5.

1 Pendahuluan

Dilihat dari situasi lingkungan saat ini, gangguannya

keseimbangan, dan keseimbangan yang salah dari elemen yang tidak diinginkan di bagian

ekosistem alam seperti di tanah, air, atau udara memaksa langkah-langkah untuk memulihkan

lingkungan alami. Kehadiran elemen yang tidak diinginkan diamati pada berbagai

tingkat trofik, yang memiliki dampak langsung pada kesehatan manusia. Masalah yang belum
terselesaikan dengan

pemanfaatan limbah yang berasal dari industri, pertanian, dan pengolahan limbah

sektor pengolahan dan pengelolaannya mengalami peningkatan

akumulasi unsur-unsur beracun di tanah pertanian selama beberapa dekade terakhir.

Polusi tanah adalah masalah dunia yang sangat besar; ada lebih dari 2,5 juta berpotensi

situs yang terkontaminasi di Eropa [ 1]. Akumulasi polutan yang ekstrim di

tanah pertanian tidak hanya menyebabkan pencemaran lingkungan tetapi juga mengakibatkan

munculnya zat beracun pada tanaman, yang secara langsung dapat mempengaruhi kualitas
makanan.

Tanah memainkan peran sentral dalam keamanan pangan karena menentukan komposisi potensial

makanan pada akar rantai makanan. Kualitas sumber daya tanah, seperti yang didefinisikan oleh

dampak potensial mereka terhadap kesehatan manusia dengan penyebaran unsur-unsur berbahaya

melalui rantai makanan [2], harus dikendalikan di seluruh dunia.

Variasi konsentrasi polutan di dalam tanah tergantung pada alam

dan proses antropogenik (pencucian, pengangkutan mekanis, pembajakan , lansekap). Zat beracun
cenderung menumpuk di lapisan atas tanah, muncul di

biokenosis tanah . Kelompok utama adalah logam berat, yang tidak dapat terurai secara hayati dan
dapat dengan mudah terakumulasi dalam organisme hidup. Logam berat(loid) yang umum terdapat
di tanah antara lain nikel (Ni), timbal (Pb), kadmium (Cd), arsenik

(As), kromium (Cr), tembaga (Cu), kobalt (Co), seng (Zn), mangan (Mn), alu minum (Al), dan merkuri
(Hg). Di antara logam berat (loid) ini , As, Pb, Cd,

dan Hg termasuk dalam 20 Besar Bahan Berbahaya Badan Racun

Substances and Disease Registry [ 3] dan United States Environmental

Perlindungan [ 4, 5]. Tanah yang tercemar secara signifikan mempengaruhi mikroba tanah

masyarakat dengan menurunkan biomassa mikroba tanah dan jumlah

koloni bakteri aktif [6]. Lebih penting lagi, beberapa dari mereka cenderung menumpuk

dalam produk makanan yang memiliki kepentingan signifikan pada diet manusia [ 7].
Meskipun beberapa elemen sangat penting untuk organisme hidup (yaitu, Cu, Mn,

Zn), mereka mungkin juga beracun secara berlebihan. Sebaliknya, elemen lain (yaitu, Cd, Pb,

Hg) mungkin beracun, bahkan ada dalam jumlah yang sangat kecil. Kontaminan beracun

dapat pindah ke ekosistem perairan, mempengaruhi kinerjanya, mempengaruhi

organisme hidup air dan organisme lain dalam rantai trofik, termasuk

manusia [8].

Pencemaran logam berat dalam tanah, dan fitur biokonsentrasi dan transfer

sistem tanah-tanaman (akar, batang, dan daun) belum banyak diketahui. Saat ini

karya maju bertujuan untuk menemukan karakteristik transfer dan

biokonsentrasi unsur-unsur yang tidak diinginkan di lingkungan. Investigasi pada

status pencemaran logam berat dalam ekosistem, trofodinamika,

faktor biokonsentrasi (BCF), dan faktor translokasi (TF) dari logam jejak di

rantai makanan sangat penting untuk menerapkan perlindungan habitat dan

tindakan konservasi yang tepat [9]. Untuk memperkirakan transferabilitas berat

logam dari tanah ke tanaman, dua indeks, BCF dan TF dapat digunakan [ 10].

BCF = Croot / Csoil , dimana Croot dan Csoil adalah konsentrasi masing-masing logam berat di
dalamnya

akar tanaman dan nilai yang sesuai di tanah, masing-masing, tetapi juga BCF

dapat dinyatakan sebagai rasio umum konsentrasi unsur beracun dalam

biomonitor (tanaman/hewan) dan konsentrasi unsur toksik dalam air atau tanah.

Sedangkan TF = Cgrain / Croot , dimana Cgrain adalah jumlah logam berat yang di crop

butir [10] dan mengungkapkan transfer dalam tanaman.

Biomagnifikasi logam berat dalam organisme dari tingkat trofik yang berbeda

( hubungan predator -mangsa) dapat diukur dan dievaluasi dengan menghitung

Faktor Biomagnifikasi ( BF) [ 11]. BF = Cprey / Cpredator , di mana: Cprey adalah

konsentrasi unsur beracun di mangsa dan Cpredator adalah konsentrasi

elemen beracun dalam predator.

Bioremediasi adalah teknik yang menerapkan beberapa organisme, yang

mengungkapkan kecenderungan untuk mengakumulasi sejumlah besar elemen beracun ketika

hadir di lingkungan, untuk digunakan sebagai media untuk menyerap unsur-unsur yang tidak
diinginkan

5.2dari lingkungan tanpa efek samping untuk dirinya sendiri. Ini sering digunakan untuk yang berat
penghapusan logam dari lingkungan memanfaatkan mekanisme biologis yang melekat untuk

menghilangkan atau mengurangi jumlah kontaminan beracun menggunakan mikroorganisme,

tumbuhan,

atau produk mereka untuk mengembalikan lingkungan yang terkontaminasi ke keadaan semula [12].

Banyak contoh hiperakumulator dan tanaman/hewan toleran logam berat

memberikan prospek yang luas untuk bioremediasi pencemaran lingkungan. Ini

tercermin dari meningkatnya jumlah artikel tentang bioremediasi

tanah terkontaminasi ion logam berat dipublikasikan sejak tahun 1995 (Gambar 5.1).

5.2 Bioremediasi

Peran logam dalam proses kehidupan sangat besar. Konfirmasi ini adalah

pengembangan bidang penelitian baru, diarahkan pada studi atau peran itu

ion logam ada di dunia biologis, termasuk perdagangan, penyerapan, pengangkutan, dan
penyimpanannya. Sejak tahun 2004 arah penelitian ini ditetapkan dengan istilah khusus

– “ metalomik ” [13, 14]. Ion logam seperti Zn2+, Fe3+, Cu2+, Ni2+, Mo2+, dan

Mn2+ adalah bagian dari banyak enzim logam, yang tanpanya proses dasar vital

26

24

22

20

18

16

14

12

10

0 1996 1998 2000 2003 2005 2007 2009

Tahun publikasi

Jumlah publikasi
2011 2013 2015 2017 2019

Gambar 5.1 Jumlah artikel yang diterbitkan sejak tahun 1995 (menurut Web of

Sains, 11 April 2019).

90 5 Bioremediasi Tanah Terkontaminasi Ion Logam Berat

seperti sintesis asam nukleat dan protein, respirasi, dan fiksasi nitrogen

tidak mungkin. Efek biologis dari setiap logam ditentukan oleh kandungannya

sel dan lingkungannya. Konsentrasi logam yang tinggi sebagian besar beracun. Itu

efek toksik ditentukan oleh percepatan pembentukan radikal bebas, yang

menyerang biomolekul, mengubah struktur dan fungsinya [15].

