sebagai Asisten Penanggung Jawab Praktikum Mata

Kuliah Dasar-Dasar Hortikultura

Akhir kata, semoga tulisan ini mendapat ridho-Nya dan bermanfaat bagi

semua pihak.

Palu, 2 April 2022

Penulis

iv
 DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL.........................................................................................…. i
SAMPUL DALAM............................................................................................…. ii
HALAMAN PENGESAHAN...........................................................................…. iii
KATA PENGANTAR.......................................................................................…. iv
DAFTAR ISI......................................................................................................…. v
DAFTAR GAMBAR.........................................................................................…. vii
DAFTAR TABEL….……………………………………………………………. viii
DAFTAR LAMPIRAN......................................................................................… ix

BAB I. PENDAHULUAN

I.1. Latar Belakang..................................................................................…. 1

I.2. Tujuan dan Manfaat..........................................................................…. 2

BAB II. TINJAUAN PUSTAKA

2.1. Jamur Anisopliae.............................................................................…. 3

2.2. Bakteri.............................................................................................…. 3
2.3. Sterilisasi Alat.................................................................................…. 4
2.4. Inokulasi Jamur...............................................................................…. 4
2.5. Isolasi Bakteri..................................................................................…. 5
2.6. Tehnik Pengenceran........................................................................…. 5
2.7. Media NA dan PDA........................................................................…. 5
2.8. Perhitungan Mikroba.......................................................................…. 6

BAB III. METODE PRAKTIKUM

1.1 Waktu dan Tempat...........................................................................….. 7

1.2 Alat dan Bahan................................................................................….. 8
1.3 Cara Kerja........................................................................................….. 8
1.3.1 Pengenalan Alat.....................................................................….. 8
1.3.2 Sterilisasi Alat........................................................................….. 8
1.3.3 Pembuatan Media NA dan PDA............................................….. 8
1.3.4 Tehnik Isolasi dan Permunian................................................…. 9
1.3.5 Tehnik Pengenceran...............................................................…. 10
1.3.6 Tehnik Perhitungan Mikroba.................................................…. 10

BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

v
 4.1 Pengenalan Alat.................................................................................…. 12
4.1.1 Hasil........................................................................................…. 12
4.1.2 Pembahsan...............................................................................…. 15
4.2 Sterilisasi Alat...................................................................................…. 16
4.2.1 Hasil........................................................................................…. 16
4.2.1 Pembahsan...............................................................................…. 19
4.3 Media NA dan PDA..........................................................................…. 20
4.3.1 Hasil........................................................................................…. 20
4.3.2 Pembahasan.............................................................................…. 20
4.4 Isolasi dan Inokulasi..........................................................................…. 22
4.4.1 Hasil........................................................................................…. 22
4.4.2 Pembahasan ............................................................................…. 22
4.5 Tehnik Perhitungan Koloni Bakteri.................................................…. 23
4.5.1 Hasil.......................................................................................…. 23
4.5.2 Pembahasan............................................................................…. 25

IV. PENUTUP

5.1 Kesimpulan.......................................................................................…. 27
5.2 Saran.................................................................................................…. 27

DAFTAR PUSTAKA
LAMPIRAN
BIODATA PENULIS

vi
 DAFTAR GAMBAR

No. Teks Halaman

1. Media NA dan PDA…………………………………………………………….

22
2. Inokulasi jamur dan Isolasi bakteri……………………………………………...
20

vii
 DAFTAR TABEL

No. Teks Halaman

1. Pengenalan Alat……………………………………………………………
14
2. Alat Sterilisasi……………………………………………………………..
16
3. Pengamatan Ciri Morfologi Koloni Bakteri……..………………………..
23
4. Jumlah Koloni Bakteri……………………………………………………
24

viii
 DAFTAR LAMPIRAN

No. Teks Halaman

1. Perhitungan jumlah mikroba......................................................................…. 28

2. Dokumentasi praktikum mikrobilogi.........................................................…. 29

ix
 BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Mikroorganisme dikenal dengan sifat patogenya terhadap objek yang di

jadikan sebagai tempat tumbuh kembangnya. Kerena itu, permasalahan mengenai

mikroba harus dapat di antisipasi serta dapat diketahui jenis-jenis dan cara mikroba

berkembang. Tetapi di samping sifat patogenya yang bersifat merugikan, mikroba

juga telah lama dikenal kerana memegang peranan penting dalam berbagai bidang

kehidupan, khsusnya pada penerapan bioteknologi yang sangat beragam seperti pada

sektor pertanian, pangan, peternakan, kesehatan serta pengobatan. Aplikasi ini banyak

mengggunakan bantuan mikroorganisme, mikroorganisme merupakan makhluk yang

memiliki ukuran yang sangat kecil.

Pemanfaatan mikroorganisme seperti jamur dan bakteri serta mikroba lainya

tidak terlepas dari upaya untuk membiakanya, akan tetapi dalam pembiakan mikroba

juga perlu memerhatikan faktor-faktor yang mempengaruhi sehingga kemudian

mikroba yang di inginkan dapat tumbuh dengan baik. Ada beberapa upaya yang harus

dilakukan dalam menumbuhkan mikroba yaitu, pembuatan media pertumbuhan serta

sterilisasai alat kerja menggunakan autoklaf. Pada bidang pertanian pengamatan

terhadap mikroba dengan maksud untuk megenali jenis dan sifat dari berbagai

mikroba.
 Mikroorganisme berinteraksi dengan sesame mikroorganisme mauoun dengan

organisme lain kemudian akan memberikan efek yang beraneka ragam, baik

menguntngkan maupun merugikan. Dalam pembahasan mikrobiologi kedokteran

maupun fitopatologi, beberapa mikroorganisme dapat menjadi penyebaba

adanyasuatu penyakit dan menjadi pathogen dalam kehidupan. Namun, mayoritas

mikroorganisme dapat memberikan manfaat yang sangat beragam dalam dunia

bioteknologi (Faridah, 2019).

Aplikasi bioteknologi sangat beragam yang meliputi berbagai aspek yaitu

pada bidang pangan, pertanian. Peternakan, kesehatan dan pengobatan. Aplikasi

bioteknologi banyak menggunakan bantuan mikroorganisme (Kurnia, 2019)

1.2 Tujuan dan Manfaat

Adapun tujuan dari dilkasanakanya praktikum Mikrobiologi pertanian kali ini

yaitu untuk memahami cara kerja dari setiap alat yang akan digunakan selama

praktikum, mengetahui proses sterilisasi, cara pembuatan media tumbuh mikroba,

prosedur isolasi dan inokulasi serta cara perhitungan koloni mikroba sehingga kita

dapat mengetahui jenis serta ciri-ciri dari jamur dan bakteri yang ada.

Manfaat dari praktikum kali ini yaitu praktikan dapat mengetahui alat-alat

yang digunakan dalam praktikum, memahami proses sterilisasi, membuat media

tumbuh dari jamur dan baktei, mengetahui prosedur inokulasi dan isolasi serta teknik

perhitungan jumlah koloni mikroba yang akan berguna ketika ingin membiakan

beberapa jenis mikroorganisme untuk beberapa keperluan

2
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Jamur

Jamur adalah organisme yang dapat bertahan hidup pada berbagai lingkungan

dengan media yang berbeda-beda, serta memeperoleh makananya dari media tempat

jamur tersebut tumbuh, jamur juga dapat hidup pada sisa tumbuhan yang ada didalam

tanah atau hidup melekat pada organisme lain. Jamur memiliki kemampuan dan

fungsi yang berbeda-beda sesuai dengan lingkunganya (Darliana, 2020).

Pertumbuhan jamur sangat sulit dicegah, pertumbuhan jamur dapat

mengakibatkan perubahan fisik maupun kimiawi yang tidak di inginkan, seperti

halnya perubahan warna sebagaian atau keseluruhan, perubahan tekstur, aroma dan

rasa sehingga tidak layak di konsumsi. (Lestari, 2019).

2.2 Bakteri

Bakteri merupakan organisme yang relative sederhana karena umumnya

terdiri dari satu sel (uniseluler) dan tidak memiliki membrane inti sel (Prokariotik).

Prokariotik mencakup bakteri dan arhaea. Dalam klasifikasi mikroorganisme, bakteri

memperoleh perhatian khusus sehingga klasifikasikan selalu mengalami perubahan,

Bakteri ada yang hidu seperti sporofit adapula yang menyebabkan penyakit.

Beberapa bakteri mampu menghasilkan toksin sehingga cukup berbahaya bagi

manusia, bakteri tersebar mulai dari dalam tanah hingga ke udara bersama debu.
Dalam bahan pangan bakteri yang tumbuh akan melaksanakan metabolism dan

merubah mekanan menjadi tidak layak saji (Hidayat dkk, 2018).

2.3 Sterilisasi alat

Sebelum melakukan praktikum mengenai peralatan yang ingin kita gunakan

harus di sterilkan terdahulu. Sterilisasi atau suci hama yaitu proses membunuh segala

bantuk kehidupan mikroorganisme yang ada dalam sampel, alat-alat atau lingkungan

tertentu, dalam bidang bakteriologi katakata sterilisasi sering dipakai untuk

menggambarkan langkah yang sering diambil agar mencapai tujuan meniadakan atau

membunuh semua bentuk kehidupan mikroorganisme (Anisah, 2016).

Praktek sterilisasi medium alat-alat secara umum dapat dilakukan secara fisil

seperti pemenasan, pembekuan, pengeringan, liofilisasi, radiasi. Secara kimiawi juga

dapat dilakukan misalnya memebrikan antiseptik, disinfektan. Pemilihan cara

sterilisasi yang akan di pakai tergantung dari beberapa hal misalnya macam bahan

dan alat yang disetrilkan, ketahanan terhadap panas dan bentuk abahan yang akan

disterilkan. (Sulistiyo, 2018)

2.4 Inokulasi Jamur

Inokulasi bakteri merupakan sebuah teknik memisahkan atau memeindahkan

koloni bakteri ke media yang lain agar mempermudah identifikasi bakteri yang ingin

di dapatkan, biasanya media yang digunakan untuk inokulasi bakteri tersebut adalah

Potato Dexrose Agar ( PDA ), kemudian ada media Nutriae Agar ( NA ), dengan

4
adanya media tersebut akan membantu untuk mengeidentifikas serta membiakan

bakteri tersebut (Tiyaswikaning, 2018).