Karena aktivitas antropogenik, paparan lingkungan menjadi berat

logam dan akumulasinya dalam air dan tanah meningkat secara signifikan. Beberapa

situs alami mengakumulasi jumlah logam yang dimiliki semua organisme hidup

untuk menanggung bahaya besar. Pada saat yang sama, banyak mikroorganisme (bakteri,

jamur, dan mikroalga) memiliki kemampuan luar biasa untuk menahan dan menghuni tanah

lingkungan yang memiliki kandungan logam berat yang tinggi. Perbandingan antara

spesies mikroba yang berbeda mengungkapkan bahwa resistensi logam berat disediakan oleh a

sistem bertingkat. Beberapa elemen dari sistem ini tersebar luas dan memastikan a

pertahanan dasar sel terhadap logam berat, sementara yang lain sangat spesifik [16].

Mekanisme perlindungan terhadap toksisitas logam yang digunakan oleh spesies mikroba

adalah: eliminasi logam, sekuestrasi ekstraseluler dan intraseluler, biosorpsi,

presipitasi, produksi agen chelating, bioakumulasi intraseluler,

kompartementalisasi, dan biotransformasi oleh enzim spesifik dan seluler

metabolit [ 16-18]. Dari sudut pandang kami, semua mekanisme ini berfungsi untuk mencapai

tiga strategi utama resistensi sel mikroba terhadap logam berat: logam

transportasi, sekuestrasi logam, dan biotransformasi logam.

Strategi dan mekanisme resistensi mikroba terhadap konsentrasi tinggi

logam berat dapat berfungsi sebagai alat yang efektif untuk digunakan dalam bioremediasi tanah.

Bioremediasi adalah proses yang dimediasi mikroorganisme untuk pembersihan atau

imobilisasi kontaminan. Jika beberapa senyawa organik beracun dapat

sepenuhnya dibersihkan dari media tercemar oleh mikroorganisme, ini adalah

tidak dapat mengubah logam berat menjadi senyawa yang tidak berbahaya. Bahkan,
mikroorganisme

harus digunakan dalam proses bioremediasi sesuai dengan spesialisasinya

jenis kontaminan dan mekanisme detoksifikasi spesifik [19].

5.2.1 Pengangkutan Logam

Masuknya / keluarnya logam sangat penting untuk memastikan kebutuhan sel dalam logam, dan

untuk perlindungan mikroorganisme dari tindakan toksik xenobiotik ini, seperti

serta untuk bioremediasi lingkungan yang terkontaminasi. Masuknya

logam melintasi membran bakteri termasuk siderofor, pompa ion, ion

saluran, transportasi yang dimediasi pembawa, endositosis, permeasi kompleks, dan lipid

permeasi bilayer. Mekanisme ini telah dilaporkan terkait dengan

pengangkutan besi, merkuri, timbal, perak, kadmium, nikel, dan berat lainnya

logam [20, 21]. Pengeluaran logam dari sel mikroba adalah mekanisme logam

5.2 Bioremediasi 91

pemeliharaan homeostasis di dalam sel. Mikroorganisme menggunakan energi tergantung

penghabisan logam, yang secara efektif memompa ion beracun yang telah memasuki sel kembali

keluar sel [22]. Proses ini dilakukan oleh transporter transmembran. Di dalam

bakteri gram negatif penghabisan logam terjadi dalam dua tahap: pertama – itu

pengangkutan logam dari sitoplasma ke periplasma; dan kedua – transportasi

logam dari periplasma ke ruang ekstraseluler. Kedua langkah tersebut dilakukan

oleh beberapa famili transporter transmembran seperti ATPase tipe-P, kation/

antiporter proton, transporter fasilitator difusi kation, protein resistance-nodulationcell division

(RND) (yang juga disebut sistem penghabisan CBA),

faktor membran luar [ 16, 23, 24]. Pemompaan

terlibat dalam penghabisan Cu, Cd, Zn, Co, dan Ni dari sel bakteri. Penghabisan dari

Cd, Zn, dan Co dari sel bakteri gram negatif disediakan oleh kation-proton

antiporter ( CzcABC ), dikodekan oleh gen czc tertentu ; Cd penghabisan dari gram positif

sel bakteri dipastikan oleh Cd-eflux ATPase; Eliminasi Cu dikaitkan dengan an

antiporter Cu yang tergantung ion [25-27].

5.2.2 Sekuestrasi Ekstraseluler

Penyerapan logam berat ekstraseluler dilakukan oleh kapsul mikroba,

yang sebagian besar terdiri dari exopolysaccharides (EPS), dan minor

fraksi protein, asam nukleat, zat humat, lipid, dan beberapa rendah

senyawa dengan berat molekul. Penyerapan logam ekstraseluler juga bisa terjadi

dilakukan oleh dinding sel. Proses ini dikenal sebagai biosorpsi. Kapsul dan

dinding sel menyediakan sekuestrasi logam berat untuk membatasi penetrasi mereka di dalam

sel mikroba. Proses ini dimungkinkan karena adanya muatan negatif

kelompok: karboksil, hidroksil, sulfonat, amina, sulfhidril, dan fosfonat [19, 24,

28]. Pada bakteri gram positif lapisan peptidoglikan yang mengandung alanin, glu asam tamat , asam
meso-di- aminopimelic , dan asam teichoic memainkan peran utama

dalam biosorpsi. Pada bakteri gram negatif enzim, glikoprotein, lipopolisak charides , lipoprotein,
dan fosfolipid dari dinding sel memastikan sequestra logam [29 ] . EPS kapsul seluler dan komponen
sel bakteri

dinding adalah situs aktif yang bertindak sebagai ligan untuk mengikat ion logam, menghasilkan

remediasi akhir dari lingkungan yang terkontaminasi [30]. Polimer utama

terlibat dalam penyerapan logam pada jamur adalah glomalin, kitin, dan melanin,

yang dapat berperan dalam biosorpsi, terutama untuk Cu [31].

Khelasi logam ekstraseluler oleh siderofor, massa molekul kecil

metabolit, peptida, dan protein yang dihilangkan oleh sel, adalah cara lain untuk mencapainya

sekuestrasi logam. Sel bakteri dan jamur dapat mengeluarkan glutathione,

oksalat, dan bahan mucilaginous ekstraseluler dengan logam beracun yang sangat baik

kemampuan mengikat [32, 33].

92 5 Bioremediasi Tanah Terkontaminasi Ion Logam Berat

5.2.3 Sekuestrasi Intraseluler

Sekuestrasi logam berat intraseluler dilakukan dengan pengikatan logam

metallothioneins , phytochelatins , dan siderophores , yang memainkan peran penting

dalam imobilisasi ion logam [ 17, 22]. Metallothionein adalah molekul rendah

protein berat kaya sistein dengan afinitas tinggi untuk kadmium, seng, tembaga,

perak, dan merkuri. Fungsi utamanya adalah detoksifikasi logam. Metalotionein

sintesis dalam sel mikroba diinduksi oleh adanya sejumlah logam beracun . Pengikatan logam oleh
metallothionein dapat mengakibatkan akumulasi seluler [22].

Phytochelatins – oligomer glutathione khas untuk mikroorganisme eukariotik ( seperti jamur,

mikroalga), dan cyanobacteria. Mereka adalah molekul kecil

terdiri dari 2–11 pengulangan γ-Glu- Cys dipeptide dengan residu terminal Gly .

Mereka mampu mengikat berbagai logam termasuk Cd, Cu, Zn, atau As melalui
residu sulfhidril dan karboksil [34]. Siderofor adalah molekul organik kecil

diproduksi oleh mikroorganisme dalam kondisi yang membatasi zat besi, yang meningkatkan

penyerapan besi mikroba. Meskipun peran utama siderophores adalah untuk mengkelat

besi besi, mereka juga dapat mendetoksifikasi sampel yang terkontaminasi logam berat dengan cara
mengikat

untuk beragam logam beracun [35, 36].