2.5 Isolasi Bakteri

Mikroorganisme pada suatu lingakaran alami merupakan populasi campuran

dari berbagai jenis, baik mikroorganisme pada tanah, air, udara, makanan maupun

yang terdapat pada tubuh hewan maupun tumbuhan. Pemisahan bakteri diperlukan

untuk mengetahui jenis, mempelajari kultural, morfologi dan bakteri yaitu dengan

cara isolasi. Isolasi bakteri adalah suatu proses pengambilan bakteri dari medium atau

dari lingkungan asalnya lalau menumbuhkannya di medium buatan sehingga

diperoleh biakan yang murni (Pujianto, 2017).

2.6 Teknik Pengenceran

Teknik dari pengenceran bertingkat yaitu untuk memperkecil atau mengurangi

jumlah mikroba yang tersuspensi dalam cairan. Penentuan besarnya atau benyaknya

tingkat pengenceran tergantung kepada perkiraan jumlah mikroba dalam sampel.

Digunakan perbandingan 1:9 untuk sampel dan pengenceran pertama dan

selanjutnya , sehingga pengenceran berikutnya mengandung 1/10 sel mikroorganisme

dari pengenceran sebelumnya (Ramadhani, 2020).

2.7 Media PDA dan Na

Salah satu media agar yang cocok dan mendukung pertumbuhan cendawan

adalah Potato Dextrose Agar (PDA) yang memiliki pH 4,5 sampai 5,5. Sehingga

menghambat pertumbuhan bakteri yang membutuhkan lingkingan yang netral dengan

5
pH 7.0 dan suhu optimum untuk pertumbuhan antara 25-30 0C. berdasarkan

komposisinya, PDA termsuk dalam media semisintetik kerana tersusun atas bahan

alami kentang dan bahan sintetik Dextrose dan agar. Kentang mengandung

karrbohidrat, vitamin, dan mikronutrien lain yang dapat dimanfaatkan oleh cendawan,

sedangkan dextrose sebagai karbohidrat sederhana menjadi sumber energy yang dapat

segera digunakan (Azzahra, 2020).

Media Natrium Agar (NA) meerupakan media yang berbentuk serbuk

berwarna putih kekuningan dan apabila setelah digunakan akan berbetuk padat karena

terdapat kandungan agar sebagai pemadatnya, komposisi yang terpenting dalam

media ini adalah karbohidrat dan protein yang terdapat pada ekstrak daging dan

pepton sesuai dengan kebutuhan sebagian besar bakteri (Nofariana, 2019).

2.8 Perhitungan Mikroba

Perhitungan bakteri merupakan suatu cara yang digunakan untuk menghitung

jumlah colony bskteri yang tumbuh pada suatu media pembiakan. Secara mendasar

ada dua cara perhitungan b-8akteri, yaitu secara langsung dan tidak langsung. Ada

beberapa cara perhitungan secara langsung, antara lain adalah dengan membuat

preparat dari suatu bahan dan pengunaan ruang hitung (Counting Chamber).

Sedangkan perhitungan secara tidak langsung hanya mengetahui jumlah

mikroorganisme pada suatu bahan yang masih hidup saja (Viable Count). Dalam

pelaksaanya ada beberapa cara perhitungan pada cawan petri, perhutungan melalaui

pengenceran, perhitungan jumlah terkecil dan metode MPN (Adifatul, 2019)

6
 BAB III
METODE PRAKTIKUM

3.1 Waktu dan Tempat

Praktikum matakuliah Mikrobiologi Pertanian telah dilaksanakan pada pada

Hari Selasa 29 dan Rabu 30 Maret 2022, pada pukul 7:30 sampai dengan pukul

17:30 Wita. Bertempat di laboratorium penyakit Fakultas Pertanian, Universitas

Tadulako, Kota Palu, Sulawesi tengah.

3.2 Alat dan bahan

Pada praktikum mata kuliah mikrobiologi pertanian ini, alat-alat yang

digunakan yaitu berupa mikropipet, tabung reaksi, pinset, cutter, pisau, bunsenn

burner, Erlenmeyer, kaca preparat, deckglass, gelas becjer, gelas ukur, sprayer,

autoclave, hot plate, laminar flow, neraca nalitik dan petridish.

Bahan-bahan yang digunakan pada praktikum mikrobiologi pertanian

kali ini yaitu, beef extrak, pepton, agar, aquades, kentang, gula, alumunium

foil, alcohol 70%, tissue dan plastic wrap.

3.3 Cara Kerja

3.3.1 Pengenalan Alat

Pada bagian pengenalan alat asisten meberikan arahan mengenai jenis-jenis

alat yang akan digunakan pada praktikum mikrobiologi pertanian dengan

menyebutkan nama dari alat-alat tersebut dan menyebutkan kegunaanya serta cara

menggunakan dari alat-alat tersebut, praktikan mencatat semua informasi yang di

sampaikan oleh asisten penganggung jawab sebagai pengantar sebelum di lakukan

praktikum.

3.3.2 Sterilisasi Alat

Pada bagian sterilisasi alat merupakan suatu langkah awal sebelum alat

digunakan, terlebih dahulu alat di sterilkan agar terhindar dari kontaminasi bakteri

yang ada di udara, langkah yang pertama itu adalah ketika alat-alat akan digunakan

maka sebelumnya di semprotkan terlebuh dahulu menggunakan alcohol 70% ke

seleruh permukaan alat, setelah itu seluruh alat praktikum akan di masukan kedalam

autoclave selama 50 menit dengan suhu 121 0C, kemudian tutup kembali autoclave,

setelah waktu selesai maka alat siap untuk digunakan pada saat praktikum.

3.3.3 Pembuatan Media NA dan PDA

Cara kerja pembuatan media NA (Nutrient Agar) langkah pertama yaitu

menimbang seluruh komponen medium dengan menggunakan timbangan analitik

dengan volume yang di inginkan sesuai dengan komposisi yang ada, seperti ; beef

extrak 1,5 gram, peptone 2,5 gram, agar 9 gram dan aquades 500ml, selanjutnya

aquades akan dipanaskan sebanyak 250ml bersamaan dengan agar, setelah agar

8
mendidih dinginkan sejennak, kemudian 250ml aquades kembali dipanaskan bersama

beef extrak dan peptone, setelah mendidih masukan kedalam wadah, setelah itu

larutan beef ekstrak dan peptone akan di homogenkan bersama dengan larutan agar

sebelunya, setelah terecampur, larutan media akan dimasukan kedalam Erlenmeyer

lalu di tutup dengan alumunium foil dan plastic wrap.

Cara kerja pembuatan media PDA (Potato Dextrose Agar), pertama kentang

dipisahkan dari kulitnya setelah itu, kentang akan di potong-potong bebentuk dadu

sebesar 1x1 cm, kemudian kentang yang telah dipotong akan dicuci terlebih dahulu,

kemudain kentang akan direbus dengan air 500ml selama 15 menit, setelah itu

dinginakan sejenak kentang, setelah itu sisa-sisa kentang yang masih tersisah akan

dikelurkan hingga yang tertinggal hanya ekstrak kentang tersebut, setelah itu air akan

ditambahkan sampai mencapai 500ml kembali, kemudian agar dan gula dimasukan

kedalam ekstrak kentang, setelah mendidih larutan media akan dimasukan kedalam

Erlenmeyer kemudian ditutup dengan alumunium foil dan palstik wrap.

3.3.4 Teknik Isolasi dan Pemurnian

Cara kerja pada bagian teknik isolasi dan pemurnian menggunakan metode

puor plate, langkah pertama yaitu menyiapkan semua bahan dan alat-alat yang akan

digunkaan, kemudian seluruh bahan dan alat tersebut di bawa ke laminar flow sebagai

tempat dilaksanakan isolasi bakteri dan jamur, setelah itu tangan akan di basahi

menggunakan alkohol dan juga alat dan bahan yang akan digunakan, kemudian ambil

cairan mikroba yang telah diencernakan sebanyak 4ml dengan menggunakan

9
mikropipet setelah itu siapkan cawan petri yang akan digunakan yang telah di

dekatkan dengan Bunsen kemudian, cairan mikroba tersebut akan dimasukan

kedalam cawan petri tersebut setelah itu siapkan media yang akan digunakan sebagai

tempat inokulasi jamur dan bakteri yang telah di dekatkan dengan Bunsen, kemudian

tuang kedalam cawan petri yang telah berisi cairan mikroba, setelah itu tutup cawan

petri dan yang diraktakn dengan palstik wrap.

3.3.5 Teknik Pengenceran

Cara kerja pada teknik pengenceran yaitu langkah pertama memasukan 1

gram sampel tanah yang berasal dari Agroforestry tanaman kakao kedalam tabung

reaksi yang berisikan aquades 9 ml. kemudian mengambil larutan yang ada di dalam

tabung 10-1 menggunakan mikropipet sebnayak 1 ml, kemudian larutan akan

dipindahkan kedalam tabung 10-2 dan diporteks agar homogeny. Lakukan cara yang

sama untuk tabung 10-2 sampai dengan tabung 10-9.

3.3.6 Teknik Perhitungan Mikroba

Menyiapkan contooh yang telah diencerkan selanjutnya memberikan kode

pada masing-masing cawan petri per tingkat pengenceran, kemudian mengambil 1m

contoh larutan dan masukan kedalam cawan petri, selanjutnya menambahkan media

yang telah cair sebanyak 10-15 ml kedalam cawan petri, selanjutnya biarkan

mengeras kemudian dibalik selanjutnya meletakan cawan petri kedalam inkubator

selama 24 jam lalu manghitung jumlah koloni yang hidup, koloni yang dipakai adalah

koloni sejumlah antara 30-300 percawan petri dihitung. Namun apabila terdapat

jumlah koloni yang menyebar, dihitung sebagai satu koloni, namun apabila koloni

10
dihitung pergram atau permililiter dari larutan dengan pengenceran yang memberikan

jumlah koloni 30-300. Missal ; 200 koloni dari tingkat pengenceran 10 -3, maka

jumlah koloni , 200 x 10-3 = 20 x 105 koloni ml.