Strategi lain yang digunakan oleh mikroorganisme, yang mengakumulasi logam melawan

gradien konsentrasi, adalah kompartementalisasi. Kompartementalisasi logam

terjadi pada banyak spesies bakteri, ragi, jamur, dan mikroalga. Sebagai hasil dari

proses ini, logam menjadi kurang beracun bagi sel, dan mikroorganisme yang memilikinya

mekanisme kompartementalisasi dapat mengakumulasi logam pada intraseluler tinggi

konsentrasi. Oleh karena itu penting untuk mengetahui kompartementalisasi logam itu tion adalah
strategi jangka pendek, dan logam berikutnya harus tunduk pada penghabisan

atau proses lain, termasuk biotransformasi. Pada mikroorganisme eukariotik,

misalnya ganggang, ragi, dan jamur, kompartementalisasi logam (Co2+, Mn2+, Zn2+)

terjadi di vakuola, di mana mereka dapat tetap dalam bentuk ionik atau berikatan dengan

polifosfat [37].

5.2.4 Biotransformasi

Biotransformasi logam merupakan mekanisme detoksifikasi terpenting yang dilakukan oleh

mikroorganisme. Dalam proses ini, logam beracun diubah menjadi lebih sedikit

bentuk beracun atau mudah dipulihkan. Biotransformasi dapat terjadi dalam dua cara: oleh

oksidasi-reduksi atau dengan reaksi mineralisasi-demineralisasi [38].

Beberapa logam seperti arsenik, selenium, kromium, dan uranium dimanfaatkan oleh

mikroorganisme sebagai akseptor elektron terakhir untuk respirasi anaerobik. Di dalam

proses, logam mengalami reduksi disimilasi [39]. Mikroorganisme tertentu

mungkin memiliki mekanisme reduksi yang tidak digabungkan dengan respirasi tetapi sebaliknya

dianggap memberikan ketahanan logam [22]. Misalnya, konsorsium mikroba

5.2 Bioremediasi 93

dapat melakukan reduksi aerobik dan anaerobik Cr( VI) menjadi Cr(III), memiliki lebih sedikit

mobilitas dan toksisitas [40]. Pengurangan dissimilasi selenate diketahui mendukung

respirasi anaerob pada beberapa mikroorganisme, dan disimilasi

reduksi selenat dan selenit terlarut menjadi selenium unsur nanopartikel

sangat mengurangi toksisitas [41]. Mikroba asli dalam berbagai sedimen berkurang

U(VI) menjadi U(IV ) yang tidak larut [ 42]. Pengurangan As5+ intraseluler menjadi As3+ sebelumnya

ekstrusi atau penyerapan sitoplasma sangat penting dalam arsenik prokariotik

detoksifikasi. Toxic As3+ yang dihasilkan dari reduksi arsenat bisa lebih jauh

dinonaktifkan oleh volatilisasi [ 43]. Umumnya, mekanisme volatilisasi melibatkan

mengubah ion logam menjadi keadaan yang mudah menguap. Ini hanya mungkin dengan Se, As, dan
Hg,

yang memiliki keadaan tidak stabil.

Banyak transformasi mikroba logam terjadi karena substrat energinya

digunakan di mana logam teroksidasi. Sejumlah logam dan metaloid tunduk

oksidasi termasuk besi, mangan, selenium, dan arsenik. Produk oksidasi mungkin kurang beracun.
Misalnya, oksidasi As( III) dapat berfungsi sebagai detoksifikasi

reaksi karena As( III) hingga 50 kali lebih beracun bagi sel bakteri daripada As(V) di

kebanyakan sistem biologis [22].

Reaksi antara logam dan berbagai mineral sangat penting dalam biogeokimia

siklus. Peran penting dalam reaksi ini dimainkan oleh mikroorganisme, yang memiliki

mekanisme melarutkan logam dari mineral dan mekanisme minerali logam . _ Reaksi ini mengubah
tingkat mobilitas logam. Biomineralisasi dari

logam dapat menyebabkan menghilangkan logam dari larutan yang menyediakan sarana
detoksifikasi tion dan biorecovery logam . Endapan logam yang paling umum dalam mikroba

transformasi termasuk oksida, fosfat, sulfida , dan oksalat [44].

Contoh reaksi mineralisasi adalah metilasi-demetilasi. Untuk

misalnya, metilasi melekat pada merkuri, timbal, selenium, arsenik, timah. Itu

organologam yang terbentuk lebih lipofilik daripada spesies logam dan dapat

terakumulasi secara aktif ke dalam sel. Hasil metilasi (penambahan metil

atau gugus etil menjadi logam) dapat meningkatkan volatilitas logam dan toksisitas logam, seperti
pada

kasus merkuri, yang diubah oleh metilasi dari Hg2+ menjadi CH3Hg+.

Reaksi ini dilakukan oleh bakteri tanah anaerob. Tahan merkuri aerobik

bakteri melakukan proses demetilasi – mengubah metil merkuri menjadi Hg( II),

yang 100 kali lipat lebih tidak beracun daripada metil merkuri. Arsenik adalah contoh lain dari a

logam yang termetilasi sebagai mekanisme resistensi. Ini dimetilasi oleh beberapa bakteri , seperti
Rhodopseudomonas palustris, dan banyak jamur, seperti Scopulariopsis.
brevicaulis menjadi mono-, di-, dan tri- methylarsine , bentuk arsenik yang mudah menguap. Namun,

metilasi beberapa logam, seperti selenium, menurunkan toksisitasnya. Dengan cara

metilasi, sejumlah besar logam akan dihapus dari terkontaminasi

tanah [ 22, 45]. Biotransformasi adalah komponen penting dari siklus kimia biogeo logam dan juga
dapat dimanfaatkan dalam bioremediasi pencemaran logam. tanah bertanda .

94 5 Bioremediasi Tanah Terkontaminasi Ion Logam Berat

5.2.5 Limit dan Prospek

Teknologi bioremediasi merupakan pilihan yang baik dibandingkan dengan konvensional lainnya

teknologi dalam hal biaya, ramah lingkungan, penerimaan sosial, dan

keberlanjutan. Proses bioremediasi secara luas dieksplorasi. Banyak bakteri,

jamur, cyanobacteria, dan mikroalga dengan potensi bioremediasi

diisolasi dan dikarakterisasi [46].

Proses bioremediasi tanah yang tercemar logam berat dapat

lengkap dengan dua hasil yang berbeda. Hasil pertama dari proses bioremediasi tanah

adalah penghilangan logam. Penghapusan logam total dapat dicapai dalam teknologi ex-situ dengan

menghilangkan biosorben atau endapan logam, tetapi juga memungkinkan secara in situ (untuk

misalnya dengan volatilisasi logam). Untuk tujuan ini, perlu ditingkatkan

kelarutan logam dan meningkatkan pemulihannya. Pemulihan logam itu mahal

proses, tetapi dapat dianggap sebagai ideal karena setelah pemulihan-teknologi

aplikasi tanah diperlakukan tersedia untuk digunakan kembali [22].

Hasil kedua terdiri dari imobilisasi logam dengan pengikatannya

agen chelating yang berbeda, dihilangkan oleh mikrobiota tanah, atau dengan reaksi reduksi.

Sebagai hasil dari reaksi ini kelarutan dan toksisitas logam menurun. Di tempat

teknologi sekuestrasi logam, karena pengoperasiannya yang mudah, biaya rendah, dan cepat

efek perbaikan, diterapkan secara luas. Namun, logam beracun yang tidak bergerak

tetap berada di dalam tanah, dan penggunaannya kembali mungkin terbatas karena poten yang
terus menerus risiko awal [18, 22, 47].