11
 BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Pengenalan Alat

4.1.1 Hasil

Tabel1. Alat-alat praktikum

No Nama Alat dan Gambar Fungsi

1 Tabung reaksi Sebagai tempat atau media
pertumbuhan

2 Pinset Mengambil benda yang berukuran

kecil dan menjadi alat bantu dalam
bekerja

3 Jarum inoculum Mengambil atau memindahkan

inokulan, ujung kecil digunakan
untuk menarik spora-spora kecil
atau meratakan inokulan

4 Bunsen Sebagai pemanas

5 Erlenmeyer Menyimpan media, Mengukur
Volume. Jika digunakan untuk
menyimpan media maka harus
ditutup dengan alumunium foil

6 Kaca preparat Tempat meletakan sampel yang

akan diamati

7 Gelas kimia Untuk membuat media

8 Gelas ukur Mengukur jumlah banyaknya

larutan

9 Sprayer Penyemprot alkohol yang

digunakan Untuk mensterilkan
semua alat atau media yang akan

13
 kita gunakan selama praktikum

10 Oven Mensterilkan alat-alat gelas yang

tidak berskala

11 Mikropipet Untuk mengambil cairan dibawah 1

ml

13 Autoclave Untuk mensterilkan alat-alat atau

media yang kita gunakan secara
berskala, dengan menggunakan air

13 Neraca Analitik Untuk menimbang massa benda

14 Laminar air flow Untuk mensterilkan udara di tempat

kerja

14
 15 Cawan petri Tempat pertumbuhan mikroba atau
tempat pengujian sampel

4.1.2 Pembahasan

Hasil praktikum tentang pengenalan alat-alat yang akan digunakan telah

dilakukan, diketahui bahwa salah satu faktor yang dapat menunjang keberhasilan

suatu praktikum ialah kelengkapan alat yang akan kita gunakandengan begitu

praktikum akan lebih efisien berjalan dan dapat memberikan hasil yang maksimal.

Pada praktikum mikrobiologi pertanian kali ini banyak menggunakan alat yang

bervariasi dan memiliki bentuk dan fungsi yang berbeda-beda tergantung

keperluan kita.

Pengenalan alat-alat laboratorium penting dilakukan untuk keselamatan

kerja saat melakukan penelitian. Alat-alat laboratorium biasanya dapat rusak atau

bahkan berbahaya jika penggunaannya tidak sesuai dengan prosedur. Pentingnya

dilakukan pengenalan alat-alat laboratorium adalah agar dapat diketahui cara

penggunaan alat tersebut dengan baik dan benar, sehingga kesalahan prosedur

pemakaian alat dapat diminimalisasi sedikit mungkin

15
 Kegiatan praktikum sebagai salah satu metode yang mengedepankan

proses dan kerja untuk menemukan sendiri sebuah konsep ilmiah berdasarkan

suatu proses pemahaman, analisis, dan pembuktian dan menarik kesimpulan dari

suatu objek, dengan itu pengetahuan mengenai alat-alat begitu penting sebelum

melakukan praktikum ( Eliyarti, 2020 ).

4.2 Sterilisasi

4.2.1 Hasil

Tabel 2. Alat Sterilisasi

No Nama Alat dan Gambar Cara kerja
1 Oven Hubungkan oven dengan aliran

listrik, kemudian buka penutup

oven dan bersihkan kotoran yang

ada di dalamnya, memasukan alat

atau bahan yang akan disterilkan,

tutup kembali oven dan atur suhu

selama pengovenan tunggu

beberapa saat sesuai waktu yang

diinginkan, setelah selesai

matikan oven san buka

penutupnya kemudian kelurakn

kembali alat yang telah di

sterilkan.

2 Laminar Air Flow Pastikan Laminar tersambung

16
 dengan listrik, tekan tombol yang

ada di samping laminar untuk

menghidupkan, semprotkan

alcohol secukupnya ke dalam

laminar dan tunggu beberapa saat,

kemudian masukan alat-alat yang

dibutuhkan, masukan sebagian

lengan ke dalam laminar san

mulailah bekerja, setelah selesai

bersihkan sisa-sisa bahan yang

ada dalam laminar dan tutup

kembali laminar dan matikan.

3 Autoclave Cek dahulu volume air dalam

autoclave, pastikan tinggi air pada

batas yang telah ditentukan,

masukan peralatan dan bahan

yang akan dditerilkan kemudian

tutuo dengan rapat dan kencang

agar uap tidak keluar, nyalakan

autoclave, lalu atur timer minimal

selama 50 menit dengan suhu

1210C. tunggu air mendidihunutk

17
 menciptakan uap yang memenuhi

kompartemen autoclave dan

terdesar keluar dari kleep

pengaman. Kencangkan klep

pengaman sampai selesai. Waktu

50 menit dihitung mulai dari

tekanan mencapai 2atm, jika

alaram berbunyi tandanya sudah

selesai, tunggu tekanan dalam

kompartemen turun sehingga

tekanannya sama dengan udara di

lingkungan, setelah itu angkat isi

autoclave dengan hati-hati.