Di antara keterbatasan pendekatan bioremediasi adalah kemampuan beradaptasi yang rendah,

memakan waktu, kurangnya daya saing mikroba, dan bioavailabilitas rendah untuk

polutan target [46]. Meskipun kemajuan dicapai dalam bioremediasi, sebagian besar

penelitian tentang masalah ini terbatas pada studi skala laboratorium. Lebih-lebih lagi,

pemahaman yang lebih dalam tentang kompleksitas proses bioremediasi diperlukan

untuk mentransfer metode dan teknik dari penelitian dasar ke ilmu terapan

dan untuk optimasi remediasi in situ menggunakan mikroorganisme [48].

Pembersihan lingkungan tercemar menggunakan mikroorganisme asli telah

tidak menghasilkan banyak hasil positif [17]. Salah satu penyebab dari fenomena ini adalah

studi tentang spesies terpisah dengan resistensi yang tinggi terhadap polutan. Untuk bioremediasi

tujuan, perlu diketahui tidak hanya proses seluler dan metabolisme

aktivitas mengacu pada spesies tertentu, tetapi juga, komunitas mikroba

komposisi dan aktivitas metabolismenya di hadapan stres yang disebabkan oleh racun

senyawa [46]. Dari sudut pandang ini, biologi sistem dan rekayasa metabolisme

pendekatan yang menarik untuk studi bioremediasi. Sistem biologi, yaitu

digunakan untuk mempelajari sistem biologis yang rumit pada molekul, seluler, populasi,

komunitas, dan tingkat ekosistem, memberikan informasi rinci yang berharga tentang

ekspresi gen, enzim, jalur biosintetik, dan metabolit sekunder

5.2 Bioremediasi 95

mikroba dan dapat mengungkapkan modifikasi jalur yang sudah ada di bawah

kondisi stres yang disebabkan oleh berbagai polutan. Teknik "omics".

( genomik , proteomik, transkriptomik, metabolomik, dan metalomik ).

banyak digunakan untuk mempelajari bioremediasi mikroba [46, 49]. Rekayasa metabolisme

menggunakan informasi, yang ditawarkan oleh sistem biologi untuk perubahan mikroba

jalur metabolisme untuk menetralkan polutan tunggal atau ganda tertentu,

termasuk logam berat [50].

Cara yang efisien untuk menghilangkan kontaminan logam beracun dari lingkungan dan

menstabilkan ekosistem adalah dengan memanfaatkan mikroorganisme hasil rekayasa genetika

untuk mengolah lingkungan yang tercemar dengan mengubah logam berat beracun menjadi tidak
berbahaya

formulir. Misalnya, bakteri lokal tidak dapat menghilangkan logam berat seperti Hg

dari lingkungan. Namun, teknologi DNA rekombinan memainkan peran utama

dalam bioremediasi kontaminasi logam berat [ 17]. Rekayasa genetika

teknologi telah difokuskan pada pengembangan rekayasa genetika

mikroorganisme yang digunakan untuk menghilangkan logam dari situs tercemar [51].
Sasaran yang paling menjanjikan dalam rekayasa genetika logam berat adalah mikroorganisme
semut toleran yang meliputi: peningkatan sekresi kelator logam ekstraseluler; ekspresi berlebih dari
pengangkut logam; kelebihan produksi logam intraseluler

chelator; dan modifikasi genetik jaringan pengatur logam berat

pertahanan stres [32]. Misalnya, ekspresi fitokelatin pada inang bakteri

meningkatkan akumulasi arsenik intraseluler 50 kali lipat dengan mengasingkan ion-ion pantat
(kemungkinan arsenit ) dalam bentuk tidak beracun dan bersaing dengan efflux arsenik

pengangkut [52]. Escherichia coli dan Moreaxella sp., yang mengekspresikan phytochelatin

pada dinding sel dapat mengakumulasi Cd atau Hg 25 kali lebih banyak dibandingkan dengan strain
wild type [51].

Teknologi transgenik telah memberikan peluang untuk menghilangkan logam

tanah yang terkontaminasi. Untuk meningkatkan kinerja bioremediasi, geneti mikroorganisme

termodifikasi bisa seefisien inokulan. Meskipun

saat ini tidak ada bukti bahwa pelepasan bakteri yang direkayasa itu disengaja

telah menyebabkan pengaruh antagonis terukur pada mikrobiota alami, yaitu

risiko yang terkait dengan mikroorganisme tersebut masih belum jelas. Jadi, mengingat

langkah-langkah keamanan, prospek bakteri rekayasa perlu ekstensif

penelitian [53]. Keberhasilan penerapan proses bioremediasi tanah dalam praktiknya dimungkinkan
tetapi membutuhkan keterlibatan interdisipliner dengan teknik,

nanoteknologi, mikrobiologi, geologi, ekologi, dan kimia [18]. Komunitas mikroba dari lokasi yang
tercemar harus diperlakukan secara keseluruhan. Bioremediasi

potensi komunitas ini dapat ditingkatkan dengan rekayasa genetika mikro ganisme . Pendekatan
biologi sistem dan rekayasa metabolik paling cocok

untuk tujuan ini.

96 5 Bioremediasi Tanah Terkontaminasi Ion Logam Berat

5.3 Fitoremediasi

Konsisten dengan asal usul istilah ( phyto = tanaman dalam bahasa Yunani, dan

remedium = memulihkan keseimbangan dalam bahasa Latin), fitoremediasi bermuara pada

penggunaan

tanaman untuk meremediasi situs/media yang terkontaminasi (tanah, air atau sedimen).

Fitoremediasi (juga: fitoteknologi/ ies ) sering digambarkan sebagai "baru"

teknologi, seperti yang awalnya digunakan pada skala teknologi pada awal 1980-an [54].

Namun, permulaannya yang paling awal berasal dari penemuan tanaman toleran logam

pada abad keenam belas [ 55]. Peningkatan baru-baru ini dalam jumlah konsep di
fitoremediasi dan istilah baru diperkenalkan untuk berbagai proses, mekanisme,

atau teknik dapat menyebabkan kebingungan, apalagi nuansa di antaranya

konsep seringkali sempit [56].

Fitoremediasi meliputi penghilangan polutan (phytoextraction), mereka

ekstraksi dari larutan berair (misalnya, rhizofiltration ), transformasi (misalnya,

fitodegradasi, fitovolatilisasi), atau imobilisasi (misalnya fitostabilisasi tion ) [56].

5.3.1 Mekanisme

Fitoremediasi logam berat beracun dan metaloid (selanjutnya disebut "logam")

fisiologi tanaman respon ical kehadiran unsur-unsur beracun di lingkungan [ 57].

Tumbuhan yang mampu menjajah tanah yang terkontaminasi logam (metalofita) mengembangkan
mecha nisme untuk mengatasi faktor stres ini dan diklasifikasikan sebagai resisten [ 58]. Berat

ketahanan logam dapat dicapai dengan penghindaran dan/atau toleransi. Penghindar adalah

tanaman yang mampu melindungi diri dengan mencegah masuknya ion logam

sitoplasma seluler mereka, sementara tanaman toleran mampu mendetoksifikasi ion logam itu

telah melewati membran plasma atau biomembran organel internal . Berdasarkan

pada strategi yang digunakan oleh metalofita mereka diklasifikasikan menjadi tiga kategori: logam

pengecualian, indikator, dan akumulator [59]. Pengecualian logam membatasi translokasi tion logam
berat dan mempertahankan tingkat kontaminan yang rendah di jaringan udara mereka pada rentang
konsentrasi tanah yang luas. Indikator logam menumpuk

logam dalam biomassanya yang dapat dipanen dan tingkat ini umumnya mencerminkan

konsentrasi logam dalam tanah. Akumulator logam dapat mengkonsentrasikan logam di dalamnya

bagian mereka yang dapat dipanen ke tingkat yang jauh melebihi yang ada di tanah. Tanaman yang
bisa

menyerap kontaminan tingkat tinggi yang terkonsentrasi baik di akar, pucuk, dan/

atau daun disebut hiperakumulator [60]. Akumulator tanaman dapat mengatasinya

efek dari konsentrasi logam internal yang tinggi melalui upregulation dari

pertahanan antioksidan [61]. Sistem ini diaktifkan untuk menanggapi

efek merusak yang disebabkan oleh spesies oksigen reaktif, membuat tanaman toleran dan

meningkatkan kemampuan akumulasi logamnya [58, 61].

5.3 Fitoremediatio 97

Perilaku biogeokimia logam berat dalam sistem tanah-tanaman adalah yang tertinggi

penting dalam memahami mekanisme fitoremediasi. Secara umum,

mekanisme fisiologis dan genetik yang sama terlibat dalam penyerapan,

translokasi, dan penyimpanan elemen beracun dan esensial [ 62]. Ini

proses telah dipelajari secara ekstensif, namun, masih ada masalah yang harus dihadapi

dijelaskan lebih lengkap [63]. Agar tanaman mengambil logam dari larutan tanah,

itu harus menyajikannya dalam bentuk yang tersedia secara biologis. Di dalam tanah terdapat logam
berat

koloid, ionik, partikulat, dan keadaan terlarut. Mereka juga memiliki afinitas tinggi untuk

asam humat, tanah liat organo , dan oksida yang dilapisi dengan bahan organik [60]. Hanya gratis

ion logam dan kompleks logam yang larut dalam larutan tanah, dan mungkin logam

ion menempati situs pertukaran ion dan secara khusus teradsorpsi pada tanah anorganik

konstituen tersedia untuk tanaman [64]. Kelarutan logam dalam tanah adalah

terutama dikendalikan oleh pH tanah, jumlah logam, kehadiran unsur-unsur lain dan

konsentrasi, kapasitas tukar kation, kandungan karbon organik, oksidasi

keadaan komponen mineral, dan potensi redoks dari sistem [60]. Tanah

pH tampaknya yang paling penting: retensi yang lebih besar dan kelarutan yang lebih rendah

logam terjadi pada pH tanah yang tinggi .

Tumbuhan memiliki mekanisme yang sangat terspesialisasi baik untuk merangsang maupun
mengurangi

bioavailabilitas logam dalam tanah [65]. Eksudat akar tanaman, terdiri dari kompleks

campuran anion asam organik, phytosiderophores , gula, vitamin, asam amino,

purin, nukleosida, ion anorganik (misalnya, HCO3

−, OH−, H+), molekul gas

(CO2, H2), enzim, dan sel batas akar, memiliki efek langsung atau tidak langsung yang besar pada

mobilisasi ion logam [66]. Mereka dapat mengubah penentuan sifat tanah

kelarutan/mobilitas logam atau mengikat logam menjadi senyawa kompleks, baik yang larut

dan tidak larut. Mungkin ada mobilisasi paralel dan imobilisasi logam

dengan prosedur yang sama, tergantung pada kondisi [67].

Setelah dimobilisasi, logam dapat ditangkap oleh sel akar. Sel akar bisa

mengatur secara terbatas jumlah logam berat yang diambil dari

lingkungan. Dinding sel akar adalah penghalang pertama untuk logam. Fungsional

kelompok (–OH, –COOH, –SH) yang ada di dinding sel tanaman bertanggung jawab

pengikatan logam melalui ikatan hidrogen [68]. Terbukti bahwa logam berasosiasi
dengan dinding sel pektin tidak sepenuhnya dilumpuhkan – mereka dapat diambil oleh

tanaman dengan endositosis kompleks logam-pektin. Dalam kondisi stres diinduksi

dengan adanya logam, sifat fisik dinding sel dapat

berubah [69]. Terutama, jumlah ikatan transversal antara konstituen dinding

( molekul protein , sakarida, dan fenol) meningkat. Stres juga bisa

menyebabkan lignifikasi atau suberisasi dinding sel, yang menyebabkan dinding

menjadi lebih kompak dan kaku, dan dengan demikian kurang permeabel [58, 61].

Membran plasma adalah penghalang selektif hidup pertama yang menentukan logam

masuk ke dalam sitoplasma. Kisaran mekanisme transportasi yang dikenal atau khusus

protein tertanam dalam membran plasma sel tanaman yang terlibat dalam penyerapan ion dan

98 5 Bioremediasi Tanah Terkontaminasi Ion Logam Berat

translokasi meliputi: ( i ) pompa proton (H+-ATPase yang mengkonsumsi energi dan

menghasilkan gradien elektrokimia), (ii) co- dan anti-transporter (protein yang

gunakan gradien elektrokimia yang dihasilkan oleh H+-ATPase untuk menggerakkan yang aktif

penyerapan ion), dan (iii) saluran (protein yang memfasilitasi pengangkutan ion ke dalam

sel) [62]. Protein membran tanaman khusus mengenali struktur kimianya

logam esensial dan mengikat mereka, dan mereka kemudian siap untuk penyerapan dan

transportasi [70]. Karena pengangkut ini tidak dicirikan oleh spesifisitas tinggi, mereka

juga dapat mengambil logam nonesensial yang karakteristik kimia atau ukurannya

dekat dengan yang esensial. Protein yang membawa logam ke dalam sel seringkali menunjukkan
spesifisitas

menjadi ion logam pada tingkat oksidasi tertentu. Spesifisitas substrat rendah dari beberapa

pengangkut logam dapat menyebabkan akumulasi logam pada tumbuhan [58]. Tanaman

dapat menurunkan penyerapan ion logam melalui saluran ion yang dimodifikasi, dan/atau oleh

menghilangkan logam dari sel dengan pompa penghabisan aktif dan/atau dengan eksudat akar.

Setelah logam berat memasuki akar, mereka disimpan di akar (a

sebagian besar tanaman, termasuk pengecualian) atau dipindahkan ke pucuk dan disimpan

di sana ( hiperakumulator) [ 60]. Dalam hiperakumulator, logam efisien

dimuat ke xilem dan diangkut ke pucuk. Perlu juga dicatat bahwa logam

dapat didistribusikan dalam tanaman melalui floem [71]. Tanaman toleran logam bisa

menyita kelebihan logam di dinding sel dan ruang ekstraseluler, dan/atau

kompartemen intraseluler, yaitu organel di mana logam tidak dapat mengganggu

dengan aktivitas fisiologis sel [ 72]. Vakuola itu penting

komponen penyimpan ion logam. Logam berat juga dapat disimpan di dalamnya

idioblas , trikoma, kutikula, atau di beberapa organ tanaman, yang terakhir sering ditumpahkan

(misalnya, daun yang lebih tua). Logam dapat dikeluarkan melalui sel stomata, hidatoda, atau

ektodesme [61]. Logam ditranslokasi di dalam tanaman baik dalam bentuk bebas

ion terhidrasi atau kompleks dengan ligan [73]. Chelation ion logam dengan spesifik

ligan berafinitas tinggi mengurangi konsentrasi larutan ion logam bebas, dengan demikian

mengurangi fitotoksisitasnya. Khelasi logam memungkinkan untuk pembatasan

penyerapan logam, penyerapan ion logam, pengangkutannya di dalam tanaman dan

kompartementasi [58]. Ligan untuk sejumlah logam telah diidentifikasi dan

protein yang terlibat dalam pengangkutan ligan ini dan logam-ligan

kompleks [73]. Khelasi logam dapat dilakukan oleh senyawa dari kedua tiol

asal (glutathione, phytochelatins , metallothioneins ) dan asal nonthiol

( histidin , nikotinamin , asam organik) [74]. Transporter milik beberapa

keluarga protein (mis., P-ATPase – subfamili P1B, CDF, NRAMP, ZIP, YSL, ABC)

berpartisipasi dalam penyerapan dan transportasi ion logam melalui membran (plasma

membran, membran intraseluler, misalnya, tonoplast) [ 75]. Protein transpor logam berat tumbuhan
dapat diklasifikasikan sebagai protein serapan logam (misalnya, ZIP, NRAMP,

dan YSL) dan protein penghabisan logam (misalnya, CDF, P1B-ATPase, ABC) [ 76]. Itu

mantan dapat mengangkut logam ke dalam sitoplasma, sedangkan yang terakhir adalah sekelompok

protein detoksifikasi, yang dapat membuang kelebihan dan logam berat beracun dari

5.3 Fitoremediatio 99

sitoplasma, atau memindahkan logam ini ke dalam vakuola. Energi yang diperlukan untuk

mengangkut logam melalui membran berasal dari dua sumber: dari

dekomposisi ATP atau dari gaya gerak proton primer yang dihasilkan oleh

pompa proton [75].