4.2.2 Pembahasan

Berdasarkan hasil praktikum yang telah dilakukan ptoses sterilisasi

merupakan hal paling penting, karena sedikit saja sampel terkena mikroorganisme

lain maka dipastikan praktikum akan gagal, prosses sterilisasi dilakukan hampir di

18
semua prosedur praktikum demi keberhasilan praktikum. Sterilisasi menggunakn

autoclave merupakan sterilisasi yang paling memakan waktu, hal ini karena

penggunaan autoklaf harus berskala namun dibalik itu sterilisasi menggunakan

autoklaf merupakan hal yang paling akurat karena dapat membunuh mikroba yang

dapat mengkontaminasi sampel.

Proses sterilisasi perlu dilakukan pada setiap alat praktikum yang akan

digunakan. Hal ini bertujuan untuk mematikan mikroorganisme yang dapat

mengkontaminasi percobaan. Salah satu metode sterilisasi adalah autoklaf,

dimana semua alat praktikum dibungkus menggunakan kertas coklat dengan sisi

licinnya yang beraada di luar. Pembungkusan alat praktikum dimaksudkan untuk

mencegah alat terkontaminasi langsung dengan udara luar saat setelah disterilisasi

Kontaminasi merupakan gangguan yang sering terjadi, terdiri dari bakteri,

jamur atau virus, untuk mencegah kontaminasi, dapat dilakukan teknik sterilisasi

yang teapt baik terhadap alat maupun bahan serta lingkungan kerja. Kegiatan

sterilisasi bertujuan untuk mengeliminasi pathogen atau cendawan yang mungkin

terbawa saat saat pengambilan eksplan ( Luthfiyyah, 2018 )

19
4.3 Media NA dan PDA

4.3.1 Hasil

(a) (b)
Gambar 1, (a) media NA dan (b) media PDA

4.3.2 Pembahasan

NA (Nutrient Agar) merupakan suatu medium yang berbentuk padat, NA

dibuat dari bahan campuran ekstrak daging dan peptone dengan menggunakan

agar sebagai pemadat. Nutrient agar merupakan suatu media untuk pembiakan

mikroba. Dalam media NA agar berfungsi sebagai tempat mikroba tumbuh dan

berkembang dengan sifat padatnya kemudian mikroba diberi nutrisi berupa

karbohidrat sebagai bahan makanan sehingga dapat bertahan lama dan tumbuh

dengan baik karena mempunyai sumber bahan makanan.

Media NA (Natrium agar) berdasarkan bahan yang digunakan termasuk

dalam kelompok media semi alam atau media yang terdiri dari bahan alami yang

ditambahkan dengan senyawa kimia. Berdasrkan kegunaanya media NA termasuk

kedalam jenis media umum, karena media ini merupakan media yang paling

umum digunakan untuk pertumbuhan sebagian besar bakteri, berdasrkan

20
bentuknya media ini berbentuk padat, karena mengandung agar , media padat

biasnya digunakan untuk mengamati penampilan atau morfologi koloni bakteri

( Munandar, 2016 )

Pada media PDA (Potato Dextrose Agar) merupakan salah satu teknik

pembiakan jamur atau jenis jenis mikroorganisme yang lain. Berdasarkan

komposisinya PDA termasuk dalam media semi sintetik karena tersusun atas

bahan alami (kentang) dan bahan sintetis (dextrose dan agar). Kentang merupakan

sumber karbon atau karbohidrat, vitamin dan energy bagi bakteri atau jamur.

Sementara dextrose sebagaisumber gula dan energy. Selain itu komponen agar

berfungsi sebagai memadatkan medium PDA.

Berdasarkan komposisinya, PDA termsuk dalam media semisintetik

kerana tersusun atas bahan alami kentang dan bahan sintetik Dextrose dan agar.

Kentang mengandung karrbohidrat, vitamin, dan mikronutrien lain yang dapat

dimanfaatkan oleh cendawan, sedangkan dextrose sebagai karbohidrat sederhana

menjadi sumber energy yang dapat segera digunakan ( Azzahra, 2020 ).

4.4 Isolasi dan Inokulasi

4.4.1 Hasil

21
 (a) (b)
Gambar 2, (a) Isolasi bakteri dan (b) Inokulasi Jamur

4.4.2 Pembahasan

Berdasarkan hasil praktikum Inokulasi dan Isolasi terhadap jamur dan

bakteri diketahui bahwa pertumbuhan telah diketahui bahwa pertumbuhan

mikroba akan terhenti ketika nutrisi pada pertumbuhan mikroba akan terhenti

ketika nutrisi pada media tempat dia mikroorganisme tumbuh akan berkurang,

oleh karena itu perlu dilakukan pemindahan mikroba ke media yang berbeda atau

inokulasi dengan tujuan untuk memperbanyak biakan murni dari mikroba

tersebut. Proses inokulasi yang dilakukan ialah mengambil inoculum

menggunakan pinset atau sejenisnya. Dan untuk proses isolasi kali ini

menggunakan sampel tanah yang berasal dari kebun agroforestry yang dengan

tujuan untuk mendapatkan mikroba biakan murni.

Inokulasi bakteri merupakan sebuah teknik memisahkan atau

memeindahkan koloni bakteri ke media yang lain agar mempermudah identifikasi

bakteri yang ingin di dapatkan, biasanya media yang digunakan untuk inokulasi

22
bakteri tersebut adalah Potato Dexrose Agar ( PDA ), kemudian ada media

Nutriae Agar ( NA ), dengan adanya media tersebut akan membantu untuk

mengeidentifikas serta membiakan bakteri tersebut (Tiyaswikaning, 2018).