Fitoremediasi logam berat dari tanah didasarkan pada tiga teknik:

phytoextraction, phytostabilization , dan phytovolatilization [77]. Ekstraksi fito

mengacu pada penghilangan kontaminan logam dari tanah melalui penyerapannya oleh

akar tanaman dan translokasi ke bagian tanaman di atas tanah (pucuk,

daun, dll.) [77]. Menurut mekanisme pengetahuan phytoextraction saat ini

memiliki lima langkah utama: ( i ) mobilisasi logam dengan sekresi khelat dan dengan

pengasaman rizosfer, (ii) penyerapan ion logam atau kompleks logam-khelat oleh

akar tanaman, (iii) translokasi ke bagian tanaman di atas tanah, (iv) logam

penyerapan dalam jaringan tanaman, dan (v) toleransi logam berat [78]. Mengalir, the

biomassa tanaman yang kaya logam dihilangkan dari tempat yang tercemar. Pemotongan dari

tanaman di tanah yang terkontaminasi diulangi sampai konsentrasi logam turun menjadi

tingkat yang dapat diterima.

Sejumlah besar biomassa terkontaminasi (berbahaya) yang dipanen harus tepat

pembuangan dan pengelolaan [60]). Pembuangan langsung (pengendapan di TPA) adalah

pendekatan yang paling tidak rumit, tetapi akan menyebabkan masalah lingkungan.

Daur ulang, yaitu pemanfaatan lebih lanjut sebagai bahan baku sekunder untuk beberapa industri

(misalnya kayu, kemasan, furnitur), sebagai sumber energi terbarukan (biogas, biofuel,

dan pembakaran untuk produksi dan pemanasan energi), dan/atau untuk pemulihan logam

( phytomining , “bio-ore”), diklaim lebih masuk akal daripada pengendapan

kesedihan [60, 79, 80]. Pilihan pengolahan biomassa yang terkontaminasi ( misalnya anaerobik

pencernaan, pengomposan, pemadatan, pembakaran, pirolisis, gasifikasi, cairan

ekstraksi, termal-oksidasi) ditinjau secara kritis [ 81, 82]. Obat

tujuan juga sedang dipelajari [83].

Fitostabilisasi mengacu pada imobilisasi logam dalam tanah melalui penyerapan

dan akumulasi oleh akar, adsorpsi permukaan akar, atau pengendapan di dalamnya

zona akar tanaman [ 84]. Tidak seperti teknologi fitoremediasi lainnya,

fitostabilisasi tidak berarti penghilangan polutan secara fisik dari

tanah. Logam berat dipertahankan di tempat kontaminasi, tetapi mobilitasnya

dan bioavailabilitas terbatas, dan akibatnya, efek toksik pada ekosistem lainnya

komponen berkurang. Fitostabilisasi digunakan ketika tanah sangat berat

terkontaminasi (misalnya tailing tambang) dan penghilangan logam menggunakan tumbuhan

pasti sulit atau akan memakan waktu yang tidak realistis [85]. Strategi ini

berfokus pada penciptaan tutupan vegetasi, yang biomassanya tidak dihilangkan dan

diproses lebih lanjut. Peran vegetasi dalam menstabilkan logam berat adalah

multidimensi. Menurut Bolan et al. [84] itu didasarkan pada yang berikut ini
proses: ( i ) pembentukan penghalang vegetasi yang mengurangi kemungkinan

kontak fisik dengan tanah oleh hewan dan manusia, (ii) stabilisasi mekanis

100 5 Bioremediasi Tanah Terkontaminasi Ion Logam Berat

situs untuk meminimalkan erosi oleh angin dan air, (iii) peningkatan

evapotranspirasi, sehingga mengurangi pencucian kontaminan, (iv) alterasi

faktor tanah yang mempengaruhi spesiasi dan imobilisasi kontaminan

(pH, bahan organik, kadar redoks), (v) eksudat akar yang mengatur pengendapan

dan imobilisasi kontaminan, dan (vi) serapan dan sekuestrasi

kontaminan dalam sistem akar.

Fitovolatilisasi adalah pendekatan yang melibatkan konversi yang diserap

logam menjadi bentuk yang mudah menguap dan pelepasannya ke atmosfer [60]. Strategi ini

unik untuk kelompok logam berat tertentu termasuk selenium (Se), merkuri (Hg),

dan arsenik (As). Terbukti bahwa bentuk Se dan Hg yang mudah menguap dapat hilang

ke atmosfer, adalah dimethylselenide [86] dan Hg0

[87], masing-masing. Pada gilirannya,

Sakakibara et al. [88] menetapkan bahwa uap dilepaskan dari pelepah Pteris

vittata termasuk senyawa arsenik, arsenit dan arsenat.

Menurut banyak penulis (yakni [78, 84, 89]), ada beberapa parameter yang

menakdirkan tanaman untuk remediasi tanah melalui phytoextraction (pe), phytostabiliza tion ( ps ),
dan/atau phytovolatization ( pv ): ( i ) toleransi terhadap efek toksik dari

menargetkan logam berat dan faktor stres lainnya (kekeringan, pemadatan, keasaman / alkalinitas
ekstrim, salinitas berlebih, nutrisi rendah/tidak ada), bersama dengan adaptasi yang baik terhadap

kondisi lingkungan yang berlaku (pe, ps , pv ); (ii) penyerapan biologis yang tinggi

koefisien (BAC) logam berat target (>1) (pe, ps , pv ) dan tinggi (>1; pe, pv ) atau

rendah (<1, ps ) TF; (iii) sistem perakaran berkembang dengan baik, laju pertumbuhan tinggi, dan
besar

biomassa di atas tanah (pe, ps , pv ); (iv) ketahanan terhadap patogen dan hama (pe, ps ,

pv ); (v) tidak tertarik pada herbivora (pe, ps , pv ); dan (vi) budidaya dan panen yang mudah

( pe , pv ?). Tanaman hiperakumulator lebih disukai untuk phytoextraction, sementara dikecualikan

ers lebih disukai untuk fitostabilisasi .

5.3.2 Kendala dan Prospek

Fitoremediasi umumnya dianggap ramah lingkungan ( tidak merusak ,

didorong surya) dan strategi yang relatif murah untuk remediasi logam berat

yang terkontaminasi [ 90]. Menjadi pendekatan yang menjanjikan, fitoremediasi itu

melibatkan akumulator/hiperakumulator alami dan/atau eksklusi menghadapi beberapa

keterbatasan. Terutama, kemanjuran sebagian besar fitoremediator alami logam adalah

umumnya dibatasi oleh biomassa rendah dan tingkat pertumbuhan lambat [ 78]. Apa

lebih lanjut, karena ketahanan tanaman terhadap logam berat terbatas, bahkan dalam kasus
hiperakumulator, fitoremediasi biasanya berlaku untuk lokasi yang memiliki

tingkat polusi logam sedang; di tanah yang sangat terkontaminasi pertumbuhan tanaman adalah

tidak berkelanjutan. Abiotik (misalnya iklim, cuaca) dan biotik (misalnya penyakit, hama)

faktor juga dapat mengurangi kegunaan tanaman untuk phytotechniques . Ada juga

risiko gangguan lebih lanjut dalam ekosistem: logam yang terakumulasi dalam biomassa tanaman
(baik di bawah maupun di atas tanah) dapat masuk ke dalam rantai makanan dan

5.3 Fitoremediasi 101

pengenalan spesies tanaman invasif sebagai fitoremediator dapat mempengaruhi penduduk asli

keanekaragaman bunga. Jangka waktu yang panjang (beberapa tahun) diperlukan untuk
fitoremediasi tanah

sering diindikasikan juga. Untuk phytoextraction, batasan yang signifikan dibatasi

ketersediaan hayati logam berat di dalam tanah. Pembuangan yang benar dari polusi

biomassa juga merupakan tantangan [80]. Karena fakta bahwa logam yang mudah menguap dapat
kembali

ke ekosistem dengan presipitasi, phytovolatilization tampaknya dipertanyakan

metode [88].

Mempertimbangkan keterbatasan fitoremediasi tradisional, alat modern

dan pendekatan telah dilibatkan untuk meningkatkan efisiensinya. Perbaikan

dicapai melalui penerapan amandemen, praktik pertanian, mikroba

melibatkan/introduksi, dan tanaman hasil rekayasa genetika (“tanaman perancang”) [90].

Namun, pendekatan baru untuk fitoremediasi ini dapat menimbulkan kendala baru

dan kekhawatiran.

Penggunaan kelat sintetik (misalnya, EDTA, HEDTA, DTPA, EGTA, NTA, EDDS,

EDDHA) untuk merangsang penyerapan logam oleh akar tanaman (phytoextraction berbantuan
chelate)

dan penerapan berbagai amandemen tanah organik dan anorganik (misalnya,

zeolit, fosfogipsum , biosolid, lumpur limbah, kompos) untuk mempromosikan logam

fiksasi oleh tanaman (dibantu phytostabilization ) dilaporkan (yaitu [77, 84, 89, 91]).

Dalam praktik pertanian, pemupukan dapat meningkatkan pertumbuhan tanaman

dan meningkatkan daya tahan tanaman, pengolahan tanah bermanfaat – mengubah logam berat

ke zona perakaran, yang mendorong kontak antara tanaman dan logam berat , rotasi tanaman, dan
tumpangsari atau tumpang tanam bermanfaat untuk mengurangi

pengaruh gulma, penyakit, dan hama serangga [92]. Selain itu penerapan dari

lebih dari dua hiperakumulator dapat meningkatkan efisiensi remediasi. Asli

tanaman berasosiasi (mikroba rhizosfer dan endofit) dan tanaman introduksi

mikroorganisme pemacu pertumbuhan (fitoremediasi berbantuan mikroba) dapat

mempengaruhi mobilitas/ ketersediaan logam , pertumbuhan tanaman, toleransi terhadap logam

dan lainnya

faktor stres, dan akumulasi logam melalui peningkatan permukaan serap

luas akar tanaman (jamur mikoriza jaringan hifa) dan produksi bermacam-macam

metabolit (misalnya, fitohormon, siderofor, antibiotik, enzim, organik

asam, biosurfaktan) [ 93]. Di sisi lain, beberapa faktor di atas itu

meningkatkan mobilitas logam dapat mengakibatkan peningkatan pelepasannya ke dalam

air tanah.

Pendekatan rekayasa genetika untuk meningkatkan toleransi tanaman dan akumulasi tion logam
beracun memiliki potensi besar untuk fitoremediasi [ 94]. Baru-baru ini,

beberapa penelitian menggunakan teknologi "omics" (genomics, transcriptomics, prot eomik ,

metabolomik) telah dilakukan untuk menjelaskan determi genetik Nants dan jalur yang terlibat
dalam toleransi logam berat pada tanaman. Tiga utama

pendekatan bioteknologi digunakan untuk merekayasa tanaman untuk fitoremedia logam berat: ( i )
memanipulasi gen pengangkut logam dan sistem serapan , (ii) meningkatkan produksi ligan logam,
dan (iii) konversi logam menjadi lebih sedikit

102 5 Bioremediasi Tanah Terkontaminasi Ion Logam Berat

bentuk beracun dan mudah menguap [95]. Meskipun kemajuan baru-baru ini dalam bioteknologi,
potensinya penting untuk fitoremediasi masih belum sepenuhnya dimanfaatkan [95].

Fitoremediasi tanaman transgenik menimbulkan konsekuensi ekologis yang berpotensi negatif

(aliran gen, spesies yang berpotensi invasif, dampak dari

peningkatan toksisitas biomassa yang diperkaya logam berat pada satwa liar in situ), dan

pembatasan hukum dan sosial membatasi potensi mereka untuk aplikasi lahan [94, 96].

Pemuliaan konvensional dan metodologi tradisional serupa (mis

mutagenesis, hibridisasi somatik) telah dilihat oleh beberapa peneliti sebagai

alternatif yang menjanjikan untuk transformasi genetik [97, 98].

Pengembangan teknik fitoremediasi yang berhasil masih membutuhkan penelitian ilmiah antar
disiplin ilmu dan kegiatan pendampingan, dengan fokus pada: ( i ) eksplorasi

keanekaragaman floristik yang ada untuk menyaring hiperakumulator/ pengecualian asli baru yang
efektif ers ; (ii) pemahaman yang lebih baik tentang interaksi dalam sistem logam-tanah-mikroba-
tanaman,

mekanisme biologis ketahanan/toleransi logam, dan nasib ion logam dalam tumbuhan

tisu; (iii) pemuliaan konvensional dan/atau rekayasa genetika untuk perbaikan lebih lanjut

fitoremediator (prototipe ideal: efektif, produktif, tidak dapat dimakan, steril, mampu

banyak akumulasi logam, spesies eurybiont , noninvasif , nonekspansif ); (iv)

memilih amandemen yang hemat biaya, tersedia secara lokal, dan ramah lingkungan dan

praktik untuk meningkatkan fitoremediasi; (v) mengintensifkan uji coba lapangan jangka panjang;
(vi)

mengintensifkan pendekatan praktis untuk pembersihan industri yang sangat terkontaminasi,

daerah terlantar, dan perkotaan; (vii) memperluas studi ekotoksikologi pada nasib

akumulasi polutan dalam biomassa selama berbagai tahap pemanfaatannya; (viii)

menggabungkan pendekatan fitoremediasi dengan tujuan bioenergi; (ix) kopling phy toremediasi
dengan biofortifikasi; (x) memperluas studi penilaian risiko dan evaluasi ekonomi; (xi)
mengembangkan forum/platform internasional untuk berdiskusi

dan mencari solusi atas tantangan yang dihadapi oleh fitoremediasi; (xii) terintegrasi aspek
lingkungan , sosial, ekonomi, dan normatif fitomediasi ; Dan

(xiii) mendidik sektor industri dan pemerintah (yakni [78, 79, 90, 94, 95, 99–102]).

Menurut Gerhardt et al. [100], pengetahuan tentang keterbatasan phytoreme diasi dan kondisi di
mana kesuksesan sangat mungkin akan menguntungkan

implementasi yang lebih besar dari strategi remedial ini, dan menghasilkan fitoreme diasi dari
teknologi yang terbukti ke praktik yang diterima dalam waktu dekat.

5.4 Metode Analisis Bioremediasi Logam

Dalam bioremediasi, kemampuan biomassa untuk mengikat ion logam berat, serta

mekanisme pengikatan, diperiksa menggunakan beberapa teknik analitik lanjutan.