4.5 Teknik Perhitungan Koloni Mikroba

4.5.1 Hasil

Tabel 3. Pengamatan ciri morfologi koloni bakteri

Ciri Morfologi Bakteri

Pengencera
Warna Bentuk Elavasi Keterangan
n

10-3 Krem Bulat, bulat Datar dan Dominan

tidak cembung berwarna

beraturan dan krem dan

bintik-bintik bentuk bulat

10-5 Biru, kuning, Bulat, bulat Datar dan Dominan

hijau, krem, tidak cembung berwarna

pink, orange beraturan, biru dan

dan ungu bintik-bintik bentuk bulat

dan berakar

10-7 Biru dan Bulat Cembung Dominan

orange sempurna, berwarna

rhizoid dan biru dan

tidak bentuk bulat

beraturan.

23
 10-9 Putih dan Benang halus, Datar Dominan

krem bulat berwarna

sempurna, putih dan

datar dan bentuk bulat

bintik-bintik

Tabel 4. Jumlah koloni bakteri (Cfu/ml)

Total Koloni Bakteri
Pengencera Gambar
n Cfu Cfu/ml

10-3 520 5,20 x 10-5

10-5 293 2,93 x 107

10-7 82 8,2 x 109

10-9 185 1,85 x 1011

4.5.2 Pembahasan

24
 Pada teknik perhitungan koloni maka didapatkan pada sampel dengan

faktor pengenceran 10-3 di daptkan warna mikroba berwarna krem dengan jumlah

koloni 520 atau 5,20x105, sementara pada kode sampel 2 dengan factor

pengenceran 10-5 di dapatkan koloni berjumlah 293 atau 2,93x107 dengan warna

yang berfariasi seperti biru, kuning, krem, merah muda dan orange, sedangkan

pada sampel 3 dengan faktor pengenceran 10-7 didapatkan jumlah koloni sebanyak

82 atau 8,2x109 dengan warna yang tidak banyak hanya biru dan orange, dan

sampel terakhir dengan factor pengenceran 10-9 di dapatkan jumlah koloni

sebanyak 185 atau 1,85x1011 dengan warna hanya putih dan krem.

Melihat dari hasil perhitungan diatas bahwa jumlah koloni yang banyak

yaitu dengan factor pengeceran yang rendah, hal tersebut Karena makin tinggi

factor pengenceran maka makain sedikit koloni yang di dapatkan begitu

sebalikny.

Perhitungan jumlah bakteri merupakan salah satu cara yang dilakukan

untuk bias mengetahui beberapa banyak koloni bakteri yang terdapat pada suatu

media, baik itu koloni sel yang hidup maupun kolono sel bakteri yang sudah mati.

Perhitungan jumlah bakteri secara langsung digunakan untuk menentukan jumlah

keseluruhan bakteri yang hidup dengan yang mati. Sedangkan perhitungan secara

tidak langsung digunakan untuk menentukan jumlah bakteri yang hidup saja.

Koloni adalah kumpulan bakteri, berupa bercak yang terlihat oleh mata pada

media biakan. Satu koloni mengandung berjuta kuman (Rosmania, 2020)

Faktor-faktor yang mempengaruhi pewarnaan bakteri yaitu fiksasi,

25
peluntur warna , substrat, intensifikasi pewarnaan dan penggunaan zat warna

penutup. Suatu preparat yang sudah meresap suatu zat warna, kemudian dicuci

dengan asam encer maka semua zat warna terhapus. sebaliknya terdapat juga

preparat yang tahan terhadap asam encer. Bakteri-bakteri seperti ini dinamakan

bakteri tahan asam, dan hal ini merupakan ciri yang khas bagi suatu spesies.

(Suharman 2020).

26
 BAB V
PENUTUP

5.1 Kesimpulan

Berdasarkan hasil praktikum yang telah dilakukan mengenai isolasi

mikroorganisme terutama pada bakteri dan jamur dapat di simpulkan bahwa:

1) Pengenalan alat praktikum mikrobiologi nertujuan agar praktikan dapat

mengetahui bentuk dan fungsi alat-alat yang akan digunakan.

2) Jamur merupakan merupakan organisme yang termsuk kedalam kingdom

fungi dan tidak mempunyai klorofil sehingga bersifat heterotrof

3) Bakteri adalah kelompok mikroorgansime sel satu yang diklasifikasikan

pada tingkat domain. Bersama dengan domain archae, bakteri digolongkan

sebagai prokariotik

4) Mikroorganisme mempunyai dampak positif bagi perkembangan

bioteknologi seperti pangan dan pertanian.

5) Perbanyakan mikroorganisme bisa dilakukan dengan media NA dan PDA

5.2 Saran

Saran untuk praktikum mikroorganisme selanjutnya semoga kedepanya

praktikan lebih serius mendengarkan arahan dari asisten pengampuh salaam proses

praktikum berjalan dan kemdian praktikum selanjutnya bisa memberikan hasil yang

baru dalam penyusunan laporan berikutnya.

 DAFTAR PUSTAKA

Adifatul Ismy, N. (2019). Keanekaragaman Koloni Mikroorganisme Rizofer Lahan

Tebu (Saccharum Officinarum) Pada Penggunaan Pupuk Bio-Slury dan
Pupuk Kimia. Jurnal Biosaintropis. Vol 5, No 1. Hal 25-30

Anisah, Triastuti R. (2016). Media Alternatif untuk Pertumbuhan Bakteri

Menggunakan Sumber Karbohidrat Yang Berbeda. Seminar Nasional
Pendidikan Biologi. 18(4) . Hal 835-860

Ayu Dinda Lestari, Elfrida, Indriyati. (2019). Identifikasi jamur Pada Roti Yang
Dijual Di Kota Langsa Berdasarkan Lama Penyimpanan. Jurnal Jeumpa.
No 6, Vol : 12

Azzahrah N, Jamilatun. (2020). Perbandingan Pertumbuhan Aspergillus Fumigatus

Pada Media Instan Modifikasi Carrot Surcose dan Potato Dextrose Agar.
Jurnal Mikologi Indonesia. Vol 4, No1. Hal 1-7

Eliyarti, Chichi Rahayu. (2020) Dieksresi Pengetahuan Awal Alat Praktikum Materi
Koloid Dalam Perkuliahan Kimia Dasar Mahasiswa Teknik. Jurnal
Pendidikan dan Ilmu Kimia. Vol 3, No 1. Hal 14-25

Hayyun D Faridah, Silvia Kurnia. (2019) Pemanfaatan Mikroorganisme Dalam

Pengembangan Makanan Halal Berbasis Bioteknologi. Jurnal Of Halal
Product and Research. Vol 2. No 1. Hal 33-43

Hidayat, Nur Irene, Yuliana. (2018). Mikroorganisme dan Pemanfaatanya. Malang :

Universitas Brawijaya Press. 198 Hal

Ina darliana, Sri Wilujeng. (2020). Isolasi dan Karakteristik Jamur Indigenous dan
Potensi untuk Biodelignifikasi. Jurnal Agrotek Indonesia. 2(5):1

Izar Tyaswikaning P. (2016). Teknik Persiapan Pembuatan Media dan Inokulasi

Bakteri. Universitas Gadjah Mada. Vol 4. No1. Hal 14-25

Kukuh Munandar, Aqmarin S. (2016). Komparasi Media NA Pabrikan Dengan NA

Modifikasi Untuk Media Pertumbuhan Bakteri. Seminar Nasional
Biologi. Vol 2, No 15, Hal 192-201
Nofriana, M. (2019). Pemanfaatan Tepung Kacang Hijau ( Vigna radiate L) Sebagai
Media Alternatif NA ( Natrium Agar ) Untuk Pertumbuhan Bakteri
Escheria coli. Jurnal: Analisis Kesehatan Sains. Vol 8, No 2. Hal 725-737

Ramadhani, Indrie, Wahyuni. (2020). Dasar-Dasar praktikum Mikrobiologi. Jawa

Tengah : CV. Pena Persada. 78 Hal.

Rico Hutama Sulistiyo, Zayyaan Luthfiyyah. (2017). Pengaruh Teknik Sterilisasi dan
Komposisi Medium Terhadap pertumbuhan Tunas Eklsplan Sirsak Ratu.
Bioedukasi: Jurnal Pendidikan Biologi. Vol 11 No1. Hal 1-5

Sri Pujyanto. Gabriela C. (2017). Isolasi dan Identifikasi Bakteri Genus

Sphingomonas Dari Daun Padi Di Area Persawahan Cibinong. Jurnal
Biologi. Vol 6, No1. Hal 1-6

27
 LAMPIRAN

Lampiran 1. Perhitungan Jumlah mikroba

1
Jumlah koloni x
Faktor pengenceran

1
1. 10−3 = 520 x −3
10
= 520 x103
= 5,20 x 105
= 5,25
1
2. 10−5 = 293 x −5
10
= 293 x 1 0−5
= 2,93 x 1 07
1
3. 10−7 = 293 x −7
10
1
= 82 x −7
10
= 82 x 1 0−7
= 8,2 x 1 09
1
4. 10−9 = 185 x −9
10
= 185x 1 0−9
= 1,85 x 1 011
Lampiran 2. Dokumentasi Praktikum Mikrobilogi

29
30
 BIODATA PENULIS

Penyusun bernama Fatullah Alfayat, lahir di Kota Palu

pada tanggal 07 Maret 2002. Anak kedua dari pasangan

Aslam A.R dan Mutmainnah Siradjudin B. Penyusun

mulai merasakan bangku pendidikan saat masuk di SD

Negeri 9 palu, pada tahun 2009 dan selesai pada tahun

2014, kemudian pada tahun yang sama penyusun

melanjutkan ke bangku sekolah menengah pertama di SMPN 6 palu hingga selesai

pada tahun 2017, setelaah itu penyusun meneruskan ke tingkat seklah menengah atas

di SMAN 3 palu pad tahun yang sama. Setelah lulus penulis kembali melanjutkan

pendidikan ke bangku kuliah di Universitas Tadulako, Fakultas Pertanian, Program

Agroteknologi pada tahun 2020.