Selain itu, teknik analisis ini digunakan untuk menentukan komposisi

5.4 Metode Analisis Bioremediasi Logam 103

yang diperkaya logam berat [ 103]. Ini termasuk Transformasi Fourier

spektroskopi inframerah (FTIR), emisi plasma-optik yang digabungkan secara induktif

spektrometri (ICP-OES), digabungkan secara induktif spektrometri massa plasma

(ICP-MS) spektrometri serapan atom nyala (FAAS), atom elektrotermal

spektrometri serapan (ETAAS), fluoresensi sinar-X (XRF), transmisi

mikrograf elektron (TEM), dan pemindaian mikroskop elektron dengan energi

spektroskopi sinar-X dispersif (SEM– EDX) [ 104–110]. Analitis ini

teknik dapat dikategorikan menjadi dua kelompok, yaitu langsung dan tidak langsung

metode [104, 111].

Metode pengukuran tidak langsung seperti teknik spektrometri ICP-OES,

ICP-MS; ETAAS, dan FAAS adalah metode analitik destruktif karena mereka

memerlukan mineralisasi sampel sebelum kuantifikasi. Selain itu, mineralisasi Proses tion
memungkinkan penentuan kandungan ion logam total secara keseluruhan

volume daripada di permukaan [103, 104, 108, 109, 112]. Di antara teknik spektrometrik , ICP-OES
dan ICP-MS mendapat perhatian lebih karena

fitur menarik mereka seperti deteksi simultan, waktu analisis singkat, dan

konsumsi sampel lebih sedikit. Selain itu, penggunaan ICP-OES atau ICP-MS dalam

proses bioremediasi terbukti sangat efisien [103]. Selanjutnya ICPOES dan ICP-MS telah menarik
banyak perhatian untuk penentuan racun

konsentrasi ion logam berat dan mikronutrien dalam biomatri yang berbeda ces [106–109, 111, 113–
115]. Dalam beberapa kasus, ICP-OES digunakan untuk menentukan

mekanisme bioremediasi. Misalnya, dalam sebuah penelitian yang dilansir oleh Mota

et al. [114] banyak fraksi budaya dari cyanobacterium uniseluler

Cyanothece sp. CCY 0110 digunakan dalam bioremediasi logam berat umum

ditemukan dalam sistem air, ini termasuk Cu, Cd, dan Pb. Bioremediasi

dilakukan secara terpisah atau dalam sistem gabungan [114]. Ringkasan mereka

temuan mengungkapkan bahwa polisakarida yang dilepaskan (RPS) efektif dalam biore pemindahan
logam berat terpilih. ICP-OES digunakan untuk menyelidiki pengikatan

mekanisme masing-masing logam pada RPS. Kemungkinan terjadinya ion

mekanisme pertukaran dilakukan dengan menganalisis pelepasan logam ringan

Ca2+, Mg2+, dan Na+ dengan adanya Cu2+, Cd2+, atau Pb2+ dalam larutan diinvestasikan dikaitkan
[114]. Hasilnya mengungkapkan bahwa mekanisme penghapusan didorong oleh

kompleksasi karena adanya kelompok fungsional organik daripada

pertukaran ion.

tak rusak langsung seperti SEM-EDX dan TEM memungkinkan

penentuan massa jenis logam berat yang terikat pada permukaan

biomassa [104]. Selanjutnya analisis yang dicapai oleh TEM dan FTIR antara lain

membantu dalam identifikasi kekuatan yang berkontribusi dalam proses bioremediasi.

Prosesnya dapat didorong oleh interaksi elektrostatik, pembentukan ion yang kompleks

pada sel dan serapan intraseluler [ 104, 108]. Selain itu, teknik ini

104 5 Bioremediasi Tanah Terkontaminasi Ion Logam Berat

memfasilitasi identifikasi gugus fungsi organik (seperti karboksil

gugus hidroksil, dan amina) yang berperan dalam proses bioremediasi [104, 108–110, 114].

5.4.1 Kombinasi Metode Analitik untuk Penentuan

Konsentrasi Logam Berat

Bioremediasi logam berat melibatkan kandungan total ion logam

di seluruh massa bahan dan kepadatan logam berat yang terikat pada

permukaan [104, 105, 108, 109, 114–116]. Oleh karena itu, untuk memperoleh informasi

untuk kedua konten total dan analit pada permukaan material, kombinasi

metode analitik langsung dan tidak langsung sangat penting. Selain itu, jika langsung

metode digunakan sendiri, hasil yang diperoleh harus divalidasi dengan mengkorelasikan

mereka dengan yang diperoleh dengan menggunakan ICP-MS/OES [104, 108, 109, 113, 115].

Amorim dkk. [116] menyelidiki kemungkinan menggunakan Meyerozyma guillier mondii dan
Meyerozyma strain caribbica untuk bioremediasi mangan

(Mn2+). Bioremoval Mn2+ oleh ragi dikonfirmasi oleh SEM/EDX . Itu

hasil yang diperoleh mengungkapkan bahwa Mn diserap oleh dinding sel dari strain yang diisolasi .
Temuan ini divalidasi menggunakan ICP-OES. Dalam studi lain,

biomassa yang dimodifikasi secara kimia dari komunitas rumput laut pesisir digunakan untuk biore
mediasi ion logam berat [113]. SEM dan FTIR digunakan untuk menyelidiki

sifat kimia dan fisik biosorben komposit sebelum dan sesudah berat

biosorpsi ion logam dan konsentrasi ion logam berat yang tersisa

dikuantifikasi menggunakan ICP-MS [113]. Chojnacka dkk. [103] menyelidiki penggunaan XRF

dan ICP-OES dalam studi bioremediasi. Temuan mereka mengungkapkan bahwa ada

korelasi positif yang tinggi diperkirakan untuk Cu, Mn, dan Zn [103]. Hasil ini dem menegaskan
bahwa teknik XRF dapat digunakan bersama dengan teknik tradisional

seperti ICP-OES untuk produksi data bioremediasi kuantitatif.

Penentuan komposisi unsur yang diperkaya dalam Green Macroalga

Vaucheria sessilis menggunakan proses bioakumulasi diselidiki menggunakan SEM–

EDX dan ICP-OES [109]. Menurut penulis, kombinasi ICP-OES

dan SEM-EDX memungkinkan pemahaman yang lebih baik tentang bioakumulasi ion logam.

Hal ini karena SEM mengungkapkan adanya interaksi antara ion logam dengan V. sessilis

permukaan, yang ditandai dengan perubahan signifikan dalam morfologi

alga [109]. Analisis ICP-OES sebelum dan sesudah proses bioakumulasi indi menunjukkan bahwa ion
logam dari larutan air terikat pada permukaan

V. sessilis [109]. Aplikasi lain dari kombinasi teknik analisis dalam

proses bioremediasi dilaporkan dalam literatur [ 105, 107, 111, 113,

117–121]. Seperti dapat dilihat semua penelitian yang dibahas di atas menegaskan bahwa, dalam
mediasi biore , penting untuk menggunakan lebih dari satu teknik analisis untuk memperoleh

informasi tentang logam berat.

Referensi 105

5.5 Kesimpulan

Bab ini membahas teknik bioremediasi dibagi menjadi mikroba dan

pemanfaatan tanaman. Yang juga menarik adalah ulasan penutup dari analisis yang mungkin

teknik yang dapat diterapkan dalam prosedur yang bertujuan untuk mengevaluasi efektivitas

seluruh proses. Tantangan terbesar adalah meningkatkan prosesnya, seperti semuanya

teknik yang menerapkan kemampuan alami organisme hidup (biomassa). Itu

transfer teknik bioremediasi dari penelitian dasar dalam praktek membutuhkan

keterlibatan interdisipliner dan sistem biologi dan rekayasa metabolik

pendekatan aplikasi. Teknologi bioremediasi adalah pilihan yang baik ketika

dibandingkan dengan teknologi konvensional lainnya dalam hal biaya, ramah lingkungan ,

penerimaan sosial, dan keberlanjutan.

Referensi

1 Shi, Z., Tang, Z., dan Wang, C. (2017). Tinjauan singkat dan evaluasi cacing tanah

biomarker dalam penilaian pencemaran tanah. Ilmu Lingkungan